治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方法

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治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方法,本发明药物组合物是以弹刀子菜、密花草、金鸡菊查耳酮、棱果海桐子、仙鹤草内酯为原料药,配比而成,可按常规制剂工艺制成各种剂型,治疗宫颈癌疗效显著。
【专利说明】
治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于中药技术领域,尤其涉及一种治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方 法。
【背景技术】
[0002] 近年来在植物中寻找有效且副作用小的抗肿瘤药物已成为国内外重要的课题,关 于中药抗肿瘤机制的研究方兴未艾,但尚无突破性成果。许多化疗药物是通过自由基途径 来实现其抗肿瘤作用的,因为肿瘤细胞内的自由基产生与清除处于失衡状态,产生自由基 能力强,而清除能力弱,对自由基十分敏感。R0S包括以自由基存在的和不以自由基存在的 具有高度活性的中间产物,前者有0:Γ、0Η,后者有H 202、N0等。恶性肿瘤细胞除了受刺激分泌 R0S外,还能自分泌一定量的R0S。细胞的生存取决于细胞内部产生的R0S与抗氧化代谢的平 衡,这种平衡反映了细胞内氧化还原态水平。细胞增殖过盛和凋亡抑制被认为是肿瘤发生 发展的关键,多种化疗药物均可引起肿瘤细胞的凋亡。细胞凋亡是多基因控制的程序化过 程。通过研究其分子调控机制,将对有计划诱导肿瘤细胞凋亡产生重要的指导作用。与细胞 凋亡相关的基因有P53基因等多种基因。p53基因分为野生型和突变型,因野生型p53表达产 物半衰期短,代谢不稳定及含量低,故常规方法很难检测,往往只能检测突变型P53基因的 表达水平。
[0003] 棱果海桐子:本品为海桐花科海桐花属植物棱果海桐P i 11 〇 s ρ 〇 r u m trigonocarpum L6vl[P.glabratum sensu Rehd·]的种子。8-9月采摘成熟果实,除去果核, 取出种子晒干。【性味】苦、微涩,微寒。【功能主治】收敛止泻,清热除烦。主治腹泻,痢疾,咽 痛,心烦不眠。【原植物形态】常绿灌木、嫩枝无毛,嫩芽有短柔毛,老枝灰色,有皮孔。叶簇生 于枝顶,二年生,革质,倒卵形或矩圆倒披针形,长7-14厘米,宽2.5-4厘米,先端急短尖,基 部窄楔形,上面绿色、发亮,干后褐绿色,下面浅褐色,无毛;侧脉约6对,与网脉在上下两面 均不明显,边缘平展,叶柄长约1厘米。伞形花序3-5枝顶生,花多数;花梗长1-2.5厘米,纤 细,无毛;萼片卵形,长2毫米,有睫毛;花瓣长1.2厘米,分离,或部分联合;雄蕊长8毫米,雌 蕊与雄蕊等长,子房有柔毛,侧膜胎座3个,胚珠9-15个。蒴果常单生,椭圆形,干后三角形或 圆形,长2.7厘米,有毛,子房柄短,长不过2毫米,宿存花柱长3毫米,果梗长约1厘米,有柔 毛,3片裂开,果片薄,革质,表面粗糙,每片有种子3-5个;种子红色,长约5-6厘米,种柄长2 毫米,压扁,散生于纵长的胎座上。收载于中药大辞典。
[0004] 弹刀子菜:本品为玄参科通泉草属植物弹刀子菜Mazus stachydi f ο 1 ius (Turcz . ) Maxim.的全草。开花结果时采收,晒干。【性味】味微辛;性凉。【功能主治】清热解 毒;凉血散瘀。主便秘下血;疮疖肿毒;毒蛇咬伤;跌打损伤。【原形态】多年生草本,高10-50cm。粗壮,全株被白色长柔毛。根状茎短;茎直立,稀上升,圆柱形,不分枝或基部分枝,老 时基部木质化。基生叶匙形,有短柄,常早枯;茎生叶对生,上部的常互生,无柄;叶片长椭圆 形至倒卵状披针形;纸质,长2-7cm,以茎中部的量大,边缘具锯齿。总状花序顶生,长2-20cm,花稀疏;苞片三角形;花萼漏斗状,长0.5-lcm,比花梗长,萼齿略长于筒部,先端长锐 尖;花冠紫以,长1.5-2cm;花冠筒与唇部近等长,上唇短,2裂,裂片狭长三角形,端部尖,下 唇宽大,开展,3裂,中裂片较侧裂片小,近圆形,稍突出,有两条着生腺毛的皱褶直达喉部; 雄蕊4枚,二强;子房上部被长硬毛。蒴果扁卵球形,长2-4mm。花期4-6月,果期7-9月。收载于 中药大辞典。
[0005] 密花草:本品为沟繁缕科田繁缕属植物田繁缕Bergia ammannioides Roxb. Ex Roth的全草。全年可采;洗净;晒干。【性味】味甘;性凉。【功能主治】清热解毒。主尿路感染; 痈疖;口腔炎。【原形态】一年生草本,高7-30cm。近直立或渐升,分枝多,淡红色,具平展的 腺毛。叶对生,几无柄;插叶长约2mm,2深裂,裂片披针形,有撕裂状小齿;叶片狭椭圆形或倒 披针形,长0.4-2cm,宽2-8_,边缘有尖锐的小锯齿,下面有短毛。花小,多数簇生于叶腋;花 梗长卜2mm;萼片5,狭卵形,长约1.2mm,先端渐尖;花瓣5,淡红色,狭卵形,约与萼片等长;雄 蕊5;花柱5,短。蒴果近球形,长1.2-2_,裂为5瓣。种子我数,极小。花期几近全年。收载于中 药大辞典。
[0006] 金鸡菊查耳酮(Okanin ): CAS号484-76-4,分子式C15H12〇6,分子量288 · 26。【药理作 用】黄色素。【成分来源】菊科金鸡菊属和鬼针草属植物黄花中。
[0007]仙鹤草内酯(481';[11101101丨(16):043号21499-24-1,分子式(]181118〇5,分子量314.34。 【药理作用】能降低离体兔肠的收缩幅度及张力,并使肠运动停止于松弛状态;也能抑制在 体小鼠肠的蠕动。【用途】解除平滑肌痉挛。【成分来源】蔷薇科植物(日本)龙芽草(仙鹤草) Agrimonia pilosa Ledeb. var. japonica (MIq.) Nakai 根。
[0008] 2个原料药的结构:


【发明内容】

[0009] 本发明的目的是克服【背景技术】的不足,提供一种有效治疗宫颈癌的药物组合物及 其制备方法。
[0010] 本发明是采用如下技术方案实现的: 制成该治疗宫颈癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为: 弹刀子菜562-568重量份密花草500-506重量份金鸡菊查耳酮204-208重量份棱果 海桐子50-60重量份仙鹤草内酯12-14重量份。
[0011]优选的用于治疗宫颈癌的药物组合物,是由如下重量份的原料药组成: 弹刀子菜565重量份密花草503重量份金鸡菊查耳酮206重量份棱果海桐子55重量 份仙鹤草内酯13重量份。
[0012] -种治疗宫颈癌的药物组合物,其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方 法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
[0013] -种治疗宫颈癌的药物组合物,其特征在于药物组合物与化学药或中药组成的治 疗宫颈癌药物。
[0014] -种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法,其特征在于按如下步骤制备: 原料药的组成和重量份为:弹刀子菜562-568重量份密花草500-506重量份金鸡菊查 耳酮204-208重量份棱果海桐子50-60重量份仙鹤草内酯12-14重量份; 制备方法: (1) 按原料药配比取弹刀子菜、密花草、金鸡菊查耳酮、棱果海桐子、仙鹤草内酯,混匀, 用重量百分比浓度21.5%乙醇作为溶剂,在38.5°C温浸提取,提取次数为25次,每次提取时 间26.5小时,每次溶剂用量为原料药总重量的36.5倍,滤过,得药渣A和提取液A,提取液A回 收乙醇,浓缩至相对密度1.14,滤过,药液通过LSD280大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重 量百分比浓度43.5%乙醇溶液洗脱LSD280大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度43.5%乙醇 洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A,用重量百分比浓度59.5%乙醇作为溶剂,加热回流提取19次,每次 提取时间为〇. 1小时,每次溶剂用量为药渣A重量的56倍,滤过,得药渣B和提取液B,提取液B 回收乙醇,浓缩至相对密度1.04,滤过,药液通过FU-18大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用 重量百分比浓度77%乙醇溶液洗脱FU-18大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度77%乙醇洗 脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀,即得药物组合物。
[0015] 优选的一种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法,其特征在于按如下步骤制备: 原料药的组成和重量份为:弹刀子菜565重量份密花草503重量份金鸡菊查耳酮206 重量份棱果海桐子55重量份仙鹤草内酯13重量份; 制备方法: (1) 按原料药配比取弹刀子菜、密花草、金鸡菊查耳酮、棱果海桐子、仙鹤草内酯,混匀, 用重量百分比浓度21.5%乙醇作为溶剂,在38.5°C温浸提取,提取次数为25次,每次提取时 间26.5小时,每次溶剂用量为原料药总重量的36.5倍,滤过,得药渣A和提取液A,提取液A回 收乙醇,浓缩至相对密度1.14,滤过,药液通过LSD280大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重 量百分比浓度43.5%乙醇溶液洗脱LSD280大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度43.5%乙醇 洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A,用重量百分比浓度59.5%乙醇作为溶剂,加热回流提取19次,每次 提取时间为〇. 1小时,每次溶剂用量为药渣A重量的56倍,滤过,得药渣B和提取液B,提取液B 回收乙醇,浓缩至相对密度1.04,滤过,药液通过FU-18大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用 重量百分比浓度77%乙醇溶液洗脱FU-18大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度77%乙醇洗 脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀,即得药物组合物。
[0016] -种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法,其特征在于药物组合物可以采用制剂 学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
[0017] -种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法,其特征在于药物组合物与化学药或中 药组成治疗宫颈癌药物。
[0018] 药物组合物治疗宫颈癌疗效显著。
【具体实施方式】
[0019] 实施例1:治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方法 治疗宫颈癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为:弹刀子菜565g密花草503g金 鸡菊查耳酮206g棱果海桐子55g仙鹤草内酯13g; 制备方法: (1) 按原料药配比取弹刀子菜、密花草、金鸡菊查耳酮、棱果海桐子、仙鹤草内酯,混匀, 用重量百分比浓度21.5%乙醇作为溶剂,在38.5°C温浸提取,提取次数为25次,每次提取时 间26.5小时,每次溶剂用量为原料药总重量的36.5倍,滤过,得药渣A和提取液A,提取液A回 收乙醇,浓缩至相对密度1.14,滤过,药液通过LSD280大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重 量百分比浓度43.5%乙醇溶液洗脱LSD280大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度43.5%乙醇 洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A,用重量百分比浓度59.5%乙醇作为溶剂,加热回流提取19次,每次 提取时间为〇. 1小时,每次溶剂用量为药渣A重量的56倍,滤过,得药渣B和提取液B,提取液B 回收乙醇,浓缩至相对密度1.04,滤过,药液通过FU-18大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用 重量百分比浓度77%乙醇溶液洗脱FU-18大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度77%乙醇洗 脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀,即得药物组合物。
[0020] 实施例2:治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方法 治疗宫颈癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为:弹刀子菜562g密花草506g金 鸡菊查耳酮204g棱果海桐子60g仙鹤草内酯12g; 制备方法: (1) 按原料药配比取弹刀子菜、密花草、金鸡菊查耳酮、棱果海桐子、仙鹤草内酯,混匀, 用重量百分比浓度21.5%乙醇作为溶剂,在38.5°C温浸提取,提取次数为25次,每次提取时 间26.5小时,每次溶剂用量为原料药总重量的36.5倍,滤过,得药渣A和提取液A,提取液A回 收乙醇,浓缩至相对密度1.14,滤过,药液通过LSD280大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重 量百分比浓度43.5%乙醇溶液洗脱LSD280大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度43.5%乙醇 洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A,用重量百分比浓度59.5%乙醇作为溶剂,加热回流提取19次,每次 提取时间为〇. 1小时,每次溶剂用量为药渣A重量的56倍,滤过,得药渣B和提取液B,提取液B 回收乙醇,浓缩至相对密度1.04,滤过,药液通过FU-18大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用 重量百分比浓度77%乙醇溶液洗脱FU-18大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度77%乙醇洗 脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀,即得药物组合物。
[0021 ]实施例3:治疗宫颈癌的药物组合物及其制备方法 治疗宫颈癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为:弹刀子菜568g密花草500g金 鸡菊查耳酮208g棱果海桐子50g仙鹤草内酯14g; 制备方法: (1)按原料药配比取弹刀子菜、密花草、金鸡菊查耳酮、棱果海桐子、仙鹤草内酯,混匀, 用重量百分比浓度21.5%乙醇作为溶剂,在38.5°C温浸提取,提取次数为25次,每次提取时 间26.5小时,每次溶剂用量为原料药总重量的36.5倍,滤过,得药渣A和提取液A,提取液A回 收乙醇,浓缩至相对密度1.14,滤过,药液通过LSD280大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重 量百分比浓度43.5%乙醇溶液洗脱LSD280大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度43.5%乙醇 洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物A; (2) 取步骤(1)药渣A,用重量百分比浓度59.5%乙醇作为溶剂,加热回流提取19次,每次 提取时间为〇. 1小时,每次溶剂用量为药渣A重量的56倍,滤过,得药渣B和提取液B,提取液B 回收乙醇,浓缩至相对密度1.04,滤过,药液通过FU-18大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用 重量百分比浓度77%乙醇溶液洗脱FU-18大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度77%乙醇洗 脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B; (3) 将提取物A和提取物B混匀,即得药物组合物。
[0022]实施例4:片剂的制备 取实施例1药物组合物327g,加入淀粉275g,混匀,制粒,干燥,加微晶纤维素15lg,硬脂 酸镁11.5g,混匀,压制成1500片,即得药物组合物片剂。
[0023]实施例5:胶囊的制备 取实施例2药物组合物400.5g,加入淀粉350.5g,混匀,制粒,干燥,整粒,加入适量硬脂 酸镁,混匀,装胶囊1500粒,即得药物组合物胶囊。
[0024]实施例6:滴丸的制备 称取聚乙二醇6000 243.5g水浴(80°C)加热煮熔,加入实施例3药物组合物12.4g,充 分搅拌均匀,以液体石蜡为冷却剂,置玻璃管(4*80cm)中,冷却温度为-4°C,滴口内外径为 7.0/2.0(mm/mm),滴口距液面为2.3cm,滴速以每分54滴为最佳条件,用棉布吸干滴丸表面 的冷凝剂,即得药物组合物滴丸。
[0025]实验例1:治疗宫颈癌的试验研究 1材料和方法 1.1材料和试剂 Hela细胞由中国科学院上海细胞生物研究所细胞库提供,药物组合物(实施例1药物组 合物批号20120915),RPMI-1640培养液(GIB⑶,USA),胎牛血清(天津血液研究所),R0S测 定试剂盒(南京建成生物有限公司),胰蛋白酶、核糖核酸酶(RNase)、碘化丙啶(PI)、免疫组 化试剂盒均为上海华美生物工程公司提供。
[0026] 1.2药物制备 药物组合物20g加水200 ml,加热沸腾30 min,网筛过滤去渣,滤液离心20 min,取上 清液浓缩为100 m,过滤除菌,备用。
[0027] 1.3实验方法 1.3.1 He la细胞培养 培养液为含10%胎牛血清、l〇5U/L青霉素、0. lg/L链霉素的RPMI-1640培养液。将100 ml 培养瓶置于5% C02、37 °C、饱和湿度的恒温箱中培养,待细胞达80%-90%融合状态时用0.25% 胰蛋白酶消化后传代。实验期间不断冻存细胞,全部实验均用指数生长期细胞。
[0028] 1.3.2药物处理和分组情况 0.25%胰酶消化细胞后,用RPMI-1640培养液调细胞浓度为108/L,每培养瓶各加细胞悬 液lml再各加入培养液6ml置5% C02、37°C恒温培养箱中培养,待细胞生长达70%融合时更换 培养液,同时加入药物组合物提取液,按药物组合物终浓度分组,即药物组合物20g/L、40g/ L和80g/L组,不同浓度培养相同时间,加入等量培养液组为对照组。
[0029] 1.3.3 MTT法细胞增殖实验 将Hela细胞接种于96孔培养板,每孔细胞数104个(分组同上,对照组加等量完全培养 基);细胞同步化后,更换新鲜培养基,加入药物组合物提取液,使药物终浓度为20、40、80g/ L,培养48 h。移液枪小心吸去所有上清液,每孔加160μ1无血清培养基及40μ1ΜΤΤ(ΜΤΤ终浓 度为lg/L);铝箱包好培养板,继续培养4 h;终止培养时吸去孔内所有上清液,每孔加200μ 1DMS0,室温下微孔板振荡器上振荡lOmin;酶标仪550 nm波长测光密度(D值);肿瘤细胞生 长抑制率=(1-药物组D值/对照组D值)X 100%。
[0030] 1.3.4流式细胞仪测定Hela细胞凋亡 收集上述处理后的包括贴壁和悬浮的Hela细胞,用roS调细胞浓度为109/L,取1 ml单 细胞悬液,离心、漂洗,70%乙醇1 ml固定细胞,再用PBS漂洗。在单细胞样本中加入RNase,再 加入终浓度为50 mg/L的PI染色,过滤后用流式细胞仪测定细胞凋亡。以正常人的外周血淋 巴细胞为正常二倍体标准,根据测定的DNA组方图,用CELLQUEST分析软件分析Hela细胞的 凋亡率。
[0031] 1.3.5化学比色法测定Hela细胞Hela细胞内活性氧(ROS) 收集处理后的Hela细胞,用生理盐水调细胞浓度为101()/L,取细胞悬液1 ml,4°C下离 心去上清液,再加入1 ml勾楽;介质,离心10 min,取适量上清液进行ROS测定。按ROS测定盒 说明书试剂操作步骤进行,同时设标准空白管、标准管,用752紫外分光光度计测定550 nm 处D值。
[0032] 1.3.6免疫组织化学法测定Hela细胞p53基因产物表达 取出载有不同条件下培养的Hela细胞的玻片,用95%乙醇固定细胞30 min,按免疫组化 试剂盒说明书步骤操作。P53表达定位于细胞核,棕黄、黄褐色为阳性表达。结果应用LEICA QWIN计算机图像分析仪,随机选取100个细胞,测其细胞核灰阶度,以反映染色强度,比较各 组染色强度差异。
[0033] 1.4统计学处理 采用SPSS 6.0进行数据处理,计量数据用,X±S表示,组间差异采用t检验,P〈0.05为差 异有显著性。
[0034] 2 结果 2.1药物组合物对Hela细胞增殖的抑制作用 结果见表1。
[0035] 表1不同浓度药物组合物对Hela细胞增殖的影响(n=4)
3种浓度的药物组合物作用一定时间后均可抑制Hela细胞的增殖,其抑制率最高可达 80.54%〇
[0036] 2.2药物组合物对Hela细胞凋亡和细胞内R0S的影响 随不同浓度药物组合物作用时间的延长,He 1 a细胞凋亡率明显增加,而细胞内R0S水平 降低。见表2。
[0037] 表2不同浓度HD对Hela细胞凋亡和细胞内R0S的影响(n=4, .X土s)
与对照组比较:*P〈〇 · 05,#P〈0 · 01。
[0038] 2.3药物组合物作用后Hela细胞的形态学变化 2.3.1倒置显微镜下动态观察培养细胞结果 Hela细胞接种后24 h完全贴壁,并伸出伪足,可见分裂期细胞。对照组Hela细胞生长活 跃,悬浮细胞很少;而加入药物组合物提取液后随作用时间延长,悬浮细胞增加,贴壁细胞 体积增大,细胞密度降低,分裂期细胞减少。
[0039] 2.3.2苏木精-伊红染色结果 对照组Hela细胞增殖活跃,分裂期细胞多见,细胞核呈类圆形,边界清,染色质均匀分 布呈浅蓝色着色,核仁明显(2-3个),细胞有伪足使细胞形态不规则,细胞密度高。药物组合 物(40 g/L)作用48h后Hela细胞形态发生明显变化,细胞密度降低,并出现凋亡细胞。凋亡 细胞胞体小,细胞膜完整,细胞核固缩,染色质浓缩,呈大小不等、数量不等的小球形、半月 形,核仁消失,核染色呈紫褐色。
[0040] 2.4药物组合物对Hela细胞p53基因表达的影响 药物组合物(40 g/L)作用48 h后Hela细胞p53表达下降,其蛋白染色灰阶度明显低于 对照组(P〈〇.〇l)。
【主权项】
1. 一种治疗宫颈癌的药物组合物,其特征在于制成该药物组合物的原料药的组成和重 量份为: 弹刀子菜562-568重量份密花草500-506重量份金鸡菊查耳酮204-208重量份棱果 海桐子50-60重量份仙鹤草内酯12-14重量份。2. 根据权利要求1所述一种治疗宫颈癌的药物组合物,其特征在于制成该药物组合物 的原料药的组成和重量份为: 弹刀子菜565重量份密花草503重量份金鸡菊查耳酮206重量份棱果海桐子55重量 份仙鹤草内酯13重量份。3. 根据权利要求1所述一种治疗宫颈癌的药物组合物,其特征在于药物组合物可以采 用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。4. 根据权利要求1所述一种治疗宫颈癌的药物组合物,其特征在于药物组合物与化学 药或中药组成的治疗宫颈癌药物。5. -种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法,其特征在于按如下步骤制备: 原料药的组成和重量份为:弹刀子菜562-568重量份密花草500-506重量份金鸡菊查 耳酮204-208重量份棱果海桐子50-60重量份仙鹤草内酯12-14重量份; 制备方法: (1)按原料药配比取弹刀子菜、密花草、金鸡菊查耳酮、棱果海桐子、仙鹤草内酯,混匀, 用重量百分比浓度21.5%乙醇作为溶剂,在38.5°C温浸提取,提取次数为25次,每次提取时 间26.5小时,每次溶剂用量为原料药总重量的36.5倍,滤过,得药渣A和提取液A,提取液A回 收乙醇,浓缩至相对密度1.14,滤过,药液通过LSD280大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重 量百分比浓度43.5%乙醇溶液洗脱LSD280大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度43.5%乙醇 洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物A; (2 )取步骤(1)药渣A,用重量百分比浓度59.5%乙醇作为溶剂,加热回流提取19次,每次 提取时间为〇. 1小时,每次溶剂用量为药渣A重量的56倍,滤过,得药渣B和提取液B,提取液B 回收乙醇,浓缩至相对密度1.04,滤过,药液通过FU-18大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用 重量百分比浓度77%乙醇溶液洗脱FU-18大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度77%乙醇洗 脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B; (3)将提取物A和提取物B混匀,即得药物组合物。6. 根据权利要求5所述一种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法,其特征在于按如下 步骤制备: 原料药的组成和重量份为:弹刀子菜565重量份密花草503重量份金鸡菊查耳酮206 重量份棱果海桐子55重量份仙鹤草内酯13重量份; 制备方法: (1)按原料药配比取弹刀子菜、密花草、金鸡菊查耳酮、棱果海桐子、仙鹤草内酯,混匀, 用重量百分比浓度21.5%乙醇作为溶剂,在38.5°C温浸提取,提取次数为25次,每次提取时 间26.5小时,每次溶剂用量为原料药总重量的36.5倍,滤过,得药渣A和提取液A,提取液A回 收乙醇,浓缩至相对密度1.14,滤过,药液通过LSD280大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用重 量百分比浓度43.5%乙醇溶液洗脱LSD280大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度43.5%乙醇 洗脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物A; (2 )取步骤(1)药渣A,用重量百分比浓度59.5%乙醇作为溶剂,加热回流提取19次,每次 提取时间为〇. 1小时,每次溶剂用量为药渣A重量的56倍,滤过,得药渣B和提取液B,提取液B 回收乙醇,浓缩至相对密度1.04,滤过,药液通过FU-18大孔吸附树脂柱,先用水洗脱,再用 重量百分比浓度77%乙醇溶液洗脱FU-18大孔吸附树脂柱,收集重量百分比浓度77%乙醇洗 脱液,回收乙醇,浓缩干燥,即得提取物B; (3)将提取物A和提取物B混匀,即得药物组合物。7. 根据权利要求5所述一种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法,其特征在于药物组 合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。8. 根据权利要求5所述一种治疗宫颈癌的药物组合物的制备方法,其特征在于药物组 合物与化学药或中药组成治疗宫颈癌药物。
【文档编号】A61K31/12GK106038799SQ201610502060
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月30日
【发明人】不公告发明人
【申请人】济南星懿医药技术有限公司
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