专利名称：N－羟基甲脒衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及抑制由花生四烯酸生物合成的20-羟基二十碳四烯酸(20-HETE)的生成酶的N-(4-烷基取代苯基)-N’-羟基甲脒衍生物。
背景技术：
作为由花生四烯酸产生的生理活性物质，通过环氧化酶生成的前列腺素类和通过脂肪氧化酶生成的白细胞三烯类是众所周知的。但是，近年来，通过细胞色素p450类酶类由花生四烯酸生成的20-HETE在机体内显示了多种多样的作用这一点也渐渐为人所知。目前已知20-HETE可以在肾脏、脑血管等主要器官中引起微血管收缩或舒张并可引起细胞增殖，在机体中具有重要生理作用的同时还与各种肾病、脑血管疾病、循环器官疾病等的疾病有着密切的联系(J.VascularResearch，第32卷，79页，1995年、Am.J.Physiol.，第277卷，R607页，1999年、Physiol.Rev.，第82卷，131页，2002年)。
在这样的背景下，据报道N’-羟基苯基甲脒衍生物或羧酸衍生物具有强20-HETE生成酶抑制作用(国际专利公开WO0132164、WO01096309、WO0168610号说明书、日本公开专利公报JP01354658、JP01354646号说明书)。
发明内容
本发明的目的是提供抑制与在肾脏、脑血管等主要器官中引起微血管收缩或舒张、或引起细胞增殖等相关的20-HETE生成的药物。
本发明人以解决上述课题为目的刻苦探索研究的结果，意外地发现具有某种特异的部分结构的芳香族化合物，即N-(4-烷基取代苯基)-N’-羟基甲脒衍生物具有选择性抑制20-HETE生成酶的作用，完成了本发明。即本发明提供如下结构式
(式中，R1所示为氢原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤素原子，A为C1-10亚烷基或如下式 (式中，m、n和p分别为0-4的整数。)所示的基团，R为如下基团N，N-二C1-6烷基氨基、二噁烷基、C1-4烷基取代的二噁烷基，C1-4烷氧基C1-4烷氧基或式 (式中s和t分别为1-4的整数，B为亚甲基、氧原子、硫原子、氮原子、C1-4烷基取代的氮原子、苯基取代的氮原子或苄基取代的氮原子，R2为氢原子或C1-4烷基，r表示0-2的整数。)所示的基团。)所示的N-羟基甲脒衍生物或其药学上可接受的盐。
此外本发明，提供下式 (式中，A’为C1-10亚烷基，R’为N，N-二C1-6烷基氨基、吡咯烷基、二噁烷基、C1-4烷基取代的二噁烷基或C1-4烷氧基C1-4烷氧基)表示的N-羟基甲脒衍生物或其药学可接受的盐。
此外本发明，提供以N-羟基甲脒衍生物或其药学可接受的盐作为有效成分的药物。
此外本发明，提供作为20-HETE生成酶的抑制剂的N-羟基甲脒衍生物。
此外本发明，提供以N-羟基甲脒衍生物或其药学可接受的盐作为有效成分的肾病、脑血管疾病或循环器官疾病治疗药。
本发明中使用的用语定义如下。
本发明中，[Cx-y]表示，其后面连接的基团含有x-y个碳原子。
C1-4烷基的意思是含有1-4个碳原子的直链或支链烷基，例如，可举出甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基等。C1-4烷氧基的意思为含有1-4个碳原子的直链或支链烷氧基，例如，可举出甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基等。
作为N，N-二C1-6烷基氨基可以举出N，N-二甲基氨基、N，N-二乙基氨基等。
式 表示的基团为C3-7的环烷上连接两个亚烷基或连接键，优选p为0-3，m和n为1-3，如下面基团等所示。
二噁烷基表示含有2个氧原子作为杂原子的饱和六元环(二噁烷)，优选由1，3-二噁烷环脱氢衍生的1价基团。
C1-4烷基取代的二噁烷基，其基团的环也可被C1-6烷基取代，例如，5，5-二甲基-1，3-二噁烷-2-基等。
C1-4烷氧基C1-4烷氧基为具有由C1-4烷氧基与C1-4烷氧基复合成的基团。优选如，甲氧基乙氧基、乙氧基乙氧基、正丁氧基乙氧基、异丁氧基乙氧基等基团。
C1-10亚烷基表示具有1-10个碳原子的直链或支链亚烷基，例如，亚甲基、甲基亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚庚基、2，2-二甲基亚丙基、3，3-二甲基亚丙基、亚己基等。其中，优选亚乙基、3，3-二甲基亚丙基。
式 表示的基团为，如吡咯子基(限1位)、哌啶子基、吗啉代、硫代吗啉代、4-甲基哌嗪-1-基、3，5-二甲基吗啉代等。
此外，作为药学可接受的盐为，与碱金属、碱土金属、铵、烷基铵等的盐、与无机酸或有机酸形成的盐，例如，钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、铝盐、三乙基铵盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、甲酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、乙基琥珀酸盐、乳糖醛酸盐、葡糖酸盐、葡庚糖酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、十二烷基硫酸盐、苹果酸盐、天冬氨酸盐、谷氨酸盐、己二酸盐、与半胱氨酸形成的盐、与N-乙酰半胱氨酸形成的盐、盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、氢碘酸盐、烟酸盐、草酸盐、苦味酸盐、硫氰酸盐、十一烷酸盐、与丙烯酸聚合物形成的盐、与羧基乙烯基聚合物形成的盐等。
本发明的化合物，可按照如下所示的方法合成。
制备方法1 (式中，B、R1、R2、r、s和t意义同前，R21和R22为C1-4烷基或两者一体化形成的C3-7环烷环)利用Mannich反应合成的醛1和苄基膦酸二乙酯等Horner-Emons试剂，在适当的溶剂(四氢呋喃、乙醚、甲苯、N，N-二甲基甲酰胺等)中，在适当的碱(正丁基锂、三乙基胺、N，N-二异丙基乙基胺、氢化钠、甲醇钠、叔丁氧基钾等)的存在下，-78℃-室温条件下反应1-24小时，可制备化合物2。然后，化合物2在披钯活性炭、氢氧化钯等催化剂的存在下，在适当的溶剂(甲醇、乙醇、丙醇、四氢呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、乙腈、乙酸乙酯)中，氢气氛下反应，可以制备化合物3。然后，化合物3在发烟硝酸-浓硫酸、硝酸钾-浓硫酸、或硝酸2铵铈(IV)-浓硫酸等条件下硝化，可制备硝化衍生物4。然后，将化合物4在适当的溶剂(甲醇、乙醇、丙醇、四氢呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、乙腈、乙酸乙酯等)中，采用还原剂(披钯活性炭/氢气氛下、披钯活性炭/水合肼、披钯活性炭/甲酸铵、氯化锡(II)1水合物、铁/氯化铵、阮内镍/水合肼等，优选披钯活性炭/氢气氛下)通过还原硝基可制备苯胺衍生物5。
然后，将化合物5在适当的溶剂中(甲醇、乙醇、丙醇、四氢呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、乙腈、乙酸乙酯等)，与N，N-二甲基甲酰胺缩二甲醇在室温-150℃，优选70℃-100℃下反应2-72小时。此处得到的中间体在适当的溶剂中(甲醇、乙醇、丙醇、四氢呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、乙腈、乙酸乙酯等)，经盐酸羟铵处理，可制备本发明化合物6。或将化合物5与原甲酸三甲酯、原甲酸三乙酯等原甲酸酯类，在催化剂量的乙酸等有机酸、盐酸等无机酸或吡啶盐酸盐等的存在下或非存在下反应得到中间体。反应温度为室温-150℃，优选70℃-100℃下反应2-72小时。将其分离或未经分离，并与羟胺在适当的溶剂中(甲醇、乙醇、丙醇、四氢呋喃、二噁烷、甲苯、二氯甲烷、氯仿、乙腈、乙酸乙酯等)处理，可制备本发明化合物6。
此外，按照文献(Org Chem第53卷，第3309项，1988年)记载的方法合成的、如下式
(式中，R21和R22与上述意义相同)所示的化合物由和式 (式中，B、R2、r、s和t与上述意义相同)所示胺类经还原的烷基化反应得到的合成中间体3，使用该合成中间体3以同样的方法制备本发明化合物6。
制备方法2按照文献(Org Letter第4卷，第1951项，2002年)记载的方法合成的如下式 (式中，式中，B、R2、r、s和t与上述意义相同，R31和R32为C1-4烷基或由两者一体化形成C3-7环烷环。)所示的化合物通过Wolff-Kishner反应等还原，或按照文献(Tetrahedron，第46卷，第2111项，1990年)记载的方法合成如下式 (式中R31和R32与上述意义相同)所示化合物与式
(式中，B、R2、r、s和t与上述意义相同。)所示的胺类经还原的烷基化反应得到如下式 (式中，B、R2、r、s、t、R31和R32与上述意义相同)所示的合成中间体，利用该中间体，按照制备方法1所示的方法可以合成式 (式中，B、R2、r、s、t、R31和R32与上述意义相同。)所示的本发明的化合物。
制备方法3 2-(4-硝基苯基)丙二酸二甲酯(7)与式R23OH；(式中，R23为C1-4烷氧基C1-3烷基、N，N-二C1-6烷基氨基C1-9烷基或下式
(式中B、R2、r、s、t、m和p与上述意义相同，q表示0-3的整数)所示的醇利用光延反应(Mitsunobu reaction)缩合，可合成化合物8(Tetrahedron Lett.，第42卷，第8395项，2001年)。然后化合物8在适当的溶剂(N，N-二甲基乙酰胺、DMSO、DMSO-H2O等)中，使与NaCl或MgCl2·6H2O反应可合成化合物9。反应温度为100-150℃，反应时间为5-24小时(Synthesis，第12卷，第1659项，2000年)。然后，按制备方法1所述的相同方法还原硝基，可合成苯胺衍生物10。最后按制备方法1所述的相同方法合成羟基甲脒，可制备本发明化合物11。
实施本发明的最佳方式以下，列举实施例更详细地说明本发明。
实施例1N-[4-(4-N，N-二甲基氨基-3，3-二甲基-丁基)苯基]-N’-羟基甲脒的制备(1)在盐酸二甲胺(10.8g，0.132mol)和2-丙醇(62mL)的混合物中加入低聚甲醛(8.7g)和异丁醛(12mL，0.132mol)。反应混合物在加热回流下，搅拌一昼夜。冷却到室温后，浓缩反应液。残渣中加入饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯(100mL×5)提取。合并的有机层用无水硫酸镁干燥，减压浓缩，得到3-二甲氨基-2，2-二甲基丙醛(8.4g)，是无色油状物。
(2)苄基膦酸二乙酯(7.4g，0.0325mol)与THF(32mL)混合物冷却至-78℃，在氮气流下加入1.6M正丁基锂的正己烷溶液(19.4mL，0.0311mol)。15分钟后滴加3-二甲氨基-2，2-二甲基丙醛(3.5g，0.0271mol)的THF溶液(20mL)。搅拌30分钟后，反应液升温至室温，加水(50mL)，用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤后，用无水硫酸镁干燥，减压浓缩。残渣用NH硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝96∶4)精制，得到(2，2-二甲基-4-苯基-3-丁烯基)二甲胺(3.3g)，是无色油状物。
(3)(2，2-二甲基-4-苯基-3-丁烯基)二甲胺(3.0g，0.015mol)的甲醇溶液中加入10％披钯活性炭(0.3g)，氢气氛下搅拌一昼夜。不溶物通过硅藻土过滤，浓缩滤液，得到(2，2-二甲基-4-苯基丁基)二甲胺(2.9g)，是无色结晶。
(4)(2，2-二甲基-4-苯基丁基)二甲胺(2.9g，0.014mol)在浓硫酸(15mL)和氯仿(29mL)的混合液中，冰浴下，边激烈搅拌边缓缓滴加发烟硝酸(0.58mL，0.014mol)。十分钟后，在反应液中加入5M氢氧化钠(90mL)，调整反应液pH值至8.0。然后，反应液中加入水(500mL)，用乙酸乙酯萃取2次。合并有机层用无水硫酸镁干燥，减压浓缩。残渣用NH硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝92∶8)精制，得到[2，2-二甲基-4-(4-硝基苯基)丁基]二甲胺和[2，2-二甲基-4-(2-硝基苯基)丁基]二甲胺的混合物(10∶1；0.45g)，是黄色油状。
(5)[2，2-二甲基-4-(4-硝基苯基)丁基]二甲胺(400mg，1.60mmol)的甲醇溶液中加入10％披钯活性炭(40mg)，在氢气氛下搅拌3小时。不溶物通过硅藻土过滤，浓缩滤液，得到4-(4-二甲氨基-3，3-二甲基丁基)苯胺(290mg)，是红色油状物。
然后，4-(4-二甲氨基-3，3-二甲基丁基)苯胺(200mg，0.908mmol)的甲醇溶液(4mL)中加入N，N-二甲基甲酰胺缩二甲醇(0.48mL，3.6mmol)，加热回流下，搅拌一昼夜。反应液冷却到室温后，加入盐酸羟铵(315mg，4.54mmol)，室温下搅拌78小时。浓缩反应混合物，加入2.5M氢氧化钠，用乙酸乙酯萃取3次。合并有机层用无水硫酸镁干燥，减压浓缩。残渣用己烷-乙酸乙酯的混合溶液重结晶，得到无色粉末状的目标化合物(68mg)1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.87(s，6H)，1.39-1.45(m，2H)，2.08(s，2H)，2.23(s，6H)，2.38-2.44(m，2H)，6.98-7.05(m，4H)，7.38(d，J＝10.7Hz，1H)，8.39(d，J＝10.7Hz，1H)，9.73(s，1H)熔点124.0-126.0℃实施例2
N-[4-(N，N-二乙氨基-3，3-二甲基-丁基)苯基]-N’-羟基甲脒的制备用实施例1相同的方法合成目标化合物。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.86(s，6H)，0.93(t，J＝7.2Hz，6H)，1.42-1.36(m，2H)，2.17(s，2H)，2.39-2.45(m，2H)，2.47-3.31(m，4H)，6.98-7.05(m，4H)，7.38(d，J＝10.7Hz，1H)，8.39(d，J＝10.7Hz，1H)，9.75(s，1H)熔点95.5-97.5℃(无色粉末)实施例3N-[4-(4-吡咯烷-1-基-3，3-二甲基-丁基)苯基]-N’-羟基甲脒的制备用实施例1相同的方法合成目标化合物。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.40-1.46(m，2H)，1.64-1.68(m，4H)，2.29(s，2H)，2.53-2.58(m，2H)，6.98-7.05(m，4H)，7.38(d，J＝10.7Hz，1H)，8.39(d，J＝10.7Hz，1H)，9.75(s，1H)熔点120.0-121.5℃(无色粉末)实施例4N-[4-(4-N，N-二乙氨基丁基)苯基]-N’-羟基甲脒的制备(1)4-(4-硝基苯基)丁酸(1.0g，4.78mmol)与二乙胺(0.699g，9.56mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入盐酸N-乙基-N’-3-二甲氨基丙基碳二亚胺(1.37g，7.17mmol)和1-羟基苯并三唑1水合物(0.969g，7.17mmol)，室温下搅拌24小时。反应液中加入水，用乙酸乙酯萃取2次。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到N，N-二乙基-4-(4-硝基苯基)丁酰胺(1.4g)，是淡黄色油状物。
在N，N-二乙基-4-(4-硝基苯基)丁酰胺(1.4g)与THF(14mL)的混合溶液中滴加1M BH3·THF(9.6mL)，室温下搅拌一昼夜。再滴加1M BH3·THF(7.0mL)，室温下搅拌6小时后，反应液中加入50％醋酸(3mL)。浓缩反应液，加入饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取2次。合并的有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到二乙基-[4-(4-硝基苯基)丁基]胺(1.74g)，是淡黄色油状物质。
(3)二乙基-[4-(4-硝基苯基)丁基]胺(1.74g)的甲醇溶液中加入10％披钯活性炭(0.3g)，氢气氛下搅拌3小时。不溶物用硅藻土过滤，浓缩其滤液。残渣用NH硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)精制，得到4-(4-二乙氨基丁基)-苯胺(998mg)，是油状物。
(4)4-(4-二乙氨基丁基)-苯胺(676mg，3.12mmol)的甲醇溶液(4mL)中加入N，N-二甲基甲酰胺缩二甲醇(0.83mL，6.2mmol)，加热回流下，搅拌1小时。反应液冷却至室温后，加入盐酸羟铵(433mg，6.24mmol)，室温下搅拌90小时。浓缩反应混合物，加入饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯萃取2次，再用氯仿萃取5次。合并有机层用无水硫酸镁干燥，减压浓缩。残渣用NH硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝5∶95)精制。将得到的固体用己烷-乙酸乙酯混合溶剂重结晶，得到无色粉末状的目标化合物(314mg)。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.92(t，J＝7.3Hz，6H)，1.24-1.60(m，4H)，2.26-2.45(m，8H)，6.99-7.08(m，4H)，7.39(d，J＝11.0Hz，1H)，8.42(d，J＝11.0Hz，1H)，9.77(s，1H)熔点110.0-113.0℃实施例5N-{4-[3-(2-甲氧基乙氧基)丙基]苯基}-N’-羟基甲脒的制备(1)在三苯膦(4.81g，18.3mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中，冷却至0℃后，依次加入偶氮二甲酸二乙酯(40％甲苯溶液；7.99g，18.3mmol)和二甘醇一甲醚(2.21g，18.4mmol)。升温至室温，搅拌30分钟。再冷却至0℃，滴加2-(4-硝基苯基)丙二酸二甲酯(3.10g，12.2mmol)的四氢呋喃溶液(50mL)。升温至室温后，室温下搅拌一夜，然后在60℃下使反应5.5小时。在反应混合物中加入乙酸乙酯，用饱和氯化纳水溶液洗涤后，用无水硫酸镁干燥。将减压浓缩得到的残渣次序经过硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝4∶1-2∶1)，NH硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝4∶1)精制，得到2-[2-(2-甲氧基乙氧基)乙基]-2-(4-硝基苯基)丙二酸二甲酯(1.80g)，是淡黄色油状物。
(2)在2-[2-(2-甲氧基乙氧基)乙基]-2-(4-硝基苯基)丙二酸二甲酯(1.13g，3.2mmol)的N，N-二甲基乙酰胺(6mL)溶液中，加入氯化镁6水合物(1.30g，6.4mmol)，在150℃下反应10小时。反应液冷却至室温后，加入乙酸乙酯，用饱和氯化钠水溶液洗涤。有机层用无水硫酸镁干燥后，将减压浓缩得到的残渣经硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝4∶1-2∶1)精制，得到1-[3-(2-甲氧基乙氧基)丙基]-4-硝基苯(0.52g)，是黄色油状物。
(3)在1-[3-(2-甲氧基乙氧基)丙基]-4-硝基苯(0.49g，2.1mmol)的甲醇(10mL)溶液中，加入5％披钯活性炭(0.20g)，在氢气氛下，室温下搅拌1小时。通过TLC分析确认原料消失后，用硅藻土过滤不溶物后，将滤液减压浓缩。得到的残渣经硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝7∶3-1∶1)精制，得到4-[3-(2-甲氧基乙氧基)丙基]苯胺(0.38g)，是淡黄色油状物。
(4)在4-[3-(2-甲氧基乙氧基)丙基]苯胺(0.20g，0.97mmol)的甲醇(5mL)溶液中，加入N，N-二甲基甲酰胺缩二甲醇(0.24g，2.0mmol)，100℃下反应4.5小时。反应液冷却至室温后，加入1盐酸羟铵(0.14g，1.9mmol)，室温下搅拌一夜。然后再加入1盐酸羟铵(0.067g，0.96mmol)，室温下反应1.5小时，50℃下反应5.5小时。反应液冷却至室温后，加入饱和氯化钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥后，将减压浓缩得到的残渣经NH硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1-1∶2)精制，得到目标化合物(0.14g)，是淡绿色的油状物。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.66-1.78(m，2H)，3.25(s，3H)，3.26-3.39(m，4H)，3.40-3.51(m，4H)，7.00-7.10(m，4H)，7.40(d，J＝10.7Hz，1H)，8.42(d，J＝10.7Hz，1H)，9.76(s，1H)
实施例6N-{4-[6-(N，N-二甲氨基)己基]苯基}-N’-羟基甲脒的制备以5-(N，N-二甲氨基)戊醇代替二甘醇一甲醚作为起始原料按照实施例5相同的方法合成目标化合物。
熔点96.0-97.0℃(无色粉末)实施例7N-{4-[2-(5，5-二甲基-[1，3]二噁烷-2-基)乙基]苯基}-N’-羟基甲脒的制备(1)4-硝基肉桂酸乙酯(3.18g，14.4mmol)的四氢呋喃(30mL)溶液中，在-78℃下滴加氢化二异丁基铝(1.0M甲苯溶液；14.4mL，14.4mmol)，保持在-78℃下搅拌1小时。然后加入氢化二异丁基铝(1.0M甲苯溶液；28.7mL，28.7mmol)，在-78℃下反应30分钟。在反应液中缓缓加入1M盐酸水溶液，用乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸镁干燥。减压浓缩后，得到的残渣经硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1-1∶3)精制，得到3-(4-硝基苯基)丙基-2-烯-1-醇(2.16g)的黄色粉末。
熔点124.5-126.0℃(2)在3-(4-硝基苯基)丙基-2-烯-1-醇(0.67g，3.8mmol)的二氯甲烷(40mL)溶液中，加入活性二氧化锰(5.01g)，室温下反应2小时。不溶物用硅藻土过滤，不溶物用氯仿洗涤。减压浓缩滤液，得到的残渣经硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝6∶1-3∶1)精制，得到3-(4-硝基苯基)丙烯醛(0.55g)，是淡黄色粉末。
熔点140.0-141.5℃(3)在3-(4-硝基苯基)丙烯醛(0.51g，2.9mmol)的苯(40mL)溶液中，加入对甲苯磺酸1水合物(0.059g，0.3mmol)、2，2-二甲基丙烷-1，3-二醇(0.36g，3.5mmol)，回流加热条件下，使反应5小时。反应液冷却到室温，加饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)，用乙酸乙酯(100mL)萃取2次。将合并的有机层用无水硫酸镁干燥后，减压浓缩，得到的残渣经硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝9∶1-6∶1)精制，得到5，5-二甲基-2-[2-(4-硝基苯基)乙烯基]-[1，3]二噁烷(0.73g)，是无色粉末。
熔点86.5-88.5℃
(4)在5，5-二甲基-2-[2-(4-硝基苯基)乙烯基]-[1，3]二噁烷(0.64g，2.4mmol)的甲醇(20mL)溶液中，加入5％披钯活性炭(0.26g)，在氢气氛下，在室温下搅拌4小时。经TLC分析确认原料消失后，用硅藻土过滤不溶物，减压浓缩滤液。得到的残渣经硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝4∶1-2∶1)精制，得到4-[2-(5，5-二甲基-[1，3]二噁烷-2-基)乙基]苯胺(0.48g)的无色粉末。
熔点93.5-94.5℃(5)在4-[2-(5，5-二甲基-[1，3]二噁烷-2-基)乙基]苯胺(0.32g，1.4mmol)的甲醇(10mL)溶液中，加入N，N-二甲基甲酰胺缩二甲醇(0.33g，2.8mmol)，在100℃下反应4小时。反应液冷却至室温后，加入1盐酸羟铵(0.14g，1.9mmol)，室温下搅拌一夜。然后加入盐酸羟铵(0.19g，2.8mmol)，使在室温下反应1小时，60℃下反应6.5小时。反应液冷却至室温后，加入饱和氯化钠水溶液，用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥后，将减压浓缩得到的残渣经NH硅胶柱层析(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1-1∶2)精制，得到目标化合物(0.25g)，是无色粉末。
熔点159.0-160.0℃实施例8N-{4-[3-(5，5-二甲基-[1，3]二噁烷-2-基)丙基]苯基}-N’-羟基甲脒的制备以4-(4-硝基苯基)丁酸代替乙基4-硝基肉桂酸乙酯作为起始原料采用与实施例7同样的方法合成目标化合物。
熔点138.0-140.0℃(无色粉末)实施例1-8中合成的化合物结构式如下所示。
实施例1 实施例5
试验例[对来自人肾脏微粒体的20-HETE生成酶的抑制作用]对上述记载的化合物，对抑制20-HETE生成的作用进行试验。
本试验按照J.Pharmacol.Exp.Ther.，第268卷，474页，1994年记载的方法进行。
将用DMSO配制的1μM的供试液，加入到含有5mM氯化镁和1mM乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)的50mM的3-吗啉代丙磺酸(MOPS)(pH7.4)缓冲溶液中，以人肾脏微粒体级分(Human CellCulture Center，Anatomic Gift Foundation)为酶源，以[5，6，8，9，11，12，14，15]氚-花生四烯酸为底物，然后添加NADPH作为辅酶，37度下反应1.5小时。在反应液中添加入甲酸使反应停止后，加入乙腈(终浓度50％)。采用装备有安装ODS柱(バイオシルC18，バイオラツド公司制)的放射性物质检测器的高效液相色谱测定20-HETE的生成量。以未添加化合物时的20-HETE生成量为100％，计算添加化合物时20-HETE生成被抑制50％时的化合物浓度(IC50)。其结果如表1所示。
表1
产业实用性本发明所述的化合物具有抑制20-HETE生成的作用，作为人和动物的与20-HETE相关的疾病，例如各种肾病、脑血管疾病、各种循环器官疾病的治疗药物是有用的。
权利要求
1.一种具有下式结构的N-羟基甲脒衍生物或其药学上可接受的盐， 式中，R1表示氢原子、C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤素原子，A为C1-10亚烷基或下式所示的基团， 式中，m、n和p分别为0-4的整数；R为如下基团N，N-二C1-6烷基氨基、二噁烷基，C1-4烷基取代的二噁烷基，C1-4烷氧基C1-4烷氧基或下式所示的基团 式中s和t分别为1-4的整数，B为亚甲基、氧原子、硫原子、氮原子、C1-4烷基取代的氮原子、苯基取代的氮原子或苄基取代的氮原子，R2为氢原子或C1-4烷基，r所示为0-2的整数。
2.一种具有下式结构的N-羟基甲脒衍生物或其在药学上可接受的盐， 式中，A’为C1-10亚烷基，R’为N，N-二C1-6烷基氨基、吡咯烷基、二噁烷基、C1-4烷基取代的二噁烷基或C1-4烷氧基C1-4烷氧基。
3.一种药物，其特征在于以权利要求第1项或第2项所述的N-羟基甲脒衍生物或其药学可接受的盐作为有效成分。
4.根据权利要求第3项所述的药物，该药物是20-HETE生成酶抑制剂。
5.根据权利要求第3项所述的药物，该药物是肾病、脑血管疾病或循环器官疾病治疗药物。
全文摘要
本发明提供一种N－羟基甲脒衍生物或其药学上可接受的盐，其化学结构式是用下式(1)表示的，(式中，R
文档编号C07C251/34GK1681775SQ0382179
公开日2005年10月12日 申请日期2003年9月11日 优先权日2002年9月12日
发明者佐藤正和, 柿沼浩行, 天田英明 申请人:大正制药株式会社