一种治疗骨折的口服制剂的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种治疗骨折的口服制剂，该制剂是由肉桂、珍珠、荜茇、安息香、阿纳其根、小豆蔻、中亚白及、丁香、花椒、干姜、乳香制成；具有补肾补脑和增强患者自然力，促进骨代谢及骨痂生长，加快骨折的愈合，临床上用于骨折的治疗。临床研究表明，骨折复位成功、无其他异常情况后，口服本制剂治疗尺桡骨骨折，其X线骨痂量评分优于对照组，骨折愈合时间早于对照组，同时对前臂旋转功能恢复快于对照组。实验研究，在大鼠左侧股骨骨折载体模型上口服本制剂，能增加大鼠骨小梁的密度，促进骨折的愈合。是一种有效安全的治疗骨折的口服制剂。
【专利说明】
一种治疗骨折的口服制剂
技术领域
[0001] 本发明涉及一种有补肾补脑和增强患者自然力，促进骨代谢及骨痂生长，加快骨 折的愈合，用于治疗骨折的口服制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 骨折是一种不时可较见多的创伤，随交通、工业的优越化和饮食习惯的改变，其发 生率日益增多并损伤机制和类型复杂。骨折是属于维医结构破坏性疾病，有时可伴有局部 血管、神经受到损害，阻滞局部所需营养的提供。虽然其本身具有自我修复能力，但骨折愈 合所需时间较长。如何加速骨折愈合、增加外力承受力一直是医学界共同关注的重大课题 之一，而骨折愈合是机体对创伤修复的复杂病理生理过程，影响骨折愈合的因素众多。故无 论在任何一个环节出现问题，均有可能导致骨折延迟愈合、骨不连或取除固定材料后再骨 折等后果。因此促进骨折愈合，减少迟迟愈合、不愈合的发生及改善骨质成为骨折治疗研究 的热点和难点。近年来虽然发现许多可以促进骨折愈合的方法，如各种诱导成骨因子、直流 电、磁场等，但均距人们所期望的愈合速度相差甚远，尚需寻求更好的方法。
[0003] 骨再生起源于局部炎症反应接着调动局部造血细胞和间充质干细胞来形成血管 网、软组织、软骨和骨，这是干细胞的有序增殖和分化并形成血管内皮细胞和成骨细胞的过 程。IL-10能使调节性T细胞分泌，对促炎细胞因子如TNF、IL-l、IL-6是一个强有力的抑制 剂。研究证实，骨折后大量骨生长因子和骨修复因子在组织修复的过程中对成骨细胞产生 积极的作用，这些细胞因子有多种，如骨形成蛋白、血管内皮生长因子、胰岛素样生长因子 等。研究发现:VEGF和BMP-2双基因转染在促进骨折方面具有协同效应，VEGF能通过促进血 管的生成来提高BMP-2成骨能力。骨组织中的IGF-I主要来自于成骨细胞、骨髓基质细胞分 泌和骨外组织。IGF-I以自分泌的方式刺激成骨细胞的复制和合成骨基质，受生长激素水平 的调控，它刺激骨骼细胞的有丝分裂，刺激工型胶原的合成，促进成骨细胞增殖。
[0004] 从医学当今的发展情况来看，在国内和国外在治疗骨折采用切开复位内固定、外 固定支架固定、髓内固定、石膏或夹板外固定等方法，但临床上发生骨不连的概率依然不易 减少。手术治疗中剥离骨膜，有损伤或感染周围血管神经的可能性，并且日后还要再行第2 次手术取出内固定，实施过程手续繁琐，费用昂贵，患者顾虑多，较难接受。
[0005]维吾尔医学对骨折的诊疗历史悠久，在各个历史时期，均有新的发展，积累了丰富 的理论和临床实践经验。在复位、固定、功能锻炼和药物治疗方面各有其独特的优点，并在 长期的治疗过程中，形成了很多疗效显著、副作用低的药物及复方药物。本发明所设计的治 疗骨折的□服制剂由肉桂、珍珠、荜茇、安息香、阿纳其根、小豆蔻、中亚白及、丁香、花椒、干 姜、乳香组成。我们通过临床研究和实验研究发现，该复方制剂促进骨折的愈合，对骨折的 治疗作用显著。
【发明内容】
[0006]本发明目的在于，提供一种治疗骨折的口服制剂，该制剂是由肉桂、珍珠、荜茇、安 息香、阿纳其根、小豆蔻、中亚白及、丁香、花椒、干姜、乳香制成，临床资料表明：骨折患者复 位成功、无其他异常情况后，□服该制剂一次7g，一日3次，连续治疗8周，通过X线检查，观察 骨痂生长、骨折愈合时间、前臂旋转功能恢复情况等指标，观察手法复位石膏外固定配合口 服本制剂对骨折愈合的效果。结果，本制剂对骨折愈合的作用优于对照组，未见副毒作用。
[0007] 本发明所述一种治疗骨折的口服制剂，其特征在于该制剂每1份各组份的含量为： 肉桂15-280克、珍珠5-75克、荜茇25-230克、安息香20-380克、阿纳其根30-180克、小豆蔻5-125克、中亚白及15-210克、丁香4-128克、花椒12-196克、干姜30-48克、乳香3-45克。
[0008] 所述治疗骨折的口服制剂的制备方法，该方法将肉桂15-280克、珍珠5-75克、荜茇 25-230克、安息香20-380克、阿纳其根30-180克、小豆蔻5-125克、中亚白及15-210克、丁香 4-128克、花椒12-196克、干姜30-48克、乳香3-45克混合，搅拌均匀，粉碎过100-200目筛，按 常规制药方法经灭菌消毒，制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂等口服制剂；
[0009] 或按常规提取方法，分别将荜茇25-230克、小豆蔻5-125克、中亚白及15-210克、花 椒12-196克、干姜30-48克药材放入容器中，每次加入3-20倍量的水或体积浓度为20-95% 的乙醇，煎煮0.5-3小时，共煎煮1 -3次，合并煎煮液浓缩，干燥，得到混合物A，再将肉桂15-280克、珍珠5-75克、阿纳其根30-180克、丁香4-128克、乳香3-45克、安息香20-380克药材粉 碎过100-200目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后，按常规制药方法经灭菌消 毒，制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液等口服制剂。
【附图说明】
[0010]图1为本发明术后第2周股骨X线片，其中A，B，C，D，E分别为五组；
[0011]图2为本发明术后第4周股骨X线片，其中A，B，C，D，E分别为五组；
[0012] 图3为本发明术后第6周股骨X线片，其中A，B，C，D，E分别为五组。
【具体实施方式】
[0013] 实施例1(以1份为基数制备片剂）
[0014] 将肉桂15克、珍珠5克、荜茇25克、安息香20克、阿纳其根30克、小豆蔻5克、中亚白 及15克、丁香4克、花椒12克、干姜30克、乳香3克混合，搅拌均匀，粉碎过100目筛，按常规制 药方法经灭菌消毒，制成治疗骨折的片剂制剂，为每日3次，每次7克。
[0015]实施例2(以1份为基数制备胶囊剂）
[0016] 将肉桂100克、珍珠25克、荜茇50克、安息香60克、阿纳其根50克、小豆蔻50克、中亚 白及55克、丁香45克、花椒60克、干姜35克、乳香10克混合，搅拌均勾，粉碎过100目筛，按常 规制药方法经灭菌消毒，制成治疗骨折的胶囊剂制剂，为每日3次，每次7克。
[0017]实施例3(以1份为基数制备颗粒剂）
[0018] 将肉桂280克、珍珠75克、荜茇230克、安息香380克、阿纳其根180克、小豆蔻125克、 中亚白及210克、丁香128克、花椒196克、干姜48克、乳香45克混合，搅拌均匀，粉碎过200目 筛，按常规制药方法经灭菌消毒，制成治疗骨折的颗粒剂制剂，为每日3次，每次7克。
[0019]实施例4(以1份为基数制备丸剂）
[0020] 将肉桂150克、珍珠10克、荜茇100克、安息香100克、阿纳其根80克、小豆蔻75克、中 亚白及100克、丁香80克、花椒100克、干姜40克、乳香25克混合，搅拌均匀，粉碎过200目筛， 按常规制药方法经灭菌消毒，制成治疗骨折的丸剂制剂，为每日3次，每次7克。
[0021]实施例5(以1份为基数制备片剂）
[0022]按常规提取方法，分别将荜茇230克、小豆蔻50克、中亚白及150克、花椒150克、干 姜30克药材放入容器中，每次加入3倍量的水，煎煮0.5小时，共煎煮3次，合并煎煮液浓缩， 干燥，得到混合物A，再将肉桂15克、珍珠5克、阿纳其根30克、丁香4克、乳香3克、安息香20克 药材粉碎过100目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后，按常规制药方法经灭菌 消毒，制成治疗骨折的片剂制剂，为每日3次，每次7克。
[0023]实施例6(以1份为基数制备片剂）
[0024]按常规提取方法，分别将荜茇150克、小豆蔻125克、中亚白及150克、花椒196克、干 姜48克药材放入容器中，每次加入体积浓度为20%的乙醇，煎煮1小时，共煎煮2次，合并煎 煮液浓缩，干燥，得到混合物A，再将肉桂280克、珍珠75克、阿纳其根180克、丁香128克、乳香 45克、安息香380克药材粉碎过200目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后，按常 规制药方法经灭菌消毒，制成治疗骨折片剂制剂，为每日3次，每次7克。
[0025]实施例7(以1份为基数制备胶囊剂）
[0026]按常规提取方法，分别将荜茇25克、小豆蔻15克、中亚白及50克、花椒40克、干姜30 克药材放入容器中，每次加入10倍量的水，煎煮1.5小时，共煎煮2次，合并煎煮液浓缩，干 燥，得到混合物A，再将肉桂50克、珍珠25克、阿纳其根60克、丁香40克、乳香10克、安息香60 克药材粉碎过100目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后，按常规制药方法经灭 菌消毒，制成治疗骨折的胶囊剂制剂，为每日3次，每次7克。
[0027]实施例8(以1份为基数制备胶囊剂）
[0028]按常规提取方法，分别将荜茇150克、小豆蔻75克、中亚白及150克、花椒120克、干 姜35克药材放入容器中，每次加入体积浓度为75%的乙醇，煎煮1小时，共煎煮2次，合并煎 煮液浓缩，干燥，得到混合物A，再将肉桂150克、珍珠50克、阿纳其根80克、丁香80克、乳香30 克、安息香120克药材粉碎过200目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后，按常规 制药方法经灭菌消毒，制成治疗骨折的胶囊剂制剂，为每日3次，每次7克。
[0029]实施例9(以1份为基数制备颗粒剂）
[0030]按常规提取方法，分别将荜茇200克、小豆蔻100克、中亚白及180克、花椒150克、干 姜45克药材放入容器中，每次加入15倍量的水，煎煮2小时，共煎煮3次，合并煎煮液浓缩，干 燥，得到混合物A，再将肉桂180克、珍珠55克、阿纳其根150克、丁香80克、乳香25克、安息香 250克药材粉碎过100目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后，按常规制药方法 经灭菌消毒，制成治疗骨折的颗粒剂制剂，为每日3次，每次7克。
[0031] 实施例10(以1份为基数制备颗粒剂）
[0032] 按常规提取方法，分别将荜茇180克、小豆蔻105克、中亚白及185克、花椒120克、干 姜48克药材放入容器中，每次加入体积浓度为70%的乙醇，煎煮2小时，共煎煮2次，合并煎 煮液浓缩，干燥，得到混合物A，再将肉桂250克、珍珠70克、阿纳其根150克、丁香80克、乳香 40克、安息香300克药材粉碎过100目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后，按常 规制药方法经灭菌消毒，制成治疗骨折的颗粒剂制剂，为每日3次，每次7克。
[0033]实施例11(以1份为基数制备丸剂）
[0034]按常规提取方法，分别将荜茇200克、小豆蔻95克、中亚白及150克、花椒96克、干姜 30克药材放入容器中，加入20倍量的水，煎煮3小时，共煎煮1次，浓缩，干燥，得到混合物A， 再将肉桂250克、珍珠65克、阿纳其根90克、丁香45克、乳香10克、安息香250克药材粉碎过 100目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后，按常规制药方法经灭菌消毒，制成 治疗骨折的丸剂制剂，为每日3次，每次7克。
[0035]实施例12(以1份为基数制备丸剂）
[0036]按常规提取方法，分别将荜茇205克、小豆蔻110克、中亚白及185克、花椒102克、干 姜38克药材放入容器中，加入体积浓度为95%的乙醇，煎煮3小时，共煎煮1次，浓缩，干燥， 得到混合物A，再将肉桂115克、珍珠35克、阿纳其根108克、丁香85克、乳香25克、安息香300 克药材粉碎过100目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后，按常规制药方法经灭 菌消毒，制成治疗骨折的丸剂制剂，为每日3次，每次7克。实施例13(以1份为基数制备颗粒 剂）
[0037]实施例13(以1份为基数制备口服液）
[0038]按常规提取方法，分别将荜茇230克、小豆蔻15克、中亚白及45克、花椒45克、干姜 30克药材放入容器中，每次加入8倍量的水，煎煮2.5小时，共煎煮3次，合并煎煮液浓缩，干 燥，得到混合物A，再将肉桂125克、珍珠15克、阿纳其根80克、丁香45克、乳香35克、安息香 120克药材粉碎过200目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后，按常规制药方法 经灭菌消毒，制成治疗骨折的口服液制剂，为每日3次，每次7克。
[0039]实施例14 (以1份为基数制备口服液）
[0040]按常规提取方法，分别将荜茇85克、小豆蔻125克、中亚白及210克、花椒196克、干 姜48克药材放入容器中，每次加入体积浓度为75 %的乙醇，煎煮2.5小时，共煎煮3次，合并 煎煮液浓缩，干燥，得到混合物A，再将肉桂250克、珍珠75克、阿纳其根170克、丁香108克、乳 香45克、安息香350克药材粉碎过200目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后， 按常规制药方法经灭菌消毒，制成治疗骨折的口服液制剂，为每日3次，每次7克。
[0041 ] 实施例15
[0042]本发明所述的治疗骨折的口服制剂对骨析愈合影响的临床研究 [0043] 1.临床资料
[0044] 本研究对新疆维吾尔自治区维吾尔医医院骨伤科就诊的66例尺桡骨干骨折患者， 以维吾尔医正骨法复位后，观察组分33例，对照组分33例，观察二组的综合临床疗效，X线观 察并骨痂网格量化评定、骨折愈合时间、安全性及术后第四个月前臂旋转功能情况。
[0045] 2.研究人群
[0046] 2.1诊断标准
[0047] 2.1.1西医诊断标准（参照全国高等医药学校统编教材《西医外科学》（第8版）、 《骨放射学》(第5版)及岳贵兴主编的《骨科学》诊断标准定制）。
[0048] 2.1.2维吾尔医诊断标准:参照《维吾尔医学高等本科学校教材维吾尔医骨科学》 (本科试用教材），新疆维吾尔医专科学校编印，2009年3月。《中国医学百科全书维吾尔医学 分卷》第四册，新疆科技卫生出版社出版，1994年10月第一版）。
[0049] 2.2诊断要点：（1)临床表现:①有明确外伤史，以间接暴力多见;②查体:骨折部 位肿胀、淤血、疼痛，外观可有凹陷畸形，可触及骨擦感。（2)X线确诊为骨连续性破坏的四肢 骨折。
[0050] 2.3纳入标准
[0051] 2.3.1符合西医诊断标准的尺桡骨干闭合性骨折。
[0052] 2.3.2符合维吾尔医手法复位治疗者。
[0053] 2.3.3病程不超过一周者。
[0054] 2.3.4 年龄6-60岁。
[0055] 2.3.5知情同意，志愿受试。
[0056] 2.4排除标准
[0057] 2.4.1除了闭合型尺桡骨干骨折外所有骨折。
[0058] 2.4.2以局部骨折端无移位及压缩性骨折，嵌插骨折等。
[0059] 2.4.3过敏体质和对多种药物过敏者。
[0060] 2.4.4合并心，肝、肾、造血系统、内分泌系统等严重原发性疾病及精神病患者。 [00611 2.4.5怀疑或确有酒精、药物滥用病史。
[0062] 2.4.6病情危重，难以对维药的有效性和安全性作出确切评价者
[0063] 2.4.7近1个月内参加过其他药物临床试验。
[0064] 2.5疗效判定标准
[0065]参照《中医病证诊断疗效标准》[10]。痊愈:患者的各项临床症状均完全消失，功能 活动均恢复至正常水平，经X线片检查可见骨折骨性愈合;显效：患者的各项临床症状均得 到明显的改善，功能活动均基本恢复至正常水平，经X线片检查可见骨折临床愈合;控制：患 者的各项临床症状均得到一定的改善，功能活动基本恢复至正常水平，经X线片检查可见骨 折迟缓愈合;无效:患者的各项临床症状较之治疗前均未得到改善甚至加重，功能活动未恢 复，经X线片检查可见骨折迟缓愈合。
[0066] 有效率=(痊愈+显效+控制)/nX100%
[0067] 3.治疗方案 [0068] 3.1手法复位
[0069] 整复前仔细阅读X线片，明确骨折移位方向和程度，制定详细的整复方案。根据患 者年龄选择是否行臂丛神经阻滞麻醉由麻醉医师完成。整复时，置于患者复位床取仰卧，患 肩外展90°，屈肘90°，在C型臂X光机下，两助手行拔伸牵引。上1/3骨折，前臂应置于旋后位； 中、下1/3骨折，则前臂应置于中立位进行拔伸，以矫正旋转、成角和重叠移位。如骨折段互 相成角向轴心靠拢移位时，医者可行挤捏分骨。横或短斜骨折，有侧方移位者，医者一手捏 持住近骨折端，另一手捏持住移位的远骨折端，将骨折突起处按捺平整，如重叠移位未获改 善，可改作反折捺正手法。斜或螺旋骨折，有背向移位，医者持住近骨折段旋转使两骨折面 接触，再用挤捏法，使两骨折面紧密吻合。如为儿童青枝骨折，有成角移位者，在拔矫枉稍过 正。
[0070] 3.2石膏外固定
[0071]复位完成后，在两个助手维持稳定牵引情况下，根据骨折块移位的方向在折端移 位处加用压垫，以免弹回再移位。若复位前桡、尺骨相互靠拢者，可用分骨垫放置在两骨之 间;若骨折原有侧方移位或成角移位。各垫放置妥当后，患肢从上臂中段至手心置一层薄棉 垫，以保护皮肤。将石膏绷带泡于25摄氏度热水，向心挤压，先前臂行缚扎，根据骨折类型、 骨折块移位的方向在折端移位处适当的缩形。然后屈肘90°，石膏绷带包扎固定，前臂原则 上放置中立位，用三角巾悬吊于胸前。
[0072] 3.3整复时注意事项及后处理
[0073] 3.3.1整复时高度关注患者的生命体征，保证正骨室空气新鲜及气流流畅。如果 出现紧急情况，立即运用急救措施。
[0074] 3.3.2整复固定时，注意棉垫均匀，石膏绷带不紧不松。石膏固定结束后，检查固 定是否妥善，即引导患者进行手指屈伸、握拳活动等功能锻炼。
[0075] 3.3.3密切观察患肢血运，皮肤感觉及手指活动情况，若出现肢端苍白，青紫，麻 木，疼痛，可能为外固定过紧而致，应立即复诊，防止Volklnarm缺血性肌挛缩的发生，术后7 天内嘱患儿适当抬高患肢以利于消肿。
[0076] 3.3.4整复固定后，复查X线片，了解骨折复位情况，若复位不理想，可再行矫正。
[0077] 3.3.5石膏外固定术后，避免外力致石膏折断而失去固定作用，应及时修补或更 换。
[0078] 3.3.6整复后3-4周，根据复查骨折愈合情况，先解除肘关节固定，鸡蛋清夹板固 定。4-8周去除包扎物，并指导患者积极进行前臂旋转及肘腕关节屈伸功能的恢复训练。
[0079] 3.4维药口服复位成功、无其他异常情况后，观察组:本制剂，口服一次7g，一日3 次；对照组:接骨七厘片，口服一次1.5g，一日3次，连续3周。全部8周为一疗程。住院治疗 (14±7)天，定期复查6周。分别在骨折复位前和复位后的第1、21、35和42天拍片，观察骨痂 生长并记录骨折愈合时间。复位术后第120±7天随访，观察前臂旋转功能恢复。
[0080] 4.观测指标
[0081] 4.1安全性观测指标
[0082] 安全性观测指标包括患者一般情况和肝功能以1^^51'、了811^^1^、丫-61')、肾功能 (BUN，Cr)等有关检查。以上项目于入组前3天内和药物治疗结束后各检测1次。治疗前正常 而治疗后异常，或治疗前异常而治疗后异常加重者应当即复查确诊，复查确认异常者应为 本制剂对肝、肾功能有影响者。
[0083] 4.2疗效性观测指标
[0084] 4.2.1临床观测指标:骨折临床愈合标准
[0085] ①局部无压痛及纵向叩击痛；
[0086]②局部无异常活动；
[0087]③X线片显示骨折处有连续性骨痂，骨折线已模糊；
[0088]④拆除外固定后，能向前平举Ikg重物持续达1分钟。
[0089]⑤连续观察2周骨折处不变形。
[0090] 4.2.2 X线检查：
[0091] 术后第3、5、7周，对骨折愈合情况进行评分，评分根据骨折愈合的相关标准进行， 根据骨折断端的边缘变化情况、骨痂密度、骨痂量与骨痂的边缘情况评定相应的分数，计算 总得分。根据骨挪形成情况观察不同时间点骨折端骨痂生长情况并进行评分。
[0092]表1-1骨痂量评分标准 LUU?M」4.3前臂屁转功能评足
[0095]美国特种外科医院(HSS)改良肘关节功能评价法（只采用旋转度和日常动作的评 价)。
[0096]表1-2前臂旋转度和日常动作评分表(总40分）
[0099] 得分36分以上为优，26~35分为良，11~25分为可，10分以下为差 [0100] 5.统计方法
[0101] 运用SPSS17.0统计软件进行分析，根据观察指标和数据，计量资料采用t检验，计 数资料采用x2检验，P〈0.05为有显著性差异。
[0102] 6.结果
[0103] 6.1安全性观测指标对实验组患者给药前、后，检测肝、肾功能指标，经配对资料 t检验，均P>0.05,具体如下。
[0104]表1-3治疗组组骨折患者给药前、后安全性检测（Z±s)
[0106] 经配对样本t检验，P均大于0.05。无明显的统计学差异。
[0107] 6.2骨折X线评分
[0108] 两组治疗后3、5、7周的骨折愈合过程中X线评分比较存在明显的统计学差异(P〈 0.05 )，提示观察组骨折愈合程度高于对照组。
[0109] 表1-4不同时间点两组患者骨折愈合X线评分（
[0111] 实验组患者与对照组相比，第3、5周P〈0.01，第7周P〈0.05。
[0112] 6.3骨折临床愈合时间比较
[0113] 两组前臂双骨折患者经上述两种方法治疗后骨折全部愈合，两组愈合时间经卡方 检验，观察组与对照组愈合时间之间比较P〈〇.05,有显著性差异。
[0114] 表1-5两组患者骨折愈合时间
[0116] 经Pearson卡方检验，x2 = 10 · 38，Ρ = 0 · 034(P〈0 · 05) 〇
[0117] 6.4 HSS旋转度和日常动作评价比较
[0118] 整复后120 ± 7天，对两组患者骨折愈合后根据HSS旋转度和日常动作评价标准评 定，优良率分别为:观察组87.8%，对照组72.7%。经卡方检验观察组组疗效优于实验组，P〈 0.05,有显著性差异。
[0119] 表1-6两组患者HSS旋转度和日常动作评价
[0121] 经卡方检验，x2 = 6.145，P = 0.046(P〈0.05)，观察组与对照组比较有显著性差异
[0122] 7.小结
[0123] 本方法手法复位石膏外固定配合本制剂口服制剂治疗尺桡骨骨折，经过两组尺桡 骨患者不同时间点X线骨痂量评分，骨折临床愈合时间，前臂旋转功能恢复等比较两组组患 者的综合临床疗效，66例患者全愈合，痊愈率100%。观察组X线骨痂量评分优于对照组(P〈 0.05)，观察组骨折愈合时间早于对照组(P〈0.05)，两组平均愈合时间：观察组5.52± 1.093 周，对照组6.24± 1.091周。观察组前臂旋转功能恢复快于对照组(P〈0.05)观察组均好于接 骨七厘片组，能增加骨小梁的密度，促进骨折的愈合。患者给药前、后的肝肾功能相关指标 发现，此药对患者肝肾功能未明显的影响。
[0124] 实施例16
[0125] 本发明治疗骨折的口服制剂对骨析愈合影响的实验研究
[0126] 1.试验方法
[0127] 1.1实验动物及骨折模型的制备
[0128] 1.1.1实验动物
[0129] 选取营养状况良好的成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠180只，年龄4月，平均体 重250 士 20g。所有大鼠均由新疆医科大学实验动物中心提供。整个实验过程均遵循动物保 护和应用委员会的相关文件。
[0130] 1.1.2骨折模型的制备
[0131] 建立大鼠骨折模型:造模前天对大鼠左侧大腿手术区进行剃毛备皮。采用5%戊巴 比妥钠和0.9%生理盐水混合稀释为0.3%的戊巴比妥钠稀释液后腹腔注射lml/100g，麻醉 起效后将大鼠置于手术台上，左侧大腿常规消毒、铺巾。沿骸骨内侧做一长约Icm的切口，切 开内侧支持带后向外翻转骸骨，暴露股骨骸，在股骨骸间偏前用直径1.2_的尖锐利克氏针 开口，再采用直径同样的克氏针一沿着开口逆行插入髓腔直至触及股骨大转子。固定牢固 后，贴着关节面剪断克氏针。取股骨外侧中段做一长约2cm切口，沿着肌间隔钝性分离暴露 股骨，以锋利骨剪于中下段处横行剪断股骨，逐层缝合切口。术后送至影像中心行X线透视， 剔除非中段横行骨折模型大鼠。
[0132] 1.2实验分组及干预措施
[0133] 将150只所有己造模成功的大鼠采用随机方法分为A，B，C，及E五组，单笼饲养。观 察3天无伤口感染后，实验组给予本制剂。灌胃时，按IOg/次喂服，每日3次，按千克体重计 算，高、中、低剂量三组每次灌胃剂量分别为8g/Kg，4/Kg，2g/Kg。阳性对照组给予接骨七厘 片，将临床用药剂量换为大鼠剂量，其灌胃时2.32g/Kg。空白对照组灌胃生理盐水15ml/Kg。 每只灌胃体积〇 · 2ml /1 OOg，1次/日。
[0134] 空白对照组：30只，生理盐水15ml/Kg灌胃2周；
[0135] 阳性对照组:30只，接骨七厘片2.32g/Kg灌胃2周；
[0136] 低剂量组:30只，本制剂2g/Kg灌胃2周；
[0137] 中剂量组:30只，本制剂4g/Kg灌胃2周；
[0138] 高剂量组:30只，本制剂8g/Kg灌胃2周。
[0139] 术后让其在笼内自由活动，常规使用碘伏对切口进行擦拭消毒，定期更换垫料并 进行消毒，所有大鼠均在自治区维吾尔医药研究所GLP实验中心饲养。
[0140] 2.观察指标
[0141] 2.1 -般情况
[0142] 术后观察大鼠的生命征、手术切口愈合情况及肢体活动情况，记录造模失败及数 据缺损的资料。
[0143] 2.2安全性检测
[0144] 术后2，4，6周，在处死动物前取各组动物外周血，送本所检验科离心分离血清，离 心速度为3000次/分钟，测定血生化指标含量并进行比较，观察不同剂量组之间的差异。
[0145] 2.3影像学检查
[0146] 术后第2,4,6周将全部大鼠按照同一条件(体位要求:仰卧位，右侧股骨保持屈髋 屈膝成角90°。曝光条件:52KV，间隔12.5ms，250mA，进行X线摄片，根据X线影像学资料对骨 折愈合情况进行评估。参考Garrett等[16]提出的X线评分系统作为骨折愈合评分指标。采 用盲法及随机方法评分，对所得的结果进行分析。
[0147] 表 2-1 Garrett 评分系统
[0149] 2.3骨生长因子和炎症因子的测定
[0150] 分别在术后2,4,6周，在处死动物前取各组动物外周血，送本所检验科离心分离血 清，离心速度为3000次/分钟。离心后分别装入1.5ml的EP管，检测前将血清置-80°C低温冰 箱中待测骨形态发生蛋白-2(BMP-2)，血管内皮生长因子（VEGF)、胰岛素样生长因子-1 (IGF-I)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)以及白介素-IO(IL-IO)等指标含量并进行比较。操作步 骤严格按照"大鼠 BMP-2、VEGF、IGF-1、IL-10和TNF-a检测ELISA试剂盒说明书，应用 MultiskanFC型酶标仪试验机检测。
[0151] 3.统计学分析
[0152] 所有数据采用计学处理。数据以SPSS17.0统计软件包（SPSS Inc, 17.0版本)进行 统计学处理。数据以s表示，各组间数据进行正态性检验及方差齐性分析，在满足正态性 检验的前提下，若方差齐采用单因素方差分析，方差不齐采用非参数检验法检验 (Nemenyi)，Ρ〈0· 05认为差异具有统计学意义。
[0153] 4.结果
[0154] 4.1安全性检测
[0155] 术后对不同剂量组检测肝肾功能指标，采用方差分析进行数据统计。同一个指标 在不同干预组之间无差别，Ρ>〇.05。本制剂对肝肾功能无明显的损害。
[0156] 表2-2不同干预组之间肝、肾功能相关指标（1土&)
[0159] 经过多组间方差分析比较，均P>0.05,各组间无统计学差异。
[0160] 4.2影像学检查
[0161] 术后2周：剂低量组部分骨折线稍微模糊，骨折断端可见连续骨痂生成；中剂量组 骨折线模糊，骨折断端可见显著得骨痂生成;高剂量组骨折线较清晰，骨折断端可见少量原 始骨痂生成；阳性对照组部分骨折线模糊，并骨折断端原始骨痂生成;空白对照组骨折线清 晰，骨折断端无明显骨痂生成。
[0162] 术后4周：低剂量组可见骨折线两侧骨痂连接增生，一侧均骨桥生成，骨折线较模 糊；中剂量组可见大量连续骨痂生成，一侧均骨桥生成，骨折线即将消失;高剂量组可见部 分骨折线两侧骨痂连接增生及一侧均骨桥生成，骨折线较模糊；阳性对照组可见骨折线一 侧骨痂连续增生，两侧均无骨桥生成，骨折线较模糊;空白对照组可见一侧皮质有骨桥，骨 折断端周围有显著的骨痂形成。
[0163] 术后6周:低剂量组可见双侧骨皮质均有清晰骨桥，未见骨折线，骨痂部分塑型；中 剂量组可见双侧骨皮质均有清晰骨桥，未见骨折线，并且骨痂塑型;高剂量组可见一侧骨皮 质有清晰骨桥，可见部分骨折线较清晰；阳性对照组可见双侧骨皮质均有骨桥，骨痂开始部 分塑型；空白对照组可见一侧骨皮质有清晰骨桥，骨折线较模糊。参见图片中A、B、C、D、E图 分别为空白对照组、阳性对照组和莎拉吉提蜜膏低、中、高剂量组X线片图。
[0164] 表2-3不同时间点大鼠骨折愈合影像学Garrett评分（i±s:)
[0166] 注:a表示与空白对照组比较，P〈0.05;b表示与阳性对照组比较，P〈0.05; ^表示与低 剂量组比较，P〈〇. 05;d表示与中剂量组比较，P〈0.05; 6表示与高剂量组比较，P〈0.05 [0167] 表2-3是根据Garrett评分标准得出来的五组术后2、4、6周不同时间点X线检查评 分结果。多组间采用方差分析两两比较进行数据统计。同一时间点高、中、低剂量组分别与 阳性对照组和空白对照组比较，低、中剂量组与阳性对照组和空白对照组之间统计学差异 有显著性意义(P〈0.05)，高剂量组分别与阳性对照组和空白对照组之间统计学差异不明显 (P>0.05 )，低剂量组和中剂量组Garrett评分优于其他三组，高剂量组Garrett评分低于阳 性对照组，与空白对照组相等；低剂量组和中剂量组分别与高剂量组比较存在统计学差异 (P〈0.05 )，低剂量组和中剂量组Garrett评分优于高剂量组，低剂量组与中剂量组两组比较 无统计学意义(P>〇.05)，表明两组Garrett评无差异，但中剂量组Garrett评分高于低剂量 组。可以认为低剂量组和中剂量组的骨折愈合评分高于其他三组，而低剂量组骨折愈合程 度低于阳性对照组，与空白对照组相同。
[0168] 4.3骨生长因子和炎症因子的测定
[0169] 将五组大鼠术后2、4、6周采外周血，以ELISA法酶标仪检测血清BMP-2、IGF-I、VEGF 等骨生长因子以及IL-10、TNF-a等炎症有关因子的表达。多组间采用方差分析两两比较进 行数据统计。同一时间点高、中、低剂量组分别与阳性对照组和空白对照组比较。
[0170] 4.3.1骨生长因子的检测
[0171] 4.3.1.1 BMP-2的检测：根据表2-4大鼠血清中BMP-2的表达术后第2周最明显，中 剂量组与低剂量、阳性对照和空白对照组之间有显著性差异(P〈〇.05)，高剂量组分别与阳 性对照组和空白对照组组之间统计学差异有显著性意义(P〈〇.05)，低剂量组与阳性对照和 空白对照组之间，高剂量组与中剂量组之间统计学差异不明显(P>〇.05)，表明大鼠血清中 剂量组BMP-2的表达最高，优于其他四组，高剂量组的表达优于低剂量组、阳性对照组和空 白对照组;术后第6周，骨形态发生蛋白-2的表达呈现下降趋势，各组间没有显著性差异。
[0172] 表2-4不同时间点大鼠血清中BMP-2的表达（?土s)
[0174] 注:a表示与空白对照组比较，Ρ〈0.05;b表示与阳性对照组比较，Ρ〈0.05; ^表示与低 剂量组比较，Ρ〈〇. 05;d表示与中剂量组比较，Ρ〈0.05; 6表示与高剂量组比较，Ρ〈0.05
[0175] 4.3.1.2 IGF-I的检测:根据表2-5的结果，术后第4周，大鼠血清中IGF-I的表达最 明显，第6周呈现下降趋势。中剂量组与低剂量组、阳性对照组和空白对照组之间并高剂量 组与阳性对照组和空白对照组之间统计学差异有显著性意义(Ρ〈〇.05)，低剂量组与阳性对 照组和空白对照组之间统计学差异不明显(Ρ>〇.05)，表明大鼠血清中剂量组IGF-I的表达 最高，优于其他四组，高剂量组的表达优于低剂量组、阳性对照组和空白对照组。
[0176] 表2-5不同时间点大鼠血清中IGF-I的表达(X土s)
[0178] 注:a表示与空白对照组比较，Ρ〈0.05;b表示与阳性对照组比较，Ρ〈0.05; ^表示与低 剂量组比较，P〈〇. 05;d表示与中剂量组比较，P〈0.05; 6表示与高剂量组比较，P〈0.05 [0179] 4.3.1.3 VEGF的检测：根据表2-6随时间血清中血管内皮生长因子的表达呈现下 降趋势。术后第2周，大鼠血清中VEGF的表达最明显，中剂量组与低剂量组间无显著性差异 (P>0.05)，中剂量组合低剂量租分别与其他三组之间统计学差异有显著性意义(P〈0.05)， 高剂量别与阳性对照组和空白对照组之间统计学差异不明显(P>〇.05);术后第6周，高剂量 组与其他四组组之间统计学差异有显著性意义(P〈〇.05)，高剂量组表达均低于其他四组， 其他四组间无统计学差异(P>〇. 05)。表明大鼠血清中中剂量组和低剂量组VEGF的表达优于 其他三组，中剂量组的表达略高于低剂量组。 「η?κη? 券9-R不同R计问占十if rfn诘由VP「TT7的券!女f
[0182] 注:a表示与空白对照组比较，Ρ〈0.05;b表示与阳性对照组比较，Ρ〈0.05; ^表示与低 剂量组比较，Ρ〈〇. 05;d表示与中剂量组比较，Ρ〈0.05; 6表示与高剂量组比较，Ρ〈0.05
[0183] 4.3.2炎症因子的检测
[0184] 4.3.2.1 IL-10的检测:根据表2-7大鼠血清中IL-10的表达呈现下降趋势。中剂量 组和低剂量组与其他三组之间统计学差异有显著性意义(Ρ〈〇.05)，高剂量组分别与阳性对 照组和空白对照组之间统计学差异不明显(Ρ>〇.05)，中剂量组与低剂量组之间统计学差异 不明显(PX). 05 )，表明大鼠血清中中剂量组和低剂量组IL-10的表达高于其他三组;术后第 6周，中剂量组其他四组之间并低剂量组与中剂量组、阳性对照组和空白对照组之间之间统 计学差异有显著性意义(P〈〇.05)，高剂量组与阳性对照组和空白对照组组之间统计学差异 不明显(P>0.05 )，表明中剂量组IL-10的表达最高，优于其他四组，高剂量组的表达最低，低 于其他四组。
[0185] 表2-7不同时间点大鼠血清中IL-10的表达（i±s)
[0187] 注:a表示与空白对照组比较，P〈0.05;b表示与阳性对照组比较，P〈0.05; ^表示与低 剂量组比较，P〈〇. 05;d表示与中剂量组比较，P〈0.05; 6表示与高剂量组比较，P〈0.05。
[0188] 4.3.2.2 TNF-α的检测:表2-8术后第2周TNF-α表达最高，随时间呈下降趋势，中剂 量组和低剂量组分别与其他三组之间统计学差异有显著性意义(P〈〇.05)，高剂量组与阳性 对照组之间并且中剂量组与低剂量组之间无统计学差异(P>〇.05);术后第6周，中剂量组与 其他四组之间组之间统计学差异有显著性意义(P〈〇.05)，其他四组相互之间无统计学差异 (P>0.05)，表明血清中中剂量组TNF-α的表达低于其他四组。
[0189] 表2-8不同时间点大鼠血清中TNF-a的表达（5土 s)
[0191] 注:a表示与空白对照组比较，P〈0.05;b表示与阳性对照组比较，P〈0.05; ^表示与低 剂量组比较，P〈〇. 05;d表示与中剂量组比较，P〈0.05; 6表示与高剂量组比较，P〈0.05
[0192] 5.小结
[0193] 5.1大鼠骨折模型的固定方法克氏针内固定，其容易操作、创伤较小;缺点是轴向 及旋转稳定性差，容易脱出。本研究所选克氏针与大鼠髓腔直径相近，这样会增加其固定的 稳定性。正式实验前精炼造模方法，造模失败率控制20 %以内。
[0194] 5.2 X线检查骨折愈合Carrett评分，同一时间点，低、中、高剂量组分别与阳性对 照组和空白对照组比较，低、中剂量组与阳性对照组和空白对照组之间统计学差异有显著 性意义（P〈0.05)，高剂量组分别与阳性对照组和空白对照组之间统计学差异不明显（P> 0.05)，低剂量组和中剂量组Garrett评分优于其他三组，高剂量组Garrett评分低于阳性对 照组，与空白对照组相等。可以认为低剂量组和中剂量组的骨折愈合评分高于其他三组，而 低剂量组骨折愈合程度低于阳性对照组，与空白对照组相同。
[0195] 5.3术后2、4、6周腹主动脉采血，以ELISA法检测血清中BMP-2、IGF-I、VEGF、IL-10 及TNF-α的表达。血清BMP-2、IGF-I、VEGF和IL-10中剂量组的表达与空白对照组和阳性对照 组差异明显（均P〈〇. 05)，高剂量组的表达低于阳性对照(P〈0.05)，高剂量组与空白对照组 无明显的差异(均P>〇.05)，IGF-I中剂量组的表达与空白对照组和阳性对照组差异明显（均 P〈0.05)，高剂量组的表达高于阳性对照(P〈0.05);而TNF-a的表达中剂量组的表达低于高 剂量组、阳性对照组及空白对照组(P〈〇. 05)，高剂量组的表达高于中剂量组和低剂量组(P〈 0.05)，与空白对照组相比无明显的差异(P>0.05)。本制剂能增加骨小梁的密度，促进骨折 的愈合。
【主权项】
1. 一种治疗骨折的口服制剂，其特征在于该制剂每1份各组份的含量为：肉桂15-280 克、珍珠5-75克、荜茇25-230克、安息香20-380克、阿纳其根30-180克、小豆蔻5-125克、中 亚白及15-210克、丁香4-128克、花椒12-196克、干姜30-48克、乳香3-45克。2. 根据权利要求1所述的治疗骨折的口服制剂的制备方法，其特征在于该方法将肉桂 15-280克、珍珠5-75克、荜茇25-230克、安息香20-380克、阿纳其根30-180克、小豆蔻5-125克、中亚白及15-210克、丁香4-128克、花椒12-196克、干姜30-48克、乳香3-45克混合，搅 拌均匀，粉碎过100-200目筛，按常规制药方法经灭菌消毒，制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂 口服制剂； 或按常规提取方法，分别将荜茇25-230克、小豆蔻5-125克、中亚白及15-210克、花椒 12-196克、干姜30-48克药材放入容器中，每次加入3-20倍量的水或体积浓度为20-95%的乙 醇，煎煮〇 . 5-3小时，共煎煮1-3次，合并煎煮液浓缩，干燥，得到混合物A，再将肉桂15-280 克、珍珠5-75克、阿纳其根30-180克、丁香4-128克、乳香3-45克、安息香20-380克药材粉碎 过100-200目筛，得到混合物B，再将混合物A与混合物B混匀后，按常规制药方法经灭菌消 毒，制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液口服制剂。
【文档编号】A61K9/00GK106075376SQ201610705323
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年8月23日
【发明人】斯拉甫·艾白, 李治建
【申请人】斯拉甫·艾白