盐酸溶菌酶牙膏及其制备方法

盐酸溶菌酶牙膏及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种盐酸溶菌酶牙膏及其制备方法，所述的牙膏包括活性成分和辅料，所述的活性成分为盐酸溶菌酶，其在牙膏中的重量百分比为0.3～4.6％，所述的辅料为制备牙膏所需的可接受的任何辅料，包括保湿剂、增稠剂、发泡剂、保护剂、磨擦剂、矫味剂和其他添加剂。本发明的牙膏具有高度清洁力、刷牙口感优异、能抑制牙菌斑和/或减轻牙龈炎和牙周炎等牙周疾病的功效，使用更安全。
【专利说明】
盐酸溶菌酶牙膏及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种牙膏及其制备方法，特别涉及一种盐酸溶菌酶牙膏及其制备方 法，属于日化产品领域。
【背景技术】
[0002] 口腔实际上是一个开放的环境，口腔中存在着大量细菌，其中绝大部分是非致病 性的常驻菌。它们在维持口腔微生态环境的平衡，协助口腔功能，保持口腔的健康，具有重 要的作用。维持口腔的微生态平衡主要是人口腔在正常状态有许多免疫活性因子在起作 用。某种异常情况下，在口腔的某个部位发生微生态的失衡导致疾病发生，外来抗菌物质可 抑制细菌的过度生长，却很难恰到好处地维持口腔的微生态平衡。不适当的药物选择不仅 能抑制或杀死口腔致病菌，同时也杀死了口腔常驻共栖菌，因而有可能形成影响口腔微生 态环境的长期慢性的刺激因素，还有可能使口腔中的条件致病菌产生耐药性，而降低了口 腔各组织对损伤的自愈能力。因此，建议各种药物牙膏都应是短期使用，开发能控制而不是 消灭致病菌或消除特异致病机制的药物牙膏具有重要意义。
[0003] 牙膏是日常生活中常用的清洁用品，有着很悠久的历史。随着科学技术的不断发 展，工艺装备的不断改进和完善，各种类型的牙膏相继问世，产品的质量和档次不断提高， 现在牙膏品种已由单一的清洁型牙膏，发展成为品种齐全、功能多样，上百个品牌的多功能 型牙膏，满足了不同层次消费水平的需要。牙膏质量好坏，直接影响着人们的身体健康。目 前，我国生产的牙膏有以下几种；防酸抗敏显效型牙膏、防牙垢口腔清洁、减轻牙龈炎症中 药牙膏、抗離IgY和IgY牙膏、云南白药牙膏等，以上功能性牙膏均是在牙膏膏体基质的基础 上添加外来的功能性化学物质或中草药等。口腔是厌氧菌感染的常见部位，临床检验发现， 牙周炎致病菌75%为厌氧菌。由于口腔部位腔隙较多，利于细菌生长。研究显示，成年人牙 周发炎时，革兰氏阴性厌氧菌所占的比例约为75%，在治疗口腔等某些感染性疾病时，长期 使用外来添加的化学物质作为抗菌剂，效果也不好，反而导致菌群失调，加重病情。我国每 年牙膏的需求量很大，急需找到一种纯天然的，又具有很好抗菌功效的添加物。因此，在这 方面进行研究将有着重要意义。
[0004] 中国专利文件CN104382762A公开了一种杀菌除臭牙膏组合物，其主要是以含有重 量百分比为0.1~5%的岗松提取物与锌离子的混合物，岗松提取物与锌离子两者按重量百 分比是5:1。以上专利很好的提供一种杀菌除臭牙膏的组合物，不足之处在于，因牙膏是长 期使用，上专利所使用的锌离子的混合物会产生锌中毒现象。
[0005] 中国专利文件CN101342140A公开了一种银锌霜牙膏，所述牙膏由碳酸钙、苯甲酸 钠、糖精钠、甘油、月桂醇硫酸脂钠、鹿角胶、精油、磺胺嘧啶银、磺胺嘧啶锌成分组成。以上 专利的不足之处在于:采用磺胺嘧啶银、磺胺嘧啶锌均为化学抗菌剂，长期使用易反而导致 菌群失调，加重病情。
[0006] 中国专利文件CN101327177A公开了丹参牙膏，该专利在牙膏中添加丹参，不足之 处是该项技术中忽略了牙膏的作为日用品，要为所有人所使用，其安全性不能保证。
[0007] 中国专利CN1244390A公开了医疗用甲硝唑牙膏，其特征在于，它是以普通牙膏为 基质，加配一定比例甲硝唑组成。该专利不足之处在于，长期使用外来添加的化学物质作为 抗菌剂，会产生耐药菌群产生，加重病情。
[0008] 中国专利CN102895147A公开了一种具有消炎及抗敏作用的牙膏及其制作工艺，其 特征在于，包括消炎止血活性成分、抗敏止痛活性成分和基料成分;所述消炎止血活性成分 包括以下质量百分比的组分:丹皮酚、甘草酸二钾盐、止血环酸、植麻素;所述抗敏止痛活性 成分包括以下质量百分比的组分:丁香酚、硝酸钾、植麻素;余量为基料成分、防腐剂和水。 该专利不足之处在于，止血活性加入止血环酸等，以及加入抗敏止痛活性如硝酸钾等;长期 使用外来添加的化学物质均会影响牙膏长期使用的安全性。
[0009] 综上所述，以上现有技术都存在不同程度的缺陷，使日常生活中应用受到很大限 制。为满足广大的需求，本领域技术人员多年来一直在寻求研制开发安全、高效，质量可控、 使用方便的牙膏。
[0010] 盐酸溶菌酶是一种自新鲜鸡蛋清中提取的一种能分解粘多糖的碱性蛋白酶，能在 胃肠内被消化和吸收，对人体无毒害作用，是一种安全系数很高的食品保鲜剂、营养保健品 和药品。盐酸溶菌酶是粘多糖的水解酵母。由于粘多糖的分解，在配合内用或外用药的同 时，起到了对炎症也就是微生物的杀菌(溶菌)作用及强力消炎作用。溶菌酶还能有效地治 疗和预防感染性炎症、非感染性炎症，对口腔疾患，特别是牙槽化脓等牙周疾病的预防、控 制及治疗，起到了非常重要的作用。盐酸溶菌酶还能与各种诱发炎症的酸性物质结合，使其 失活，并增强抗生素和其他药物的疗效，改善组织基质的粘多糖代谢，从而有利于修复被炎 症损伤的组织。盐酸溶菌酶能激活血小板，改善组织局部循环障碍，分解脓液，增强局部防 卫，从而更好的发挥抗菌、消炎、止痛等作用。
[0011]目前，盐酸溶菌酶制剂主要为口服制剂，临床用于急慢性咽喉炎、口腔粘膜溃疡及 咳痰困难等。迄今为止，盐酸溶菌酶在牙膏中应用尚未见报道。

【发明内容】

[0012] 针对现有技术的不足，本发明提供了一种盐酸溶菌酶牙膏，该牙膏具有高度清洁 力、刷牙口感优异、能抑制牙菌斑和/或减轻牙龈炎和牙周炎等牙周疾病的功效，且使用安 全;本发明还提供该牙膏的制备方法。
[0013] 术语说明：
[0014] 盐酸溶菌酶，英文名Lysozyme hydrochloride，系自新鲜鸡蛋清中提取的一种粘 多糖的碱性蛋白酶，与氯离子结合成为溶菌酶氯化物，CAS登录号9066-59-5，市场可购。 [0015]室温:是指实验操作所处的环境温度，本发明控制在15~30°C范围内。
[0016]本发明的技术方案如下：
[0017] -种盐酸溶菌酶牙膏，包括活性成分和辅料，所述的活性成分为盐酸溶菌酶，其在 牙膏中的重量百分比为0.3~4.6%。
[0018] 本发明牙膏中的盐酸溶菌酶可发挥以下作用：（1)与各种诱发炎症的酸性物质结 合，使其失活，并增强抗生素和其他药物的疗效；（2)改善组织基质的粘多糖代谢，从而有利 于修复被炎症损伤的组织；（3)激活血小板，改善组织局部循环障碍，分解脓液，增强局部防 卫；（4)防止伤口感染，更好的发挥抗菌、消炎、止痛等作用，阻止外界的细菌入侵，并对受损 的皮肤有愈合作用。
[0019] 根据本发明，所述的辅料为制备牙膏所需的可接受的任何辅料，根据本领域所熟 知的，所述辅料包括保湿剂、增稠剂、发泡剂、保护剂、磨擦剂、矫味剂和/或其他添加剂。
[0020] 根据本发明，优选的，所述的保湿剂为甘油和/或山梨醇，增稠剂为羧甲基纤维素 和/或海藻酸钠，发泡剂为十二烷基硫酸钠，保护剂为甘氨酸和/或十二烷基甜菜碱，磨擦剂 为碳酸钙和/或磷酸钙，矫味剂为香精和/或糖精钠，其他添加剂包括二氧化硅和去离子水。
[0021] 本发明所使用的盐酸溶菌酶为本领域常规原料，市购产品。其质量卫生部药品标 准98版二部制定要求，其中每lmg的效价不得少于6250单位(酶活力）。
[0022] 本发明提供以下优选的技术方案：
[0023] -种盐酸溶菌酶牙膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 2, 0~7. 0份 碳酸钙或磷酸钙 2. 0~7. 0份 羧甲基纤维素 0.. .5~L 6份
[0024] 海藻酸钠 0. 25~0, 8份 十二烷基甜菜碱 1.0~6. 0份 甘氨酸 0. 3~0. 7份 糖精钠 0~0. 1份 甘油 1.0~3.0份 香精 0~0. 1份 十二烷基硫酸钠 L 0~6. 0份
[0025] 山梨醇 0. 5~0. 7份 二氧化硅 0~5. 0份 去离子水 150~600份；
[0026]根据本发明，进一步优选的：
[0027] -种盐酸溶菌酶牙膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 2. 0~5. 0份 碳酸钙或磷酸钙 2. 0~5. 0份 羧甲基纤维素 0. 5~1.4份 海藻酸钠 0. 25~0. 7份 十二烷基甜菜碱 1. 0~4. 0份 甘氨酸 0. 3~0. 5份
[0028] 糖精钠 0.01~0.08份 甘油 1. 0~3. 0份 香精 0.01~0.08份 十二烷基硫酸钠 1._0~4. 0份 山梨醇 0,5~0.7份 二氧化硅 2. 0~4. 0份 去离子水 150~500份；
[0029]更进一步优选的：
[0030] -种盐酸溶菌酶牙膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 3.: 5份 碳酸钙 3. 5份 羧甲基纤维素 0.96份 海藻酸钠 0. 48份
[0031] 十二烷基甜菜碱 2. 5份 甘氨酸 0. 4份 糖精钠 0. 05份 甘油 2. 0份 香精 0. 05份 十二烷基硫酸钠 2, 5份
[0032] 山梨醇 0. 6份 二氧化硅 3. 0份 去离子水 325份；
[0033]或者，
[0034] -种盐酸溶菌酶牙膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 2. 0份 磷酸钙 2. 0份 羧甲基纤维素 0. 5份 海藻酸钠 ：0.. 25.份 十二烷基甜菜碱 1. 0份 甘氨酸 〇. 3份
[0035] 糖精钠 0.01份 甘油 1. 0份 香精 0. 01份 十二烷基硫酸钠 1. 0份 山梨醇 Q.5份 二氧化硅 2. 0份 去离子水 150份;
[0036] 或者，
[0037] -种盐酸溶菌酶牙膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 5. 0份 碳酸#5 5. 0份 羧甲基纤维素 1，4份 海藻酸钠 G. 7份
[0038] 十二烷基甜菜碱 4. 0份 甘氨酸 0.5份 糖精钠 0. 08份 甘油 3. 0份 香精 0. 08份 十二烷基硫酸钠 4. 0份 山梨醇 0. 7份
[0039] 二氧化硅 4. 0份 去离子水 500份。
[0040] 本发明所述的盐酸溶菌酶牙膏，所使用的原料未特别说明的均为常规市购产品。
[0041 ] -种盐酸溶菌酶牙膏的制备方法，包括如下步骤：
[0042] (1)将磨擦剂碳酸钙或磷酸钙进行超微粉碎，碳酸钙过400目筛，用激光粒度测定 得到平均粒径为15~21μπι;磷酸钙过350~400目筛，用激光粒度测定得到平均粒径为5~19 μπι；
[0043] (2)将步骤(1)加入去离子水配制成质量比碳酸钙或磷酸钙:去离子水=1:5~10， 进行胶体磨处理，制成混悬液溶液，备用；
[0044] (3)按配方量称取各原料，将甘油、山梨醇用去离子水配置成质量浓度为10~30% 的溶液备用;再将羧甲基纤维素、海藻酸钠、糖精钠、香精加入，在60~80°C条件下，转速为 60~90r/min，时间30~50分钟，制成胶体溶液，备用；
[0045] (4)将步骤(2)混悬液溶液与步骤(3)胶体溶液混合，再加入十二烷基硫酸钠、十二 烷基甜菜碱、二氧化硅，然后再在转速为30~50r/min搅拌;使其充分混匀后，在121~125°C 条件下灭菌30~60分钟，输送至已灭菌的罐内存放，在60~80°C下备用；
[0046] (5)在溶解罐中，将盐酸溶菌酶、甘氨酸加入去离子水溶解，然后将步骤(4)加入， 温度在40~60°C条件下，开启剪切机低速1000~1750r/min剪切8~10分钟，然后高速2500 ~3000r/min剪切4~5分钟；关闭剪切机，开启搅拌，转速为60~90r/min，继续搅拌5~10分 钟，然后再在搅拌转速为30~50r/min搅拌，开始降温，降温至30~35 °C时停止搅拌，然后在 大于0.096MPa真空下，在搅拌转速为30~50r/min，搅拌时间30~50min，制成膏体，包装即 得。
[0047] 根据本发明优选的，步骤(3)所述的胶体溶液，按照《中国药典2010年版二部附录 VIG第二法》采用NDJ-1型旋转式黏度计，以4号转子，转速为每分钟6转，物料的黏度，在25°C 时物料的动力黏度为20~30Pa · s。
[0048] 根据本发明进一步优选的，一种盐酸溶菌酶牙膏的制备方法，包括如下步骤：
[0049] (1)将磨擦剂碳酸钙或磷酸钙进行超微粉碎，碳酸钙过400目筛，用激光粒度测定 得到平均粒径为在15~21μπι;磷酸钙过400目筛，用激光粒度测定得到平均粒径为在5~12μ m；
[0050] (2)将步骤（1)加入去离子水配制成质量比碳酸钙或磷酸钙:去离子水=1:5~8， 进行胶体磨处理，制成混悬液溶液，备用；
[0051] (3)按配方量称取各原料，将甘油、山梨醇用去离子水配置成质量浓度为20~30 % 的溶液备用;再将羧甲基纤维素、海藻酸钠、糖精钠、香精加入，在60~80°C条件下，转速为 60~80r/min，时间30~40分钟，制成胶体溶液，备用；
[0052] (4)将步骤(2)混悬液溶液与步骤(3)胶体溶液混合，再加入十二烷基硫酸钠、十二 烷基甜菜碱、二氧化硅，然后再在转速为30~50r/min搅拌;使其充分混匀后，在121~125°C 条件下灭菌30~40分钟，输送至已灭菌的罐内存放，在60~80°C下备用；
[0053] (5)在溶解罐中，将盐酸溶菌酶、甘氨酸加入去离子水溶解，然后将步骤(4)加入， 温度在40°C条件下，开启剪切机低速1000~1200r/min剪切8~10分钟，然后高速2500~ 2800r/min剪切4~5分钟；关闭剪切机，开启搅拌，转速为60~90r/min，继续搅拌5~10分 钟，然后再在搅拌转速为30~40r/min搅拌，开始降温，降温至30~35 °C时停止搅拌，然后在 大于0.096MPa真空下，在搅拌转速为30~40r/min，搅拌时间30~40min，制成膏体，包装即 得。
[0054]下面结合实验例对本发明做进一步的说明，但不限于此。
[0055] 实验例1、磨擦剂(碳酸钙或磷酸钙)粒径和粒径分布的测定实验
[0056] 碳酸钙、磷酸钙是一种无机化合物，经试验验证未经粉碎的碳酸钙作为磨擦剂成 分无论所占处方量的多少，都会在口腔中留下不适的砂砾感，故选用碳酸钙、或磷酸钙经超 微粉碎，细腻的膏体在口腔中能够产生舒畅的感觉，粗糙的膏体则会产生砂烁感。
[0057]使用过筛分析法测定碳酸钙、磷酸钙的粒径分布。碳酸钙、磷酸钙颗粒进行，每批 对50g碳酸钙、磷酸钙颗粒进行测定。使用筛分仪和标准测试筛进行测定，振幅为1.5mm，振 动时间为20min。筛的规格为200目、250目、300目、350目、和400目。使用购自Marlven2000的 激光衍射粒径分析仪测定碳酸钙、磷酸钙颗粒筛分下的平均粒径，碳酸钙、磷酸钙的平均粒 径和粒径分布如表1所示。
[0058] 粒度分布测定法(D50):MalVern2000或性能相当的激光粒度分析仪，取本品约 0.12g，使检测器遮光率在8~20%范围，加水800mL，以每分钟3000转的转速搅拌15分钟或 以每分钟3000转的转速搅拌，并同时超声2~3分钟(超声功率16W，振幅3μπι)，依法检查，取 连续测量3次的平均值，应符合下表规定。
[0059] 表1碳酸钙、磷酸钙的平均粒径和粒径分布
[0062] 结果分析:随着目数的增加，碳酸钙、磷酸钙颗粒量也随着增加，筛分下的颗粒，平 均粒径不断降低。
[0063] 用实施例1的制备方法，处方不变，选用碳酸钙或磷酸钙颗粒不同的目数制备牙 膏，考察碳酸钙或磷酸钙牙膏口感;见表2:
[0064] 表2不同目数对口感的影响
[0065]
[0066] 本实验例的目的是评估不同的平均粒径范围，对溶菌酶牙膏特征的影响，并确认 所选用的颗粒目数范围，即400目即碳酸钙平均粒径在15~21μπι; 350目~400目即磷酸钙平 均粒径在5~19μπι;以上粒径对于本发明是合理的。
[0067] 实验例2、溶菌酶牙膏中保护剂的研究实验
[0068]盐酸溶菌酶对温度很敏感，温度在40~60°C条件下，考察加入甘氨酸络合剂量对 盐酸溶菌酶活性起到的保护作用;结果见表3。
[0069]表3甘氨酸用量筛选结果单位(g)
[0071]盐酸溶菌酶牙膏对加入甘氨酸所产生的盐酸溶菌酶效价分析;见表4。
[0072]表4盐酸溶菌酶效价分析
[0074]处方评价及结果：
[0075]处方1:透明液体，但效价低；
[0076]处方2:透明液体，但效价较低；
[0077]处方3:透明液体，效价稳定；
[0078]处方4:透明液体，效价稳定；
[0079]处方5:透明液体，效价稳定。
[0080]结果分析：以上处方为透明液体;处方1、2中甘氨酸用量低，造成盐酸溶菌酶效价 较低，不适合本制剂的要求。处方3、4、5为透明液体;盐酸溶菌酶效价稳定，适合要求。确定 处方3、4、5中甘氨酸用量，作为本发明处方，由此可见加入甘氨酸络合剂对盐酸溶菌酶活性 起到保护作用。
[0081 ]实验例3、十二烷基甜菜碱对盐酸溶菌酶牙膏稳定性影响实验
[0082] 在含有盐酸溶菌酶的牙膏中，十二烷基硫酸钠这样的阴离子界面活性剂等离子性 成分，与盐酸溶菌酶配合时，会生成白色沉淀，导致盐酸溶菌酶活性降低，盐酸溶菌酶牙膏 达不到预期的效果，使盐酸溶菌酶的应用遇到了困难。而用非离子成分配制牙膏的方法，又 因为它有较低的发泡性而影响了使用。
[0083] 发明的目的就是进一步研究解决上述问题，以得到含有盐酸溶菌酶稳定的牙膏， 进行了研究，其目的是:在盐酸溶菌酶及阴离子界面活性剂中添加十二烷基甜菜碱界面活 性保护剂，在保持盐酸溶菌酶稳定的基础上，能有效地改善发泡性。
[0084] 1、试验:样品的制备按实施例1中制备方法，加入十二烷基甜菜碱界面活性保护剂 为盐酸溶菌酶牙膏样品2。实施例1中制备方法，不加入十二烷基甜菜碱界面活性保护剂为 盐酸溶菌酶牙膏样品1。
[0085] 2、检测指标:盐酸溶菌酶活性检测、发泡性的感观评价
[0086] 3、测定结果:在40 °C时保存1、5、10、24月盐酸溶菌酶牙膏中的盐酸溶菌酶活性，以 及发泡性的感观评价见表5。
[0087]表5十二烷基甜菜碱对盐酸溶菌酶牙膏稳定性
[0089] 作为本发明用的界面活性保护剂十二烷基甜菜碱，从而得到了一种不损害盐酸溶 菌酶活性并同时保持发泡性良好的牙膏。
[0090] 实验例4、溶菌酶牙膏膏体流变学实验研究
[0091] 牙膏是由多种物质组成的混合物。其中影响膏体流变性的主要因素是磨擦剂、保 湿剂、增稠剂。目前对于牙膏流变学方面的研究只局限于配方中某一成分(如增稠剂)对牙 膏粘度的影响，对牙膏的剪切应力流变性研究。确立了牙膏的流变学评价标准，就可客观地 根据流变学测定来确定配方组成。按正常膏体检验项目进行检验，证明制得的膏体具有良 好的流变性，符合生产和使用的要求。
[0092] 1、主要原料、仪器及流变学数据测定方法
[0093] 1.1原料:羧甲基纤维素 (CMC)、海藻酸钠；
[0094] 1.2仪器:旋转式粘度计;高剪切混合乳化机;旋转式真空栗;增力电动搅拌机；
[0095] 1.3流变学数据测定方法
[0096]待测物放置24hs后，在室温下测其粘度值然后将待测物在高剪切混合乳化机中剪 切5min(转速为4200转/min)，迅速测其粘度Π2,以[ηι(ηι_η2)/ηι] X 1〇〇表示触变性的大小。 [0097] 2、增稠剂的选择
[0098] 将羧甲基纤维素(CMC)0.5~1.6g、海藻酸钠0.5~1.6g、分别与去离子水160g混合 后用磁力加热搅拌器加热，在60~80°C条件下搅拌至膏体均匀透明为止，静置24hr后测其 粘度和触变性，结果见图1、2。
[0099] 由图1、图2可知，相同用量下，羧甲基纤维素 CMC的粘度大于海藻酸钠;但羧甲基纤 维素 CMC的触变性小于海藻酸钠。对于正常的膏体须具有一定的稠度和触变性以保证膏体 的稳定及满足生产和使用的要求。羧甲基纤维素 CMC触变性差，不适于单独使用;海藻酸钠 触变性好，但粘度过低。为获得较好的粘度和触变性，将羧甲基纤维素 CMC和海藻酸钠复配 使用，取长补短。
[0100] 表6复配增稠剂的膏体液流变学数据
[0102] 根据表6中的流变学数据，在保证粘度和触变性符合要求的情况下尽量减少用量， 选择质量比羧甲基纤维素 CMC:海藻酸钠2:1为增稠剂〔即在上述配方中羧甲基纤维素 CMC占 2份(W/W)，海藻酸钠占1份(W/W)〕。
[0103] 实验例5:保湿剂在溶菌酶牙膏的膏体液选择实验研究
[0104] 以羧甲基纤维素 CMC、海藻酸钠为增稠剂;甘油、山梨醇作保湿剂，按实施例1方法 制胶，测定膏体液的流变学数据见表7。
[0105] 表7保湿剂对膏体液的流变学数据
[0107] 由表7可知，选择1、2、3组较合适。即本发明优选的保湿剂由甘油和山梨醇组成，其 中甘油与山梨醇用量比为1.0~3.0:0.5~0.7重量比(W/W)。
[0108] 实验例6:盐酸溶菌酶牙膏口腔黏膜刺激性实验
[0109] 1、试验材料
[0110] (1)材料:盐酸溶菌酶牙膏，实施例1制备的盐酸溶菌酶牙膏；赋形剂(空白牙膏）： 用实施例1的辅料，按实施例1的制备方法，不加盐酸溶菌酶；
[0111] (2)动物:金黄地鼠，等级为普通级，由山东大学实验动物中心提供，24只雄性，体 重 120g±20g。
[0112] 2、口腔黏膜刺激性试验方法
[0113] 分组：取禁食12h金黄地鼠24只，按体重随机分成盐酸溶菌酶牙膏完整黏膜组，盐 酸溶菌酶牙膏破损黏膜组，赋形剂(空白牙膏)完整黏膜组，赋形剂(空白牙膏)破损黏膜组， 每组6只。自身左右侧黏膜对照，左侧给药，右侧作为空白对照。给药前24h无菌大头针划破 黏膜组金黄地鼠左右两侧口颊黏膜。
[0114] 给药:将金黄地鼠取仰卧位固定，盐酸溶菌酶牙膏组取准确称量盐酸溶菌酶牙膏 16mg放入其口腔左侧颊囊内，赋形剂（空白牙膏）组取赋形剂16mg放入其口腔左侧颊囊内。 每日给药3次，连续3d，盐酸溶菌酶牙膏对金黄地鼠口腔黏膜的刺激性，观察评价和组织学 评价。光学镜下观察组织形态学改变按表8进行评分；
[0115]观察并记录与药物接触的粘膜有无红斑、糜烂和水肿等按表9进行评分；
[0116]表8 口腔组织反应显微镜评分标准
[0119]表9 口腔刺激性反应评分标准
[0121] (1)在试验期间，所有动物活动正常，饮食正常，未见全身不良反应。各试验组未见 口腔黏膜充血、出血、糜烂或溃疡。各组给药侧1:3腔黏膜与对照侧比较未见差异，盐酸溶菌 酶牙膏与赋形剂(空白牙膏）组比较未见差异。按口腔刺激反应评分标准，各组动物计分见 表10〇
[0122] 表10 口腔刺激性反应评分
[0124] 结果:大体观察显示盐酸溶菌酶牙膏对金黄地鼠的口腔完整黏膜和破损黏膜均无 刺激性;病理组织学检查显示盐酸溶菌酶牙膏对完整黏膜和破损黏膜均不产生炎症等病理 学改变;病理组织学评分显示盐酸溶菌酶牙膏对完整黏膜和破损黏膜均无刺激性。
[0125] (2)组织学观察评价：病理学对口腔黏膜切片的评价为：对完整黏膜各组进行镜 检，观察其黏膜上皮、炎症细胞浸润、血管反应及间质水肿等病理状态，发现4组无明显差 异，提示盐酸溶菌酶牙膏对金黄地鼠的口腔完整黏膜无炎症刺激等病理学改变;对破损黏 膜各组进行镜检，观察其黏膜上皮、炎症细胞浸润、血管反应及问质水肿等病理状态，发现4 组无明显差异，提示盐酸溶菌酶牙膏对金黄地鼠的口腔完整黏膜无炎症刺激等病理学改 变;另有观察发现，在盐酸溶菌酶牙膏破损黏膜给药组，有4例镜下显示黏膜下层有很好的 肉芽组织形成，提示盐酸溶菌酶牙膏对口腔破损黏膜的修复过程有一定的促进作用。按口 腔组织反应显微镜评价分类系统，判定各组动物计分见表11。
[0126] 表11 口腔组织反应显微镜评分
[0128] 结论:溶菌酶牙膏对金黄地鼠的口腔黏膜无刺激性，因此溶菌酶牙膏是安全。
[0129] 实验例7:盐酸溶菌酶牙膏对牙周病的治疗作用实验
[0130] 牙龈炎和牙周炎是口腔常见病，患病率高，研究证明细菌和菌斑是导致牙龈炎和 牙周炎的始动因子，因此控制和去除菌斑是预防牙龈炎和牙周炎的重要措施，本研究观察 药物牙膏对牙龈炎和牙周炎的效果，同时观察了药物牙膏对牙龈炎和牙周炎的改善情况。
[0131] 1、材料与方法
[0132] 1.1对照组牙膏金银花牙膏、试验组牙膏实施例1制备的溶菌酶牙膏。
[0133] 1.2治疗方法:试验组每天早晚用盐酸溶菌酶牙膏刷牙，刷牙后半小时不进食。对 照组沿用原习惯早晚用金银花牙膏刷牙。牙周炎患者连续使用观察14d，牙龈炎患者连续使 用观察7d。在试验中嘱患者保持原有的口腔卫生习惯，以避免其他因素的影响。
[0134] 纳入标准：186例，年龄16~73岁，平均37.3岁，其中试验组97例，对照组89例。
[0135] 2、观察指标:为了便于观察记录和统计，我们将各项指标均折合成分值。
[0136] 2.1疼痛:3、剧烈疼痛;2、中度疼痛;1、轻度疼痛;0、不痛。
[0137] 2.2松动度:3、ΙΠ 松动;2、Π 松动；1、I松动;0、正常。
[0138] 2.3咀嚼功能:3、不能咀嚼软食;2、不能咀嚼硬食；1、能咀嚼硬食，但稍有疼痛;0、 正常。
[0139] 2.4龈沟出血指数(SBI):1、不出血;2、探龈沟时出血，外观正常;3、探龈沟出血，牙 銀充血;4、牙銀有溃瘍或肿胀等其它症状。
[0140] 2.5牙龈指数(GI):0、正常龈;1、轻度炎症;2、中度炎症;3、重度炎症。
[0141] 2.6菌斑指数(PLI):0、无菌斑；1、菌斑覆盖牙面1/3以下;2、菌斑覆盖牙面1/3~2/ 3；
[0142] 3、菌斑覆盖牙面2/3以上。
[0143] 2.7牙周袋深度指数(？01):0、龈沟彡2111111;1、2111111<龈沟彡3.5111111 ;2、3.5111111<龈沟彡 5mm; 3、5111111<銀沟<6 · 5mm;4、6 · 5111111<銀沟<8111111。
[0144] 3、疗效判断：
[0145] 3.1牙周炎：设1=(5811+611+?1^11+?011-58114+6114+?1^14+?0114)/4显效 ：]\1彡 0.5;有效:0<]\1<0.5;无效:]\^0。
[0146] 3.2牙龈炎:设~=(5811+611+?1^1-5817+617+?1^7)/3显效4彡1 ;有效:0.5<~< 1;无效:N彡0.5。
[0147] 4、结果
[0148] 4.1资料的均衡性:2组患者性别和年龄经检验均无显著性差异(P>0.05)，由此说 明试验组和对照组的构成是均衡的，具有可比性。
[0149] 4.2疗效:实验组和对照组观察结果如下;牙周炎见表12,牙龈炎见表13,综合疗效 判定见表14。
[0150]表12牙周炎患者综合疗效评定
[0152] *Ρ<〇.〇1
[0153] 表13牙龈炎患者综合疗效评定
[0155] *Ρ<〇.〇1
[0156] 表14牙周炎、牙龈炎患者综合疗效评定
[0158] *Ρ<〇.〇1
[0159] 以上结果均说明试验组疗效优于对照组。不良反应:试验组和对照组中的所有病 例均未见局部和全身的不良反应。
[0160] 本发明以盐酸溶菌酶为活性成分，加以合适的辅料制成牙膏，实现清洁牙齿、止 血、抗菌等效果。本发明的盐酸溶菌酶牙膏中的盐酸溶菌酶，可发挥以下作用：它不仅对牙 齿磨损小，而且具有洁齿、护齿作用;盐酸溶菌酶可以溶解伤口中的细菌，阻止细菌的繁殖， 防止伤口感染，并对受损的皮肤有愈合作用;盐酸溶菌酶牙膏的作用特点为局部使用，所使 用的原辅材料安全无毒，使用更安全。
[0161] 本发明的有益效果如下：
[0162] 1、本发明制备的盐酸溶菌酶牙膏口感好，所选用的辅料较少，牙膏稳定。
[0163] 2、本发明所选用的磨擦剂为难吸收性碳酸钙或磷酸钙，通过控制其粒度，从而使 牙膏沉降体积比符合牙膏要求。
[0164] 3、盐酸溶菌酶牙膏通过口腔使盐酸溶菌酶能够渗入口腔组织里，并且抑制牙菌斑 和/或预防、控制及治疗牙龈炎和牙周炎等牙周疾病。
[0165] 4、本发明中加入甘氨酸，甘氨酸与盐酸溶菌酶络合，使得在制备盐酸溶菌酶牙膏 过程中盐酸溶菌酶在高温条件下的效价稳定。
[0166] 5、本发明使用界面活性保护剂十二烷基甜菜碱，不损害盐酸溶菌酶活性并同时保 持牙膏发泡性良好。
[0167] 6、本发明通过海藻酸钠与羧甲基纤维素增稠剂合理的配比，使其二者具有极好的 协同效应，大大提高了牙膏的悬浮性、触变性、流变性，同时对牙膏的稳定性无任何影响，因 而在牙膏中具有较高的应用价值。
【附图说明】
[0168] 图1是实验例4粘度曲线，纵坐标为粘度;横坐标为羧甲基纤维素(CMC)和海藻酸钠 用量；
[0169] 图2是实验例4触变性参数曲线，纵坐标为触变性参数；横坐标为羧甲基纤维素 (CMC)和海藻酸钠用量。
【具体实施方式】
[0170] 下面通过具体实施例并结合附图对本发明做进一步说明，但不限于此。
[0171] 实施例中原辅料说明：
[0174] 实施例中所涉及的装置和设备均为膏体制剂生产通用设备，市场可购。说明如下：
[0175] 马尔文Marlven激光衍射粒度分析仪(型号2000)英国产;剪切机(型号50L)温州市 东顶机械制造有限公司有售;万能高效粉碎机（型号30B)、不锈钢反应釜（型号50L)山东新 华医疗器械公司有售。
[0176] 以下结合具体实施例，对本发明做进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本 发明，而非用于限定本发明的范围。
[0177] 实施例1: 一种盐酸溶菌酶牙膏的制备方法
[0178] 1、一种盐酸溶菌酶牙膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 3. 5份 碳酸钙 3. 5份 羧甲基纤维素 0. 96份 海藻酸钠 0. 48份 十二烷基甜菜碱 2. 5份 甘氨酸 0. 4份
[0179] 糖精钠 0.05汾 甘油 2. 0份 香精 Q. 05份 十二烷基硫酸钠 2. 5份 山梨醇 〇.&份 二氧化硅 3. 0份 去离子水 325份；
[0180] 2、制备方法如下：
[0181] (1)将碳酸钙进行超微粉碎，过400目筛，用激光粒度测定得到平均粒径为在15~ 21μπι；
[0182] (2)将步骤(1)加入去离子水配制成质量比碳酸钙:去离子水= 1:5,进行胶体磨处 理，制成混悬液溶液，备用；
[0183] (3)按配方量称取各原料，将甘油、山梨醇用去离子水配置成质量浓度为15~25% 的溶液备用;再将羧甲基纤维素、海藻酸钠、糖精钠、香精加入，在60~80°C条件下，转速为 60~80r/min，时间30~40分钟，制成胶体溶液，备用；
[0184] (4)将步骤(2)混悬液溶液与步骤(3)胶体溶液混合，再加入十二烷基硫酸钠、十二 烷基甜菜碱、二氧化硅，然后再在转速为30~50r/min搅拌;使其充分混匀后，在121~125°C 条件下灭菌30~40分钟，输送至已灭菌的罐内存放，在60~80°C下备用；
[0185] (5)在溶解罐中，将盐酸溶菌酶、甘氨酸加入去离子水溶解，然后将步骤(4)加入， 温度在40°C条件下，开启剪切机低速1000~1200r/min剪切8~10分钟，然后高速2500~ 2800r/min剪切4~5分钟；关闭剪切机，开启搅拌，转速为60~90r/min，继续搅拌5~10分 钟，然后再在搅拌转速为30~40r/min缓慢搅拌，开始降温，降温至30~35 °C时停止搅拌，然 后在大于〇 .〇96MPa真空下，在搅拌转速为30~40r/min，搅拌时间30~40min，制成膏体，包 装即得。
[0186] 实施例2: -种盐酸溶菌酶牙膏的制备方法
[0187] 1、一种盐酸溶菌酶牙膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 2. 0份 磷酸钙 2. 0份 羧甲基纤维素 0.5份 海藻酸钠 0. 25份 十二烷基甜菜碱 1.0份 甘氨酸 0. 3份
[0188] 糖精钠 0.01份 甘油 1.0份 香精 Q. 01份 十二烷基硫酸钠 1..0份' 山梨醇 0. 5份 二氧化硅 2. 0份 去离子水 150汾，
[0189] 2、制备方法如下：
[0190] (1)将磷酸钙进行超微粉碎，过400目筛，用激光粒度测定得到平均粒径为5~12μ m；
[0191] (2)将步骤(1)加入去离子水配制成质量比磷酸钙:去离子水= 1:7,进行胶体磨处 理，制成混悬液溶液，备用；
[0192] (3)按配方量称取各原料，将甘油、山梨醇用去离子水配置成质量浓度为20~30 % 的溶液备用;再将羧甲基纤维素、海藻酸钠、糖精钠、香精加入，在60~70°C条件下，转速为 60~75r/min，时间30~45分钟，制成胶体溶液，备用；
[0193] (4)将步骤(2)混悬液溶液与步骤(3)胶体溶液混合，再加入十二烷基硫酸钠、十二 烷基甜菜碱、二氧化硅，然后再在转速为30~40r/min搅拌;使其充分混匀后，在121~125°C 条件下灭菌30~60分钟，输送至已灭菌的罐内存放，在60~70°C下备用；
[0194] (5)在溶解罐中，将盐酸溶菌酶、甘氨酸加入去离子水溶解，然后将步骤(4)加入， 温度在50°C条件下，开启剪切机低速1000~1500r/min剪切8~10分钟，然后高速2500~ 2600r/min剪切4~5分钟；关闭剪切机，开启搅拌，转速为60~70r/min，继续搅拌5~10分 钟，然后再在搅拌转速为30~50r/min缓慢搅拌，开始降温，降温至30~35°C时停止搅拌，然 后在大于〇 .〇96MPa真空下，在搅拌转速为30~40r/min，搅拌时间30~40min，制成膏体，包 装即得。
[0195] 实施例3: -种盐酸溶菌酶牙膏的制备方法
[0196] 1、一种盐酸溶菌酶牙膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 5, 0份 碳酸钙 5. 0份 羧甲基纤维素 丨.4份 海藻酸钠 d 7份 十二烷基甜菜碱 4. 0份 甘氨酸 0. 5份
[0197] 糖精钠 0.08份 甘油 3. 0份 香精 0. 08份 十二烷基硫酸钠 4. 0份 山梨醇 α 7份 二氧化硅 4, 0份 去离子水 500份;
[0198] 2、制备方法如下：
[0199] (1)将碳酸钙进行超微粉碎，过400目筛，用激光粒度测定得到平均粒径为在15~ 21μπι；
[0200] (2)将步骤(1)加入去离子水配制成质量比碳酸钙:去离子水= 1:8,进行胶体磨处 理，制成混悬液溶液，备用；
[0201] (3)按配方量称取各原料，将甘油、山梨醇用去离子水配置成质量浓度为10~20% 的溶液备用;再将羧甲基纤维素、海藻酸钠、糖精钠、香精加入，在60~70°C条件下，转速为 60~65r/min，时间30~35分钟，制成胶体溶液，备用；
[0202] (4)将步骤(2)混悬液溶液与步骤(3)胶体溶液混合，再加入十二烷基硫酸钠、十二 烷基甜菜碱、二氧化硅，然后再在转速为30~45r/min搅拌;使其充分混匀后，在121~125°C 条件下灭菌30~40分钟，输送至已灭菌的罐内存放，在60~70°C下备用；
[0203] (5)在溶解罐中，将盐酸溶菌酶、甘氨酸加入去离子水溶解，然后将步骤(4)加入， 温度在60°C条件下，开启剪切机低速1000~1200r/min剪切8~10分钟，然后高速2500~ 2700r/min剪切4~5分钟;关闭剪切机，开启搅拌，转速为60~65r/min，继续搅拌5~8分钟， 然后再在搅拌转速为30~40r/min缓慢搅拌，开始降温，降温至30~35°C时停止搅拌，然后 在大于0.096MPa真空下，在搅拌转速为30~40r/min，搅拌时间30~40min，制成膏体，包装 即得。
[0204] 实施例4: 一种盐酸溶菌酶牙膏的制备方法
[0205] 1、一种盐酸溶菌酶牙膏，由以下原料按质量份制成： 盐酸溶菌酶 5. 0份 磷酸钙 5. 0份 羧甲基纤维素 1.4份 海藻酸钠 0. 7份 十二烷基甜菜碱 4. 0份 甘氨酸 0. 5份
[0206] 糖精钠 0. 08份 甘油 3. 〇份 香精 0. 08份 十二烷基硫酸钠 4. 0份 山梨醇 〇· 7份 二氧化硅 4. 0份 去离子水 500汾；
[0207] 2、制备方法如下：
[0208] (1)将磷酸钙进行超微粉碎，过400目筛，用激光粒度测定得到平均粒径为在5~12 μπι;
[0209] (2)将步骤(1)加入去离子水配制成质量比磷酸钙:去离子水= 1:7,进行胶体磨处 理，制成混悬液溶液，备用；
[0210] (3)按配方量称取各原料，将甘油、山梨醇用去离子水配置成质量浓度为20~30% 的溶液备用;再将羧甲基纤维素、海藻酸钠、糖精钠、香精加入，在60~65°C条件下，转速为 60~65r/min，时间30~35分钟，制成胶体溶液，备用；
[0211] (4)将步骤(2)混悬液溶液与步骤(3)胶体溶液混合，再加入十二烷基硫酸钠、十二 烷基甜菜碱、二氧化硅，然后再在转速为30~35r/min搅拌;使其充分混匀后，在121~125°C 条件下灭菌30~40分钟，输送至已灭菌的罐内存放，在60~65°C下备用；
[0212] (5)在溶解罐中，将盐酸溶菌酶、甘氨酸加入去离子水溶解，然后将步骤⑷加入， 温度在55°C条件下，开启剪切机低速1000~1200r/min剪切8~9分钟，然后高速2500~ 2700r/min剪切4~5分钟;关闭剪切机，开启搅拌，转速为60~65r/min，继续搅拌5~8分钟， 然后再在搅拌转速为30~35r/min缓慢搅拌，开始降温，降温至30~35°C时停止搅拌，然后 在大于0.096MPa真空下，在搅拌转速为30~40r/min，搅拌时间30~40min，制成膏体，包装 即得。
【主权项】
1. 一种盐酸溶菌酶牙膏，其特征在于，包括活性成分和辅料，所述的活性成分为盐酸溶 菌酶，其在牙膏中的重量百分比为0.3~4.6%。2. 如权利要求1所述的盐酸溶菌酶牙膏，其特征在于，所述的辅料为制备牙膏所需的可 接受的任何辅料，根据本领域所熟知的，所述辅料包括保湿剂、增稠剂、发泡剂、保护剂、磨 擦剂、矫味剂和/或其他添加剂。3. 如权利要求2所述的盐酸溶菌酶牙膏，其特征在于，所述的保湿剂为甘油和/或山梨 醇，增稠剂为簇甲基纤维素和/或海藻酸钢，发泡剂为十二烷基硫酸钢，保护剂为甘氨酸和/ 或十二烷基甜菜碱，磨擦剂为碳酸巧和/或憐酸巧，矫味剂为香精和/或糖精钢，其他添加剂 包括二氧化娃和去离子水。4. 如权利要求1-3任一所述的盐酸溶菌酶牙膏，其特征在于，由W下原料按质量份制 成：5. 如权利要求4凤 弓量份制成：6.如权利要求安质量份制成： 或者，或者，7.如权利要求4~6任一所述的盐酸溶菌酶牙膏的制备方法，其特征在于，包括如下步 骤： (1) 将磨擦剂碳酸巧或憐酸巧进行超微粉碎，碳酸巧过400目筛，得到平均粒径为15~ 21皿;憐酸巧过350~400目筛，得到平均粒径为5~19皿； (2) 将步骤（1)加入去离子水配制成质量比碳酸巧或憐酸巧:去离子水=1:5~10,进行 胶体磨处理，制成混悬液溶液，备用； (3) 按配方量称取各原料，将甘油、山梨醇用去离子水配置成质量浓度为10~30%的溶 液备用;再将簇甲基纤维素、海藻酸钢、糖精钢、香精加入，在60~80°C条件下，转速为60~ 9化/min，时间30~50分钟，制成胶体溶液，备用； (4) 将步骤(2)混悬液溶液与步骤(3)胶体溶液混合，再加入十二烷基硫酸钢、十二烷基 甜菜碱、二氧化娃，然后再在转速为30~50r/min揽拌;使其充分混匀后，在121~125°C条件 下灭菌30~60分钟，输送至已灭菌的罐内存放，在60~80°C下备用； (5) 在溶解罐中，将盐酸溶菌酶、甘氨酸加入去离子水溶解，然后将步骤(4)加入，溫度 在40~60°C条件下，开启剪切机低速1000~1750r/min剪切8~10分钟，然后高速2500~ 30(K)r/min剪切4~5分钟；关闭剪切机，开启揽拌，转速为60~90r/min，继续揽拌5~10分 钟，然后再在揽拌转速为30~50r/min揽拌，开始降溫，降溫至30~35°C时停止揽拌，然后在 大于0.096MPa真空下，在揽拌转速为30~SOr/min，揽拌时间30~50min，制成膏体，包装即 得。8. 如权利要求7所述的盐酸溶菌酶牙膏的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述的胶体 溶液，按照《中国药典2010年版二部附录VIG第二法》采用NDJ-I型旋转式黏度计，W4号转 子，转速为每分钟6转，物料的黏度在25 °C时物料的动力黏度为20~30化.S。9. 如权利要求7所述的盐酸溶菌酶牙膏的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： (1) 将磨擦剂碳酸巧或憐酸巧进行超微粉碎，碳酸巧过400目筛，用激光粒度测定得到 平均粒径为在15~21皿;憐酸巧过400目筛，用激光粒度测定得到平均粒径为在5~12皿； (2) 将步骤（1)加入去离子水配制成质量比碳酸巧或憐酸巧:去离子水=1:5~8,进行 胶体磨处理，制成混悬液溶液，备用； (3) 按配方量称取各原料，将甘油、山梨醇用去离子水配置成质量浓度为20~30%的溶 液备用;再将簇甲基纤维素、海藻酸钢、糖精钢、香精加入，在60~80°C条件下，转速为60~ 8化/min，时间30~40分钟，制成胶体溶液，备用； (4) 将步骤(2)混悬液溶液与步骤(3)胶体溶液混合，再加入十二烷基硫酸钢、十二烷基 甜菜碱、二氧化娃，然后再在转速为30~50r/min揽拌;使其充分混匀后，在121~125°C条件 下灭菌30~40分钟，输送至已灭菌的罐内存放，在60~80°C下备用； (5) 在溶解罐中，将盐酸溶菌酶、甘氨酸加入去离子水溶解，然后将步骤(4)加入，溫度 在40°C条件下，开启剪切机低速1000~1200r/min剪切8~10分钟，然后高速2500~2800r/ min剪切4~5分钟;关闭剪切机，开启揽拌，转速为60~90r/min，继续揽拌5~10分钟，然后 再在揽拌转速为30~40r/min揽拌，开始降溫，降溫至30~35°C时停止揽拌，然后在大于 0.096MPa真空下，在揽拌转速为30~40;r/min，揽拌时间30~40min，制成膏体，包装即得。
【文档编号】A61Q11/00GK105902407SQ201610308798
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年5月11日
【发明人】乔敏, 袁武杰
【申请人】山东司邦得制药有限公司