一种bmp蛋白制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种BMP蛋白制剂及其制备方法。该制剂包括BMP蛋白，赋形剂，磷脂和多糖。制备方法是将BMP蛋白，赋形剂，磷脂和多糖在0℃条件下，玻璃搅拌棒搅拌均匀。本发明的BMP蛋白制剂，在骨科手术治疗的过程中，可以暴露于常温空气条件下10天以上，保证手术的顺利进行，在低温条件下可以保存30天以上，在冷冻条件下可以长期保存数年，活性不发生变化。
【专利说明】
一种BMP蛋白制剂及其制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种蛋白稳定剂，特别涉及一种骨形态发生蛋白BMP的制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]骨形态发生蛋白(BMP)能够诱导动物或人体间充质细胞分化为骨、软骨、韧带、肌腱和神经组织。BMP在临床的价值无可限量。近年来基因重组的BMP-2和BMP-7的安全性和有效性得到了充分的证实，美国FDA也于2002年7月批准重组骨形态发生蛋白-2用于脊柱融合。基于BMP的安全性和高效诱导成骨活性被越来越多的实验所证实，在一些国家骨形态发生蛋白已进入大规模的临床实验阶段。
[0003]作为骨科治疗的有效蛋白，其稳定性需要得到保障。在治疗中，为了达到效果，骨蛋白需要暴露于体外数天的时间，通过聚合物药物递送，释放到体内起作用，储存于有机溶剂中的BMP蛋白能保持一定时间的活性，冻干粉保存也具有一定的效果，但是，这些效果都不是很明显，蛋白质还是会讲解，生物活性降低速度很快。专利200680021260.0公开了一种骨形态发生蛋白，采用冻干的方式，加冻干保护剂和氧化/还原稳定剂。采用冻干的方法虽然有利于长期保存，但是，不利于短期室温保存，且在冻融的过程中会有蛋白损伤，且损伤不可逆，使得治疗效果大大降低。
【发明内容】
[0004]本发明是为了克服上述现有技术中缺陷，通过提供一种BMP蛋白制剂解决BMP蛋白室温短期储存及手术过程中长期暴露于体外导致活性迅速降低的问题。
[0005]—种BMP蛋白制剂，包括BMP蛋白，赋形剂，磷脂和多糖。
[0006]所述赋形剂选自甘油，明胶，麦芽糖糊精，羟基乙酸淀粉钠，羟丙基甲基纤维素，蔗糖硬脂酸酯，辛烯基琥珀酸淀粉酯，mPEG-PLA-赖氨酸中的一种或一种以上。
[0007]所述多糖选自海藻糖，裙带菜多糖，低聚异麦芽糖，阿拉伯半乳聚糖，β_1，6-葡聚多糖中的一种或一种以上。
[0008]所述磷脂选自卵磷脂，脑磷脂，心磷脂，鞘磷脂，磷脂酰丝氨酸，磷脂酰甘油中的一种或一种以上。
[0009]所述赋形剂占BMP蛋白制剂总重量的30-60%。
[0010]所述磷脂占BMP蛋白制剂总重量的10-20%。
[0011]所述多糖占BMP蛋白制剂总重量的10-20%。
[0012]递送蛋白质的一种医学试剂盒，包括掺入聚合基质的BMP蛋白；溶于溶剂的赋形剂，磷脂和多糖。
[0013]所述溶剂为去离子水或乙醇。
[0014]一种BMP蛋白制剂的制备方法，是将BMP蛋白，赋形剂，磷脂和多糖在O V条件下，玻璃搅拌棒搅拌均匀。
[0015]与现有技术相比，本发明具有如下有益效果:本发明的BMP蛋白制剂，在骨科手术治疗的过程中，可以暴露于常温空气条件下10天以上，保证手术的顺利进行，在低温((TC)条件下可以保存30天以上，在冷冻条件下(-80°C)可以长期保存数年，活性不发生变化。
【具体实施方式】
[0016]下面对本发明的【具体实施方式】进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受【具体实施方式】的限制。
[0017]实施例1
[0018]一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白30份，甘油40份，卵磷脂15份，海藻糖15份。
[0019]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失8%，在(TC条件下储存30天，活性丧失5%，在_80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失15%。
[0020]实施例2
[0021 ] 一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白35份，明胶35份，脑磷脂18份，裙带菜多糖12份。
[0022]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失7%，在(TC条件下储存30天，活性丧失6%，在-80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失16%。
[0023]实施例3
[0024]一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白25份，羟基乙酸淀粉钠42份，心磷脂18份，低聚异麦芽糖15份。
[0025]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失7%，在(TC条件下储存30天，活性丧失5%，在-80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失14%。
[0026]实施例4
[0027]一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白28份，羟丙基甲基纤维素32份，鞘磷脂20份，阿拉伯半乳聚糖20份。
[0028]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失6%，在(TC条件下储存30天，活性丧失6%，在_80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失13%。
[0029]实施例5
[0030]一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白28份，羟丙基甲基纤维素32份，鞘磷脂20份，β-l，6-葡聚多糖20份。
[0031]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失6%，在(TC条件下储存30天，活性丧失6%，在_80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失13%。
[0032]实施例6
[0033]一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白40份，蔗糖硬脂酸酯30份，磷脂酰丝氨酸10份，阿拉伯半乳聚糖20份。
[0034]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失6%，在(TC条件下储存30天，活性丧失8%，在-80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失17%。
[0035]实施例7
[0036]一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白30份，辛烯基琥珀酸淀粉酯20份，mPEG-PLA-赖氨酸20份，磷脂酰甘油10份，阿拉伯半乳聚糖20份。
[0037]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失6%，在(TC条件下储存30天，活性丧失8%，在-80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失17%。
[0038]实施例8
[0039]一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白30份，甘油40份，卵磷脂15份，海藻糖15份，茼草提取物I份。
[0040]所述茼草提取物的提取方法为:将茼草晒干，磨成粉末，加3-6倍重量份数的70%乙醇溶液回流提取3次，合并滤液，活性炭脱色，蒸干制成。
[0041]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失1%，在(TC条件下储存30天，活性丧失1%，在-80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失2%。
[0042]实施例9
[0043]一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白30份，甘油40份，卵磷脂15份，海藻糖15份，硬草提取物I份。
[0044]所述茼草提取物的提取方法为:将硬草晒干，磨成粉末，加3-6倍重量份数的70%乙醇溶液回流提取3次，合并滤液，活性炭脱色，蒸干制成。
[0045]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失1%，在(TC条件下储存30天，活性丧失1%，在-80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失2%。
[0046]对比例I
[0047]一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白30份，卵磷脂15份，海藻糖15份。
[0048]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失48%，在(TC条件下储存30天，活性丧失55%，在-80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失85%。
[0049]实施例2
[0050]一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白30份，甘油40份，海藻糖15份。
[0051]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失38%，在(TC条件下储存30天，活性丧失35%，在-80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失55%。
[0052]实施例3
[0053]一种BMP蛋白制剂，由如下重量份数的物质组成:BMP蛋白30份，甘油40份，卵磷脂15份。
[0054]将上述组分的物质在低温条件下轻轻搅拌混匀，在室温条件下10天内活性丧失48%，在(TC条件下储存30天，活性丧失55%，在-80°C条件下储存3年，解冻后，活性丧失85%。
[0055]以上公开的仅为本发明的具体实施例，但是，本发明并非局限于此，任何本领域的技术人员能思之的变化都应落入本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种BMP蛋白制剂，其特征在于，包括BMP蛋白，赋形剂，磷脂和多糖。2.根据权利要求1所述的BMP蛋白制剂，其特征在于，所述赋形剂选自甘油，明胶，麦芽糖糊精，羟基乙酸淀粉钠，羟丙基甲基纤维素，蔗糖硬脂酸酯，辛烯基琥珀酸淀粉酯，mPEG-PLA-赖氨酸中的一种或一种以上。3.根据权利要求1所述的BMP蛋白制剂，其特征在于，所述多糖选自海藻糖，裙带菜多糖，低聚异麦芽糖，阿拉伯半乳聚糖，β-1，6-葡聚多糖中的一种或一种以上。4.根据权利要求1所述的BMP蛋白制剂，其特征在于，所述磷脂选自卵磷脂，脑磷脂，心磷脂，鞘磷脂，磷脂酰丝氨酸，磷脂酰甘油中的一种或一种以上。5.根据权利要求1所述的BMP蛋白制剂，其特征在于，所述赋形剂占BMP蛋白制剂总重量的 30-60 %。6.根据权利要求1所述的BMP蛋白制剂，其特征在于，所述磷脂占BMP蛋白制剂总重量的10-20%。7.根据权利要求1所述的BMP蛋白制剂，其特征在于，所述多糖占BMP蛋白制剂总重量的10-20%。8.递送蛋白质的一种医学试剂盒，其特征在于，包括掺入聚合基质的BMP蛋白；溶于溶剂的赋形剂，磷脂和多糖。9.根据权利要求8所述递送蛋白质的一种医学试剂盒，其特征在于，所述溶剂为去离子水或乙醇。10.一种BMP蛋白制剂的制备方法，其特征在于，将BMP蛋白，赋形剂，磷脂和多糖在O°C条件下，玻璃搅拌棒搅拌均匀。
【文档编号】A61K47/24GK106075400SQ201610669266
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年8月16日 公开号201610669266.4, CN 106075400 A, CN 106075400A, CN 201610669266, CN-A-106075400, CN106075400 A, CN106075400A, CN201610669266, CN201610669266.4
【发明人】赵彦涛, 朱加亮, 韩丽伟, 别晓梅, 李晋, 衷鸿宾, 侯树勋
【申请人】中国人民解放军总医院第一附属医院