一种山楂叶黄酮的提取方法
【专利摘要】本发明提供一种山楂叶黄酮的提取方法，所述提取方法为：提取过程：将山楂叶碾碎后转移到烧瓶中，加入料液比为1:10?15g/ml的70?90%的乙醇溶液，置于60?90℃水浴锅中回流1?3h，过滤并收集滤液,至少重复2次，合并滤液，挥干，得到粗提物；纯化过程：用蒸馏水将山楂叶黄酮粗提物溶解后，依次加入正己烷溶液、氯仿溶液和乙酸乙酯溶液进行萃取，最后分离水层，挥干后得到纯化产物。所述山楂叶黄酮的提取方法操作简单，提取量高、纯度高，此外提取过程不需要特殊的仪器，成本低廉，使用安全，所述方法充分利用丰富的山楂叶资源提取药用价值高的山楂叶黄酮，提高了山楂树的经济价值。
【专利说明】
一种山楂叶黄酮的提取方法
技术领域
[0001]本发明涉及提取工艺技术领域，尤其涉及一种山楂叶黄酮的提取方法。
【背景技术】
[0002 ]山楂为蔷薇科山楂属(Crataegus.L)植物，在我国具有悠久的保健与药用历史。山楂有重要的药用价值，自古以来，就成为健脾开胃、消食化滞、活血化痰的良药。山楂以果实作药用，性微温，味酸甘，入脾、胃、肝经，有消食健胃、活血化淤、收敛止痢之功能。对肉积痰饮、痞满吞酸、泻痢肠风、腰痛疝气、产后儿枕痛、恶露不尽、小儿乳食停滞等，均有疗效。自20世纪50年代，人们开始对山楂叶化学成分进行了研究，证实其含有大量的黄酮以及绿原酸、山楂酸、胆碱、挥发油等，而且其黄酮类物质含量高达1.8%?2%，是果实含量的20倍?120倍。开发利用山楂叶、变废为宝，既可充分利用我国丰富山楂叶资源，又可提高山楂树的经济价值。
[0003]通过细胞药理药效实验研究发现，植物黄酮类物质已被证明对心血管疾病和糖尿病有疗效。山楂叶嫩叶含有非常丰富的黄酮类物质，而且这些山楂叶黄酮类具有很高的甜味，这些使得山楂叶嫩叶黄酮类提取物成为筛选糖尿病防治天然药物的良好侯选对象。此夕卜，植物黄酮大多数具有显著生理药理活性，对一些常见病，多发病有重要的生理作用，如有抗氧化作用和清除自由基作用;抗癌、防癌作用;对心血管、心肌有益作用;对内分泌系统作用。还对过敏、感染、高血压和AIDS等疾病具有辅助治疗的作用。目前，黄酮的提取和纯化方法已有很大进展，但是常用的提纯工艺无法从山楂叶中有效提取黄酮。
[0004]因此，现有技术还有待于进一步改进。
【发明内容】
[0005]鉴于现有技术的不足，本发明在于提供一种山楂叶黄酮的提取方法，旨在解决目前无相应技术能从山楂叶中有效提取黄酮。
[0006]—种山楂叶黄酮的提取方法，其中，所述方法为:
提取过程:将山楂叶碾碎后转移到烧瓶中，加入料液比为I: 10-15g/ml的70-90%的乙醇溶液，置于60-90°C水浴锅中回流l_3h，过滤并收集滤液。至少重复2次，合并滤液，挥干，得到粗提物；
纯化过程:用蒸馏水将山楂叶黄酮粗提物溶解后，依次加入正己烷溶液、氯仿溶液和乙酸乙酯溶液进行萃取，最后分离水层，挥干后得到纯化产物。
[0007]所述的山楂叶黄酮的提取方法，其中，提取过程中加入料液比为1:12.5g/ml的乙醇溶液。
[0008]所述的山楂叶黄酮的提取方法，其中，所述提取过程中加入乙醇溶液的浓度为80%。
[0009]所述的山楂叶黄酮的提取方法，其中，提取过程中，置于80°C水浴锅中回流2h。
[0010]所述的山楂叶黄酮的提取方法，其中，所述纯化过程具体为:用蒸馏水将山楂叶黄酮粗提物溶解后，加入与蒸馏水等量的正己烷溶液后静置，室温放置，液体分层后分离正己烷层和水层;再向水层中加入等量的氯仿溶液，充分搅拌静置后，分离出水层；向水层中加入等量乙酸乙酯溶液，静置分层后，分离水层后将水层挥干，得到纯化产物。
[0011]所述的山楂叶黄酮的提取方法，其中，所述山楂叶黄铜提取物与蒸馏水的料液比为I g:20-30mlo
[0012]有益效果:本发明提供一种山楂叶黄酮的提取方法，所述山楂叶黄酮的提取和纯化方法操作简单，提取量高、纯度高，此外提取过程不需要特殊的仪器，成本低廉，使用安全，所述方法充分利用丰富的山楂叶资源提取药用价值高的山楂叶黄酮，提高了山楂树的经济价值，拓宽了其应用领域。
【具体实施方式】
[0013]本发明提供一种山楂叶黄酮的提取方法，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0014]本发明提供一种山楂叶黄酮的提取方法，所述提取方法为:
提取过程:
首先，将山楂叶碾碎后转移到烧瓶中，加入料液比为1:1 O-15g/ml的70-90%的乙醇溶液，置于60-90°C水浴锅中回流l_3h，过滤并收集滤液。至少重复2次，合并滤液，挥干，得到粗提物。
[0015]由于黄酮具易溶于乙醇，在乙醇溶液中溶解度高，萃取率也高。当乙醇溶液的浓度为80%时，山楂叶黄酮的溶解度最强，提取效率最高。
[0016]在一定范围内，山楂叶黄酮的提取量随乙醇溶液的量增加而提高，但是当乙醇溶液的量过多时，山楂叶黄酮的提取量基本不再改变，此时过多的乙醇溶液会提高提取的成本，造成浪费，也加大了纯化的难度。加入料液比为I: 10-15g/ml的乙醇溶液时，山楂叶黄酮的提取效率高，成本较低。优选地，加入料液比为1: 12.5 g/ml的乙醇溶液时，山楂叶黄酮的提取效率最尚。
[0017]提取过程中，水浴温度条件为60-90°C，水浴l_3h时，能成分提取山楂叶黄酮。水浴温度条件为80 0C，水浴2h时，黄酮提取率最高，且黄酮活性受到影响小。
[0018]纯化过程:用蒸馏水将山楂叶黄酮粗提物溶解后，依次加入正己烷溶液、氯仿溶液和乙酸乙酯溶液进行萃取，最后分离水层，挥干后得到纯化产物。
[0019]所述纯化过程具体为:用蒸馏水将山楂叶黄酮粗提物溶解后，加入与蒸馏水等量的正己烷溶液后静置，室温放置，液体分层后分离正己烷层和水层;再向水层中加入等量的氯仿溶液，充分搅拌静置后，分离出水层；向水层中加入等量乙酸乙酯溶液，静置分层后，分离水层后将水层挥干，得到纯化产物。先后采用正己烷溶液、氯仿溶液和乙酸乙酯溶剂分离水层中的杂质，能有效提高黄酮提取物的纯度。
[0020]其中，所述山楂叶黄铜提取物与蒸馏水的料液比为Ig:20-30ml，而其他三种有机溶剂的体积与蒸馏水相同，这样的料液比能有效分离出黄酮粗提物中的多种杂质，提高产物的纯度。
[0021]用上述提取方法提取纯化得到的山楂叶黄酮具有很强的α-葡萄糖苷酶抑制活性及自由基清除活性，具有很高的医用价值，可用于制备糖尿病药物、抗衰老药物等。
[0022]现有的α-葡萄糖苷酶抑制剂是一类以延缓肠道碳水化合物吸收而达到治疗糖尿病的口服降糖药物。α-葡萄糖苷酶抑制剂是比较成熟的治疗糖尿病药物，已广泛应用于临床。山楂叶黄酮提取物具有显著抑制α-葡萄糖苷酶活性的功能，可作为α-葡萄糖苷酶抑制剂，用于制备糖尿病药物。其次，自由基是含有一个或多个未成对电子的原子、分子或离子，具有高度的化学反应活性，自由基过多或清除过慢，会加速机体的衰老进程并诱发各种疾病。而黄酮类化合物具有清除自由基的功能，作用原理为:通过酚羟基可与自由基反应，生成比较稳定的半醌式自由基，从而终止了自由基链式反应。因此，山楂叶黄酮提取物还可用于制备抗衰老药物等。
[0023]实施例1
本发明提供的山楂叶黄酮的提取方法如下:
提取过程:称取山楂叶原料，粉碎后移入圆底烧瓶，加入料液比为I: 12.5g/ml的80%乙醇溶液，置于75°C水浴锅中回流2h，过滤并收集滤液。重复3次，合并滤液，挥干，得到粗提物。
[0024]纯化过程:用料液比为1:25g/ml的蒸馏水将山楂叶黄酮粗提物溶解后，加入与蒸馏水等量的正己烷溶液后静置，室温放置，液体分层后分离正己烷层和水层;再向水层中加入等量的氯仿溶液，充分搅拌静置后，分离出水层；向水层中加入等量乙酸乙酯溶液，静置分层后，分离水层后将水层挥干，得到纯化产物。
[0025]实验结果:粗提物中山楂叶黄酮的提取率达16.54%，纯度为56.43%。提取的山楂叶黄酮对于葡萄糖苷酶的抑制率为95.12%，DPPH自由基清除率为92.45%。
[0026]实施例2
本发明提供的山楂叶黄酮的提取方法如下:
提取过程:称取山楂叶原料40g，粉碎后移入圆底烧瓶，加入料液比为1:10g/ml的70%乙醇溶液，置于60°C水浴锅中回流lh，过滤并收集滤液。重复4次，合并滤液，挥干，得到粗提物。
[0027]纯化过程:用料液比为1:20g/ml的蒸馏水将山楂叶黄酮粗提物溶解后，加入与蒸馏水等量的正己烷溶液后静置，室温放置，液体分层后分离正己烷层和水层;再向水层中加入等量的氯仿溶液，充分搅拌静置后，分离出水层；向水层中加入等量乙酸乙酯溶液，静置分层后，分离水层后将水层挥干，得到纯化产物。
[0028]实验结果:粗提物中山楂叶黄酮的提取率达15.24%，纯度为54.30%。提取的山楂叶黄酮对于葡萄糖苷酶的抑制率为94.56%，DPPH自由基清除率为92.25%。
[0029]实施例3
本发明提供的山楂叶黄酮的提取方法如下:
提取过程:称取山楂叶原料，粉碎后移入圆底烧瓶，加入料液比为I: 15g/ml的90%乙醇溶液，置于90 V水浴锅中回流3h，过滤并收集滤液。重复2次，合并滤液，挥干，得到粗提物。
[0030]纯化过程:用料液比为1:30g/ml的蒸馏水将山楂叶黄酮粗提物溶解后，加入与蒸馏水等量的正己烷溶液后静置，室温放置，液体分层后分离正己烷层和水层;再向水层中加入等量的氯仿溶液，充分搅拌静置后，分离出水层；向水层中加入等量乙酸乙酯溶液，静置分层后，分离水层后将水层挥干，得到纯化产物。[0031 ]实验结果:粗提物中山楂叶黄酮的提取率达15.12%，纯度为54.4%。提取的山楂叶黄酮对于葡萄糖苷酶的抑制率为94.56%，DPPH自由基清除率为90.35%。
[0032]本发明提供一种山楂叶黄酮的提取方法，所述山楂叶黄酮的提取和纯化方法操作简单，提取量高、纯度高，此外提取过程不需要特殊的仪器，成本低廉，使用安全，所述方法充分利用丰富的山楂叶资源提取药用价值高的山楂叶黄酮，提高了山楂树的经济价值，拓宽了其应用领域。
[0033]应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
【主权项】
1.一种山楂叶黄酮的提取方法，其特征在于，所述方法为: 提取过程:将山楂叶碾碎后转移到烧瓶中，加入料液比为I: 10-15g/ml的70-90%的乙醇溶液，置于60-90°C水浴锅中回流l_3h，过滤并收集滤液;至少重复2次，合并滤液，挥干，得到粗提物； 纯化过程:用蒸馏水将山楂叶黄酮粗提物溶解后，依次加入正己烷溶液、氯仿溶液和乙酸乙酯溶液进行萃取，最后分离水层，挥干后得到纯化产物。2.根据权利要求1所述的山楂叶黄酮的提取方法，其特征在于，提取过程中加入料液比为l:12.5g/ml的乙醇溶液。3.根据权利要求1所述的山楂叶黄酮的提取方法，其特征在于，所述提取过程中加入乙醇溶液的浓度为80%。4.根据权利要求1所述的山楂叶黄酮的提取方法，其特征在于，提取过程中，置于80°C水浴锅中回流2h。5.根据权利要求1所述的山楂叶黄酮的提取方法，其特征在于，所述纯化过程具体为:用蒸馏水将山楂叶黄酮粗提物溶解后，加入与蒸馏水等量的正己烷溶液后静置，室温放置，液体分层后分离正己烷层和水层;再向水层中加入等量的氯仿溶液，充分搅拌静置后，分离出水层；向水层中加入等量乙酸乙酯溶液，静置分层后，分离水层后将水层挥干，得到纯化产物。6.根据权利要求5所述的山楂叶黄酮的提取方法，其特征在于，所述山楂叶黄铜提取物与蒸馏水的料液比为I g:20-30ml。
【文档编号】A61P3/10GK105902640SQ201610357049
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年5月26日
【发明人】董华强, 侯毅
【申请人】佛山科学技术学院