用于治疗皮肤疾病的草药组合的制作方法
【专利摘要】本发明公开了用于治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银屑病或其他炎症性皮肤疾病或其组合的方法和药物，包括将包括大黄素和地高辛的分子组合和/或大黄和生地黄的草药组合的周期性剂量的治疗方案施用或者注射到诊断有黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银屑病或其他炎症性疾病或其组合的患者的患病皮肤区域。
【专利说明】用于治疗皮肤疾病的草药组合
[0001] 发明背景 1 .发明领域
[0002] 本发明一般地涉及疾病治疗，包括用于癌症(包括皮肤癌和白血病）以及用于自身 免疫疾病如银肩病、chrone、溃疡性结肠炎、关节炎和糖尿病的治疗。更具体地，其涉及使用 某些草药、某些草药提取物和/或某些草药的某些分子组分的组合来降低白细胞计数。实例 化合物和/或分子包括用于治疗疾病的与大黄素及其类似物组合的强心苷类如地高辛和哇 巴因（Quabain)。可以组合和/或可以从其提取并组合某些化合物和/或分子的实例草药包 括大黄和生地黄，以及金银花、牡丹皮、地骨皮、仙鹤草和椿根皮。
[0003] 2.相关领域的描述
[0004] 草药药物仍然相当普遍，且满足全世界的庞大人口的药物需求。全球草药药物市 场目前价值约三百亿美元。由于它们在控制各种各样的疾病(ailment)方面可能的有用性， 人们对从草药分离生物活性的植物化学物质投入了更多的努力。确定生物活性的植物化学 物质的分子结构和作用机制对于提供它们的功效的证据以及草药制剂来说同等重要，这还 可能导致合成或半合成药物的药物学开发。关于癌症研究中的草药药物，几项早先研究证 实药用草药中存在的某些植物化学物质发挥出抗癌活性。在包括大黄素、大黄素甲醚和大 黄酚的三种结构相关的蒽醌中，大黄素显示出对肿瘤细胞的最有效的细胞毒性作用。大黄 素（1，3，8-三羟基-6-甲基蒽醌)和芦荟-大黄素（1，8-二羟基-3-羟甲基-9，10-蒽二酮)在体 外和动物模型中显示出用于治疗各种类型癌症的化疗活性，包括膀胱癌、肺癌、肝癌和白血 病。芦荟-大黄素是存在于一些传统药用植物如大黄(Rhei Rhizoma)和掌叶大黄(Rheum palmatum)中的天然蒽醌化合物。有趣的是，已经发现芦荟-大黄素对正常人体细胞具有更 低的细胞毒性。
[0005] 植物源性强心苷类，如地高辛，用于治疗充血性心力衰竭和其他心脏紊乱。它们的 主要药理学作用是通过抑制钠栗(Na+和K+依赖性ATP酶(NKA) 1 (EC 3.6.3.9))而介导的。 NKA，一种普遍存在的膜阳离子转运蛋白，通过维持高K+和低Na+浓度而在所有真核细胞中控 制正常膜电位。它由催化亚基和辦唐蛋白亚基组成。研究表明，植物源性强心苷类在各种各 样的癌细胞中调节某些细胞过程，如增殖和凋亡。
[0006] 以下文件通过援引加入:W02004/052294，W02007/130124和 US2009/0018088。
【附图说明】
[0007]图1说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对NB4白血病细胞的作用。
[0008] 图2说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对HL-60白血病细胞的作用。
[0009] 图3说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对Jurkat T细胞白血病性细胞的作用。 [0010]图4说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对HT29结肠癌细胞的作用。
[0011] 图5说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对PC3前列腺肿瘤细胞的作用。
[0012] 图6说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对MDA 435乳腺癌细胞的作用。
[0013] 图7说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对黑素瘤和乳腺癌的MDA 435细胞系的 作用。
[0014] 图8说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对乙酰肝素酶活性的作用。
[0015] 图9说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对HMVEC活性的作用。
[0016] 图10-11说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对AML(急性髓性白血病）的NB-4细 胞系的作用。
[0017]图12说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对HL-60细胞系的作用。
[0018]图13说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对Jurkat细胞系的作用。
[0019]图14说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对HT-29细胞系的作用。
[0020] 图15是条形图，说明了某些草药和草药组合对活的癌细胞的作用，包括(C1)生地 黄-地黄属(Rhemannia)，以及(C2)金银花-忍冬科(Lonicerae)、大黄-大黄(Rhei)、牡丹皮-牡丹（Moutan)和地骨皮-地骨皮（Cortex Lycii)的组合，和（C3)仙鹤草-仙鹤草 (Agrimoniae)和椿根皮-臭椿(Ailanthi)的组合。
[0021] 图16-18显示了癌细胞的生长相对于18种不同草药的每一种的稀释因子的曲线 图。
[0022] 图19是条形图，说明了某些草药和草药组合对活的癌细胞的作用。
【具体实施方式】
[0023] 提供了治疗白血病或其他癌症的方法。该治疗包括将包括草药、或草药提取物或 提取自某些草药或草药提取物的化合物或分子的组合的定期剂量的方案施用到诊断有白 血病或其他癌症的患者。七种这样的草药在以某些组合使用时在杀死癌细胞和/或降低白 细胞计数方面表现出增强的效力。这七种草药包括大黄、生地黄和金银花，以及牡丹皮、地 骨皮、仙鹤草和椿根皮。
[0024] 以这些草药中两种或更多种的某些组合的治疗方案进行的施用起到了降低白细 胞计数的作用，并在本文中作为实施方式提供。具体的实施方式包括，如在下文和援引加入 的美国专利申请序列号13/018,435中所指出的，大黄与生地黄的有利组合，以及大黄和/或 生地黄与金银花的组合。进一步的实施方式包括大黄和/或生地黄与牡丹皮、地骨皮、仙鹤 草和/或椿根皮中的一种或多种的组合。其他的实施方式包括大黄和/或生地黄与金银花以 及牡丹皮、地骨皮、仙鹤草和/或椿根皮中一种或多种的组合。进一步的实施方式包括金银 花与牡丹皮、地骨皮、仙鹤草和/或椿根皮中的一种或多种的组合。其他实施方式包括牡丹 皮、地骨皮、仙鹤草和/或椿根皮中的两种或更多种的组合。
[0025] 七种草药中的每一种含有几种分子成分。因七种草药的组合的定期剂量的治疗方 案而导致的观察到的白细胞计数降低可以是活性分子(例如大黄和生地黄中分别含有的大 黄素和地高辛）的各种组合的结果。该方案的有利效果可以通过与活性成分的进一步组合 和/或通过一种或多种缓冲剂分子或者一种或多种用作活性分子的一些有益载体的分子而 增强。七种草药的化学和药理学性质总结如下。
[0026] 在某些实施方式中，使用七种草药的某些部分，如根、茎、叶、外壳(husk)、枝、皮 (bark)、汁液(sap)或籽粒(kerne 1)或其组合。例如，对于大黄，至少可以使用根。对于生地 黄，至少可以使用干燥的块根。对于金银花，至少可以使用干燥的花。对于牡丹皮，至少可以 使用干燥的根皮。对于地骨皮，至少可以使用干燥的根皮。对于仙鹤草，至少可以使用仙鹤 草(Agrimonia Pilosa Ledeb)的干燥的地上部分。对于椿根皮，至少可以使用根或莖的干 燥的皮。
[0027]在某些进一步的实施方式中，两种草药生地黄和大黄，或者包括金银花的三种草 药中的两种或更多种，或者包括牡丹皮、地骨皮、仙鹤草和/或椿根皮的七种草药与三种草 药中的任意一种或多种的组合，可以与包括以下草药的另外十一种草药中任意一种或多种 组合，甚至在某些实施方式中与其全部组合：紫草，或软紫草(radix arnebiae(arnebia r oo t))或紫草（rad i x lithospermi (gromwell root));玄参，或玄参（radix scrophulariae(figwort root));石膏，或石膏（gypsum fibrosum(gypsum));白苟，或白苟 (radix paeoniae alba(white peony root));赤苟，或赤苟（radix paeoniae rubra(red peony root));红花，
[0028] 或红花（flos carthami(safflower));大青叶，或大青叶（folium isatidis(woad leaf));青黛，或青黛（indigo naturalis( indigo natural is));白术，或白术（rhizoma atractylodis macrocephalae(largehead atractylodes rhizome));石韦，或石韦 (folium pyrrosiae(shearer's pyrrosia leaf));
[0029] 和肉桂，或肉桂（cortex cinnamomi(cinnamomum bark)) 〇
[0030] 大黄
[0031] 大黄（radix et rhizoma rhei，rhubarb)
[0032] 化学性质
[0033] 大黄含有游离蒽醌类、蒽醌苷类和二蒽酮类。大黄中含有的游离蒽醌中有茜素、芦 荟大黄素、大黄?Kchrysophanol)、羟基大黄素(citreorosein)、大黄素、紫胶酸D、大黄素 甲醚(physcion)和大黄酸(rhein)。大黄中含有的蒽醌苷中有1,8-二羟基-3-甲基蒽醌-1-Ο-β-D-葡萄糖苷(Palmatin)、芦荟大黄素 Γ-Ο-β-D-吡喃葡萄糖苷、
[0034] 芦荟大黄素 Ι-Ο-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄酚Ι-Ο-β-D-吡喃葡萄糖苷（大黄酚苷 (chrysophanein))、大黄酸8-〇-β-?-Ρ比喃葡萄糖苷、大黄素 Ι-Ο-β-D-P比喃葡萄糖苷、大黄素 3-0-?Η)_吡喃葡萄糖苷(Glucoemodin)、大黄素8-(H3-D-吡喃葡萄糖苷、大黄素甲醚l-0-β-D-P比喃葡萄糖苷、大黄素甲醚8-〇-β-?-龙胆二糖苷、physcionin、和大黄酸Ι-Ο-β-D-P比喃葡 萄糖苷。大黄中含有的二蒽酮中有芦荟大黄素二蒽酮，大黄酚二蒽酮，palmidins A-C，大黄 二蒽酮(rheidin)A-C，
[0035] 番泻苷元（861111丨(1；[11)4、13和(]，和番泻苷（86111108丨(16)八-卩。
[0036] 大黄还包含其他化合物，包括：2-(-2-羟基-丙基）-5_甲基-7-羟基-色酮 (chromone)、2-(-2-羟基丙基)-甲基-7-羟基-色满酮（chromanone)、2，5-二甲基-7-羟基色 酮、2-甲基-5-羧甲基-7-羟基色酮、3萘类、3,5,4'-三羟基二苯乙烯4'-0-〇-(2"-〇-没食子 酰基)_吡喃葡萄糖苷、3，5，4 ' -三羟基二苯乙烯4 '-0-?ΗΗ 6"-0-没食子酰基)-吡喃葡萄糖 苷、4'-〇-甲基白藜芦醇苷(11161:1171口;^61(1)、土大黄苷(1?11&口〇111:;[11)、大黄酸苷(1?116；[11081(16) A-D、二苯乙烯没食子酸盐3,5，4'_三羟基二苯乙烯4'-Ο-β-D-吡喃葡萄糖苷、二苯乙烯白藜 芦醇苷(Stilbene piceid)和单宁类。
[0037] 药理学
[0038]大黄的泻下作用
[0039] 众所周知，大黄是一种泻剂。活性成分是组合的蒽醌类，特别是番泻苷类。番泻苷 类的含量与大黄的泻下活性相关。表1说明了蒽醌类的口服泻下m)5〇值。
[0040]
[0041] 表 1
[0042] 对作用机制进行的研究发现番泻苷类主要对大肠起作用。通过胃施用从大黄提取 物或番泻苷A或者通过静脉途径而从番泻苷元获得最有效的泻下活性，用氯霉素抑制小鼠 中的肠道菌群显著降低了蒽醌苷的辅糖基(prosthetic sugar group)的活性，防止蒽酮在 被转运到大肠中和被细菌酶水解成游离番泻苷元之前被氧化。发现番泻苷类通过微生物β-糖苷酶以逐步方式经由8-单糖苷水解成对应的番泻苷元。所得代谢物番泻苷元可能通过结 合到肠道细菌的细胞膜的还原酶而进一步还原成作为泻下活性成分的大黄酸蒽酮。
[0043] 大肠与小肠连接处的结扎未能防止蒽醌苷在大肠中产生泻下作用。口服施用大黄 在6-8小时后开始生效。这些结果表明还有大量的蒽醌苷在作用于盆丛并产生蠕动和泻下 之前，在小肠中吸收并且在肝脏中转化。
[0044] 另一方面，小剂量（口服施用0.05-0.3g)大黄由于其高单宁含量而引起便秘。便秘 作用可以通过大黄与黄连(Rhizoma Coptidis) -起煎煮而防止。这是因为单宁与黄连的主 要成分小檗碱在煎煮过程中形成胶状沉淀。
[0045] 大黄的抗微生物作用
[0046] 通过在37°C下混合病毒与芦荟大黄素稀释物15分钟而进行测试，单纯疱疹病毒2 型和3型、水痘-带状疱疹病毒、假性狂犬病病毒、流感病毒被灭活。病毒的电镜检查证实，包 膜被部分破坏，表明其对于包膜病毒是直接杀病毒的。大黄素和大黄酸表现出对人巨细胞 病毒(HCMV)菌株AD-169的抗病毒活性。在对HCMV的更昔洛韦抗性菌株进行测试时，大黄酸 的EC50值优于对于AD169-菌株获得的值。掌叶大黄的水提取物抑制乙型肝炎病毒(HBV)聚 合酶活性并且结合乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)。使用血清鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA水 平和DHBV DNA聚合酶活性作为抗病毒指标，对DHBV携带雏鸭静脉内施用50mg/kg的提取物 显示出对DHBV的抗病毒活性。
[0047] 大黄表现出对葡萄球菌、溶血性链球菌、白喉杆菌、枯草杆菌、布鲁氏杆菌、蕈状芽 孢杆菌、包皮垢杆菌(B.smegatis)、草分枝杆菌、鼠疫巴氏杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、痢 疾杆菌和淋病双球菌的抑制作用。葡萄球菌和淋病双球菌对该草药是最敏感的。主要抗细 菌组分是具有1，9_二羟基蒽醌结构的蒽醌衍生物。3-羧基大黄酸、羟基芦荟-大黄素和羟基 大黄素显示出最有效的抗细菌活性。大黄酸、大黄素和芦荟-大黄素对葡萄球菌、链霉素、白 喉杆菌、枯草杆菌、炭疽杆菌和伤寒杆菌的抑菌作用集中在微生物的线粒体呼吸链。金黄色 葡萄球菌的呼吸作用受到大黄素、芦荟-大黄素和大黄酸的强力抑制。大黄酸、大黄素和大 黄酸特异性干扰氧化还原功能NADH脱氢酶。
[0048]大黄的水提取物、乙醇提取物和醚提取物还对多种病原性真菌是抗真菌的，包括 许兰黄癣菌（Achorion schoenleini)、同心毛癣菌（Trichopphyton concentricum)、紫色 毛癣菌(T · violaceum)、石膏样毛癣菌（T · gypsum)、星形诺卡菌(Nocardia asteroids)、絮 状麦皮癣菌（Epidermophyton flocosum)和申克抱子丝菌（Sporotrichum schenckii)。大 黄煎剂表现出针对流感病毒的抑制作用。鸡胚中体外和半体内的最小有效剂量为5mg/胚 胎。
[0049]大黄的抗肿瘤和抗诱变作用
[0050]腹膜内施用75mg/kg大黄素对小鼠乳腺癌产生45%抑制作用。511^/1^大黄酸和大 黄素对鼠黑素瘤的抑制率为76%和73%。大黄酸、大黄素和芦荟-大黄素体内抑制鼠白血病 P388,增加存活时间并减小腹水体积。它们还抑制艾氏腹水癌（Ehrlich ascites carcinoma)，大黄素是艾氏腹水癌细胞中呼吸作用的强力抑制剂，ED50为20yg/mL。还抑制 白血病L1210细胞中的细胞呼吸。巴马汀(Palmatin)、Cysophanein和physcionin也对几种 类型癌细胞表现出中等细胞毒性活性。
[0051] 来自掌叶大黄的草药提取物和大黄素在鼠伤寒杆菌TA98中引起苯并(a)芘[B(a) P，]，2-氨基-3-甲基咪唑并（4，5-f)喹啉（IQ)和3-氨基-1-甲基-5H-吡啶并（4，3-b)吲哚 (trp-P-2)的诱变性的剂量依赖性的下降。进一步发现，大黄素通过直接抑制肝微粒体激活 而非通过与IQ的直接代谢物的相互作用和/或通过改变细菌细胞中的DNA修复过程来降低 IQ的诱变性。大黄素还在使用鼠伤寒杆菌TA98的Ames-微粒体试验中以剂量依赖性方式显 著降低1-硝基芘（1-NP)的诱变性，和在使用大肠杆菌PQ37的S0S显色试验中显著降低遗传 毒性。而且，大黄素在鼠伤寒杆菌TA98中明显抑制1-NP DNA加合物的形成。结果表明，大黄 素充当阻断剂和/或抑制剂以降低1-NP的直接作用诱变性。
[0052] 大黄的止血作用
[0053]大黄还在传统中药中作为止血剂。止血活性已经在实验和临床上证实。大黄对外 出血和内出血均有效。它有效治疗和预防大鼠中的实验性胃出血和溃疡形成。还报告了掌 叶大黄的粉状根茎在治疗胃肠出血方面的明显疗效。它减少凝血时间，并且降低毛细血管 的通透性和脆性。它增加纤维蛋白原并促进骨髓产生血小板。
[0054]大黄的免疫抑制作用
[0055] 3 X 10_7_3 X 10、的大黄素剂量依赖性地抑制人单核细胞对植物血凝素和混合淋 巴细胞反应的响应。进一步发现，在暴露于大黄素（1〇_6Μ)后，白细胞介素-l(IL-l)和白细胞 介素-2(IL-2)的产生以及IL-2受体的表达都被降低。大黄素可以是开发用于对抗移植和自 身免疫疾病的更好免疫抑制剂的新模板。
[0056] 大黄的利胆作用
[0057] 大黄可以刺激胆囊的构建，并且松弛胆胰管括约肌(Oddi 's sphinctercan)，由此 促进胆汁分泌。它还增加胆红素和胆汁酸的含量。
[0058] 大黄的其他作用
[0059] 口服施用大黄素和大黄素在兔中引起显著的利尿、利尿钠排泄和利尿钾排泄作 用。口服施用大黄增加钠和钾的尿排泄，使尿碱化至高达8.4的pH值。大黄还抑制胃蛋白酶、 胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶的活性。它降低血压和血胆固醇水平。具有由皮下注射肺炎 双球菌引起的发烧的兔子在口服施用大黄煎剂后反应为体温降低。
[0060 ]腹膜内施用15mg/kg的大黄素在大鼠中表现出对卡拉胶引起的足妬炎症的抗炎活 性。以相同的剂量，它还在大鼠中显示出对幽门结扎的、阿司匹林和束缚应激引起的胃溃疡 的抗溃疡活性。按照阿司匹林处理的幽门结扎的大鼠的胃液中的总碳水化合物:蛋白质比 率，它减少酸和胃蛋白酶输出并且增加粘液分泌，表明大黄素的抗溃疡作用可能是因为对 胃分泌的这种作用。
[0061 ] 牡丹皮
[0062] 牡丹皮（cortex moutan(paeony bark))
[0063] 化学性质
[0064] 牡丹皮含有牡丹酸新苷（Apiopaeonoside)、苯甲酰氧苟药苷 (Benzoyloxypaeoniflorin)、苯甲酰苟药苷(Benzoylpaeoniflorin)、没食子酰基氧苟药苷 (Gal loyloxypaeoni florin )、没食子酰基苟药苷（Gal loypaeoni florin )、牡丹皮苷 (Mudanpioside)A_F、氧苟药苷（Oxypaeoniflorin)、Paeconoside、苟药苷（Paeoniflorin)、 ?已6011丨81^；1^&1、？&6011丨81^；1^0116、苟药醇（？&6011〇1)、牡丹酸原苷（？&6011〇1丨(16)、五没食子 酰基葡萄糖（Pentagalloyglucose) 1，2，3，4，6和Suffruticoside A-Eo
[0065] 药理学
[0066] 牡丹皮的抗微生物活性
[0067] 根皮的煎剂对以下细菌表现出强的体外抗细菌活性:枯草杆菌、大肠杆菌、伤寒杆 菌、副伤寒杆菌、普通变形杆菌、绿脓假单胞菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球 菌和霍乱弧菌。芍药醇是抗细菌组分之一；它对金黄色葡萄球菌的MIC值为1:2000,对枯草 杆菌和大肠杆菌的MIC值为1:1500。
[0068]牡丹皮的抗炎作用
[0069] 根皮的70%甲醇提取物抑制由卡拉胶引起的大鼠爪部肿胀。发现芍药醇具有抑制 由葡聚糖、乙酸或卡拉胶引起的大鼠爪部肿胀的活性。它还抑制由乙酸或5-HT引起的小鼠 腹内毛细血管通透性的增加和豚鼠皮肤毛细血管通透性的增加。另一方面，不含芍药醇的 水溶性部分以及苷部分还对由卡拉胶引起的大鼠爪部水肿表现出显著的抑制作用。水溶性 部分还有效地预防或治疗大鼠中由辅剂引起的关节炎。甲醇提取物、苷部分和芍药醇抑制 血小板聚集。ADP或胶原引起的人血小板聚集受到芍药醇抑制。血栓素 B2的形成也受到抑 制，但是从C-花生四稀酸(C-arachidonate)形成12-羟基-5,8,10,14-花生四稀酸受到刺 激。此外，芍药醇在大鼠腹膜巨噬细胞中抑制从C-花生四烯酸形成前列腺素类激素，如前列 腺素类，以及血栓素类。因此，根皮的抗炎作用涉及芍药醇对前列腺素类合成的抑制作用。
[0070] 牡丹皮的降血压作用
[0071 ]在口服施用5g/kg的根皮煎剂5天并且再口服施用10g/kg两天之后，患有原发性高 血压或肾性高血压的狗的血压显著降低。患有肾性高血压的狗的血压还在口服lOg/kg无芍 药醇煎剂10天之后降低。口服施用0.5-1.Og/kg芍药醇还对肾性高血压狗和大鼠产生降血 压作用。
[0072]牡丹皮对CNS的作用
[0073]腹膜内或口服施用芍药醇减少小鼠的自发性活动，拮抗由咖啡因引起的过度活 动，并且延长由eye lobar ital引起的睡眠。在更高的剂量下，苟药醇导致小鼠翻正反射消 失。它还拮抗由卡地阿唑、士的宁、尼古丁和电休克引起的惊厥。而且，发现芍药醇具有解热 和镇痛活性。芍药醇降低正常小鼠和具有由伤寒和副伤寒疫苗引起的发烧的小鼠的体温。 口服施用芍药醇在小鼠中对由乙酸引起的扭动(writhing)和由按压引起的尾痛产生镇痛 作用。
[0074]牡丹皮对肥胖的作用
[0075]该草药的水提取物以0.5%浓度作为饮用水给予3至32周龄的（SLN X C3H/He)Fl 肥胖小鼠。该处理导致食物摄取和Lee指数(肥胖指数）的明显降低，特别是在雄性中，而且 导致葡萄糖耐受性的增加。未观察到实验组和对照组之间血清游离脂肪酸水平的显著差 异。两种性别中和在雌性动物发情周期模式中心脏、肝、肺、脾和主要内分泌器官的重量在 组之间几乎没有差异。这些结果表明该草药至少部分地通过食物摄取减少和葡萄糖代谢增 加而对抗肥胖，特别是在雄性中。
[0076]牡丹皮的其他作用
[0077] 芍药醇对小鼠和豚鼠的离体回肠表现出抗胆碱和抗组胺作用。它还在小鼠中预防 应激性溃疡并且抑制大鼠胃分泌和大鼠子宫的原位自发运动。根皮的提取物和芍药醇还具 有抗诱变活性。它们在大肠杆菌WP2s中降低由4-硝基喹啉1-氧化物引起的突变的频率。
[0078] 生地黄
[0079] 地黄（radix rehmanniae)(中国毛地黄根（Chinese foxglove root))
[0080] 化学性质
[00811生地黄含有4-(a-L_吡喃鼠李糖基氧)-3-甲氧苯甲酰基筋骨草醇、Aceutoside、筋 骨草醇(Ajugol)、桃叶珊瑚苷(Aucubin)、菜油留醇(Campesterol)、栗苷(Castanoside)A和 卩、梓醇(03七&]^〇1)、松果菊苷化(：11；[仙(308丨(16)4-阿魏酰基筋骨草醇化-€61'1110713加801)、 异麦角甾苷（Isoacetoside)、焦地黄苷(Jioglutoside)A和B、焦地黄苯乙醇苷(Jionoside) 八&13、益母草苷(1^0]1111^(16)、甘露糖醇、蜜利特苷(161;[1:1:081(16)、对香豆酰基筋骨草醇、对 羟基苯甲酰基筋骨草醇、洋地黄叶苷C(Purpureaside C)、地黄素 A(Rehmaglutins A)、地黄 紫罗兰苷(1^]11]1&；[01108丨(16)4-(]、地黄苷(1^111]1&1111；[08丨(16)4-0、地黄苦苷(1^111]1&。；[(31'08丨(16)、 香草酰基筋骨草醇、Z-阿魏酰基筋骨草醇和β-谷固醇。
[0082] 药理学
[0083]生地黄对肾上腺皮质功能和皮质醇代谢的作用
[0084]该草药能够使由施用地塞米松导致的血浆皮质酮浓度下降停止，并且防止肾上腺 皮质萎缩。接受地塞米松的兔中皮质酮水平在同时施用该草药时的第4周和第6周上升。在 接受地塞米松和该草药的同时处理的兔的垂体腺和肾上腺皮质中未观察到形态变化。口服 施用单次大剂量(3g/kg)的根或者与另外两种草药知母(知母(Rhizoma Anemarrhenae))和 甘草(各〇. 9g/kg)-起拮抗地塞米松对兔的垂体-肾上腺系统的抑制作用，由此提高血浆皮 质酮水平。
[0085]如在昼间地塞米松抑制试验中所测试的，这种混合物还在12个正常受试者中拮抗 地塞米松对早晨皮质醇分泌峰的抑制作用。根的粗提取物(8mg)在与兔的肝切片一同孵育 时，保护皮质醇防止在C4与C5之间的双键和C3的酮处还原以及在C17和C21的羟基和C20的 酮处降解，由此延迟皮质醇在肝中的代谢。当草药与外源性肾上腺皮质激素类同时使用时， 血浆皮质醇仍然可以保持几乎正常的水平。该机制据信是一种影响皮质激素与受体的结合 并且影响肝细胞摄取类固醇皮质激素的竞争性效应，由此减缓皮质醇的分解代谢。
[0086] 生地黄的心血管和利尿作用
[0087]该草药对心脏的作用很大程度上依赖于剂量。0.1或0.5%浓度下没有明显的强心 活性。在1%浓度下，在离体灌注蛙心中观察到强心作用。该作用在虚弱的心脏中更明显。当 浓度增加到2-5 %时，心脏被抑制。它对于血压的作用也是剂量依赖性的。在灌注血管的实 验中，1-3 %的提取物引起血管收缩，而5 %引起血管舒张。
[0088]静脉内注射2.5ml的根提取物在麻醉的狗中产生利尿作用。这种作用可能与强心 和肾血管舒张活性相关。
[0089]生地黄对血糖的作用
[0090] 在该草药对血糖的作用方面在动物实验中的结果不一致。早期研究者报告称根的 醇提取物以2g/kg皮下剂量或者4g/kg 口服剂量在兔中的降血糖作用。得自皮下注射的结果 更加明显:血糖在服药后4小时降低到最低水平。醇提取物皮下施用于兔还抑制由来自党参 (Codonopsis pilosula)的根的碳水化合物引起的延长的高血糖作用。肌内施用20g相同的 提取物还在兔中抑制和预防肾上腺素引起的高血糖。然而，其他研究报告称水或醇提取物 只可以降低正常兔的血糖而在由肾上腺素引起的高血糖中无效。但还有报告称该草药对兔 的正常血糖水平没有影响。煎剂或6g/kg的醇提取物在服药6小时内对兔的正常血糖测量没 有影响。皮下施用20g/kg的相同药剂也未能在大鼠中拮抗由肾上腺素引起的高血糖。更近 地，报告了地黄苷D在自发性糖尿病小鼠中的弱降血糖活性。
[0091] 生地黄的抗炎和免疫抑制作用
[0092] 由甲醛引起的大鼠爪部水肿在以10g/kg的每天剂量口服施用5天煎剂或醇提取物 后消退。然而，另一篇报告声称只有煎剂而非醇提取物具有明显的抗炎活性。l〇〇mg/kg 口服 剂量下，焦地黄苯乙醇苷B和麦角留苷在小鼠脾中产生36%和18%的溶血斑形成细胞的抑 制。在相同试验条件下，30mg/kg腹膜内剂量的环磷酰胺具有52.5 %的抑制。
[0093] 生地黄的止血作用
[0094]在施用来自根的醇提取物的黄色针晶之后，在兔中的凝血时间减少。腹膜内施用 l〇g/kg的煎剂或醇提取物，或者口服施用烧焦的草药缩短了具有尾部伤口的小鼠的出血时 间。
[0095]生地黄对血液流变学的作用
[0096]调查了该草药对炎症动物、血栓形成动物和正常动物的血液流变学的作用。口服 施用200mg/kg该草药的50%醇提取物在慢性炎症模型（辅剂诱导的关节炎）中抑制溶纤活 性红细胞变形性的降低、红细胞计数的降低以及胸动脉结缔组织的减少。然而，它在关节炎 大鼠中对水肿的发生以及对急性和慢性炎症无效。此外，该提取物在血栓形成模型（内毒素 诱导的弥散性血管内凝血(DIC))中抑制红细胞变形性的降低，但不抑制凝血因子的减少。 它还在正常大鼠中表现出对红细胞变形性和溶纤活性的促进作用。这些结果表明口服施用 该提取物可以通过改善血液流变学而预防在多种慢性疾病的外周微循环中引起障碍。
[0097] 生地黄的其他作用
[0098] 还观察到根提取物在动物中的抗辐射、抗真菌和抗肝毒素活性。每天lml腹膜内施 用根的100%注射溶液，施用6天，缓解由600拉德的γ辐照引起的大鼠血小板损伤。根的水 提取物抑制内部真菌须疮藓菌（intra fungi mentagrophyton)、石膏样小孢子菌 (Microsporum gypseum)和奥杜安氏小孢子菌(M.audouini)。根的煎剂在小鼠中显示出对 抗CCI引起的肝中毒的保护作用。口服或腹膜内施用10g/kg的煎剂或醇提取物加强了戊巴 比妥钠的催眠作用。腹膜内施用20g/kg煎剂或醇提取物保护小鼠免受低压缺氧的影响。 [0099]金银花
[0100] 金银花（flos lonicerae，honeysuckle flower)
[0101] 化学性质
[0102] 金银花含有2,6,6_三甲基-2-乙烯基-5-羟基四氢吡喃、苄醇、香芥酚、顺-和反-2-甲基-2-乙烯基-5_(α-羟基异丙基)_四氢呋喃、断马钱子甙半缩醛内酯(Epivogeloside)、 丁香油酚、香叶醇、己-1-烯、己-3-烯-1-醇、异绿原酸b+c(3,4_二咖啡酰基奎宁酸的两个异 构体）、异绿原酸a (3，5-二咖啡酰基奎宁酸）、芳樟醇、马钱苷、忍冬苷、木犀草素、藤黄菌素、 甲基咖啡酸酯、蒎烯、与齐墩果酸的皂苷类、断马钱子苷二甲基缩醛（Secologanin dimethylacetal)、断氧化马钱子苷（Secoxyloganin)、香草酸、喜树次碱(Venoterpin)(欧 龙胆碱(gentialutine))、断马钱子苷半缩醛内酯(Vogeloside)、α-松油醇和β-苯乙基醇。
[0103] 药理学
[0104] 金银花的抗微生物活性
[0105] 花和藤的提取物在体外抑制以下细菌：金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆 菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、伤寒沙门菌、副伤寒沙门菌、肺炎双球菌、脑膜炎奈瑟菌、绿脓假单 胞菌和结核分枝杆菌。它还加强青霉素对耐药性金黄色葡萄球菌的作用。绿原酸和异绿原 酸据信是花的主要抗菌组分。藤黄菌素也显示出抗细菌活性。接受LD剂量的绿脓假单胞菌 或其内毒素的小鼠中超过一半在通过腹膜内施用给予7.5g/kg的花注射溶液后存活。静脉 内施用6g/kg的花馏出物在绿脓假单胞菌内毒素中毒的兔中也可以是治疗有效的。
[0106] 观察到花的水提取物对铁锈色小孢子菌和星形诺卡菌的抗真菌活性。在人胚胎肾 的上皮细胞的单层原代培养物中，花的煎剂抑制流感病毒、艾柯病毒和疱疹病毒。
[0107] 金银花的抗炎作用
[0108] 腹膜内施用0.25g/kg的花抑制由卡拉胶引起的大鼠爪部水肿。通过腹膜内注射6 天内每天两次给予8g/kg，花提取物显示出对由巴豆油引起的肉芽肿的抗渗出和抗增生作 用。腹膜内施用注射溶液提高了小鼠中炎症细胞的吞噬活性。稀释到1:1280浓度的煎剂仍 然能够促进白细胞吞噬作用。
[0109] 金银花的中枢兴奋作用
[0110] 在使用电休克和转笼的实验中，口服施用绿原酸在小鼠和大鼠中产生中枢兴奋； 中枢兴奋效力是咖啡因的1 /6。在它们共同使用时，未观察到成瘾或协同作用。
[0111] 金银花的抗血脂作用
[0112] 口服施用2.5g/kg的花减少胆固醇的肠吸收和血浆胆固醇水平。体外实验显示花 与胆固醇结合。
[0113]金银花的其他作用
[0114]交配后第8天给小鼠腹膜内施用金银花(L.japonica)的花的水-醇提取物，剂量依 赖性地减少了试验动物的怀孕。子宫内和羊膜内施用该提取物分别在狗中杀死胎儿和在猴 中导致流产。在口服施用时，花的提取物在大鼠中对实验性胃溃疡表现出轻度预防性作用。 绿原酸的较大口服剂量增加胃肠蠕动并促进胃和胆汁分泌。绿原酸对离体大鼠子宫具有刺 激作用。
[0115] 地骨皮
[0116] 地骨皮（cortex lycii radicis，wolfberry bark)
[0117] 化学性质
[0118] 地骨皮含有5α-豆甾烷-3,6_二酮、甜菜碱、肉桂酸、地骨皮甲素 (Kukoamine A)、亚 油酸、枸杞酰胺(Lyciumamide)、蜂花酸(Melissic acid)、柳杉HKSugiol)和β-谷固醇。
[0119] 药理学
[0120] 地骨皮的解热作用
[0121] 口服或通过注射施用该草药的水或醇提取物在具有由热原引起的发热的兔中产 生显著的解热作用。甜菜碱也有活性。〇. 75至7.5g/kg范围当量生药的剂量的醇提取物的水 性部分同样表现出强解热作用。来自铅盐的提取物沉淀也显示出与合成的解热镇痛药相当 的解热活性。
[0122] 地骨皮的降血糖作用
[0123] 口服施用该草药的煎剂在兔中使血糖水平降低平均14%;该作用持续7-8小时。在 施用后3至4小时观察到最高的作用。在皮下施用时，它效力也较低。6g/kg皮下剂量的提取 物在1小时后导致兔血糖14 %的平均降低。
[0124] 地骨皮的降血压和抗胆固醇血作用
[0125] 该草药的煎剂、浸剂、酊剂和注射溶液通过静脉内或肌内施用而在麻醉的狗、猫、 兔中以及通过口服施用而在麻醉的大鼠中产生显著的降血压作用。以较低剂量反复静脉内 施用未引起快速耐受。静脉内注射〇.375g/kg的注射溶液导致麻醉的狗的血压骤降和死亡。 在ECG中观察到心动过缓、PR间期延长和压低的T波。地骨皮甲素在以5mg/kg剂量静脉内施 用时导致大鼠的低血压。
[0126] 每天口服施用10g/kg草药提取物3周在兔中使血清胆固醇降低36.9%，而对甘油 三酯作用很小。
[0127] 地骨皮的抗微生物活性
[0128] 在使用纸盘法的敏感性试验中，该草药的煎剂强力抑制伤寒杆菌、甲型副伤寒沙 门菌和弗氏志贺菌，但对金黄色葡萄球菌无活性。它对结核分枝杆菌是弱抑菌性的。在胚胎 肾细胞的原代单层组织培养物中，煎剂在细胞中防止由亚洲流感病毒A JK株导致的病原性 变化。
[0129] 地骨皮对子宫的作用
[0130] 皮的100%注射溶液显示出对正常大鼠子宫和离体小鼠子宫的刺激作用。lml该溶 液的活性与0.054单位的垂体后叶激素的活性相当。
[0131] 仙鹤草
[0132] 仙雀鸟草（herba agrimoniae，hairyvein agrimonia herb)
[0133] 化学性质
[0134] 仙鹤草含有仙鹤草酸(Agrimol )A、B、C、D和E，仙鹤草素(Agrimoniin)，仙鹤草内酯 (八区1'；[1]1〇11〇1丨(16)，鹤草酸(厶81'；[1]1〇印11〇1)，序菜素-7-葡萄糖苷(厶。丨8611；[11-7-8111(308丨(16)，咖 啡酸，縣花酸，没食子酸，藤黄菌素-7-葡萄糖苷，Pendinculagin，蛇含縣质(Potentillin) 和槲皮素(Quercetin)。
[0135] 药理学
[0136] 仙鹤草的杀绦虫作用
[0137] 该草药的冬芽在民间药物中用于驱绦虫，且发现活性成分是鹤草酚。鹤草酚直接 作用于寄生虫。它在寄生虫中抑制糖原分解、有氧和无氧代谢。
[0138] 该草药和鹤草酚还对其他一些寄生虫致命，如阴道毛滴虫、血吸虫和蛔虫。
[0139] 仙鹤草的抗细菌活性
[0140] 从该草药里分离的六种化合物，藤黄菌素-7-葡萄糖苷、芹菜素-7-葡萄糖苷、槲皮 素、縣花酸、咖啡酸和没食子酸都对杆菌性痢疾(bacillary dysentery)具有活性。组合使 用藤黄菌素-7-葡萄糖苷与鞣花酸、芹菜素-7葡萄糖苷和芹菜素-7葡萄糖苷比相应的单个 化合物更有效。
[0141] 仙鹤草的抗肿瘤作用
[0142] 仙鹤草素在治疗前或治疗后施用时具有抗肿瘤活性。10-30mg/kg单次剂量在肿瘤 接种之前或之后静脉内或口服施用时，延长携带MM2肿瘤的小鼠的寿命或者产生治愈。仙鹤 草素也在小鼠中抑制MH-134和Meth-A实体肿瘤的生长。它在体外对MM2细胞具有强细胞毒 性，但通过将胎牛血清加入到培养物中，该活性几乎完全消除。腹膜内施用仙鹤草素增加外 周白血细胞数量以及单核细胞的比例。仙鹤草素的抗肿瘤活性看起来是因为其对免疫应答 的增强。
[0143] 仙鹤草的心血管作用
[0144] 静脉内施用该草药的醇提取物在麻醉的兔和狗中升高血压并刺激呼吸，但是水提 取物的醇溶部分在兔中降低血压。输注到兔耳和蛙后肢的血管中，它在低浓度下引起血管 收缩而在高浓度下引起血管舒张。该提取物和仙鹤草素增加蛙和蟾蜍的心率与心肌收缩 性。另一方面，水提取物的醇溶部分抑制离体蛙心。
[0145] 椿根皮
[0146] 棒根皮（cortex ailanthi，tree-〇f_heaven bark)
[0147] 化学性质
[0148] 椿根皮含有1 -0-，2 ' -二羟基乙基)-4-甲氧基-β-咔啉(cabo 1 ine)、1 -(2 ' -羟基乙 基)-4-甲氧基-β-咔啉、1-(2-羟基-1-甲氧基)-乙基-4-甲氧基-β-咔啉、13(21)-脱氢-乐园 树酮、13(21)-脱氢glaucarubolone、1-乙酰基-4-甲氧基-β-味啉、1-氨基甲酰基-β-味啉、 1 _甲酯基_β_味啉、1_羟基铁屎米_6_酮（l-hydroxycanthin-6-one)、1-甲氧基铁屎米-6-酮、1-甲氧基-铁屎米-6-酮-3-氧化物、5-羟甲基铁屎米-6-酮、6-甲氧基-β-咔啉-1 -羧酸甲 酯、臭椿酮(Ailanthone)、臭椿醇(Ailantinol)A和Β、臭椿苦内酯(Amarolide)、臭椿苦内酯 11-乙酸酯、铁屎米-6-酮、铁屎米-6-酮-3-氧化物、楂杷壬酮（Chaparrinone)、 Chaparrolide、乐园树酮(glaucarubinone)、苦木苦味素(Quassinoid)、Δ 13(18)-脱氢-乐 园树酮、^13(18)-脱氢81&11031'1113〇1〇116、臭椿双内酯（311；[11」_11(1；[13(31：0116)、臭椿内酯 (311；[11加1&(31:0116)4-1^和0-味啉-1-丙酸。
[0149] 药理学
[0150] 乐园树酮和臭椿酮对寄生虫溶组织内阿米巴显示出体外杀阿米巴活性。一些苦木 苦味素明显抑制耐氯喹的恶性疱原虫的生长。乐园树酮在〇.〇〇〇6μg/ml下产生完全抑制。臭 椿酮也显示出有效的抗溃疡活性。
[0151] 图15说明了各自在1:40、1:20和1:10的三种浓度下三种草药组合对活细胞的作 用。C1包括生地黄，C2包括金银花、大黄、牡丹皮和地骨皮，且C3包括仙鹤草和椿根皮。图15 说明了这三个实例组合各自提供活细胞数的降低，特别是在较高浓度下，而C1和C2看起来 比C3更有效。C1和C2各自包括三种草药地黄、金银花和大黄中的一种或两种，而C3不包括。 此外，C2中的四种草药的组合看起来比C1中的单种草药更有效。
[0152] 图16-18说明了作为对照的百分比的十八种草药中每一种的生长相对于稀释因子 的图。图16-18说明了三种草药生地黄、大黄和金银花最有效，而四种草药牡丹皮、地骨皮、 仙鹤草和椿根皮有效，以及十一种草药紫草、玄参、石膏、白芍、赤芍、红花、大青叶、青黛、白 术、石韦和肉桂不太有效。
[0153] 图19说明了各自在1:40和1:80的两种浓度下五种草药组合对活细胞的作用。Cal 包括全部十八种草药的组合，C2包括金银花、大黄、牡丹皮和地骨皮的组合，C3包括大黄、生 地黄和金银花的组合，C4与C5包括十八种草药中的其他十一种草药（紫草、玄参、石膏、白 芍、赤苟、红花、大青叶、青黛、白术、石韦和肉桂)的组合，即不与七种草药(生地黄、大黄、金 银花、牡丹皮、地骨皮、仙鹤草和椿根皮）中的任一种组合。具体地，C4包括石膏、石韦、白术、 肉桂和红花，而C5包括紫草、玄参、赤芍、白芍、大青叶和青黛。图19说明了全部十八种草药 的组合以及三种草药(生地黄、大黄和金银花）的组合最有效，而C2组合效罚较低，以及C4与 C5组合效力更低。
[0154] 草药成分
[0155] 芦荟大黄素
[0156] 芦荟大黄素具有约270.24g/mol的分子量。关于其抗癌活性，芦荟大黄素在舌SCC、 宫颈癌细胞中表现出细胞毒性;并且在肝癌细胞中表现出经由MAPK-JNK级联的凋亡性。芦 荟大黄素还倾向于诱导P53和细胞凋亡。此外，芦荟大黄素的细胞毒性在黑素瘤和胃癌中诱 导作用。关于其抗炎活性，芦荟大黄素在包膜病毒_HSV、PSV、VSV和INF中表现出抗TNF和抗 病毒性。芦荟大黄素还在炎症中降低C0X2和IN0S表达，并且在JEV和EV71中增加 IFN。芦荟大 黄素还可以因其作为轻泻药的性质而服用。使用芦荟大黄素可以引起恶心和导致腹痛的肠 收缩。长期使用蒽醌可以导致肾和肝损伤。芦荟大黄素的半衰期为约78分钟。
[0157] 大黄酚
[0158] 大黄酚具有约254.24g/mol的分子量。关于其抗癌活性，大黄酚在肝癌细胞中表现 出坏死，包括ATP变化和R0S级联。大黄根酸在结肠癌细胞中抑制EGFR。关于其抗炎活性，大 黄酚可以充当抗菌剂、杀细菌剂、杀念珠菌剂和/或泻剂。此外，大黄酚可以用作抗金黄色葡 萄球菌剂和抗枯草芽孢杆菌剂。大黄酚可以在LPS刺激的巨噬细胞中用于抑制NF-kB和胱天 蛋白酶-1的激活。大黄酚还是抗脊髓灰质炎病毒化合物。大黄酚可以用作止血剂和杀虫剂， 并且可以用于治疗月经过多，包括流产后出血、鼻出血、功能性子宫出血和血小板减少。大 黄酚用作泻剂，并且可以用于在肝中经由P450转化为芦荟大黄素。大黄素和大黄酚可以作 为抗癌治疗剂而组合摄入。大黄酚具有约2.75小时的半衰期。
[0159] 大黄素
[0160] 大黄素（emodin)，也称为大黄(Rheum emodi)，具有约270.24g/mol的分子量。关于 其抗癌活性，大黄素经由P53和P21而在前列腺癌细胞中表现出促凋亡性。大黄素增加 R0S并 在耐药性前列腺细胞中改善化疗效果。大黄素在多发性骨髓有中通过抑制IL6表现出促凋 亡性。大黄素通过整合素作用（integrins effect)而表现出抗转移性。大黄素减少乳腺癌 中的HER2并且改善化疗效果。大黄素在舌癌中引起细胞毒性并且抑制NFkB和其他促炎细胞 因子。关于其抗炎活性，大黄素可以通过破坏幽门螺旋杆菌和改变胃液而用作抗溃疡剂。大 黄素引起对血管中的动脉粥样硬化斑块的稳定作用，并且改善2型糖尿病中的胰岛素和葡 萄糖变化。大黄素促进抗疟疾的抗疟原虫作用，并且可以用作免疫抑制剂、杀虫剂、泻剂、解 痉剂、止血剂、血管舒张剂和/或杀病毒剂。大黄素具有约227分钟的半衰期，并且在肝中经 由P450转化成两种活性代谢物。
[0161] 大黄酸
[0162] 大黄酸(Rhein)，也称为山扁豆酸（cassic acid)，具有约284.22g/mol的分子量。 关于其抗癌活性，大黄酸在肝癌、乳腺癌、肺SCC和宫颈癌中用作抗增殖剂。大黄酸改善紫杉 醇在乳腺癌中的效果，并且抑制鼻咽癌和EGFR。大黄酸用作丝裂霉素增效剂。大黄酸在舌癌 中表现出细胞毒性。大黄酸可以用于抗血管生成。关于其抗炎活性，大黄酸表现出抗纤维变 性，并且通过抑制TGFbl而促进抗肝细胞增殖。大黄酸可以用作抗氧化剂。大黄酸降低IL1B 和IL18促炎性细胞因子。大黄酸还是抗细菌剂，并且可以用于对抗金黄色葡萄球菌。大黄酸 还提高对ADH(药物）的敏感性。大黄酸具有约205分钟(大约）的半衰期。大黄酸是疏水性的， 并且可以与细胞溶解酶结合以成为亲水性的，作为赖氨大黄酸。
[0163] 大黄酚苷
[0164] 大黄酚苷在癌细胞系中表现出明显的体外细胞毒性活性。
[0165] 土大黄苷
[0166] 土大黄苷具有约420.41g/mol的分子量。关于其抗癌活性，土大黄苷在胃癌中诱导 细胞凋亡并且抑制KATO III细胞生长。土大黄苷还对LDL和红细胞提供抗氧化性损伤的保 护作用。土大黄苷具有约23.5分钟的半衰期。
[0167] 二苯乙烯白藜芦醇苷
[0168] 二苯乙烯白藜芦醇苷具有约390.2g/mol的分子量。关于其抗癌活性，二苯乙烯白 藜芦醇苷在LLC细胞中抑制DNA合成。二苯乙烯白藜芦醇苷还对脂氧合酶具有抑制作用。二 苯乙烯白藜芦醇苷还表现出抗氧化剂活性并且抑制α-葡糖苷酶。二苯乙烯白藜芦醇苷还在 肝微粒体中抑制由ADP和NADPH引起的脂质过氧化。二苯乙烯白藜芦醇苷直接作用于平滑肌 以促进肺动脉舒张。
[0169] 单宁
[0170] 单宁具有约500-3000g/mol的分子量。关于其抗癌活性，单宁抑制MCF-7乳腺癌细 胞生长。老鹳草素 (Geraniin)(分离自天竺葵的单宁的形式）通过诱导凋亡而引起细胞死 亡。单宁对体外生长的宫颈癌和结肠癌细胞表现出不同的抗增殖作用。石榴中的单宁调节 结肠癌细胞中的炎性细胞信号传导。单宁通过在非小细胞肺癌细胞诱导P53而促进凋亡。关 于其抗炎活性，西红柿中的单宁抑制C0X-2表达。单宁可以用作体外抗氧化剂和/或抗血小 板剂，并且还可以因其自由基清除作用而用作抗炎剂。单宁可以因其抗病毒、抗细菌和/或 抗寄生虫作用而使用。单宁可以用于治疗HFE遗传性血色素沉积症。单宁能够逆转由6-羟基 多巴胺诱导的毒性。单宁具有牙科用途，而且作为单宁-氟化物制剂减少基牙周围的齿龈炎 症。大量摄入单宁可以导致肠刺激、肾刺激、肝损伤、胃刺激和/或胃肠疼痛。已经在人食管 癌或鼻癌与某些具有高单宁浓度的草药的日常消耗建立了相关性。单宁抑制矿物质如铁的 吸收，如果长期持续，这可以导致贫血。单宁存在于土壤、植物、水、茶、果酒和水果中。单宁 具有约3.15小时的半衰期。
[0171] 香芥酚
[0172] 香芥酸(Carvacrol)，也称为香旱序HKcymophenol)，具有约150.217g/mol的分子 量。关于其抗癌活性，香芥酚促进对包括MDA-MB231的人转移性乳腺癌细胞的抗肿瘤作用。 香芥酚是人非小细胞肺癌细胞生长的有效抑制剂。香芥酚还抑制成肌细胞生长，甚至在突 变的N-ras致癌基因激活之后。关于其抗炎活性，香芥酚激活PPAR并抑制C0X-2炎症。香芥酚 可以因其抗增殖和抗血小板性质而使用。香芥酸存在于牛至(Origanum vulgare)的精油、 百里香油、从田字草(pepperwort)获得的油和野生佛手柑(bergamot)中。香芥酸抑制几种 细菌菌株的生长，例如大肠杆菌和錯样芽胞杆菌(Bacillus cereus)，并且在绿脓假单胞菌 中，香芥酚破坏细菌膜。香芥酚可以因其抗氧化剂活性而使用。香芥酚具有约1.29小时的半 衰期。
[0173] 丁香油酚
[0174] 丁香油酚具有约164.2g/mol的分子量。丁香油酚在人结肠癌细胞中诱导凋亡，并 且抑制由MNNG引起的胃癌变的侵袭和血管生成。蜂蜜中的丁香油酚显著抑制艾氏腹水癌的 生长。丁香油酚相关的联苯(S)-6,6'_二溴-脱氢双丁香油酚对部分地触发凋亡的神经外胚 层肿瘤细胞引起特定的抗增殖活性。丁香油酚通过抑制E2F1转录活性而引起黑素瘤生长抑 制。丁香油酚还可以用作抗菌剂。丁香油酚还抑制由包括胶原、ADP和钙离子载体的激动剂 引起的血小板聚集。丁香油酚可以提取自某些精油，特别是来自丁香油、肉豆蔻、肉桂、罗勒 和月桂叶。丁香油酚还作为局部抗菌剂和麻醉剂用于香水、香料、精油和药物中。丁香油酚 可以因其抗氧化性而使用。丁香油酚表现出肝毒性。过量的丁香油酚可以引起惊厥、腹泻、 恶心、昏迷、头晕和/或快速心跳。丁香油酚可以引起过敏。丁香油酚可以通过由其代谢物造 成的氧化性DNA损伤而显示出致癌性。丁香油酚具有1.975小时的半衰期，并且在某些条件 下，可以具有至多4小时或甚至18小时的半衰期。
[0175] 香叶醇
[0176] 香叶醇具有约154.25g/mol的分子量。关于其抗癌活性，香叶醇在人胰腺腺癌细胞 中促进抗增殖机制。香叶醇还在人乳腺癌细胞中促进抗增殖和细胞周期调控作用。香叶醇 可以在结肠癌细胞中引起胸苷酸合成酶与胸苷激酶表达的2倍减少。香叶醇，作为植物精油 的组分，使人结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶处理敏感。香叶醇抑制胰腺肿瘤生长而不明显影响 血胆固醇水平。关于其抗炎活性，香叶醇降低了由帕米膦酸体外和体内刺激引起的炎症标 志物的水平。香叶醇还在巨噬细胞中促进对一氧化氮和前列腺素 E2产生的抑制作用。香叶 醇是玫瑰油、玫瑰草油和香茅油的组分，并且小量的香叶醇存在于天竺葵和柠檬中，具有玫 瑰样的气味并且常用于香水中。香叶醇可以用作有效的植物基驱蚊剂。香叶醇发现于香烟 中。关于生物学用途，与香叶醇组合的离子交换离子电渗是高效的经皮递送系统。香叶醇在 与阴道清洗组合时，抑制阴道中的念珠菌细胞生长及其局部炎症。香叶醇还引起过敏。香叶 醇具有约〇. 713小时的半衰期。
[0177] 藤黄菌素
[0178] 藤黄菌素具有286.24g/mol的分子量。关于其抗癌活性，藤黄菌素，特别是与标准 抗癌药如顺铂组合，充当HDAC抑制剂，例如用于治疗肺癌。藤黄菌素促进协同/加性生长抑 制作用，并且可以在头颈癌和肺癌的化学预防治疗中有效。藤黄菌素在人鼻咽癌细胞中引 起G1停止。藤黄菌素在Caco-2细胞中不仅保护DNA免受氧化性损伤，而且增加修复活性。低 浓度的藤黄菌素对癌细胞具有很小的毒性作用，但这样的低浓度可以在各种癌细胞系中使 化疗药敏化。藤黄菌素在肿瘤细胞中选择性地抑制胰凝乳蛋白酶样和胰蛋白酶样蛋白酶体 催化活性。藤黄菌素通过E-钙粘蛋白抑制前列腺癌PC3细胞的侵袭。
[0179] 藤黄菌素是TOE4抑制剂及一般磷酸二酯酶抑制剂和白细胞介素6抑制剂。藤黄菌 素在内皮中抑制炎症反应并改善胰岛素敏感性。藤黄菌素通过抑制NF-κ B信号传导通路而 在心肌细胞中阻止LPS诱导的TNF-α表达。藤黄菌素抑制髓鞘碱性蛋白诱导的人肥大细胞激 活和Jurkat T细胞的肥大细胞依赖性刺激。藤黄菌素抑制环氧合酶-2表达并且清除反应性 氧物质。
[0180]藤黄菌素发现于叶中，但它也见于芹菜、百里香、蒲公英、果皮(rind)、外皮、三叶 草花和豚草花粉中。藤黄菌素可用于预防和治疗皮肤光老化。藤黄菌素抑制小胶质细胞并 且改变海马依赖性的空间工作记忆。藤黄菌素通过激活脂肪细胞中的PPARy转录活性而增 强胰岛素敏感性。藤黄菌素可以引起恶心、呕吐和胃分泌过多。藤黄菌素具有约1.2小时的 半衰期。
[0181] 皂苷类
[0182] 关于阜苷类与齐墩果酸的抗癌活性，牛膝阜苷Η甲酯(achyranthoside H methyl ester)，一种来自弗氏牛膝(Achyranthes fauriei)根的新型齐墩果酸阜苷衍生物，通过胱 天蛋白酶激活途径在人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-453细胞中诱导凋亡。与齐墩果酸的皂苷表 现出针对墨西哥豆瓢虫幼虫(Epilachna varivestis)的杀虫活性。
[0183] 香草酸
[0184] 香草酸具有168.14672g/m〇l的分子量。香草酸通过PI3K抑制而抑制人癌细胞的转 移潜能，并且减少体内血管生成。香草酸增强人淋巴细胞增殖活性和IFN- γ分泌。香草酸对 DSS诱导的溃疡性结肠炎具有有益的作用，由此显示其在调控慢性肠炎方面的有用性。蘑菇 香燕(1^111:;[11111& edodes，shiitake)中的酸类化合物通过其对免疫介导的肝炎症的抑制而 具有保肝性。香草酸发现于当归(Angelica sinensis)的根以及橄榄油中。香草酸促进降低 的细胞酪氨酸酶活性、D0PA氧化酶和黑色素含量，以及下调的黑皮质素-1受体(MC1R)、小眼 畸形相关转录因子(MITF)、酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白2(TRP2)和TRP-1表达。香草酸通 过阻断丙酮醛介导的细胞内糖化系统而有助于防止糖尿病神经病变的发生。存在香草醛的 氧化形式。香草酸具有约10.552小时的半衰期。
[0185] α-松油醇
[0186] α-松油醇或alpha-松油醇的抗癌活性部分地通过NF-κΒ激活的抑制而介导。α-松 油醇对红白血病Κ562细胞表现出抗增殖作用。α-松油醇抑制IL-6受体的基因表达。α-松油 醇抑制由fMLP、LPS和PMA刺激的超氧化物产生。α-松油醇发现于白千层油（cajuput oil)、 松油和苦橙叶油(petitgrain oil)中，并且是香水、化妆品及香料和茶中的常用成分。α-松 油醇对15种不同属的口腔细菌显现出不同程度的生长抑制。松油中的α-松油醇可以引起体 位性低血压，并且可以引起眼刺激。有三种异构体：α-、β-和γ -松油醇。α-松油醇具有约 1.245小时的半衰期。
[0187] 桃叶珊瑚苷
[0188] 桃叶珊瑚苷具有346.32978g/mol的分子量。
[0189] 1.抗增殖活性在人非小细胞肺癌A549细胞中是通过细胞周期停滞和细胞凋亡
[0190] 2.研究一一苷作为桃叶珊瑚苷经由其显示出抗肿瘤活性的可能机制之一的拓扑 异构酶I中毒所引起的DNA损伤
[0191 ] 3.研究--对MCF7-乳腺腺癌、HeLa-宫颈腺癌、上皮源的A431-皮肤癌的细胞毒性 活性
[0192] 4.可以通过调控Bcl-2和Bax的表达以及抑制胱天蛋白酶级联激活而阻断H(2)0 (2)诱导的凋亡。
[0193] 桃叶珊瑚苷增强人淋巴细胞增殖活性和IFN- γ分泌。桃叶珊瑚苷发现于东瀛珊瑚 (Aucuba japonica)(山茱萸科（Cornaceae))、杜仲（Eucommia ulmo ides)(杜仲科 (Eucommiaceae))和车前草（Plantago asiatic)(车前草科(Plantaginaceae))的叶中。桃 叶珊瑚苷对抗由四氯化碳或鹅膏蕈碱引起的肝损伤，特别是在腹膜内施用时。桃叶珊瑚 苷在原发性糖尿病脑病中提供神经保护作用。桃叶珊瑚苷治疗可以降低血糖。桃叶珊瑚苷 可以在肝和肾中产生脂质过氧化水平的升高和抗氧化酶活性的降低。桃叶珊瑚苷具有约 42.5分钟的半衰期。
[0194] 地高辛
[0195] 地高辛，也称为洋地黄(digitalis)，具有780.938g/mol的分子量。地高辛治疗可 以抑制HIF-la合成并阻滞肿瘤生长。地高辛在人急性T细胞成淋巴细胞性白血病细胞系中 诱导凋亡。地高辛可以用作特异性成神经细胞瘤生长抑制剂和非特异性血管生成抑制剂。
[0196] 地高辛广泛用于治疗通常不可以通过其他药物治疗控制的各种心脏病，即心房纤 颤、心房扑动以及有时心力衰竭。地高辛提高心肌收缩性，使得心率降低，同时血压随每搏 输出量增加而升高，导致组织灌注增加。地高辛因为血流动力学改善而提高心肌效率，并且 改善心室功能曲线。地高辛通过肾血流量增加和GFR增加而影响肾。通常仅在心力衰竭中看 到轻度利尿作用。地高辛可以引起房室交接区心律和异位搏动(二联律），导致室性心动过 速和纤颤。
[0197] 地高辛可以引起食欲不振、恶心、呕吐和腹泻，因为胃肠活动增加。地高辛的其他 常见作用是视力模糊、视觉障碍(黄-绿色晕轮和颜色感知问题）、意识错乱、困倦、头晕、失 眠、梦魇、激动不安和抑郁，以及更强烈的感性活动的敏锐感觉。地高辛的较不频繁的不良 反应(0.1 % -1 % )包括:急性精神病、谵妄、健忘、惊厥、缩短的QRS波群、房性或室性期外收 缩、具有房室阻滞的阵发性房性心动过速、室性心动过速或纤颤，和心传导阻滞。危险的相 互作用可以在地高辛与维拉帕米(verapamil )、胺碘酮(amiodarone)、红霉素和肾上腺素之 间发生。Pgp的化疗剂底物的效力可以在服用地高辛的患者中强烈地降低。地高辛治疗在绝 经后妇女中增加侵袭性乳腺癌的风险。地高辛具有约36小时的半衰期。
[0198]异麦角甾苷
[0199]异麦角甾苷作为来自黄钟花(Tecoma stans)的提取物表现出对人肝癌细胞(Hep-G2)的细胞毒性作用。异麦角甾苷具有约3.7-6.4小时的半衰期。
[0200] β-谷固醇
[0201] 谷固醇或beta-谷固醇具有约414.71g/mol的分子量。β-谷固醇可以用于治疗前 列腺癌和乳腺癌。谷固醇可以凭借其体外自由基清除能力而具有化学预防潜能，对正常 细胞具有最小的细胞毒性。谷固醇还减少连环蛋白和PCNA表达，使其成为用于结肠癌 变的潜在抗癌药。谷固醇在体外显著抑制SGC-7901人胃癌细胞生长，并且诱导其凋亡。 bcl-2/bax比率下降以及DNA损伤可以在SGC-7901人胃癌细胞中产生由β-谷固醇诱导的凋 亡。谷固醇通过影响神经酰胺代谢而增强他莫昔芬对乳腺癌细胞的效力。谷固醇在 MCA-102细胞中具有通过激活ERK和阻断PI3K/Akt信号传导通路而介导的促凋亡作用。因 此，β-谷固醇具有很强的作为用于预防癌症如纤维肉瘤的治疗剂的潜力。β-谷固醇是有效 的凋亡促进剂，且饮食中加入更多的植物固醇可以对乳腺癌起到预防措施作用。β-谷固醇 的抗微管特性可以有助于宫颈癌中SiHa细胞的增殖抑制。β-谷固醇在LNCaP人前列腺癌细 胞中激活鞘磷脂循环并引起细胞凋亡。谷固醇促进可以通过抑制细胞反应和后续的Th2 细胞因子释放/合成介导的平喘作用。谷固醇可以具有过敏性哮喘的治疗潜力。
[0202] β-谷固醇发现于黑种草（Nigella sativa)、美洲山核桃（pecans)、锯棕榈 (Serenoa repens、saw palmetto)、鳄梨（avocados)、Curcurbita pepo(南瓜子）、非洲刺李 (Pygeum africanum)、腰果（cashew fruit)、米糠、麦胚、玉米油、大豆、沙棘（sea-buckthorn)、枸杞（wolfberries)和青定木（Wrightia tinctoria)中。
[0203] β-谷固醇降低胆固醇的血水平，且有时候用于治疗高胆固醇血症。β-谷固醇可以 与锯棕榈组合对雄性脱发产生积极作用。谷固醇可以在草药治疗中起到主要作用，特别 是在治疗良性前列腺增生中。谷固醇是可以用于治疗动脉粥样硬化、糖尿病、癌症和炎症 的天然存在的植物固醇并且还是抗氧化剂。谷固醇具有约0.966小时的半衰期。
[0204] 通过服用超过推荐剂量的β-谷固醇，人们可以遭受肠胃不适、恶心、腹泻、胀气 (gas)或便秘、阳痿（也称为勃起功能障碍或ED)、性欲减少。β-谷固醇应在妊娠和母乳喂养 期间避免，因为没有证明它对未出生和新生儿童的潜在作用为良性。谷固醇也不推荐用 于患有谷固醇血症(一种罕见的遗传脂肪储存疾病）的个体，因为具有这种状况的人在他们 的系统中具有太多的谷固醇和相关脂肪，从而服用谷固醇只会恶化这种状况。血液中 的高水平谷固醇浓度已经与此前患有心脏病发作的男性中心脏病严重度的增加相关联， 并且可以引起变态反应。
[0205] 已经指出了某些分子的半衰期。分子的半衰期可以由于这些因素而不同，例如，一 般基于草药生长和/或制备条件、其在治疗中如何与其他草药分子组合、或者基于患者特性 和行为如吃和喝及身体活动、或者基于效力或其他因素。剂量和剂量周期可以部分地基于 半衰期而确定。然而，通常剂量和剂量周期将基于患者特性、患者状况和患者病史，以及主 治医师的专门知识和经验而确定。
[0206]治疗方法可包括含有约5ug/ml或10ug/ml或更多的大黄素以及分别0.05ug/ml或 0.10ug/ml或更多的地高辛的定期剂量。治疗中可以使用其他组合，包括将5ug/ml或更多的 大黄素与至少约〇. l〇ug/ml地高辛组合，或者将至少约10ug/ml大黄素与至少约0.10ug/ml 地高辛组合，或者将多于5ug/ml大黄素与至少约0.05ug/ml地高辛组合，或者将至少约 10ug/ml大黄素与至少约0.05ug/ml地高辛组合。取决于如体重、年龄、性别、家庭或患者病 史的变化的因素，或者特定于患者的其他特性，可以使用和由医师指定其他组合。
[0207] 治疗方案可以包括每天一次或两次给药，或者每周两次或更多次给药，或者其他 方式。可以进行每天多于一次或两次给药，同时每次给药的量根据治疗的周期性而确定。
[0208] 还提供了制备白血病或其他癌症的治疗药物的方法，包括制备包含大黄素与地高 辛的组合的鸡尾酒式药物。
[0209] 还提供了白血病或其他癌症的治疗药物，包括包含大黄素与地高辛的组合的鸡尾 酒式药物。
[0210] 本发明涉及强心苷类如地高辛和哇巴因单独或与大黄素及其类似物组合用于治 疗癌症，更具体地用于治疗血液癌症的新型治疗应用。预料不到的是，本发明首次公开了地 高辛与大黄素协同以刺激癌细胞死亡。
[0211]图1说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对NB4白血病细胞的作用。结果代表三 次平行试验的平均值±STDEV。使用死细胞PI染色计算活细胞和死细胞的百分比，并通过 FACS测定活细胞数。
[0212]图2说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对HL-60白血病细胞的作用。结果代表 三次平行试验的平均值土 STDEV。使用死细胞PI染色计算活细胞和死细胞的百分比，并通过 FACS测定活细胞数。
[0213]图3说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对Jurkat T细胞白血病细胞的作用。结 果代表三次平行试验的平均值±STDEV。使用死细胞PI染色计算活细胞和死细胞的百分比， 并通过FACS测定活细胞数。
[0214]图4说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对HT29结肠癌细胞的作用。结果代表三 次平行试验的平均值±STDEV。使用死细胞PI染色计算活细胞和死细胞的百分比，并通过 FACS测定活细胞数。
[0215]图5说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对PC3前列腺肿瘤细胞的作用。结果代 表三次平行试验的平均值±STDEV。使用死细胞PI染色计算活细胞和死细胞的百分比，并通 过FACS测定活细胞数。
[0216]图6说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对乳腺癌的MDA 435细胞系的作用。在 该体外实验中，存在对浓度的依赖性。
[0217]图7说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对黑素瘤和乳腺癌的MDA 435细胞系的 作用。在该情况下，1/100的浓度没有作用（与对照相同），1/3具有良好作用，和1/10杀死全 部细胞。正常细胞受到的影响比病理细胞的比率低50-90%。本文描述的处理可以准备用于 黑素瘤、BCC(基底细胞癌)和炎性皮肤疾病如银肩病治疗的局部应用。例如，如本文描述的 草药和/或草药提取物的组合可以作为乳霜制备以施用于皮肤上。本文描述的草药或草药 提取物组合也可以使用注射器注射到患者皮肤的患病区域。下文提供了根据某些实施方式 的用于制备外用乳霜的实例方法。
[0218]制备外用乳霜/软膏剂
[0219]首先，烹煮(cook)两种或更多种草药，例如，如本文其他地方描述的或者如本领域 技术人员可以理解或确定的。然后制备大约一半草药一半乳霜的乳霜，例如，可以使用1:1 比率的30%草药液与70%乳霜。草药也可以制备为酊剂，例如，将草药例如以1:3的比率浸 泡在醇中一段时间，例如2周。然后该草药液可以以与上文所描述的相同的方式与乳霜混 合。
[0220]本文描述的治疗还可以有效对抗免疫缺陷疾病，如HIV和AIDS，以及其他影响免疫 系统的病症。
[0221]图8说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对乙酰肝素酶活性的作用。乙酰肝素酶 是一种涉及血管生成(包括从预先存在的血管生长新血管的生理过程)的酶。这个图片描述 了地高辛与大黄素的组合的增加延迟了这种酶的活性的事实。
[0222] 图9说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对HMVEC的作用，HMVEC也是一种涉及血 管生成的酶。
[0223] 图10和11说明了地高辛、大黄素及其组合的增加对AML(急性Milo白血病）的NB-4 细胞系的作用。图10图表中左边两个条是对照（以及DMSOhO.lug/ml的单独地高辛（由第3 个条说明）显示出强的效果。单独的大黄素只在大浓度下（约l〇ug/ml或更多）有效果。图10 右边的三个条是地高辛与大黄素的组合的效果。服用〇.lug/ml地高辛和lOug/ml大黄素具 有比两种单独作用中任一更好的极强效果。事实上，该效果超过两倍:单独使用大黄素时测 得892个活细胞，单独使用地高辛时测得892个活细胞，而组合使用地高辛与大黄素二者时 测得371个活细胞。地高辛与大黄素组合的这种令人惊讶的效果证明了本发明的有利特征。
[0224] 图12-13显示了对于HL-60,其是早幼粒细胞白血病(Promyolitic Leukemia)，以 及对于Jurkat，其是急性T细胞白血病，观察到相同的令人惊讶的有利协同效应。
[0225] 图14也显示了使用地高辛与大黄素的组合对HT-29细胞系的协同优势。
[0226] 在某些实施方式中，大黄素和/或地高辛可以与本文描述的其他分子中的一种或 多种组合。在某些实施方式中，大黄素、大黄酸、土大黄苷、香芥酚、香草酸、谷固醇、桃叶珊 瑚苷、地高辛和谷固醇中的任意两种或更多种可以组合以形成疾病如癌症、炎性疾病或 自身免疫缺陷的有效治疗。本文描述的或其他的一种或多种进一步分子同样可以与这些分 子中的任意一种或多种组合。
[0227] 实施例
[0228] 本发明的实施方式涉及用于癌症治疗的有利药物和治疗方法及药物的制备和治 疗，其中使用以下物质的组合抑制肿瘤细胞生长和/或降低白细胞计数:某些草药如大黄 和/或生地黄，和/或金银花，和/或牡丹皮、地骨皮、仙鹤草和/或椿根皮，和/或包括以下草 药的另外i 种草药中的任意一种或多种的组合：紫草，或软紫草（radix arnebiae， arnebia root)或紫草（radix lithospermi，gromwell root);玄参，或玄参（radix scrophulariae,f igwort root);石霄，或石霄（gypsum fibrosum，gypsum);白苟，或白苟 (radix paeoniae alba,white peony root);赤苟，或赤苟（radix paeoniae rubra,red peony root);红花，或红花（flos carthami，safflower);大青叶，或大青叶（fol ium isatidis，woad leaf);青黛，或青黛（indigo naturalis，indigo naturalis);白术，或白 术（rhizoma atractylodis macrocephalae，largehead atractylodes rhizome);石韦，或 石韦（folium pyrros iae , shearer ' s pyrrosia leaf);和/或肉桂，或肉桂（cortex cinnamomi，cinnamomum bark);和/或某些草药成分如地高辛"D"和大黄素"E"，和/或上文 描述的一种或多种其他物质(包括大黄的大黄素、大黄酸和/或土大黄苷，金银花的香芥酚、 香草酸和/或谷固醇，和/或生地黄的桃叶珊瑚苷、地高辛和/或β-谷固醇，和/或存在于这两 种、这三种、这七种和/或甚至这十八种草药中的其他成分）的组合。
[0229]在一个实施方式中，13.3克至60克生地黄和3.3克至30克大黄的剂量在饭前每天 一次或者每天2-3次或者多达每天10次或者少于每天一次，甚至少至每月三次施用。在其他 实施方式中，必须进一步描述的方案包括3.3克至30克金银花。在其他实施方式中，这三种 中的两种包括在方案中。在进一步的实施方式中，草药牡丹皮、仙鹤草、椿根皮和地骨皮中 的一种、两种、三种或全部四种与三种草药生地黄、大黄和金银花中的一种、两种或全部组 合，包括3.3克至15克的这七种草药中的任何其他四种，例如，3.3克至15克的牡丹皮，3.3-10克至15克的仙鹤草，3.3-10克至15克的椿根皮，和/或3.3-5克至15克的地骨皮。
[0230]在涉及三种草药的组合的一个实施例中，100克水中的40克生地黄、60克水中的15 克大黄和60克水中的15克金银花可以组合成单次治疗剂量并且施用于患者。该组合可以烹 煮一次或两次，并且草药:液体比率可以是1:10或其他。给药可以是1-10天或者甚至每天多 次，包括每天2-6次，和甚至频繁至每天10次。
[0231] 在另一个实施例中，治疗方案包括七种草药的组合，如15克水中的5克牡丹皮，80 克水中的20克生地黄，15克水中的5克仙鹤草，15克水中的5克椿根皮，15克水中的5克地骨 皮，40克水中的10克大黄和40克水中的10克金银花。该组合可以烹煮一次或两次，并且草 药:液体比率可以是1:10或其他。给药可以是1-10天或者甚至每天多次，包括每天2-6次，和 甚至频繁至每天10次。
[0232] 在另一个实施例中，包括十八种草药的低剂量配方包括：约32克水中的3.3克大 黄，约129克水中的13.3克生地黄，约32克水中的3.3克金银花，约32克水中的3.3克牡丹皮， 约48克水中的5克地骨皮，约97克水中的10克仙鹤草，约97克水中的10克椿根皮，约80克水 中的8.3克紫草，约65克水中的6.7克玄参，约32克水中的3.3克石膏，约39克水中的4克白 芍，约39克水中的4克赤芍，约32克水中的3.3克红花，约80克水中的8.3克大青叶，约65克水 中的6.7克青黛，约65克水中的6.7克白术，约48克水中的5克石韦，和约19克水中的2克肉 桂。
[0233] 在另一个实施例中，包括十八种草药的高剂量配方包括：约300克水中的30克大 黄，约600克水中的60克生地黄，约300克水中的30克金银花，约150克水中的15克牡丹皮，约 150克水中的15克地骨皮，约150克水中的15克仙鹤草，约150克水中的15克椿根皮，约50克 水中的5克紫草，约50克水中的5克玄参，约50克水中的5克石膏，约50克水中的5克白芍，约 50克水中的5克赤芍，约50克水中的5克红花，约50克水中的5克大青叶，约50克水中的5克青 黛，约50克水中的5克白术，约50克水中的5克石韦，和约50克水中的5克肉桂。
[0234] 在另一个实施例中，包括七种草药的低剂量配方包括:约32克水中的3.3克大黄， 约129克水中的13.3克生地黄，约32克水中的3.3克金银花，约32克水中的3.3克牡丹皮，约 48克水中的5克地骨皮，约97克水中的10克仙鹤草和约97克水中的10克椿根皮。
[0235] 在另一个实施例中，包括七种草药的高剂量配方包括:约300克水中的30克大黄， 约600克水中的60克生地黄，约300克水中的30克金银花，约150克水中的15克牡丹皮，约150 克水中的15克地骨皮，约150克水中的15克仙鹤草和约150克水中的15克椿根皮。
[0236] 在另一个实施例中，包括三种草药的低剂量配方包括:约32克水中的3.3克大黄， 约129克水中的13.3克生地黄和约32克水中的3.3克金银花。
[0237] 在另一个实施例中，包括三种草药的高剂量配方包括：约300克水中的30克大黄， 约600克水中的60克生地黄和约300克水中的30克金银花。
[0238] 在另一个实施例中，包括三种草药的中剂量配方包括:约100克水中的10克大黄， 约250克水中的25克生地黄和约100克水中的10克金银花。
[0239] 在另一个实施例中，包括三种草药的中剂量配方包括：约200克水中的20克大黄， 约400克水中的40克生地黄和约200克水中的20克金银花。
[0240]在另一个实施例中，包括三种草药的中剂量配方包括:约150克水中的15克大黄， 约350克水中的35克生地黄和约150克水中的15克金银花。
[0241] 在另一个实施例中，包括三种草药的中剂量配方包括：约250克水中的25克大黄， 约450克水中的45克生地黄和约250克水中的25克金银花。
[0242] 在另一个实施例中，包括两种草药的低剂量配方包括:约32克水中的3.3克大黄和 约129克水中的13.3克生地黄。
[0243] 在另一个实施例中，包括两种草药的高剂量配方包括:约300克水中的30克大黄和 约600克水中的60克生地黄。
[0244] 在另一个实施例中，包括两种草药的中剂量配方包括:约100克水中的10克大黄和 约300克水中的30克生地黄。
[0245] 在另一个实施例中，包括两种草药的中剂量配方包括:约300克水中的20克大黄和 约450克水中的45克生地黄。
[0246] 在另一个实施例中，包括两种草药的中剂量配方包括:约32克水中的15克大黄和 约400克水中的40克生地黄。
[0247] 在另一个实施例中，包括两种草药的中剂量配方包括:约300克水中的25克大黄和 约500克水中的50克生地黄。
[0248] 七种草药和十八种草药组合的中剂量配方的实施例还与包括其他四种和其他15 种草药的对应百分比变化的两种和三种草药组合的中剂量配方相应地提供。取决于患者特 征，如患者的年龄、体重和状况以及患者病史，可以使用其他许多组合。
[0249] 双草药配方、三草药配方、七草药配方和十八草药配方的低剂量与高剂量实施例 之间的剂量也在进一步的实施例的范围内。在某些情况下，如由医师用他或她的领域内普 遍的专门知识和经验且对于特定患者而确定的，可以使用高于高剂量配方或低于低剂量配 方的剂量。此外，这18种草药中的两种、三种、四种或更多种的其他组合可以在进一步的配 方实施例中使用，其中可以使用上述实施例中描述的或者由医师另外确定的剂量范围。本 文未描述的另外的草药也可以包括在含有所描述的草药的组合的配方中。
[0250] 在上述实施例中，草药组合的某些剂量已经在特定量的水中描述。在水中混合草 药仅仅是服用草药组合的方式的一个例子。相反，可以不使用水，并且相反，可以使用另一 液体。草药可以形成丸剂或胶囊，或者可以使用静脉内注射。任意草药组合可以形成为乳霜 并且擦拭到皮肤上，或者可以使用注射器以将草药组合注射到患者。
[0251] 在另一个实施例中，检测了 CXCR4拮抗剂对NB4、HL60、Jurkat白血病细胞和HT29结 肠癌和前列腺癌细胞的存活的作用。地高辛在0.05至1微克/ml浓度下显著抑制白血病细胞 的生长。大黄素自身仅在超过5微克/ml的浓度下抑制白血病细胞的生长。0.1微克/ml浓度 的地高辛与5或10微克/ml大黄素的组合显著提高了两种化合物的肿瘤杀伤能力。地高辛、 大黄素及其组合还增加了对HT29肿瘤细胞的部分但显著的作用。
[0252] 研究了地高辛、大黄素及其组合的增加对不同起源的癌细胞系的生存力的作用。 将收获的非粘附人造血癌细胞系NB4、HL60和Jurkat细胞在补充有10%FCS的培养基中一式 三份以每孔2xl0 5个有活力的细胞/lml接种到24孔板中，并用不同浓度的地高辛、大黄素及 其组合孵育24小时。在孵育之后，用碘化丙啶(？1)(3181^，3丨丄〇114,0)染色细胞，并使用 CellQuest软件通过FACScalibur分析（Becton Dickinson Immunocytometry Systems)测 定培养物中存活的PI阴性细胞的百分比。将粘附的前列腺癌PC3细胞和结肠癌HT29细胞在 上述条件下以每孔lxl〇 5个有活力的细胞/lml接种到24孔板中，且在24小时暴露于地高辛、 大黄素及其组合后，收获细胞，用PBS清洗，并如对造血细胞描述的用PI染色并计数。
[0253] 地高辛的治疗指数认为是在0.125m" g和0.5m"g之间，同时大黄素在小鼠中的LD50 值认为是〇 · 56g/k" g。
[0254] 在根据本发明组合D与E时，有着令人惊讶的且预料不到的协同效应。
[0255] 现有治疗可以准备为已知分别具有地高辛"D"和大黄素"E"的草药混合物。芦荟-大黄素是存在于一些传统药用植物如大黄和掌叶大黄中的天然蒽醌化合物。有趣的是，已 经发现芦荟-大黄素对正常人类细胞具有较小的细胞毒性。已经用合成的D&E分子对细胞系 进行了体外试验。用植物进行的体外试验与用分离的分子所进行的相似。
[0256] 大黄素可以提取自传统药用植物如大黄和掌叶大黄。在一个实施方式中，所用的 大黄素的来源是大黄-中文名，或大黄（Rhubarb Root)-英文名，或掌叶大黄（Rheum Plamatum)-植物学名称，或大黄(Radix Rhisoma Rhei)_药物学名称。大黄素可以提取自大 黄（Rhubarb)、鼠李（Buckthorn)和 / 或日本紫毙（Japanese Knotweed，Fallopia Japonica)。可以使用芦荟-大黄素，其是发现于索科特拉芦荟(Socotrine aloe)、巴巴多斯 芦苔(Barbados aloe)和桑给巴尔芦苔(Zanzibar aloe)中的多种大黄素。
[0257] 使用大黄素的癌症药物治疗在某些实施方式中通过在水中以约10:1的比率混合 草药大黄而制备。草药可以研磨成细粉。水可以添加到细粉状草药，并且盖上罐。在沸腾之 后，在某些实施方式中热降低至约70摄氏度。水性混合物再烹煮1小时。然后液体滤到容器 中。在一些情况下，这可以进行两次。在第二次烹煮中，比率可以降低至7.5:1。第二次烹煮 可以费时约45分钟，包括沸腾。
[0258] 地高辛的来源在某些实施方式中是生地黄-中文名，或毛地黄根（Foxglove root)-英文名，或地黄(Radix Rhemania)-药品学名称。地高辛的制备可以与大黄素相同。 在某些实施方式中，大黄素与地高辛自其中提取的草药一起烹煮。地高辛可以提取自毛地 黄(Digitalis Purpurea)或紫色毛地黄(Purple Foxglove)。
[0259] 在某些实施方式中，所准备的治疗是不纯的。例如，某些治疗可以包括根据本文提 供的具体实施例由多于一种和甚至两种、三种、七种或十八种草药的成分制成的"植物汤" 型方案，或者本文描述的草药的任意组合，或者本文描述的草药与本文未提及的其他草药 的组合。在某些实施方式中，草药成分在溶液中混合，且患者可以饮用该液体。虽然冻干成 粉末形式的草药也是可能的，但上述方法看起来更高效。
[0260] 将收获的非粘附人造血系统癌细胞系NB4(AML)、HL60和Jurkat在补充有10%FCS 的培养基中以每孔2xl05个存活细胞/lml -式三份接种到24孔板中，并用不同浓度的地高 辛、大黄素及其组合孵育24小时。在孵育之后，用碘化丙啶(PI)(Sigma，St.Louis，M0)染色 细胞，并使用Cel lQuest 软件通过 FACScalibur 分析（Bee ton Dickinson Immunocy tome try Systems)测定培养物中有活力的PI阴性细胞的百分比。将粘附的前列腺癌PC3细胞和结肠 癌HT29细胞在上述条件下以每孔lxlO 5个存活细胞/lml接种到24孔板中，且在24小时暴露 于地高辛、大黄素及其组合后，收获细胞，用PBS清洗，并如对造血细胞描述的用PI染色并计 数。
[0261] 援引加入
[0262] 除本文中（并且包括描述为背景、
【发明内容】
、【附图说明】、附图和摘要的部分)上文和 下文所引用的的那些那些参考文件之外，以下是特此援引加入到下文的优选实施方式的详 细描述中的参考文件的引用列表，正如公开了未在下文详细陈述的优选实施方式的元素或 特征的替代性实施方式那样。可以查询这些参考文件中的单独一个或者两个或更多个的组 合以获得下文的详细描述中所描述的优选实施方式的变化。书面说明书中引用的另外的专 利、专利申请和非专利参考文件也援引加入到优选实施方式中。
[0263] 癌症治疗(包括施用包含大黄素与地高辛的组合的鸡尾酒式药物)可以与如可以 由本领域技术人员所理解的和/或如可以在文献如下列文献中所描述的其他治疗组合，这 些文献特此援引加入，就像公开了可以与大黄素、地高辛鸡尾酒式药物在有效的癌症疗法 中组合的替代性实施方式和化合物那样：
[0264] Chronic Lymphocytic Leukemia by the Leukemia&Lymphoma Society；
[0265] Medifocus .com:Medifocus Guide on Chronic Lymphocytic Leukemia；
[0266] Ran j i t Thomas 等，Spontaneous Clinical Regression in Chronic Lymphocytic Leukemia,British Journal of Haematology，2002,116,341-345;
[0267] Dragomir Marisavljevic等，Spontaneous Clinical Remission of Chronic Lymphocytic Leukemia,Haema 2003；6(3):394-397；
[0268] Upshaw JD Jr·等，Spontaneous Remission of B cell Chronic Lymphocytic Leukemia associated with T Lymphocytic Hyperplasia in bone marrow,South Med J.2002June 1995(6):647-9；
[0269] ffiernik PH,Second neoplasms in patients with chronic lymphocytic leukemia,Current Treat Options Oncol.2004Jun；5(3):215-23；
[0270] Luis Fayad MD和Susan O'Brien MD,Chronic Lymphocytic Leukemia and Associated Disorders，Medical Oncology:A Comprehensive Review,1995；
[0271] Michael J·Keating等，Biology and Treatment of Chronic Lymphocytic Leukemia,American Society ofHematology,Hematology 2003，153-175;
[0272] GE Marti等，Descriptive Epidemiology of Chronic Lymphocytic Leukemia (CLL);和
[0273] 美国专利号 7,790,905,7,695,926,7,563,584,7,393,656,7,381，535,7,358， 222,7,268，162,6,812,255,6,740,665,6，197,754,5,872，103;和
[0274] 美国公布专利申请号20050196473,20030211180,20100092585,20100167286， 20100144647,20100068198,20090269772,20090215042,20090143279,20080152700， 20080220441，20070191262，20060205679，20050026849;和
[0275] PCT 公布申请号 W02006/053049;W001/66123，W02007/130124，W02004/052294。
[0276] 据信还可以提供具有大黄素与地高辛的有利组合的治疗以治疗其他病症如银肩 病和炎性疾病。
[0277] 如具有本领域的普通技术的人所做的，设想新分离的化合物可以各自单独地或组 合地作为制备用于特定治疗意图的药学组合物的成分使用。就像制药工业的现有技术中那 样，一旦获得了基本上纯的化合物制剂，可以使用工业中的常规方法或者未来开发的方法 从该基本上纯的化合物制备各种药物组合物或制剂。从化学化合物制备药学制剂和剂型 (包括但不限于片剂、胶囊、注射剂、糖浆剂）的具体方法不是本发明的一部分，而制药工业 领域的普通技术人员能够将工业中建立的一种或多种方法应用于本发明的实践中。或者， 本领域的普通技术人员可以改变现有常规方法以更好地适应本发明的化合物。例如，USPT0 官方网站提供的专利或专利申请数据库含有涉及从有效的化学化合物制备药学制剂和产 品的丰富资源。另一个有用的信息来源是由Sarfaraz K.Niazi编辑并由Culinary& Hospitality Industry Publications Services出售的Handbook of Pharmaceutical Manufacturing Formulations，其援弓丨加入。
[0278] 虽然本发明已经就多个实施方式进行描述，但本领域技术人员应认识到本发明不 限于所描述的实施方式，而是可以使用在随附权利要求的精神和范围之内的改变和改动而 实施。本说明书因此视为是说明而非限制如在随附权利要求中所陈述的本发明，包括其结 构及功能等价物。
【主权项】
1. 一种治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的方法，其包括将基本 上由有效量的大黄和生地黄的组合组成的治疗方案局部施用、口服施用或静脉内施用于或 者注射到诊断有黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的患者的患病皮肤区 域。2. -种治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的方法，其包括将基本 上由有效量的大黄、生地黄和金银花的组合组成的治疗方案局部施用、口服施用或静脉内 施用于或者注射到诊断有黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的患者的患 病皮肤区域。3. -种治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的方法，其包括将基本 上由有效量的大黄、生地黄、金银花、牡丹皮、地骨皮、仙鹤草和椿根皮的组合组成的治疗方 案局部施用、口服施用或静脉内施用于或者注射到诊断有黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银 肩病或炎症性疾病的患者的患病皮肤区域。4. 一种治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的方法，其包括将基本 上由有效量的大黄、生地黄、金银花、牡丹皮、地骨皮、仙鹤草、椿根皮、紫草、玄参、石膏、白 芍、赤芍、红花、大青叶、青黛、白术、石韦和肉桂的组合组成的治疗方案局部施用、□服施用 或静脉内施用于或者注射到诊断有黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的 患者的患病皮肤区域。5. -种治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的方法，其包括将基本 上由有效量的大黄、生地黄、牡丹皮、地骨皮、仙鹤草和椿根皮的组合组成的治疗方案局部 施用、口服施用或静脉内施用于或者注射到诊断有黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或 炎症性疾病的患者的患病皮肤区域。6. -种治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的方法，其包括将基本 上由有效量的大黄、生地黄、紫草、玄参、石膏、白芍、赤芍、红花、大青叶、青黛、白术、石韦和 肉桂的组合组成的治疗方案局部施用、口服施用或静脉内施用于或者注射到诊断有黑素 瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的患者的患病皮肤区域。7. 权利要求1所述的方法，其中所述方法包括将乳霜局部施用到所述患病皮肤。8. -种治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的方法，其包括将基本 上由有效量的大黄、金银花、牡丹皮、地骨皮、仙鹤草和椿根皮的组合组成的治疗方案局部 施用、口服施用或静脉内施用于或者注射到诊断有黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或 炎症性疾病的患者的患病皮肤区域。9. 一种治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的方法，其包括将基本 上由有效量的大黄、金银花、紫草、玄参、石膏、白芍、赤芍、红花、大青叶、青黛、白术、石韦和 肉桂的组合组成的治疗方案局部施用、口服施用或静脉内施用于或者注射到诊断有黑素 瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的患者的患病皮肤区域。10. -种治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌）或者银肩病或炎症性疾病的方法，其包括将基 本上由有效量的生地黄、金银花、牡丹皮、地骨皮、仙鹤草和椿根皮的组合组成的治疗方案 局部施用、口服施用或静脉内施用于或者注射到诊断有黑素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩 病或炎症性疾病的患者的患病皮肤区域。11. 一种治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌）或者银肩病或炎症性疾病的方法，其包括将基 本上由有效量的生地黄、金银花、紫草、玄参、石膏、白芍、赤芍、红花、大青叶、青黛、白术、石 韦和肉桂的组合组成的治疗方案局部施用、口服施用或静脉内施用于或者注射到诊断有黑 素瘤、BCC(基底细胞癌)或者银肩病或炎症性疾病的患者的患病皮肤区域。12. 权利要求1所述的方法，其中大黄以13.3-60克的量存在，并且生地黄以3.3-40克的 量存在。13. 权利要求2所述的方法，其中所述方法还包括将乳霜局部施用到所述患病皮肤。14. 权利要求3所述的方法，其中所述方法还包括将乳霜局部施用到所述患病皮肤。15. 权利要求4所述的方法，其中所述方法还包括将乳霜局部施用到所述患病皮肤。16. 权利要求2所述的方法，其中大黄以13.3-60克的量存在，并且生地黄以3.3-40克的 量存在，并且金银花以3.3-30克的量存在。17. -种用于治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌）或者银肩病或炎症性疾病的药用组合，其 基本上由有效量的大黄和生地黄的组合组成。18. -种用于治疗黑素瘤、BCC(基底细胞癌）或者银肩病或炎症性疾病的药用组合，其 基本上由有效量的大黄、生地黄和金银花组成。19. 权利要求17所述的药用组合，其中大黄以13.3-60克的量存在，并且生地黄以3.3-40克的量存在。20. 权利要求18所述的药用组合，其中大黄以13.3-60克的量存在，生地黄以3.3-40克 的量存在，并且金银花以3.3-30克的量存在。
【文档编号】A61K36/284GK105939721SQ201380082025
【公开日】2016年9月14日
【申请日】2013年12月2日
【发明人】N·施雷博姆
【申请人】塞尔巴有限公司