一种提高免疫力的碱性植物盐及其制备方法
【专利摘要】本发明提供一种提高免疫力的碱性植物盐，所述碱性植物盐，包括以下原料组分：盐地碱蓬植物盐、裙带菜提取物、香蕉干粉、虫草花提取物、山药提取物、决明子提取物、魔芋粉、茶多酚、岩藻多糖。本发明还提供上述碱性植物盐的制备方法。本发明制备的碱性植物盐，能够增加免疫器官的重量；具有增强体液免疫的作用，提高溶血素含量；具有增加小鼠非特异性免疫功能的作用，显著增加小鼠吞噬细胞的吞噬指数及吞噬活性；增加小鼠迟发型变态反应能力；提高抗体生产细胞的数量。
【专利说明】
一种提高免疫力的碱性植物盐及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种提高免疫力的碱性植物盐及其制备方法，属于植物盐技术领域。
【背景技术】
[0002] 免疫力是人体自身的防御机制，分为非特异性免疫和特异性免疫，是人体识别和 消灭外来侵入的异物(病毒、细菌等），处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处 理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为，免疫力是人体识别和排除"异 己"的生理反应。人体内执行这一功能的是免疫系统，人体免疫系统分液体免疫(免疫球蛋 白），细胞免疫(B细胞、T细胞)两大类。B细胞可生成各种抗体，T细胞可直接杀死、吞噬各种 病原体。
[0003] 免疫力下降，就是人体内B细胞和T细胞的水平和功能下降，使得人体免疫系统不 能正常发挥保护作用，极易招致细菌、病毒、真菌等感染，因此免疫力低下最直接的表现就 是容易生病。由于经常患病，加重了人体各项机体的消耗，所以一般有体质虚弱、营养不良、 精神萎靡、疲乏无力、食欲降低、睡眠障碍等表现，而且疾病难以彻底治愈，容易反复性、经 常性的生病，例如感冒反复发作、扁桃体炎反复发作、哮喘反复发作、支气管炎反复发作、肺 炎反复发作、腹泻反复发作。长此以往会导致身体和智力发育不良，还易诱发重大疾病。 [0004]引起免疫力下降的原因主要包括:营养不良失衡、劳累过度、睡眠不足、不爱运动、 不良情绪、环境污染、病毒侵害、食物中毒、慢性疾病、身体老化、身体肥胖、药物引起等。针 对以上引起免疫力下降的原因，目前主要增强免疫力的方法有:一是注意饮食调控;二是运 动增强免疫力;三是注意生活起居，保证良好睡眠；四是调节心态平衡，保持良好情绪;五是 服用增强免疫的药物或保健品。
[0005] 对于特异性免疫疾病和恶性肿瘤的免疫缺陷治疗，一般采用核酪注射液、左旋咪 唑、聚肌胞、胸腺肽、丙种球蛋白、干扰素、转移因子、胎盘脂多糖等药物。这些化合物或者生 物制品虽然发挥了积极的治疗作用，但是仍然存在一定的毒副反应。
[0006] 对于非特异性免疫能力低下的治疗，更多是通过不同的中药材提取物的组合搭配 起到增强免疫功能的作用;但是，此类免疫增强制剂存在组方中药材种类繁杂、制备工艺复 杂等问题，同时由于药材的产地不同，其有效成分的差异性很大，导致产品在保证其功效的 稳定性上存在一定的问题，再有药材的配伍应用属于因人辨证施治、因病分型论治的中医 体系，从而使得适用人群有限，且不适宜长期服用。
[0007] 现有的提尚免疫力的食品或者药物存在以下不足： (1) 对免疫器官的重量增加幅度不大； (2) 对于增强体液免疫的效果不好； (3) 对于增加非特异性免疫功能的作用不明显； (4) 对迟发型变态反应能力无明显提高作用； (5) 对抗体生产细胞的数量无明显提高作用。
【发明内容】
[0008] 为解决现有技术中存在的技术问题，本发明提供一种提高免疫力的碱性植物盐及 其制备方法，以实现以下发明目的： (1) 本发明制备的碱性植物盐，能够增加免疫器官的重量； (2) 本发明制备的碱性植物盐，具有增强体液免疫的作用，提高溶血素含量； (3) 本发明制备的碱性植物盐，具有增加小鼠非特异性免疫功能的作用，显著增加小鼠 吞噬细胞的吞噬指数及吞噬活性； (4) 本发明制备的碱性植物盐，增加小鼠迟发型变态反应能力； (5) 本发明制备的碱性植物盐，提高抗体生产细胞的数量。
[0009] 为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案如下： 一种提高免疫力的碱性植物盐，所述碱性植物盐，包括以下原料组分:盐地碱蓬植物 盐、裙带菜提取物、香蕉干粉、虫草花提取物、山药提取物、决明子提取物、魔芋粉、茶多酚、 岩藻多糖。
[0010] 以下是对上述技术方案的进一步改进： 所述碱性植物盐，以重量份计，包括以下原料组分:盐地碱蓬植物盐130-150份、裙带菜 提取物10-15份、香蕉干粉8-14份、虫草花提取物11-16份、山药提取物4-8份、决明子提取物 12-17份、魔芋粉3-7份、茶多酚4-9份、岩藻多糖11-17份。
[0011] 所述盐地碱蓬植物盐，钠含量为15.72-15.95%;黄酮含量为3.8-4. lmg/g，可溶性 多糖含量为11.2-12.6%;甜菜红素含量为73-79 nmol/g;Ca含量为2589-2629 mg/kg; Zn含 量为76 · 9-77 · 4 mg/kg，硫酸镁含量为22 · 49-22 · 89%;维生素 C含量为42 · 56-42 · 98 mg/g。
[0012] 所述裙带菜提取物，盐藻黄质含量为30%。
[0013]所述虫草花提取物，虫草多糖含量>30%，腺苷含量>1%，细度为80目，灰分含量〈9%， 水分含量〈5%，重金属含量As〈l.Oppm，Pb〈2.0PPM，Hg〈0.1ppm;Cd〈1.0ppm。
[0014] 所述山药提取物，薯蓣皂素含量为15%;所述决明子提取物，总蒽醌2%，大黄素4%， 100%通过80目；所述魔芋粉，葡甘聚糖含量达60%。
[0015] -种提高免疫力的碱性植物盐的制备方法，所述制备方法，包括盐地碱蓬植物盐 的制备;所述盐地碱蓬植物盐的制备，包括酶解;所述酶解，包括一级酶解、二级酶解、三级 酶解。
[0016] 所述二级酶解，酶解pH为6.2-6.5;木瓜蛋白酶加入量为0.3-0.4%;酶解时间为4-4.5h〇
[0017] 所述二级酶解，温度为50-55°C，木瓜蛋白酶的酶活为85-95万U/g。
[0018] 所述一级酶解，加入酶活为145-155万U /g的纤维素酶，加酶量1.6-2. Owt%;pH为 6.0-6.5,并加温至50-55 °C，酶解时间为3h。
[0019] 与现有技术相比，本发明的有益效果为： (1) 本发明制备的碱性植物盐，能够增加免疫器官的重量，食用本发明碱性植物盐30天 后，小鼠的脾脏与体重的比值为0.552-0.561%;胸腺与体重的比值为0.365-0.385%;对照 组，小鼠的脾脏与体重的比值为0.520%;;胸腺与体重的比值为0.335%; (2) 本发明制备的碱性植物盐，具有增强体液免疫的作用;食用本发明碱性植物盐30天 后，小鼠的溶血素含量为0.820-0.867(OD);对照组小鼠的溶血素含量为0.460(OD); (3) 本发明制备的碱性植物盐，具有增加小鼠非特异性免疫功能的作用，显著增加小鼠 吞噬细胞的吞噬指数及吞噬活性；食用本发明碱性植物盐30天后，小鼠的吞噬指数为 0 · 0305-0 · 0348;吞噬活性为 5 · 41-5 · 86; (4) 本发明制备的碱性植物盐，增加小鼠迟发型变态反应能力，食用本发明碱性植物盐 30天后，给小鼠腹腔注射2%绵羊红细胞(SRBC)0.2mF只进行致敏，于免疫后第4天每鼠左后 足环部皮下注射20%SRBC(20ul/只）进行攻击，并于攻击前和攻击后24小时测量每鼠左后 足肠同一部位厚度，计算攻击前、后的差值，即注射后24h足跖肿胀度为0.452-0.466 mm;对 照组为0.240 mm; (5) 本发明制备的碱性植物盐，能够提高抗体生产细胞的数量，食用本发明碱性植物盐 30天后，小鼠的溶血空斑数为44.9-50.7 X 103/全脾。
【具体实施方式】
[0020] 以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用 于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
[0021] 实施例1 一种提高免疫力的碱性植物盐 以重量份计，包括以下原料组分： 盐地碱蓬植物盐130份、裙带菜提取物10份、香蕉干粉8份、虫草花提取物11份、山药提 取物4份、决明子提取物12份、魔芋粉3份、茶多酚4份、岩藻多糖11份。
[0022] 所述盐地碱蓬植物盐，钠含量为15.72-15.95%;黄酮含量为3.8-4. lmg/g，可溶性 多糖含量为11.2-12.6%;甜菜红素含量为73-79 nmol/g;Ca含量为2589-2629 mg/kg; Zn含 量为76 · 9-77 · 4 mg/kg，硫酸镁含量为22 · 49-22 · 89%;维生素 C含量为42 · 56-42 · 98 mg/g; 所述裙带菜提取物，盐藻黄质含量为30%; 所述虫草花提取物，虫草多糖含量>30%，腺苷含量>1%，细度为80目，灰分含量〈9%，水分 含量〈5%，重金属含量As〈l.Oppm，Pb〈2.0PPM，Hg〈0.1ppm;Cd〈1.0ppm。
[0023] 所述山药提取物，薯蓣皂素含量为15%; 所述决明子提取物，总蒽醌2%，大黄素4%，100%通过80目； 所述魔芋粉，葡甘聚糖含量达60%。
[0024]实施例2-种提高免疫力的碱性植物盐 采用实施例1所述的各原料，只改变各原料的配比，改变为： 以重量份计，包括以下原料组分： 盐地碱蓬植物盐142份、裙带菜提取物12份、香蕉干粉13份、虫草花提取物14份、山药提 取物6份、决明子提取物15份、魔芋粉5份、茶多酚8份、岩藻多糖13份。
[0025]实施例3-种提高免疫力的碱性植物盐 采用实施例1所述的各原料，只改变各原料的配比，改变为： 以重量份计，包括以下原料组分： 盐地碱蓬植物盐150份、裙带菜提取物15份、香蕉干粉14份、虫草花提取物16份、山药提 取物8份、决明子提取物17份、魔芋粉7份、茶多酚9份、岩藻多糖17份。
[0026]实施例4 一种提高免疫力的碱性植物盐的制备方法 包括以下步骤： 步骤1、制备决明子提取物 以干燥决明子为原料，经清洗、干燥、装罐，6立方米提取罐可装料1-1.5吨，加入10倍体 积量的70%乙醇-水溶液，加热回流提取三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇至无醇，继 续浓缩蒸发水至d=l. 15的浸膏，喷雾干燥塔进行喷雾干燥得决明子提取物，粉碎，过100目 振动筛，得决明子提取物。
[0027] 步骤2、制备盐地碱蓬植物盐 (1)原料前处理 盐地碱蓬植物经过收割和清洗后，植株在通风处自然晒干(干重与鲜重比为1:2.5)，使 用粉碎机进行粉碎(粉碎细度克约200目），得盐地碱蓬粉。
[0028] (2)热浸提 将盐地碱蓬粉放入超声波和微波协同强化外循环提取罐内，并投放按重量百分比计盐 地碱蓬粉与乙醇水溶液固液比为1:12,其中乙醇水溶液中含乙醇的体积百分比为60%; 超声波和微波协同强化外循环提取罐内物料在频率为2650MHz，功率为12KW的微波和 频率为1 OOKHz，功率为4KW的超声波协同强化外循环提取，提取温度为50 °C，提取时间为150 分钟，获得的提取液注入高位提取液储罐，然后向超声波和微波协同强化外循环提取罐通 入压缩空气，将盐地碱蓬内尚存的提取液吹至低位提取液储罐，再将高位提取液储罐和低 位提取液储罐内的提取液注入微波减压外循环浓缩罐内，所述压缩空气压力为3MPa，通入 时间为70分钟； 所述提取液的外循环是按如下步骤实现的：提取液在功率为6KW的提取罐外循环栗作 用下由提取罐料液出口流出，经输料管送至提取罐料液循环入口，返回超声波和微波协同 强化外循环提取罐内，实现提取液的外循环;外循环浸提时间为2小时，浸提结束后得浸提 提取液。
[0029] (3)酶解 A、 一级酶解 将步骤(2)所得浸提提取液，加入酶解罐，调节pH6.5，并加温至50-55 °C，加入酶活为 150万U /g的纤维素酶，加酶量1.8%质量比，搅拌均匀，保温50-55°C，酶解时间3h;得一级 酶解液； B、 二级酶解 将一级酶解所得酶解液，调节PH6.2-6.5，并加温至50-55°C，加入酶活为90万U/g的木 瓜蛋白酶进行二级酶解，加酶量0.3-0.4%质量比，搅拌均匀，保温50-55 °C，酶解时间4-4.5h，得二级酶解液； C、 三级酶解 将二级酶解液调节PH3.5,并加温至45°C，加入酶活为7万U /mL液体果胶酶进行三级 酶解，加酶量1.5%质量比，搅拌均匀，保温45 °C，酶解时间3h;得三级酶解液。
[0030] (4)除重金属 向步骤（3 )所得三级酶解液中加入生物吸附剂，加入量为三级酶解液质量的0.3~ 0.5%，温度控制在33~36°C，90rpm搅拌25~26小时； 所述生物吸附剂包括海藻酸钠7~9份、褐藻胶2~3份、微生物制剂4~4.8份； 所述微生物制剂包括鲁氏毛霉6 X 108个/g、藤黄微球菌2.5 X 108个/g、酿酒酵母3 X 1〇8个/g;上述微生物分别由菌种按常规培养方法培养制得； 所述鲁氏毛霉(Mucor rouxianus)菌种保藏号为CICC3155;藤黄微球菌(Micrococcus luteus)菌种保藏号为ACCC41016;酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae)菌种保藏号为 ACCC20089;上述菌种均来自市售。
[0031] (5)过滤 过滤，分离残渣和生物吸附剂，得滤液。
[0032] (6)干燥、结晶 将滤液，进行喷雾干燥，喷雾干燥过程中进风温度170°C，出风温度105°C ;雾化器频率 420Hz，得本发明植物盐。
[0033] 步骤3、制备碱性植物盐 按照配方，称取各原料组分，混合均匀后，粉碎中120目，经过消毒处理后，得本发明碱 性植物盐。
[0034]实施例5本发明制备的碱性植物盐，具有提高免疫力的效果。
[0035] 1、材料和方法 (1)试样:本发明实施例1、实施例2、实施例3所制备的碱性植物盐。按照人体口服推荐 量为2000mg/d，成人体重60kg计算，折合剂量33.33mg/kg · bw。
[0036] (2)实验动物与分组： 清洁级昆明种小鼠，体重为18~22g，将小鼠随机分组。免疫I组，进行脏体比值的测定； 免疫II组，进行体液免疫功能实验;免疫III组，进行碳廓清实验;免疫IV组，进行迟发型变 态反应实验;免疫V组，进行抗体生成细胞检测实验。每个免疫组，再分成4组，分别为对照 组，本发明组1 (实施例1 )、本发明组2 (实施例2 )、本发明组3 (实施例3 )。
[0037] (3)实验环境条件： 普通环境系统，温度20~24 °C，湿度52~58 %。
[0038] (4)剂量选择及试样处理： 根据人体口服推荐量，小鼠的剂量相当于人体口服推荐量的10倍，即333.3mg/kg· bw;每天灌胃1次，灌胃体积为14.7mg/10g · bw，对照组予以等体积的溶剂，连续30d。
[0039] (5)主要仪器与试剂 动物台秤、分析天平、离心机、722分光光度计、恒温水浴箱、显微镜、微量注射器、 Na2C03溶液、绵羊红细胞(SRBC)、印度墨汁等。
[0040] (6)实验方法 参照《保健食品检验与评价技术规范》（2003版）中关于增强免疫力功能检查方法进 行，并用Excel/SPSS软件对实验结果进行统计分析。
[0041 ] 2、实验结果 (1)体重及脏器/体重比值的测定： 对小鼠各剂量组连续灌胃给药30天，每天一次，观察体重的变化，称重后处死小鼠，取 出脾脏和胸腺，在电子分析天平上称重，计算脏体比值，结果见表1和表2。
[0042]表1对小鼠体重的影响
表2对小鼠免疫器官脏器/体重比值的影响
由表2可见，经口给予小鼠试样30天，对小鼠脾脏/体重比值和胸腺/体重比值有显著影 响。
[0043] (2)体液免疫功能实验 将小鼠60只，随机分为4组，灌胃给药，每天一次，连续给药15天，于给药后的第9天给各 组小鼠 ip〇. 5 %鸡RBC生理盐水0.2ml/只进行免疫，于免疫后7天，眼眶经脉从取血，按鸡RBC 作免疫原的溶血素测定法测各组小鼠的溶血素含量。
[0044] 表3对小鼠溶血素含量的影响
由表3可见，本发明制备的碱性植物盐，能显著增加小鼠溶血素的含量，表明本发明制 备的碱性植物盐具有增加小鼠体液免疫的作用。
[0045] (3)碳粒廓清法(对非特异性免疫功能的影响） 将小鼠60只，随机分为4组，灌胃给药，每天一次，连续给药30天，于给药后的第30天， 通过小鼠尾静脉注射用生理盐水稀释4倍的印度墨汁，每10g体重注射0.1ml，墨汁注入后立 即计时，于注入墨汁第2、lOmin，分别经内眦静脉取血20ul，加入到2mlNa2C0 3溶液中摇均。以 Na2C03溶液作空白对照，用722型分光光度计在60nm波长处比色测光密度值(0D值）。计算各 组小鼠的吞噬指数K及吞噬活性，见表4。
[0046]表4对小鼠单核吞噬细胞功能的影响
由表4可见，本发明制备的碱性植物盐，可显著增加小鼠吞噬细胞的吞噬指数及吞噬活 性，表明本发明制备的碱性植物盐，具有增加小鼠非特异性免疫功能的作用。
[0047] (4)迟发型变态反应(DTH)(足跖增厚法） 将小鼠60只，随机分为4组，灌胃给药，每天一次，于灌胃第30天，给小鼠腹腔注射2 %绵 羊红细胞（SRBC)0.2mF只进行致敏，于免疫后第4天每鼠左后足环部皮下注射20%SRBC (20ul/只）进行攻击。并于攻击前和攻击后24小时测量每鼠左后足肠同一部位厚度，计算攻 击前、后的差值，，见表5。
[0048] 表5对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响
由表5可见，本发明制备的碱性植物盐，能够增加小鼠足跖肿胀度。
[0049] (5)抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法） 将小鼠45只，随机分为3组，灌胃给药，每天一次，于灌胃第30天，开始试验。将压积绵羊 红细胞(SRBC)用生理盐水配成2 % (v/v)的细胞悬液，每只小鼠腹腔注射0.2ml。将免疫后4 天的小鼠处死，取脾轻轻撕碎，用Hank's液制成细胞悬液，200目筛网过滤，洗涤、离心2次， 最后将细胞悬浮在5ml Hank's液中。将表层培养基加热溶解后与等量的pH 7.4、2倍浓度的 Hank ' s液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加入用SA液配制的10 % SRBC 50ul (v/ v)、20ul脾细胞悬液，迅速混匀后倾倒于已刷薄层琼脂糖的玻片上，待琼脂糖凝固后将玻片 平扣放在玻片架上，放入二氧化碳培养箱中温育1.5小时，将用SA液稀释的补体(1:10)加入 到玻片凹槽内继续温育1.5小时后计数溶血空斑数。实验结果见表6。
[0050] 表6对小鼠抗体生成细胞数的影响
本发明制备的碱性植物盐，能够提高小鼠的抗体生产细胞，增强小鼠的免疫功能。
[0051] 上述表1-6中的数据均为算术平均值土标准偏差。
[0052] 除非特殊说明，本发明所述的比例均为质量比例，所述的百分数，均为质量百分 数。
[0053] 最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明， 尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可 以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。 凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的 保护范围之内。
【主权项】
1. 一种提高免疫力的碱性植物盐，其特征在于:所述碱性植物盐，包括以下原料组分： 盐地碱蓬植物盐、裙带菜提取物、香蕉干粉、虫草花提取物、山药提取物、决明子提取物、魔 芋粉、茶多酚、岩藻多糖。2. 根据权利要求1所述的一种提高免疫力的碱性植物盐，其特征在于：所述碱性植物 盐，以重量份计，包括以下原料组分:盐地碱蓬植物盐130-150份、裙带菜提取物10-15份、香 蕉干粉8-14份、虫草花提取物11-16份、山药提取物4-8份、决明子提取物12-17份、魔芋粉3-7份、茶多酚4-9份、岩藻多糖11-17份。3. 根据权利要求1所述的一种提高免疫力的碱性植物盐，其特征在于:所述盐地碱蓬植 物盐，钠含量为15.72-15.95%;黄酮含量为3.8-4. lmg/g，可溶性多糖含量为11.2-12.6%;甜 菜红素含量为73-79 nmol/g; Ca含量为2589-2629 mg/kg; Zn含量为76.9-77.4 mg/kg，硫酸 镁含量为22.49-22.89%;维生素 C含量为42.56-42.98 mg/g。4. 根据权利要求1所述的一种提高免疫力的碱性植物盐，其特征在于:所述裙带菜提取 物，盐藻黄质含量为30%。5. 根据权利要求1所述的一种提高免疫力的碱性植物盐，其特征在于:所述虫草花提取 物，虫草多糖含量>30%，腺苷含量>1%，细度为80目，灰分含量〈9%，水分含量〈5%，重金属含量 As 〈l.Oppm ，Pb〈2.0PPM， Hg〈0.1ppm;Cd〈1.0ppm。6. 根据权利要求1所述的一种提高免疫力的碱性植物盐，其特征在于： 所述山药提取物，薯蓣皂素含量为15%;所述决明子提取物，总蒽醌2%，大黄素4%，100% 通过80目；所述魔芋粉，葡甘聚糖含量达60%。7. -种提高免疫力的碱性植物盐的制备方法，其特征在于:所述制备方法，包括盐地碱 蓬植物盐的制备;所述盐地碱蓬植物盐的制备，包括酶解;所述酶解，包括一级酶解、二级 酶解、三级酶解。8. 根据权利要求7所述的一种提高免疫力的碱性植物盐的制备方法，其特征在于:所述 二级酶解，酶解pH为6.2-6.5;木瓜蛋白酶加入量为0.3-0.4%;酶解时间为4-4.5h。9. 根据权利要求7所述的一种提高免疫力的碱性植物盐的制备方法，其特征在于:所述 二级酶解，温度为50_55°C，木瓜蛋白酶的酶活为85-95万U/g。10. 根据权利要求7所述的一种提高免疫力的碱性植物盐的制备方法，其特征在于:所 述一级酶解，加入酶活为145-155万U /g的纤维素酶，加酶量1.6-2.0wt%;pH为6.0-6.5，并 加温至50-55 °C，酶解时间为3h。
【文档编号】A61K31/353GK105902756SQ201610242036
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年4月19日
【发明人】王胜
【申请人】王胜