一种含蛹虫草成分的原液及其制备方法
【专利摘要】一种含蛹虫草成分的原液，含有水解蜂王浆、芦荟发酵物、虫草提取物、马齿苋提取物、黄芩根提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、桑黄提取物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提取物、膜荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、米糠提取物、茉莉花提取物、桃仁提取物、芳樟叶提取物二十一种活性成分，具有安全无毒的特点。本发明还提供一种含蛹虫草成分的原液的制备方法，该制备方法简单且有效降低生产成本。
【专利说明】一种含蛹虫草成分的原液及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及化妆品领域，尤其涉及一种含蛹虫草成分的原液及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 北冬虫夏草学名叫蛹虫草(Cbr办ce/75· ?i/iiaris)，它与青海冬虫夏草同属于真 菌门子囊菌亚门虫草属，因此，被业内专家称为冬虫夏草的同属"兄弟"。蛹虫草生活史的有 性阶段包括菌丝体生长和子实体生长。鳞翅目、鞘翅目、双翅目等昆虫幼虫或蛹感染到拟青 霉的孢子，当环境条件适宜时，孢子便萌发形成菌丝体，菌丝体吸取虫(蛹）体内的营养作为 其生长发育的物质和能源。当菌丝把虫(蛹）体内的各种组织和器官分解完毕后，菌丝体发 育由营养生长转为生殖生长，菌丝体逐渐扭结分化形成菌核并穿出体外成为橘黄色或橘红 色的顶部略膨大的、呈棒状的子座(子实体)，子座多从虫体的头部、胸部、近尾部等处伸出。
[0003] 野生的北冬虫夏草与传统的冬虫夏草相似，在自然界中极为稀少。多数研究认为， 北冬虫夏草在药效成分上与天然冬虫夏草相近，其药用和食用价值可与天然的冬虫夏草媲 美。工厂化生产的北冬虫夏草素含量高于天然冬虫夏草，其蛋白质、氨基酸、维生素和微量 元素的含量均达到甚至超过了天然冬虫夏草的水平。在已报道的350余种虫草菌中，蛹虫 草是少有的能形成大量虫草素的虫草菌。因为与冬虫夏草亲缘关系最近、有效成分相当甚 至更高，且可以人工栽培，北冬虫夏草成为天然冬虫夏草的理想代用品。蛹虫草富含多种生 物活性物质，如虫草多糖、虫草素、虫草酸、SOD酶、腺苷、多肽/氨基酸、甘露醇等，以蛹虫草 提取物为原料制成的化妆品，则具有抗氧化、抗衰老和提供营养、抑制黑色素合成等作用， 能对人体肌肤产生补充营养、改善粗糙、增强弹性、保湿美白等效果。
[0004] 由于年龄增长及季节变化、紫外线照射、抽烟、工作压力大、在电脑、电视机前久 坐、接触放射性物质等各种因素造成了人们的皮肤问题，如真皮层塌陷、保湿能力下降、皮 肤干燥老化。因此，化妆品已经成为人们的一种必不可少的日常用品。化妆品行业中的原 液，指的是添加相对单一的高浓度护肤成分，能够针对各种肌肤需要，给肌肤更直接、更安 全、更强效的保养，让肌肤在短时间内恢复最佳状态的美容产品。原液中的有效成分含量 高，能快速检索肌肤保养需求，给肌肤密集强效的养护。目前，市售的原液分为很多种类，但 效果、功能差异较大。因此，亟需开发一种既有良好使用效果、又不会损害消费者的身体健 康的新型原液。
【发明内容】
[0005] 针对上述问题，本发明提供一种含蛹虫草成分的原液及其制备方法，具有安全无 毒、滋养抗皱的特点，且生产成本较低。
[0006] 为实现本发明的上述目的，本发明提供一种含蛹虫草成分的原液，由以下A、B、C 和D组分原料按重量份数配制而成。
[0007] A组分：纯水30-45份、甘草酸二钾0· 7-2. 85份、海藻糖L 3-2. 75份、HA (小分子 海华1%溶液）2. 5-4份、丝滑纳豆胶2. 1-3. 3份。
[0008] B组分：甘油2-3份、黄原胶1-2. 5份、羧甲基β -葡聚糖0. 2-0. 35份。
[0009] C组分：丁二醇L 5-2份、1，2己二醇0· 7-2份、尼泊金酯0· 2-0. 5份。
[0010] D组分：水解蜂王浆蛋白0. 3-0. 5份、人表皮生长因子0. 02-0. 04份、酸性成纤维 细胞生长因子0. 2-0. 45份、金属硫蛋白0. 015-0. 03份、马齿苋提取物0. 1-0. 3份、虫草提 取物5-8. 5份、芦荟发酵物0. 1-0. 4份、黄芩根提取物0. 05-0. 1份、柿叶提取物0. 01-0. 03 份、橘子皮提取物〇. 01-0. 03份、桑黄提取物0. 01-0. 03份、白柳皮提取物0. 01-0. 04份、香 草提取物〇. 01-0. 02份、冷香玫瑰花提取物0. 03-0. 06份、绿豆提取物0. 02-0. 04份、绿茶 提取物0. 01-0. 03份、八角茴香提取物0. 01-0. 02份、膜荚黄芪根提取物0. 01-0. 03份、人 参根提取物〇. 01-0. 02份、松口蘑提取物0. 01-0. 02份、米糠提取物0. 01-0. 04份、茉莉花 提取物0. 01-0. 02份、桃仁提取物0. 01-0. 02份、芳樟叶提取物0. 01-0. 05份。
[0011] 所述D组分中虫草提取物的制备方法如下。
[0012] 菌丝体发酵液中虫草多糖的超声提取。
[0013] (1)采用液体深层发酵方式获得蛹虫草菌丝体。
[0014] 蛹虫草深层液体发酵的工艺如下：菌丝体发酵培养基组成为：20g/L蔗糖+5g/L蛋 白胨+0. 5g/L MgS04*7H20+lg/L KH2P04+5g/L芽孢杆菌菌体蛋白；采用两阶段控制pH策略， 即发酵开始时控制pH值恒定在6. 0-7. 0之间的某一数值，接种蛹虫草液体菌种40h-60h后 再将pH值恒定控制为5. 0-6.0之间的某一数值。发酵罐内的通风量控制在1:0. 3-1:0.6 之间（单位为m3/m3/min)，发酵罐搅拌速度控制在120_200r/min。
[0015] (2)菌丝体发酵液的超声提取：取上述经深层发酵获得的蛹虫草菌丝体发酵液 100-200ml，超声（59Hz)处理15-45min，经超声处理后的发酵液经离心后收集离心上清液， 所得初次沉淀物再加30-100ml碱性离子水进行二次超声处理，依次共超声处理三次。合并 三次离心上清液，并用旋转蒸发仪（30°C -50°C，转数60rpm)浓缩得20-30ml的浓缩液，力口 浓缩液3倍量的无水乙醇，在4°C条件下沉淀8-12h，倾出上清液，沉淀用无水乙醇洗涤、干 燥，得多糖粗品，即为虫草提取物。
[0016] 所述碱性离子水是通过将纯水进行电解产生的。
[0017] 所述碱性离子水指标为pH :9· 80-13. 80,电位：彡-120mV。
[0018] 所述D组分芦荟发酵物的制备方法如下。
[0019] (1)表面净化：把芦荟鲜叶用清水洗干净，所述清水不能用含漂白剂的自来水，因 为漂白剂可导致芦荟液变色、变质。
[0020] (2)紫外线辐射杀菌：洗干净的芦荟鲜叶晾干后，运入样品准备室，所述样品准备 室为无菌室(室内备有杀菌消毒设备)，进行紫外灯辐照杀菌5-30min。
[0021] (3)去掉叶皮：在无菌室内去掉芦荟鲜叶叶皮，用消毒的刀片割开外皮，并将芦荟 凝胶原汁取出；将凝胶原汁和叶皮分别装入塑料桶。
[0022] (4)高速粉碎与沉淀：用高速粉碎机(转速10000-30000、时间0. 2-5分钟）把叶皮 组织捣碎，成为稀浆液；然后进行沉淀处理；上清液即成为芦荟叶原汁。
[0023] (5)芦荟发酵物的制备：所述芦荟发酵物包括芦荟凝胶发酵物与芦荟叶发酵物。
[0024] ①、以芦荟凝胶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，菌液的接种量 1%-10% (体积百分比)。发酵温度26°C-31°C，发酵时间为20-30天，所得发酵物即为芦荟 凝胶发酵物。
[0025] ②、以芦荟叶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，菌液的接种量1%-10% (体积百分比)。发酵温度26°C_31°C，发酵时间为20-30天，所得发酵物即为芦荟叶发酵物。
[0026] 所述马齿苋提取物、黄芩根提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、桑黄提取物、白柳 皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提取物、膜 英黄苗根提取物、人参根提取物、松口磨提取物、米糖提取物、荣莉花提取物、桃仁提取物、 芳樟叶提取物的制备方法为：分别取粉末状的马齿苋、黄芩根、柿叶、橘子皮、桑黄、白柳皮、 香草、冷香玫瑰花、绿豆、绿茶、八角茴香、膜荚黄芪根、人参根、松口蘑、米糠、茉莉花、桃仁、 芳樟叶，分别加碱性离子水震荡后得混合液，所述混合液经离心后收集离心上清液，所得初 次沉淀物分别再加碱性离子水进行二次提取，依次共提取三次；合并三次离心上清液并浓 缩得浓缩液，即分别得到马齿苋提取物、黄芩根提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、桑黄提 取物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香 提取物、I吴英黄苗根提取物、人参根提取物、松口磨提取物、米糖提取物、荣莉花提取物、桃 仁提取物、芳樟叶提取物。
[0027] 本发明还提供一种含蛹虫草成分的原液的制备方法，包括以下步骤。
[0028] 步骤一、将A组分原料按配方计量后加入混合罐，搅拌(转数30-lOOrpm)分散均 匀，升温至80-90°C，搅拌溶解。
[0029] 步骤二、加入B组分原料搅拌溶解，并于70_75°C继续搅拌溶解后，降温至45°C。
[0030] 步骤三、C组分原料40°C预热后混合均匀，加入混合罐，搅拌均匀，加入D组分原料 搅拌均匀，真空脱气10-20分钟(真空度为0. 09-0. IOMPa)。
[0031] 步骤四、降温至30_40°C，陈化24小时，灌装，分装并包装，即为成品。
[0032] 与现有技术相比本发明的有益效果。
[0033] 本发明提供一种含蛹虫草成分的原液及其制备方法，所述含蛹虫草成分的原液含 有水解蜂王浆蛋白、芦荟发酵物、虫草提取物、马齿苋提取物、黄芩根提取物、柿叶提取物、 橘子皮提取物、桑黄提取物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、 绿茶提取物、八角茴香提取物、膜荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、米糠提取 物、茉莉花提取物、桃仁提取物、芳樟叶提取物二十一种活性成分。其中芦荟发酵物具有消 除皮肤炎症及抗菌作用，且可以显著提高原液的抗皱效果，尤其适合中老年女性使用。马齿 苋含有丰富的SL3脂肪酸及维生素 A样物质。SL3脂肪酸是形成细胞膜所必需的物质；维 生素 A样物质能维持上皮组织如皮肤、角膜的正常机能。橘子皮提取物含有萜烯类物质，起 抗菌和天然香料的作用。柿子叶中含有大量丹宁酸，可有效的杀灭各种细菌和真菌，具有清 洁和滋润皮肤的功效。蜂王浆富含蛋白质，氨基酸、维生素、类脂物、葵乙酸、微量元素、叶 酸、乙酰胆碱、核酸等物质，具有调节皮肤代谢和抗氧化等功效。桑黄、白柳皮、香草、绿豆提 取物富含粗多糖等；冷香玫瑰花提取物含有香料。茉莉花提取物具有抗氧化和抑菌功能。 另外，本发明中采用液体深层发酵方式获得蛹虫草菌丝体，具有培养周期短、活性物质易于 提取等优点，很多药用真菌液体发酵的活性物含量远高于人工栽培的药用真菌的活性物含 量；菌丝体发酵液中添加芽孢杆菌的菌体蛋白，既提高蛹虫草菌丝体的产量、又减少了蛋白 胨用量，大大节约了原料成本。
【具体实施方式】
[0034] 下面结合具体实施例进一步详细说明本发明。
[0035] 本发明提供一种含蛹虫草成分的原液，由以下A、B、C和D组分原料按重量份数配 制而成。
[0036] A组分：纯水38份、甘草酸二钾1. 5份、海藻糖1. 8份、HA (小分子海华1%溶液)3 份、丝滑纳豆胶2. 5份。
[0037] B组分：甘油2. 6份、黄原胶2份、羧甲基β -葡聚糖0. 3份。
[0038] C组分：丁二醇L 9份、1，2己二醇L 2份、尼泊金酯（ΡΗΕΝ0ΝΙΡ) 0· 35份。
[0039] D组分：水解蜂王浆蛋白0. 4份、人表皮生长因子（rh EGF) 0. 025份、酸性成纤维 细胞生长因子（aFGF) 0. 3份、金属硫蛋白0. 02份、马齿苋提取物0. 1份、虫草提取物6份、 芦荟发酵物0. 2份、黄芩根提取物0. 07份、柿叶提取物0. 02份、橘子皮提取物0. 015份、 桑黄提取物〇. 02份、白柳皮提取物0. 015份、香草提取物0. 01份、冷香玫瑰花提取物0. 04 份、绿豆提取物0. 03份、绿茶提取物0. 02份、八角茴香提取物0. 015份、膜荚黄芪根提取物 0. 015份、人参根提取物0. 01份、松口蘑提取物0. 01份、米糠提取物0. 04份、茉莉花提取物 〇. 02份、桃仁提取物0. 01份、芳樟叶提取物0. 04份。
[0040] 所述D组分中虫草提取物的制备方法如下。
[0041] 菌丝体发酵液中虫草多糖的超声提取。
[0042] (1)采用液体深层发酵方式获得蛹虫草菌丝体。
[0043] 野生蛹虫草是在含有大量昆虫蛋白的蚕蛹体内生长的，目前培养蛹虫草菌丝体的 深层发酵培养基中蛋白质的来源主要为蛋白胨，与蚕蛹蛋白具有一定差别。本发明采用添 加与蚕蛹昆虫蛋白更接近的芽孢杆菌菌体蛋白，使蛹虫草菌丝体发酵产率获得提高。菌丝 体发酵培养基组成为：20g/L蔗糖+5g/L蛋白胨+0. 5g/L MgS04*7H20+lg/L KH2P04+5g/L芽 孢杆菌菌体蛋白；采用两阶段控制pH策略，即发酵开始时控制pH值恒定在6. 2,接种蛹虫 草液体菌种(该液体菌种由蛹虫草(Cbr办ce/75· 发酵而来）后50h再将pH值恒 定控制为5. 6。发酵罐内的通风量控制在1:0. 4之间（单位为m3/m3/min)，发酵罐搅拌速度 控制在180r/min。
[0044] (2)菌丝体发酵液的超声提取：取上述经深层发酵获得的蛹虫草菌丝体发酵液 100ml，超声（59Hz)处理30min，经超声处理后的发酵液经离心后收集离心上清液，所得沉 淀物再加 IOOml碱性离子水进行二次超声提取，依次共超声提取三次。合并三次离心上清 液并用旋转蒸发仪（40°C，转数60rpm)浓缩得30ml的浓缩液，加浓缩液3倍量的无水乙醇， 在4°C条件下沉淀10h，倾出上清液得沉淀物，该沉淀物用无水乙醇洗涤、干燥，得多糖粗 品，即为虫草提取物。
[0045] 所述碱性离子水是通过将纯水进行电解产生的；所述纯水经电解后，阴极附近水 中富集氢氧根离子，呈碱性，得到碱性离子水。
[0046] 所述碱性离子水出水口产生的碱性离子水指标为pH :9. 80-13. 80,电位： > _120mv。
[0047] 以蒸馏水提取蛹虫草菌丝体有效成分，提取效率为16. 5%，而碱性离子水的提取效 率为23. 9%。由此可见，所述碱性离子水提取蛹虫草菌丝体有效成分不仅大幅度提高了提取 效率，还避免了因使用化学溶剂带来的污染。
[0048] 所述D组分芦荟发酵物的制备方法。
[0049] (1)表面净化：首先把芦荟鲜叶用清水洗干净，所述清水不能用含漂白剂的自来 水，因为漂白剂可导致芦荟液变色、变质。
[0050] (2)紫外线辐照杀菌：洗干净的芦荟鲜叶晾干后，运入样品准备室，所述样品准备 室为无菌室(室内备有杀菌消毒设备)，进行紫外灯辐照杀菌6min。
[0051] (3)去掉叶皮：在无菌室内去掉芦荟叶皮，用消毒的刀片割开外皮，并将芦荟凝胶 原汁取出；将凝胶原汁和叶皮分别装入塑料桶。
[0052] (4)高速粉碎与沉淀：用高速粉碎机(转速20000、时间3分钟）把叶皮组织捣碎， 成为稀浆液；然后进行沉淀处理；上清液即成为芦荟叶原汁。
[0053] (5)芦荟发酵物的制备：所述芦荟发酵物包括芦荟凝胶发酵物与芦荟叶发酵物。
[0054] ①、以芦荟凝胶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌(批号：AS2. 297,上海北诺生物 科技有限公司）为接种菌种，接种量4% (体积百分比)。发酵温度28°C，发酵时间为25天， 所得发酵物即为芦荟凝胶发酵物。
[0055] ②、以芦荟叶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌(批号：AS2. 297,上海北诺生物科 技有限公司）为接种菌种，接种量4% (体积百分比）。发酵温度28°C，发酵时间为25天，所 得发酵物即为芦荟叶发酵物。
[0056] 现有技术常用芦荟原汁，而本发明采用芦荟发酵物，该芦荟发酵物与没经发酵的 芦荟原汁相比具有如下好处：成分更多样且分子更小，从而更容易被皮肤吸收。
[0057] 所述马齿苋提取物、黄芩根提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、桑黄提取物、白柳 皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提取物、膜 英黄苗根提取物、人参根提取物、松口磨提取物、米糖提取物、荣莉花提取物、桃仁提取物、 芳樟叶提取物的制备方法为：分别取粉末状的马齿苋、黄芩根、柿叶、橘子皮、桑黄、白柳皮、 香草、冷香玫瑰花、绿豆、绿茶、八角茴香、膜荚黄芪根、人参根、松口蘑、米糠、茉莉花、桃仁、 芳樟叶，分别加碱性离子水震荡后得混合液，所述混合液经离心后收集离心上清液，所得初 次沉淀物分别再加碱性离子水进行二次提取，依次共提取三次；合并三次离心上清液并浓 缩得浓缩液，即分别得到马齿苋提取物、黄芩根提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、桑黄提 取物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香 提取物、I吴英黄苗根提取物、人参根提取物、松口磨提取物、米糖提取物、荣莉花提取物、桃 仁提取物、芳樟叶提取物。
[0058] 本发明还提供一种含蛹虫草成分的原液的制备方法，包括以下步骤。
[0059] 步骤一、将A组分原料按配方计量后加入混合罐，搅拌(转数50rpm)分散均匀，升 温至80°C，搅拌溶解。
[0060] 步骤二、加入B组分原料搅拌溶解，并于75°C继续搅拌溶解后，降温至45°C。
[0061] 步骤三、C组分原料40°C预热后混合均匀，加入混合罐，搅拌均匀，加入D组分原料 搅拌均匀，真空脱气15分钟(真空度为0. 09-0. IOMPa)。
[0062] 步骤四、降温至30°C，陈化24小时，灌装，分装并包装，即为成品。
[0063] 本实施例配方组成及其制备方法所得原液产品的功效评价。
[0064] 1、实际使用效果评价：参加原液效果评测受访者人数为33人，使用本实施例含蛹 虫草成分的原液每天1次，30天为一疗程。使用本实施例含蛹虫草成分的原液一疗程后，对 该原液保湿、补水、吸收度、涂展性、粘稠度、气味做出客观评价，每种功效评判标准共分三 档，其中保湿：第一档为保湿效果非常好，第二档为保湿效果一般，第三档为保湿效果不好； 补水：第一档为补水效果非常明显，第二档为补水效果一般，第三档为补水效果不好；吸收 度：第一档为易于吸收，第二档为吸收效果一般，第三档为吸收效果不好；涂展性：第一档 为涂展性非常好，第二档为涂展性一般，第三档为涂展性不好；气味：第一档为天然舒适， 第二档为化学试剂明显，第三档为没有特殊味道。具体评价结果见表1。
[0065] 表1 :本发明含蛹虫草成分的原液使用效果评价。
【权利要求】
1. 一种含蛹虫草成分的原液，由以下A、B、C和D组分原料配制而成： A组分：纯水30-45份、甘草酸二钾0. 7-2. 85份、海藻糖1. 3-2. 75份、HA (小分子海华 1%溶液）2. 5-4份、丝滑纳豆胶2. 1-3. 3份； B组分：甘油2-3份、黄原胶1-2. 5份、羧甲基3 -葡聚糖0. 2-0. 35份； C组分：丁二醇1. 5-2份、1，2己二醇0. 7-2份、尼泊金酯0. 2-0. 5份； D组分：水解蜂王浆蛋白0. 3-0. 5份、人表皮生长因子0. 02-0. 04份、酸性成纤维细胞 生长因子0. 2-0. 45份、金属硫蛋白0. 015-0. 03份、马齿苋提取物0. 1-0. 3份、虫草提取物 5-8. 5份、芦荟发酵物0. 1-0. 4份、黄芩根提取物0. 05-0. 1份、柿叶提取物0. 01-0. 03份、橘 子皮提取物〇. 01-0. 03份、桑黄提取物0. 01-0. 03份、白柳皮提取物0. 01-0. 04份、香草提 取物0. 01-0. 02份、冷香玫瑰花提取物0. 03-0. 06份、绿豆提取物0. 02-0. 04份、绿茶提取 物0. 01-0. 03份、八角茴香提取物0. 01-0. 02份、膜荚黄芪根提取物0. 01-0. 03份、人参根 提取物0. 01-0. 02份、松口蘑提取物0. 01-0. 02份、米糠提取物0. 01-0. 04份、茉莉花提取 物0. 01-0. 02份、桃仁提取物0. 01-0. 02份、芳樟叶提取物0. 01-0. 05份； 所述D组分中虫草提取物的制备方法为： (1) 采用液体深层发酵方式获得蛹虫草菌丝体： 蛹虫草深层液体发酵的工艺为：菌丝体发酵培养基组成为：20g/L蔗糖+5g/L蛋白胨 +0. 5g/L MgS04*7H20+lg/L KH2P04+5g/L芽孢杆菌菌体蛋白；采用两阶段控制pH策略，即发 酵开始时控制pH值恒定在6. 0-7. 0之间的某一数值，接种蛹虫草液体菌种40h-60h后再 将pH值恒定控制为5. 0-6. 0之间的某一数值；发酵罐内的通风量控制在1:0. 3-1:0. 6之间 (单位为m3/m3/min)，发酵罐搅拌速度控制在120-200r/min ; (2) 菌丝体发酵液的超声提取：取上述经深层发酵获得的蛹虫草菌丝体发酵液 100-200ml，超声（59Hz)处理15-45min，经超声处理后的发酵液经离心后收集离心上清液， 所得初次沉淀物再加30-100ml碱性离子水进行二次超声处理，依次共超声处理三次；合并 三次离心上清液，并用旋转蒸发仪（30°C -50°C，转数60rpm)浓缩得20-30ml的浓缩液，力口 浓缩液3倍量的无水乙醇，在4°C条件下沉淀8-12h，倾出上清液，沉淀用无水乙醇洗涤、干 燥，得多糖粗品，即为虫草提取物； 所述D组分芦荟发酵物的制备方法为； (1) 表面净化：芦荟鲜叶用清水洗干净； (2) 紫外线辐射杀菌：洗干净的芦荟鲜叶晾干后，运入样品准备室，所述样品准备室为 无菌室(室内备有杀菌消毒设备)，进行紫外灯辐照杀菌5-30min ; (3) 去掉叶皮：在无菌室内去掉芦荟鲜叶叶皮，用消毒的刀片割开外皮，并将芦荟凝胶 原汁取出；将凝胶原汁和叶皮分别装入塑料桶； (4) 高速粉碎与沉淀：用高速粉碎机把叶皮组织捣碎，成为稀浆液；然后进行沉淀处 理；上清液即成为芦荟叶原汁； (5) 芦荟发酵物的制备：所述芦荟发酵物包括芦荟凝胶发酵物与芦荟叶发酵物； ① 、以芦荟凝胶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，菌液的接种量1%_1〇%， 发酵温度26°C -31°C，发酵时间为20-30天，所得发酵物即为芦荟凝胶发酵物； ② 、以芦荟叶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，菌液的接种量1%_1〇%，发 酵温度26°C -31°C，发酵时间为20-30天，所得发酵物即为芦荟叶发酵物； 所述马齿苋提取物、黄芩根提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、桑黄提取物、白柳皮提 取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提取物、膜荚黄 苗根提取物、人参根提取物、松口磨提取物、米糖提取物、荣莉花提取物、桃仁提取物、芳棒 叶提取物的制备方法为：分别取粉末状的马齿苋、黄芩根、柿叶、橘子皮、桑黄、白柳皮、香 草、冷香玫瑰花、绿豆、绿茶、八角茴香、膜荚黄芪根、人参根、松口蘑、米糠、茉莉花、桃仁、芳 樟叶，分别加碱性离子水震荡后得混合液，所述混合液经离心后收集离心上清液，所得初次 沉淀物分别再加碱性离子水进行二次提取，依次共提取三次；合并三次离心上清液并浓缩 得浓缩液，即分别得到马齿苋提取物、黄芩根提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、桑黄提取 物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提 取物、膜荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、米糠提取物、茉莉花提取物、桃仁 提取物、芳樟叶提取物。
2.如权利要求1所述的含蛹虫草成分的原液，其特征在于，由以下A、B、C和D组分原 料配制而成： A组分：纯水38份、甘草酸二钾1. 5份、海藻糖1. 8份、HA (小分子海华1%溶液）3份、 丝滑纳豆胶2. 5份； B组分：甘油2. 6份、黄原胶2份、羧甲基3 -葡聚糖0. 3份； C组分：丁二醇1. 9份、1，2己二醇1. 2份、尼泊金酯0. 35份； D组分：水解蜂王浆蛋白0. 4份、人表皮生长因子0. 025份、酸性成纤维细胞生长因子 〇. 3份、金属硫蛋白0. 02份、马齿苋提取物0. 1份、虫草提取物6份、芦荟发酵物0. 2份、黄 芩根提取物〇. 07份、柿叶提取物0. 02份、橘子皮提取物0. 015份、桑黄提取物0. 02份、白柳 皮提取物〇. 015份、香草提取物0. 01份、冷香玫瑰花提取物0. 04份、绿豆提取物0. 03份、 绿茶提取物〇. 02份、八角茴香提取物0. 015份、膜荚黄芪根提取物0. 015份、人参根提取 物0. 01份、松口蘑提取物0. 01份、米糠提取物0. 04份、茉莉花提取物0. 02份、桃仁提取物 〇. 01份、芳樟叶提取物〇. 04份； 所述C组分中虫草提取物的制备方法为： (1) 采用液体深层发酵方式获得蛹虫草菌丝体： 菌丝体发酵培养基组成为：20g/L蔗糖+5g/L蛋白胨+0. 5g/L MgS04*7H20+lg/L KH2P04+5g/L芽孢杆菌菌体蛋白；采用两阶段控制pH策略，即发酵开始时控制pH值恒定 在6. 2,接种蛹虫草液体菌种后50h再将pH值恒定控制为5. 6 ;发酵罐内的通风量控制在 1:0. 4之间（单位为m3/m3/min)，发酵罐搅拌速度控制在180r/min ; (2) 菌丝体发酵液的超声提取：取上述经深层发酵获得的蛹虫草菌丝体发酵液100ml， 超声（59Hz)处理30min，经超声处理后的发酵液经离心后收集离心上清液，所得沉淀物再 加100ml碱性离子水进行二次超声提取，依次共超声提取三次；合并三次离心上清液并用 旋转蒸发仪（40°C，转数60rpm)浓缩得30ml的浓缩液，加浓缩液3倍量的无水乙醇，在4°C 条件下沉淀l〇h，倾出上清液得沉淀物，该沉淀物用无水乙醇洗涤、干燥，得多糖粗品，即为 虫草提取物； 所述D组分芦荟发酵物的制备方法： (1) 表面净化：芦荟鲜叶用清水洗干净； (2) 紫外线辐照杀菌：洗干净的芦荟鲜叶晾干后，运入样品准备室，所述样品准备室为 无菌室(室内备有杀菌消毒设备)，进行紫外灯辐照杀菌6min ; (3) 去掉叶皮：在无菌室内去掉芦荟叶皮，用消毒的刀片割开外皮，并将芦荟凝胶原汁 取出；将凝胶原汁和叶皮分别装入塑料桶； (4) 高速粉碎与沉淀：用高速粉碎机把叶皮组织捣碎，成为稀浆液；然后进行沉淀处 理；上清液即成为芦荟叶原汁； (5) 芦荟发酵物的制备：所述芦荟发酵物包括芦荟凝胶发酵物与芦荟叶发酵物； ① 、以芦荟凝胶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，接种量4%，发酵温度 28°C，发酵时间为25天，所得发酵物即为芦荟凝胶发酵物； ② 、以芦荟叶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，接种量4%，发酵温度 28°C，发酵时间为25天，所得发酵物即为芦荟叶发酵物； 所述马齿苋提取物、黄芩根提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、桑黄提取物、白柳皮提 取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提取物、膜荚黄 苗根提取物、人参根提取物、松口磨提取物、米糖提取物、荣莉花提取物、桃仁提取物、芳棒 叶提取物的制备方法为：分别取粉末状的马齿苋、黄芩根、柿叶、橘子皮、桑黄、白柳皮、香 草、冷香玫瑰花、绿豆、绿茶、八角茴香、膜荚黄芪根、人参根、松口蘑、米糠、茉莉花、桃仁、芳 樟叶，分别加碱性离子水震荡后得混合液，所述混合液经离心后收集离心上清液，所得初次 沉淀物分别再加碱性离子水进行二次提取，依次共提取三次；合并三次离心上清液并浓缩 得浓缩液，即分别得到马齿苋提取物、黄芩根提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、桑黄提取 物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提 取物、膜荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、米糠提取物、茉莉花提取物、桃仁 提取物、芳樟叶提取物。
3. 如权利要求1或2所述的含蛹虫草成分的原液，其特征在于，所述碱性离子水是通过 将纯水进行电解产生的。
4. 如权利要求3所述的含蛹虫草成分的原液，其特征在于，所述碱性离子水指标为pH : 9. 80-13. 80,电位：彡-120mV。
5. 如权利要求4所述的含蛹虫草成分的原液的制备方法，其特征在于： 步骤一、将A组分原料按配方计量后加入混合罐，搅拌(转数30-lOOrpm)分散均匀，升 温至80-90°C，搅拌溶解； 步骤二、加入B组分原料搅拌溶解，并于70-75°C继续搅拌溶解后，降温至45°C ; 步骤三、C组分原料40°C预热后混合均匀，加入混合罐，搅拌均匀，加入D组分原料搅拌 均匀，真空脱气10-20分钟； 步骤四、降温至30-40°C，陈化24小时，灌装，分装并包装，即为成品。
【文档编号】A61Q19/00GK104367544SQ201410692029
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2014年11月27日 优先权日:2014年11月27日
【发明者】张宝元, 杨伟超, 纪悦 申请人:沈阳源康医疗器械有限公司