一种碳基生物菌肥及其制备方法与流程

文档序号:15173304发布日期:2018-08-14 18:08阅读:313来源:国知局

本发明属于生物肥技术领域,尤其涉及一种碳基生物菌肥及其制备方法。



背景技术:

土壤是农作物赖以生长的物质基础。土壤有机质的多少、土壤保肥能力的强弱、土壤通气能力的好坏以及土壤溶液的平衡等对植物的生长具有决定性的作用。土壤主要由矿物质、有机质和微生物三大部分组成,土壤微生物的活性,对植物根部营养非常重要,因为土壤中的有益微生物直接参与土壤肥力的形成,包括土壤中物质和能量的转化、腐植质的形成和分解、养分的释放、氮素的固定等等,但纯自然状态下有益微生物数量不够,作用力也有限。

目前微生物菌肥技术的发展非常迅速,但因为微生物种类繁多,利用微生物生产微生物菌肥的技术发展空间巨大,科学优选微生物配伍制备微生菌肥后,产生的作用常常是意料不到的。

而公知技术中的微生物菌肥主要采用菌种制备而成,但是,现有微生物菌肥缺乏有效载体,添加量较少,而且成分单一,效果并不好。



技术实现要素:

本发明要解决的技术问题是提供一种碳基生物菌肥及其制备方法。

本发明的内容包括:

一种碳基生物菌肥,包括如下原料制备而成:

甜叶菊粉15-20重量份;

苹果渣17-25重量份;

豆粕13-19重量份;

甘蔗渣21-25重量份;

abt生根粉0.05-0.09重量份;

中微量元素3-6重量份;

荧光假单胞杆菌液0.5-0.9重量份;

淡紫拟青霉菌液0.1-0.5重量份;

地衣芽孢杆菌液0.2-0.5重量份。

本发明中,作为一种优选的技术方案,所述碳基生物菌肥中的有效活菌数3-8×108个/克。

本发明中,作为一种优选的技术方案,所述碳基生物菌肥由如下原料制备而成:

甜叶菊粉18重量份;

苹果渣20重量份;

豆粕16重量份;

甘蔗渣23重量份;

abt生根粉0.07重量份;

中微量元素5重量份;

荧光假单胞杆菌液0.7重量份;

淡紫拟青霉菌液0.3重量份;

地衣芽孢杆菌液0.4重量份。

一种碳基生物菌肥的制备方法,包括以下步骤:

将甜叶菊粉、苹果渣、豆粕和甘蔗渣研磨至50-100目的粉末,在45-55℃下搅拌,搅拌的同时加入蒸馏水,保持湿度为20-35wt%,搅拌2-4小时,得到物料a;

将荧光假单胞杆菌接种到金氏b培养基中,于30~35℃、150r/min振荡培养18~20小时,然后将荧光假单胞杆菌划线接种到金氏b培养基平板上,于30~35℃培养箱中培养18~20小时,挑取单菌落再次接种到金氏b培养基中,于30~35℃、150r/min振荡培养18~20小时,得荧光假单胞杆菌培养液,将荧光假单胞杆菌培养液接种到金氏b培养基中,于30~35℃、150r/min振荡培养18~20小时,得荧光假单胞杆菌种子液,然后将荧光假单胞杆菌种子液接种到含有金氏b培养基的发酵罐中,连续培养24~30小时,得荧光假单胞杆菌液;将淡紫拟青霉菌接入pda液体培养基,于25~28℃、60~120r/min条件下在摇床上振荡培养48~72小时,将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上,于25~28℃、60~120r/min条件下培养3~5天,待长出粗壮菌丝后,挑选粗壮菌丝转接到固体斜面培养基,培养得到一级斜面菌种,将所述一级斜面菌种接入pda液体培养基,于25~28℃、60~120r/min条件下培养48~72小时,得二级摇瓶种子液,将所述二级摇瓶种子液接入pda液体培养基,于ph7.0~7.2、25~28℃条件下发酵3~5天,即得淡紫拟青霉菌菌液;

将地衣芽孢杆菌于20~35℃、密闭条件下,在活化培养基中接种、活化培养10~36小时,然后于ph7.0~7.2、20~35℃下将培养好的菌种在发酵培养基中发酵扩繁24~72小时,在所述活化培养和发酵扩繁过程中不断摇动或搅拌,即得地衣芽孢杆菌菌液;

称量荧光假单胞杆菌液、淡紫拟青霉菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液,混合,并倒入生物炭颗粒中,在35-45℃下自然干燥,得到物料b;

将物料a和物料b混合均匀,同时向其中加入abt生根粉、中微量元素,搅拌均匀得到碳基生物菌肥。

本发明中,作为一种优选的技术方案,所述活化培养基为蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水。

本发明中,作为一种优选的技术方案,所述蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水的质量百分比为8∶3∶5∶13∶1000。

本发明的有益效果是:

本发明提供的碳基生物菌肥,利用生物炭颗粒对菌种进行有效的吸附,提高了菌种的添加率,使用后,可以使得各微生物菌种构建成优势菌群,同时,本发明的原料中包括了甜叶菊粉、苹果渣、豆粕、甘蔗渣,其降解后形成的营养物质,能够被作物充分吸收利用,无残留,对作物土壤无任何危害,对植物生长起着显著的调节和促进作用,而且,菌种的存在同时可以分解、活化土壤中的大、中、微量等不溶于水的营养元素,提高肥效。

具体实施方式

为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解,下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。

实施例1

一种碳基生物菌肥,包括如下原料制备而成:甜叶菊粉15重量份;苹果渣17重量份;豆粕13重量份;甘蔗渣21重量份;abt生根粉0.05重量份;中微量元素3重量份;荧光假单胞杆菌液0.5重量份;淡紫拟青霉菌液0.1重量份;地衣芽孢杆菌液0.2重量份。所述碳基生物菌肥中的有效活菌数3×108个/克。

一种碳基生物菌肥的制备方法,包括以下步骤:

将甜叶菊粉、苹果渣、豆粕和甘蔗渣研磨至50目的粉末,在45℃下搅拌,搅拌的同时加入蒸馏水,保持湿度为20wt%,搅拌2小时,得到物料a;

将荧光假单胞杆菌接种到金氏b培养基中,于30℃、150r/min振荡培养18小时,然后将荧光假单胞杆菌划线接种到金氏b培养基平板上,于30℃培养箱中培养18小时,挑取单菌落再次接种到金氏b培养基中,于30℃、150r/min振荡培养18小时,得荧光假单胞杆菌培养液,将荧光假单胞杆菌培养液接种到金氏b培养基中,于30℃、150r/min振荡培养18小时,得荧光假单胞杆菌种子液,然后将荧光假单胞杆菌种子液接种到含有金氏b培养基的发酵罐中,连续培养24小时,得荧光假单胞杆菌液;将淡紫拟青霉菌接入pda液体培养基,于25℃、60r/min条件下在摇床上振荡培养48小时,将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上,于25℃、60r/min条件下培养3天,待长出粗壮菌丝后,挑选粗壮菌丝转接到固体斜面培养基,培养得到一级斜面菌种,将所述一级斜面菌种接入pda液体培养基,于25℃、60r/min条件下培养48小时,得二级摇瓶种子液,将所述二级摇瓶种子液接入pda液体培养基,于ph7.0、25℃条件下发酵3天,即得淡紫拟青霉菌菌液;将地衣芽孢杆菌于20℃、密闭条件下,在活化培养基中接种、活化培养10小时,活化培养基为蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水,所述蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水的质量百分比为8∶3∶5∶13∶1000,然后于ph7.0、20℃下将培养好的菌种在发酵培养基中发酵扩繁24小时,在所述活化培养和发酵扩繁过程中不断摇动或搅拌,即得地衣芽孢杆菌菌液;

称量荧光假单胞杆菌液、淡紫拟青霉菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液,混合,并倒入生物炭颗粒中,在35℃下自然干燥,得到物料b;

将物料a和物料b混合均匀,同时向其中加入abt生根粉、中微量元素,搅拌均匀得到碳基生物菌肥。

实施例2

一种碳基生物菌肥,包括如下原料制备而成:甜叶菊粉20重量份;苹果渣25重量份;豆粕19重量份;甘蔗渣25重量份;abt生根粉0.09重量份;中微量元素6重量份;荧光假单胞杆菌液0.9重量份;淡紫拟青霉菌液0.5重量份;地衣芽孢杆菌液0.5重量份。所述碳基生物菌肥中的有效活菌数8×108个/克。

一种碳基生物菌肥的制备方法,包括以下步骤:

将甜叶菊粉、苹果渣、豆粕和甘蔗渣研磨至100目的粉末,在55℃下搅拌,搅拌的同时加入蒸馏水,保持湿度为35wt%,搅拌4小时,得到物料a;

将荧光假单胞杆菌接种到金氏b培养基中,于35℃、150r/min振荡培养20小时,然后将荧光假单胞杆菌划线接种到金氏b培养基平板上,于35℃培养箱中培养20小时,挑取单菌落再次接种到金氏b培养基中,于35℃、150r/min振荡培养20小时,得荧光假单胞杆菌培养液,将荧光假单胞杆菌培养液接种到金氏b培养基中,于35℃、150r/min振荡培养20小时,得荧光假单胞杆菌种子液,然后将荧光假单胞杆菌种子液接种到含有金氏b培养基的发酵罐中,连续培养30小时,得荧光假单胞杆菌液;将淡紫拟青霉菌接入pda液体培养基,于28℃、120r/min条件下在摇床上振荡培养72小时,将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上,于28℃、120r/min条件下培养5天,待长出粗壮菌丝后,挑选粗壮菌丝转接到固体斜面培养基,培养得到一级斜面菌种,将所述一级斜面菌种接入pda液体培养基,于28℃、120r/min条件下培养72小时,得二级摇瓶种子液,将所述二级摇瓶种子液接入pda液体培养基,于ph7.2、28℃条件下发酵5天,即得淡紫拟青霉菌菌液;将地衣芽孢杆菌于35℃、密闭条件下,在活化培养基中接种、活化培养36小时,活化培养基为蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水,所述蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水的质量百分比为8∶3∶5∶13∶1000,然后于ph7.0、20℃下将培养好的菌种在发酵培养基中发酵扩繁24小时,在所述活化培养和发酵扩繁过程中不断摇动或搅拌,即得地衣芽孢杆菌菌液;

称量荧光假单胞杆菌液、淡紫拟青霉菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液,混合,并倒入生物炭颗粒中,在45℃下自然干燥,得到物料b;

将物料a和物料b混合均匀,同时向其中加入abt生根粉、中微量元素,搅拌均匀得到碳基生物菌肥。

实施例3

一种碳基生物菌肥由如下原料制备而成:甜叶菊粉18重量份;苹果渣20重量份;豆粕16重量份;甘蔗渣23重量份;abt生根粉0.07重量份;中微量元素5重量份;荧光假单胞杆菌液0.7重量份;淡紫拟青霉菌液0.3重量份;地衣芽孢杆菌液0.4重量份。所述碳基生物菌肥中的有效活菌数5×108个/克。

一种碳基生物菌肥的制备方法,包括以下步骤:

将甜叶菊粉、苹果渣、豆粕和甘蔗渣研磨至80目的粉末,在50℃下搅拌,搅拌的同时加入蒸馏水,保持湿度为25wt%,搅拌3小时,得到物料a;

将荧光假单胞杆菌接种到金氏b培养基中,于33℃、150r/min振荡培养19小时,然后将荧光假单胞杆菌划线接种到金氏b培养基平板上,于33℃培养箱中培养19小时,挑取单菌落再次接种到金氏b培养基中,于32℃、150r/min振荡培养19小时,得荧光假单胞杆菌培养液,将荧光假单胞杆菌培养液接种到金氏b培养基中,于32℃、150r/min振荡培养19小时,得荧光假单胞杆菌种子液,然后将荧光假单胞杆菌种子液接种到含有金氏b培养基的发酵罐中,连续培养28小时,得荧光假单胞杆菌液;将淡紫拟青霉菌接入pda液体培养基,于27℃、100r/min条件下在摇床上振荡培养60小时,将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上,于27℃、100r/min条件下培养4天,待长出粗壮菌丝后,挑选粗壮菌丝转接到固体斜面培养基,培养得到一级斜面菌种,将所述一级斜面菌种接入pda液体培养基,于27℃、100r/min条件下培养60小时,得二级摇瓶种子液,将所述二级摇瓶种子液接入pda液体培养基,于ph7.1、26℃条件下发酵4天,即得淡紫拟青霉菌菌液;将地衣芽孢杆菌于25℃、密闭条件下,在活化培养基中接种、活化培养20小时,活化培养基为蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水,所述蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水的质量百分比为8∶3∶5∶13∶1000,然后于ph7.1、30℃下将培养好的菌种在发酵培养基中发酵扩繁48小时,在所述活化培养和发酵扩繁过程中不断摇动或搅拌,即得地衣芽孢杆菌菌液;

称量荧光假单胞杆菌液、淡紫拟青霉菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液,混合,并倒入生物炭颗粒中,在40℃下自然干燥,得到物料b;

将物料a和物料b混合均匀,同时向其中加入abt生根粉、中微量元素,搅拌均匀得到碳基生物菌肥。

实施例4

一种碳基生物菌肥,包括如下原料制备而成:甜叶菊粉15重量份;苹果渣25重量份;豆粕13重量份;甘蔗渣25重量份;abt生根粉0.05重量份;中微量元素6重量份;荧光假单胞杆菌液0.5重量份;淡紫拟青霉菌液0.5重量份;地衣芽孢杆菌液0.2重量份。所述碳基生物菌肥中的有效活菌数4×108个/克。

一种碳基生物菌肥的制备方法,包括以下步骤:

将甜叶菊粉、苹果渣、豆粕和甘蔗渣研磨至50目的粉末,在55℃下搅拌,搅拌的同时加入蒸馏水,保持湿度为20wt%,搅拌4小时,得到物料a;

将荧光假单胞杆菌接种到金氏b培养基中,于30℃、150r/min振荡培养20小时,然后将荧光假单胞杆菌划线接种到金氏b培养基平板上,于30℃培养箱中培养20小时,挑取单菌落再次接种到金氏b培养基中,于30℃、150r/min振荡培养20小时,得荧光假单胞杆菌培养液,将荧光假单胞杆菌培养液接种到金氏b培养基中,于30℃、150r/min振荡培养20小时,得荧光假单胞杆菌种子液,然后将荧光假单胞杆菌种子液接种到含有金氏b培养基的发酵罐中,连续培养24小时,得荧光假单胞杆菌液;将淡紫拟青霉菌接入pda液体培养基,于28℃、60r/min条件下在摇床上振荡培养72小时,将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上,于25℃、120r/min条件下培养3天,待长出粗壮菌丝后,挑选粗壮菌丝转接到固体斜面培养基,培养得到一级斜面菌种,将所述一级斜面菌种接入pda液体培养基,于28℃、60r/min条件下培养72小时,得二级摇瓶种子液,将所述二级摇瓶种子液接入pda液体培养基,于ph7.0、28℃条件下发酵3天,即得淡紫拟青霉菌菌液;将地衣芽孢杆菌于35℃、密闭条件下,在活化培养基中接种、活化培养10小时,活化培养基为蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水,所述蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水的质量百分比为8∶3∶5∶13∶1000,然后于ph7.2、20℃下将培养好的菌种在发酵培养基中发酵扩繁72小时,在所述活化培养和发酵扩繁过程中不断摇动或搅拌,即得地衣芽孢杆菌菌液;

称量荧光假单胞杆菌液、淡紫拟青霉菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液,混合,并倒入生物炭颗粒中,在35-45℃下自然干燥,得到物料b;

将物料a和物料b混合均匀,同时向其中加入abt生根粉、中微量元素,搅拌均匀得到碳基生物菌肥。

实施例5

一种碳基生物菌肥,包括如下原料制备而成:甜叶菊粉20重量份;苹果渣17重量份;豆粕19重量份;甘蔗渣21重量份;abt生根粉0.09重量份;中微量元素3重量份;荧光假单胞杆菌液0.9重量份;淡紫拟青霉菌液0.4重量份;地衣芽孢杆菌液0.3重量份。所述碳基生物菌肥中的有效活菌数7×108个/克。

一种碳基生物菌肥的制备方法,包括以下步骤:

将甜叶菊粉、苹果渣、豆粕和甘蔗渣研磨至100目的粉末,在45℃下搅拌,搅拌的同时加入蒸馏水,保持湿度为35wt%,搅拌3小时,得到物料a;

将荧光假单胞杆菌接种到金氏b培养基中,于35℃、150r/min振荡培养18小时,然后将荧光假单胞杆菌划线接种到金氏b培养基平板上,于35℃培养箱中培养19小时,挑取单菌落再次接种到金氏b培养基中,于34℃、150r/min振荡培养19小时,得荧光假单胞杆菌培养液,将荧光假单胞杆菌培养液接种到金氏b培养基中,于32℃、150r/min振荡培养18小时,得荧光假单胞杆菌种子液,然后将荧光假单胞杆菌种子液接种到含有金氏b培养基的发酵罐中,连续培养30小时,得荧光假单胞杆菌液;将淡紫拟青霉菌接入pda液体培养基,于25℃、120r/min条件下在摇床上振荡培养50小时,将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上,于26℃、100r/min条件下培养4天,待长出粗壮菌丝后,挑选粗壮菌丝转接到固体斜面培养基,培养得到一级斜面菌种,将所述一级斜面菌种接入pda液体培养基,于28℃、80r/min条件下培养50小时,得二级摇瓶种子液,将所述二级摇瓶种子液接入pda液体培养基,于ph7.1、26℃条件下发酵4天,即得淡紫拟青霉菌菌液;将地衣芽孢杆菌于35℃、密闭条件下,在活化培养基中接种、活化培养35小时,活化培养基为蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水,所述蛋白胨、牛肉浸取物、氯化钠、琼脂和无菌水的质量百分比为8∶3∶5∶13∶1000,然后于ph7.0、34℃下将培养好的菌种在发酵培养基中发酵扩繁50小时,在所述活化培养和发酵扩繁过程中不断摇动或搅拌,即得地衣芽孢杆菌菌液;

称量荧光假单胞杆菌液、淡紫拟青霉菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液,混合,并倒入生物炭颗粒中,在35-45℃下自然干燥,得到物料b;

将物料a和物料b混合均匀,同时向其中加入abt生根粉、中微量元素,搅拌均匀得到碳基生物菌肥。

所属领域的普通技术人员应当理解:以上任何实施例的讨论仅为示例性的,并非旨在暗示本公开的范围(包括权利要求)被限于这些例子;在本发明的思路下,以上实施例或者不同实施例中的技术特征之间也可以进行组合,步骤可以以任意顺序实现,并存在如上所述的本发明的不同方面的许多其它变化,为了简明它们没有在细节中提供。因此,凡在本发明的精神和原则之内,所做的任何省略、修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

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