本发明属于微生物肥料与微生物农药
技术领域：
，具体是涉及一种防治根结线虫的微生物菌肥及其制备方法。
背景技术：
：根结线虫是严重危害植物的土传病害之一，其侵染根系后形成大量的根结，而且植株表现生长矮小和叶片黄化等现象，导致植物对水分和养分的吸收困难，严重影响植物的正常生长和发育。因此，根结线虫对作物造成了巨大产量和经济的损失。作物连作是引起植物根结线虫病害发生的主要因素，但由于根结线虫寄主范围很广泛，其中包括绝大多数作物和杂草，一旦发生就很难通过轮作等其他途径防治。目前，在农业生产中防治根结线虫的方法主要是化学防治，但是对环境和人类自身造成了许多负面的影响，而且许多国家或地区已经对防治根结线虫的化学药品进入市场进行了严格限制。因此，寻找新的、环境友好型的生物防治方法是非常迫切和必要的。海芋[alocasiamacrorrhiza(l.)schott]为天南星科海芋属植物，据《土农药及生物防治》记载，海芋水提取物对防治稻苞虫、粘虫、稻飞虱、稻叶蝉效果良好。侯学文等从海芋块茎中分离出海芋凝集素(alocasiamacrorrhizalectin，aml)，并发现海芋凝集素对肺腺癌细胞株p18具有较强的直接杀伤能力。同时大量资料证明，来源于植物的多种凝集素(gna、wga、cona等)均表现出明显的杀虫活性，并已在抗虫转基因植物中应用。但没有报道将海芋凝集素应用到防治根结线虫上。也没有将海芋叶应用到防治根结线虫上。技术实现要素：本发明的目的是提供一种防治根结线虫的微生物菌肥，防治根结线虫的微生物菌肥的原料主要为：湿海芋叶粉，甘蔗渣，磷酸氢钙，硫酸镁，卡伍尔链霉菌等组成；本发明生产的防治根结线虫的微生物菌肥，有效结合了植物防治虫与微生物代谢产物防治根结线虫的功能，能明显改善土壤环境质量，提高作物产量，具有生产成本低，环境友好，能耗低的特点，产品同时高效利用了利用率很低的具有明显辛辣味的海芋叶粉，对当地的经济与环保具有重要意义。为了达到上述目的，本发明利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥的原料按重量份为：湿海芋叶粉800-900份，甘蔗渣50-100份，磷酸氢钙1-2份，硫酸镁0.1-0.2份，卡伍尔链霉菌10-20份等组成。本发明的另一目的是提供一种防治根结线虫的微生物菌肥的制备方法，包括如下步骤：⑴、向旋转蒸煮罐中依次加入800-900份粉碎过2毫米筛的湿海芋叶粉，加入甘蔗渣50-100份，磷酸氢钙1-2份，硫酸镁0.1-0.2份，搅拌均匀，121℃灭菌30-50min，降温至30℃；⑵、向步骤⑴中灭菌的已经降温的发酵物料加入10-20份卡伍尔链霉菌种子，搅拌均匀，将均匀的发酵物料平铺在托盘或发酵槽内，物料厚度为5-8cm，在湿度为55%-75%，温度为28-32℃的发酵室中发酵72-96h，待发酵物料布满白色菌体，检测其卡伍尔链霉孢子含量超过100亿cfu/g，即可以结束发酵；⑶、将发酵物低温干燥至含水量小于13%，即可粉碎包装；其中，卡伍尔链霉菌种子的制备方法如下：取出菌种保藏管卡伍尔链霉菌accc41145(购买于中国农业微生物菌种保藏中心)，用高氏一号固体培养基划平板进行复苏，30℃培养4-5天。在平板下挑取单个菌落接种至茄子瓶中高氏一号固体培养基上，涂满整个茄子瓶，在培养箱中30℃培养4-6天，等菌体表面有浅粉红色孢子即可，将1l无菌水将茄子瓶中的菌苔洗下，将洗下的卡伍尔链霉菌种子接种于装有350l卡伍尔链霉菌液体培养基的500l种子发酵罐，初始ph值为7.2，温度为30℃，通风1:1，开搅拌，转速为200r/min；培养36-48小时，待菌体变粘稠，有大量菌丝产生，即可作为卡伍尔链霉菌种子；其中，所述高氏一号培养基：淀粉20g、nacl0.5g、kno31g、kh2po4·3h2o0.5g、feso4·7h2o0.01g、mgso4·7h2o0.5g、琼脂18g、水1000ml；其中，所述卡伍尔链霉菌液体培养基：葡萄糖20g/l，豆粕粉20g/l，硫酸镁0.5g/l，碳酸钙2g/l，ph7.2；各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15mpa，121℃灭菌30分钟。本发明的有益效果：本发明生产的防治根结线虫的微生物菌肥，有效结合了植物防治虫与微生物代谢产物防治根结线虫的功能，能明显改善土壤环境质量，提高作物产量，具有生产成本低，环境友好，能耗低的特点，产品同时高效利用了利用率很低的具有明显辛辣味的海芋叶粉，对当地的经济与环保具有重要意义。具体实施方式实施例1一种防治根结线虫的微生物菌肥，其特征在于该微生物菌肥的原料按重量份为：湿海芋叶粉850份，甘蔗渣100份，磷酸氢钙1份，硫酸镁0.1份，卡伍尔链霉菌20份等组成。其中，所述的一种防治根结线虫的微生物菌肥的制备方法，包括如下步骤：⑴、向旋转蒸煮罐中依次加入850份粉碎过2毫米筛的湿海芋叶粉，加入甘蔗渣100份，磷酸氢钙1份，硫酸镁0.1份，搅拌均匀，121℃灭菌30-50min，降温至30℃；⑵、向步骤⑴中灭菌的已经降温的发酵物料加入20份卡伍尔链霉菌种子，搅拌均匀，将均匀的发酵物料平铺在托盘或发酵槽内，物料厚度为5-8cm，在湿度为55%-75%，温度为28-32℃的发酵室中发酵84h，发酵物料布满白色菌体，检测其卡伍尔链霉孢子含量为112亿cfu/g，即结束发酵；⑶、将发酵物低温干燥至含水量为10%，粉碎包装；实施例2一种防治根结线虫的微生物菌肥，其特征在于该微生物菌肥的原料按重量份为：湿海芋叶粉900份，甘蔗渣80份，磷酸氢钙1份，硫酸镁0.1份，卡伍尔链霉菌20份等组成。其中，所述的一种防治根结线虫的微生物菌肥的制备方法，包括如下步骤：⑴、向旋转蒸煮罐中依次加入900份粉碎过2毫米筛的湿海芋叶粉，加入甘蔗渣80份，磷酸氢钙1份，硫酸镁0.1份，搅拌均匀，121℃灭菌30-50min，降温至30℃；⑵、向步骤⑴中灭菌的已经降温的发酵物料加入20份卡伍尔链霉菌种子，搅拌均匀，将均匀的发酵物料平铺在托盘或发酵槽内，物料厚度为5-8cm，在湿度为55%-75%，温度为28-32℃的发酵室中发酵88h，发酵物料布满白色菌体，检测其卡伍尔链霉孢子含量为108亿cfu/g，即结束发酵；⑶、将发酵物低温干燥至含水量为10%，粉碎包装。对比例1（以市场普通菌肥发酵剂发酵）一种防治根结线虫的微生物菌肥，其特征在于该微生物菌肥的原料按重量份为：湿海芋叶粉850份，甘蔗渣100份，磷酸氢钙1份，硫酸镁0.1份，市购菌肥发酵剂20份等组成；其它同实施例1。对比例2（以常用的防病促生作用的泾阳链霉菌发酵试验）一种防治根结线虫的微生物菌肥，其特征在于该微生物菌肥的原料按重量份为：湿海芋叶粉900份，甘蔗渣80份，磷酸氢钙1份，硫酸镁0.1份，泾阳链霉菌20份等组成；其它同实施例2。对比例3（常规原料发酵，用羊粪替代海芋叶粉）一种防治根结线虫的微生物菌肥，其特征在于该微生物菌肥的原料按重量份为：羊粪850份，甘蔗渣100份，磷酸氢钙1份，硫酸镁0.1份，卡伍尔链霉菌20份等组成；其它同实施例1。对比例4（用麸皮替代海芋叶粉发酵）一种防治根结线虫的微生物菌肥，其特征在于该微生物菌肥的原料按重量份为：麸皮900份，甘蔗渣80份，磷酸氢钙1份，硫酸镁0.1份，泾阳链霉菌20份等组成；其它同实施例2。实施例3:防治根结线虫的微生物菌肥在蕃茄上的应用实验组：实施组1：在蕃茄移栽时分别在以实施例1生产的微生物菌肥的100倍稀释液进行沾根，并进行灌施实施例1生产的微生物菌肥5公斤/亩；实施组2：在蕃茄移栽时分别在以实施例2生产的微生物菌肥的100倍稀释液进行沾根，并进行灌施实施例2生产的微生物菌肥5公斤/亩；对比组1：在蕃茄移栽时分别在以对比例1生产的微生物菌肥的100倍稀释液进行沾根，并进行灌施对比例1生产的微生物菌肥5公斤/亩；对比组2：在蕃茄移栽时分别在以对比例2生产的微生物菌肥的100倍稀释液进行沾根，并进行灌施对比例2生产的微生物菌肥5公斤/亩；对比组3：在蕃茄移栽时分别在以对比例3生产的微生物菌肥的100倍稀释液进行沾根，并进行灌施对比例3生产的微生物菌肥5公斤/亩；对比组4：在蕃茄移栽时分别在以对比例4生产的微生物菌肥的100倍稀释液进行沾根，并进行灌施对比例4生产的微生物菌肥5公斤/亩；对照组1：沾根用清水，灌施也仅用清水；对照组2：为使用常规农药主要成份为阿维菌素，稀释1000倍进行灌根使用，每隔15天使用一次，总共使用两次；移栽到同一片往年根结线虫病发病严重的田块未处理的番茄苗作为对照，按常规方法进行管理。结果：番茄采摘结束时调查番茄植株根系根结线虫病发病情况，调查结果如表1：按照实施例生产的微生物菌肥其防治效果达到92%以上，而使用常规发酵剂发酵海芋叶粉的（对比组1与对比组2）所得到的菌剂其防治效果仅仅为52.39%-56.76%之间；而使用卡伍尔链霉菌发酵其他基质时（对比组3-4）其防治效果也仅仅只有59.16%-62.38%之间；对比组1-4的防治根结线虫的效果不如对照组2使用阿维菌素的效果好，而实施例1与实施例2使用的效果则远远好于对照组使用阿维菌素的效果。表1各组根结线虫发病情况组别菌肥种类病情指数（%）防效（%）对照组1清水96.34实施例1实施例1生产的微生物菌肥7.1292.61实施例2实施例2生产的微生物菌肥6.8992.85对比1对比例1生产的微生物菌肥45.8752.39对比2对比例2生产的微生物菌肥41.6656.76对比3对比例3生产的微生物菌肥36.2462.38对比4对比例4生产的微生物菌肥39.3559.16对照组2阿维菌素28.1970.74实施例4:防治根结线虫的微生物菌肥在香蕉上的应用。在同一片根结线虫病发病严重的香蕉地进行试验，试验组：在香蕉出芽前亩施微生物菌肥10kg（每株施用0.08kg-0.1kg）；对照组为常规阿维菌素，稀释1000倍进行灌根使用，每隔15天使用一次，总共使用两次；按常规方法进行管理。香蕉采摘结束时调查香蕉植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示:在香蕉使用微生物菌肥相对于常规阿维菌素的相对防效提高了67%以上，香蕉的产量与对照组提高了45%。实施例5:防治根结线虫的微生物菌肥在沃柑上的应用在同一片根结线虫病发病严重的沃柑地进行试验，试验组：在沃柑开花前亩施微生物菌肥20kg（每株施用0.2kg-0.25kg）；对照组为常规阿维菌素，稀释1000倍进行灌根使用，每隔15天使用一次，总共使用两次；按常规方法进行管理。沃柑采摘结束时调查沃柑植株根系根结线虫病发病情况，调查结果显示：在沃柑使用微生物菌肥相对于常规阿维菌素的相对防效提高了42%以上，沃柑的产量与对照组提高了23%。试验组土壤中的放线菌比对照组中的放线菌提高了290%，真菌含量减少了64%，同时试验组微生物菌肥还使土壤容重下降，阳离子代换量增加，土壤全氮、全磷、速效氮、速效钾增加，从而改善了土壤的结构和营养状况，对土壤起到了修复作用，使产量增加明显。当前第1页12