猴耳环提取物在制备抗多重耐药铜绿假单胞菌药物中的应用
【专利摘要】本发明公开了猴耳环提取物在制备抗多重耐药铜绿假单胞菌及该类抗生素增敏药物中的应用。所述的猴耳环提取物由以下方法制备：猴耳环粗粉用水或乙醇水溶液提取，所得的提取液再用乙酸乙酯萃取，所得的萃取物即为目标产品。本发明首次公开猴耳环提取物在制备抗多重耐药铜绿假单胞菌及该类抗生素增敏药物中的应用。可作为天然的抗菌药物或抗生素增敏剂，应用于由铜绿假单胞菌引起的疾病治疗。作为中药提取物还具有低成本、副作用低等优点。
【专利说明】
猴耳环提取物在制备抗多重耐药铜绿假单胞菌药物中的应用
技术领域
[0001] 本发明涉及猴耳环提取物在制备抗耐药菌药物中的新用途。
【背景技术】
[0002] 21世纪是多重耐药菌的时代，抗生素临床应用60年后，越来越多的院内感染和多 重耐药菌感染成为目前临床抗菌治疗的一大难题，1961年Jerons报告第1例临床耐甲氧西 林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染患者，目前MRSA感染已逐渐遍及全球;2011年中国细菌耐药 性监测临床中主要耐药菌的分布，大肠杆菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)株 分别平均为50.7%、38.5%，其耐药性的变迀和现状备受关注。另外据我国卫生部耐药监测 协作组2010年度报告，鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌在医院ICU分离的病原菌中居首位，鲍 曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别高达60.4%和61.4%。综上所述，在MRSA、 产ESBL的各类细菌、多重耐药的鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的临床占有率逐年攀升，耐 药率不断攀高的压力下，抗生素治疗面临着巨大的挑战。为避免细菌耐药现象的进一步恶 化，专家学者力图发现新的抑制细菌生长以及治疗细菌引起疾病的新方法。已有研究报道 证明中国传统中药如黄连、黄苳和连翘等对不同耐药细菌有一定的抑制效果，进一步研究 中药抑制耐药菌生长的重点在于发现新的抑菌能力更强、耐药抑菌谱更广的中药。
[0003] 猴耳环(Pithecellobium clypearia Benth)，学名围诞树，是含羞草科猴耳环属 植物猴耳环的干燥幼枝和叶，其性味苦涩寒，功效清热解毒、收湿敛疮，是治疗多种热毒症 候独特的南方药材
[0004] 目前有文献公开猴耳环以及其提取物具有抗病毒作用。中国专利CN103385912A公 开了猴耳环的提取物具有抗MRSA作用及抗生素增敏作用，但该专利未提及该猴耳环提取物 对多重耐药铜绿假单胞菌的抗菌作用及与抗生素联用的增敏作用。
【发明内容】
[0005] 本发明公开了猴耳环提取物在制备抗多重耐药铜绿假单胞菌及该类抗生素增敏 药物中的应用。
[0006] 猴耳环提取物对左氧氟沙星或亚胺培南或阿米卡星或头孢他啶或头孢哌酮五类 抗生素抗多重耐药铜绿假单胞菌具有明显的增敏作用。
[0007] 所述的猴耳环提取物可以是猴耳环水提取物或猴耳环乙醇提取物。可由以下方法 制备:猴耳环粗粉用水或乙醇水溶液提取，所得的提取液再用乙酸乙酯萃取，所得的萃取物 即为目标产品。
[0008] 本发明优选按体积比计浓度为60%的乙醇水溶液作为提取溶剂所制得的猴耳环 提取物。
[0009] 本发明的有益效果:本发明首次公开猴耳环提取物在制备抗多重耐药铜绿假单胞 菌及该类抗生素增敏药物中的应用。尤其可作为天然的抗菌药物或抗生素增敏剂，应用于 由铜绿假单胞菌引起的疾病治疗，本发明包括药物包括人用药物和其他动物用药物。作为 中药提取物还具有低成本、副作用低等优点。
【具体实施方式】
[0010]本发明通过下述实施方案对猴耳环水或乙醇提取物的抗多重耐药铜绿假单胞菌 的药理作用进行筛选。
[0011] 以微量肉汤稀释法测定猴耳环提取物对多重耐药铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度 (MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。
[0012] 菌株：多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA，编号Pl-P20)20株;铜绿假单胞菌质控菌株 (PAE，ATCC27853)均由中山大学附属第一医院检验医学部临床微生物检验室提供，经中山 大学附属第一医院临床微生物检验室检测确认其耐药性。
[0013] MH肉汤培养基:MH肉汤干粉(英国OXOID LTD.)2.1g，定容至100ml，NA0H调节pH至 7.0，高压灭菌，置4 °C冰箱备用。
[0014]方法:参照美国国立临床试验标准化委员会(NCCLS)推荐的微量肉汤稀释法操作。 [0015]本发明通过下述方法对猴耳环提取物对左氧氟沙星、亚胺培南、阿米卡星、头孢他 啶、头孢哌酮抗多重耐药铜绿假单胞菌的增敏作用进行考察。
[0016] 菌株：多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA，编号Pl-P20)20株;铜绿假单胞菌质控菌株 (PAE，ATCC27853)均由中山大学附属第一医院检验医学部临床微生物检验室提供，经中山 大学附属第一医院临床微生物检验室检测确认其耐药性。
[0017] MH肉汤培养基:MH肉汤干粉(英国OXOID LTD.)2.1g，定容至100ml，NA0H调节pH至 7.0，高压灭菌，置4 °C冰箱备用。
[0018] 方法:参照美国国立临床试验标准化委员会(NCCLS)推荐的棋盘稀释法操作。以下 通过具体的实施例进一步说明本发明的技术方案。
[0019] 实施例1
[0020] 猴耳环提取物的制备方法
[0021 ] 猴耳环(Pithecellobium clypearia Benth)由广州市花城制药厂提供。取适量猴 耳环药材打成粗粉，用水或乙醇回流2次，每次2小时，过滤;合并滤液，浓缩得浸膏（水或乙 醇提取物）。取浸膏用水混悬后，用乙酸乙酯萃取，萃取三次，合并乙酸乙酯萃取液，浓缩得 乙酸乙酯萃取物。
[0022] 所述的乙醇提取物可由10-95 %乙醇回流制得。
[0023] 实施例2
[0024] 猴耳环水提取物抗多重耐药铜绿假单胞菌的抑菌杀菌试验及分别与左氧氟沙星、 亚胺培南、阿米卡星、头孢他啶、头孢哌酮联合的增敏药效考察。
[0025] 1.实验方法
[0026] 1)最低抑菌浓度(MIC)的测定：
[0027] 猴耳环水提取物、左氧氟沙星（LVX)、亚胺培南（MP)、阿米卡星(AMK)、头孢他啶 (CAZ)、头孢哌酮(CFP)分别在MH肉汤培养基中进行一系列倍比稀释，每孔50μ1，调节接种菌 为1.0 X IO6CFlVml，每孔50μ1菌液。35 °C培养;24小时，无沉淀出现的最低抗菌药物的浓度 为其最低抑菌浓度(MIC)。
[0028] 2)最低杀菌浓度(MBC)的测定：
[0029] 采用平板涂布计数法，从1)项无菌生长的孔中吸取50ul菌悬液至血平板上，均匀 涂布，35 °C培养24小时，菌落计数，使最初的实验活菌数减少99.9 %或以上所需要的最低抗 菌药物的浓度为其最低杀菌浓度(MBC)。
[0030] 通过测定药物的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)，并对数据进行统计得 出[(：5()、]\0(： 9()、冊(：5()、]\^(：9()，来评价药物抗多重耐药铜绿假单胞菌的作用。
[0031] 3)棋盘稀释法：
[0032]棋盘稀释法在96孔无菌培养板中进行，将猴耳环水提取物及左氧氟沙星(LVX)、亚 胺培南（MP)、阿米卡星(AMK)、头孢他啶(CAZ)、头孢哌酮(CFP)分别在MH肉汤培养基中倍比 稀释成系列浓度，以两药各自1/4MIC到4MIC分别进行联合，每孔A药B药各加25yL，调整菌悬 液的浓度为I .OX l〇6CFU/ml，每孔接种50yL菌液，35°C孵育24h后观察A药B药联合后对多重 耐药铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)。 _3] fic指数的计算:孤====+譴，廳體部分抑菌 指数(FIC)来评价猴耳环水提取物与抗生素联合抗菌的相互作用，FICS0.5为协同作用， 0.5<FIC< 1为相加作用，1<FIC<2为无关作用，FIC>2为拮抗作用；并根据无菌生长孔找出 猴耳环水提取物和抗生素的最佳浓度配比，最终评价猴耳环水提取物增强抗生素效力的作 用。
[0034] 2.实验结果
[0035]猴耳环水提取物及五种抗生素（左氧氟沙星、亚胺培南、阿米卡星、头孢他啶、头孢 哌酮)对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑菌试验结果见表1。
[0036] 猴耳环水提取物对多重耐药铜绿假单胞菌的体外杀菌试验结果见表2。
[0037] 经过统计分析，猴耳环水提取物及五种抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑 菌和杀菌的MIC50、MIC90见表3。
[0038]经过统计分析，猴耳环提取物对多重耐药铜绿假单胞菌的杀菌的MBC5Q、MBC9Q见表 4〇
[0039] 猴耳环水提取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值及FIC值的分布统计结果 见表5、表6〇
[0040] 猴耳环水提取物对五种抗生素的增敏作用及联用后其MIC5Q、MIC9Q见表7-表12。
[0041] 表1猴耳环水提取物及五种抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌体外抑菌试验结果
[0069] 猴耳环水提取物单用对多重耐药铜绿假单胞菌的MIC50为800μg/ml，MIC90为1600 μg/ml，MBC50为1600μg/ml，MBC90为1600μg/ml;
[0070] 对20株多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环水提取物与头孢他啶联用的FIC均<2表明 两药无拮抗作用，其中有45%FIC值<0.5呈协同作用;对20株多重耐药多重耐药铜绿假单 胞菌，猴耳环水提取物在浓度彡单用MIC时，使头孢他啶MIC50从单用的32μg/ml降至8μg/ ml，降低了75% ;MIC90从256μg/ml降至64μg/ml，降低75% ;
[0071] 猴耳环水提取物与头孢哌酮联用对20株多重耐药铜绿假单胞菌FIC均<2表明两 药两药无拮抗作用，其中35%FIC值<0.5呈协同作用;对20株多重耐药多重耐药铜绿假单 胞菌，猴耳环水提取物在浓度彡单用MIC时，使头孢哌酮MIC50从单用的64μg/ml降至0.5yg/ ml，降低了99.2% ;MIC90从512μg/ml降至256μg/ml，降低50% ;
[0072] 猴耳环水提取物与阿米卡星联用FIC均<2表明两药没有拮抗作用，其中35%FIC <0.5呈协同作用;对20株多重耐药多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环水提取物在浓度 < 单用 MIC时，使阿米卡星MIC50从单用的lμg/ml降至0.0625μg/ml，降低了93.75% ;MIC90从32yg/ ml 降至2μg/ml，降低93.75% ;
[0073] 猴耳环水提取物与亚胺培南联用后FIC均<2表明两药没有拮抗作用，其中40% FICS0.5呈协同作用;对20株多重耐药多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环水提取物在浓度< 单用MIC时，使亚胺培南MIC50从单用的32μg/ml降至2μg/ml，降低了93·75% ;MIC90从64yg/ ml降至 16μg/ml，降低75% ;
[0074] 猴耳环水提取物与左氧氟沙星联用抗20株多重耐药铜绿假单胞菌，FIC均<2表明 两药无拮抗作用，其中15%FIC值<0.5表明两药有一定程度的协同作用;对20株多重耐药 多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环水提取物在浓度 < 单用MIC时，使左氧氟沙星MIC50从单用 的4μg/ml降至lμg/ml，降低了75% ;MIC90从32μg/ml降至8μg/ml，降低75%。
[0075] 实施例3
[0076] 猴耳环10%乙醇提取物抗多重耐药铜绿假单胞菌的抑菌杀菌试验及分别与左氧 氟沙星、亚胺培南、阿米卡星、头孢他啶、头孢哌酮联合的增敏药效考察。
[0077] 1.实验方法:按本发明实施例2项下方法测定并评价。
[0078] 2.实验结果：
[0079]猴耳环10%乙醇提取物及五种抗生素（左氧氟沙星、亚胺培南、阿米卡星、头孢他 啶、头孢哌酮)对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑菌试验结果见表13。
[0080] 猴耳环10%乙醇提取物对多重耐药铜绿假单胞菌的体外杀菌试验结果见表14。
[0081] 经过统计分析，猴耳环10%乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌的 体外抑菌和杀菌的MIC50、MIC90见表15。
[0082]经过统计分析，猴耳环提取物对多重耐药铜绿假单胞菌的杀菌的MBC5Q、MBC9Q见表 16。
[0083]猴耳环10%乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值及FIC值的分布统 计结果见表17、表18。
[0084] 猴耳环10%乙醇提取物对五种抗生素的增敏作用及联用后其MIC5Q、MIC 9Q见表19- 表24。
[0085]表13猴耳环10%乙醇提取物及五抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌体外抑菌试验 结果
[0090]表15猴耳环10%乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑菌 的MIC5Q、MIC9Q统计结果
[0113] 猴耳环10%乙醇提取物单用对多重耐药铜绿假单胞菌的[050为80(^8/1111，11090 为1600μg/ml，MBC50为1600μg/ml，MBC90为1600μg/ml;
[0114] 对20株多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环10%乙醇提取物与头孢他啶联用的FIC均 <2表明两药无拮抗作用，其中有35%FIC值<0.5呈协同作用;对20株多重耐药多重耐药铜 绿假单胞菌，猴耳环10%乙醇提取物的在浓度 < 单用MIC时，使头孢他啶MIC50从单用的32μ g/ml降至 16μg/ml，降低了50% ;MIC90从256μg/ml降至64μg/ml，降低75% ;
[0115] 猴耳环10%乙醇提取物与头孢哌酮联用对20株多重耐药铜绿假单胞菌FIC均<2 表明两药两药无拮抗作用，其中35%FIC值<0.5呈协同作用；对20株多重耐药多重耐药铜 绿假单胞菌，猴耳环10%乙醇提取物在浓度彡单用MIC时，使头孢哌酮MIC50从单用的64yg/ ml降至4μg/ml，降低了93.75% ;MIC90从512μg/ml降至256μg/ml，降低50% ;
[0116] 猴耳环10%乙醇提取物与阿米卡星联用FIC均<2表明两药没有拮抗作用，其中 30%FIC<0.5呈协同作用；对20株多重耐药多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环10%乙醇提取 物在浓度彡单用MIC时，使阿米卡星MIC50从单用的lμg/ml降至0.0625μg/ml，降低了 93.75% ;MIC90从32μg/ml降至4μg/ml，降低87.5% ;
[0117]猴耳环10%乙醇提取物与亚胺培南联用后FIC均<2表明两药没有拮抗作用，其中 50%FIC<0.5呈协同作用；对20株多重耐药多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环10%乙醇提取 物的乙酸乙酯萃取物在浓度彡单用MIC时，使亚胺培南MIC50从单用的32μg/ml降至2μg/ml， 降低了 93.75%;]\〇090从64以8/1111降至16以8/1111，降低75%;
[0118] 猴耳环10%乙醇提取物与左氧氟沙星联用抗20株多重耐药铜绿假单胞菌，FIC均 <2表明两药无拮抗作用，其中15%FIC值<0.5表明两药有一定程度的协同作用;对20株多 重耐药多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环15%乙醇提取物在浓度 < 单用MIC时，使左氧氟沙星 10〇50从单用的4以8/1111降至叫8/1111，降低了75%;]\0090从32以8/1111降至4以8/1111，降低87.5%。
[0119] 实施例4
[0120]猴耳环60%乙醇提取物抗多重耐药铜绿假单胞菌的抑菌杀菌试验及分别与左氧 氟沙星、亚胺培南、阿米卡星、头孢他啶、头孢哌酮联合的增敏药效考察。
[0121 ] 1.实验方法:按本发明实施例2项下方法测定并评价。
[0122] 2.实验结果：
[0123] 猴耳环60%乙醇提取物及五种抗生素（左氧氟沙星、亚胺培南、阿米卡星、头孢他 啶、头孢哌酮)对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑菌试验结果见表25。
[0124] 猴耳环60%乙醇提取物对多重耐药铜绿假单胞菌的体外杀菌试验结果见表26。
[0125] 经过统计分析，猴耳环60%乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌的 体外抑菌和杀菌的MIC50、MIC90见表27。
[0126] 经过统计分析，猴耳环提取物对多重耐药铜绿假单胞菌的杀菌的MBC5Q、MBC9Q见表 28 〇
[0127] 猴耳环60%乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值及FIC值的分布统 计结果见表29、表30。
[0128] 猴耳环60%乙醇提取物对五种抗生素的增敏作用及联用后其MIC5Q、MIC 9Q见表31-表36 〇
[0129] 表25猴耳环60%乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌体外抑菌试 验结果
[0134] 表27猴耳环60%乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑菌 的MIC5Q、MIC9Q统计结果
[0140]表30猴耳环60 %乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验FIC值的分布统计结果
[0145] 表32猴耳环60%乙醇提取物对头孢哌酮的增敏作用及联用后的MIC
[0157] 猴耳环60%乙醇提取物单用对多重耐药铜绿假单胞菌的MIC50为400μg/ml，MIC90 为800μg/ml，MBC50为1600μg/ml，MBC90为1600μg/ml;
[0158] 对20株多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环60%乙醇提取物与头孢他啶联用的FIC均 <2表明两药无拮抗作用，其中有40%FIC值<0.5呈协同作用;对20株多重耐药多重耐药铜 绿假单胞菌，猴耳环60%乙醇提取物在浓度 < 单用MIC时，使头孢他啶MIC50从单用的32yg/ ml降至8μg/ml，降低了75% ;MIC90从256μg/ml降至64μg/ml，降低75% ;
[0159] 猴耳环60%乙醇提取物与头孢哌酮联用对20株多重耐药铜绿假单胞菌FIC均<2 表明两药两药无拮抗作用，其中20%FIC值<0.5呈协同作用；对20株多重耐药多重耐药铜 绿假单胞菌，猴耳环60%乙醇提取物在浓度 < 单用MIC时，使头孢哌酮MIC50从单用的64yg/ ml降至4μg/ml，降低了93.75% ;MIC90从512μg/ml降至256μg/ml，降低50% ;
[0160] 猴耳环60%乙醇提取物与阿米卡星联用FIC均<2表明两药没有拮抗作用，其中 20%FIC<0.5呈协同作用；对20株多重耐药多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环60%乙醇提取 物在浓度彡单用MIC时，使阿米卡星MIC50从单用的lμg/ml降至0.0625μg/ml，降低了 93.75% ;MIC90从32μg/ml降至2μg/ml，降低93.75% ;
[0161] 猴耳环60%乙醇提取物与亚胺培南联用后FIC均<2表明两药没有拮抗作用，其中 15%FIC<0.5呈协同作用；对20株多重耐药多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环60%乙醇提取 物在浓度彡单用MIC时，使亚胺培南MIC50从单用的32μg/ml降至2μg/ml，降低了93.75% ; MIC90从64μg/ml降至 16μg/ml，降低75% ;
[0162] 猴耳环60%乙醇提取物与左氧氟沙星联用抗20株多重耐药铜绿假单胞菌，有4株 FIC大于2呈拮抗作用，其中10%FIC值<0.5表明两药有一定程度的协同作用;对20株多重 耐药多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环60%乙醇提取物在浓度<单用MIC时，使左氧氟沙星 MIC50 从单用的 4μg/ml 降至 lμg/ml，降低了 75%;MIC90 从 32μg/ml 降至 8μg/ml，降低 75%。
[0163] 实施例5
[0164] 猴耳环95%乙醇提取物抗多重耐药铜绿假单胞菌的抑菌杀菌试验及分别与左氧 氟沙星、亚胺培南、阿米卡星、头孢他啶、头孢哌酮联合的增敏药效考察。
[0165] 1.实验方法:按本发明实施例2项下测定并评价。
[0166] 2.实验结果：
[0167] 猴耳环95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物及五种抗生素(左氧氟沙星、亚胺培南、 阿米卡星、头孢他啶、头孢哌酮)对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑菌试验结果见表13。
[0168] 猴耳环95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物对多重耐药铜绿假单胞菌的体外杀菌 试验结果见表14。
[0169] 经过统计分析，猴耳环95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物及五种抗生素对多重耐 药铜绿假单胞菌的体外抑菌和杀菌的MIC50、MIC90见表15。
[0170] 经过统计分析，猴耳环提取物对多重耐药铜绿假单胞菌的杀菌的MBC5Q、MBC9Q见表 16。
[0171]猴耳环95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物与五种抗生素的联合药敏试验的FIC值 及FIC值的分布统计结果见表17、表18。
[0172]猴耳环95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物对五种抗生素的增敏作用及联用后其 MIC5q、MIC9〇 见表 19-表 24。
[0173]表37猴耳环95%乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌体外抑菌试 验结果
[0178]表39猴耳环95%乙醇提取物及五种抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑菌 的MIC5Q、MIC9Q统计结果
[0184]表42猴耳环95%乙醇提取物与五种抗生素的联合药敏试验FIC值的分布统计结果
[0189] 表44猴耳环95%乙醇提取物对头孢哌酮的增敏作用及联用后的MIC
[0201] 猴耳环95%乙醇提取物单用对多重耐药铜绿假单胞菌的[050为80(^8/1111，11090 为800μg/ml，MBC50为1600μg/ml，MBC90为1600μg/ml;
[0202] 对20株多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环95%乙醇提取物与头孢他啶联用的FIC均 <2表明两药无拮抗作用，其中有25%FIC值<0.5呈协同作用;对20株多重耐药多重耐药铜 绿假单胞菌，猴耳环95%乙醇提取在浓度彡单用MIC时，使头孢他啶MIC50从单用的32μg/ml 降至 16μg/ml，降低了50% ;MIC90从256μg/ml降至 128μg/ml，降低50% ;
[0203] 猴耳环95%乙醇提取物与头孢哌酮联用对20株多重耐药铜绿假单胞菌FIC均<2 表明两药两药无拮抗作用，其中40%FIC值<0.5呈协同作用；对20株多重耐药多重耐药铜 绿假单胞菌，猴耳环95%乙醇提取物在浓度 < 单用MIC时，使头孢哌酮MIC50从单用的64yg/ ml 降至 4μg/ml，降低了 93.75%;]\〇090从512以8/1111降至128以8/1111，降低75% ;
[0204]猴耳环95%乙醇提取物与阿米卡星联用FIC均<2表明两药没有拮抗作用，其中 40%FIC<0.5呈协同作用；对20株多重耐药多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环95%乙醇提取 物在浓度彡单用MIC时，使阿米卡星MIC50从单用的lμg/ml降至0.12μg/ml，降低了87.5% ; 1〇〇90从32以8/1111降至4以8/1111，降低87.5%;
[0205]猴耳环95%乙醇提取物与亚胺培南联用后FIC均<2表明两药没有拮抗作用，其中 40%FIC<0.5呈协同作用；对20株多重耐药多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环95%乙醇提取 物在浓度彡单用MIC时，使亚胺培南MIC50从单用的32μg/ml降至4μg/ml，降低了 75%;MIC90 从64μg/ml降至 16μg/ml，降低75% ;
[0206]猴耳环95%乙醇提取物与左氧氟沙星联用抗20株多重耐药铜绿假单胞菌，FIC均 <2表明两药无拮抗作用，其中10%FIC值<0.5表明两药有一定程度的协同作用;对20株多 重耐药多重耐药铜绿假单胞菌，猴耳环15%乙醇提取物在浓度 < 单用MIC时，使左氧氟沙星 10〇50从单用的4以8/1111降至叫8/1111，降低了75%;]\0090从32以8/1111降至4以8/1111，降低87.5%。
【主权项】
1. 猴耳环提取物在制备抗多重耐药铜绿假单胞菌药物中的应用。2. 猴耳环提取物在制备抗生素抗多重耐药铜绿假单胞菌增敏药物中的应用。3. 如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的抗生素是左氧氟沙星或亚胺培南或阿 米卡星或头孢他啶或头孢哌酮。4. 如权利要求1或2或3所述的应用，其特征在于，所述的猴耳环提取物是猴耳环水提取 物或猴耳环乙醇提取物。5. 如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的猴耳环水提取物水或猴耳环乙醇提取 物由以下方法制备:猴耳环粗粉用水或乙醇水溶液提取，所得的提取液再用乙酸乙酯萃取， 所得的萃取物即为目标产品。6. 如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的乙醇水溶液是按体积比计浓度为 10%-95%的乙醇水溶液。7. 如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的乙醇水溶液是按体积比计浓度为60 % 的乙醇水溶液。
【文档编号】A61K36/48GK105963339SQ201610308716
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年5月10日
【发明人】王永刚, 刘翀, 周倩, 李沛波, 苏薇薇, 彭维
【申请人】中山大学