专利名称：一种含有牡丹提取物的微乳液及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及植物提取物，公开了一种含有牡丹提取物的微乳液，可用于调节基因， 并用于化妆品。
背景技术：
牡丹是传统的中药材，据中药大辞典记载，其根、叶、花都能入药。在美容护肤方面的应用也能追述到很早的年代，如《外台密要》《御院要方》等古籍中都有记载含有牡丹皮， 牡丹花等饮片的美容方剂。
现代，也有将牡丹应用于洗发露(CN200410098833. 2)和美白霜 (CN200510000271. 8)等洗涤化妆品，但在提取工艺、稳定性保护、功效验证等方面都存在缺陷。
牡丹的油溶性和水溶性提取物具有不同的功效，但是由于其溶解性的不同，难以同时加入化妆品或护肤品的配方中；或者在制备化妆品和护肤品过程中分别在不同的步骤中加入。
本发明设计了系统的工艺与验证方法，能够全面的提取牡丹的有效成分，并利用物理技术对其进行稳定性保护，使其能方便的应用于化妆品，并使用基因微阵列技术快速准确的确定牡丹提取物与其他功效物在基因调节方面的作用并寻找出最佳配比范围。发明内容
本发明旨在提供一种含有牡丹提取物的微乳液及其制备方法。
本发明还将上述含有牡丹提取物的微乳液用于制备基因调节复合物。
本发明的另一个目的在于将上述含有牡丹提取物的微乳液用于制备化妆品或护肤品。
技术方案包括如下步骤
将牡丹提取物与水、氢化卵磷脂和油相混合，牡丹提取物与水的重量比为1: 5 I 12 ;混合后氢化卵磷脂的浓度为Iwt % 50Wt%，油相的浓度为Iwt % 50Wt% ;在 50 500atm下以100 800米/秒速度剪切混合10 60分钟。
油相可选用硅油、矿油或氢化聚异丁烯；
牡丹 提取物的制备方法为
(I)牡丹全草(包括根、茎、叶、花)干燥至水分含量< 10%，粉碎至过30 50目筛；
(2)使用石油醚或正己烷或乙醇提取，提取条件为30 90摄氏度下提取2 8小时；固液分离；
(3)液体部分回收溶剂(溶剂残留量< O. 1% )得到牡丹油溶性成分；
固体残渣用水提取，提取条件为30 90摄氏度下1-4小时。固液分离，液体部分浓缩为浸膏，得到牡丹水溶性成分；
(4)混合牡丹油溶性成分和牡丹水溶性成分。
通过上述方法得到的含有牡丹提取物的微乳液，粒径为1000 2000nm ;其中牡丹提取物的含量为
这种含有牡丹提取物的微乳液，同时含有牡丹的水溶性成分和油溶性成分的提取物，可用于制备护肤品和化妆品，与普通的牡丹提取物相比，在护肤品和化妆品中的稳定性提闻。
这种含有牡丹提取物的微乳液与其他物质复配，可调节与黑色素形成有关基因、 与皮肤保湿能力有关基因、与改善皮肤衰老程度有关基因和与舒缓皮肤刺激有关基因的表达水平。
本发明的优点在于，将牡丹水溶性成分和油溶性成分制备成微乳液，提高稳定性， 并且使用方便。这种微乳液用于制备化妆品和护肤品，可有效保湿、减少黑色素、改善皮肤衰老和舒缓皮肤刺激。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步详细、完整地说明
实施例1
取牡丹全草(包括根、茎、叶、花)，干燥至水分含量7%，粉碎至过20目筛。
使用乙醇为溶剂提取，在60°C条件下提取6小时，固液分离。液体部分蒸馏去除溶剂并回收溶剂，溶剂残留量< O.1%，得到牡丹油溶性成分。
固体残渣用水提取，提取条件为70°C下提取3小时。固液分离，液体部分浓缩为浸膏，得到牡丹水溶性成分。
牡丹水溶性成分和油溶性成分混合。
乙醇可用石油醚或正己烷代替，结果相同。
实施例2
取实施例1所得到的牡丹油溶性成分和水溶性成分混合物1kg，加入1Okg水；再加入4kg卵磷脂和5kg硅油得到混合液；氢化卵磷脂和硅油在混合液中质量浓度分别为 20%和 25%。
将混合液放入不锈钢容器,加500atm的压力，以500m/s的剪切速度混合40min,形成微乳液，得到含有牡丹提取物的微乳液。最终产品的粒径范围在1000 2000nm，其中牡丹提取物的含量为5wt%。硅油可以用矿油代替，结果相同。
将以上制备得到的微乳液加入乳液与膏霜基质，添加量为10%作为实验组。同时， 将市售未经微乳化的牡丹提取物加入同样的乳液与膏霜基质，添加量为O. 5%作为对照组。 不添加任何提取物的乳液与膏霜基质作为空白对照。
将实验组与对照组样品置于透明塑料瓶中，在24小时光照，40摄氏度的条件下强化测试4周，空白对照保存于避光阴凉处。请40位志愿者对各组的色泽、气味进行评价。所有志愿者认为，实验组与空白对照相比，“颜色气味没有变化”或“颜色气味有极微小变化”。 所有志愿者认为，对照组与空白对照相比“颜色气味有很大变化”。所有志愿者认为，“实验组的外观和气味优于对照组”。
实施例3
取实施例1所得到的牡丹油溶性成分和水溶性成分混合物1. 2kg，加入7. 8kg水； 再加入O. 5kg氢化卵磷脂和O. 5kg硅油得到混合液；卵磷脂和硅油在混合液中质量浓度分别为5%和5%。
将混合液放入不锈钢容器,加5atm的压力，以800m/s的剪切速度混合60min,形成微乳液，得到含有牡丹提取物的微乳液。最终产品的粒径范围在1000 2000nm，其中牡丹提取物的含量为12wt%。硅油可用氢化聚异丁烯代替，结果相同。
实施例4
(I)人类表皮角化细胞(HEK)培养株接种于6孔板，密度大约在20000个细胞/ cm2。当细胞融合率达到70%时，分为至少两组。
(2) 一组添加含有牡丹提取物的有效成分进行处理，处理时间为24小时加入实施例I含有牡丹提取物的微乳液和i^一碳烯酰基苯丙氨酸(SEPPIC公司产品)，用DMEM培养基稀释，最终细胞系中含有牡丹提取物的微乳液浓度为3wt %，十一碳烯酰基苯丙氨酸 Iwt % ；
另一组作为对照(加入空白培养基)。
(3)细胞收集后分离出RNA，并转化为cDNA.。得到的cDNA经T7RNA聚合酶扩增， 并用花青素_3或者花青素_5荧光标签标记胞苷三磷酸。标记后的cDNA杂交到基因微阵列载玻板上。用Agilent双通道激光检测基因微阵列扫描系统扫描检测基因微阵列载玻板， Cy-3标签的激发波长为532nm，Cy-5标签激发波长为633nm。记录荧光强度，并进行数据分析。
结果显示，能够有效调节GM-CSF(表达下调20倍)、谷氧还蛋白(表达上调38 倍)、硫氧还蛋白还原酶I (表达上调24倍)等与黑色素形成有关基因的表达水平。
实施例5
细胞培养和检测方法同实施例4，步骤(2)中添加实施例1含有牡丹提取物的微乳液和维生素C，最终细胞系中含有牡丹提取物的微乳液浓度为3wt%，维生素C O. 5wt% ；
结果显示，能够有效调节GM-CSF(表达下调30倍)、谷氧还蛋白(表达上调16 倍)、硫氧还蛋白还原酶I (表达上调10倍)等与黑色素形成有关基因的表达水平。
实施例6
细胞培养和检测方法 同实施例4，步骤(2)中添加实施例2含有牡丹提取物的微乳液和三色堇提取物(法国Silab公司产品)，最终细胞系中含有牡丹提取物的微乳液浓度为 Iwt三色堇提取物Iwt% ；
结果显示，能够有效调节Desmocollin 3 (表达上调18倍)、Filaggrin (表达上调 4倍)、AQP3 (表达上调2倍)等与皮肤保湿能力有关基因的表达水平。
实施例7
细胞培养和检测方法同实施例4，步骤⑵中添加实施例2含有牡丹提取物的微乳液和莳萝提取物(BASF产品)，最终细胞系中含有牡丹提取物的微乳液浓度为3wt%，莳萝提取物Iwt % ；
结果显示，能够有效调节MMPl (表达下调30 % )、MMP2 (表达下调90 % ) L0XL-8 (表达上调2倍)、C0L1A2 (表达上升60% )等与改善皮肤衰老程度有关基因的表达水平。
实施例8
细胞培养和检测方法同实施例4，步骤⑵中添加实施例2含有牡丹提取物的微乳液、甘草酸二钾和红没药醇，最终细胞系中含有牡丹提取物的微乳液浓度为1. 5wt%，甘草酸二钾O. 5wt %，红没药醇O. 5wt % ；
结果显示 ，能够有效调节IL-18 (表达下降90% )、Caspase 1(表达下调4倍)等与舒缓皮肤剌激有关基因的表达水平。
权利要求
1.一种含有牡丹提取物的微乳液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤将牡丹提取物与水、氢化卵磷脂和油相混合，牡丹提取物与水的重量比为1: 5 I 12 ;混合后氢化卵磷脂的浓度为lwt% 50Wt%，油相的浓度为lwt% 50Wt% ;在50 500atm下以100 800米/秒速度剪切混合10 60分钟。
2.权利要求1所述含有牡丹提取物的微乳液的制备方法，其特征在于，所述油相为硅油、矿油或氢化聚异丁烯。
3.权利要求1所述含有牡丹提取物的微乳液的制备方法，其特征在于，牡丹提取物的制备方法包括以下步骤(1)牡丹全草干燥至水分含量<10%，粉碎至过30 50目筛；(2)用石油醚或正己烷或乙醇提取，提取条件为30 90摄氏度下提取2 8小时；固液分离；(3)液体部分回收溶剂得到牡丹油溶性成分；固体残渣用水提取，提取条件为30 90摄氏度下提取I 4小时，固液分离，液体部分浓缩为浸膏，得到牡丹水溶性成分；(4)混合牡丹油溶性成分和牡丹水溶性成分。
4.一种含有牡丹提取物的微乳液，其特征在于，通过权利要求1 3任一项所述的方法制备。
5.权利要求4所述含有牡丹提取物的微乳液在制备护肤品或化妆品方面的应用。
6.权利要求4所述含有牡丹提取物的微乳液用于制备与黑色素形成有关基因、与皮肤保湿能力有关基因、与改善皮肤衰老程度有关基因和与舒缓皮肤刺激有关基因表达水平的基因调节复合物。
全文摘要
本发明涉及植物提取物，公开了一种含有牡丹提取物的微乳液的制备方法，包括如下步骤将牡丹提取物与水、氢化卵磷脂和油相混合，牡丹提取物与水的重量比为1∶5～1∶12；混合后氢化卵磷脂的浓度为1wt％～50wt％，油相的浓度为1wt％～50wt％；在50～500atm下以100～800米/秒速度剪切混合10～60分钟。这种含有牡丹提取物的微乳液与其他物质复配，可调节与黑色素形成有关基因、与皮肤保湿能力有关基因、与改善皮肤衰老程度有关基因和与舒缓皮肤刺激有关基因的表达水平。这种微乳液稳定性好，使用方便，用于制备化妆品和护肤品，可有效保湿、减少黑色素、改善皮肤衰老和舒缓皮肤刺激。
文档编号A61Q19/00GK103027863SQ20111029613
公开日2013年4月10日 申请日期2011年9月30日 优先权日2011年9月30日
发明者郑春颖, 黄晓青 申请人:伽蓝(集团)股份有限公司