水基辣椒素制剂及制备方法和应用

水基辣椒素制剂及制备方法和应用
【专利摘要】本发明公开了辣椒素制剂和治疗方法，其可被用来治疗/减轻哺乳动物中的疼痛。通常，通过在离散部位注射给药来提供更长时间的缓解疼痛。制剂以药学上可接受的载体给药。制剂包括足够减轻辣椒素给药的灼热和痛觉过敏效果的量的镇痛剂。本发明还包括通过施用皮质类固醇然后施用辣椒素来治疗疼痛的方法。
【专利说明】
水基辣椒素制剂及制备方法和应用
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本申请要求2013年11月12日提交的美国申请号14/078,253的优先权的权益，其全 部内容通过引用被明确地纳入到本申请中。
技术领域
[0003] 本发明涉及将辣椒素施用到局部的组合物。该组合物对治疗多种涉及病痛（急性 和慢性的，温和到严重的）的失调有用，并且它们提供了延长的疼痛缓解。本发明还涉及包 括预处理的方法，所述预处理限制与辣椒素注射有关的灼痛和刺痛。
【背景技术】
[0004] 辣椒碱，一种辣椒属植物果实的辛辣物质，对由C神经末梢的局部退化引起的疼痛 有缓解作用；辣椒素是已知的唯一通过这种机制缓解疼痛的镇痛剂。辣椒碱的活性源自其 结合并激活称为香草酸受体I (VR1)的离子通道。在正常的情况下，当VRl离子被激活时，其 打开很短的时间，引起C神经向大脑传递疼痛信号。当辣椒碱结合并激活VRl时，其在使C神 经末端(或末端的C神经)退化的细胞中引起一系列的事件，从而阻止神经传递疼痛信号。
[0005] 虽然辣椒碱的止痛效果被认为是由于P物质的损耗，但最近的证据表明伤害感受 纤维"机能丧失"的过程是形成辣椒碱止痛效果的原因 。（Anand P ,Bley K. Topical capsaicin for pain management: therapeutic potential and mechanisms of action of the new high-concentration capsaicin 8%patch.Br J Anaesth.2011；107(4): 490-502.)
[0006] 辣椒碱局部软膏和药膏释放能够缓解轻微的疼痛以及肌肉和关节的疼痛。目前辣 椒碱作为含有低剂量辣椒碱的非处方局部使用、非灭菌药膏和药贴在市场上出售。辣椒碱 的浓度一般在0.025重量％至0.075重量％之间。消费者通常使用这些非处方局部用制剂来 缓解疼痛，当用来治疗如骨关节炎、带状疱行疹(带状疱疹）、银肩病和糖尿病神经炎的失调 时，同时伴随着产生可变并且往往不足的结果。辣椒碱也可在可施用于背部的大型胶布绷 带中利用。
[0007] 辣椒碱的局部用制剂在引起疼痛和瘙痒的各种皮肤失调中都有使用，例如带状疱 疹后神经痛、糖尿病神经炎、前列腺炎、银肩病、丛集性头痛、术后疼痛综合征、鼻病、口腔黏 膜炎、皮肤过敏性反应、逼尿肌反射亢进、腰痛/血尿综合征、颈痛、截肢残端痛、反射性交感 神经萎缩症、皮肤瘤、包括类风湿关节炎和的骨关节炎关节炎、术后疼痛、口腔痛和因受伤 而引起的疼痛以及其他失调。（Martin Hautkappe et al. ,Review of the Effectiveness of Capsaicin for Painful Cutaneous Disorders and Neural Dysfunction, Clin.J.Pain,14:97-106,1998)〇
[0008] 透明质酸(HA)或玻尿酸是滑膜液中的糖胺聚糖成分。HA影响着作为润滑剂和减震 器的滑膜液的粘弹性的质量。将HA制剂注射到膝盖和臀部通常用于治疗骨关节炎，但是对 治疗效果和效益风险比有争议。当进行结果汇总时，采用5种不同的透明质酸产品的40个安 慰剂对照试验的科克伦评论(Cochrane review)发现对负重疼痛在统计学上有显著的改 善，但改善差别很大。
[0009] 将透明质酸（例如透明质酸钠注射剂、海尔根（Hyalgan)、欣维可（Synvisc)、 Artzal和Nuflexxa)注射到关节--一种称作粘弹性物补充疗法的程序--可为膝盖骨关 节炎提供疼痛缓解。虽然没有进行重大安全问题的检测，但是在安慰剂对照试验中，在注射 部位会轻微发生轻度不良事件(例如短时疼痛），在用关节腔内透明质酸治疗的患者中比在 用皮质类固醇治疗的患者中频率更高。（Zhang et al，.OARSI recommendations for the management of hip and knee osteoarthritis,part II:OARSI evidence-based,expert consensus guidelines.Osteoarthritis Cartilage 2008；16:137-162.)
[0010] 而且，已经显示在小鼠的缓激肽诱导的关节痛模型中，HA能够诱导痛觉缺失。该镇 痛作用也具有分子量(丽)依赖性，因为在较低浓度下，较高丽制剂比较低丽的HA更能够观 察到显著的效果。
[0011] (Gotoh Set al:Effects of the molecular weight of hyaluronic acid and its action mechanisms on experimental joint pain in rats.Ann Rheum Dis 1993, 52:817-822)。
[0012] HA可对P物质有直接或间接的影响，所述P物质可引起疼痛。由于P物质与兴奋性氨 基酸、前列腺素和NO相互作用，所以HA对这些因素的影响可间接地影响P物质的药理学作 用。此外，已显示出HA能够抑制P物质诱导的血管通透性的增加。
[0013] (Moore et al:Hyaluronan as a drug delivery system for diclofenac :a hypothesis for mode of action.Int J Tissue React 1995,17:153-156.)
[0014] 抗炎药减轻了组织部位的炎症和肿胀。它们通过阻断某些生理活性物质来做到这 一点。例如，这些物质，前列腺素、P物质和组织胺，能引起小动脉扩张，随后形成水肿或液 体。软组织、肌肉和神经细胞变得容易发炎以及过度兴奋。消炎药可抑制这种炎症过程。然 而，用抗炎药来治疗慢性疼痛受到了限制。
[0015] 在髋关节置换术和全膝关节置换术之后缓解疼痛的主要是阿片类药物。虽然这些 药物都是优秀的镇痛药，但是阿片类药物也有限制其有效性的很多问题。其他镇痛剂被认 为对这些手术引起的疼痛太温和。
[0016] 美国专利5962532公开了用有效浓度的辣椒碱或其类似物在特定部位治疗疼痛的 方法和组合物。所述方法涉及向施用辣椒碱或其类似物的部位提供麻醉，然后向关节施用 有效浓度的辣椒碱。
[0017] 美国专利8158682涉及治疗或减轻患者疼痛的方法。具体地，该发明提供了减轻裸 露伤口或手术切口的邻近部位疼痛的方法，包括向伤口或切口逐步施用包括辣椒碱的药物 组合物，让药物组合物存在预定的时间段，然后清理伤口或切口以除去药物组合物。该发明 还提供了用于减轻关节附近疼痛的方法，包括向关节进行关节腔内注射包含辣椒素的药物 组合物，让药物组合物存在预定的时间段，然后清理关节以除去药物组合物。在本发明某些 实施例中，辣椒素为辣椒碱。
[0018] 美国专利8420600公开了通过向人或动物的离散部位施用有效量的辣椒碱剂量以 去除离散部位的神经而不会诱发对离散位置之外的影响来缓解人或动物部位的疼痛的组 合物和方法。
[0019] US2004/0161481公开了用于缓解有此需要的人或动物部位疼痛的方法，包括通过 注射或渗透施用一剂辣椒素，以及联合施用有效量的NSAID(非类固醇抗炎药)来降低辣椒 素的不良效果。
[0020] US2004/0156931公开了用于缓解有此需要的人或动物部位疼痛的方法，包括通过 注射或渗透施用一剂辣椒素，以及联合施用血管扩张剂。
[0021] US2004/0186182公开了用于缓解有此需要的人或动物部位疼痛的方法，包括通过 注射或渗透施用一剂辣椒素，以及联合施用非麻醉钠通道阻滞剂。
[0022] US2005/0019436公开了用于通过在有此需要的人或动物的离散部位施用一剂有 效量的辣椒碱以去除离散部位的神经而不会诱发对离散位置之外的影响来缓解人或动物 部位疼痛的组合物和方法，辣椒碱的剂量范围为Iyg至3000yg。
[0023] US2005/0020690公开了用于减弱或缓解有此需要的人或动物部位疼痛的组合物 和方法，通过在有此需要的人或动物的手术部位或裸露的伤口处浸润一剂有效量的辣椒素 来去除手术部位或裸露伤口的神经，而不会诱发对手术部位或裸露伤口之外的影响。
[0024] US2005/0058734公开了用于缓解有此需要的人或动物部位疼痛的方法，包括通过 注射或渗透施用一剂辣椒素以及联合施用血管收缩剂。
[0025] US2006/0269628公开了用于减弱或缓解有此需要的人或动物部位疼痛的方法，通 过在有此需要的人或动物的手术部位或裸露伤口处浸润一剂有效量的辣椒素来去除手术 部位或裸露伤口处的神经，但接下来不会诱发对手术部位或裸露伤口之外的影响。
[0026]美国专利申请2006/0100272公开了用于治疗疼痛、特别是神经性疼痛的方法。 [0027] US2006/0148903提供了用于缓解人或动物部位的术前和术后疼痛的辣椒素凝胶 剂和方法，通过在需要其的人或动物的手术部位施用一剂有效量的辣椒素来减轻手术部位 的术后疼痛，一剂辣椒碱的范围为I OOyg至1 〇，OOOyg。
[0028] US2007/0293703提供了合成辣椒碱和/或辣椒碱类似化合物的反式异构体的方 法，其中反式构型从合成反应开始设置，并展开于整个合成过程。
[0029] US2008/0153780涉及用于生产治疗疼痛药剂的香草酸激动剂与糖胺聚糖或蛋白 聚糖的用途。
[0030] US2007/0036876提供了缓解人或动物部位疼痛所需的组合物和方法，通过在需要 其的人或动物离散部位施用一剂有效量的辣椒碱来去除离散部位的神经而不会诱发对离 散部位之外的影响，辣椒碱的剂量范围为Iyg至3000yg。
[0031] US2008/0260791提供了缓解有此需要的人或动物离散部位疼痛的组合物和方法， 通过在有此需要的人或动物的离散部位使用以及有效量的辣椒碱来去除离散部位的神经 而不会诱发对离散部位之外的影响，辣椒碱的剂量范围为Iyg至5000yg。
[0032] US2008/0262091A1提供了减弱或缓解有此需要的人或动物部位疼痛的组合物和 方法，通过在人或动物的手术部位或裸露伤口浸润一剂有效量的辣椒素来去除手术部位或 裸露的伤口的神经，而接下来不会诱发对手术部位或裸露的伤口之前的影响。
[0033] US2009/0062359涉及缓解有此需要的人或动物部位疼痛的方法，包括通过注射或 渗透施用一剂辣椒素以及联合施用非麻醉钠通道阻滞剂。
[0034] US2009/0054527公开了缓解有此需要的人或动物部位疼痛的方法，包括通过注射 或渗透施用一剂辣椒素以及联合施用血管扩张剂。
[0035] US2009/0111792公开了缓解有此需要的人或动物部位疼痛的方法，包括通过注射 或渗透施用一剂辣椒素以及联合施用三环类抗抑郁剂。
[0036] US2009/0117167A1公开了缓解有此需要的人或动物部位疼痛的方法，包括通过注 射或渗透施用一剂辣椒素以及联合施用血管收缩剂。
[0037] US2009/0118242公开了缓解有此需要的人或动物部位疼痛的方法，包括通过注射 或渗透施用一剂辣椒素以及联合施用有效量的NSAID来降低辣椒素的不良效果。
[0038] US2011/0311592教导了提高溶解性差的化合物的溶解度的方法，以及制备和使用 这种化合物制剂的方法。
[0039] ALGRX-4975在临床上被开发以治疗与骨关节炎、肌腱炎与术后状况相关的疼痛以 及发生继发性神经损伤的神经性疼痛和其他慢性疼痛状况。通过仅靶向C神经疼痛纤维， ALGRX-4975能产生显著地长期痛觉缺失。在临床研究中，ALGRX-4975已提供了来自单一治 疗的长期疼痛的缓解，总结于表1中。
[0040] 表1 - ALGRX-497 5的临床试验总结
[0042] ⑴Cantilon，M.et al,Preliminary safety,tolerability and efficacy of ALGRX 4975in Osteoarthritis(OA)of the knee,The Journal of Pain1Vol.6,March, 2005.
[0043] (2)Diamond,E.et al,ALGRX 4975reduces pain of intermetatarsal neuroma: preliminary results from a randomized,double-blind,placebo-controlled,phase II multicenter clinical trial,The Journal of Pain,Vol.7,April,2006.
[0044] ⑶Aasvang，E·et al , The effect of wound instillation of a novel purified capsaicin formulation on postherniotomy pain: a double-blind， randomized,placebo-controlled study,Anesthesia and Analgesia，2008,107(1)， p.282-291.
[0045] 为了进行几项临床试验，供应了瓶装的高纯度的反式辣椒碱，瓶中含有5mL的以 0.5mg/ml的浓度溶解在roG-300中的纯的辣椒碱。将辣椒碱/PEG-300溶液储存在15°C至25 °C的温度下。在注射前的4小时内，将辣椒碱浓缩物的浓度进行稀释以制备含有约20 % PEG-30 ， 约1. 5mg/ml 组氨酸和约 5 % 蔗糖 的制剂 。如表1I 中所示 ，在美国专利8420600中 所列的 3 个实施例的辣椒碱浓度为〇. 〇〇2mg/ml、0.02mg/ml和0.06mg/ml。
[0046]表1I-可注射的辣椒碱剂量水平
[0049] 在临床试验中注射辣椒碱时，立刻经历了自发性灼痛和痛觉过敏，并且持续了 60 分钟。这些不良的副作用归因于在辣椒碱施用部位的外周伤害感受器的强烈活动和暂时性 的致敏。该活动和致敏在脱敏阶段之前发生。在尝试控制辣椒碱注射引起的灼热和刺痛时， 在注射辣椒碱之前注射局部麻醉剂，然后退出。
[0050] 可注射的辣椒碱制剂应用的目前的限制为强烈的灼痛和刺痛(B&S)的可能性达1 小时，然后温和的疼痛再持续1-2小时。，辣椒碱剂预期发生B&S被认为来自在伤害感受器脱 敏之前在兴奋期期间发生的强烈的伤害感受器放电。
[0051] 在多种模型中的工作已经显示出辣椒碱能激活感觉神经来诱导神经肽特别是降 钙素基因相关肽（CGRP)以及炎性P物质（SP)的释放Lundberg et al, Co-existence of substance P and calcitonin gene-related peptide-like immunoreactivities in sensory nerves in relation to cardiovascular and bronchoconstrietor effects of capsaicin.Eur.J.Pharmacol.,108,315-319,(1985).Martling et al,Calcitonin gene-related peptide and the lung:neuronal coexistence with substance P, release by capsaicin and vasodilatory effect.Regul.Pept.,20,125-139,（1988)〇
[0052] 已经证实辣椒碱诱导的水肿对抗炎类固醇和地塞米松的治疗敏感，这与形成其他 形式的炎症水肿形成对比。Newbold et al,An Investigation into the mechanism of capsaicin-induced edema in rabbit skin，Brit.J.of Pharma.，114,570-577,（1995)〇
[0053] Ferrell等人（Neuroscience Letters 141:259-261,1992)证实将辣椒喊关节腔 内注射到大鼠的膝关节中导致无髓鞘纤维的数量显著地减少，并且这种减少是可逆的。
[0054] 对可注射的辣椒碱制剂和疼痛的治疗程序有一个未满足的要求，这就是将辣椒碱 注射后产生的急性烧灼减小到最小程度。用辣椒素注射进行的临床研究已经显示了辣椒碱 减轻术前和术后疼痛、由关节炎、肌腱炎和其他外科手术引起的疼痛的能力。疼痛疾病最常 用阿片类药物和NSAID来治疗，慢性用途常常由于副作用受到限制。在安全有效的治疗慢性 疼痛的疗法方面还有未满足的需求。
[0055] 发明目的
[0056] 本发明的目的是设计用于提供通过可注射的辣椒素来缓解哺乳动物中的疼痛的 制剂和方法，其克服了施用辣椒素经历的强烈的灼痛。
[0057] 本发明的进一步的目的是提供用于减轻或阻止与辣椒素注射给药相关的灼痛或 刺痛的制剂和方法。
[0058] 本发明的另一个目的是提供含有完全混溶的水性和亲脂性组分的光学透明的溶 液。
[0059] 本发明的另一个目的是提供用于在没有镇静或麻醉(例如神经、脊髓或硬膜外阻 滞)的情况下延长疼痛缓解的制剂和方法，用于一系列的治疗应用。
[0060] 其他目的和益处从下面的说明书来看是显而易见的。

【发明内容】

[0061] 本发明涉及用于在哺乳动物中注射的水性组合物，包括：
[0062] i)0.0002%_0.1% 重量的辣椒素，
[0063] i i )99.9 %-99.9998 %重量的水性载体，所述水性载体包括溶解所述辣椒素的增 溶剂以及在哺乳动物中注射所述组合物时使所述辣椒素从所述水性组合物中的释放减慢 的延长释放剂，
[0064] 其中所述水性载体减少或消除了在注射时所述辣椒素产生的灼热和刺痛。辣椒素 通常为反式辣椒碱。增溶剂可以为聚乙二醇，延长释放剂通常为具有平均分子量约1000千 道尔顿的透明质酸。延长释放剂也可为胶原蛋白、弹性蛋白和可生物降解的聚合物基体。
[0065] 在一个有利的实施例中，所述水性组合物包括：
[0066] 0.005-0.05 %重量的辣椒碱，
[0067] 5-25%重量的聚乙二醇，以及
[0068] 0.2-1 %重量的透明质酸。
[0069] 在其他实施例中，所述水性组合物可包括抗炎性剂、镇痛剂和/或表面活性剂 (.002-2%重量），例如非离子表面活性剂聚氧乙烯40氢化蓖麻油或PS 80。辣椒素与多山梨 醇酯80的重量比可以为1至5。
[0070] 在一个有利的实施例中，所述水性组合物包括：
[0071] 0.005-0.05 %重量的辣椒碱，
[0072] 0.025-0.15%重量的多山梨醇酯80或聚氧乙烯40氢化蓖麻油，
[0073] 0-25%重量的聚乙二醇300或400,以及
[0074] 0.2-1 %重量的透明质酸。
[0075] 本发明还涉及一种用于治疗哺乳动物(例如人)的部位疼痛的方法，包括向所述哺 乳动物施用治疗上有效量的本发明的水性组合物。通常在施用所述组合物之前施用麻醉 剂。在一个实施例中，在施用所述辣椒素组合物后的第一分钟期间，要反复弯曲和伸展该关 节。而且，在施用所述辣椒素组合物之前、期间和/或之后，可向所述部位使用冷却手段。以 约0.1ml至25ml体积的药学上可接受的载体施用辣椒素组合物。
[0076] 本发明还涉及通过关节腔内注射施用辣椒素的试剂盒，包括:a)至少一个单位剂 量的麻醉剂，以及b)至少一个单位剂量的含有辣椒素和透明质酸的辣椒素溶液。该试剂盒 被设置为在辣椒素溶液之前施用所述麻醉剂。该试剂盒可包括用于给药a)和b)的装置，并 可以有给药说明书。
【具体实施方式】
[0077] 本发明的制剂提供了一种用于管理温和到严重的慢性(持续大于3个月）或急性疼 痛的长效的、非阿片类的治疗方案。有效的辣椒素注射疗法必须包括处理辣椒素给药后灼 热疼痛的位置的治疗方式。
[0078] 通过部位特异性的辣椒碱注射引起患有致残慢性疼痛病情的患者中的感觉神经 元的选择性和可逆性的机能丧失，对于长期(数周到数月）缓解疼痛是一种具有吸引力的方 法。然而，由于注射时辣椒碱所引起的强烈的灼痛，采用辣椒碱注射缓解疼痛的关节等的治 疗是非常复杂。
[0079] 本发明公开的辣椒素制剂和方法可被用来治疗/减轻哺乳动物中的疼痛，通常通 过在离散部位注射来提供延长的一段时间的缓解疼痛。以药学上可接受的渗透载体施用制 剂。所述方法和制剂进一步包括以减弱辣椒素给药产生的灼热和痛觉过敏效果的量给药延 长释放剂、抗炎药、镇痛剂和/或麻醉剂。这可以与在辣椒素注射前、期间或之后冷却方法例 如冰袋或凝胶袋的应用结合进行。
[0080] 通过部位特异性的辣椒碱注射引起的感觉神经元的选择性和可逆性的机能丧失 在患有致残慢性疼痛病情的患者中提供了长期(数周到数月）的疼痛缓解，并且没有或仅轻 微的系统性副作用。本发明的辣椒素制剂可在长的时间段里减轻或减弱部位处的疼痛。关 于与关节炎病情(例如骨关节炎)相关的疼痛，在某些实施例中，一个单位剂量的辣椒素注 射或植入减轻部位疼痛至少3个月，至少4个月、5个月或6个月。关于关节疼痛，在某些实施 例中，一个单位剂量的辣椒素注射或植入减轻部位疼痛至少1个月，至少3个月，和3至6个 月，以及大于6个月的时间段，例如6至12个月。关于术后疼痛，一个单位剂量的辣椒素注射 或植入减轻部位疼痛至少1周，并且在某些实施例中至少1个月。
[0081 ]本发明的组合物
[0082]通过将辣椒素掺入到药学上以及生理上可接受的水性载体中制备辣椒素药剂用 来注射、植入、渗透或局部应用进行降低基于应用产生的灼热感。本发明的目的是将非常小 量的辣椒碱注射给药到离散的局部区域来治疗以及减轻疼痛。，显著的益处产生于毫克级 和/或毫克量分数的辣椒碱，目的是通过改变受限区域的感觉神经的功能(TRPV-I)产生治 疗结果。
[0083] 本发明组合物的组分讨论如下 [0084]辣椒素
[0085]对本发明的辣椒素的一般性讨论见美国专利申请2008/0262091，以及共同拥有的 美国系列申请号13/609100,其通过引用全部并入本申请。如在此使用的术语"辣椒素"包括 辣椒碱和除辣椒碱以外的辣椒素即二氢辣椒碱、降二氢辣椒碱、高二氢辣椒碱、高辣椒碱和 香草壬酰胺，以及辣椒碱与一种或多种其他辣椒素的混合物。药物的使用量基于一剂辣椒 碱的治疗上的剂量。辣椒素为制剂的〇.0002-. I %wt，有益的为制剂的0.005-0.05%wt。
[0086]或者，"辣椒碱类似物"（例如树脂毒素）可部分或全部代替辣椒素给药。被施用的 类似物以治疗上与辣椒碱等效剂量的量给药-见美国专利申请2008/0262091，通过引用将 其全部并入于此。在其他的实施例中，在本发明的制剂和方法中使用TRPVl促效药而不是辣 椒素或辣椒碱类似物。
[0087]输送载体
[0088]本发明使用的水性药物组合物为单相水性/水系统的药学上可接受的输送载体， 所述单相水性/水系统包括药学上可接受的溶剂(例如聚乙二醇（如PEG 300和PEG 400)、乙 醇和非离子表面活性剂(例如聚氧乙烯40氢化蓖麻油（克列莫佛RH40)和多山梨醇酯80(PS 80)))。延长释放剂(例如透明质酸)可控制制剂的粘性并有助于制剂的稳定性。公开的水基 制剂的显著的益处为水浓度可超过95wt. %。
[0089] 水性制药载体中的额外组分的示例包括调节渗透压和肌肉弹性的葡萄糖(蔗糖） 和/或氯化钠，以及调节pH的缓冲剂。在辣椒碱/PS 80的水性溶液中包含0.9%NaCl、0.25% 苯酚、0.25 %薄荷醇和5 %葡萄糖不会导致混浊态或形成沉淀。
[0090] 延长释放剂
[0091] 已经发现能够使辣椒素从制剂中缓慢释放出来（引起延长释放）的某些化合物减 少了灼热和刺痛效果。有利地，延长释放剂将会在超过15分钟、30分钟、1小时，或超过4小时 的时间里释放所述辣椒素。在一个实施例中，在超过一周的时间里释放所述辣椒素。通常， 较高的剂量会在更长的时间里被释放出来。在本发明的一个实施例中，所述延长释放剂不 是糖胺聚糖或蛋白聚糖。
[0092] 透明质酸
[0093] 辣椒碱和透明质酸及其盐(天然存在于人体各种组织(皮肤、关节滑膜液和结蹄组 织）中的物质）的增溶有助于改善与局部使用和注射辣椒碱制剂相关的灼热和刺痛。有利 地，使用1%至2%重量的透明质酸或其盐。在本发明中描述的实验测试中使用的透明质酸 的分子量具有800至1200千道尔顿的平均分子量。然而不希望被理论束缚，人们认为向辣椒 碱中加入透明质酸组分会在水溶液中形成多糖网，并引起辣椒碱以可控的方式缓慢地被释 放出来，导致灼热和刺痛的疼痛减轻。在本发明的一个实施例中，所述透明质酸为交联水凝 胶的形式。
[0094] Jj父原蛋白和弹性蛋白
[0095] 胶原蛋白是动物中各种结蹄组织的主要结构蛋白。作为结缔组织的主要组分，其 是哺乳动物中最丰富的蛋白，占据了整个身体蛋白含量的25%至35%。胶原蛋白为细长纤 维的形态，主要见于纤维组织，例如腱、韧带和皮肤，并且在眼角膜、软骨、骨头、血管、肠和 椎间盘中也很丰富。
[0096] 弹性蛋白是结缔组织中的一种蛋白，其具有弹性并让身体中的许多组织在拉伸或 收缩后恢复它们的形状。弹性蛋白帮助被戳或捏的皮肤回到其原来的位置。弹性蛋白还是 脊椎动物身体中的重要的承重组织以及在需要存储机械能的地方使用。
[0097] 与辣椒素一起的胶原蛋白和/或弹性蛋白在治疗包括OA疼痛的疼痛治疗中是有利 的。加入到增溶的辣椒碱制剂中的胶原蛋白和/或弹性蛋白组分可在水溶液中形成蛋白网， 这有助于延迟或延长辣椒碱的释放，从而有助于最小化来自局部应用或注射辣椒碱的灼热 的不舒服感。此外，在用辣椒素注射时，这些天然存在的高分子量蛋白的功能是控制辣椒碱 向神经释放的速率以减轻灼热，提供了滑动骨表面的润滑作用。向含有一种或两种这些天 然存在的高分子量蛋白的辣椒素制剂中添加透明质酸进一步使耐受性和有效性最优化。在 本发明的组合物中，胶原蛋白或弹性蛋白必须为液体或凝胶形式。
[0098] 生物可吸收聚合物基体
[0099]生物可吸收聚合物基体，例如交联氧化葡聚糖水凝胶，也可作为延长释放剂被用 于本发明的制剂中。参见美国专利8435565,其内容通过引用全部结合在本申请中。
[0100] 溶剂
[0101] 聚乙二醇被称为PEG，其作为溶剂、增塑剂、软膏和栓剂的基质，以及在片剂和胶囊 中作为润滑剂被用作非活性组分。PEG具有低毒性，全身吸收小于0.5%。术语"PEG"与数字 结合使用。在制药工业中，所述数字表示平均分子量。低分子量液体聚乙二醇PEG 300和400 为优良的溶剂，并且是大量不易溶于水的物质的共溶剂。因此，它们广泛地被用作活性物质 的溶剂和增溶剂以及液体和半固体制剂中的赋形剂。PEG与活性物质形成复合物的能力使 其具有优良的溶剂能力。聚乙二醇也可被用来调节液体制药制剂的粘度、调节它们的吸收 性能以及稳定制剂。
[0102] 具有平均分子量达400的聚乙二醇在室温下为非挥发性液体。直到PEG600的液体 PEG能与水以任意比例混合。但即使较高分子量的固体PEF等级在水中也有优良的溶解度。
[0103] 聚乙二醇显示出了在急性和慢性口服毒性、胚胎毒性或皮肤兼容性方面的优秀的 毒理学安全性，这通过肠胃外/吸收/排泄研究得到了支持。它们已经在化妆品、食品和制药 工业中使用了很多年。这些化合物中的许多列于FAD非活性成分列表中用于处方产品。本发 明的制剂包括多达25 %重量的溶剂，通常为5-25 %的重量。
[0104] PEG化合物的替代物为聚丙二醇。此外，醇类（包括乙醇、甘油和聚乙烯乙二醇等 等)可作为辣椒素增溶剂被添加到制剂中。
[0105] 表面活性剂
[0106] 表面活性剂，例如非离子表面活性剂，如PS80和/或克列莫佛flRH 40(聚氧乙烯40 氢化蓖麻油）；或者克列莫佛sELP或SolirteeHS 15，可与溶剂(如上面所描述的）或作为溶剂 的替代物一起用于本发明的制剂中。表面活性剂用作润滑剂和乳化剂，并可减轻与辣椒素 给药相关的初始刺痛或灼热的不舒服感。
[0107] 进一步地，可形成用于在共同拥有的美国专利8637569描述中的该发明的制剂和 方法的表面活性剂/辣椒碱(或其他辣椒素)的浓缩物，通过引用所述美国专利8637569的全 部内容并入于此。可在本发明的制剂中使用这些浓缩物。
[0108] 本发明的制剂包括.〇〇 1 -2.5%重量的表面活性剂，通常为0.1-0.5%的重量。
[0109] 镇痛剂和麻醉剂
[0110] 在本发明的制剂中使用镇痛剂组分来改善或预防辣椒碱相关的初始急性灼痛或 刺痛。在本发明中可以使用各种镇痛剂。
[0111] 苯酚和薄荷醇
[0112] 可在被治疗的手术切口、裸露的伤口或注射部位施用苯酚和/或薄荷醇。可在施用 辣椒素之前施用苯酚和薄荷醇，或与辣椒素联合施用。弹丸注射苯酚和薄荷醇浓度的有效 的24小时囊内胶囊浓度对于IOml关节液体注射体积应该为~25μg/ml或~250yg。
[0113] 苯酚和薄荷醇（1)都会快速渗透到与注射剂接触的表面；（2)有助于减少或消除与 TRPVl促效药(例如辣椒碱)给药相关的急性灼痛和刺痛。也可以用丁香油酚。本发明包括使 用特定的可注射的镇痛剂(例如苯酚和薄荷醇），所述镇痛剂具有相对于辣椒碱的快速"起 效"以有效地减缓辣椒碱的灼热感的作用。化合物的起效与其物理化学性质相关，一些药剂 列于表1II中。
[0114] 表1II-所选的镇痛剂的起效和麻醉剂成分
[0116]当伴随给药时，这些具有快速起效的选择的镇痛药的使用有效地减缓了辣椒碱的 灼热效果，而且提供了更直接的辣椒碱相关的疼痛缓解。在本发明的一个实施例中，注射的 镇痛剂具有I60或更小的分子量。辣椒碱提供了更长期/长持久性的与注射镇痛药相关的疼 痛的缓解。
[0117]局部麻醉剂(例如利多卡因）通常添加到关节腔内注射中。它们被用于许多基础医 疗手术中以产生短时间的麻木，包括被用于医生的办公室或医院以麻醉受伤的或需要小外 科手术操作的区域。局部麻醉剂可添加到注射载体中以提供局部的疼痛缓解。麻醉剂的示 例为利多卡因、布比卡因、罗哌卡因、辛可卡因、普鲁卡因、氯普鲁卡因、普鲁卡因、马比佛卡 因、依替卡因、依替卡因和赛罗卡因。有利地，由于化合物起效的不同，在辣椒素给药2-20分 钟之前，施用麻醉剂。
[0118]抗炎剂
[0119]抗炎剂任选地被包括在所述制剂中。
[0120] 非类固醇抗炎药(NSAID)
[0121] 非类固醇抗炎药(例如阿司匹林、萘普生、吲哚美辛、双氯芬酸钠、罗非昔布和布洛 芬)抑制环氧合酶(C0X-2抑制剂），并因此降低前列腺素的合成。前列腺素是过敏和炎症过 程期间被释放出的炎症介质。NSAID完全阻止前列腺素被合成、减少或消除疼痛。
[0122] NSAID抗炎剂(例如双氯芬酸、阿司匹林、布洛芬、萘普生、苯恶洛芬、氟比洛芬、非 诺洛芬以及其他等等)可被添加到可注射组合物中来提供局部的疼痛缓解，同时伴随最小 程度的或无全身吸收。
[0123] 皮质类固醇
[0124] 在本发明的一个实施例中，在辣椒碱之前或同时地施用辅助剂例如皮质类固醇 (糖皮质激素），以减轻来自施用辣椒碱药剂的初始急性灼痛和刺痛。一些最有效的抗炎药 为皮质类固醇。皮质类固醇已经被证实通过抑制引起炎症的物质的产生来减轻炎症。可注 射的皮质类固醇在疼痛管理中被广泛应用。这些药物凭借其抗炎特性可减少或消除疼痛的 病灶。皮质类固醇注射可以很高效，因为其可以直接向炎症的部位输送药物。，皮质类固醇 注射是减轻包括由来自TRPV-I神经末梢的炎症物质由于辣椒碱的存在引起的炎症的有效 的方式。虽然不希望受限于理论，人们认为皮质类固醇给药通过安神和减少某些生物递质 (例如P物质和缓激肽)的炎症反应起作用，其产生于辣椒素给药。
[0125] 有多种皮质类固醇可以使用，包括地塞米松、醋酸甲基强的松龙、甲基泼尼松龙琥 珀酸钠及其混合物。也可以使用本领域技术人员已知的其他等效的皮质类固醇。在一个实 施例中，根据美国专利8637569(其全部内容通过引用并入于此），皮质类固醇的溶解度通过 形成皮质类固醇的浓缩物(例如用PS 80或聚氧化40氢化蓖麻油)来增加。
[0126] 可注射的皮质类固醇能够以水溶性或长效制剂获得。水溶性皮质类固醇通常不被 用于关节腔内注射，因为它们会从注射区域快速地分散开，发挥全身作用。长效制剂会在被 注射的部位保留较长的时间，维持局部效果，对关节注射有益。有各种可以加以使用的长效 皮质类固醇，包括甲基强的松龙醋酸酯、倍他米松磷酸钠、倍他米松醋酸酯、醋酸氢化可的 松、泼尼松龙(tebulate)、曲安奈德、己曲安奈德及其混合物。相比于较高溶解度的化合物， 具有较低溶解度的皮质类固醇具有长时间保持有效的滑膜液水平并产生较低的全身水平 的额外好处。
[0127] 当皮质类固醇与辣椒素一起施用时，所述施用向被治疗的区域提供了灼痛和刺痛 的缓解。皮质类固醇给药与辣椒碱或辣椒碱类似化合物给药产生了较轻的辣椒碱给药的疼 痛，并且在该部位长时间（大于1个月，有利的是大于3个月，最有利的是大于6个月）的缓解 疼痛。
[0128] 在矫形外科中，具有有效抗炎性活性的皮质类固醇与辣椒素一起使用消除了或实 质上减少了来自辣椒素给药的急性疼痛。这可以以安全并有效的方式延长疼痛的缓解。
[0129] 水基辣椒碱可注射制剂-胶束/无
[0130]在表1V中所列的制剂依赖于增溶辣椒碱和镇痛剂的PEG和乙醇、苯酚以及薄荷醇。 需要~15-40重量％PEG和~0-40重量％乙醇的名义上的含量来维持苯酚和薄荷醇的单相 水溶液。
[0131] 表1V-高PEG 300/400辣椒碱制剂(无胶束的）

[0134] 水基辣椒碱可注射制剂-在胶束中含有辣椒碱
[0135] 如在美国专利8637569的实施例V和实施例VIA至VID指出的，在水溶液中含有Img/ ml辣椒碱的组合物需要在水溶液中有10mg/ml的PS80。还需要指出，在PS80浓缩物中每增加 I Omg/m 1，辣椒碱的水溶解度增加约lmg/m 1。
[0136] 然而，共同拥有的美国专利8637569的实施例意外地教导了在水溶液中需要一半 (1/2)的PS 80浓度，即5mg/ml的PS 80溶解lmg/ml的辣椒碱。在相对水不溶的辣椒碱中以 5mg/ml的PS 80获得lmg/ml浓度的比例表明辣椒碱被包含在胶束内。（见实施例1)因此，为 了获得0.06mg/ml的辣椒碱浓度，仅需要0.3gm/ml的PS 80。
[0137] 在表V中引用的制剂依赖于PS 80、苯酚和薄荷醇，所述PS 80通过增溶和胶束剂溶 解辣椒素，并且PEG和乙醇的含量溶解镇痛剂。需要5-20重量％PEG和~0-40重量％乙醇来 维持苯酚和薄荷醇的单相水溶液。
[0138] 表V-PS 80辣椒碱制剂
[0141]在表VI中引用的制剂依赖于溶解辣椒碱和镇痛剂的克列莫佛? RH 40 (或者， 克列莫佛?ELP或Sdute6HS 15)、苯酚和薄荷醇。
[0142] 表VI-克列莫佛1!1 4〇辣椒碱制剂
[0144] 制备本发明制剂的方法
[0145] 在下面的实施例1-6中讨论了制备本发明的制剂的方法。
[0146] 使用本发明的组合物的方法和给药
[0147] 本发明提供了用于治疗疼痛的水性辣椒素制剂的给药。在离散部位、手术部位或 裸露的伤口施用有效量的单剂的辣椒素制剂，以去除注射部位、手术部位（例如腹腔镜检 查)或伤口（例如骨折或韧带撕裂)神经。部位的示例包括关节、肌肉、腱、神经质或肿瘤。
[0148] 本发明的制剂对1)缓解关节腔内部位或体间隙的疼痛;2)减轻随着卸下临床护理 设施的患者所经历的术后疼痛;3)提供有效的术后痛觉缺失，是有用的，从而减少了患者摄 入的镇定剂的量，因此减少了术后康复的时间。
[0149] 本发明的组合物的用途和方法包括但不限于膝盖、肩部、臂部、背部、脊柱、颈、肘 部、手、足的骨科障碍以及在特定部位涉及疼痛的其他障碍。关节腔内给药的示例包括膝 盖、肘部、臂部、腕骨、跗骨、腕、椎间盘、踝以及关节炎状况的其他关节主体的注射。体间隙 的示例包括囊或腹膜。
[0150]骨关节炎(OA)与软骨的减少有关。软骨由称作软骨细胞的特化细胞组成，所述软 骨细胞产生大量的由胶原蛋白纤维组成的细胞外基质、富含蛋白聚糖的丰富的基质以及弹 性蛋白纤维。
[0151] 本发明的组合物可用于管理和延长缓解哺乳动物中与骨关节炎、类风湿性关节 炎、肌腱炎、滑囊炎、术前和术后状况有关的伤害性疼痛，以及用于发生继发性神经损伤的 神经性疼痛。在美国专利8420600和共同拥有的美国系列号13/609100中描述了给药的其他 用途和方法，其全部内容通过引入并入本申请。
[0152] 如在本发明中使用的"注射"的意思是通过皮肤向部位给药。"植入"的意思是通过 嵌入一剂材料到皮肤、肌肉、腱或关节中在部位给药。
[0153] 辣椒碱制剂可通过注射或渗透向部位给药。对于外科手术或伤口，向外科手术或 伤口的部位周围的肌肉、组织或骨头施用药剂。当通过渗透进行辣椒素给药时，根据本领域 技术人员已知的工具将辣椒素施用到手术部位或伤口以通过渗透来给药，例如针及注射 器。
[0154] 如在本发明中使用的"治疗上有效量"是指产生临床所需结果（例如生物应答）的 或减轻疾病或状况的症状(例如减轻或消除疼痛)的药剂的数量或剂量。
[0155] 当通过注射单剂进行辣椒碱给药时，辣椒碱的注射体积取决于给药的局部部位。 被输送的合适的注射体积有利地在约0.1至约20ml，更有利地在约0.5至约IOml，以及最有 利地在约1.0至约5ml，取决于被治疗的部位。
[0156] 接下来是治疗关节痛并最小化或消除可注射辣椒碱的灼热和刺痛效果的本发明 的可注射组合物有益的用途。为了减少感染的风险，对于注射，必须使用无菌技术。皮肤最 先用聚维酮碘或其他合适的防腐剂清洗。
[0157] 注射程序
[0158] 采用下面的程序将辣椒碱制剂注射到关节(例如膝关节）中：
[0159] 1.将针插入到关节，并抽出多余的液体。
[0160] 2.将麻醉剂（1%利多卡因）注射到受影响的关节并允许渗透到周围的关节腔的表 面约5至10分钟。在这段时间里，让主体走动、弯曲以及伸展（屈伸)膝盖来分散利多卡因。有 利的是，在辣椒素制剂给药之前，没有从关节移走麻醉剂。在注射利多卡因之前、期间和/或 之后，任选地将冷却手段(例如冰袋)施用于受影响的膝盖。
[0161] 3.注射利多卡因5至10分钟后，以在5ml溶液中的0.2至0.5mg的剂量注射辣椒碱。 在辣椒碱制剂注射之前、期间和之后，任选地将冰袋或凝胶袋或冷却装置应用于受影响的 膝盖。为了在关节中分散辣椒碱，在第一个1分钟里(有利的为30秒），充分地反复弯曲和伸 展膝关节，而主体在台上检查。也可以让主体走动以及弯曲膝盖。
[0162] 注射辣椒碱后弯曲关节
[0163] 显著地，辣椒碱给药后的第一分钟内，通过屈伸（弯曲和伸展)关节和行走活动关 节有助于使制剂循环，并减轻灼痛和刺痛。
[0164] 冷却
[0165] 通过外部冷却手段(例如冰袋或冷却装置)冷却关节或给药部位也可以减轻辣椒 素给药的疼痛效果。在一个实施例中，冷袋或凝胶袋产生高于结冰的温度，例如38-50华氏 度。
[0166] 本发明的治疗方法使用辣椒碱(例如反式辣椒碱）的剂量范围为0.0 Olmg至1.0 mg， 有利的是0.211^至0.411^。所述方法使用体积约0.11111至251111的水性载体，有利的是5-101111。 用于关节或非关节应用的辣椒素和载体的量根据本领域的技术人员决定而变化。
[0167] 本发明的组合物通过包括0.0002 %-0.1 %重量的辣椒素，有利的是0.01-0.05 % 重量的辣椒素。
[0168] 本发明的制剂和方法提供了缓解疼痛2至5天，有利的是7至21天，或更有利的是6 至8周，或者大于14周(例如大于1个月，有利的是大于3个月，以及最有利的是大于6个月）。
[0169] 可以使用相似的技术来缓解不同于关节痛的疼痛。
[0170] 下面的实施例用作说明，但不限于本发明的组合物和方法。通常会遇到多种条件 和参数的其他合适的改变以及变通，这对本领域的技术人员是显而易见的，在本发明的精 神和范围内。
[0171] 实施例1
[0172] 浓缩的辣椒碱/PS 80溶液的制备
[0173] 美国专利8637569教导了需要5mg/ml的PS 80溶解lmg/ml的辣椒碱，即为了获得 0.06mg/ml的辣椒碱浓度，需要仅0.3gm/ml的PS 80。而且，测定了在胶束中含有相对地水不 溶性的辣椒碱，由于在辣椒碱溶解度方面，每增加 lmg/ml，则需要5mg/ml的PS 80。在购自 Croda公司的高纯度的PS80中增溶辣椒碱方面使用了该专利的教导。.
[0174] 步骤I-辣椒碱和PS 80浓缩物的制备
[0175] 成分包括：
[0176] 10克的多山梨醇酯80(PS 80)，超精，Croda公司，CAS#9005-65-6
[0177] 2克的反式辣椒碱，Aversion Technologies公司，USP 30,95.7%反式-辣椒碱，平 衡顺式辣椒碱
[0178] 程序：
[0179] 1.将10克的PS 80加入到50ml"Pyrex"的玻璃小瓶中。
[0180] 2.将2克的反式辣椒碱加入到步骤1中的PS 80中。
[0181] 3.将步骤2的混合物加热到~125°C以溶解反式辣椒碱从而形成反式辣椒碱/PS80 浓缩物。
[0182] 将少量的辣椒碱颗粒加入到室温的辣椒碱/PS 80溶液中没有导致形成辣椒碱沉 淀，因此表明辣椒碱溶液没有过饱和。获得了意想不到的高浓度水平，即在I.Oml的PS 80中 200mg的辣椒碱(200mg/ml)。将2ml的该辣椒碱/PS 80浓缩物加入到98克的~70°C的水中导 致浑浊的溶液，当溶液混合物冷却到室温时，所述浑浊的溶液逐渐变得完全透明。因此将该 20 %辣椒碱/PS 80浓缩物加入到水中获得了 4mg/ml的水性辣椒碱溶解度水平。相似地，将 I Oml的该辣椒碱/PS80浓缩物加入到90克的~70 °C的水中获得浑浊的溶液，当溶液混合物 冷却到室温时，所述浑浊的溶液逐渐变得完全透明。因此，将该2%辣椒碱/PS 80的浓缩物 加入到水中获得了 20mg/ml的水性辣椒碱的溶解度水平。
[0183] 还需要注意的是，在PS 80浓度每增加5mg/ml，辣椒碱的水性溶解度增加约Img/ ml。不希望受到理论的限制，这表明在PS 80胶束中含有辣椒碱。
[0184] 实施例2
[0185] 200克含有来自实施例1的辣椒碱/PS80浓缩物和透明质酸的水性溶液的制备
[0186] 步骤I-透明质酸溶液的制备
[0187] 成分包括：
[0188] 1 克的透明质酸，M.W· =1000千道尔顿，Lotioncrafter LLC，CAS#9067-32-7
[0189] 191.8克的蒸馏水，Poland Springs
[0190] 程序：
[0191 ] I.向400cc Pyrex烧杯中加入1克的透明质酸。
[0192] 2.向透明质酸中加入191.8克的水，并充分混合直到获得澄清溶液。完全溶解透明 质酸需要更长的时间。
[0?93] 步骤II-0.6mg/ml辣椒碱，3.Omg/ml PS80&5mg/ml透明质酸水溶液的制备
[0194] 成分包括：
[0195] 来自实施例1的7.2克的辣椒碱/PS 80浓缩物
[0196] 来自步骤I的192.8克的透明质酸。
[0197] 程序：
[0198] 1.向步骤I中制备的并包含在400cc Pyrex烧杯内的192.8克的透明质酸溶液中缓 慢加入7.2克实施例1中制备的辣椒碱/PS 80浓缩物，同时充分搅拌。
[0199] 2.为了后续的包装，现在准备好来自步骤1的混合物。
[0200] 在充分混合所述成分之后，获得的混合物完全透明并且为中等粘度。混合物的粘 度可通过改变透明质酸的含量来调节。
[0201] 在PS80中的辣椒碱的高温增溶是重要的。多次尝试将PS80和辣椒碱加入到水中， 接着加热到~70 °C - 90 °C的温度导致只有一部分辣椒碱溶解。
[0202]如前文所描述的，在水性介质中获得增加辣椒碱溶解度水平的能力使得被注射的 辣椒碱的液体体积显著减少。当与PS80(具有胶束增溶作用）表面活性剂相比时，采用PEG-400 的实 验没有获得辣椒碱的 溶解度 水平。
[0203] 实施例3
[0204] 200克的0.06mg/ml辣椒碱可注射溶液(无胶束)的制备
[0205]步骤I -辣椒碱、苯酚、薄荷醇溶液的制备 [0206]成分包括：
[0207] 60克的PEG-300，Spectrum Chemical，NF，CAS#25322-68-3
[0208] 16克的乙醇，Graves Grain Alcohol，190Proof
[0209] 0.2克的苯酚，液化(石碳酸），Spectrum Chemical，USP，CAS#108-95-2
[0210] 0.2克的L-薄荷醇，晶体，Spectrum Chemical，USP，CAS#2216-51-5
[0211] 0.012克的反式-辣椒碱，Aversion Technologies公司，USP 30,95.7%反式辣椒 碱，平衡顺式辣椒碱
[0212]程序：
[0213] 1.将60克的PEG-300加入到400cc Pyrex烧杯中。
[0214] 2.将16克的乙醇加入到PEG-300中并充分混合。
[0215] 3.将0.2克的液化苯酚加入到步骤2的混合物中。
[0216] 4.将0.2克的L-薄荷醇晶体加入到步骤3的混合物中。
[0217] 5.将0.012克的反式-辣椒碱加入到步骤4的混合物中。
[0218] 6.将步骤5的混合物加热到~40 °C以加速形成薄荷醇和辣椒碱的溶液。
[0219] 7.将步骤6中的溶液放置一边，让其冷却到室温。
[0220] 步骤II-透明质酸溶液的制备
[0221] 成分包括：
[0222] 1 克的透明质酸，M.W· =1000千道尔顿，Lotioncrafter LLC，CAS#9067-32-7
[0223] 122.6克的蒸馈水，Poland Springs
[0224] 程序：
[0225] 1.将1克的透明质酸加入到250cc Pyrex烧杯中。
[0226] 2.将122.6克的水加入到透明质酸中并充分混合，直到获得澄清的溶液。完全溶解 透明质酸需要更长的时间，最有可能为30分钟。
[0227] 步骤III -步骤I&步骤II溶液的组合
[0228] 成分包括：
[0229] 来自步骤I的溶液混合物。
[0230]来自步骤II的溶液混合物。
[0231] 程序：
[0232] 1.将来自步骤II的透明质酸溶液缓慢加入到来自步骤I的含有辣椒碱的溶液中， 同时充分搅拌。
[0233] 2.为了后续的包装，现在准备好来自步骤1的混合物。
[0234] 表6含有包含在0.06mg/ml辣椒碱溶液中的成分。
[0235] 实施例4
[0236] 200克的0.06mg/ml辣椒碱/PS 80胶束可注射溶液的制备
[0237] 步骤I-辣椒碱和PS 80溶液的制备
[0238] 成分包括：（注意：为了保证重量精确，制备的辣椒碱/PS 80溶液的量是0.06mg/ml 可注射溶液所需的8倍）
[0239] 2克的多山梨醇酯80(PS 80)，Super refinecUCroda公司，CAS#9005-65-6
[0240] 0.125克的反式辣椒碱，Aversion Technologies公司，USP 30,95.7%反式辣椒 碱，平衡顺式辣椒碱
[0241] 程序：
[0242] 1.将2克的PS 80加入到16ml Pyrex玻璃小瓶中。
[0243] 2.将0.125克的反式-辣椒碱加入到步骤1中的PS 80中。
[0244] 3.将步骤2中的混合物加热到~55°C以溶解反式-辣椒碱，然后形成反式-辣椒碱/ PS 80溶液。
[0245] 步骤II-辣椒碱/PS 80、PEG_300、乙醇、苯酚&薄荷醇溶液的制备
[0246] 成分包括：
[0247] 20mg的PEG PEG-300，Spectrum Chemical，NF，CAS#25322-68-3
[0248] 10克的乙醇，Graves Grain Alcohol，190Proof
[0249] 0.27克的反式-辣椒碱/PS 80solution from STEP I.
[0250] 0.2克的苯酚，液化(石碳酸），Spectrum Chemical，USP，CAS#108-95-2
[0251] 0.2克的L-薄荷醇，晶体，Spectrum Chemical，USP，CAS#2216-51-5 [0252]程序：
[0253] 1.将20克的PEG-300加入到400cc Pyrex烧杯中。
[0254] 2.将10克的乙醇加入到PEG-300中并充分混合。
[0255] 3.将0.27克的反式-辣椒碱/PS 80溶液加入到步骤2的混合物中并充分搅拌。
[0256] 4.将0.2克的液化苯酚加入到步骤3的混合物中。
[0257] 5.将0.2克的L-薄荷醇晶体加入到步骤4的混合物中。
[0258] 6.将步骤5的混合物加热到~40 °C以加速薄荷醇溶液。
[0259] 7.将步骤5的溶液放置在一边，让其冷却到室温。
[0260]步骤III-透明质酸溶液的制备
[0261] 成分包括：
[0262] 1 克的透明质酸，M.W· =1000千道尔顿，Lotioncrafter LLC，CAS#9067-32-7
[0263] 169.5克的蒸馈水，Poland Springs
[0264] 程序：
[0265] 1 ·将1克的透明质酸加入到400cc Pyrex烧杯中。
[0266] 2.将169.5克的水加入到透明质酸中并充分混合直到获得澄清的溶液。完全溶解 透明质酸需要更长的时间。
[0267] 步骤III -步骤I&步骤II溶液的组合
[0268] 成分包括：
[0269] 来自步骤I的溶液。
[0270]来自步骤I的溶液。
[0271] 程序：
[0272] 1.将来自步骤II的透明质酸溶液缓慢加入到来自步骤II的含有辣椒碱的溶液中， 同时充分搅拌。
[0273] 2.为了后续的包装，现在准备好来自步骤1的混合物。
[0274] 表6含有包含在0.06mg/ml辣椒碱溶液内中的成分。
[0275] 实施例5
[0276] 200克的4mg/ml辣椒碱、lmg/ml薄荷醇和lmg/ml苯酸的透明的水性浓缩物的制备 [0277]下面的步骤遵循4mg/ml辣椒碱、lmg/ml薄荷醇和lmg/ml苯酸浓缩物的制备。
[0278] 成分包括：
[0279] 0.40克的反式辣椒碱，Aversion Technologies公司，USP 30,95.7%反式辣椒碱， 平衡顺式辣椒碱
[0280] 0.10克的苯酚，液化(石碳酸），Spectrum Chemical，USP，CAS#108-95-2
[0281] 0.10克的L-薄荷醇，晶体，Spectrum Chemical，USP，CAS#2216-51
[0282] 2克的克列莫彿?RH 40，CAS号61788-85-0,购自Sigma Aldrich(圣路易斯?莫）
[0283] 程序：
[0284] 1.将0.4克的辣椒碱粉末、0.1克的薄荷醇晶体和0.1克的液化苯酚加入到300 cc Pyrex烧杯中。
[0285] 2.将2.0克的克列莫佛gRH 40加入到步骤1的混合物中。
[0286] 3.将步骤2的混合物加热到约125°C。
[0287] 4.将水缓慢加入到来自步骤3的混合物中，同时充分搅拌以提供重达200克的水性 混合物。
[0288] 得到含有4mg/ml辣椒碱、lmg/ml薄荷醇、lmg/ml苯酸和20mg/ml克列莫佛lglRH 40的 光学澄清的水溶液。辣椒碱、薄荷醇和苯酚的混合物与克列莫佛?40表面活性剂的组合重量 比为 1.0/3.33。
[0289] 实施例6
[0290] HA/PEG/辣椒碱注射溶液的制备
[0291] 在可注射制剂中使用的辣椒碱是用于药物用途的高纯合成的反式辣椒碱产品。台 耀化学(Formosa Laboratories)为经过认证的制造商(DMF#16769)。马萨诸塞州的Johnson Compounding of Waltham制备作为无菌液体的辣椒碱注射制剂，Bioventus LLC of Durham，NC供应用于制备无菌辣椒碱-HA注射溶液的无菌透明质酸(HA)制剂，透明质酸钠注 射剂。辣椒碱溶液和透明质酸钠注射剂的制造和发行符合药品生产质量管理规范(GMP)。
[0292] 用溶解于100 %聚乙二醇300 (PEG)的辣椒碱制备辣椒碱溶液。将由此获得的溶液 无菌过滤并无菌地装入5ml的I型玻璃小瓶中，然后密封。辣椒碱溶液的组分和组合物列于 表VII中。
[0293] 表VII-辣椒碱溶液的组分
[0295] 1从台湾的台耀化学获取cGMP 99+wt%反式-辣椒碱
[0296] 2Sigma-Aldrich,圣路易斯?莫（货号#81162)
[0297] 然后将辣椒碱溶液与透明质酸钠注射剂混合。透明质酸钠注射剂为纯的高分子量 (620000-1170000道尔顿）的透明质酸钠(透明质）的无菌的、粘弹性的无热源溶液，pH为 6.8-7.8。每毫升透明质酸钠注射剂含有IOmg溶于生理盐水的玻璃酸钠(玻尿酸）（1.0%溶 液）。透明质酸钠(透明质酸)从鸡冠中提取出来。透明质酸钠(透明质酸)为含有葡糖醛酸重 复双糖单元的聚糖。透明质酸钠注射剂的组分和组合物显示于表VIII。
[0298] 表VIII -透明质酸钠注射剂的组分
[0300]水性辣椒碱-HA无菌注射溶液的辣椒碱的浓度范围为在5ml的无菌注射溶液中 0.2-0.5mg的辣椒碱，并在刚好注射进关节腔内膝关节之前，通过辣椒碱与透明质酸制剂 (透明质酸钠注射剂)混合来制备。
[0301] 实施例7
[0302] HA/PEG/辣椒碱溶液注射到膝盖中
[0303]患有疼痛的膝骨关节炎的72岁男性接受含有1%利多卡因的8ml溶液注射到他的 左膝关节的关节腔内。在5ml的水性辣椒碱-HA无菌溶液关节腔内注射之前，通过行走和膝 关节屈伸约5分钟使利多卡因溶液分布到整个关节腔。通过0.5ml的辣椒碱溶液与4.5ml含 有透明质酸钠注射剂载体的HA混合获得0.2mg辣椒碱的辣椒碱剂量水平。在注射水性辣椒 碱-HA无菌溶液之前，将膝关节预冷约3分钟，在后续的治疗过程中继续进行膝关节冷却。辣 椒碱注射后，立即猛力地屈伸(弯曲和伸展)膝关节约1分钟来将关节腔内的水性辣椒碱-HA 无菌溶液进行分散。疼痛水平一度上升到中等水平，通过休息以及屈伸膝关节快速消退。注 射水性辣椒碱-HA无菌溶液后7分钟，完成程序，主体经历了骨关节炎疼痛症状的完全缓解。 表1X总结了过程疼痛水平作为经过的时间的函数。
[0304]表1X-注射后的膝关节#1
[0305] 0.5ml辣椒碱溶液和4.5ml透明质酸钠注射剂(0.2mg辣椒碱剂量水平）
[0308] 注意:从辣椒碱注射到完全缓解疼痛所经过的时间=7分钟
[0309] 实施例8
[0310] HA/PEG/辣椒碱溶液注射到膝关节中
[0311]在将IOml含有1 %利多卡因的溶液注射到他的左膝关节的关节腔内之前，患有疼 痛膝骨关节炎的74岁男性已经从他的左膝关节移除14cc的液体。在关节腔内注射5ml的水 性辣椒碱-HA无菌溶液之前，通过行走和膝关节屈伸约7分钟使利多卡因溶液分布到整个关 节腔内。通过0.75ml的辣椒碱溶液与4.25ml的含有透明质酸注射剂载体的HA混合获得 0.3mg的辣椒碱剂量水平。在注射辣椒碱-HA无菌溶液之前，预冷膝关节约2分钟，后续的治 疗程序继续进行膝关节的冷却。辣椒碱注射后，立即猛力地屈伸膝关节约1分钟来分散关节 腔内的水性辣椒碱-HA无菌溶液。疼痛水平一度上升到中等水平，通过使用额外的冰敷和膝 关节屈伸快速消退。注射水性辣椒碱-HA溶液后14分钟，完成程序，主体经历了骨关节炎疼 痛症状的完全缓解。表X总结了过程疼痛水平作为经过的时间的函数。
[0312] 表X-注射后的膝关节#2
[0313] 0.75ml辣椒碱溶液&4.25ml透明质酸钠注射剂0.4mg辣椒碱的剂量水平
[0316] 注意:从辣椒碱注射到完全缓解疼痛所经过的时间=14分钟
[0317] 实施例9
[0318] HA/PEG/辣椒碱溶液注射到膝关节中
[0319] 在将含有1 %利多卡因的IOml溶液注射到他的左膝关节的关节腔内之前，患有疼 痛膝骨关节炎疼痛的如实施例8中相同的74岁男性已从他的右膝关节移除Hcc的液体。在 关节腔内注射5ml的水性辣椒碱-HA无菌溶液之前，通过行走和膝关节屈伸约8分钟使利多 卡因溶液分布到整个关节腔内。通过Iml的辣椒碱溶液与4ml的含有透明质酸注射剂载体的 HA混合获得0.3mg的辣椒碱剂量水平。在注射辣椒碱-HA无菌溶液之前，预冷膝关节约2分 钟，在后续的治疗程序中继续进行膝关节的冷却。辣椒碱注射后，立即猛力地屈伸膝关节约 1分钟来分散关节腔内的水性辣椒碱-HA无菌溶液。疼痛水平一度上升到中等水平，通过膝 关节的屈伸和静止快速消退。注射水性辣椒碱-HA溶液后11分钟，完成程序，主体经历了他 的骨关节炎疼痛症状的完全缓解。表XI总结了过程疼痛水平作为经过的时间的函数。
[0320]表XI-注射后的膝关节#3
[0321 ] Iml辣椒碱溶剂&4ml透明质酸钠注射剂0.4mg辣椒碱的剂量水平
[0324] 注意:从辣椒碱注射到完全缓解疼痛所经过的时间=11分钟
[0325] 上文引用的所有文件和文献均通过引用将它们的全部内容在此并入到该申请中。
[0326] 虽然本发明以示例性的实施例进行描述，但本领域的技术人员将理解在没有脱离 本发明的范围情况下，可以进行各种改变，可以等同替换其元素。此外，在没有脱离本发明 的基本范围的情况下，可以根据本发明的教导进行多种修饰来适应特定的情形或材料。因 此，本发明将不会被考虑实施本发明最优的模型公开的特定的实施例所限制，而是本发明 将包括落入所附权利要求内所有的实施例。
【主权项】
1. 一种用于在哺乳动物中注射的水性组合物，包括： O · 0002 %-O · 1 %重量的辣椒素， 99.9 % -99.9998 %重量的水性载体，所述水性载体包括溶解所述辣椒素的增溶剂以及 在哺乳动物中注射所述组合物时使所述辣椒素从所述水性组合物中的释放减慢的延长释 放剂， 其中，所述水性载体减轻或消除了在注射时所述辣椒素产生的灼热和刺痛。2. 根据权利要求1所述的水性组合物，其中所述辣椒素为辣椒碱。3. 根据权利要求1所述的水性组合物，其中所述辣椒素为反式辣椒碱。4. 根据权利要求1所述的水性组合物，其中所述辣椒素为含有非离子表面活性剂的浓 缩物的形式。5. 根据权利要求1所述的水性组合物，其中所述增溶剂选自聚乙二醇-300、聚乙二醇-400和聚丙二醇组成的群组。6. 根据权利要求1所述的水性组合物，其中所述延长释放剂为透明质酸。7. 根据权利要求6所述的水性组合物，其中所述缓释剂为0.5%-1.5%重量的透明质 酸。8. 根据权利要求6所述的水性组合物，其中所述透明质酸具有1000千道尔顿的平均分 子量。9. 根据权利要求6所述的水性组合物，其中所述透明质酸为水凝胶的形式。10. 根据权利要求1所述的水性组合物，其中所述延长释放剂选自胶原蛋白、弹性蛋白 和可生物降解的聚合物基体组成的群组。11. 根据权利要求1所述的水性组合物，包括： 0.005-0.05 %重量的辣椒碱， 5-25%重量的聚乙二醇，以及 0.2-1 %重量的透明质酸。12. 根据权利要求1所述的水性组合物，进一步包括非离子表面活性剂。13. 根据权利要求12所述的水性组合物，其中所述辣椒素为辣椒碱，所述非离子表面活 性剂为聚氧乙烯40氢化蓖麻油。14. 根据权利要求12所述的水性组合物，其中所述辣椒素为辣椒碱，所述非离子表面活 性剂为多山梨醇酯80。15. 根据权利要求14所述的水性组合物，其中辣椒碱与多山梨醇酯80的重量比为1至5。16. 根据权利要求1所述的水性组合物，进一步包括抗炎剂。17. 根据权利要求16所述的水性组合物，其中所述抗炎剂为皮质类固醇。18. 根据权利要求1所述的水性组合物，进一步包括镇痛剂。19. 根据权利要求18所述的水性组合物，其中所述镇痛剂为苯酚、薄荷醇和丁香油酚组 成的群组中的一种或多种。20. 根据权利要求1所述的水性组合物，进一步包括麻醉剂。21. 根据权利要求1所述的水性组合物，包括： 0.005-0.05 %重量的辣椒碱， 0.025-0.15%重量的多山梨醇酯80或聚氧乙烯40氢化蓖麻油， 0-25%重量的聚乙二醇300或400,以及 0.2-1 %重量的透明质酸。22. -种用于治疗哺乳动物部位疼痛的方法，包括： 向所述哺乳动物的所述部位施用治疗有效量的根据权利要求1所述的水性组合物。23. 根据权要求22所述的方法，其中所述哺乳动物为人。24. 根据权要求22所述的方法，其中在施用所述水性组合物之前施用麻醉剂。25. 根据权要求24所述的方法，其中以约0.1ml至25ml体积的药学上可接受的载体施用 所述麻醉剂。26. 根据权要求22所述的方法，其中在施用所述水性组合物之后的第一分钟期间，重复 弯曲和伸展关节。27. 根据权要求22所述的方法，其中在施用所述水性组合物之前、期间和/或之后，向所 述部位使用冷却手段。28. 根据权要求22所述的方法，其中通过注射施用所述水性组合物。29. 根据权要求22所述的方法，其中通过渗透施用所述水性组合物。30. 根据权要求22所述的方法，其中所述疼痛源自伤口或手术部位。31. 根据权要求22所述的方法，其中辣椒素为0.0 Olmg至0.5mg范围的反式辣椒碱水平。32. 根据权要求22所述的方法，其中以约0.1 ml至25ml的体积施用所述水性组合物。33. 根据权要求22所述的方法，其中所述水性组合物包括辣椒素、透明质酸和聚乙二 醇。34. -种用于通过关节腔内注射施用辣椒素的试剂盒，包括： a) 至少一个单位剂量的麻醉剂， b) 至少一个单位剂量的辣椒素溶液，所述辣椒素溶液含有辣椒素和透明质酸， 其中所述试剂盒被设置为在所述辣椒素溶液之前施用所述麻醉剂。35. 根据权利要求34的试剂盒，进一步包括用于施用a)和b)的装置。36. 根据权利要求34的试剂盒，进一步包括给药说明书。37. 根据权利要求34的试剂盒，其中所述辣椒素、透明质酸和麻醉剂被配制在一起。
【文档编号】A61K31/165GK105960230SQ201480071773
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2014年11月12日
【发明人】查尔斯·A·比尔巴拉, 菲利普·J·比尔巴拉, 丹尼尔·巴克斯, 玛丽·库格林
【申请人】Vizuri健康科学有限责任公司