一种微藻生物肥料及其在改良沙漠土质中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物技术领域，具体地，涉及一种微藻生物肥料，以及该微藻生物肥料 在改良沙漠土质中的用途。
【背景技术】
[0002] 沙漠是指地面完全被沙所覆盖、植物非常稀少、雨水稀少、空气干燥的荒芜地区。 沙漠地域大多是沙滩或沙丘，沙下岩石也经常出现。有些沙漠是盐滩，完全没有草木。在沙 漠的边缘，沙漠往往会侵蚀正常的土壤，使得正常土壤的土质变为沙漠土质。
[0003] 沙漠土质的土壤的肥力和保水力下降十分严重，直接导致了沙漠土质的土壤上的 农作物产量急剧下降。现有的改良沙漠土质的方法包括：设置草方格沙障，即用麦草、稻 草、芦苇等材料，在流动沙丘上扎成挡风墙，以削弱风力的侵蚀，同时有截留降雨的作用， 能提高沙层的含水量，有利于沙生植物的生长；设置黏土沙障，即将黏土在沙丘上堆成高 20-30m的土埂，间距1~2m，走向与风向垂直。黏土固沙施工简单，固沙效果较好，且具有 良好的保水能力，但需要大量的黏土；以及进行节水灌溉，即进行滴灌和喷灌等。
[0004] 向沙漠土质中施用有机肥也是一种积极的改良方法。例如CN104140307A公开了 一种蓝藻有机肥，其包括下述重量份数配比的原料：蓝藻粉40~70、全氮10~25、五氧化 二磷5~20、氧化钾5~15。该蓝藻有机肥能够阶段性地增加沙漠土质的肥力，但是沙漠 土质的保水力和长期肥力仍然较低。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是克服现有的有机肥长期肥力较低且保水性差的缺陷，提供一种能 够使沙漠土质长期保持高肥力和高保水力的微藻生物肥料，。
[0006] 为了实现上述目的，本发明提供了该微藻生物肥料含有多变鱼腥藻（Anabaena variabilis)的活藻体和柱胞鱼腥藻（Anabaenacylindrica)的活藻体，该微藻生物肥 料通过包括如下步骤的方法制备得到：（1)将含有多变鱼腥藻的第一培养液、含有柱胞鱼 腥藻的第二培养液和补充培养基混合并培养至叶绿素a含量为3-8yg/mL，得到第三培 养液；所述补充培养基能够维持含有多变鱼腥藻（Anabaenavariabilis)和柱胞鱼腥藻 (Anabaenacylindrica)的生长；（2)将所述第三培养液或浓缩后的所述第三培养液与保 水剂混合至保水剂的浓度为0. 5-5g/L。
[0007] 本发明还提供了如上所述的微藻生物肥料在改良沙漠土质中的用途。
[0008] 通过上述技术方案，本发明的微藻生物肥料能够使沙漠土质长期保持高肥力和高 保水力。
[0009] 本发明的其他特征和优点将在随后的【具体实施方式】部分予以详细说明。
【附图说明】
[0010] 附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具 体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：
[0011] 图1是测试实施例1中测定实施例1微藻生物肥料和对比例1的有机肥对盆栽蕃 茄的植株大小的影响。
【具体实施方式】
[0012] 以下对本发明的【具体实施方式】进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体 实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
[0013] 在本发明中，在未作相反说明的情况下，使用的气体和液体的体积均为1个标准 大气压和20 °C下的数值。
[0014] 本发明提供了一种微藻生物肥料，其中，该微藻生物肥料含有多变鱼腥藻 (Anabaenavariabilis)的活藻体和柱胞鱼腥藻（Anabaenacylindrica)的活藻体，该微藻 生物肥料通过包括如下步骤的方法制备得到：（1)将含有多变鱼腥藻的第一培养液、含有 柱胞鱼腥藻的第二培养液和补充培养基混合并培养至叶绿素a含量为5-20yg/mL，得到第 三培养液；所述补充培养基能够维持含有多变鱼腥藻（Anabaenavariabilis)和柱胞鱼腥 藻（Anabaenacylindrica)的生长；（2)将所述第三培养液或浓缩后的所述第三培养液与 保水剂混合至保水剂的浓度为0. 5-5g/L。
[0015] 其中，步骤（1)中，所述第一培养液和所述补充培养基之间的体积比可以为 (0.2-0. 8) :1，优选为（0.4-0. 6) :1 ;所述第一培养液与所述第二培养液之间的体积比为 (0? 2-5) :1，优选为（0? 3-3) :1。
[0016] 其中，含有多变鱼腥藻的第一培养液中叶绿素a含量可以为5-20yg/mL，优选 为10-15yg/mL;含有柱胞鱼腥藻的第二培养液中叶绿素a含量为2-20yg/mL，优选为 4-15yg/mL。其中，培养液中的叶绿素a的含量可以通过如下方法测量得到：将lmL培养液 离心后收集细胞，加入3mL甲醇，混匀后4°C浸泡lh，离心取上清，测定上清液的665nm处的 吸光值（即A665)，根据公式叶绿素a含量（yg/mL) = 13. 9A665计算得到培养液中叶绿素 a的含量。
[0017] 其中，本发明所用的多变鱼腥藻（Anabaenavariabilis)可以为购自ATCC的商品 编号33801的多变鱼腥藻（Anabaenavariabilis)，即多变鱼腥藻ATCC33801。其中，本发 明所用的柱胞鱼腥藻（Anabaenacylindrica)可以为购自ATCC的商品编号29414的柱胞 鱼腥藻（Anabaenacylindrica)，S卩柱胞鱼腥藻ATCC29414。
[0018] 其中，所述含有多变鱼腥藻的第一培养液可以是将多变鱼腥藻接种到第一培养 基中培养得到的；所述第一培养基可以含有1-28/1的似勵 3、0.03-0.05§/1的1(2即04、 0? 03-0. 05g/L的MgS04、0. 01-0. 03g/L的CaCl2、0. 01-0. 03g/L的Na2C03、0. 004-0. 01g/L的 柠檬酸、〇? 004-0.Olg/L的柠檬酸铁、2-3. 5mg/L的H3B04、l-2. 5mg/L的MnCl2、0. 15-0. 3mg/ L的ZnS04、0. 3-0. 5mg/L的Na2Mo04、0. 07-0. 09mg/L的CuS04和 40-60mg/L的Co(NO3)2;所 述含有柱胞鱼腥藻的第二培养液可以是将多变鱼腥藻接种到第二培养基中培养得到的；所 述第二培养基可以含有 3-5g/L的NaN03、0. 03-0. 05g/L的K2HP04、0. 03-0. 05g/L的MgS04、 0? 01-0. 03g/L的CaCl2、0. 01-0. 03g/L的Na2C03、0. 004-0. 01g/L的柠檬酸、0? 004-0. 01g/L 的柠檬酸铁、2-3. 5mg/L的H3B04、l-2. 5mg/L的MnCl2、0. 15-0. 3mg/L的ZnS04、0. 7-0. 9mg/L 的Na2Mo04、0. 07-0. 09mg/L的CuS04和 70-100mg/L的C〇(N03)2。其中，培养的条件可以为常 规的多变鱼腥藻和柱胞鱼腥藻的培养条件，例如培养条件可以包括：温度为20-30°C，光暗 比为1 : (0. 6-0. 8)，光照强度为1000-60000勒克斯，时间为4-10天。
[0019] 其中，所述补充培养基可以含有0? 03-0. 05g/L的K2HP04、0. 03-0. 05g/L的MgS04、 0? 01-0. 03g/L的CaCl2、0. 01-0. 03g/L的Na2C03、0. 004-0. 01g/L的柠檬酸、0? 004-0. 01g/L的柠檬酸铁、2-3. 5mg/L的H3B04、l-2. 5mg/L的MnCl2、0. 15-0. 3mg/L的ZnS04、0. 7-0. 9mg/L 的Na2Mo04、0. 07-0. 09mg/L的CuS04和 70-100mg/L的CoCl2。
[0020] 其中，将含有多变鱼腥藻的第一培养液、含有柱胞鱼腥藻的第二培养液和补充培 养基混合并培养的培养条件可以包括：温度为20-30°C，光暗比为1 : (0. 6-0. 8)，光照强度 为1000-60000勒克斯，时间为4-10天。
[0021] 其中，步骤（2)中，浓缩前的所述第三培养液的体积是浓缩后的所述第三培养液 的体积的2-100倍，其中，浓缩可以通过离心弃去部分上清液的方式进行。
[0022] 其中，所述保水剂的吸水倍率可以为200-1000倍。其中，所述吸水倍率是指吸水 后的保水剂减去干重再除以保水剂干重得到的倍率。
[0023] 其中，所述保水剂可以包括聚丙烯酸钠、淀粉丙烯酸接枝共聚物和聚丙烯酰胺中 的至少一种。
[0024] 本发明还提供了如上所述的微藻生物肥料在改良沙漠土质中的用途。
[0025] 以下，通过实施例进一步详细说明本发明。
[0026] 实施例1
[0027] 将购自ATCC的商品编号33801的多变鱼腥藻（Anabaenavariabilis)，即多变鱼 腥藻ATCC33801接种到第一培养基中，所述第一培养基含有1. 5g/L的NaN03、0. 04g/L的 K2HP04、0. 04g/L的MgS04、0. 02g/L的CaCl2、0. 02g/L的Na2C03、0. 007g/L的柠檬酸、0? 007g/L 的柠檬酸铁、3mg/L的H3B04、2mg/L的MnCl2、0. 2mg/L的ZnS04、0. 4mg/L的Na2Mo04、0. 08mg/L 的CuSO# 50mg/L的C〇(NO3)2，培养的条件包括温度为25°C，光暗比为1 :0. 7,光照强度为 800勒克斯。在培养的过程中，每8个小时测量一次培养液中的叶绿素a的含量，养液中的 叶绿素a的含量通过如下方法测量得到：将lmL培养液离心后收集细胞，加入3mL甲醇，混 匀后4°C浸泡12h，离心取上清，测定上清液的665nm处的吸光值（即A665)，根据公式：叶绿 素a含量（yg/mL) = 13. 9A665,计算得到培养液中叶绿素a的含量。在培养的第6天时， 得到叶绿素a含量为1. 8yg/mL的第一培养液。
[0028] 将购自ATCC的商品编号29414的柱胞鱼腥藻（Anabaenacylindrica)，即柱胞 鱼腥藻ATCC29414接种到第二培养基中，所述第二培养基含有4g/L的NaN03、0. 04g/L的 K2HP04、0. 04g/L的MgS04、0. 02g/L的CaCl2、0. 02g/L的Na2C03、0. 008g/L的柠檬酸、0? 008g/L 的柠檬酸铁、3mg/L的H3B04、2mg/L的MnCl2、0. 2mg/L的ZnS04、0. 8mg/L的Na2Mo04、0. 08mg/ L的CuSOjP90mg/L的Co(NO3) 2，培养的条件包括温度为25°C，光暗比为1 :1，光照强度为 10000勒克斯。在培养的过程中，每8个小时测量一次培养液中的叶绿素a的含量，养液中 的叶绿素a的含量通过如下方法测量得到：将lmL培养液离心后收集细胞，加入3mL甲醇， 混匀后4°C浸泡12h，离心取上清，测定上清液的665nm处的吸光值（即A665)，根据公式： 叶绿素a含量（yg/mL) = 13. 9A665,计算得到培养液中叶绿素a的含量。在培养的第6天 时，得到叶绿素a含量为15yg/mL的第二培养液。
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