专利名称：活性炭吸咐柱一次性分离十四种氨基酸的方法
技术领域：
本发明涉及从蛋白质水解液中分离氨基酸，特别是高收得率地分离一些难于分离的氨基酸的方法。
目前，从蛋白质水解液中分离氨基酸仍沿用传统方法，由于大多数品种的氨基酸的理化性质近似，甚至相同，无法将它们逐一分开。一般是利用某种氨基酸在十七种氨基酸混合液中的相对量大，溶解度小的特点，才把它从混合液中放开；或者是利用某种氨基酸分子与某特殊结构的化学物质络合沉淀而分开。这样的分离结果，获得的氨基酸品种少，收得率低。混在酸性水溶液中的氨基酸品种多，数量大，则无法利用，造成严重浪费，排放又造成环境污染。尽管CN85102242A专利申请“水解蛋白质分离氨基酸方法”，是将蛋白质水解液先直接通过活性炭吸附柱分离成A、B两部分，A部分经解脱后再经树脂柱最后分离成九种单一氨基酸品种；B部分尚有八种氨基酸未被分离出来，排放而浪费了。
本发明的目的是采用新的技术工艺，进一步提高氨基酸收得率和增加单一氨基酸的品种数。
本发明与CN85102242A现有技术比较，大幅度提高了该种色层分离技术工艺，其特征是把蛋白质水解液经稀释和调节酸碱度后，一次性流经活性炭吸附柱，接着经水洗、酸性溶液和碱性乙醇溶液解脱，连续分段收集。相继得到丙组份、脯组份、亮组份、精氨酸溶液。再用以下方法处理，最后将各组份氨基酸逐一分离成单一的氨基酸溶液将丙组份和脯组份氨基酸溶液分别流经717阴离子树脂交换柱，相继分离出①天门冬氨基酸；②谷氨酸；③丝氨酸；④苏氨酸；⑤甘氨酸；⑥缬氨酸；⑦脯氨酸；⑧赖氨酸；⑨丙氨酸等九种单一氨基酸。
将亮组份用邻二甲苯-4-磺酸沉淀出①亮氨酸后的氨基酸混合液再流经717阴离子树脂交换柱，相继分离出②蛋氨酸；③异亮氨酸；④组氨酸。
本发明的优点是对蛋白质水解液中的氨基酸进行了全分离过程，使分离到的氨基酸品种数在专利申请号85102242的九种基础上增加到十四种，总得率从41％增加到52.1％，所以，本发明的分离效果好，收得率高。
本发明下面将结合实例作进一步详述以100克人发置于800毫升圆底烧瓶中，加入250毫升盐酸，加温至110℃以上，并水解10小时，然后收集水解转化生成的氨基酸混合液，加两倍清水稀释，液氨中和到PH值达7.0以上，然后让其流经4.0cm×20cm内装有GH-15颗粒活性炭的活性炭吸附柱，注入料液之后，接着以两倍炭柱体积的清水洗涤，继而以6至8倍炭柱体积0.05N-0.2N的盐酸和50％左右乙醇液解脱，分段收集流经活性炭吸附柱的溶液，分别得到丙组份、脯组份、亮组份、精氨酸的氨基酸分离溶液。再将丙组份和脯组份调至PH值10以上，让它们分别流经再生成H0-型的4.0cm×20cm717阴离子树脂交换柱，分离到①天门冬氨酸；②谷氨酸；③丝氨酸；④苏氨酸；⑤甘氨酸；⑥缬氨酸；⑦脯氨酸；⑧赖氨酸；⑨丙氨酸的单一氨基酸的溶液，然后再分别蒸发浓缩，得到天门冬氨酸4.1克，谷氨酸9.9克，丝氨酸6.1克，苏氨酸4.2克，甘氨酸2.5克，丙氨酸2.3克，缬氨酸3.2克，脯氨酸4.8克，赖氨酸1.8克；用邻二甲苯4-磺酸沉淀出①亮氨酸4.6克；剩下的混合液调PH值10以上让其流经2.0cm×10.0cm的OH-型717阴离子树脂交换柱，分离出①蛋氨酸0.4克，②异亮氨酸1.6克；将精氨酸溶液调PH值8.0让其流经2.0cm×10.0cm的H+型732阳离子树脂交换柱，得到①精氨酸6.2克，②组氨酸0.4克。以上十四种单一氨基酸总量为52.1克，总收得率为52.1％。
文献现有技术中国发明专利申请号8510224权利要求
1.水解蛋白质分离氨基酸的方法，其特征是将蛋白质水解液加水稀释2至4倍，并用液氨中和到PH值7.0以上后，让其直接进入活性炭吸附柱。氨基酸液全部流经活性炭柱后，以活性炭柱2倍体积清水流经洗涤，接着以4至6倍活性炭柱体积的0.05N-0.2N盐酸液流经活性炭柱，最后以1倍活性炭柱体积的0.2N盐酸液和50％左右乙醇液流经活性炭柱。分段收集全部流经活性炭柱的氨基酸分离液，经分析判断出丙组份、脯组份、亮组份、组氨酸、精氨酸等。①让丙组份和脯组份分别流经717阴离子树脂柱，分离得到丝氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、缬氨酸、脯氨酸和赖氨酸等九种单一氨基酸；②用邻二甲苯-4-磺酸络合沉淀分离亮组份液得到亮氨酸、异亮氨酸和蛋氨酸。
2.根据权利要求1所述的水解蛋白质分离氨基酸方法，其特征蛋白质为人发、猪毛等角质蛋白质，或是畜血粉、明胶、骨胶、残丝、蚕蛹蛋白、植物油饼等低价值的蛋白质。
3.根据权利要求1所述的水解蛋白质分离氨基酸的方法，其特征是分离氨基酸混合液成单一氨基酸的设备是活性炭吸附柱和717阴离子交换柱等色层分离装置。
4.根据权利要求1所述的水解蛋白质分离氨基酸的方法，其特征是分离介质为活性炭、717阴离子树脂、邻二甲苯-4-磺酸等物质。
5.根据权利要求1所述的水解蛋白质分离氨基酸的方法，其特征作为分离解脱液是水、0.05N-0.2N盐酸液、50％左右乙醇的0.2N盐酸混合液以及1N氨液的70％-90％乙醇混合液。
6.根据权利要求1、3、4、5所述的水解蛋白质分离氨基酸的方法，其特征是采用分段收集法收集分离到的氨基酸溶液。
全文摘要
动植物蛋白质水解液经稀释和调节酸碱度，一次性流经活性炭吸附柱，用水、酸液、乙醇配成解脱剂，连续分段收集，将丙组份、组份和亮组份的氨基酸混合解脱液，让其流经阴离子交换柱；精氨酸混合解脱液流经阳离子交换柱，细分出单一品种的氨基酸。以人发为蛋白质水解原料，用本发明工艺方法进行色层分离，获得14种单一氨基酸，总率为 52.1％。
文档编号C07C227/00GK1515543SQ0213492
公开日2004年7月28日 申请日期2002年10月10日 优先权日2002年10月10日
发明者邹学满 申请人:黄洪锐, 邹学满