一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法
【专利摘要】本发明公开了一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法，包括以下步骤：培养菌种；前发酵；调整溶液；分装液体叶面肥。所述的菌种包括乳酸菌群、芽孢杆菌群、酵母菌群、放线菌群。所述的调整溶液工序起到终止前发酵和启动后发酵的作用，后发酵在叶面肥存储销售的过程中进行，使叶面肥长时间保持微生物活性。本发明的微生物抗逆抗病叶面肥生产方法，极大地提高了微生物叶面肥的稳定性，保质期18个月以上；并且充分利用了工农业生产的废弃物，有利于可持续发展。制成的叶面肥富含各种植物营养元素和刺激植物生长的有机酸，有利于提高作物产量和抗逆能力；叶面肥中的活性微生物菌群具有抑制植物病原菌作用，可提高植物的抗病能力。
【专利说明】
一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法
技术领域
[0001]本发明涉及肥料领域，尤其涉及一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法。
【背景技术】
[0002]植物吸收养分可以通过根系吸收和叶面吸收两种途径，施用于叶面的肥料专称叶面肥。叶面施肥不是提供植物营养的主要手段，只是作为补充和调节营养的辅助措施。特别是在根部吸收机能受到障碍的逆境(如土壤盐碱化、过酸过碱、干旱、过涝)时，叶面施肥能发挥特殊的效果。另外，叶面施肥是施加微量元素营养的有效措施，可避免微量元素稀释于土壤中不被吸收，节约肥料成本。
[0003]叶面肥可以分成以下几类:1.无机营养型叶面肥:复配各种化学肥料制成，提供各种营养元素;2.调节型叶面肥:含有生长素、激素等植物生长调节剂，调控植物生长发育;3.微生物叶面肥:含活性微生物及其代谢物，可刺激植物生长、防治微生物病害;4.腐植酸叶面肥:腐植酸与营养元素复配，可刺激植物吸收养分和生长;5.氨基酸叶面肥:以氨基酸为主并加入微量元素，可壮苗健株、提高植物抗逆抗病能力;6.复合型叶面肥:复合形式多样，功能多种。
[0004]现有技术中各种类型叶面肥都有，以复合型叶面肥为主。通常是各种氨基酸、化学肥料、生长调节剂、杀虫剂的复配，例如申请号为CN 200910219029.8、CN 201310699548.5、CN 201510221601.X、CN 201510470691.6的专利所述的叶面肥。少数是微生物叶面肥，例如申请号为CN 201210403492.X、CN 201310592120.0的专利所述的叶面肥，属于绿色肥料，月巴效显著。
[0005]作为一种绿色肥料，微生物叶面肥有多方面的功效。有益微生物占据了叶面生态位，可以防治微生物病害;微生物的代谢产物有氨基酸、腐植酸和其他可刺激植物吸收营养和生长的物质，并且可以螯合营养元素帮助吸收。但是现有技术往往比较关注微生物叶面肥在营养和刺激生长方面的作用，而对防治微生物病害的作用没有充分重视，于是这方面的功效也就并不明显。另外，微生物叶面肥的稳定性差也是一个缺陷，主要体现在微生物活性难以保持，活性保质期往往不超过12个月。微生物如果死了，起作用的就只剩下其代谢产物和其它复配的成分。
[0006]其实微生物叶面肥可以同时将提供营养、刺激植物生长、提高植物抗逆能力和防止微生物病害这三方面的功效都发挥的很好，关键在于合适的菌种组合和菌种活性的保持。
【发明内容】
[0007]为了解决上述问题，本发明公开了一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法，提供一种微生物活性保质期长，同时具有提供营养、刺激植物生长、提高植物抗逆能力和防止微生物病害多重效果的微生物叶面肥。为达此目的，本发明采用以下技术方案:
[0008]—种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法，其特征在于这种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法包括如下步骤:
[0009](I)培养菌种:菌种包括乳酸菌群、酵母菌群、芽孢杆菌群、放线菌群；
[0010]乳酸菌群具体包括嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌，分别挑取两种乳酸菌的斜面菌种各两环，接种到两瓶200mL乳酸杆菌肉汤培养基，37摄氏度摇床培养48小时获得两种乳酸菌的菌种液;所述乳酸杆菌肉汤培养基的配方:乳化胨15.0g/L、酵母浸粉5.0g/L、磷酸二氢钾
2.0g/L、葡萄糖 1.0g/L、番茄浸出粉2.5g/L、吐温80 1.0g/L、pH值6.8 ± 0.2;
[0011]酵母菌群具体包括酿酒酵母、异常汉逊酵母(抵抗黄曲霉等致病霉菌)，分别挑取两种酵母菌的斜面菌种各两环，接种到两瓶200mL麦芽汁液体培养基，28摄氏度摇床培养72小时获得两种酵母菌的菌种液;所述麦芽汁液体培养基的配方:麦芽浸粉130g/L，pH值6.4±0.2;
[0012]芽孢杆菌群具体包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、多黏类芽孢杆菌，分别挑取四种芽孢杆菌的斜面菌种个两环，接种到四瓶200mL营养肉汤培养基，37摄氏度摇床培养48小时获得四种芽孢杆菌的菌种液;所述营养肉汤培养基的配方:蛋白胨1g/L、牛肉膏 3g/L、氯化钠 5g/L、pH 值 7.4 ± 0.2;
[0013]放线菌群具体包括细黄链霉菌，挑取斜面菌种两环接种到200mL链霉菌液体培养基，37摄氏度摇床培养72小时获得菌种液;所述链霉菌液体培养基的配方:葡萄糖4.0g/L,酵母浸粉4.0g/L、麦芽浸粉4.0g/L;
[0014](2)前发酵:将上述菌种液加入营养液中，通无菌空气搅拌发酵，30摄氏度培养72小时；
[0015](3)调整溶液:发酵液再加入糖蜜50kg、尿素50kg，混匀溶解后50目滤网过滤；
[0016](4)分装:密封分装成瓶装或桶装，液体叶面肥须装满容器容积的95%?98%。
[0017]第(2)步前发酵中，所述营养液的配方:碳源50kg、氮源10kg、补充营养源20kg、草木灰0.5kg、水500kg，混合搅拌，煮沸20分钟后冷却至30摄氏度。
[0018]所述的碳源、氮源和补充营养源能在满足微生物营养需求的基础上根据具体情况选择能用的工农业生产废弃物。
[0019]所述的碳源能选用甘蔗糖蜜或天然糖蜜，优选甘蔗甜蜜;所述的氮源能选用花生麸、豆渣粉或玉米浆干粉，优选花生麸;所述的补充营养源能选用果渣粉、啤酒酒糟粉、黄酒酒糟粉或果酒酒糟粉，优选果渣粉。
[0020]第(3)步中，所述的发酵液还能添加钼、砸、硼及植物所需的微量元素。
[0021]所述的微生物抗逆抗病叶面肥能用于草本植物和木本植物的根外追肥，须用清水稀释30?50倍后喷施使用。
[0022]本发明的有益效果:本发明的微生物抗逆抗病叶面肥，利用乳酸菌群、芽孢杆菌群、酵母菌群和放线菌群组成稳定的微生物群落，生物活性大于单独使用其中每一种菌群。生产方法第(3)步加入糖蜜和尿素，可降低发酵液的水分活度，使微生物启动后发酵，同时尿素在叶面肥中能起到软化叶片角质层、加速其他营养物质进入叶片的作用。生产方法第
(4)步限定液体叶面肥须装满容器容积的95%?98%，限制了液体中的溶氧量，有利于后发酵过程中微生物产生有机酸。本发明的微生物抗逆抗病叶面肥还有以下效果:提供氮、磷、钾、钙、镁等营养元素等各种有机酸刺激植物生长，促进营养元素吸收;提高植物抗逆能力；微生物活性保持18个月以上，解决微生物叶面肥稳定性差的问题。
【具体实施方式】
[0023]为了使本发明的目的和技术方案以及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明做进一步详细说明，应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以对发明的解释，并不用于限定所述求的权利要求。
[0024]本发明所利用的菌种均可以从各种市场渠道购买获得，对于所使用的菌株并无特别要求。而发明实施例中的菌株来自于广东省微生物菌种保藏中心:嗜酸乳杆菌编号GIMl.731，植物乳杆菌编号GIMl.648，酿酒酵母编号GIM2.137，异常汉逊酵母编号GIM2.100，枯草芽孢杆菌编号GMl.222，地衣芽孢杆菌编号GMl.863，凝结芽孢杆菌编号GIMl.646，多黏类芽孢杆菌编号G頂1.695，细黄链霉菌编号G頂5406。
[0025]—种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法，其特征在于这种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法包括如下步骤:
[0026](I)培养菌种:菌种包括乳酸菌群、酵母菌群、芽孢杆菌群、放线菌群；
[0027]乳酸菌群具体包括嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌，分别挑取两种乳酸菌的斜面菌种各两环，接种到两瓶200mL乳酸杆菌肉汤培养基，37摄氏度摇床培养48小时获得两种乳酸菌的菌种液;所述乳酸杆菌肉汤培养基的配方:乳化胨15.0g/L、酵母浸粉5.0g/L、磷酸二氢钾
2.0g/L、葡萄糖 1.0g/L、番茄浸出粉2.5g/L、吐温80 1.0g/L、pH值6.8 ± 0.2;
[0028]酵母菌群具体包括酿酒酵母、异常汉逊酵母(抵抗黄曲霉等致病霉菌)，分别挑取两种酵母菌的斜面菌种各两环，接种到两瓶200mL麦芽汁液体培养基，28摄氏度摇床培养72小时获得两种酵母菌的菌种液;所述麦芽汁液体培养基的配方:麦芽浸粉130g/L，pH值6.4±0.2;
[0029]芽孢杆菌群具体包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、多黏类芽孢杆菌，分别挑取四种芽孢杆菌的斜面菌种个两环，接种到四瓶200mL营养肉汤培养基，37摄氏度摇床培养48小时获得四种芽孢杆菌的菌种液;所述营养肉汤培养基的配方:蛋白胨1g/L、牛肉膏 3g/L、氯化钠 5g/L、pH 值 7.4 ± 0.2;
[0030]放线菌群具体包括细黄链霉菌，挑取斜面菌种两环接种到200mL链霉菌液体培养基，37摄氏度摇床培养72小时获得菌种液;所述链霉菌液体培养基的配方:葡萄糖4.0g/L,酵母浸粉4.0g/L、麦芽浸粉4.0g/L;
[0031 ] (2)前发酵:将上述菌种液加入营养液中，通无菌空气搅拌发酵，30摄氏度培养72小时；
[0032](3)调整溶液:发酵液再加入糖蜜50kg、尿素50kg，混匀溶解后50目滤网过滤；
[0033](4)分装:密封分装成瓶装或桶装，液体叶面肥须装满容器容积的95%?98%。
[0034]第(2)步前发酵中，所述营养液的配方:碳源50kg、氮源10kg、补充营养源20kg、草木灰0.5kg、水500kg，混合搅拌，煮沸20分钟后冷却至30摄氏度。
[0035]所述的碳源、氮源和补充营养源能在满足微生物营养需求的基础上根据具体情况选择能用的工农业生产废弃物。
[0036]所述的碳源能选用甘蔗糖蜜或天然糖蜜，优选甘蔗甜蜜;所述的氮源能选用花生麸、豆渣粉或玉米浆干粉，优选花生麸;所述的补充营养源能选用果渣粉、啤酒酒糟粉、黄酒酒糟粉或果酒酒糟粉，优选果渣粉。
[0037]第(3)步中，所述的发酵液还能添加钼、砸、硼及植物所需的微量元素。
[0038]所述的微生物抗逆抗病叶面肥能用于草本植物和木本植物的根外追肥，须用清水稀释30?50倍后喷施使用。
[0039]实施例一:本例为叶面肥的具体生产方法I
[0040](I)培养菌种
[0041 ]菌种包括乳酸菌群、酵母菌群、芽孢杆菌群、放线菌群。
[0042]乳酸菌群具体包括嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌，分别挑取两种乳酸菌的斜面菌种各两环，接种到两瓶200mL乳酸杆菌肉汤培养基，37摄氏度摇床培养48小时获得两种乳酸菌的菌种液。乳酸杆菌肉汤培养基配方:乳化胨15.(^/1，酵母浸粉5.(^凡，磷酸二氢钾2.(^/1，葡萄糖 1.0g/L，番茄浸出粉2.5g/L，吐温80 1.0g/L，pH值6.8 ± 0.2。
[0043]酵母菌群具体包括酿酒酵母、异常汉逊酵母(抵抗黄曲霉等致病霉菌)，分别挑取两种酵母菌的斜面菌种各两环，接种到两瓶200mL麦芽汁液体培养基，28摄氏度摇床培养72小时获得两种酵母菌的菌种液。麦芽汁液体培养基配方:麦芽浸粉130g/L，pH值6.4 ± 0.2。
[0044]芽孢杆菌群具体包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、多粘类芽孢杆菌，分别挑取四种芽孢杆菌的斜面菌种个两环，接种到四瓶200mL营养肉汤培养基，37摄氏度摇床培养48小时获得四种芽孢杆菌的菌种液。营养肉汤培养基配方:蛋白胨10g/L，牛肉膏 3g/L，氯化钠 5g/L，pH 值 7.4 ± 0.2。
[0045]放线菌群具体包括细黄链霉菌，挑取斜面菌种两环接种到200mL链霉菌液体培养基，37摄氏度摇床培养72小时获得菌种液。链霉菌液体培养基配方:葡萄糖4.0g/L，酵母浸粉4.0g/L，麦芽浸粉4.0g/L。
[0046](2)前发酵
[0047]将上述菌种液加入营养液中，通无菌空气搅拌发酵，30摄氏度培养72小时。营养液配方:糖蜜50kg，花生麸1kg，果渣粉20kg，草木灰0.5kg，水500kg，混合搅拌，煮沸20分钟后冷却至30摄氏度。
[0048](3)调整溶液
[0049]发酵液再加入糖蜜50kg、尿素5kg，混匀溶解后50目滤网过滤过滤。
[0050](4)分装
[0051 ] 用500mL PET塑料瓶密封分装，每瓶装液体叶面495mL。
[0052]实施例二:本例为叶面肥的具体生产方法2
[0053](I)培养菌种
[0054]与实施例1对应部分相同。
[0055](2)前发酵
[0056]将上述菌种液加入营养液中，通无菌空气搅拌发酵，30摄氏度培养72小时。营养液配方:糖蜜50kg，豆渣粉I Okg，啤酒酒糟粉20kg，草木灰0.5kg，水500kg，混合搅拌，煮沸20分钟后冷却至30摄氏度。
[0057](3)调整溶液
[0058]与实施例1对应部分相同。
[0059](4)分装
[0060]用50LPP塑料桶密封分装，每桶装液体叶面肥49L。[0061 ] 实施例三
[0062]本例为以实施例一制得的叶面肥的种植试验，以杨桃树作为试验对象:
[0063]2块杨桃树试验林各I亩，I块试验林使用按实施例1制得的微生物抗病抗逆叶面肥，I块试验林使用尿素叶面肥作为对照。I亩果林种树30株，2块试验林施肥量相同、其他种植条件相同。
[0064]微生物抗病抗逆叶面肥用清水稀释40倍，I亩果林每次喷施叶面肥稀释液60L。在新稍转绿期、花蕾期、幼果期、果实膨大期分别喷施2次，每次喷施间隔I个星期。该试验林没有一株杨桃发生炭疽病，年产果6060kg。
[0065]尿素配成0.9%溶液，I亩果林每次喷施尿素溶液60L。在新稍转绿期、花蕾期、幼果期、果实膨大期分别喷施2次，每次喷施间隔7天。该试验林出现炭疽病的株数占13%，年产果5100kgo
[0066]试验表明，使用本发明的叶面肥比市售尿素增产18.8%，并且提高了杨桃的抗病能力，有效防止了杨桃炭疽病。
[0067]尽管上述图文已经描述了本发明的优选实施例的说明，但本领域内的技术人员一旦得知了本创造性地概念，则可以对这些实施例做另外的变更和修改，所以，所附的权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更。显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种修改和变型而不脱离本发明的思想和范围，这样，尚若对本发明的这些修改和变形属于本发明权利要求及其等同技术范围之内，则本发明意图包含这些改动和变形在内。
【主权项】
1.一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法，其特征在于这种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法包括如下步骤: (1)培养菌种:菌种包括乳酸菌群、酵母菌群、芽孢杆菌群、放线菌群； 乳酸菌群具体包括嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌，分别挑取两种乳酸菌的斜面菌种各两环，接种到两瓶200mL乳酸杆菌肉汤培养基，37摄氏度摇床培养48小时获得两种乳酸菌的菌种液;所述乳酸杆菌肉汤培养基的配方:乳化胨15.0g/L、酵母浸粉5.0g/L、磷酸二氢钾2.0g/L、葡萄糖 1.0g/L、番茄浸出粉2.5g/L、吐温80 I.0g/L、pH值6.8 ± 0.2; 酵母菌群具体包括酿酒酵母、异常汉逊酵母(抵抗黄曲霉等致病霉菌)，分别挑取两种酵母菌的斜面菌种各两环，接种到两瓶200mL麦芽汁液体培养基，28摄氏度摇床培养72小时获得两种酵母菌的菌种液;所述麦芽汁液体培养基的配方:麦芽浸粉130g/L，pH值6.4±0.2； 芽孢杆菌群具体包括枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、多黏类芽孢杆菌，分别挑取四种芽孢杆菌的斜面菌种个两环，接种到四瓶200mL营养肉汤培养基，37摄氏度摇床培养48小时获得四种芽孢杆菌的菌种液;所述营养肉汤培养基的配方:蛋白胨10g/L、牛肉膏 3g/L、氯化钠 5g/L、pH 值 7.4 ± 0.2; 放线菌群具体包括细黄链霉菌，挑取斜面菌种两环接种到200mL链霉菌液体培养基，37摄氏度摇床培养72小时获得菌种液;所述链霉菌液体培养基的配方:葡萄糖4.0g/L、酵母浸粉4.0g/L、麦芽浸粉4.0g/L; (2)前发酵:将上述菌种液加入营养液中，通无菌空气搅拌发酵，30摄氏度培养72小时； (3)调整溶液:发酵液再加入糖蜜50kg、尿素50kg，混匀溶解后50目滤网过滤； (4)分装:密封分装成瓶装或桶装，液体叶面肥须装满容器容积的95%?98%。2.根据权利要求1所述的一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法，其特征在于:第(2)步前发酵中，所述营养液的配方:碳源50kg、氮源10kg、补充营养源20kg、草木灰0.5kg、水500kg，混合搅拌，煮沸20分钟后冷却至30摄氏度。3.根据权利要求2所述的一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法，其特征在于:所述的碳源、氮源和补充营养源能在满足微生物营养需求的基础上根据具体情况选择能用的工农业生产废弃物。4.根据权利要求3所述的一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法，其特征在于:所述的碳源能选用甘蔗糖蜜或天然糖蜜，优选甘蔗甜蜜;所述的氮源能选用花生麸、豆渣粉或玉米浆干粉，优选花生麸;所述的补充营养源能选用果渣粉、啤酒酒糟粉、黄酒酒糟粉或果酒酒糟粉，优选果渣粉。5.根据权利要求1所述的一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法，其特征在于:第(3)步中，所述的发酵液还能添加钼、砸、硼及植物所需的微量元素。6.根据权利要求1所述的一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法，其特征在于:所述的微生物抗逆抗病叶面肥能用于草本植物和木本植物的根外追肥，须用清水稀释30?50倍后喷施使用。
【文档编号】C05G3/00GK105859395SQ201610196225
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年3月31日
【发明人】胡军
【申请人】胡军