一种治疗脑胶质瘤的药物组合物及其用图
【专利摘要】本发明属于医药领域，具体涉及一种药物组合物及其用于制备治疗脑胶质瘤药物中的应用。本发明药物组合物以榄香烯和泊马度胺为药物活性成分，其中榄香烯和泊马度胺的比例优选为0.003?100：1，进一步优选为0.01?50：1。本发明通过大量的药理学实验证实，榄香烯和泊马度胺在治疗脑胶质瘤方面具有显著的协同作用，能够显著减小肿瘤体积，降低瘤重，延长生存期。本发明药物组合物治疗脑胶质瘤时疗效确切、毒副作用小，具有很好的医学应用前景。
【专利说明】
-种治疗脑胶质瘤的药物组合物及其用途
技术领域
[0001] 本发明属于医药领域，设及一种治疗脑胶质瘤的药物组合物及其用途，具体设及 包含揽香締和泊马度胺的组合物及其用于制备治疗脑胶质瘤药物中的用途。
【背景技术】
[0002] 胶质瘤是发生于神经外胚层的肿瘤，故亦称神经外胚层肿瘤或神经上皮肿瘤。脑 胶质瘤是一种高复发的脑部肿瘤疾病，具有发病率、复发率、死亡率高和治愈率低等"Ξ高 一低"的特点，其发病病因至今仍不明确。脑胶质瘤(脑胶质细胞瘤)约占烦内肿瘤的46%， 发病率为3~10人/10万人，发病年龄高峰在30-40岁，或10-20岁。脑胶质瘤占全身恶性肿瘤 的1%~3%，手术加放化疗的平均生存期仅为8~11个月。胶质细胞瘤的生长特点为浸润性 生长，与正常脑组织无明显界限，多数不限于一个脑叶，向脑组织外呈指状深入破坏脑组 织，偏良性者生长缓慢，病程较长，自出现症状至就诊时间平均两年，恶性者瘤体生长快，病 程短，自出现症状到就诊时多数在3个月之内，70-80%多在半年之内。
[0003] 脑胶质瘤是一种浸润性生长肿瘤，传统多采用手术治疗，但由于其呈浸润性生长， 大多与正常脑组织无明显分界，手术难W做到彻底切除，生存率较低。采用手术治疗为主， 术后辅W放疗、化疗等综合治疗方案可W提高疗效。脑胶质瘤的化疗工作作为术后辅助治 疗，关键是研制特效的药物。
[0004]泊马度胺(pomalidomide，商品名:Pomalyst)是新一代免疫调节剂，是沙利度胺类 似物，比沙利度胺和来那度胺更有效、毒性更小。泊马度胺为胶囊剂，有lmg、2mg、3mg和4mg 四种规格，推荐起始剂量为每日4mg，28d为一个周期，前21d用药，直到病情恶化。可W与地 塞米松联合使用[3]。美国食品和药物管理局(FDA)2013年2月批准泊马度胺用于曾接受至 少两种治疗(包括来那度胺和棚替佐米)之后疾病仍然进展，W及对治疗无效且在最后一种 治疗60d内发生疾病进展的MM。揽香締化lemene)是从传统中草药姜科植物溫郁金(溫義术） 中提取获得的祗締类化合物。揽香締注射液we-揽香締为主要成分，并含有少量T-和S-揽 香締及其它祗类化合物，通过实验研究和临床试验已于1994年作为国家二类抗肿瘤新药上 市应用。多年来，有关揽香締注射液进一步的基础研究层出不穷，研究结果充分表明该药对 多种肿瘤细胞具有显著的抑杀作用，能够诱导肿瘤细胞调亡和分化，逆转肿瘤细胞多药耐 药和抗肿瘤转移，与放化疗联合具有增敏减毒、提高机体免疫力W及毒副反应轻微等显著 特点。
[0005] 经检索，目前在治疗脑胶质瘤的临床药物方面尚无 W揽香締和泊马度胺为活性成 分的抗脑胶质瘤药物组合物用于脑胶质瘤治疗的临床报道。
【发明内容】
[0006] 针对现有脑胶质瘤治疗过程中缺乏有效的化疗药物，且现有的化疗药物毒副作用 大的缺陷，本发明提供一种安全有效的治疗脑胶质瘤药物，进一步增加脑胶质瘤患者的临 床用药选择，该药物组合物W揽香締和泊马度胺为药物活性成分，其对于脑胶质瘤的治疗 效果好、毒副作用小，有很好的临床应用前景。
[0007] 本发明人经过大量的药理学实验惊奇地发现揽香締和泊马度胺联合应用在治疗 脑胶质瘤方面具有显著地协同作用，本发明药效部分实施例1表明含有揽香締和泊马度胺 的药物组合物对大鼠脑胶质瘤模型具有很好的治疗作用，其能够显著抑制大鼠脑胶质瘤生 长，降低脑胶质瘤瘤重，明显延长大鼠生存期。本发明药效部分实施例2表明含有揽香締和 泊马度胺的药物组合物对裸鼠脑胶质瘤模型具有很好的治疗作用，能够显著抑制裸鼠脑胶 质瘤生长，减小肿瘤体积。本发明药物组合物治疗脑胶质瘤的效果不仅显著优于两种药物 单独使用时的效果，更优于两者效果的加和。两种药物联合使用可W明显减少各自用量，减 少不良反应发生。
[0008] 本发明目的之一是提供一种用于治疗脑胶质瘤的药物组合物，该药物组合物的药 物活性成分由揽香締和泊马度胺组成。发明人通过大量药理实验发现，该药物组合物中揽 香締和泊马度胺在广泛的比例范围内均可W起到治疗脑胶质瘤的协同治疗效果。根据药物 组合物的治疗脑胶质瘤的效果和协同作用的强弱，本发明药物组合物中揽香締与泊马度胺 的重量比优选为0.003-100:1，进一步优选为0.01-50:1。
[0009] 本发明还提供了含有上述药物组合物的药物制剂，本发明药物组合物可W根据需 要制备成合适的药物制剂用于脑胶质瘤的治疗，如微乳制剂、注射制剂、片剂、胶囊剂等。所 述微乳制剂所选用的辅料可W为薄荷油、聚氧乙締-23-月桂基酸、1,2-丙二醇、氨化挪油甘 油脂、月桂酷基聚乙二醇-32-甘油醋、聚乙二醇3350、辛酸油酸乙醋、聚乙二醇8000、留兰香 油、十甘油单硬脂酸醋、聚氧乙締藍麻油化-40中的部分或全部。上述制剂的所用辅料及制 备方法均可采用其常规的辅料和制备方法制得。
[0010] 本发明目的之二是提供上述药物组合物的医药用途，即该药物组合物用于制备治 疗脑胶质瘤药物中的用途。本发明的药物组合物在临床上可用于治疗脑胶质瘤。上述所述 的医药用途中，根据动物病情W及用药部位可W将揽香締和泊马度胺药物组合物制备成合 适的药物制剂W方便用药，对于本发明治疗脑胶质瘤的药物组合物的给药时间和给药次数 需要根据病情的具体诊断结果而定，运在本领域技术人员掌握的技术范围之内。例如，将对 大鼠脑胶质瘤的治疗方案应用于人身上，所有药物对人的有效剂量可W通过该药物对大鼠 的有效剂量进行换算，运对于本领域的普通技术人员来说是显而易见的。
[0011] 与现有技术相比，本发明药物组合物在治疗脑胶质瘤方面具有如下突出的优势：
[0012] (1)与单独给药揽香締或泊马度胺相比，本发明含有揽香締和泊马度胺的药物组 合物对大鼠脑胶质瘤模型治疗效果更好，并且两种药物活性成分在降低脑胶质瘤瘤重和延 长患者存活时间方面体现出很好的协同增效作用。与单独给药揽香締或泊马度胺相比，本 发明含有揽香締和泊马度胺的药物组合物对裸鼠脑胶质瘤模型治疗效果更好，并且两种药 物活性成分在减小肿瘤体积方面体现出很好的协同增效作用。
[0013] (2)本发明药物组合物含有泊马度胺和揽香締，二者联合用药在具有协同作用的 同时，可W显著降低二者用量，从而显著降低患者用药时的毒副作用，减少不良反应发生。
[0014] (3)本发明药物组合物W固定组合的形式治疗脑胶质瘤，与同时服用单药相比服 用更佳方便，提高了患者的顺应性和依从性，一定程度上增强了对疾病的治疗效果。
【具体实施方式】
[0015] W下通过具体实施方法进一步描述本发明，但本发明的应用范围不仅仅限于下列 实施例。在本发明的内容、精神和/或范围内，对本发明技术特征的替换和/或组合，对本领 域的技术人员来说是显而易见的，且包含在本发明之中。
[0016] 第一部分本发明药物组合物制剂及其制备方法
[0017] 实施例1微乳浓缩物 [001引处方 糖香嫌 0 Ig 泊马度胺 30g 薄荷油 40甚
[0019] 辛酸油酸乙驅 巧g 1，2-丙二醇 斗游 聚己二醇3350 40g
[0020] 制备工艺:称取处方量薄荷油、辛酸油酸乙醋、1,2-丙二醇、聚乙二醇3350,混合后 揽拌均匀，然后加入揽香締、泊马度胺溶解，也可W超声波处理W加速溶解，得澄清浓缩液， 即为揽香締与泊马度胺微乳浓缩物。激光粒度测定仪测定其粒径，平均粒径为40nm。上述微 乳浓缩物可进一步稀释用于注射或口服。
[0021] 实施例2微乳浓缩物 [0022] 处方 揽香婦 20g 泊马度胺 lOg 薄荷油 靴g
[0023] 辛酸油酸乙醋 55g 1:，2-丙二醇 45g 聚己二醇巧50 40g
[0024] 制备工艺同实施例1。激光粒度测定仪测定其粒径，平均粒径为20nm。上述微乳浓 缩物可进一步稀释用于注射或口服。
[0025] 实施例3微乳浓缩物 [002引处方 揽香嫌 lOg 泊马度胺 O.lg 薄荷油 4化
[0027] 辛酸油酸己醋 55g 1,，2-丙二醇 45g 聚乙二醇巧50 4好g
[0028] 制备工艺同实施例1。激光粒度测定仪测定其粒径，平均粒径为33nm。上述微乳浓 缩物可进一步稀释用于注射或口服。
[0029] 实施例4微乳浓缩物 [0030] 处方 揽香婦 〇.3g 泊马度胺 lOg
[0031] 薄荷油 3麵 聚氧石締 -23-月桂基酸 60g 1，2-巧二醇 30g
[0032] 制备工艺:称取处方量薄荷油、聚氧乙締-23-月桂基酸、1,2-丙二醇，混合后揽拌 均匀，然后加入揽香締、泊马度胺溶解，也可W超声波处理W加速溶解，得澄清浓缩液，即为 揽香締与泊马度胺微乳浓缩物。激光粒度测定仪测定其粒径，平均粒径为45nm。上述微乳浓 缩物可进一步稀释用于注射或口服。
[0033] 实施例5微乳浓缩物
[OOW 处方 繼香嫌 越 泊马度胺 O.ig
[003引薄荷油 35g 聚氧艺締 -23-月桂基髓 60貸 1，2-巧二酶： 30g
[0036] 制备工艺同实施例4。激光粒度测定仪测定其粒径，平均粒径为75nm。上述微乳浓 缩物可进一步稀释用于注射或口服。
[0037] 实施例6微乳浓缩物 [00測处方 植香婦 D.5g 泊马度胺 lOg
[0039] 薄荷油 35g 聚敏乙締 -23-月桂基職 60g 1，2-丙二醇 30g
[0040] 制备工艺同实施例4。激光粒度测定仪测定其粒径，平均粒径为50nm。上述微乳浓 缩物可进一步稀释用于注射或口服。
[0041 ]实施例7微乳浓缩物 [0042] 处方 揽香婦 巧:g 巧马度肢 么5g
[0043] 月桂醜基聚艺二醇-32-甘油醋 20g 聚氧乙締蘆麻油6以40 3始 1，2-丙二醇 ]5g
[0044] 制备工艺：
[0045] 称取处方量月桂酷基聚乙二醇-32-甘油醋、聚氧乙締藍麻油化-40、1,2-丙二醇， 混合后揽拌均匀，然后加入揽香締、泊马度胺溶解，也可W超声波处理W加速溶解，得澄清 浓缩液，即为揽香締与泊马度胺的微乳浓缩物。激光粒度测定仪测定其粒径，平均粒径为 63nm。上述微乳浓缩物可进一步稀释用于注射或口服。
[0046] 实施例8片剂
[0047] 处方 槐香稀 llg 泊马度胺 0.5g 微晶纤维素 52g
[004引预胶化淀粉 4礎 交联錢甲基纤维素钢 15g 硬脂酸镇 2.5g 10%淀粉浆 5.5g
[0049] 制备工艺:将药物和辅料分别过80目筛，将揽香締与3?微晶纤维素、30g预胶化淀 粉和Ug交联簇甲基纤维钢充分混合，10%淀粉浆制软材，18目筛制粒，60°C下干燥，得颗粒 1。将泊马度胺与1始微晶纤维素、12g预胶化淀粉和2g交联簇甲基纤维钢充分混合，10%淀 粉浆制软材，18目筛制粒，60°C下干燥，得颗粒2。按等量递增原则，将颗粒1和颗粒2充分混 合，16目筛整粒，加入硬脂酸儀，混匀，压片。
[0050] 实施例9胶囊剂
[0051 ] 处方 揽香稀 llg 泊马度胺 0,確 淀粉 69g
[0052]乳糖 20g 交联竣甲基纤维素销 15g 硬脂酸漢 么罐 7%PVP溶液 10 5g
[0053]制备工艺:将药物和辅料分别过80目筛，将揽香締与49g淀粉和13g交联簇甲基纤 维素钢充分混合，7%PVP溶液制软材，18目筛制粒，60°C下干燥，得颗粒1。将泊马度胺与20g 乳糖、20g淀粉和2g交联簇甲基纤维素钢充分混合，7%PVP溶液制软材，18目筛制粒，60°C下 干燥，得颗粒2。按等量递增原则，将颗粒1和颗粒2充分混合，16目筛整粒，加入硬脂酸儀，混 匀，灌胶囊。
[0化4] 实施例10注射液 [0055] 处方 揽香締 〇.2g 泊马度朦 25g
[0化6] 氯化钢 〇.85g 1，丙二醇 1.5g
[0057]制备工艺:取处方量的揽香締和泊马度胺，加入适量的蒸馈水，再加入丙二醇进行 充分溶解，加入氯化钢，过滤、灌封，100摄氏度灭菌30min即得。
[005引实施例11注射液
[0059] 处方 揽香締 lOg 泊马度胺 〇.lg
[0060] 氯化辆 0.85g 1，2-丙二醇 1.5g
[0061] 制备工艺同实施例10。
[0062] 实施例12注射液
[0063] 处方 揽香締 0,5各 泊马度胺 5g
[0064] 氯化钢 0 iS5g 1，2-丙 ^一醇 1.5g
[00化]制备工艺同实施例10。
[0066] 第二部分药效学实施例部分
[0067] 实施例1组合物对Wistar大鼠体内C6细胞的抑制作用实验
[0068] UWistar大鼠脑胶质瘤模型的建立：
[0069] 选用健康雄性Wistar大鼠90只，体重250~280g。肿瘤细胞采用C6脑胶质瘤细胞 (细胞浓度为1.0 X lo^ul，细胞存活率为95% W上）。2%戊己比妥钢(40mg/kg)腹腔注射全 身麻醉后，将大鼠头部固定在立体定向仪上，接种祀点座标选定右侧尾状核(座标:前画中 点前1.0cm，矢状缝右旁3.0cm，硬膜下6.0cm)。将备用细胞悬液3ul W lu V3分钟速度注射祀 点，注射完毕后留针5分钟，使细胞充分沉积。拔针后用骨蜡封闭骨孔，术后连续3天注射青 霉素4万U/日。分笼饲养，每天观察大鼠的存活状态及手术切口情况。将种植肿瘤后12天的 大鼠用于实验。
[0070] 2、实验分组与给药终浓度如下：
[0071 ]模型对照组:灌胃给予等体积的赋形剂
[0072] 揽香締低量组:灌胃给予0.1 mg/kg揽香締
[0073] 揽香締高量组:灌胃给予10.0 mg/kg揽香締
[0074] 泊马度胺低组:灌胃给予0.1 mg/kg泊马度胺
[0075] 泊马度胺高组:灌胃给予30.0 mg/kg泊马度胺
[0076] 组合物A组:灌胃给予10.0 mg/kg揽香締+0.1 mg/kg泊马度胺
[0077] 组合物B组:灌胃给予1. Omg/kg揽香締+1. Omg/kg泊马度胺
[0078] 组合物C组:灌胃给予0.1 mg/kg揽香締+30.0 mg/kg泊马度胺 [00巧]3、实验结果统计如下：
[0080] 给药前用DMS0溶解各药物有效成分，每天灌胃给药1次。化疗后密切观察大鼠的状 态，发现状态不佳立刻处死，记录生存期，在处死动物之前，向屯、腔注射0.5 %亚甲兰酒精溶 液，使瘤组织与脑组织分界较清楚。取出鼠脑，分离出瘤体，称重后，-70°C冰箱保存备用。每 组取3只鼠脑10%甲醒液固定，用于病理学检查。
[0081] 计算肿瘤抑制率：
[0082] 肿瘤抑瘤率=(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重X 100%
[0083] 表1组合物对Wistar大鼠脑胶质瘤大小的影响
[0084]
[0085] 与揽香締低量组相比严p<0.01;与揽香締高量组相比Λ<0.05严p<0.01;
[0086] 与泊马度胺低量组相比，$9<0.05，$$9<0.01;与泊马度胺高量组相比，￥口< 0.05;
[0087] 通过上述表1的结果可W看出，各治疗组与模型对照组相比均有显著差异（p< 0.05)，组合物A组、B组和C组与揽香締低剂量组相比具有极显著性差异(p<0.01)，与揽香 締高剂量组相比也具有显著性差异(P<〇. 05)，与泊马度胺的两个剂量组相比具有显著性 差异或极显著性差异。运表明，揽香締与泊马度胺联合后体内抑制肿瘤生长具有协同增效 作用，即可W显著抑制脑胶质瘤生长、降低瘤重。
[0088] 此外，组合物A组、B组和C组在降低脑胶质瘤瘤重方面，具有更好的治疗效果。
[0089] 表2组合物对Wistar大鼠存活时间的影响
[0090]
[0091] 与揽香締低量组相比严p<0.01;与揽香締高量组相比Λ<0.05严p<0.01;
[0092] 与泊马度胺低量组相比，$9<0.05，$$9<0.01;与泊马度胺高量组相比，￥口< 0.05;
[0093] 通过上述表2的结果可W看出，各治疗组与模型对照组相比均有显著差异（p< 0.05)，组合物A组、B组和C组与揽香締低剂量组相比具有极显著性差异(p<0.01)，与揽香 締高剂量组相比也具有显著性差异(P<〇. 05)，与泊马度胺的两个剂量组相比具有显著性 差异或极显著性差异。运表明，揽香締与泊马度胺联合后具有协同增效作用，能够显著延长 患者的生存期。
[0094] 综上，揽香締与泊马度胺联用，与单药相比，具有显著的协同增效作用，能够显著 抑制患者脑胶质瘤生长，降低瘤重，延长患者生存期。并且，两药联用具有更好的治疗效果。 运在临床应用上具有十分重要的意义。
[00M]实施例2组合物对裸鼠体内C6细胞的抑制作用实验
[0096] 1、裸鼠脑胶质瘤模型的建立：
[0097] 1.1 U87细胞体外培养及接种前准备口脈了胶质瘤细胞在含10%胎牛血清的DMEM培 养基中培养，计数并调整细胞悬液浓度为1〇8个细胞/ml,锥虫（台吩)蓝染色检测活细胞比 率>95%。
[009引 1.2立体定向裸鼠脑内种植U87细胞□选用健康Nu/Nu裸小鼠，体重20~25g。裸鼠麻 醉后固定于脑立体定向仪上。消毒后沿中线纵向切开头皮约1cm，暴露前因，用直径1mm的牙 科钻小屯、钻穿烦骨。烦骨开窗的中屯、位于前因中点前1 mm，矢状缝右旁开2mm，W lOul化milton注射器抽取配好的U87细胞悬液5ul(5X105个细胞），缓慢垂直烦骨进针 2.5mm，回退0.5mm，Wlul/m in的速度注入细胞悬液。留针5min后缓慢拔针。用聚氯乙締膜 封闭骨孔，缝合头皮，常规饲养，每天观察裸鼠的存活状态及手术切口情况。造模7天后，将 裸鼠随机分成8组，每组10只。
[0099] 2、实验分组与给药终浓度如下：
[0100]模型对照组:皮下注射等体积的赋形剂 [0101 ]揽香締低量组:皮下注射0.06mg/kg揽香締 [01 02]揽香締高量组:皮下注射6. Omg/kg揽香締
[0103] 泊马度胺低组:皮下注射0.06mg/kg泊马度胺
[0104] 泊马度胺高组:皮下注射18.Omg/kg泊马度胺
[010日]组合物A组:皮下注射6. Omg/kg揽香締+0.06mg/kg泊马度胺
[0106] 组合物B组:皮下注射1 .Omg/kg揽香締+1 .Omg/kg泊马度胺
[0107] 组合物C组:皮下注射0.06mg/kg揽香締+18. Omg/kg泊马度胺
[0108] 3、实验结果统计如下：
[0109] 给药前用DMS0溶解各药物有效成分，每天皮下注射1次。定期观察裸鼠精神、饮食 和排便，用游标卡尺测量肿瘤结节的最长径(a)和最短径(b)，根据公式计算肿瘤体积，V = l/63iab2，计算肿瘤体积的平均值。
[0110] U87胶质细胞种植后第21天处死动物，并取肿瘤组织固定于10%福尔马林溶液中， 石蜡包埋，组织切片，肥染色，进行组织病理检查。
[0111] 表3组合物对裸鼠脑胶质瘤大小的影响
[0112]
[0113]
[0114] 与揽香締低量组相比严p<0.01;与揽香締高量组相比严p<0.01;
[0115] 与泊马度胺低量组相比，$9<0.05，$$9<0.01;与泊马度胺高量组相比，￥口< 0.05。
[0116] 通过上述表3的结果可W看出，各治疗组与模型对照组相比均有显著差异（p< 0.05)，组合物A组、B组和C组与揽香締低剂量组相比具有极显著性差异(p<0.01)，与揽香 締高剂量组相比也具有极显著性差异(P<〇.01)，与泊马度胺的两个剂量组相比具有显著 性差异或极显著性差异。运表明，揽香締与泊马度胺联合后体内抑制肿瘤生长具有协同增 效作用，即可W显著抑制脑胶质瘤生长、减小肿瘤体积。
【主权项】
1. 一种治疗脑胶质瘤的药物组合物，其特征在于其药物活性成分由榄香烯和泊马度胺 组成。2. 如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物中榄香烯和泊马度胺 的重量比为0.003-100:1。3. 如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物中榄香烯和泊马度胺 的重量比为0.01-50:1。4. 如权利要求1-3中所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物为口服制剂。5. 如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于所述口服制剂为口服微乳、片剂、胶囊 剂。6. 如权利要求1-3中所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物为注射制剂。7. 如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于所述注射制剂为注射液、注射微乳。8. 如权利要求1所述的药物组合物在制备治疗脑胶质瘤药物中的用途。
【文档编号】A61K31/015GK105998019SQ201610497971
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年6月29日
【发明人】王传秀
【申请人】青岛云天生物技术有限公司