Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2-甲硫基乙基)胺基衍生物的组合物在抗缺氧药物中 ...的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的组合物在抗缺氧药物中的应用，本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及一种Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的组合物及其在抗缺氧药物上的用途。本发明公开了一种Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的组合物及其制备方法。药理学实验表明，本发明的组合物具有抗缺氧作用，具有开发抗缺氧药物的价值。
【专利说明】
Sa IV i sk i none A的苯并咪性基和二(2-甲硫基乙基)胺基衍生 物的组合物在抗缺氧药物中的应用
技术领域
[0001] 本发明设及有机合成和药物化学领域，具体设及组合物、制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 氧是人类及许多生物赖W生存的重要条件。低氧化ypoxia)是指机体生命活动所 需的氧不能得到充足的供给。氧和低氧是生命活动最重要的关键因素，是生命科学基本理 论的重要课题。低氧的形成可分为Ξ类:第一类是外界环境氧含量降低，使正常生理活动过 程不能摄取足够氧，如高原和航空缺氧;第二类是指因疾病等导致外界正常氧量不能充分 到达机体内，造成屯、、脑和呼吸系统等的缺氧;第Ξ类是机体活动所需氧消耗量，超过了生 理动员能力，造成相对氧供给不足，常见于剧烈运动和超限量劳动。长期低氧是危害人体健 康的重要隐患，严重者可危及生命。因此，低氧造成屯、、脑和呼吸系统等损伤已成为21世纪 医学界急待解决的主要问题之一。
[0003] 从天然产物中寻找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其衍生物，从而得到 高效低毒的潜在药物最有重要价值。
[0004] 本发明设及的化合物I是一个2011年发表（Ayumi Ohsaki et al.， 2011 . Salviskinone A,a diterpene with a new skeleton from Salvia 口^6￥日131^;[.了日化日11日化0]11日1:1日'3 52(2011)1375-1377)的化合物，我们对化合物1进行 了结构修饰，获得了两个新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV 制备了组合物并对该组合物的抗缺氧活性进行了评价，其具有抗缺氧活性。
【发明内容】
[0005] 本发明公开了一个新的组合物，该组合物由化合物ΙΠ 和化合物IV组成，该组合物 中化合物ΠI和化合物IV的质量百分数分别为15 %和85 %。
[0006]
[0007] 本发明公开的化合物可W制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。
[0008] 药效学实验表明，本发明的组合物具有较好的抗缺氧作用。本发明的药学上可接 受的盐具有同样的药效。
[0009] W下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加 W限定。
【具体实施方式】
[0010] 实施例1化合物Salviskinone A的制备
[0011] 化合物Salviskinone A(I)的制备方法参照Ayumi Ohsaki等人发表的文献(Ayumi Ohsaki et al.,2011.Salviskinone A,a diterpene with a new skeleton from Salvia przewalskii.Tetr址e化on Letters 52(2011)1375-1377)的方法。
[0012]
[0013] 实施例2 Salviskinone A的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0014] 将化合物I(312mg，1.00mmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四下基漠化锭（TBAB) (0.08g)，1，2-二漠乙烧(3.760g，20.0 Ommol)和6mL的50%氨氧化钢溶液。混合物在35摄氏 度揽拌12h"12h之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烧萃取两次，合并有机相溶液。然 后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涂4次，再用无水硫酸钢干燥，最后减压浓缩去除 溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化(流动相为:石油酸/丙酬=100:1.5，v/v)， 收集栋色集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物II的栋色粉末(327mg，78%)。
[001 引 iHMffi(500MHz，DMS0-d6)S6.63(s，lH)，6.37(s，lH)，5.81(s，lH)，4.51(s，2H), 3.84(s，lH)，3.79(s，2H)，2.15(s，lH)，2.04(s，lH)，1.91(s，lH)，1.65(s，lH)，1.39(s，3H), 1.08(3,6扣，0.99(3，細）.
[0016] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl88.07(s),183.70(s),154.38(s),147.57(s),140.21 (s),136.40(s),134.71(s),131.25(s),128.40(s),118.83(s),72.12(s),45.49(s),37.54 (s),33.58(s),31.78(s),26.17(s),25.12(s),24.66(s),23.51(s),23.17(s),22.65(s).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M+扣+calcd for C2抽2泌r03:419.1222;found 419.1220.
[001 引
[0019] 实施例3 Salviskinone A的0-(苯并咪挫基）乙基衍生物（III)的合成
[0020] 将化合物II(209mg，0.5mmo 1)溶于20mL乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟(345mg， 2.5mmo 1)，舰化钟（84mg，0.5mmo 1)和苯并咪挫（1180mg，1 Ommo 1)，混合物加热回流化。反应 结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烧萃取Ξ次，合并有机相。依次用水和饱和食盐 水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗 品用硅胶柱层析纯化(流动相为:石油酸/丙酬= 100:1.5，v/v)，收集栋色集中洗脱带，浓缩 即得到化合物ΠI的栋色固体(215mg，43 % )。
[00別]1h 醒R(500MHz，DMS0-d6)S8.15(s，lH),7.54(d，J=25.0Hz，2H),7.15(s，lH), 7.06(s，lH)，6.33(d，J = 84.1Hz，lH)，6.26(s，lH)，5.66(s，lH)，4.38(d，J=15.8Hz，4H)， 3.57(3，1扣，1.96(3，1扣，1.90(3，1扣，1.77(3，把），1.51(3，1扣，1.20(3,3扣，0.99(3，細）， 0.81(3，細）.
[0022] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl87.90(s),183.51(s),154.17(s),147.37(s),146.27 (s),139.98(s),139.63(s),136.22(s),134.51(s),133.48(s),131.05(s),128.18(s), 123.93(s)，123.35(s)，118.56(d，J = 9.細z)，110.85(s)，68.55(s)，45.29(s)，44.74(s)， 37.34(s),33.36(s),25.96(s),24.94(s),24.46(s),23.32(s),22.96(s),22.42(s).
[0023] HRMS化SI):m/z[M+H]+calcd for C2姐33化〇3:457.2491;found:457.2493。
[0024]
[00巧]实施例4 Salviskinone A的0-(二径乙胺基）乙基衍生物的合成
[0026] 将化合物II(209mg，0.5mmo 1)溶于30mL乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟(690mg， S.Ommol)，舰化钟（252mg，1.5mmol)和二乙醇胺（1051mg，lOmmol)，混合物加热回流9h。反应 结束后将反应液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲烧萃取2次，合并有机相。依次用水和饱和 食盐水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗品。产 物粗品用硅胶柱层析纯化(流动相为:石油酸/丙酬= 100:0.5，v/v)，收集黄色集中洗脱带 并挥去溶剂即得到Salviskinone A的0-(二径乙胺基）乙基衍生物的淡黄色固体（159.5mg， 72%)。
[0027] 1h 醒R(500MHz，DMS0-d6)S6.52(s，lH)，6.40(s，lH)，5.71(s，lH)，4.15(s，2H), 3.70(s，lH)，3.37(s，4H)，3.00(s，2H)，2.50(s，4H)，2.07(s，lH)，1.96(s，lH)，1.83(s，lH), 1.57((1，1 = 1.4化，3扣，1.30(3,3扣，0.99(3，細），0.90(3,6扣.
[002引"C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl88.01(S),183.52(s),154.08(s),147.15(s),140.11 (s),136.23(s),134.42(s),130.84(s),128.31(s),118.62(s),68.93(s),58.73(s),56.61 (s),53.94(s),45.20(s),37.13(s),33.49(s),25.96(s),24.84(s),24.26(s),23.43(s), 22.97(s),22.33(s).
[0029] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C26出8N〇5:444.2750;found:444.2746。
[0030]
[0031 ] Salviskinone A的〇-(二径乙胺基）乙基衍生物
[0032] 实施例5 Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物的合成
[0033] 将实施例4制备的Salviskinone A的0-(二径乙胺基）乙基衍生物（0.222邑， 0.5mmol)溶于6mL氯仿，逐滴加入氯化亚讽(0.238g，2mmol)，反应物加热回流化。将反应物 冷却至室溫，滴加甲醇分解过量的氯化亚讽，减压浓缩除去溶剂。产物经硅胶柱层析纯化 (石油酸/丙酬100:0.3，v/v)，得到Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物的淡黄色 固体（170.0mg，71%)。
[0034] 1h NMR(500MHz，Chloroform-dl)S6.51(s，lH)，6.22(s，lH)，5.72(s，lH)，4.16(s, lH),3.66(s,lH),3.44(s,4H),3.01(s,2H),2.80(s,2H),2.64(s,2H),2.04(s,lH),1.98(s, lH)，1.85(s，lH)，1.59(s，lH)，1.28(s，3H)，0.97(s，6H)，0.93(s，細）.
[003引"C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl87.90(s),183.41(s),153.97(s),147.04(s),140.00 (s),136.12(s),134.31(s),130.73(s),128.20(s),118.51(s),68.82(s),55.57(s),53.94 (s),45.20(s),39.10(s),37.02(s),33.39(s),25.87(s),24.76(s),24.19(s),23.33(s), 22.88(s),22.25(s).
[0036] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C2姐36Ci2N03:480.2072;found:480.2070。
[0037]
[003引 Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物
[0039] 实施例6 Salviskinone A的0-(二(2-甲硫基乙基)胺基）乙基衍生物的合成
[0040] 将实施例5制备的Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物（0.240邑， 0.5mmo 1)溶于15mL乙醇，室溫下加入甲硫醇钢(0.2Ig，3mmo 1)，反应物加热回流化。减压浓 缩除去溶剂，所得产物用硅胶柱层析进行纯化(石油酸/丙酬100:0.5，v/v)，得到黄色固体 物，即化合物 IV(〇.169g，67%)。
[004U 1h NMR(500MHz，Chloroform-dl)S6.48(s，lH)，6.41(s，lH)，5.65(s，lH)，4.12(s, 2H)，3.99(s，lH)，2.94(s，2H)，2.53(d，J=15.4Hz，8H)，1.99(s，lH)，1.94(s，6H)，1.90(s， 1扣，1.77(3，1扣，1.51(3，1扣，1.23(3,3扣，0.92(3,6扣，0.83(3，細）.
[0042] 1化 NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl87.81(s),183.42(s),154.08(s),147.28(s),139.90 (s),136.12(s),134.44(s),130.96(s),128.09(s),118.53(s),68.94(s),53.83(s),52.15 (s),45.21(s),37.24(s),33.29(s),31.87(s),25.85(s),24.86(s),24.38(s),23.21(s), 22.88(s),22.34(s),14.38(s).
[0043] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C2姐42N〇3S2:504.2606;found:504.2603。
[0044]
[0045] 实施例7小鼠特异性屯、肌缺氧实验
[0046] 1、方法：
[0047] 组合物的制备：将研磨之后过200目网的15mg化合物III的粉末和研磨之后过200 目网的85mg化合物IV的粉末装入带盖的小管中并用满轮揽拌仪混合即得到lOOmg组合物， 使用时用水溶解运lOOmg的组合物即得到组合物的溶液。
[004引50只昆明小鼠，体重(20±2)g。随机分为5组，灌胃给药。前2组给予0.3%簇甲基纤 维素钢(CMC-Na)溶液，后3组分贝给予化合物III、化合物IV和组合物，50min后，除第1组外， 均腹腔注射异丙肾上腺素（IS0)15mg · Kg-i，15min后，将小鼠放入常压缺氧装置中，记录小 鼠死亡时间及耗氧量。
[0049] 结果；
[0050] 异丙肾上腺素可通过兴奋屯、脏β受体，使屯、肌耗氧量增加。本实验显示，与溶媒对 照组相比，组合物O.OlOg · Kg-i能显著对抗异丙肾上腺素 （ISO)导致的屯、肌耗氧量增加 (Ρ< 0.01)，同时延长小鼠缺氧密闭状态下的存活时间（P<〇.01)，结果见表1。而化合物III和化 合物IV均不具备此作用。
[0051]表1待试物对异丙肾上腺素致特异性缺氧小鼠的影响(x，n = 10)
[0化2]
[0053] 注:1中<0.01，与对照组比较，2)P<0.01，与异丙肾上腺素组比较。
[0054] 实施例8小鼠常压窒息性缺氧实验
[0化5] 1、方法：
[0056] 40只昆明小鼠，体重(20±2)g。随机分为4组，灌胃给药。第1组给予0.3%簇甲基纤 维素钢(CMC-Na)溶液，后3组分别给予含组合物、化合物ΠI和化合物IV的CMC-Na溶液，浓度 为O.OlOg-Kg^i。给药50min后，置于广口瓶中并盖紧瓶塞(瓶内放置5g钢石灰）。^呼吸停止 为标志，记录小鼠存活时间。
[0057] 2、结果：
[005引与溶媒对照组相比，组合物的O.OlOg . Kg-i使小鼠在常压密闭条件下的存活时间 延长了43.25%，差异具有显著性(P<0.01)，而化合物III和化合物IV均未能使小鼠在常压 密闭条件下的存活时间显著延长。
[0059] 实施例9小鼠减压缺氧实验
[0060] 1、方法：
[0061] 40只昆明小鼠，体重（20±2)g。随机分为4组，灌胃给药。给药组分别给予组合物、 化合物ΠI和化合物IV，浓度为0.0 lOg · Kg-I，对照组给予0.3 % CMC-Na溶液，灌胃体积均为 2ml · Kg^。50min后，各给药组和对照组各取5只，放入减压装置中，在26.7Kpa(相当于海拔 约10000m)时停止减压，保持此压力不变，待对照组动物死亡80 %时，立即停止减压，缓缓放 入空气，取出动物，记录各组死亡及存活数目，重复操作至实验完成。
[006^ 2、结果：
[0063] 组合物O.OlOg . Kg-i使小鼠在减压缺氧条件下的存活率由对照组的20%提高至 40%，差异具有显著性(P<〇.05);而化合物ΙΠ 和化合物IV对小鼠在减压缺氧条件下的存活 率为20%，均未有提高。
[0064] 结论:组合物可显著提高异丙肾上腺素致特异性缺氧的存活时间，窒息性缺氧和 急性减压缺氧小鼠的存活率，提供了组合物在制备抗缺氧药物中的用途。而化合物ΠΙ和化 合物IV均不具有上述活性。
[0065] 实施例10本发明所设及组合物片剂的制备
[0066] 取2克组合物，加入制备片剂的常规辅料18克，混匀，常规压片机制成100片。
[0067]实施例11本发明所设及组合物胶囊的制备
[006引取2克组合物，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉18克，混匀，装胶囊制成100粒。
【主权项】
1. 一种组合物，其特征为该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合物中化合物 III和化合物IV的质量百分数分别为15%和85%，2. 如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征为:将化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照质量百分数分别为15 %和85 %充分混合。3. -种如权利要求1所述的组合物在抗缺氧药物中的应用。4. 根据权利要求3所述的组合物在抗缺氧药物中的应用，其特征在于:所述缺氧为异丙 肾上腺素致特异性缺氧。5. 根据权利要求3所述的组合物在抗缺氧药物中的应用，其特征在于:所述缺氧为常压 室息性缺氧。6.根据权利要求3所述的组合物在抗缺氧药物中的应用，其特征在于:所述缺氧为减压 缺氧。
【文档编号】C07D235/08GK105998005SQ201610256681
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年4月22日
【发明人】王卓婷
【申请人】南京赋海澳赛医药科技有限公司