本发明涉及一种生物肥的制备方法，具体为一种可以提高蔬菜抗氧化酶活性和营养品质的富硒菌糠生物肥的制备方法，涉及肥料技术领域。
背景技术
中国食用菌产量年均占世界的70％，由此产生的大量菌糠资源,菌糠资源大多被随意丢弃或焚烧，不仅浪费资源而且污染环境。菌糠是栽培食用菌以后剩余的废弃物，它的主要成分是秸秆、木屑、棉籽壳、米糠、玉米芯等农作物。通过发酵可以作为肥料，微生物将木质素和纤维素不同程度的降解，并且转化为多种可被利用的营养物质。食用菌在栽培过程中，产生了大量菌丝体，使得菌糠中富集了丰富的营养。
硒是人体必需的微量元素，人体血液中的硒含量与癌症发病率呈负相关，硒是gsh-px的重要组成成分，可以清除体内自由基，硒还可防治地方病(克山病)、糖尿病、白内障、心脑血管等疾病,具有排毒、解毒，保护肝脏的作用。食用菌对硒具有很强的富集作用，利用食用菌的富硒能力生产富硒功能食品具有广阔的应用前景，但富硒食用菌生产后的菌糠需很好的加以利用。利用富硒菌糠生产生物肥是一条有效途径。利用富硒菌糠生物肥种植蔬菜，不但有效提高蔬菜的产量与硒含量，而且提高了蔬菜的抗氧化酶活性和营养品质。自由基和活性氧会引起细胞的氧化损伤和衰老，当机体内自由基积累过多的时候，可能会造成糖降解、dna链断裂、细胞结构损伤等问题而引起疾病。抗氧化酶系统，超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，sod)、过氧化物酶(peroxidase，pod)和过氧化氢酶(catalase，cat)等，可以清除活性氧和自由基，保护机体。利用富硒菌糠生物肥栽培蔬菜可以极大的提高其抗氧化酶活性和降低丙二醛(malondialdehyde，mda)的含量，并且提高维生素c的含量，有效的帮助机体防御氧化作用。
但是目前还没有专门针对制备提高蔬菜抗氧化酶活性和营养品质的富硒菌糠生物肥及其应用的方法。
技术实现要素：
针对现有技术的不足，本发明提供一种提高蔬菜抗氧化酶活性和营养品质的富硒菌糠生物肥的制备方法，可有效的提高蔬菜抗氧化酶活性。
本发明解决技术问题采用的技术方案如下：一种提高蔬菜抗氧化酶活性和营养品质的富硒菌糠生物肥，包括如下步骤：
(1)将富硒栽培食用菌收获后菌糠晒干、打碎、过筛；
(2)取菌糠重量1％的尿素，将尿素溶于水中制成尿素水，将尿素水与菌糠混合，混合后菌糠中的含水量为60％～65％；
(3)将步骤(2)制备的菌糠自然放置24h；
(4)取絮状米糠，所述絮状米糠的重量为步骤(3)处理后菌糠重量的5％,将其与菌糠混合均匀，得到混合菌糠；
(5)将混合菌糠的ph值调整在6～9的范围内；
(6)将混合菌糠置于室外自然发酵，当发酵温度达到58-62℃的高温时，持续高温24-36h后，进行第一次翻动，翻动后静置；
(7)当温度再次达到58-62℃的高温时，进行第二次翻动，翻动后静置5-7d，直至发酵温度稳定在40℃以下，发酵完成，制得富硒菌糠生物肥；
进一步的，所述步骤(1)滑菇菌糠中硒含量为43.49-49.76mg/kg干重，秀珍菇菌糠中硒含量为43.04-45.23mg/kg干重，菌糠中硒的存在形式为硒离子或有机硒，有机硒如蛋白硒和多糖硒等。
进一步的，所述步骤(1)菌糠是滑菇和秀珍菇袋料栽培后的菌包剩余物，所述的滑菇菌包包括如下百分比的原料：锯末60％、木屑片30％、米糠3％、麸皮7％，ph为5.8、含水量为65％。所述的滑菇菌包中硒的含量为80-100mg/kg。所述的秀珍菇菌包包括如下百分比的原料：玉米芯75％、棉籽壳10％、麸皮10％、石灰5％，料水比1:1.9。所述的秀珍菇菌包中硒含量为60-100mg/kg。富硒滑菇菌糠和秀珍菇菌糠，单独的作为步骤1原料制备生物肥。
本发明的有益效果如下：(1)本发明的发酵基质为食用菌菌糠，相比于传统的秸秆或其他基质，菌糠实现了资源的循环利用，更利于资源的可持续发展；(2)菌糠中存在的硒一部分是未被吸收的无机亚硒酸钠，而菌肥中残留大量的菌丝体中的硒是以有机硒的形式存在，更利于被植物吸收利用。(3)在堆肥过程中，水份是否适量直接影响堆肥发酵速度和腐熟程度，所以含水率是好氧堆肥化的关键因素之一。如果含水率超过65％，会造成堆肥物料空隙率降低影响空气的扩散，并出现厌氧状态，形成发臭的中间产物(硫化氢、硫醇、氨等)产生恶臭和因硫化物而导致堆料腐败发黑。含水率低于30％时，微生物繁殖缓慢，影响发酵进程。(4)温度是堆肥系统微生物活动的反映，是影响微生物活动和堆肥工艺过程的重要因素。堆肥温度过低发酵不彻底；温度过高，进入孢子形成阶段，使分解速度相应变慢。因此，高温堆肥温度最好在58℃-62℃左右。控制发酵的高温阶段，可以减少氨气，硫化物等臭气的产生。(5)富硒栽培食用菌时在培养基料中加入了无机硒源，栽培食用菌后的菌糠中存在着一部分未被吸收的无机硒，还有残留在大量的菌丝体中的硒，这部分硒是以蛋白硒和多糖硒等有机硒的形式存在，更利于被植物吸收利用。本发明以富硒食用菌菌糠为发酵基质获得富硒生物肥，通过施肥获得富硒作物，更体现了资源的循环利用，更利于资源的可持续发展。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步详述，本发明所应用的化学试剂以及仪器如未经特别说明，均可从商业渠道购买。
实施例1：滑菇菌糠的制备
(1)基质：锯末60％、木屑片30％、米糠3％、麸皮7％；ph为5.8、含水量为65％，向菌包中拌入亚硒酸钠粉末，制成每千克菌包中含有亚硒酸钠为80-100mg的富硒菌包。
(2)灭菌：按照100℃、90分钟，110℃、90分钟，121℃、150分钟三个阶段依次灭菌，灭菌锅30分钟-排汽。
(3)接种：采用冷却间强制冷却至料温18℃以下接种，接种采用人工接种、手动封口机封口。
(4)培育：接种后送入发菌室培育。
(5)菌糠的获取：待滑菇生长周期彻底结束后(约10个月)的菌包为菌糠，基质中会残留未被食用菌彻底吸收利用的硒。
实施例2：秀珍菇菌糠的制备
(1)基质：玉米芯75％、棉籽壳10％、麸皮10％、石灰5％，含水量为65％，向菌包中拌入亚硒酸钠粉末，制成每千克菌包中含有亚硒酸钠为60-100mg的富硒菌包。
(2)灭菌：太空包方式按照100℃、13h，100℃、14h，100℃、15h三个阶段依次灭菌。
(3)接种：采用冷却间强制冷却至料温18℃以下接种，接种采用人工接种、手动封口机封口。
(4)培育：接种后送入发菌室培育。
(5)菌糠的获取：待秀珍菇生长周期彻底结束后的菌包为菌糠，基质中会残留未被食用菌彻底吸收利用的硒。
实施例3：发酵菌糠的制备
(1)将菌糠晒干、打碎、过筛；
(2)取菌糠重量1％的尿素，将尿素溶于水中制成尿素水，将尿素水与菌糠混合，混合后菌肥中的含水量为65％，自然放置24h；
(3)取絮状米糠，将其与菌糠混合均匀，得到混合菌糠；所述絮状米糠的重量为步骤(2)处理后菌糠重量的5％；
(4)将混合菌肥的ph值调整为9；
(5)将混合菌糠置于室外自然发酵，当发酵温度达到60℃的高温时，持续高温36h后，进行第一次翻动，翻动后静置；
(6)当温度再次达到60℃的高温时，进行第二次翻动，翻动后静置7天，直至发酵温度稳定在40℃以下，发酵完成，制得发酵菌糠。
实施例4：富硒菌糠生物肥的制备
按照实施例3的步骤进行发酵，产物即为富硒菌糠生物肥。
按照上述方法制备的富硒菌糠生物肥：氮、磷、钾含量总和为9.02％，符合农业部有机肥标准中总养分的标准(≥5.0％)；有机质含量为51.4％，符合农业部有机肥的标准(≥45％)；ph为7.6，符合农业部有机肥酸碱度的范围(5.5-8.5)。并且硒含量为47.122-49.771mg/kg。
实施例5：利用富硒菌糠生物肥种植富硒小白菜
将富硒菌糠生物肥按比例与土壤拌匀，进行小白菜的种植，当富硒菌糠有机肥施入土壤中比例为20％时，四季小白菜的发芽率为82.5％、产量为2.91kg/m2、维生素c含量为15.75mg/100g、可溶性糖含量为1.76％、还原糖含量为1.66％、硒含量为0.677mg/kg。与未富硒菌肥组相比，产量增加37.9％，硒含量增加18.91倍(p<0.01)。小白菜中的维生素c含量增加30.6％(p<0.01)；可溶性糖含量增加15.79％(p<0.01)；还原糖含量增加7.79％(p<0.05)；硝酸盐含量降低42.82％(p<0.01)。
超氧化物歧化酶活性提高了49.43％(p<0.01)；过氧化氢酶活性提高了44.82％(p<0.01)；过氧化物酶活性提高了29.66％(p<0.01)；丙二醛含量降低了51.04％(p<0.01)。因此，说明富硒菌糠有机肥中的硒对四季小白菜生长和营养有明显的促进作用，还可以极大的提高小白菜中的硒含量和抗氧化酶活性。
实验例6：利用富硒菌糠生物肥大棚种植富硒番茄
亩施湿重菌糠生物肥5414.0kg和发酵鸡粪6000kg，用旋耕机耙地拌均，塑料标准大棚栽培，试验面积3.84m2，移栽番茄小苗。富硒菌糠生物肥+鸡粪组比鸡粪组提前两天成熟，菌糠生物肥比例为20％组的产量为3.54kg/m2、维生素c含量为39.82mg/100g、可溶性糖含量为3.96％、还原糖含量为3.78％、硒含量为0.31mg/kg。与鸡粪组相比，产量增加28％，硒含量增加31.83％(p<0.01)。可溶性糖含量增加4.16％；还原糖含量增加1.08％；硝酸盐含量降低33.53％(p<0.01)。
超氧化物歧化酶活性提高了37.77％(p<0.01)；过氧化氢酶活性提高了35.38％(p<0.01)；过氧化物酶活性提高了32.87％(p<0.01)；丙二醛含量降低了34.41％(p<0.01)。大棚栽培实验表明：富硒秀珍菇菌糠生物肥对番茄各营养指标及抗氧化酶活性均有极大的有利作用，可以提高番茄的品质及产量，缩短成熟期。
表1富硒菌糠生物肥栽培小白菜的营养指标
表2富硒菌糠生物肥栽培小白菜的抗氧化酶活性
表3富硒菌糠生物肥栽培番茄的营养指标
表4富硒菌糠生物肥栽培番茄的抗氧化酶活性
上述实施例只是用于对本发明的举例和说明，而非意在将本发明创造限制于所描述的实施例范围内。此外本领域技术人员可以理解的是，本发明不局限于上述实施例，根据本发明的教导还可以做出更多种的变型和修改，这些变型和修改均落在本发明所要求保护的范围内。