调节人5－羟色胺受体的吡唑衍生物的制作方法

专利名称：调节人5－羟色胺受体的吡唑衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及非内源性、组成型活性的5-羟色胺受体的小分子调节剂；优选地，所述小分子调节剂优先选择人5HT2A受体而非人5HT2C受体；和最优选地，所述小分子调节剂是5HT2A受体的反激活剂。
背景技术：
I.G蛋白偶联受体G蛋白偶联受体都具有一个相同的结构基元(motif)。所有这些受体具有七个由22到24个疏水氨基酸组成的序列，它们组成七个α螺旋，每个α螺旋都跨过膜。跨膜螺旋通过具有更大环的氨基酸链在细胞膜外侧第4和第5跨膜螺旋之间连接。另外一个主要由亲水氨基酸组成的更大的环在细胞膜内侧连接第5和第6跨膜螺旋。受体的羧基端位于细胞内而氨基端位于细胞外。据认为，连接第5和第6螺旋的环以及羧基端与G蛋白相互作用。目前已经识别的G蛋白是Gq、Gs、Gi和Go。G蛋白偶联受体的一般结构显示在

图1中。
在生理条件下，G蛋白偶联受体存在于细胞膜上，并在“非活化”状态和“活化”状态这两种不同的状态或构象之间保持平衡。如图2所示意，在非活化状态下的受体不能与细胞内传导途径相偶联以产生生物学反应。受体构象向活性状态的转变就使它与传导途径相偶联并产生生物学反应。
受体可被内源配体或外源的激活剂配体稳定在活性状态。近来的发现提供了除配体之外能够使受体稳定在活性状态构象的不同方法，这包括但不限于对受体的氨基酸序列的修饰。这些方法通过模仿与受体结合的配体的作用来有效地稳定活性状态的受体。通过如此的配体非依赖性方法形成的稳定被称为“组成型受体活化”。
II.5-羟色胺受体5-羟色胺(5-HT)受体是重要的一类G蛋白偶联受体。5-HT被认为在涉及学习和记忆、睡眠、热调节、情绪、运动活力、疼痛、性和攻击性行为、食欲、神经变性调节和生物节律的过程中发挥作用。毫不惊奇地，5-HT与下列病理生理学状况相关联，如焦虑、抑郁、强迫性人格障碍、精神分裂症、自杀、孤独症、偏头痛、呕吐、酒精中毒以及神经变性障碍。关于集中在5-HT受体上的抗精神病的治疗方法，这些类型的治疗一般能分成两类“典型”和“非典型”。两者皆有抗精神病的效果，但典型治疗还包括伴随的运动有关的副作用(锥体外系综合症如咂嘴、舌头急投和运动系统运动等)。这样一些副作用被认为与和其他受体如黑质纹状体途径中的人多巴胺D2受体相互作用的化合物相关。因此，优选非典型治疗。氟哌丁苯被视为典型抗精神病药，而将氯氮平视为非典型抗精神病药。
5-HT受体划分为7个亚族，称为5-HT1至5-HT7(含)。这些亚族进一步划分成亚类。例如，将5-HT2亚族划分为3个受体亚类5-HT2A、5-HT2B和5-HT2C。人5-HT2C受体于1987年首先分离并克隆，而人5-HT2A受体于1990年首先分离并克隆。这两个受体被认为是引起幻觉药物的作用位点。另外，5-HT2A和5-HT2C受体的拮抗剂被认为在治疗抑郁、焦虑、精神病和饮食失调中是有用的。
美国专利4,985,352描述了编码整个人5-HT1C受体(现已知为5-HT2C受体)的功能性cDNA克隆的分离、鉴定和表达。美国专利5,661,012描述了编码整个人5-HT2A受体的功能性cDNA克隆的分离、鉴定和表达。
已有报道内源形式的大鼠5-HT2A和大鼠5-HT2C受体的突变导致这些受体的组成型活化(5-HT2ACasey，C.等，(1996)Society forNeuroscience Abstracts，22699.10，下文称“Casey”；5-HT2CHerrick-Davis，K.和Teitler，M.，(1996.Society for NeuroscienceAbstracts，22699.18，下文称“Herrick-Davis 1”；和Herrick-Davis，K.等，(1997)J.Neurochemistry 69(3)1138，下文称“Herrick-Davis-2”)。Casey描述了在大鼠5-HT2A受体的位置322将半胱氨酸残基突变成赖氨酸(C322K)、谷氨酰胺(C322Q)和精氨酸(C322R)，它们已被报道导致组成型活化。Herrick-Davis 1和Herrick-Davis 2描述了在大鼠5-HT2C受体的位置312将丝氨酸残基突变成苯丙氨酸(S312F)和赖氨酸(S312K)，它们已被报道导致组成型活化。
发明概述本发明涉及非内源性、组成型活化形式的人5-HT2A和人5-HT2C受体的小分子调节剂，所述小分子调节剂优先选择5-HT2A受体，和更优选在受体上具有反激活剂特征。
附图简述下列附图中，粗字体表示非内源性、组成型活化的受体中相对于对应的内源性受体突变所处的位置。
图1显示G蛋白偶联受体的一般结构，数字标明了跨膜螺旋、胞内环以及胞外环。
图2示意典型G蛋白偶联受体活性和非活性的状态以及活性状态与第二信使转导途径的连接。
图3提供从体内分析化合物116082在1-(2，5-二甲氧基-4-碘代苯基)-2-氨基丙烷(“DOI”)抑制研究(精细活动、移动和动物后腿站立结果测定)中的剂量-反应结果的总结图。116082在DOI用前30分钟施用。DOI施用后10分钟将动物放置在运动活性测定笼中，并测定活动10分钟。呈现的结果是处于运动活性测定仪中10分钟所计数的总活动量。
图4提供从体内分析化合物116081在DOI抑制研究(精细活动、移动和动物后腿站立结果测定)中剂量-反应结果的总结图。116081在DOI用前30分钟施用。DOI施用后10分钟将动物放置在运动活性测定笼中，并测定活性10分钟。呈现的结果是处于运动活性测定仪中10分钟所计数的总活性。
图5提供从体内分析化合物116082在僵住症肌肉僵硬度研究中结果的总结图。116082(AR10、AR40和AR80mg/kg)和氟哌丁苯(Hal.0.8mg/kg)在大鼠棒僵住症测试中进行比较。测试化合物在测试前60分钟腹膜内施用。两个前肢保持在棒上的时间记载下来，最长30秒。数值代表3个连续测定的平均值(平均值±SEM，n＝6-8只/组)。*P＜0.05对赋形剂，斯氏t检验。
图6提供在大鼠DOI抑制研究中口服施用116082和116081效果的总结图。数值代表平均值±SEM(n＝6只/组)。#P＜0.05对赋形剂/赋形剂，*P＜0.05对赋形剂/DOI，斯氏t检验。
图7提供采用116081(7A)和氯氮平(7B)逆转MK-801-诱导的功能亢进的总结图。116081和氯氮平剂量依赖性地衰减了MK801-诱导的功能亢进，正如由MK-801-治疗的动物中走动减少所测定。116081在剂量为25μmol/kg(10mg/kg)时产生了显著的MK-801效果的反转。呈现的结果是在施用MK-801后接触运动活性测定仪120分钟所计数的总活动量。Dunnett氏检验(n＝6-8只/组)后，采用ANOVA对数据(平均值±SEM)进行分析。
图8表示本发明所使用的优选载体，pCMV。
定义涉及受体的科学文献谈及对受体具有各种效应的配体时采用了一些术语。为了清楚和前后一致，在本专利申请文件中将由始至终使用下列定义。在这些定义与这些词语的其他定义冲突时，选择下列定义激活剂 系指激活细胞内反应的成分，此时它们结合受体或促进GTP与膜结合。
在此应用的氨基酸缩写列于下表1表1
部分激活剂 系指这样的成分，它们与受体结合时，激活细胞内反应或者促进GTP与膜结合的程度低于激活剂。
拮抗剂 系指这样的成分，它和激活剂在同一位点与受体竞争性地结合，但不激活由受体的活性形式引起的细胞内反应，并可因此抑制由激活剂或部分激活剂促进的细胞内反应。拮抗剂在没有激活剂或部分激活剂的情形下并不削弱基本细胞内反应。
候选化合物 系指经受筛选技术的分子(例如但不限于化学化合物)。
组合物 是指至少包含两种化合物或两种组分的物质；例如但不限于药物组合物是组合物。
化合物效应 系指一个化合物抑制或者刺激受体功能的能力的量度，它与受体结合亲和力相对。
被组成型活化的受体 系指易受组成型受体活化的受体。
组成型受体活化 系指不利用内源配体或其化学等价物与受体结合的方法而使受体稳定在活性状态下。
接触 系指把至少两种成分放在一起，无论是在体外系统还是在体内系统中。
内源 系指由哺乳动物天然产生的物质。关于内源的受体(例如但不限于)系指由哺乳动物(例如但不限于人类)或病毒天然产生的物质。与之相对比，术语“非内源”在本文中系指不是由哺乳动物(例如但不限于人类)或病毒天然产生的。例如但不限于，在其内源形式下并非组成型活化的受体，当对之进行操作而使之组成型活化时，此受体被最优选地指称为“非内源的被组成型活化的受体”。这两个术语都可被用来描述“体内”和“体外”系统。在筛选过程中，内源的或非内源的受体可被用于体外筛选系统，这也只作为例证而不是限制。作为进一步的例子而不是限制，当操作哺乳动物的基因组以包括非内源组成型活化受体时，可以通过体内系统筛选候选化合物。
抑制 与术语“反应”相联系，系指在一个化合物存在时一个反应被降低或阻止，这正好与该化合物不存在时相反。
反激活剂 系指与内源受体结合的成分或与组成型活化形式受体结合的成分，该成分将由活性内源形式的受体引发的基本细胞内反应抑制至正常基础水平以下，该正常基础水平是在没有内源配体、激活剂或部分激活剂的情况下观察的，或者它们降低GTP与膜的结合。与不存在反激活剂的基本反应相比，优选在反激活剂存在下基本细胞内反应被抑制至少30％，更优选被抑制至少50％，最优选被抑制75％。在生物学上，“GPR6反激活剂”系指可以通过其他因素而在体内估测的成分，这些其他因素系指除测定所述成分与GPR6反应之外的因素，例如当所述成分在体内与哺乳动物的GPR6反应时，可以观察到在接触GPR6和GPR6反激活剂的24小时至48小时之内，该哺乳动物的体重降低至少5％。
配体 系指对内源性天然产生的受体特异的内源性天然产生的分子。
药物组合物 系指包括至少一种活性成分的组合物，借此可以研究该组合物在哺乳动物(例如但不限于人体)中特定的效果。本领域的那些普通技术人员将能够理解和正确评价那些适于确定活性成分是否具有技术人员所需要的预期效果的技术。
刺激 与术语“反应”相联系，系指当一种化合物存在时比当它不存在时反应增强。详细描述I.特别优选的突变为方便起见，关于非内源性组成型活化的人5-HT2A和5-HT2C受体的序列信息参照表2所列出的标识符。
表2
正如下文将详细讨论，把与Casey报道的突变(C322K)相类似的突变在人5-HT2A受体中采用并在本发明称为AP-2。但是，AP-2不能导致足以允许利用筛选技术的组成型活化。
II.一般G蛋白偶联受体的筛选分析技术当一种G蛋白受体变为组成型活化时，它与G蛋白(例如Gq、Gs、Gi、Go)偶联并刺激GTP与G蛋白结合。接着，G蛋白作为GTP酶慢慢地把GTP水解为GDP，受体在正常情况下借此失活。然而，组成型活化的受体继续把GDP转化为GTP。GTP非可水解的类似物[35S]GTPγS，可被用来监测与表达组成型活化受体的膜的结合。据报道，[35S]GTPγS可被用来监测在配体存在或不存在的情形下G蛋白与膜的偶联。这种监测的一个例证，与本领域中著名的和已知的其他例证一起，由Traynor和Nahorski在1995年所报道。通常，本测定系统的一个优选的应用是为了初步筛选候选化合物，因为本系统对所有蛋白-偶联受体一般可行，而不考虑与受体的细胞内结构域相互作用的那一种特别的G蛋白。
III.G蛋白偶联受体位点筛选分析技术的确认一旦应用“一般”G蛋白偶联的受体测定方法(即筛选是激活剂、部分激活剂或反激活剂的化合物的方法)识别出候选化合物，优选进一步筛选以确认在受体位点发生作用的化合物。例如，应用“一般”测定方法识别的化合物可以不与受体结合，但也可以仅仅使细胞内结构域与G蛋白“解偶联”。因此，通过筛选那些使用激活剂和/或拮抗剂竞争性结合测定中的“一般”测定方法而识别的候选化合物，提供了选择过程的进一步精确性。
麦角酸二乙酰胺(LSD)是熟知的5-HT2A和5-HT2C受体的激动剂，而美舒麦角是熟知的5-HT2C受体的拮抗剂。因此，在最优选的实施方案中，把激活剂(LSD)和/或拮抗剂(美舒麦角)竞争性结合分析用来进一步筛选那些选自“一般”分析的化合物用于确认5-HT受体结合。
IV.特异G蛋白分析技术本领域接受的生理学介导的用于5-HT2A和5-HT2C受体的途径是通过Gq进行的。IP3的胞内积累能用于确认这些类型的Gq偶联受体的组成型活化(参见Herrick-Davis-1)。结果，“IP3积累”分析能用于进一步筛选那些选自激活剂和/或拮抗剂竞争性分析的化合物。
V.药物组合物被选择进行进一步开发的候选化合物可应用本领域周知的技术配制成药物组合物。适当的药物可接受的载体是本领域中的人员可得的；例如，参见Remington’s Pharmaceuctical Sciences，第16版，1980年，Mack Publishing Co.(Oslo等人编写)。
实施例下面提供的实施例的目的是要阐明而不是限制本发明。下文中所描述的筛选技术的具体顺序是为了说明的方便而排列。虽然在此公开了特定的核酸序列和氨基酸序列，本领域的普通技术人员有能力对这些序列进行修饰，并且同时可以获得与下面报告相同或实质上相似的结果。等价、非内源性、组成型活化的人5-HT受体序列意图包括那些与已公开序列比较具有85％同源性的序列，更优选具有90％同源性的序列，以及最优选具有95％同源性的序列。实施例1非内源性、组成型活化的人5-HT受体5-HT2C和5-HT2A的产生A.组成型活性5-HT2C受体cDNA的构建1.内源性人5-HT2C编码内源性人5-HT2C受体的cDNA采用RT-PCR从人脑聚腺苷酸(poly-A+)RNA中获得。5′和3′引物衍生自5′和3′不翻译区域并包含下列序列5′-GACCTCGAGGTTGCTTAAGACTGAAGCA-3′(SEQ.ID.NO.1)，5′-ATTTCTAGACATATGTAGCTTGTACCGT-3′(SEQ.ID.NO.2)。
使用TaqPlusTM精确聚合酶(Stratagene)或rTthTM聚合酶(PerkinElmer)以及生产厂商提供的缓冲系统进行PCR，每个引物0.25μM，四种核苷酸每种0.2mM。循环条件为94℃1分钟、57℃1分钟以及72℃2分钟，循环30次。将1.5kb的PCR片段用XhoI和XbaI消化并亚克隆到pBluescript的SalI-XbaI位点上。
衍生的cDNA克隆全部测序，结果对应于发表的序列。
2.AP-1 cDNA将含有人5-HT2C受体第三个胞内环中S310K突变的cDNA(AP-1cDNA)通过采用编码所需突变的合成双链寡核苷酸替代含有氨基酸310的StyI限制性片段构建。所用的有义链序列具有以下序列5′-CTAGGGGCACCATGCAGGCTATCAACAATGAAAGAAAAGCTAAGAAAGTC-3′(SEQ.ID.NO.3)，所用的反义链具有如下序列5′-CAAGGACTTTCTTAGCTTTTCTTTCATTGTTGATAGCCTGCATGGTGCCC-3′(SEQ.ID.NO.4)。
B.组成型活性5-HT2A受体cDNA的构建1.内源性人5-HT2A编码内源性人5-HT2A受体的cDNA采用RT-PCR从人脑聚腺苷酸(poly-A+)RNA中获得。5′引物衍生自5′不翻译区域，带有XhoI限制性位点，序列如下5′-GACCTCGAGTCCTTCTACACCTCATC-3′(SEQ.ID.NO.5)，以及3′引物衍生自3′不翻译区域，含有XbaI位点，序列如下5′-TGCTCTAGATTCCAGATAGGTGAAAACTTG-3′(SEQ.ID.NO.6)。
使用TaqPlusTM精确聚合酶(Stratagene)或rTthTM聚合酶(PerkinElmer)以及生产厂商提供的缓冲系统进行PCR，每个引物0.25μM，四个核苷酸每种0.2mM。循环条件为94℃1分钟、57℃1分钟以及72℃2分钟，循环30次。将1.5kb的PCR片段用XbaI消化并亚克隆到pBluescript的Eco RV-XbaI位点上。
将所得的cDNA克隆全部测序后发现与公布的序列比较编码2个氨基酸变化。第一个变化是N-端胞外结构域中T25N突变和第二个变化是H452Y突变。这些变化可能表示序列的多态性而非PCR错误，因为具有2个相同突变的cDNA克隆衍生自2个独立PCR程序，使用的Taq聚合酶来自2个不同的厂商(TaqPlusTMStratagene和rTthTMPerkin Elmer)。
2.人5-HT2A(C322K；AP-2)含有第三个胞内环中点突变C322K的cDNA采用SphI限制性酶位点构建，该位点包含氨基酸322。对于PCR程序，使用含有C322K突变的引物5′-CAAAGAAAGTACTGGGCATCGTCTTCTTCCT-3′(SEQ.ID.NO.7)和如上SEQ.ID.NO.6所阐述的来自3′不翻译区域的引物。然后使用所得的PCR片段通过T4聚合酶平端的SphI位点以替代野生型5-HT2A cDNA的3′末端。使用pfu聚合酶(Stratagene)和厂商提供的缓冲系统进行PCR，并使用10％DMSO，每个引物0.25mM，四种核苷酸每种0.5mM。循环条件为94℃1分钟、60℃1分钟以及72℃1分钟，循环25次。
3.AP-3 cDNA人5-HT2AcDNA带有用对应的人5-HT2ccDNA替代的胞内环3(IC3)和胞质尾，其构建采用以PCR为基础的诱变。
(a)IC3环的替代人5-HT2AcDNA的IC3环首先用对应的人5-HT2CcDNA替换。进行2个单独的PCR程序从而产生2个片段，片段A和片段B，它们将5-HT2cIC3环融合到5-HT2A的跨膜6(TM6)上。将含有5-HT2cIC3和5-HT2ATM6的起始13bp的237bp的PCR片段即片段A采用以下引物进行扩增5′-CCGCTCGAGTACTGCGCCGACAAGCTTTGAT-3′(SEQ.ID.NO.8)5′-CGATGCCCAGCACTTTCGAAGCTTTTCTTTCATTGTTG -3′(SEQ.ID.NO.9)所用模板为人5-HT2CcDNA。
将含5-HT2CIC3 C末端13bp及起始于TM6起点的5-HT2AC末端的529bp PCR产物用如下引物进行扩增5′-AAAAGCTTCGAAAGTGCTGGGCATCGTCTTCTTCCT-3′(SEQ IDNO10)5′-TGCTCTAGATTCCAGATAGGTGAAAACTTG-3′(SEQ ID NO11)所用模板为人5-HT2AcDNA。
采用片段A和片段B作为共同模板以及SEQ.ID.NO8和SEQ.ID.NO11(注意SEQ.ID.NO6和11的序列相同)作为引物进行第二轮PCR。所得740bp的PCR片段即片段C含有人5-HT2C的IC3环，其通过人5-HT2A的胞质尾末端融合到TM6中。使用pfuTM聚合酶(Stratagene)和厂商提供的缓冲系统进行PCR，并使用10％DMSO，每个引物0.25mM，四种核苷酸每种0.5mM。循环条件为94℃1分钟、57℃(第一轮PCR)或60℃(第二轮PCR)1分钟以及72℃1分钟(第一轮PCR)或90秒(第二轮PCR)，循环25次。
为生成包含人5-HT2A TM5和5-HT2C的IC3环之间的融合接点的PCR片段，使用4个引物。2个外部引物衍生自人5-HT2A，具有以下序列5′-CGTGTCTCTCCTTACTTCA-3′(SEQ.ID.NO.12)所用的另一引物为SEQ.ID.NO6(参见上述有关SEQ.ID.NO6和11的注释)。所使用的第一个内部引物是含有5-HT2CIC3起始13bp的反义链，所述起始13bp后面跟着衍生自5-HT2ATM5的末端23bp5′TCGGCGCAGTACTTTGATAGTTAGAAAGTAGGTGAT-3′(SEQ.ID.NO.13)。
第二个内部引物是含有衍生自5-HT2ATM5的末端14bp的有义链，所述末端14bp后面跟着衍生自5-HT2CIC3的起始24bp5′TTCTAACTATCAAAGTACTGCGCCGACAACCTTTGATG -3′(SEQ.ID.NO.14)。
使用内源性人5-HT2A和共同模板片段C在50ml反应体积中进行PCR。所述50ml反应液含有1×pfu缓冲液、10％DMSO、四种核苷酸每种0.5mM、每个外部引物(SEQ.ID.NO11和12)0.25mM、每个内部引物(SEQ.ID.NO13和14)0.06mM以及1.9单位的pfu聚合酶(Stratagene)。循环条件为94℃1分钟、52℃1分钟以及72℃2分钟10秒，循环25次。然后将1.3kb的PCR产物进行凝胶纯化并用PstI和Eco RI消化。把所得1kb的PstI-Eco RI片段用于替换内源性人5-HT2A序列中的对应片段以生成编码5-HT2CIC3环的突变5-HT2A序列。
(b)胞质尾的替代为了用5-HT2C的胞质尾替换5-HT2A的胞质尾，PCR采用含有内源性人5-HT2ATM7的C末端22bp后面跟着内源性人5-HT2C胞质尾的起始21bp的有义引物进行5′-TTCAGCAGTCAACCCACTAGTCTATACTCTGTTCAACAAAATT-3′(SEQ.ID.NO.15)，反义引物衍生自内源性人5-HT2C的3′不翻译区域5′-ATTTCTAGACATATGTAGCTTGTACCGT-3′(SEQ.ID.NO.16)。
所得PCR片段即片段D含有与内源性人5-HT2C的胞质尾相融合的内源性人5-HT2ATM7的最后22bp。使用片段D进行第二轮PCR，共同模板为内源性人5-HT2A，其先用AccI消化以避免不希望的扩增。所用反义引物为SEQ.ID.NO16(SEQ.ID.NO16和2的序列相同，并且所用的有义引物衍生自内源性人5-HT2A5′-ATCACCTACTTTCTAACTA-3′(SEQ.ID.NO.17)。
除退火温度48℃以及延伸时间90秒以外，PCT条件如实施例183(a)中第一轮PCR所阐述。所得710bp的PCR产物用ApaI和XbaI消化并用于替代(a)内源性人5-HT2A或(b)带有2C IC3的5-HT2A的对应ApaI-XbaI片段，从而分别生成(a)带有内源性人5-HT2C胞质尾的内源性人5-HT2A和(b)AP-3。
4.AP-4 cDNA该突变的产生是将内源性人5-HT2A区域，从氨基酸247，Pro246紧后面的TM5的中部到氨基酸337，Pro338紧前面的TM6的中部，替代为AP-1 cDNA的对应区域。为方便起见，TM5中的连接点称为“2A-2C连接”，而TM6中的连接点称为“2C-2A连接”。
生成包含所需杂合连接的三个PCR片段。以内源性人5-HT2A为模板通过PCR生成含有TM5中的2A-2C连接的561bp的5′片段，以SEQ.ID.NO12为有义引物，反义引物衍生自后面跟着20bp的5-HT2A序列的5-HT2C的13bp片段5′-CCATAATCGTCAGGGGAATGAAAAATGACACAA -3′(SEQ.ID.NO.18)。
323bp的中部片段含有内源性人5-HT2C序列，该序列衍生自TM5的中部到TM6的中部，侧翼为来自2A-2C连接和2C-2A连接的13bp的5-HT2A序列。该中部片段的生成是以AP-1 cDNA为模板，有义引物含有13bp的5-HT2A，其后面跟着横跨2A-2C连接的20bp的5-HT2C序列，该引物具有以下序列5′-ATTTTTCATTCCCCTGACGATTATGGTGATTAC-3′(SEQ.ID.NO.19)；反义引物含有13bp 5-HT2A，其后面跟着横跨2C-2A连接的20bp5-HT2C序列，该反义引物具有以下序列5′-TGATGAAGAAAGGGCACCACATGATCAGAAACA-3′(SEQ.ID.NO.20)。
含有2C-2A连接的487bp的3′片段的生成是通过PCR，以内源性人5-HT2A为模板，有义引物具有下列来自2C-2A连接的序列5′-GATCATGTGGTGCCCTTTCTTCATCACAAACAT -3′(SEQ.ID.NO.21)以及反义引物是SEQ.ID.NO6(参见上述有关SEQ.ID.NO6和11的注释)。
分别进行两个第二轮PCR反应以便连接5′和中部片段(5′M PCR)以及中部和3′片段(M3′PCR)。
所用的5′M PCR共同模板是如上所述的5′和中部PCR片段，有义引物为SEQ.ID.NO12和反义引物为SEQ.ID.NO20。5′M PCR程序导致857bp的PCR片段。
M3′PCR采用如上所述的中部和M3′PCR片段作为共同模板，SEQ.ID.NO19作为有义引物，而SEQ.ID.NO6(参见上述有关SEQ.ID.NO6和11的注释)作为反义引物，并产生784bp的扩增产物。以来自第二轮PCR的857bp和784bp片段作为模板，并以SEQ.ID.NO12和SEQ.ID.NO6(参见上述有关SEQ.ID.NO6和11的注释)分别作为有义和反义引物进行最后一轮PCR。从最后一轮PCR得到的1.32kb扩增产物用PstI和Eco RI消化。将所得1kb的PstI-Eco RI片段用于替代内源性人5-HT2A的对应片段，从而产生具有5-HT2CC310K/IC3的突变人5-HT2A。将AP3的Apa I-Xba片段用于替代具有5-HT2CC310K/IC3的突变5-HT2A中的对应片段以产生AP4。实施例2受体表达A.pCMV尽管本领域中的技术人员可获得多种表达载体，但为了利用本发明所讨论的内源性和非内源性受体，最优选使用的载体是pCMV。该载体根据布达佩斯条约为专利程序目的对微生物保藏的国际识别的规定于1998年10月13日保藏在美国典型培养物保藏中心(ATCC)(10801University Blvd.，Manassas，VA 20110-2209 USA)。该DNA由ATCC测试并证明存活。ATCC已将下列保藏号分配给pCMVATCC#203351。参见图8。
B.转染程序对于一般分析([35S]GTPγS；实施例3)和拮抗剂结合分析(美舒麦角；实施例4)，采用下列方案实现COS-7或297T细胞转染。
第一天，将5×106个COS-7细胞或1×107个293T细胞接种到150mm的培养板上。第二天，准备两支反应试管(比例是每板用于一支试管)通过将20μg DNA(例如pCMV载体；GPR6 cDNA的pCMV载体；GPR6融合蛋白的pCMV载体)在1.2ml无血清的DMEM(IrvineScientific，Irvine，CA)中混合来准备试管A；通过将120μl脂转染胺试剂(Gibco BRL)在1.2ml无血清DMEM中混合来准备试管B。把试管A和B翻转混合(几次)，然后在室温下温育30-45分钟。所得混合物被称为“转染混合物”。培养板上的293细胞用1X PBS洗涤，然后加入10ml无血清的DMEM。把2.4ml转染混合物加入到细胞中去，然后在37℃/5％CO2下温育4小时。接着通过抽吸移去转染混合物，然后加入25ml的DMEM/10％胎牛血清。接着细胞在37℃/5％CO2温育。温育72小时后收获细胞并用来进行分析。实施例3方案GTP膜结合闪烁邻近测试法应用[35S]GTPγS结合测定组成型活化的优点是(a)[35S]GTPγS的结合对所有G蛋白偶联受体是普遍适用的；(b)[35S]GTPγS的结合邻近细胞膜表面，在此处较少可能遇到影响细胞内级联反应的分子。优选使用GPCR融合蛋白。此试验利用G蛋白偶联受体刺激[35S]GTPγS与表达相关受体的细胞膜结合的能力。因此，本测定可用于在所公开的5-HT受体上直接筛选化合物。
一种闪烁邻近(scintillation proximity)实验被用于监测[35S]GTPγS与表达(例如)COS细胞中所表达的内源性人5-HT2C受体的细胞膜的结合。简言之，一种优选的实验程序是将检测物在pH 7.4的20mMHEPES以及其中含有0.3nM的[35S]GTPγS和12.5μg膜蛋白和1μMGDP的结合缓冲液(100mM NaCI和10mM MgCl2)中温育30分钟。然后将测试培养板在室温下以4000rpm离心15分钟，随后抽吸并在闪烁计数器上计数。5-HT作为内源性配体活化5-HT2C受体，以浓度依赖的方式刺激[35S]GTPγS与膜的结合(数据未显示)。经刺激的结合能被30μM的米安色林完全抑制，米安色林为一种化合物，被视为传统的5-HT2C拮抗剂，但也被知晓为5-HT2C反激活剂(数据未显示)。
虽然此分析测定激活剂诱导的[35S]GTPγS与膜的结合并通常能用来测定受体的组成型活性，但是当前麦胚凝集素珠的耗费可能是昂贵的。较少耗费但同等适用的替代物也满足大规模筛选的需要。闪光板和WallacTM闪烁条可用于设计高通量的[35S]GTPγS结合分析。该技术使得人们能监测氚化的配体与受体的结合，并同时监测通过[35S]GTPγS结合的功效。这是可能的，因为WallacTMβ计数器能转换能量窗来分析氚和35S标记的探针。
该分析也可用作其他类型膜活化作用的检测，该作用导致受体活化。例如，此分析可用于监测各种受体(包括G蛋白偶联受体和酪氨酸激酶受体)的32P磷酸化作用。当膜离心至孔的底部时，结合的[35S]GTPγS受体或32P-磷酸化的受体将活化包被在孔上的闪烁体。使用Scinti条(WallacTM)显示该原理。另外，此分析利用放射性标记配体可用作测定与受体结合的配体。以相似方式，放射性标记的结合配体离心至孔的底部并活化闪烁体。[35S]GTPγS分析结果与以传统受体的第二信使分析获得的结果平行。
在该分析中，当米安色林抑制此反应时，5-HT刺激[35S]GTPγS与内源性人5-HT2C受体的结合；进一步，米安色林通过抑制[35S]GTPγS与表达内源性人5-HT2C受体的膜的基础组成型结合，充当部分反激活剂(数据未显示)。在此分析中，在无GDP的情况下应没有激活剂反应，这是因为没有GDP存在来交换[35S]GTPγS。该分析系统能用来显示天然5-HT2C受体的反应，并且也用来测定其他受体的组成型活化。
使用这一测定法，观察到[35S]GTPγS与从仅表达对照载体的293T细胞中所制备的膜、天然5-HT2C受体或AP-1受体的结合增强。在实验中所使用的总蛋白浓度影响[35S]GTPγS与每个受体结合的总量。在转染的pCMV与组成型活化的突变受体之间的c.p.m差异从蛋白浓度10μg/孔时的大约1000c.p.m提高至蛋白浓度75μg/孔时的大约6-8,000c.p.m。
AP-1受体显示最高水平的组成型活化，野生型受体跟随其后也显示了高于基础线的增强的[35S]GTPγS结合。这与内源性人5-HT2C受体在没有5HT的刺激(实施例5)下积累胞内IP3的能力一致，也与公布的数据一致，这些数据声称内源性人5-HT2C受体具有高的天然基础活性。因此，AP-1受体显示组成型活性可通过在膜界面由邻近的[35S]GTPγS结合作用来测定。实施例4方案5HT受体激活剂/拮抗剂竞争性结合分析从转染的COS-7细胞(参见实施例2)中制备膜的方法采用在20mMHEPES和10mM EDTA，pH7.4中匀浆并49000×g离心15分钟。沉淀重悬浮于20mM HEPES和0.1mM EDTA，pH7.4中，并使用polytron匀浆机(Brinkman)5000rpm下匀浆10秒钟，然后49000×g离心15分钟。将终沉淀重悬浮于20mM HEPES和10mM MgCl2，pH7.4中，并使用polytron匀浆机(Brinkman)5000rpm下匀浆10秒钟。
在96孔板以200μl体积一式三份进行分析。分析缓冲液(20mMHEPES和10mM MgCl2，pH7.4)用于稀释膜、3H-LSD、3H-美舒麦角、5-HT(用于定义非特异对LSD结合)和米安色林(用于定义非特异对美舒麦角结合)。最终分析浓缩物由1nM3H-LSD或1nM3H-美舒麦角、50μg细胞膜蛋白和100μm 5-HT或米安色林构成。对于LSD分析，在37℃温育1小时，而对于美舒麦角分析，在室温下温育1小时。分析终止使用Skatron细胞收集器以冰冷的结合缓冲液快速过滤通过Wallac Filtermat B型。用Wallac 1205 BctaPlate计数器测定放射性活性。实施例5方案胞内IP3积累分析对于IP3积累分析，采用与实施例2中所阐述的方案不同的转染方案。在下列实施例中，第1-3天所使用的方案如下所述与指明的条件稍有不同；但第4天的方案所有条件相同。
A.COS-7和293细胞第一天，将COS-7细胞或293细胞涂抹在24孔板上，通常分别为1×105细胞/孔或2×105细胞/孔。第二天，首先在50μl无血清的DMEM/孔中混合0.25ug DNA(参见实施例2)，然后在50μl无血清的DMEM/孔中加入2μl脂质转染胺试剂进行细胞转染。将溶液(“转染介质”)轻轻混合后室温下温育15-30分钟。用0.5ml的PBS洗涤细胞，然后将400μl无血清的介质与转染介质混合并加入到细胞中。接着将细胞在37℃/5％CO2下温育3-4小时。然后将转染介质移开并用1ml/孔的正常生长介质替代。第三天，将介质移开，并用0.5ml的PBS洗涤细胞。然后将0.5ml的无肌醇/无血清介质(GIBCO BRL)加入到每个含有0.25μCi的3H-肌醇/孔的孔中，并将细胞在37℃/5％CO2下温育16-18小时过夜。方案A。
B.293细胞第一天，将每150mm平板的1×107个293细胞铺平板。第二天，准备2个反应管(下述每个管的比例按照每一平板描述)管A的准备是将20μg DNA(如pCMV载体、pCMV载体AP-1cDNA等)混合到1.2ml的无血清DMEM(Irvine Scientific，Irvine，CA)中；管B的准备是将120μl的脂质转染胺试剂(Gibco BRL)混合到1.2ml的无血清DMEM中。然后将管A和管B颠倒混合(数次)，接着室温下温育30-45分钟。此混合物称为“转染混合物”。铺板的293细胞用1×PBS洗涤，然后加入10ml的无血清DMEM。将2.4ml的转染混合物加入到细胞中，继续在37℃/5％CO2下温育4小时。第三天，将细胞用胰蛋白酶消化并计数，随后铺1×106个细胞/孔(聚D-赖氨酸处理的12孔平板)。细胞允许附着到孔上，然后用1×PBS洗涤一次。其后，将1ml无肌醇的DMEM中的0.5μCi3H-肌醇加入到每孔中。方案B。
第四天，将细胞用0.5ml PBS洗涤，然后加入0.45ml的分析介质，该介质包含无肌醇/无血清介质、10μM巴吉林、10mM氯化锂，或加入0.4ml分析介质和50μl的10×酮色林(ket)至终浓度10μM。然后将细胞在37℃下温育30分钟。用0.5ml PBS洗涤细胞，每孔加入200μl新鲜/冰冷的终止溶液(1M KOH、18mM硼酸钠、3.8mM EDTA)。将溶液放置于冰上5-10分钟或直到细胞裂解，然后用200μl的新鲜/冰冷的中和溶液(7.5％HCl)中和。将裂解液转移到1.5ml的微离心管中，并每管加入1ml的氯仿/甲醇(1∶2)。将溶液旋涡震荡15秒，将上层施用到Biorad AG1-X8阴离子交换树脂(100-200目)。用水洗涤树脂并将0.9ml的上层装到柱子中。该柱子用10ml的5mM肌醇和10ml的5mM硼酸钠/60mM甲酸钠洗涤。将肌醇三磷酸酯用2ml的0.1M甲酸/1M甲酸铵洗脱到含有10ml闪烁混合物的闪烁瓶中。柱子用10ml的0.1M甲酸/3M甲酸铵洗涤再生，并用dd H2O冲洗两次，然后室温下储存于水中。结果下文讨论。实施例7抗非内源性、组成型活化的人5-HT受体AP-1的候选化合物的筛选大约5500个候选化合物(Tripos，Inc.，St.Louis，MO)采用实施例3的分析方案(用AP-1突变受体)作为抗所述受体的反激活剂进行筛选鉴定，对于此分析，建立至少50％抑制的任选取舍点用于鉴定反激活剂。这些化合物中大约有120个在10μM候选化合物时显示至少50％抑制[35S]GTPγS结合(数据未显示)。实施例8选定化合物的筛选以确认受体结合性AP-1采用实施例4的分析方案(美舒麦角)和AP-1突变受体对来自实施例7中所鉴定的候选化合物进行筛选。测定IC50(nM)值；实施例7的将近120个化合物中的5个经测定具有有力的受体结合亲和性。结果总结在表4中。
表4
实施例9a一般筛选范例临床前候选先导化合物的筛选为直接鉴定人5HT2A/5HT2C受体反激活剂而设计的“初级”筛选由基于膜的GTPγS结合分析组成，该分析利用从AP-1人受体瞬时转染的COS-7细胞中制备的细胞膜。直接鉴定成在GTPγS结合中抑制受体介导的增加程度大于50-75％(任选取舍点的值)的候选化合物(10μM终分析浓度)被视为活性“匹配物”(hit)。然后将初级分析采样数以相同分析再测试以再确认它们的反激活剂活性。如果初级分析采样数再确认为活性(50％或更高的抑制)，因此直接鉴定为例如反激活剂，可利用二种方法中的一种(a)能产生所谓的“定向库”，即额外的候选化合物在经再确认的采样数的基础上合成(适合于例如化合物特征的改进)，由此评价定向化合物库用于与和突变5HT2C(AP-1)和内源性5HT2A受体结合的放射性配体竞争的能力，或(b)然后评价再确认的采样数用于与放射性配体竞争与突变5HT2C(AP-1)和内源性5HT2A受体结合的能力。因此，当使用方法(a)时，因为这些定向库的候选化合物是基于下述化合物的结构，所述化合物从基于膜GTPγS结合分析中直接鉴定，定向库化合物在基于膜的GTPγS结合分析中不进行再测试，而是通过放射性配体结合分析确认。放射性配体结合分析测试起始在测试化合物浓度10μM时一式三份进行，并且如果化合物抑制放射性标记的结合达50％或更多，接着以8个浓度竞争曲线进行分析以测定Ki值。次级分析评价中的最后步骤是测定测试化合物是否能够抑制AP-3受体介导的肌醇磷酸酯(例如IP3)积累。该最终分析确认直接鉴定的化合物保持了反激活剂特性。实施例9b组成型活化的人5HT2C受体(AP-1)介导促进GTPγS与COS7膜结合本方案基本上与上述实施例6中所阐述的相同。
初级筛选分析测定GTPγS与膜结合，该膜从以人突变5HT2C受体(AP-1)瞬时转染的COS7细胞中制备，将所述初级筛选分析用于直接鉴定筛选库(Tripos，Inc.)中的反激活剂。候选化合物的筛选在总分析体积200μl中采用闪烁体包被的Wallac ScintistripTM板进行。初级分析由下列化学物组成(在标记的终分析浓度下)20mM HEPES、pH7.4、100mM NaCl、20mM MgCl2、0.2％皂苷、0.2mM抗坏血酸、1μMGDP、0.3nM GTPγ35S以及12.5μg上述定义的膜。在环境室温下温育60分钟。结合分析温育由分析板4000rpm离心15分钟终止，接着快速吸出反应混合物并用Wallac MicroBetaTM闪烁计数器计数。
初级筛选候选化合物起始涉及在单一式份、终分析浓度为10μM的候选化合物中测试每分析板72个测试化合物(采用96孔板)。每个板总16个孔用于8个浓度的氯氮平(确认的5HT2C/2A反激活剂)剂量反应曲线(每个浓度重复测定二次)。最终，每个板的总共5个分析孔用于定义阴性对照(表达AP-1受体的膜，不加入候选化合物)，并且每个板的3个孔用于定义阳性对照(没有AP-1受体的细胞膜)。
再确认实验涉及以上述相同分析重新测试候选化合物，除了候选化合物以一式三份进行评价，因此每96孔分析板允许评价24个化合物。与初级分析板相似，8个浓度的氯氮平剂量反应曲线(每个浓度重复测定二份)，以及相同阴性和阳性对照孔也包括在每个96孔板内。实施例9c(1)对直接鉴定的化合物突变人5HT2C受体(AP-1)的竞争性研究采用标准96孔微量滴定板在总分析体积200μl中进行放射性结合竞争性实验。终分析成分由分析缓冲液(20mM HEPES和10mMMgCl2)、1nM[3H]美舒麦角和50μg的膜(带有如上所定义AP-1的COS7)所组成。非特异的[3H]美舒麦角结合限定在100μM米安色林存在下。37℃下温育1小时。受体结合的放射性配体通过在Wallac FiltermatTMB型过滤膜上快速过滤分析混合物与游离放射性配体分开，然后使用SkatronTM细胞收集器用冰冷分析缓冲液洗涤。放射性活性采用Wallac1205 BetaPlateTM计数器计数。每个分析板含有5个阴性对照孔(表达受体的膜，不加入候选化合物)和3个阳性对照孔(每个含有100μM米安色林)。对一种浓度测试来说，将候选化合物用分析缓冲液稀释并在终浓度10μM下筛选，一式三份。对于IC50测定，将候选化合物用分析缓冲液稀释并将8个不同浓度进行评价，一式三份。对两个分析来说，为8个浓度米安色林剂量反应曲线评价指定总共16个孔。实施例9c(2)竞争性研究野生型人5HT2A受体采用标准96孔微量滴定板在总分析体积200μ1中进行放射性结合竞争性实验。终分析成分包括分析缓冲液(20mM HEPES和10mMMgCl2)、1nM[3H]LSD和50μg的前述膜(带有AP-1的COS7)。非特异的[3H]LSD结合限定在100μM 5-HT存在下。37℃下温育1小时。受体结合的放射性配体通过在Wallac FiltermatTMB型过滤膜上快速过滤分析混合物与游离放射性配体分开，然后使用SkatronTM细胞收集器用冰冷分析缓冲液洗涤。放射性活性采用Wallac 1205 BetaPlateTM计数器计数。每个分析板含有5个阴性对照孔(表达受体的膜，不加入候选化合物)和3个阳性对照孔(每个含有100μM米安色林)。对一种浓度测试来说，将候选化合物用分析缓冲液稀释并在终浓度10μM下筛选，一式三份。对于IC50测定，将候选化合物用分析缓冲液稀释并将8个不同浓度进行评价，一式三份。对两个分析来说，为8个浓度5-羟色胺剂量反应曲线评价指定总共16个孔。实施例9d受体介导的肌醇磷酸酯积累将实施例9a-9c中分析鉴定的候选化合物进行评价用于肌醇磷酸酯积累，按照实施例5的方案(表达人突变5HT2A受体AP-3的COS7细胞)，修改如下管A的准备是将16μg DNA(如pCMV载体、pCMV载体AP-1 cDNA等)混合到1.0ml的无血清DMEM(Irvine Scientific，Irvine，CA)中；管B的准备是将60μl的脂质转染胺试剂(Gibco BRL)混合到1.0ml的无血清DMEM中。然后将管A和管B颠倒混合(数次)，接着室温下温育30分钟。此混合物称为“转染混合物”。铺板的293细胞用10ml无血清DMEM洗涤，然后加入11ml的无血清DMEM。将2.0ml的转染混合物加入到细胞中，继续在37℃/5％CO2下温育5小时。第三天，将细胞用胰蛋白酶消化并计数，随后铺1×106个细胞/孔(12孔平板)。细胞允许附着到孔上8小时，然后用1×PBS洗涤一次。其后，将1ml无肌醇的DMEM中的0.5μCi3H-肌醇加入到每孔中。
第四天，将细胞用1.5ml PBS洗涤，然后加入0.9ml的分析介质在37℃/5％CO2下5分钟，该介质包含无肌醇/无血清介质、10μM巴吉林、10mM氯化锂，随后加入100μl用相同物质稀释的候选化合物。然后将细胞在37℃下温育120分钟。用1.5ml PBS洗涤细胞，每孔加入200μl新鲜/冰冷的终止溶液(1M KOH、18mM硼酸钠、3.8mMEDTA)。将溶液放置于冰上5-10分钟或直到细胞裂解，然后用200μl的新鲜/冰冷的中和溶液(7.5％HCl)中和。将裂解液转移到1.5ml的微离心管中，并每管加入1ml的氯仿/甲醇(1∶2)。溶液旋涡震荡15秒，将上层施用到Biorad AG1-X8阴离子交换树脂(100-200目)。用水洗涤树脂并将0.9ml的上层装到柱子中。该柱子用10ml的5mM肌醇和10ml的5mM硼酸钠/60mM甲酸钠洗涤。将肌醇三磷酸酯用2ml 0.1M甲酸/1M甲酸铵洗脱到含有10ml闪烁混合物的闪烁瓶中。柱子用10ml 0.1M甲酸/3M甲酸铵洗涤再生，并用dd H2O冲洗两次，然后室温下储存于水中。
经过这轮分析后，IC50值小于10μM的候选化合物被视为潜在的先导化合物，可用于开发药物组合物。实施例10侯选化合物的筛选按照上文所述的程序，一个化合物(实施例8，参见上文)显示出如下结果
根据这些结果，化合物103487的结构活性分析提示3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯胺的一系列的衍生物将显示出与5-HT2A类似的活性和选择性。合成了3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯胺的一系列的衍生物。然后根据实施例9c(1)，9c(2)和9d所述的方案对这些直接的(″directed″)文库化合物(Tripos，Inc.)进行了分析。
具有5-HT2A受体活性的优选的一系列化合物可用作这些受体的反激活剂，这些化合物由下列通式(A)表示
其中W是F、Cl、Br、I、C1～8直链或支链烷基、C3～8环烷基、C4～9烷基环烷基、或C2～8链烯基；X是O或S或NR2；Y是NR3R4或(CH2)mR5或O(CH2)nR6m是包括0和4在内的0到4之间的整数；n是包括0和4在内的0到4之间的整数；Z是H、C1～8直链或支链烷基、C3～8环烷基、C4～9烷基环烷基、或C2～8链烯基；R1，R2，R3和R10各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C3～8环烷基、C4～9烷基环烷基、或C2～8链烯基；R4，R5，和R6各自独立地选自C1～8直链或支链烷基，C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基、或CH2芳基；其中在所述C1～8直链或支链烷基、C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基或CH2芳基中的每一结构部分可在任何位置被至多4个取代基任选取代，所述每一取代基各自独立地选自H，F，Cl，Br，I，R7，CF3，CF2R7，CF2CF2，CCl3，CCl2R7，CCl2CCl2R7，NR8R9，NR10COR7，NR10SO2R7，OR7，OCF3，OCF2R7，OCF2CF2R7，OCOR7，OSO2R7，OPO(OR7)2，SR7，SCF3，SCF2R7，SCF2CF2R7，SCOR7，SO3R7，SO2NR8R9，PO(OR7)3，PO(OR7)2R7，NO2，CN，CNR10(NR8R9)，CNR10(SR7)，COOR7，COSR7，CONR8R9，条件是当R4，R5，或R6含有在芳基环的至少两个相邻位置上被取代的芳基环时，则所述两个相邻位置可一起选自SCH2S、SCH2CH2S、OCH2O或OCH2CH2O以形成双环结构；R7是H，C1～8直链或支链烷基，C3～8环烷基、C4～9烷基环烷基、C2～8链烯基，芳基或烷基芳基；和R8和R9各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基、或CH2芳基；其中在所述C1～8直链或支链烷基、C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基或CH2芳基中的每一结构部分可在任何位置被至多4个取代基任选取代，所述每一取代基各自独立地选自F，Cl，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC5H11，SC6H11，SC6H13，，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，以及条件是当R8或R9中的一个或两者含有在芳基环的至少两个相邻位置上被取代的芳基环时，则所述两个相邻位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O，或OCH2CH2O以形成双环结构；或者R8和R9可一起形成5、6或7元环结构的一部分，其中所述结构是饱和的或不饱和的，进一步地所述的结构含有选自O、N或S的至多4个杂原子，并且再进一步地所述环结构中的每一结构部分在任意位置被至多4个取代基任选取代，所述取代基各自独立地选自F，Cl，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC5H11，SC6H11，SC6H13，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，以及条件是当R8和R9形成在芳基环的至少两个相邻的位置被取代的芳基环时，则所述的两个相邻位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O，或OCH2CH2O以形成双环结构。
芳基结构部分可以是5或6元芳族杂环(含有至多4个独立地选自N，O或S的杂原子)或不含杂原子的6元芳族环或多环；C1-8烷基的适当的例子包括(但不限于)甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，和叔丁基。
5或6元环结构部分包括(但不限于)苯基，呋喃基，噻吩基，咪唑基，吡啶基，吡唑基，噁唑基，异噁唑基，三唑基，吡唑基，四唑基，噻唑基，和异噻唑基。多环结构部分的例子包括但不限于萘基，苯并噻唑基，苯并呋喃基，苯并咪唑基，喹啉基，异喹啉基，吲哚基，喹喔啉基，喹唑啉基，和苯并噻吩基。
落入通式(A)范围的优选的化合物是那些其中Y＝NR3R4的如下所述的式(1)所示的化合物 其中X是O或S或NR2；Z是H或CH3；R2，R3和R10各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C3-8环烷基，C4-9烷基环烷基或C2～8链烯基；R11is H，F，Cl，Br，I，R7，CF3，CF2R7，CF2CF2，CCl3，CCl2R7，CCl2CCI2R7，NR8R9，NR10COR7，NR10SO2R7，OR7，OCF3，OCF2R7，OCF2CF2R7，OCOR7，OSO2R7，OPO(OR7)2，SR7，SCF3，SCF2R7，SCF2CF2R7，SCOR7，SO3R7，SO2NR8R9，PO(OR7)3，PO(OR7)2R7，NO2，CN，CNR10(NR8R9)，CNR10(SR7)，COOR7，COSR7，CONR8R9，条件是当与R11相邻的位置被取代时，则R11和所述的相邻位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O或OCH2CH2O以形成双环结构；
R7is H、C1-8直链或支链烷基、C3-8环烷基、C4-9烷基环烷基、C2-8链烯基、芳基或烷基芳基；R8和R9各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C2～8链烯基或环烷基，或烷基环烷基，或芳基或CH2芳基； 其中在所述C1～8直链或支链烷基、C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基或CH2芳基中的每一结构部分可在任何位置任选地被至多4个取代基取代，所述取代基独立地选自F，Cl，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC5H11，SC6H11，SC6H13，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，条件是当R8或R9中的一个含有在芳基环的至少两个相邻位置上被取代的芳基环时，则所述两个相邻的位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O或OCH2CH2O以形成双环结构；R12，R13，R14，和R15各自独立地选自F，Cl，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC5H11，SC6H11，SC6H13，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，以及条件是当R12，R13，R14，和R15中的任意两个相邻的位置被取代时，所述两个相邻的位置可进一步一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O或OCH2CH2O以形成双环结构；和条件是R12，R13，R14，和R15中至少有一个必须是H。落入式(1)所示化合物范围内的更优选的化合物是如下定义的化合物 其中X＝O或S；Z是H或CH3；R3和R10各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C3～8环烷基、C4～9烷基环烷基、或C2～8链烯基；R11是H，F，Cl，Br，I，R7，CF3，CCl3，NR8R9，NR10COR7，NR10SO2R7，OR7，OCF3，OCOR7，OSO2R7，SR7，SCF3，SCOR7，SO3R7，SO2NR8R9，NO2，CN，COOR7，COSR7，CONR8R9，条件是当与R11相邻的位置被取代时，则R11和所述的相邻位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O，或OCH2CH2O以形成双环结构；R7是H，C1～8直链或支链烷基，C3～8环烷基，C4～9烷基环烷基，C2～8链烯基，芳基或烷基芳基；R8和R9各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C2～8链烯基或环烷基，或烷基环烷基，或芳基或CH2芳基；其中在所述C1～8直链或支链烷基、C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基或CH2芳基中的每一结构部分可在任何位置被至多4个取代基任选取代，所述每一取代基各自独立地选自F，Cl，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC5H11，SC6H11，SC6H13，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，以及条件是当R8或R9中的一个含有在芳基环的至少两个相邻位置上被取代的芳基环时，则所述两个相邻位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O或OCH2CH2O以形成双环结构；R12，R13，R14和R15各自独立地选自F，Cl，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC5H11，SC6H11，SC6H13，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，以及条件是当R12，R13，R14和R15中的任意两个相邻的位置是被取代的时候，所述两个相邻的位置可一起进一步选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O，或OCH2CH2O以形成双环结构；和条件是R12，R13，R14和R15中至少两个必须是H。
通式(A)，式(1)所示的示例性的化合物说明如下。根据现已获得的活体内数据(如下文所述)，化合物116081和116082是特别优选的。
肌醇磷酸酯积累试验证明了被试化合物的活性。相对于对照的单一浓度的百分数和IC50的测定值都表明了活性。在下表中各栏中的符号具有下列含义IP3％对照该栏中的数值反映的是在IP积累试验中被试化合物是在10μM的一个浓度下被评估的。为进行这些试验，将所述化合物在不含肌醇但含10μM巴吉林和10mM LiCl的Dulbecco′s Eagle培养基中稀释，并在10μM的终试验浓度测试，重复三次。基于没加被试化合物的对照的值，计算出相对于的对照的百分数。
IP3AP-3 IC50nM该栏中的数值反映的是在IP积累试验中被试化合物是在几个不同的浓度下被评估的，从而可得出IC50值。此栏对应于上文的表中标明肌醇磷酸酯积累，AP-3，IC50值(μM)的那栏。
WT 5HT2ALSD IC50nM该栏中的数值反映的是采用LSD的竞争性结合试验。此栏对应于上文的表中标明竞争性结合，WT 5HT2A，([3H]LSD)，IC50值(μM)的那栏。
(注表中的短线“-”表示没有测定值)

符合式(1)中各参数定义的其他的化合物如下
实施例11活体内分析A.1-(2，5-二甲氧基-4-碘代苯基)-2-氨基丙烷(″DOI″)运动机能障碍分析116081和116082116082和116081在体内功能分析测验中的结果提示这一化合物展现出了选择性的5HT2A反激活剂特性。通过在大鼠中进行由Krebs-Thomson(Psychopharmacology，14069-74，1998)描述的DOI运动活性试验，进行活体内5-HT2受体拮抗剂的评估。
以0.3mg/kg的剂量外周给药致幻剂和5HT2激活剂DOI[1-(2，5-二甲氧基-4-碘代苯基)-2-氨基丙烷]通常在大鼠中产生运动机能障碍，表现出移动(即，行走和跑)、休息时身体的精细活动(即，修饰、舔)和后肢活动(即以后肢站立)下降。采用全自动的运动活性测定笼来评估运动功能。将大鼠放置在一标准的啮齿动物笼中，周围布满光电管束，这样可以将大鼠的运动活性自动记录下来。被测动物不受任何运动的限制，可在笼的周围自由活动。在该试验中，对雄性Sprague-Dawley大鼠(n＝6，每个剂量)给药11081和11082(腹膜内注射)然后30分钟后再经皮下给药DOI。对由DOI诱导的运动机能障碍的逆转被看作受试化合物能在活体内拮抗5HT2受体的一种提示。
基于在图3和图4中所示的结果，从这些数据中可以得出结论116081和116082能有利地逆转DOI诱导的运动机能障碍。根据已获得的数据，可以得出的另一个结论是，化合物116082在5-10mg/kg的剂量范围内表现出它的5-羟色胺5HT2拮抗剂特性，而化合物116081在2.5-10mg/kg的剂量范围内表现出它的5-羟色胺5HT2拮抗剂特性。
B.椎体外系副作用分析116082目前市售的一般的抗精神病的药物如氟哌丁苯的显著的问题在于椎体外系副作用的发生。椎体外系运动综合症(EPS)的特征在于帕金森样综合症，其是由大脑纹状体多巴胺D2和D1受体受封闭引起的(Snyder，SH.Am.J.Psychiatry，138461-468，1981)。
通过在啮齿动物中测量僵住症的诱导来评估潜在的治疗药物封闭大脑纹状体多巴胺受体的倾向性(Hoffman和Donavan，Psychopharmacology 120128-133，1995)。僵住症的特征在于身体僵直，并通常是在大鼠中采用棒条测验(bar test)来进行测量(Prinssen et al.Psychopharmacology，14420-29，1999)。因此，采用该测验，以确定化合物116082在活体内的可能的EPS副作用倾向性。
在上述棒条测验中，使大鼠的前肢放在水平的圆柱状的金属棒(直径0.75cm，高10cm)，测量两前肢同时放在棒上的时间，最长达30秒。连续重复该测验3次，由3次测量的平均数确定僵住症。在进行该测验前60分钟，给雄性Sprague-Dawley大鼠(平均体重300g)给药化合物116082(腹膜内注射)。每个剂量下的受试动物数为6-8只。
图5中所示的数据支持如下之结论116082并不引起大鼠在棒上所呆时间的剂量依赖性的增加，因此提示116082在10-80mg/kg的剂量范围内并不诱导大鼠的僵住症。另一方面，氟哌丁苯却诱导大鼠呆在棒上的时间明显增加，这说明此化合物在0.8mg/kg的剂量下诱导大鼠的僵住症。这些数据支持这样的结论化合物116082在活体内在剂量为比封闭5HT2A受体所需的剂量(即，参见上文的DOI实施例)大8倍的剂量下也不诱导大鼠的椎体外系副作用。
利用同样的剂量参数和方案，还测定出化合物116081在满足上文所述的条件下也不产生僵住症反应(n＝10，每个剂量)。数据未列出。
C.口服利用度116081和116082根据已获得的活体内的数据，考察了化合物110681和110682的口服生物利用度。在大鼠中在给药DOI前30分钟以50mg/kg的剂量通过口服填喂法对大鼠给药化合物(参见上文所述实施例11A)。在给药DOI 10分钟后将动物置于运动活性测定笼中，并测量其10分钟内的活动。结果如图6所示，显示了在10分钟内被运动活性测定仪所计数出的总活动数。
图6中的数据支持这样的结论以50mg/kg的剂量给大鼠口服116082和116081逆转了DOI诱导的运动机能障碍。这些数据还支持这样的结论50mg/kg的化合物116082和116081的口服剂量与以腹膜内以10mg/kg的剂量给药同样的化合物(图3和图4)一样有效。
这些数据支持这样的结论化合物116082和116081是口服有活性的，其口服生物利用度大于或等于20％。
D.对MK801-诱导的运动过度的拮抗潜在的抗精神病(抗阴性)活性模型在啮齿动物中，非竞争性NMDA受体拮抗剂MK-801诱导运动活性和刻板症的显著增加。由于精神分裂症的部分症状可能与谷氨酸传递在NMDA受体的改变有关，在啮齿动物中将MK-801诱导的运动活性过度的逆转已被常规地用作检测潜在的抗精神病活性的动物模型(O’Neill et al.，Pharmacology Biochem.Behav.，53237-243，1999)。因此，采用该试验以确定化合物11 6081的体内的可能的抗精神病活性。
如上文(实施例11(A)，上文)所述，采用全自动“运动活性测定笼”评价运动活性。给雄性Sprague-Dawley大鼠(250-350g体重)腹膜内给药受试化合物，并将其置于“运动活性测定笼”中达30分钟。此后，对动物给药MK-801(0.5μM/kg＝0.17mg/kg，皮下)，然后再立即放回到运动活性测定笼中，并测量其在120分钟内活动数。对MK-801在大鼠中诱导的运动活性(表现为活动的明显增加)的逆转被看成是受试化合物能逆转精神病症状的指示。结果如图7所示。
根据图7A和7B所示的结果，在逆转由MK-801诱导的运动活性方面，化合物116081看来与非典型的抗精神病药氯氮平具有同等的功效。因此，这些数据支持这样的结论，即，AR116081可能具有抗精神病的特性。实施例12合成路径本发明公开的化合物可按照各种合成方法容易地进行制备，本领域的普通技术人员对于所述的合成方法是熟悉的。在下文所述的一般合成中，被标明的取代基与在上文有关化合物的定义部分所述的具有同样的含义。
通式(I)的化合物可通过本领域普通技术人员所熟知的各种合成路线来得到。异氰酸酯类与胺类的反应是合成脲类的常规反应方法(参见，Org.Syn.Coll.Vol.V，(1973)，555)。胺(IV)，3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯胺可从Maybridge Chemical Company公司买到，其产品编号为KM01978，CAS No.175201-77-1]，在惰性溶剂如卤代烃中很容易与异氰酸酯类(V)反应，生成由通式(I)所示的所需脲类，其中R1＝R2＝H 或者，在惰性溶剂如卤代烃中在有机碱如三乙胺或乙基二异丙基胺的存在下，通过使胺(IV)与光气或适当的光气等价物如三光气反应可将其转化成相应的异氰酸酯(VI)。异氰酸酯(VI)与通式(VII)所示的胺类以与上述的(IV)与(V)之反应类似的反应方式进行反应，生成通式(I)所示的所需的脲类，其中R1＝H 或者，当通式(V)所示的异氰酸酯是市场上所不能买到的时候，可通过与上文制备(VI)所述之类似过程从通式(VIII)所示的相应的胺来制备它。这些异氰酸酯与(IV)的反应将同样产生出如通式(I)所示的所需的脲类，其中R1＝R2＝H 通过按序与四氢呋喃中的羰基二咪唑和乙腈中的碘代甲烷作用，通式(VII)所示的胺类可容易地被转化成通式(IX)所示的活化的异氰酸酯等价物。(R.A.Batey et al.，Tetrahedron lett.，(1998)，39，6267-6270)。(IX)和(IV)在惰性溶剂如卤代烃中的反应将产生通式(I)所示的所需的脲类，其中R1＝H 根据J.Barbuenga et al.，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.，(1984)，20，1334-1335所述的步骤可将胺(IV)单甲基化，或者根据P.Marchini et al.，J.Org.Chem.，(1975)40(23)，3453-3456所述的步骤将胺(IV)烷基化，产生通式(X)所示的化合物，其中R1＝低级烷基。这些材料可按如下路径与通式(V)和(IX)所示的物质反应 通式(A)的化合物或其溶剂化物或生理上有功能的衍生物可用作治疗剂，特别是用作5-羟色胺5-HT2A受体活性的调节剂。据信，5-羟色胺受体活性的调节剂可用于治疗或预防CNS、胃肠、心血管和炎症紊乱。式(A)的化合物可通过口、舌下、胃肠外、直肠或局部施用给药。除了那些通过适当加入可离子化的取代基而制成的式(A)化合物的中性形式外(所述取代基并不改变化合物的受体特异性)，也可制备此化合物的生理上可接受的盐并用作治疗剂。为达到所需的生物效果将需要不同量的式(A)所示的化合物。该量取决于各种因素如具体的化合物、其所要针对的用途、给药方式和被治疗的个体的状况。通常的剂量预计应在0.001-200mg/千克被治疗个体的体重。单位剂量可含有1-200mg式(A)化合物，并可一天分一次或多次、单剂或多剂给药。在使用式(A)化合物的盐或溶剂化物的情况下，该剂量是基于阳离子(对于盐)或未溶剂化的化合物而定的。
组合物(包括但不限于，药物组合物)包含作为活性成分的至少一种式(A)化合物和/或其可接受的盐或溶剂化物(例如，可药用盐或溶剂化物)，该活性成分与至少一种载体或赋型剂(例如，药物载体或赋型剂)组合在一起。在治疗其中表明需要5-羟色胺5-HT2A受体的调节剂的临床症状时，特别是当活性成分对5HT2A受体比对5HT2A受体有更高的选择性时，尤其是当活性成分也是5HT2A受体的反激活性时，可以使用药物组合物。至少一种式(A)化合物可与固体或液体载体组合在单位剂量的配方中。药物载体必须是与组合物中的其它成分相容性的，并且必须是可被接受者个体耐受的。如果需要，可将其它的生理活性成分掺入到本发明的药物组合物中，如果这些成分是与组合物中的其它成分相容的话。可用任何适当的方法进行制剂，通常是将活性化合物与液体或细碎的固体载体或两者按所需的比例均匀混合，然后，如果需要，再将所得混合物制成所需的形状。
在用于口服给药的片剂和胶囊中使用常规的赋型剂如粘合剂、填料、可接受的湿润剂、压片润滑剂和崩解剂。用于口服给药的液体制剂，其可为溶液、乳液、水或油悬浮液和糖浆。另外，口服制剂也可为在使用前用水或其它适当的液体溶媒重建的干粉形式。其它的添加剂如悬浮剂或乳化剂、非水溶媒(包括食用油)、防腐剂和矫味剂和着色剂也可加入到液体制剂中。通过将本发明的化合物溶解在适当的液体溶媒并将其过滤灭菌，然后灌装到适当的瓶或安瓿中并密封，这样可制备胃肠外给药剂型。这些只是在剂型制备领域所熟知的许多适当方法中的少数几个例子。
本发明的第五方面提供了式(A)化合物在制备药物中的应用，所述药用是用于治疗其中表明需要5-羟色胺5-HT2A受体活性的调节剂的病症的药物。
本发明的另一方面提供了一种用于治疗哺乳动物例如人的病症的方法，所述病症的治疗表明需要5-羟色胺5-HT2A受体活性的调节剂，该方法包括对所述哺乳动物施用治疗有效量的式(A)化合物或生理上可接受的其盐、溶剂化物或生理上的功能衍生物。实施例13试验数据采用带有Gilson HPLC的Micromass PlatformTMLC记录质谱。在Nicolet AvatarTM360 FT-IR上记录红外光谱。熔点由ElectrothermalIA9200TM仪记录，但未校正。由BrukerTM300MHz机器记录质子核磁共振谱。参照四甲基硅烷给出化学迁移。在本文中，使用下列缩略词s(单峰)，d(双重峰)，t(三重峰)，m(多重峰)或其组合。化学迁移以百万分之份数(ppm)以及以赫兹(Hz)为单位的偶合常数给出。
采用铝衬二氧化硅板进行薄层色谱(250μL；GF254)。在使用Hichrom 3.5 C18反相柱(50mm×2.1mm内径)的HP ChemstationTM1100HPLC上记录HPLC。5分钟内的线性梯度洗脱——95％水(+0.1TFA)/5％乙腈(+0.05％TFA)逐渐减到5％水/95％乙腈。流速为0.8mL/分钟[方法A]；或在Hichron 3.5 C18反相柱(100mm×3.2mm，内径)上进行。在11分钟内的线性梯度95％水(+0。1％TFA)/5％乙腈(+0.05％TFA)逐渐减到5％水/95％乙腈。流速为1mL/分钟[方法B]。样品通常在254nM监测，除非另有指明。
所有的试剂均购自商业来源。试验例1103487的制备和分析N-[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基][{(4-三氟甲氧基)苯基}氨基]甲酰胺该化合物可从Maybridge Chemical Company购买得到，其产品目录编号为KM04515。
使用下列两个合成方案中的一个或另一个(如所指明的)，制备以下各化合物方案A向存在于CH2Cl2(4mL)中的异氰酸酯(1mmol)中滴加3-(3-氨基苯基)-4-溴-1-甲基吡唑(1mmol)的CH2Cl2(4mL)溶液。将混合物搅拌16小时并浓缩。进行闪蒸硅胶(20％-80％乙酸乙酯/己烷)色谱纯化，然后进行重结晶，得到纯的脲。
方案B向溶于CH2Cl2(4mL)的三光气(0.33mmol)溶液中滴加溶于CH2Cl2(4mL)的3-(3-氨基苯基)-4-溴-1-甲基吡唑(1mmol)和三乙胺(2mmol)的溶液。1小时后，加入苯胺1mmol。将混合物搅拌16小时并浓缩。进行闪蒸硅胶(20％-80％乙酸乙酯/己烷)色谱纯化，然后进行重结晶，得到纯的脲。试验例2116079的制备和分析N-[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基][(4-甲硫基苯基)氨基]甲酰胺[方案A]-4-(甲硫基)苯基异氰酸酯无色固体(乙酸乙酯/己烷)
MS(ES+)m/z(％)＝419(M+H81Br，100)，417(M+H79Br，94).
1H-NMR(MeOH d4)δ＝2.42(3H，s，SCH3)，3.81(3H，s，NCH3)，7.06(1H，m，ArH)，7.22(2H，m，ArH)，7.37(2H，m，ArH)，7.42-7.61(4H，m，ArH).
HPLC滞留时间3.35分钟(方法A)。试验例3116081的制备和分析N-[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3基)苯基][4-(氯代苯基)氨基]甲酰胺[方案A]-4-氯代苯基异氰酸酯无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝409(M+H81Br37Cl，19)，407(M+H79Br37Cl(81Br35Cl)，100)，405(M+H79Br35Cl，81).
1H-NMR(MeOH d4)δ＝3.81(3H，s，CH3)，7.07(1H，m，ArH)，7.23(2H，m，ArH)，7.36-7.60(6H，m，ArH).
HPLC滞留时间3.42分钟(方法A)。试验例4116082的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3基)苯基]氨基}-N-4-(氟代苯基)甲酰胺[方案A]-4-氟代苯基异氰酸酯无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝391(M+H81Br，96)，389(M+H79Br，100).
1H-NMR(MeOHd4)δ＝3.81(3H，s，CH3)，6.93-7.11(3H，m，ArH)，7.37-7.61(6H，m，ArH).
HPLC滞留时间3.11分钟。试验例5116087的制备和分析
{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-[2-(三氟甲氧基)苯基]甲酰胺[方案A]-2-(三氟甲氧基)苯基异氰酸酯无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝457(M+H81Br，100)，455(M+H79Br，95).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝3.79(3H，s，CH3)，7.06-7.18(2H，m，ArH)，7.38-7.49(2H，m，ArH)，7.51-7.62(2H，m，ArH)，7.65(1H，m，ArH)，7.71(1H，s，ArH)，8.24(1H，dd，J＝1.1，8.2，ArH)，8.56(1H，s，NH)，9.49(1H，s，NH).
HPLC滞留时间3.40分钟。试验例6116089的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(2-硝基苯基)甲酰胺[方案A]-2-硝基苯基异氰酸酯黄色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)n/z(％)＝418(M+H81Br，98)，416(M+H79Br，100).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝1H-NMR(DMSO d6)□＝3.79(3H，s，NCH3)，7.14(1H，m，ArH)，7.24(1H，m，ArH)，7.50(1H，t，J＝7.7，ArH)，7.60(2H，m，ArH)，7.67(1H，s，ArH)，7.71(1H，s，ArH)，8.10(1H，m，ArH)，8.29(1H，m，ArH)，9.65(1H，s，NH)，10.09(1H，s，NH).
HPLC滞留时间3.10分钟[方法A]。试验例7116091的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(4-甲氧基苯基)甲酰胺[方案A]-4-甲氧基苯基异氰酸酯无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝403(M+H81Br，100)，401(M+H79Br，96).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝3.71(3H，s，OCH3)，3.79(3H，s，NCH3)，6.87(2H，d，J＝8.9，ArH)，7.06(1H，d，J＝7.5，ArH)，7.39(2H，d，J＝8.9，ArH)，7.45-7.61(3H，m，ArH)，7.65(1H，s，ArH)，8.52(1H，s，NH)，8.84(1H，s，NH).
HPLC滞留时间3.08分钟.试验例8116092的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(2-甲基苯基)甲酰胺[方案A]-邻甲苯基异氰酸酯无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝387(M+H81Br，94)，385(M+H79Br，100).
1H-NMR(MeOH d4)δ＝2.29(3H，s，CH3)，3.81(3H，s，NCH3)，7.03(1H，dt，J＝1.1，7.5，ArH)，7.09(1H，dt，J＝1.1，7.5，ArH)，7.13-7.22(2H，m，ArH)，7.45(1H，t，J＝7.9，ArH)，7.49-7.57(2H，m，ArH)，7.60-7.68(2H，m，ArH).
HPLC滞留时间2.96分钟.试验例9116097的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-[4-(三氟甲基)苯基]甲酰胺[方案A]-4-(三氟甲基)苯基异氰酸酯无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝441(M+H81Br，94)，439(M+H79Br，100).
1H-NMR(MeOH d4)δ＝3.82(3H，s，CH3)，7.04-7.16(3H，m，ArH)，7.20-7.47(6H，m，ArH).
HPLC滞留时间3.56分钟。试验例10116105的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(3-氯代苯基)甲酰胺[方案A]-3-氯代苯基异氰酸酯无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝409(M+H81Br37Cl，26)，407(M+H79Br37Cl(81Br35Cl)，100)，405(M+H79Br35Cl，70).
1H-NMR(MeOH d4)δ＝3.81(3H，s，NCH3)，7.04(1H，m，ArH)，7.10(1H，m，ArH)，7.28(2H，m，ArH)，7.47(1H，t，J＝7.8，ArH)，7.55(1H，m，ArH)，7.63(1H，m，ArH)，7.68(1H，s，ArH)，7.73(1H，m，ArH)，9.04(2H，s，NH).
HPLC滞留时间3.20分钟[方法A]。试验例11116108的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(2-氯代苯基)甲酰胺[方案A]-2-氯代苯基异氰酸酯无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝409(M+H81Br37Cl，24)，407(M+H79Br37Cl(81Br35Cl)，100)，405(M+H79Br35Cl，72).
1H-NMR(MeOH d4)δ＝3.81(3H，s，NCH3)，7.03(1H，m，ArH)，7.11(1H，m，ArH)，7.28(1H，m，ArH)，7.35-7.53(3H，m，ArH)，7.55(1H，s，ArH)，7.62(1H，m，ArH)，8.11(1H，m，ArH).
HPLC滞留时间3.13分钟。试验例12116110的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-[4-(甲基乙基)苯基]甲酰胺[方案A]-4-异丙基苯基异氰酸酯无色固体(THF/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝415(M+H81Br，100)，413(M+H79Br，92).
1H-NMR(MeOH d4)δ＝1.23(6H，d，J＝6.8，2xCH3)，2.86(1H，septet，J＝6.8，CH)，3.82(3H，s，NCH3)，7.09(1H，m，ArH)，7.16(2H，d，J＝7.6，ArH)，7.31(2H，d，J＝7.6，ArH)，7.42-7.51(2H，m，ArH)，7.54(1H，s，ArH)，7.59(1H，m，ArH).
HPLC滞留时间3.66分钟。试验例13116111的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(3-甲氧基苯基)甲酰胺[方案A]-3-甲氧基苯基异氰酸酯无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝403(M+H81Br，100)，401(M+H79Br，96).
1H-NMR(MeOH d4)δ＝3.73(3H，s，OCH3)，3.81(3H，s，NCH3)，6.59(1H，m，ArH)，6.91(1H，m，ArH)，7.08(1H，m，ArH)，7.14(2H，m，ArH)，7.39-7.61(4H，m，ArH).
HPLC滞留时间2.90分钟。试验例14116112的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(3-甲基苯基)甲酰胺[方案A]-间甲苯基异氰酸酯无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝387(M+H81Br，100)，385(M+H79Br，96).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝2.26(3H，s，CH3)，3.76(3H，s，NCH3)，6.79(1H，m，ArH)，7.06-7.22(3H，m，ArH)，7.29(1H，m，ArH)，7.43-7.62(3H，m，ArH)，7.68(1H，s，ArH)，8.65(1H，s，NH)，8.89(1H，s，NH).
HPLC滞留时间3.05分钟[方法A]。试验例15116113的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-甲基-N-[4-(三氟甲氧基)苯基]甲酰胺[方案B]-N-甲基-4-(三氟甲氧基)苯胺浅黄色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝471(M+H81Br，88)，469(M+H79Br，100).
1H-NMR(MeOH d4)δ＝3.35(3H，s，NCH3)，3.81(3H，s，NCH3)，7.09(1H，m，ArH)，7.25-7.51(8H，m，ArH).
HPLC滞留时间3.56分钟[方法A]。试验例16116119的制备和分析N-[4-(叔丁基)苯基]{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}甲酰胺[方案B]-4-叔丁基苯胺无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝429(M+H81Br，98)，427(M+H79Br，100).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝1.27(9H，s，3xCH3)，3.79(3H，s，NCH3)，7.07(1H，d，J＝7.5，ArH)，7.29(2H，d，J＝8.7，ArH)，7.37(2H，d，J＝8.7，ArH)，7.45(1H，t，J＝7.5，ArH)，7.51-7.60(2H，m，ArH)，7.66(1H，s，ArH)，8.65(1H，s，NH)，8.83(1H，s，NH).
HPLC滞留时间3.77分钟。试验例17116122的制备和分析N-[4-(二甲基氨基)苯基]{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}甲酰胺[方案B]-N，N-二甲基-对亚苯基二胺无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝416 (M+H81Br，96)，414(M+H79Br，100).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝2.86(6H，s，NCH3)，3.80(3H，s，NCH3)，6.80(2H，m，ArH)，7.09(1H，d，J＝7.7，ArH)，7.28(2H，m，ArH)，7.42(1H，t，J＝7.8，ArH)，7.52(1H，m，ArH)，7.59(1H，s，ArH)，7.67(1H，s，ArH)，8.45(1H，s，NH)，8.75(1H，s，NH).
HPLC滞留时间2.07分钟[方法A]。试验例18116138的制备和分析N-(3，5-二氯-4-甲基苯基){[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}甲酰胺[方案B]-3，5-二氯-4-甲基苯胺无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝457(M+H，35)，455(M+H，100)，453(M+H，65).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝2.32(3H，s，CH3)，3.79(3H，s，NCH3)，7.11(1H，d，J＝7.4，ArH)，7.46(1H，t，J＝7.8，ArH)，7.50-7.64(4H，m，ArH)，7.68(1H，s，ArH)，9.02(1H，s，NH)，9.09(1H，s，NH).
HPLC滞留时间3.66分钟。试验例19116139的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-[4-(三氟甲硫基)苯基]甲酰胺[方案B]-4-(三氟甲硫基)苯胺无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝473(M+H81Br，100)，471(M+H79Br，94).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝3.81(3H，s，NCH3)，7.11(1H，d，J＝7.5，ArH)，7.47(1H，t，J＝7.9，ArH)，7.51-7.63(6H，m，ArH)，7.66(1H，s，ArH)，9.03(1H，s，NH)，9.16(1H，s，NH).
HPLC滞留时间3.76分钟。试验例20116141的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-环己基)甲酰胺[方案B]-环己胺无色固体，m.p.155.5-156.3℃(乙酸乙酯/己烷)。
MS(ES+)m/z(％)＝379(M+H81Br，93)，377(M+H79Br，100).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝1.07-1.34(5H，m，5xCH)，1.52(1H，m，CH)，1.63(2H，m，2xCH)，1.76(2H，m，2xCH)，3.48(1H，m，NCH)，3.74(3H，s，CH3)，6.15(1H，d，J＝7.8，ArH)，6.98(1H，d，J＝7.5，ArH)，7.32-7.43(2H，m，ArH)，7.51(1H，m，NH)，7.62(1H，s，ArH)，8.50(1H，s，NH).
HPLC滞留时间3.16分钟[方法A]。
TLC滞留因子0.35(50％乙酸乙酯/己烷)。试验例21116143的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(苯基甲基)甲酰胺[方案B]-苄胺无色固体，m.p.144.5-146.2℃(乙酸乙酯/己烷)。
IR□max＝1622，1565，1467，1374，1239，973，802，752，695cm-1.
MS(ES+)m/z(％)＝387(M+H81Br，89)，385(M+H79Br，100).
1H-NMR(CD3OD)δ＝3.81(3H，s，CH3)，4.40(2H，s，CH2)，7.05(1H，m，ArH)，7.19-7.51(9H，m，ArH).
HPLC滞留时间3.06分钟[方法A].a试验例22116144的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(2-氟代苯基)甲酰胺[方案A]-2-氟代苯基异氰酸酯无色固体(DCM/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝391(M+H81Br，100)，389(M+H79Br，90).
1H-NMR(MeOH d4)δ＝3.79(3H，s，NCH3)，7.00-7.11(4H，m，ArH)，7.40-7.56(3H，m，ArH)，7.61(1H，m，ArH)，8.09(1H，m，ArH).
HPLC滞留时间3.01分钟。试验例23116145的制备和分析2-({[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}羰基氨基)苯甲酰胺[方案B]-2-氨基苯甲酰胺无色固体(乙酸乙酯/己烷)
MS(ES+)m/z(％)＝399(M+H-1781Br，100)，397(M+H-1779Br，94).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝3.79(3H，s，NCH3)，6.93-7.10(2H，m，ArH)，7.45(2H，t，J＝7.8，ArH)，7.59-7.72(5H，m，ArH)，8.22(2H，m)，9.92(1H，s，NH)，10.69(1H，s，NH).
HPLC滞留时间2.88分钟。试验例24116147的制备和分析{(3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基)氨基}-N-(4-氰基苯基)甲酰胺[方案B]-4-氨基苯基氰无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝398(M+H81Br，100)，396(M+H79Br，96).
1H-NMR(MeOH d4)δ＝3.81(3H，s，NCH3)，7.12(1H，m，ArH)，7.46-7.57(3H，m，ArH)，7.62-7.69(5H，m，ArH).
HPLC滞留时间3.12分钟。试验例25116148的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(2-氰基苯基)甲酰胺[方案B]-2-氨基苯基氰无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝398(M+H81Br，95)，396(M+H79Br，100).
1H-NMR(CDCl3)δ＝3.79(3H，s，CH3)，7.13-7.28(2H，m，ArH)，7.49(1H，t，J＝7.8，ArH)，7.57(1H，m，ArH)，7.62(1H，m，ArH)，7.65-7.71(2H，m，ArH)，7.78(1H，m，ArH)，8.07(1H，d，J＝8.6，ArH)，8.83(1H，s，NH)，9.62(1H，s，NH).
HPLC滞留时间3.05分钟[方法A]。试验例26116182的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(4-氟代苯基甲基)甲酰胺-4-氟苄胺无色固体，m.p.185.5-186.6℃(乙酸乙酯/己烷)。
MS(ES+)m/z(％)＝405(M+H81Br，97)，403(M+H79Br，100).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝3.75(3H，s，CH3)，4.28(2H，d，J＝6.0，CH2)，6.73(1H，t，J＝5.9，NH)，7.01(1H，d，J＝7.5，ArH)，7.10-7.18(2H，m，ArH)，7.27-7.41(4H，m，ArH)，7.56(1H，s，ArH)，7.62(1H，s，ArH)，8.82(1H，s，NH).
HPLC滞留时间3.10分钟[方法A]。
TLC滞留因子0.25(50％乙酸乙酯/己烷)。试验例27116183的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(3，4-二甲氧基苯基甲基)甲酰胺[方案B]-3，4-二甲氧基苄胺无色固体，m.p.174.9-175.5℃(乙酸乙酯/己烷)。
MS(CI+)m/z(％)＝447(M+H81Br，100)，445(M+H79Br，92).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝3.71(3H，s，CH3)，3.73(3H，s，CH3)，3.76(3H，s，CH3)，4.22(2H，d，J＝5.8，CH2)，6.62(1H，t，J＝5.7，NH)，6.80(1H，m，ArH)，6.89(2H，m，ArH)，6.98(1H，m，ArH)，7.36-7.51(3H，m，ArH)，7.63(1H，s，ArH)，8.76(1H，s，NH).
HPLC滞留时间2.86分钟[方法A]。
TLC滞留因子0.20(50％乙酸乙酯/己烷)。试验例28116184的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(3，4，5-三甲氧基苯基甲基)甲酰胺[方案B]3，4，5-三甲氧基苄胺无色固体(乙酸乙酯/己烷)。
MS(CI+)m/z(％)＝477(M+H81Br，100)，475(M+H79Br，95).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝3.63(3H，s，OCH3)，3.75(9H，s，3xCH3)，4.21(1H，d，J＝5.9，CH2)，6.61(2H，s，ArH)，6.65(1H，t，J＝5.9，NH)，6.99(1H，m，ArH)，7.40(1H，t，J＝7.7，ArH)，7.45(1H，m，ArH)，7.56(1H，m，ArH)，7.64(1H，s，ArH)，8.77(1H，s，NH).
HPLC滞留时间5.91分钟[Method B]。
TLC滞留因子0.50(50％乙酸乙酯/己烷).试验例29116185的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(2-甲基苯基甲基)甲酰胺[方案B]-2-甲基苄胺无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(CI+)m/z(％)＝401(M+H81Br，96)，399(M+H79Br，100).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝2.28(3H，s，CH3)，3.76(3H，s，NCH3)，4.28(1H，d，J＝5.8，CH2)，6.60(1H，t，J＝5.8，NH)，7.01(1H，m，ArH)，7.15(3H，m，ArH)，7.24(1H，m，ArH)，7.38-7.50(2H，m，ArH)，7.57(1H，m，ArH)，7.65(1H，s，ArH)，8.77(1H，s，NH).
HPLC滞留时间2.74分钟[方法A]。
TLC滞留因子0.20(50％乙酸乙酯/己烷)。试验例30116189的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-(4-甲氧基苯基甲基)甲酰胺[方案B]-4-甲氧基苄胺无色固体(乙酸乙酯/己烷)。
MS(CI+)m/z(％)＝417(M+H81Br，94)，415(M+H79Br，100).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝3.72(3H，s，CH3)，3.77(3H，s，NCH3)，4.22(1H，d，J＝5.9，CH2)，6.62(1H，t，J＝5.9，NH)，6.90(2H，d，J＝8.8，ArH)，7.00(1H，m，ArH)，7.23(2H，d，J＝8.8，ArH)，7.39(1H，t，J＝7.8，ArH)，7.43(1H，m，ArH)，7.56(1H，m，ArH)，7.64(1H，s，ArH)，8.73(1H，s，NH).
HPLC滞留时间6.41分钟[方法B]。
TLC滞留因子0.25(50％乙酸乙酯/己烷)。试验例31116194的制备和分析{[3-(4-溴-1-甲基吡唑-3-基)苯基]氨基}-N-[2-(4-甲氧基)苯基乙基]甲酰胺[方案B]-2-(4-甲氧基苯基)乙胺无色固体(乙酸乙酯/己烷)MS(ES+)m/z(％)＝431(M+H81Br，95)，429(M+H79Br，100).
1H-NMR(DMSO d6)δ＝2.68(2H，t，J＝7.1，CH2)，3.31(2H，m，CH2)，3.71(3H，s，CH3)，3.77(3H，s，CH3)，6.16(1H，t，J＝5.8，NH)，6.87(2H，d，J＝8.6，ArH)，6.99(1H，dt，J＝1.4，7.3，ArH)，7.16(2H，d，J＝8.6，ArH)，7.33-7.48(2H，m，ArH)，7.52(1H，m，ArH)，7.63(1H，s，ArH)，8.71(1H，s，NH).
HPLC滞留时间6.62分钟[方法B]。
从以上数据可以得出的重要的一点是，通过在侯选化合物的直接识别过程中使用受体的组成型活化形式，化合物的选择性是指数级的正如本领域的人所知道的，在人5HT2A和5HT2C受体之间有约95％的同源性，即使有这样的同源性，某些被直接识别的化合物例如化合物116081和116082对5HT2A受体的优先选择性(通过IC50值测量)与对5HT2C受体的选择性相比显示出了100倍的差异。这一点对于药物组合物而言是重要的，因为这样的选择性将有助于减少药物与非靶受体相互作用相关的副作用。
本发明的不同的实施方案将由不同的组成型活化的受体、不同的表达系统、不同的分析试验、和不同的化合物组成。本领域的普通技术人员会明白并能确定何种受体与何种的表达系统以及分析试验一起使用。所有这些都被认为是在本发明的范围内。另外，本领域的普通技术人员将理解的是可在不背离本发明精神的前提下，对上文阐述的本发明的描述性实施例作出各种修改、增加、代换、和改变，因此，这些种修改、增加、代换、和改变也在本发明的范围内。所有在上文中引用的文献(包括但不限于临时和常规专利申请)以其全文在此引入本文。
序列表序列表<110> 阿瑞那制药公司(Arena Pharmaceuticals，Inc.)<120> 非内源的组成型活化的人5-羟色胺受体的小分子调节剂(Small Molecule Modulators of Non-Endogenous，Constitutively Activated Human Serotonin Receptors)<130> AREN-0085<150> US 60/152,798<151> 1999-09-07<150> US 09/418,721<151> 1999-10-15<150> US 09/292,072<151> 1999-04-14<150> US 60/123,000<151> 1999-03-05<150> US 09/292,071<151> 1999-04-14<150> US 09/292,069<151> 1999-04-14<150> US 60/112,909<151> 1998-12-18<160> 27<170> PatentIn version 3.0<210> 1<211> 28<212> DNA<213> 人工序列<400> 1gacctcgagg ttgcttaaga ctgaagca 28<210> 2<211> 28<212> DNA<213> 人工序列<400> 2atttctagac atatgtagct tgtaccgt 28<210> 3<211> 50<212> DNA<213> 人工序列<400> 3ctaggggcac catgcaggct atcaacaatg aaagaaaagc taagaaagtc 50<210> 4<211> 50<212> DNA<213> 人工序列<400> 4caaggacttt cttagctttt ctttcattgt tgatagcctg catggtgccc 50<210> 5<211> 26<212> DNA<213> 人工序列<400> 5gacctcgagt ccttctacac ctcatc 26<210> 6<211> 30<212> DNA<213> 人工序列<400> 6tgctctagat tccagatagg tgaaaacttg 30<210> 7<211> 31<212> DNA<213> 人工序列<400> 7caaagaaagt actgggcatc gtcttcttcc t31<210> 8<211> 31<212> DNA<213> 人工序列<400> 8ccgctcgagt actgcgccga caagctttga t31<210> 9<211> 38<212> DNA<213> 人工序列<400> 9cgatgcccag cactttcgaa gcttttcttt cattgttg 38<210> 10<211> 36<212> DNA<213> 人工序列<400> 10aaaagcttcg aaagtgctgg gcatcgtctt cttcct36<210> 11<211> 30<212> DNA<213> 人工序列<400> 11tgctctagat tccagatagg tgaaaacttg 30<210> 12<211> 19<212> DNA<213> 人工序列<400> 12cgtgtctctc cttacttca 19<210> 13<211> 36<212> DNA<213> 人工序列<400> 13tcggcgcagt actttgatag ttagaaagta ggtgat36<210> 14<211> 38<212> DNA<213> 人工序列<400> 14ttctaactat caaagtactg cgccgacaag ctttgatg 38<210> 15<211> 43<212> DNA<213> 人工序列<400> 15ttcagcagtc aacccactag tctatactct gttcaacaaa att43<210> 16<211> 28<212> DNA<213> 人工序列<400> 16atttctagac atatgtagct tgtaccgt 28<210> 17<211> 19<212> DNA<213> 人工序列<400> 17atcacctact ttctaacta 19<210> 18<211> 33<212> DNA<213> 人工序列<400> 18ccataatcgt caggggaatg aaaaatgaca caa 33<210> 19<211> 33<212> DNA<213> 人工序列<400> 19atttttcatt cccctgacga ttatggtgat tac 33<210> 20<211> 33<212> DNA<213> 人工序列<400> 20tgatgaagaa agggcaccac atgatcagaa aca 33<210> 21<211> 33<212> DNA<213> 人工序列<400> 21gatcatgtgg tgccctttct tcatcacaaa cat 33<210> 22<211> 1377<212> DNA<213> 智人(Homo sapiens)<400> 22atggtgaacc tgaggaatgc ggtgcattca ttccttgtgc acctaattgg cctattggtt 60tggcaatgtg atatttctgt gagcccagta gcagctatag taactgacat tttcaatacc 120tccgatggtg gacgcttcaa attcccagac ggggtacaaa actggccagc actttcaatc 180gtcatcataa taatcatgac aataggtggc aacatccttg tgatcatggc agtaagcatg 240gaaaagaaac tgcacaatgc caccaattac ttcttaatgt ccctagccat tgctgatatg 300ctagtgggac tacttgtcat gcccctgtct ctcctggcaa tcctttatga ttatgtctgg360ccactaccta gatatttgtg ccccgtctgg atttctttag atgttttatt ttcaacagcg420tccatcatgc acctctgcgc tatatcgctg gatcggtatg tagcaatacg taatcctatt480gagcatagcc gtttcaattc gcggactaag gccatcatga agattgctat tgtttgggca540atttctatag gtgtatcagt tcctatccct gtgattggac tgagggacga agaaaaggtg600ttcgtgaaca acacgacgt cgtgctcaac gacccaaatt tcgttcttat tgggtccttc660gtagctttct tcataccgct gacgattatg gtgattacgt attgcctgac catctacgtt720ctgcgccgac aagctttgat gttactgcac ggccacaccg aggaaccgcc tggactaagt780ctggatttcc tgaagtgctg caagaggaat acggccgagg aagagaactc tgcaaaccct840aaccaagacc agaacgcacg ccgaagaaag aagaaggaga gacgtcctag gggcaccatg900caggctatca acaatgaaag aaaagctaag aaagtccttg ggattgtttt ctttgtgttt960ctgatcatgt ggtgcccatt tttcattacc aatattctgt ctgttctttg tgagaagtcc 1020tgtaaccaaa agctcatgga aaagcttctg aatgtgtttg tttggattgg ctatgtttgt 1080tcaggaatca atcctctggt gtatactctg ttcaacaaaa tttaccgaag ggcattctcc 1140aactatttgc gttgcaatta taaggtagag aaaaagcctc ctgtcaggca gattccaaga 1200gttgccgcca ctgctttgtc tgggagggag cttaatgtta acatttatcg gcataccaat 1260gaaccggtga tcgagaaagc cagtgacaat gagcccggta tagagatgca agttgagaat 1320ttagagttac cagtaaatcc ctccagtgtg gttagcgaaa ggattagcag tgtgtga 1377<210> 23<211> 458<212> PRT<213> 智人(Homo sapiens)<400> 23Met Val Asn Leu Arg Asn Ala Val His Ser Phe Leu Val His Leu Ile1 510 15Gly Leu Leu Val Trp Gln Cys Asp Ile Ser Val Ser Pro Val Ala Ala20 25 30Ile Val Thr Asp Ile Phe Asn Thr Ser Asp Gly Gly Arg Phe Lys Phe35 40 45Pro Asp Gly Val Gln Asn Trp Pro Ala Leu Ser Ile Val Ile Ile Ile50 55 60Ile Met Thr Ile Gly Gly Asn Ile Leu Val Ile Met Ala Val Ser Met65 70 75 80Glu Lys Lys Leu His Asn Ala Thr Asn Tyr Phe Leu Met Ser Leu Ala85 90 95Ile Ala Asp Met Leu Val Gly Leu Leu Val Met Pro Leu Ser Leu Leu100 105 110Ala Ile Leu Tyr Asp Tyr Val Trp Pro Leu Pro Arg Tyr Leu Cys Pro115 120 125Val Trp Ile Ser Leu Asp Val Leu Phe Ser Thr Ala Ser Ile Met His130 135 140Leu Cys Ala Ile Ser Leu Asp Arg Tyr Val Ala Ile Arg Asn Pro Ile145 150 155 160Glu His Ser Arg Phe Asn Ser Arg Thr Lys Ala Ile Met Lys Ile Ala165 170 175Ile Val Trp Ala Ile Ser Ile Gly Val Ser Val Pro Ile Pro Val Ile180 185 190Gly Leu Arg Asp Glu Glu Lys Val Phe Val Asn Asn Thr Thr Cys Val195 200 205Leu Asn Asp Pro Asn Phe Val Leu Ile Gly Ser Phe Val Ala Phe Phe210 215 220Ile Pro Leu Thr Ile Met Val Ile Thr Tyr Cys Leu Thr Ile Tyr Val225 230 235 240Leu Arg Arg Gln Ala Leu Met Leu Leu 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tggactaagt 840ctggatttcc tgaagtgctg caagaggaat acggccgagg aagagaactc tgcaaaccct 900aaccaagacc agaacgcacg ccgaagaaag aagaaggaga gacgtcctag gggcaccatg 960caggctatca acaatgaaag aaaagcttcg aaggtactgg gcatcgtctt cttcctgttt1020gtggtgatgt ggtgcccttt cttcatcaca aacatcatgg ccgtcatctg caaagagtcc1080tgcaatgagg atgtcattgg ggccctgctc aatgtgtttg tttggatcgg ttatctctct1140tcagcagtca acccactagt ctatactctg ttcaacaaaa tttaccgaag ggcattctcc1200aactatttgc gttgcaatta taaggtagag aaaaagcctc ctgtcaggca gattccaaga1260gttgccgcca ctgctttgtc tgggagggag cttaatgtta acatttatcg gcataccaat1320gaaccggtga tcgagaaagc cagtgacaat gagcccggta tagagatgca agttgagaat1380ttagagttac cagtaaatcc ctccagtgtg gttagcgaaa ggattagcag tgtgtga 1437<210> 25<211> 478<212> PRT<213> 智人(Homo sapiens)<400> 25Met Asp Ile Leu Cys Glu Glu Asn Thr Ser Leu Ser Ser Thr Thr Asn1 5 10 15Ser Leu Met Gln Leu Asn Asp Asp Asn Arg Leu Tyr Ser Asn Asp Phe20 25 30Asn Ser Gly Glu Ala Asn Thr Ser Asp Ala Phe Asn Trp Thr Val Asp35 40 45Ser Glu Asn Arg Thr Asn Leu Ser Cys Glu Gly Cys Leu Ser Pro Ser50 55 60Cys Leu Ser Leu Leu His Leu Gln Glu Lys Asn Trp Ser Ala Leu Leu65 70 75 80Thr Ala Val Val Ile Ile Leu Thr Ile Ala Gly Asn Ile Leu Val Ile85 90 95Met Ala Val Ser Leu Glu Lys Lys Leu Gln Asn Ala Thr Asn Tyr Phe100 105 110Leu Met Ser Leu Ala Ile Ala Asp Met Leu Leu Gly Phe Leu Val Met115 120 125Pro Val Ser Met Leu Thr Ile Leu Tyr Gly Tyr Arg Trp Pro Leu Pro130 135 140Ser Lys Leu Cys Ala Val Trp Ile Tyr Leu Asp Val Leu Phe Ser Thr145 150 155 160Ala Ser Ile Met His Leu Cys Ala Ile Ser Leu Asp Arg Tyr Val Ala165 170 175Ile Gln Asn Pro Ile His His Ser Arg Phe Asn Ser Arg Thr Lys Ala180 185 190Phe Leu Lys Ile Ile Ala Val Trp Thr Ile Ser Val Gly Ile Ser Met195 200 205Pro Ile Pro Val Phe Gly Leu Gln Asp Asp Ser Lys Val Phe Lys Glu210 215 220Gly Ser Cys Leu Leu Ala Asp Asp Asn Phe Val Leu Ile Gly Ser Phe225 230 235 240Val Ser Phe Phe Ile Pro Leu Thr Ile Met Val Ile Thr Tyr Phe Leu245 250 255Thr Ile Lys Val Leu Arg Arg Gln Ala Leu Met Leu Leu His Gly His260 265 270Thr Glu Glu Pro Pro Gly Leu Ser Leu Asp Phe Leu Lys Cys Cys Lys275 280 285Arg Asn Thr Ala Glu Glu Glu Asn Ser Ala Asn Pro Asn Gln Asp Gln290 295 300Asn Ala Arg Arg Arg Lys Lys Lys Glu Arg Arg Pro Arg Gly Thr Met305 310 315 320Gln Ala Ile Asn Asn Glu Arg Lys Ala Ser Lys Val Leu Gly Ile Val325 330 335Phe Phe Leu Phe Val Val Met Trp Cys Pro Phe Phe Ile Thr Asn Ile340 345 350Met Ala Val Ile Cys Lys Glu Ser Cys Asn Glu Asp Val Ile Gly Ala355 360 365Leu Leu Asn Val Phe Val Trp Ile Gly Tyr Leu Ser Ser Ala Val Asn370 375 380Pro Leu Val Tyr Thr Leu Phe Asn Lys Ile Tyr Arg Arg Ala Phe Ser385 390 395 400Asn Tyr Leu Arg Cys Asn Tyr Lys Val Glu Lys Lys Pro Pro Val Arg405 410 415Gln Ile Pro Arg Val Ala Ala Thr Ala Leu Ser Gly Arg Glu Leu Asn420 425 430Val Asn Ile Tyr Arg His Thr Asn Glu Pro Val Ile Glu Lys Ala Ser435 440 445Asp Asn Glu Pro Gly Ile Glu Met Gln Val Glu Asn Leu Glu Leu Pro450 455 460Val Asn Pro Ser Ser Val Val Ser Glu Arg Ile Ser Ser Val465 470 475<210> 26<211> 1380<212> DNA<213> 智人(Homo sapiens)<400> 26atggatattc tttgtgaaga aaatacttct ttgagctcaa ctacgaactc cctaatgcaa 60ttaaatgatg acaacaggct ctacagtaat gactttaact ccggagaagc taacacttct 120gatgcattta actggacagt cgactctgaa aatcgaacca acctttcctg tgaagggtgc 180ctctcaccgt cgtgtctctc cttacttcat ctccaggaaa aaaactggtc tgctttactg 240acagccgtag tgattattct aactattgct ggaaacatac tcgtcatcat ggcagtgtcc 300ctagagaaaa agctgcagaa tgccaccaac tatttcctga tgtcacttgc catagctgat 360atgctgctgg gtttccttgt catgcccgtg tccatgttaa ccatcctgta tgggtaccgg 420tggcctctgc cgagcaagct ttgtgcagtc tggatttacc tggacgtgct cttctccacg 480gcctccatca tgcacctctg cgccatctcg ctggaccgct acgtcgccat ccagaatccc 540atccaccaca gccgcttcaa ctccagaact aaggcatttc tgaaaatcat tgctgtttgg 600accatatcag taggtatatc catgccaata ccagtctttg ggctacagga cgattcgaag 660gtctttaagg aggggagttg cttactcgcc gatgataact ttgtcctgat cggctctttt 720gtgtcatttt tcattcccct gacgattatg gtgattacgt attgcctgac catctacgtt 780ctgcgccgac aagctttgat gttactgcac ggccacaccg aggaaccgcc tggactaagt 840ctggatttcc tgaagtgctg caagaggaat acggccgagg aagagaactc tgcaaaccct 900aaccaagacc agaacgcacg ccgaagaaag aagaaggaga gacgtcctag gggcaccatg 960caggctatca acaatgaaag aaaagctaag aaagtccttg ggattgtttt ctttgtgttt1020ctgatcatgt ggtgcccttt cttcatcaca aacatcatgg ccgtcatctg caaagagtcc1080tgcaatgagg atgtcattgg ggccctgctc aatgtgtttg tttggatcgg ttatctctct1140tcagcagtca acccactagt ctatactctg ttcaacaaaa tttaccgaag ggcattctcc1200aactatttgc gttgcaatta taaggtagag aaaaagcctc ctgtcaggca gattccaaga1260gttgccgcca ctgctttgtc tgggagggag cttaatgtta acatttatcg gcataccaat1320gaaccggtga tcgagaaagc cagtgacaat gagcccggta tagagatgca agttgagaat 1380<210> 27<211> 478<212> PRT<213> 智人(Homo sapiens)<400> 27Met Asp Ile Leu Cys Glu Glu Asn Thr Ser Leu Ser Ser Thr Thr Asn1 5 10 15Ser Leu Met Gln Leu Asn Asp Asp Asn Arg Leu Tyr Ser Asn Asp Phe20 25 30Asn Ser Gly Glu Ala Asn Thr Ser Asp Ala Phe Asn Trp Thr Val Asp35 40 45Ser Glu Asn Arg Thr Asn Leu Ser Cys Glu Gly Cys Leu Ser Pro Ser50 55 60Cys Leu Ser Leu Leu His Leu Gln Glu Lys Asn Trp Ser Ala Leu Leu65 70 75 80Thr Ala Val Val Ile Ile Leu Thr Ile Ala Gly Asn Ile Leu Val Ile85 90 95Met Ala Val Ser Leu Glu Lys Lys Leu Gln Asn Ala Thr Asn Tyr Phe100 105 110Leu Met Ser Leu Ala Ile Ala Asp Met Leu Leu Gly Phe Leu Val Met115 120 125Pro Val Ser Met Leu Thr Ile Leu Tyr Gly Tyr Arg Trp Pro Leu Pro130 135 140Ser Lys Leu Cys Ala Val Trp Ile Tyr Leu Asp Val Leu Phe Ser Thr145 150 155 160Ala Ser Ile Met His Leu Cys Ala Ile Ser Leu Asp Arg Tyr Val Ala165 170 175Ile Gln Asn Pro Ile His His Ser Arg Phe Asn Ser Arg Thr Lys Ala180 185 190Phe Leu Lys Ile Ile Ala Val Trp Thr Ile Ser Val Gly Ile Ser Met195 200 205Pro Ile Pro Val Phe Gly Leu Gln Asp Asp Ser Lys Val Phe Lys Glu210 215 220Gly Ser Cys Leu Leu Ala Asp Asp Asn Phe Val Leu Ile Gly Ser Phe225 230 235 240Val Ser Phe Phe Ile Pro Leu Thr Ile Met Val Ile Thr Tyr Cys Leu245 250 255Thr Ile Tyr Val Leu Arg Arg Gln Ala Leu Met Leu Leu His Gly His260 265 270Thr Glu Glu Pro Pro Gly Leu Ser Leu Asp Phe Leu Lys Cys Cys Lys275 280 285Arg Asn Thr Ala Glu Glu Glu Asn Ser Ala Asn Pro Asn Gln Asp Gln290 295 300Asn Ala Arg Arg Arg Lys Lys Lys Glu Arg Arg Pro Arg Gly Thr Met305 310 315 320Gln Ala Ile Asn Asn Glu Arg Lys Ala Lys Lys Val Leu Gly Ile Val325 330 335Phe Phe Val Phe Leu Ile Met Trp Cys Pro Phe Phe Ile Thr Asn Ile340345 350Met Ala Val Ile Cys Lys Glu Ser Cys Asn Glu Asp Val Ile Gly Ala355 360 365Leu Leu Asn Val Phe Val Trp Ile Gly Tyr Leu Ser Ser Ala Val Asn370 375 380Pro Leu Val Tyr Thr Leu Phe Asn Lys Ile Tyr Arg Arg Ala phe Ser385 390 395 40OAsn Tyr Leu Arg Cys Asn Tyr Lys Val Glu Lys Lys Pro pro Val Arg405 410 415Gln Ile Pro Arg Val Ala Ala Thr Ala Leu Ser Gly Arg Glu Leu Asn420 425 430Val Asn Ile Tyr Arg His Thr Asn Glu Pro Val Ile Glu Lys Ala Ser435 440 445Asp Asn Glu Pro Gly Ile Glu Met Gln Val Glu Asn Leu Glu Leu Pro450 455 460Val Asn Pro Ser Ser Val Val Ser Glu Arg Ile Ser Ser Val465 470 47权利要求
1.一种化合物，其结构如下所示
2.一种化合物，其结构如下所示
3.一种组合物，其含有权利要求1所述的化合物。
4.一种组合物，其含有权利要求2所述的化合物。
5.一种化合物，其结构如下所示
6.一种化合物，其结构如下所示
7.一种组合物，其含有权利要求5所述的化合物。
8.一种组合物，其含有权利要求6所述的化合物。
9.一种化合物，其结构如下所示 其中W是F、Cl、Br、I、C1～8直链或支链烷基、C3～8环烷基、C4～9烷基环烷基、或C2～8链烯基；X是O或S或NR2；Y是NR3R4或(CH2)mR5或O(CH2)nR6m是包括0和4在内的0到4之间的整数；n是包括0和4在内的0到4之间的整数；Z是H、C1～8直链或支链烷基、C3～8环烷基、C4～9烷基环烷基、或C2～8链烯基；R1,R2,R4和R10各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C3～8环 烷基、C4～9烷基环烷基、或C2～8链烯基；R4，R5，和R6各自独立地选自C1～8直链或支链烷基，C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基、或CH2芳基；其中在所述C1～8直链或支链烷基、C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基或CH2芳基中的每一结构部分可在任何位置被至多4个取代基任选取代，所述每一取代基各自独立地选自H，F，Cl，Br，I，R7，CF3，CF2R7，CF2CF2，CCl3，CCl2R7，CCl2CCl2R7，NR8R9，NR10COR7，NR10SO2R7，OR7，OCF3，OCF2R7，OCF2CF2R7，OCOR7，OSO2R7，OPO(OR7)2，SR7，SCF3，SCF2R7，SCF2CF2R7，SCOR7，SO3R7，SO2NR8R9，PO(OR7)3，PO(OR7)2R7，NO2，CN，CNR10(NR8R9)，CNR10(SR7)，COOR7，COSR7，CONR8R9，条件是当R4，R5，或R6含有在芳基环的至少两个相邻位置上被取代的芳基环时，则所述两个相邻位置可一起选自SCH2S、SCH2CH2S、OCH2O或OCH2CH2O以形成双环结构；R7是H，C1～8直链或支链烷基，C3～8环烷基、C4～9烷基环烷基、C2～8链烯基，芳基或烷基芳基；和R8和R9各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基、或CH2芳基；其中在所述C1～8直链或支链烷基、C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基或CH2芳基中的每一结构部分可在任何位置被至多4个取代基任选取代，所述每一取代基各自独立地选自F，Cl，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC5H11，SC6H11，SC6H13，，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，以及条件是当R8或R9中的一个或两者含有在芳基环的至少两个相邻位置上被取代的芳基环时，则所述两个相邻位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O，或OCH2CH2O以形成双环结构；或者R8和R9可一起形成5、6或7元环结构的一部分，其中所述结构是饱和的或不饱和的，进一步地所述的结构含有选自O、N或S的至多4个杂原子，并且再进一步地所述环结构中的每一结构部分在任意位置被至多4个取代基任选取代，所述取代基各自独立地选自F，Cl，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC5H11，SC6H11，SC6H13，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，以及条件是当R8和R9形成在芳基环的至少两个相邻的位置被取代的芳基环时，则所述的两个相邻位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O，或OCH2CH2O以形成双环结构。
10.一种组合物，其含有权利要求9的化合物。
11.一种化合物，其结构如下所示 其中X＝O或S；Z是H或CH3；R3和R10各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C3～8环烷基、C4～9烷基环烷基、或C2～8链烯基；R11是H，F，Cl，Br，I，R7，CF3，CCl3，NR8R9，NR10COR7，NR10SO2R7，OR7，OCF3，OCOR7，OSO2R7，SR7，SCF3，SCOR7，SO3R7，SO2NR8R9，NO2，CN，COOR7，COSR7，CONR8R9，条件是当与R11相邻的位置被取代时，则R11和所述相邻的位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O或OCH2CH2O以形成双环结构；R7是H，C1～8直链或支链烷基，C3～8环烷基，C4～9烷基环烷基，C2～8链烯基，芳基或烷基芳基；R8和R9各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C2～8链烯基或环烷基，或烷基环烷基，或芳基或CH2芳基；其中在所述C1～8直链或支链烷基、C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基或CH2芳基中的每一结构部分可在任何位置被至多4个取代基任选取代，所述每一取代基各自独立地选自F，C1，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC6H11，SC6H11，SC6H13，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，以及条件是当R8或R9中的一个含有在芳基环的至少两个相邻位置上被取代的芳基环时，则所述两个相邻位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O，或OCH2CH2O以形成双环结构；R12，R13，R14，和R15各自独立地选自F，C1，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC5H11，SC6H11，SC6H13，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，以及条件是当R12，R13，R14和R15中的任意两个相邻的位置是被取代的时候，所述两个相邻的位置可一起进一步选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O，或OCH2CH2O以形成双环结构；和条件是R12，R13，R14和R15中至少两个必须是H。
12.权利要求11的化合物，其结构如下所示 其中X＝O或S；Z是H或CH3；R3和R10各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C3～8环烷基、C4～9烷基环烷基、或C2～8链烯基；R11是H，F，Cl，Br，I，R7，CF3，CCl3，NR8R9，NR10COR7，NR10SO2R7，OR7，OCF3，OCOR7，OSO2R7，SR7，SCF3，SCOR7，SO3R7，SO2NR8R9，NO2，CN，COOR7，COSR7，CONR8R9，条件是当与R11相邻的位置被取代时，则R11和所述的相邻位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O，或OCH2CH2O以形成双环结构；R7是H，C1～8直链或支链烷基，C3～8环烷基，C4～9烷基环烷基，C2～8链烯基，芳基或烷基芳基；R8和R9各自独立地选自H，C1～8直链或支链烷基，C2～8链烯基或环烷基，或烷基环烷基，或芳基或CH2芳基；其中在所述C1～8直链或支链烷基、C2～8链烯基或环烷基、或烷基环烷基、或芳基或CH2芳基中的每一结构部分可在任何位置被至多4个取代基任选取代，所述每一取代基各自独立地选自F，Cl，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC5H11，SC6H11，SC6H13，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，以及条件是当R8或R9中的一个含有在芳基环的至少两个相邻位置上被取代的芳基环时，则所述两个相邻位置可一起选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O或OCH2CH2O以形成双环结构；R12，R13，R14和R15各自独立地选自F，Cl，Br，I，CF3，CCl3，CH3，C2H5，C3H7，C4H9，NH2，NHCH3，N(CH3)2，NHC2H5，N(C2H5)2，NHC3H7，N(C3H7)2，NHC4H9，N(C4H9)2，NHCOH，NHCOCH3，NHCOC2H5，NHCOC3H7，NHCOC4H9，NHSO2CH3，NHSO2C2H5，NHSO2C3H7，NHSO2C4H9，OH，OCH3，OC2H5，OC3H7，OC4H7，OC4H9，OC5H9，OC5H11，OC6H11，OC6H13，OCF3，OCOCH3，OCOC2H5，OCOC3H7，OCOC4H9，OSO2CH3，OSO2C2H5，OSO2C3H7，OSO2C4H9，SH，SCH3，SC2H5，SC3H7，SC4H7，SC4H9，SC5H9，SC5H11，SC6H11，SC6H13，SCF3，SCOCH3，SCOC2H5，SCOC3H7，SCOC4H9，SO3CH3，SO3C2H5，SO3C3H7，SO3C4H9，SO2NH，SO2NH2，SO2NHCH3，SO2N(CH3)2，SO2NHC2H5，SO2N(C2H5)2，SO2NHC3H7，SO2N(C3H7)2，SO2NHC4H9，SO2N(C4H9)2，NO2，CN，COOCH3，COOC2H5，COOC3H7，COOC4H9，COSCH3，COSC2H5，COSC3H7，COSC4H9，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，CONHC2H5，CON(C2H5)2，CONHC3H7，CON(C3H7)2，CONHC4H9，CON(C4H9)2，以及条件是当R12，R13，R14和R15中的任意两个相邻的位置是被取代的时候，所述两个相邻的位置可一起进一步选自SCH2S，SCH2CH2S，OCH2O，或OCH2CH2O以形成双环结构；和条件是R12，R13，R14和R15中至少两个必须是H。
13.一种组合物，其含有权利要求11所述的化合物。
14.一种组合物，其含有权利要求12所述的化合物。
全文摘要
本发明公开的是非内源性、组成型活化形式的人5－HT
文档编号C07D231/12GK1411448SQ00817253
公开日2003年4月16日 申请日期2000年10月13日 优先权日1999年10月15日
发明者多米尼克·P·比汉, 奈杰尔·R·A·比利, 德里克·T·查默斯, 理查德·J·福斯特, 罗伯特·C·格伦, 迈克尔·S·劳利斯, 蓁·W·廖, 求恩·刘, 弗里德里克·门扎奇, 约瑟夫·F·鲁索, 朱利安·R·史密斯, 威廉·J·汤姆森 申请人:阿瑞那制药公司, 台甫公司