专利名称：一种含有覆盆子提取物的改善皮肤皱纹用化妆品组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种含有覆盆子(Rubus coreanus)提取物作为活性成分的化妆品组合物，更具体地，涉及一种含有通过传统的东方医学加工技术加工的覆盆子提取物，能够抑制SNARE复合体的形成和神经递质的释放，从而具有显著的皱纹改善效果的化妆品组合物。该化妆品组合物与传统的改善皱纹的产品相比，具有显著的制剂稳定性，且与以往用于改善皱纹的肉毒杆菌相比，具有与之相当的效果，从而能够显著地改善皱纹而不引发副作用。
背景技术：
通常，为了神经递质的释放，含有神经递质的突触囊泡需要与突触前膜融合才能形成两个边界之间的通道。此时，由含有三种蛋白质的SNARE复合体为上述膜融合提供基本力。具体地，当通过突触囊泡和突触前膜之间的膜融合形成神经递质的释放通道时，附着在靶标膜上的t-SNARE复合体(突触融合蛋白-Ia和SNAP-25蛋白的复合体)与附着在囊泡上的v-SNARE平行盘绕。上述SNARE蛋白是以螺旋状扭曲的。在膜融合时，发生脂质二重层的重排，这是本领域已公知的。由于生物膜相互强烈排斥，所述膜不会自动融合，因此， 需要有强大的外力来克服膜之间的斥力。此时，SNARE蛋白产生足以能够克服所述膜之间的斥力的如此强大的力量。换言之，SNARE复合体的形成是克服所述膜之间斥力的力量的源泉，并且是包括神经递质释放在内的胞外分泌现象的核心。此外，位于肌肉上层的肌肉神经接点起到调节肌肉的松弛和肌肉的收缩的作用，且该神经末梢充满了突触囊泡。BoNT(肉毒杆菌神经毒素；以下简称“肉毒杆菌”(Botox))是一种用于SNARE蛋白切割的蛋白酶，SNARE 蛋白是参与神经递质释放的主要蛋白。肉毒杆菌通过切割SNARE蛋白阻断神经递质，从而使渗透肉毒杆菌的肌细胞麻痹。肉毒杆菌不可逆地切割SNARE蛋白以阻断神经传递，而所谓的“可施用肉毒杆菌”是一种抑制SNARE复合体的形成以干扰神经传递的竞争性抑制剂。 目前使用的可施用肉毒杆菌的主要成分-六胜肽(Argireline)的缺点在于效果不明确，且由于是合成肽因此价格也不合理，因此并不是用户友好型产品。使用天然提取物来开发一种神经传递抑制剂，相比肽材料能够提供一种更廉价的原料，且由天然提取物制得的最终产品能够更容易被消费者接受。因此，与肽材料相比，天然提取物更容易工业化。此外，草药加工技术是用韩语称为“炮制(Po-je)”、“合化(Hap-hwa)”、“合药 (Hap-yak)”、“修治(Su-chi)，，、“炮炙(Po-ja)，，、“法制(Beob-je) ” 和“修事(Su-sa)，，的一种传统东方医学的制造技术。该技术可以被定义为根据东方医学理论通过对草药进行加工处理改变药材性质的药物制造技术。所述草药加工包括正确筛选药材、去除杂质、净化、加热、利用辅料加工等。在某些情况下，将草药与一些适用于医药应用的辅料一起加工处理是为了根据疾病而获得药物供给量。在草药加工过程中会使用各种辅料，它们具有不同的性质和作用，因此，加工得到的草药显示出不同的功效。目前用于草药加工的辅料的种类很多，而大体上分为液体辅料和固体辅料。所述液体辅料包括酒、醋、盐水、蜂蜜、姜汁、甘草汁、黑豆汁、食盐溶液、米泔水、 马油、牛奶、童子尿和石灰水。所述固体辅料包括米、麦麸、明矾、豆腐、泥土、贝壳粉和沙。进行草药加工是为了净化药物，方便药物的储存，减少或去除药物的毒性和副作用，改变药性以使其更有效，增强药物的治疗效果，并且去除药物的令人不愉快的气味和口感以便于服用。皱纹是由于如年龄增加及压力等内在因素或如空气污染及紫外线照射等外部环境因素而导致的最明显的皮肤老化现象。皱纹发生在如前额、眼周、眉间及嘴周等面部；以及如颈、颈周、肘部、腋窝、手部及脚部等身体的各部位。皱纹通常从大约30岁以后开始变得明显，并且随着年龄的增长其数量逐渐增加或者深度逐渐加深。皱纹的产生主要是由于随着皮肤老化由皮肤组织产生的活性氧与构成皮肤真皮主要组成成分的胶原纤维和弹力纤维形成交联，从而改变这些纤维的生成和分解。用于抑制皮肤老化的抗氧化剂如维生素 Ε、葫萝卜素、维生素C及谷胱甘肽，自由基清除剂，或如能够增强真皮胶原合成的维生素A等物质能够被用于改善皮肤皱纹。然而，这些化妆品活性成分大部分对皮肤具有强刺激性，或在制剂中的状态不稳定而发生变色、变味和产生沉淀，以及导致原有的活性降低。近来，为了减少各种化学物质导致的皮肤刺激，已经开发出了多种基于天然原料的化妆品。这些天然原料不仅对皮肤的副作用少，而且还深受消费者喜爱，从而它们作为化妆品原料的价值逐渐提高。
发明内容
因此，本发明的发明人对具有优异的皮肤皱纹改善效果的天然原料进行研究的结果，发现含有覆盆子提取物的化妆品组合物具有优异的皮肤皱纹改善效果，从而完成了本发明。因此，本发明的目的在于提供一种含有覆盆子提取物作为有效成分的化妆品组合物。为了达到上述目的，本发明提供一种含有覆盆子提取物作为有效成分的化妆品组合物。根据本发明的化妆品组合物含有覆盆子提取物作为有效成分，抑制SNARE复合体的形成并阻碍神经递质的释放，从而显示出优异的皮肤皱纹改善效果。同时，由于本发明的化妆品组合物含有天然原料，因此对皮肤的副作用少且减少了对皮肤的刺激。此外，与传统的改善皮肤皱纹用制剂相比，它具有很好的制剂稳定性，并显示出与以往用于改善皱纹的肉毒杆菌相当的效果，从而能够显著地改善皮肤皱纹而不产生副作用。
图1是根据本发明的覆盆子提取物对膜融合现象的抑制效果的图谱；图2是根据本发明的覆盆子提取物对在PC12细胞中的神经递质释放的抑制效果的图谱。
具体实施例方式本发明提供一种含有覆盆子提取物作为有效成分的改善皮肤皱纹用化妆品组合物。以下，详细说明本发明。本发明中所使用的覆盆子(Rubus coreanus)是覆盆子(Rubus coreanus Miquel) 的果实，且无气味、味甘酸、而性温。覆盆子能够增强肾功能，从而用于治疗遗精、梦遗和遗尿。覆盆子还具有益气轻身，使头发黑亮的作用。它还有助于妊娠和能够使皮肤柔滑、亮丽。 据报道其还具有包括抗炎、抗氧化效果及抗幽门螺旋杆菌活性的药理作用。本发明的覆盆子提取物抑制SNARE (可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感性因子附着型蛋白受体)复合体的形成以及神经递质的传递，从而显示出优异的改善皮肤皱纹效果。它能够显示出与以往用于改善皮肤皱纹的肉毒杆菌相当的效果，从而显著地改善皮肤皱纹而不产生副作用。为了制备本发明的覆盆子提取物，可以在提取之前先用溶剂对覆盆子进行处理。 将干燥的覆盆子通过煮、蒸、炒(roasting process)、焙(baking process)或两种或多种的组合进行加工。具体地，将覆盆子在60-100°C下，煮30分钟-2小时；在120-150°C下，蒸 3-6小时；在100-180°C下，炒10分钟-1小时；并在80-100°C下，焙10分钟-1小时而进行加工。如果加工温度和时间超过上述范围，会导致覆盆子的处理效果不足或者覆盆子成分的改变。此外，还可以将覆盆子和辅料一起进行加工。例如，在本发明中可使用的辅料包括酒、醋、盐水、蜂蜜、姜汁、甘草汁、黑豆汁、食盐溶液、米泔水、马油、牛奶、童子尿、石灰水、 米、麦麸、明矾、豆腐、泥土、贝壳粉和沙。 在本发明中，覆盆子的提取物可通过本领域公知的任何传统方法得到。例如，可以通过如下方法获得覆盆子提取物将经过加工的覆盆子与水或有机溶剂在回流下，浸渍提取，利用过滤布过滤浸渍液，将经过过滤的溶液离心分离成残渣和滤液，在减压条件下浓缩分离的滤液。本发明中可使用的有机溶剂可以包括乙醇、甲醇、丁醇、乙醚、乙酸乙酯、氯仿以及其中的至少一种和水的混合物。优选地，使用80%的乙醇。所述提取工艺优选在10-80°C 下进行6-24小时。如果提取温度和时间超过上述范围，会导致提取效率降低或者覆盆子成分的改变。利用所述溶剂获得提取物之后，根据本领域公知的传统方法，可以采用室温浸渍、 加热及过滤方法获得液体物质。可选地，可进行蒸发以除去溶剂或可以进行喷雾干燥或冷冻干燥。根据本发明的化妆品组合物，以所述组合物的总重量为基准，所述覆盆子提取物的含量为0. 0001-30重量％。如果覆盆子提取物的含量少于0. 0001重量％，就无法获得改善皮肤皱纹的效果；而如果大于30重量％，将不能获得随着含量增加的更好的效果。根据本发明的化妆品组合物可制成润肤液、收敛化妆水、乳液、营养霜、按摩霜、精华、面膜、粉底霜、唇膏或粉状粉底，但并不限于此。在本发明所述化妆品组合物中，除提取物之外的其他成分，可由本领域技术人员根据化妆品组合物的制剂类型或化妆品组合物的使用目的容易地进行适当选择。实施例下面，将通过实施例和实验例进一步详细说明本发明，但是应该理解的是，这些实施例只是为了举例说明而并不能理解为对本发明范围的限定。实施例1 覆盆子生品(raw Rubus coreanus)提取物的制备将Ikg干燥的覆盆子加到5升80%的乙醇水溶液，在回流条件下提取3次，然后在 15°C下浸渍1天。接着，使用过滤布将浸渍液过滤并离心分离成残渣和滤液，并在减压条件下，将分离的滤液浓缩而获得覆盆子提取物285g。实施例2 清炒覆盆子提取物的制备将Ikg干燥的覆盆子放入玻璃容器中，在150°C下炒30分钟，并在阴凉处晾干。将所述经过炒制的且干燥的覆盆子加到5升80%的乙醇水溶液，在回流条件下提取3次，然后在15°C下浸渍1天。接着，使用过滤布将浸渍液过滤并离心分离成残渣和滤液，并在减压条件下，将分离的滤液浓缩而获得清炒覆盆子提取物250g。实施例3 酒蒸覆盆子提取物的制备将Ikg干燥的覆盆子浸在300ml的黄酒中(利用韩国传统翁器在阴凉处熟成，相对于覆盆子的干重，使用20-30重量％的黄酒)1小时，从而使其被黄酒浸湿。将上述浸湿的覆盆子在100-150°C下，在蒸锅中蒸4小时候，并在阴凉处晾干。接着，将上述干燥的材料加到5升80%的乙醇水溶液，在回流条件下提取3次，然后在15°C下浸渍1天。接着，使用过滤布将浸渍液过滤并离心分离成残渣和滤液，并在减压条件下，将分离的滤液浓缩而获得酒蒸覆盆子提取物260g。实施例4 盐炙覆盆子提取物的制备将Ikg干燥的覆盆子与200ml的盐水(利用韩国传统翁器在阴凉处熟成且具有 8-10%的盐浓度，相对于覆盆子的干重，使用20-30重量％的盐水)充分混合，并在密封状态下静置1小时，使覆盆子完全吸收盐水。接着，将吸收了盐水的覆盆子放入玻璃容器中， 在150°C下炒30分钟，并在阴凉处晾干。接着，将上述干燥的材料加到5升80%的乙醇水溶液，在回流条件下提取3次，然后再15°C下浸渍1天。接着，使用过滤布将浸渍液过滤并离心分离成残渣和滤液，并在减压条件下，将分离的滤液浓缩而获得盐炙覆盆子提取物295g。试验例1 膜融合抑制效果对由实施例1-4得到的覆盆子提取物的膜融合抑制效果进行试验。由通过生物技术转化的大肠杆菌(E. coli Codon⑴RIL，Novagen)分别纯化出了称为 SNAP25(NM011428)、突出融合蛋白 la(AF217197)和 VAMP2 (匪012663)的 SNARE 蛋白。 首先，为了制备用荧光物质标记的囊泡微粒_脂质体，I"棕榈酰基-2-油酰基卵磷脂 (palmitoyloleoyl phosphatidylcholine) (POPC) (62 摩尔 ％ )、二油酰基磷脂酰丝氨酸(dioleoyl phosphatidylserine) (DOPS) (35 摩尔 ％ )、1-油酰基-2 [N-(7-硝基苯并-2-氧杂-1，3-二唑-4-基)胺]己酰基磷脂酰丝氨酸(l-oleoyl-2-[N-(7-nitro-2, 1, 3-benzoxadiazol-4-yl)amino]caproyl phosphatidylserine)(NBD-PS)(1. 5 /K % ) 和荧光物质罗丹明-PE(1.5摩尔％ )混合而制备IOMm脂质体(v-vesicle)。为了制备没有标记荧光物质的脂质体，将DOPS和POPC以35 65的摩尔浓度混合制备50Mm脂质体(t-vesicle)。为了制备由纯化的SNAP25和突出融合蛋白Ia构成的复合体，将纯化的 SNAP25和突出融合蛋白Ia以1 1的摩尔浓度混合并在室温下反应1小时，然后与没有标记荧光物质的脂质体以100 1的摩尔比混合，并将VAMP2与含有荧光物质的脂质体以 50 1的摩尔比结合。然后，将上述两种脂质体利用IOkDa的透析膜在4°C下搅拌24小时进行透析，然后以3 7(v-vesicle t-vesicle)的比例混合。接着，在含有SNAP-25、突出融合蛋白Ia和VAMP-2的上述混合物中分别以40 μ g/ml的浓度加入作为对照的甲醇和实施例1-4的覆盆子提取物。然后，利用荧光强度测定仪(型号；SpectraMax M2，美国分子仪器公司)测定每个混合物的荧光强度，测定结果在表1中示出。由于图1中的荧光强度表示SNARE蛋白之间的膜融合现象，荧光强度低表示膜融合阻碍效果良好。黑色圆圈表示对照的反应路径。如图1所示，与对照相比，覆盆子提取物显示出低荧光强度，表示这些提取物具有抑制SNARE蛋白之间的膜融合的作用。特别是，与其他实验组相比，酒蒸覆盆子提取物(实施例3)具有优异的膜融合抑制效果。每种提取物的膜融合抑制率(％ )相对于对照的效果为100计算，且计算结果在下表1中示出。表 1覆盆子提取物的膜融合抑制效果
权利要求
1.一种含有覆盆子(Rubus coreanus)提取物作为有效成分的改善皮肤皱纹用化妆品组合物。
2.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中，所述覆盆子提取物由在提取之前经加工的覆盆子制备。
3.根据权利要求1或2所述的化妆品组合物，其中，以所述组合物的总重量为基准，所述覆盆子提取物的含量为0. 0001-30重量％。
全文摘要
本发明涉及一种含有覆盆子提取物作为有效成分的化妆品组合物，更具体地，涉及一种含有通过传统的东方医学加工技术加工的覆盆子提取物，能够抑制SNARE复合体的形成和神经递质的释放，从而具有优异的皮肤皱纹改善效果的化妆品组合物。该化妆品组合物与传统的改善皮肤皱纹的产品相比，具有优异的制剂稳定性，且与以往用于改善皮肤皱纹的肉毒杆菌相比，具有与之相当的效果，从而能够显著地改善皮肤皱纹而不引发副作用。
文档编号A61Q19/08GK102470096SQ201080029147
公开日2012年5月23日 申请日期2010年6月25日 优先权日2009年6月30日
发明者朴元锡, 朴葰星, 权大赫, 柳善慧, 金东泫, 金德姬, 金汉坤, 高现株 申请人:株式会社爱茉莉太平洋