抗hbv的药物组合物及其应用
【专利摘要】本发明提供了包含1?(2?脱氧?2?氟?β?L?阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶的药物组合物及其应用，用于抗乙型肝炎病毒。
【专利说明】
抗HBV的药物组合物及其应用
技术领域
[0001] 本发明属于医药技术领域，具体而言，本发明涉及包含1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉 伯呋喃糖基)胸腺嘧啶的组合物及其应用。
[0002]
【背景技术】
[0003]核苷类似物是目前抗病毒(包括乙型肝炎病毒，HBV)药物中的一类重要候选化合 物，其主要通过抑制病毒的逆转录酶和/或DNA聚合酶而发挥疗效。有许多核苷类似物因抗 病毒效果显著而已经成药并推广应用，但是更多的化合物由于本身效果不如成药化合物， 即使在结构上与成药化合物差别很小，也被弃之不用。
[0004] 然而，本发明人在对抗乙型肝炎病毒的药物的长期研究中，意外地发现了有些被 筛选弃去的化合物尽管本身的抗HBV的能力较弱(但也并非不能单独使用），大比例地与成 药化合物混合使用会使混合的组合物的抗HBV效率不如单独使用成药化合物本身，但是少 量混合使用却不会降低、甚至可能会有所提高抗HBV的效率。因此，本发明人开发了这些已 经被弃去的核苷类似物，主要用于与1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶的联 合使用，用于抗HBV。
[0005]
【发明内容】
[0006] 本发明要解决的技术问题在于提供新的核苷类似物的药物应用，包括用于与ΙΟ-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基) 胸腺嘧啶联合使用， 用于抗 HBV。另外，本发明还提供 了包含该核苷类似物和1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶的药物组合物等。
[0007] 具体而言，在第一方面，本发明提供了 1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸 腺嘧啶和另一种或多种化合物联合在制备抗乙型肝炎病毒的药物中的应用，其中，所述另 一种或多种化合物是选自如下组的一种或多种化合物： 1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶;和， 1-(2-脱氧-2-溴-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶。
[0008] 优选在本发明的第一方面的应用中，另一种或多种化合物是1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶，即本发明的第一方面的应用是1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯 呋喃糖基)胸腺嘧啶和1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶联合的应用。
[0009] 经本发明研究发现，另一种或多种化合物的（总）量不宜超过1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶的量。优选在本发明的第一方面的应用中，1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基）胸腺嘧啶和另一种或多种化合物的摩尔比为1000:1~1:1，优选为 1000:5~20:1，更优选为 100:1~10:1。
[0010] 优选在本发明的第一方面的应用中，抗乙型肝炎病毒是降低乙型肝炎病毒的DNA 水平。这与此类核苷类似物的抗病毒机理是一致的。
[0011] 在第二方面，本发明提供了抗乙型肝炎病毒的药物组合物，其包括1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶和另一种或多种化合物，其中，另一种或多种化合物是 选自如下组的一种或多种化合物： 1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶;和， 1-(2-脱氧-2-溴-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶。
[0012] 优选本发明的第二方面的药物组合物由1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基） 胸腺嘧啶和另一种或多种化合物组成。
[0013] 优选在本发明的第二方面的药物组合物中，1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖 基)胸腺嘧啶和另一种或多种化合物的摩尔比为1000:1~1:1，优选为1000:5~20:1，更优选 为100 :1~10:1〇
[0014] 也优选在本发明的第二方面的药物组合物中，另一种或多种化合物是1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶。在本发明的【具体实施方式】中，1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶显示了比1-(2-脱氧-2-溴-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶更好 的自身抗HBV的能力，而且在与1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶组成复方 时，抗HBV效果也可能更好。
[0015] 在第三方面，本发明提供了抗乙型肝炎病毒的药物制剂，其包括本发明的第二方 面的药物组合物和药学上可接受的辅料。在本文中，药学上可接受的辅料指无毒且不干扰 药物活性成分发挥疗效的填充剂、稳定剂、稀释剂、佐剂或其他制剂辅料。本领域的技术人 员可以根据治疗目的、给药途径(如注射或口服)的需要将药物组合物制成各种剂型，优选 该组合物为单位剂量形式，如冻干剂、片剂、颗粒剂、胶囊、粉剂、乳液剂、注射剂或喷雾剂。 本发明第三方面的药物制剂优选是注射制剂(如冻干剂或注射液)或口服制剂(如片剂）。
[0016] 在另一个方面，本发明提供了 1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基）胸腺嘧啶 和/或1-(2-脱氧-2-溴-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶在制备抗乙型肝炎病毒的药物中的 应用，优选地，本发明提供了 1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶在制备抗乙 型肝炎病毒的药物中的应用。
[0017] 本文另一个方面的应用可以是单独应用，也可以是联合应用。优选在本文的应用 (包括第一方面的应用）中，所述(制备的）药物是本发明的第二方面的药物组合物或本发明 第三方面的药物制剂。
[0018] 本发明取得的有益效果包括将被弃去的核苷类似物变废为宝，甚至可能减少成药 化合物A的用量，节约成本，提高抗HBV的效率。
[0019] 为了便于理解，以下将通过具体的实施例对本发明进行详细地描述。需要特别指 出的是，这些描述仅仅是示例性的描述，并不构成对本发明范围的限制。依据本说明书的论 述，本发明的许多变化、改变对所属领域技术人员来说都是显而易见的。
【具体实施方式】
[0020] 以下通过实施例进一步说明本发明。如未特别指明，实施例中所用的技术手段为 本领域技术人员所熟知的常规手段、设备和试剂，有些已经提供商品化服务，可参见《有机 合成》等手册。
[0021] 实施例1 1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶的合成
合成过程如以上流程所示，可以委托广西慧宝源制药有限公司合成，具体而言：将式I 化合物(400mg, 0.86mmol)溶于无水QfeCh(IOml)中，加入溶于醋酸中的溴化氢(45% w/v， 1.5ml)，并将所得溶液在室温下搅拌17小时，蒸发溶剂并用甲苯共蒸后，得到式2化合物。 [0022] 同时，将胸腺嘧啶（215mg，1.72mmol)在HMDS(25ml)中在氮气保护下回流17小时， 得到均相溶液，蒸去溶剂得到甲硅烷化的胸腺嘧啶。
[0023]将式2化合物溶于二氯乙烷(50ml)中，加入甲硅烷化的胸腺嘧啶，并将所得溶液在 氮气下回流3天，加入水，然后用CHCl3萃取。将有机层依次用水、盐水洗涤并用MgSO4干燥。蒸 发溶剂得到粗产物，将其经TLC纯化，用2%Me0H/CHCl 3展开，得到式3化合物。
[0024] 在室温下将式3化合物（145mg，0.309_〇1)用MWCH3OH处理18小时，蒸发溶剂，经 制备TLC( 15% MeOH/CHCl3)纯化，得到式4化合物。
[0025] 实施例2 1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶的合成
合成过程如以上流程所示，基本等同于实施例1的具体合成过程，所不同的是起始化合 物替换为式5化合物，其为氯取代的。
[0026]实施例3 1-(2-脱氧-2-溴-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶的合成
合成过程如以上流程所示，基本等同于实施例1的具体合成过程，所不同的是起始化合 物替换为式9化合物，其为溴取代的。
[0027]实施例4抗HBV活性试验 将根据实施例1-3合成的化合物单独或者以不同比例混合，测定它们体外对乙型肝炎 病毒(HBV)的影响。具体而言，将转染了HBV的HepG 2.2.15细胞在含10%胎牛血清的最低基 础培养基中培养，每隔3天更换一次新鲜的培养基。培养至汇集后，更换新鲜培养基并加入 不同总浓度的根据实施例1-3合成的化合物及其混合物，培养3天，然后再更换新鲜培养基 并加入前次的药物，再培养3天。然后用聚乙二醇沉淀法收集培养基中的病毒颗粒，裂解后 用定量实时荧光PCR法测定HBV的DNA量，计算相对于不加任何药物的对照组的DNA水平抑制 50%时的各药物浓度（IC50)。
[0028] 表1抗HBV试验结果
本发明人的试验结果如表1所示，化合物A的抗HBV的效果比化合物B和C的好了约一个 数量级以上，显示了化合物A比化合物B和C更有开发成抗HBV药物的前景;然而，令人惊讶的 是，化合物A与少量的化合物B和C(尤其是摩尔比小于1/10的化合物B)组成复方，却基本能 发挥相同总量的化合物A的效果，甚至可能提高抑制效果，相应地节约化合物A的使用量，因 此也具有开发成复方药物的前景。
【主权项】
1.1- (2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶和另一种或多种化合物联合在制 备抗乙型肝炎病毒的药物中的应用，其中，所述另一种或多种化合物是选自如下组的一种 或多种化合物： 1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶;和， 1-(2-脱氧-2-溴-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶。2. 权利要求1所述的应用，其中1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶和另 一种或多种化合物的摩尔比为1000:1~1:1，优选为1000:5~20:1，更优选为100:1~10:1。3. 权利要求1所述的应用，其是1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶和ΙΟ-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基) 胸腺嘧啶联合的应用。4. 权利要求1所述的应用，其中抗乙型肝炎病毒是降低乙型肝炎病毒的DNA水平。5. 抗乙型肝炎病毒的药物组合物，其包括1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺 嘧啶和另一种或多种化合物，其中，另一种或多种化合物是选自如下组的一种或多种化合 物： 1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶;和， 1-(2-脱氧-2-溴-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶。6. 权利要求5所述的药物组合物，其中1-(2-脱氧-2-氟-β-L-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧 啶和另一种或多种化合物的摩尔比为1000:1~1:1，优选为1000:5~20:1，更优选为100:1~ 10：1〇7. 权利要求5所述的药物组合物，其中另一种或多种化合物是1-(2-脱氧-2-氯-β-L-阿 拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶。8. 抗乙型肝炎病毒的药物制剂，其包括权利要求5~7之任一所述的药物组合物和药学 上可接受的辅料。 9.1- (2-脱氧-2-氯-β-L-阿拉伯呋喃糖基）胸腺嘧啶和/或1-(2-脱氧-2-溴-β-L-阿拉 伯呋喃糖基)胸腺嘧啶在制备抗乙型肝炎病毒的药物中的应用。10.权利要求9所述的应用，其中所述药物是权利要求5~7之任一所述的药物组合物或 权利要求8所述的药物制剂。
【文档编号】A61P31/20GK105943547SQ201610344035
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年5月23日
【发明人】不公告发明人
【申请人】北京慧宝源生物技术有限公司