Mek的杂环抑制剂及其使用方法

专利名称：Mek的杂环抑制剂及其使用方法
背景技术：
1.发明领域本发明涉及一系列新型杂环化合物，所述化合物用于治疗哺乳动物中过度增殖性疾病，如癌症和炎症。本发明还涉及使用这些化合物治疗哺乳动物，特别是人中过度增殖性疾病的方法，本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物。
2.现有技术状况描述通过生长因子受体和蛋白激酶进行细胞信号传递是细胞生长、增殖和分化的重要调节形式。在正常的细胞生长中，生长因子(即PDGF或EGF等)通过受体活化激活MAP激酶途径。在参与正常及非受控细胞生长的MAP激酶途径中，Ras/Raf激酶途径是最重要且所知最清楚的途径之一。活性GTP-结合Ras导致Raf激酶的活化及间接磷酸化。然后，Raf在MEK1和MEK2的两个丝氨酸残基上对它们进行磷酸化(MEK1的S218和S222，MEK2的S222和S226)(Ahn等，Methodsin Enzymology，2001，332，417-431)。然后，激活的MEK使其唯一的已知底物MAP激酶ERK1和ERK2磷酸化。由MEK对ERK进行的磷酸化，对于ERK1而言发生在Y204及T202上，对于ERK2而言发生在Y185及T183上(Ahn等，Methods in Enzymology，2001，332，417-431)。磷酸化的ERK进行二聚，然后移位至细胞核，在细胞核处聚集(Khokhlatchev等，Cell，1998，93，605-615)。在细胞核中，ERK参与数种重要的细胞功能，包括但不限于核转运、信号转导、DNA修复、核小体组装和转位，以及mRNA加工和翻译(Ahn等，MolecularCell，2000，6，1343-1354)。总之，用生长因子处理细胞导致ERK1及ERK2的激活，ERK1及ERK2的激活导致增殖以及在一些情况下导致分化(Lewis等，Adv.Cancer Res.，1998，74，49-139)。
在增殖性疾病中，参与ERK激酶途径的生长因子受体、下游信号蛋白或者蛋白激酶的基因突变和/或过度表达导致细胞非受控的增殖，最终形成肿瘤。例如，一些癌症含有突变，该突变由于生长因子持续产生而导致这一途径的持续激活。其它突变可导致活性GTP-结合Ras复合物的去活化中的缺陷，这又导致MAP激酶途径的活化。在50％的结肠癌和超过90％的胰腺癌以及许多其它类型的癌症中均发现了突变的、致癌性的Ras形式(Kohl等，Science，1993，260，1834-1837)。最近，在超过60％的恶性黑素瘤中都鉴别出bRaf突变(Davies，H.等，Nature，2002，417，949-954)。这些bRaf突变导致组成型的活性MAP激酶级联。原发性肿瘤样品及细胞系的研究也表明，在胰腺、结肠、肺、卵巢和肾的癌症中具有组成型的或过度活化的MAP激酶途径(Hoshino，R.等，Oncogene，1999，18，813-822)。因此，在癌症和由于基因突变导致的MAP激酶途径过度活化之间存在密切的关联性。
由于组成型的或过度活化的MAP激酶级联在细胞增殖分化中起非常重要的作用，因此认为抑制这一途径对于过度增殖性疾病是有益的。在这一途径中，MEK充当关键角色，因为它在Ras和Raf的下游。此外，它是引人注目的治疗靶点，因为MEK磷酸化的唯一已知底物是MAP激酶ERK1和ERK2。在一些研究中，已表明抑制MEK具有潜在的治疗价值。例如，已证明小分子MEK抑制剂抑制裸鼠异种移植中的人肿瘤细胞生长(Sebolt-Leopold等，Nature-Medicine 1999，5(7)，810-816；Trachet等，AACR April 6-10，2002，Poster#5426；Tecle，H.IBC 2ndInternational Conference of Protein kinases，September 9-10，2002)、阻止动物的静态异常性疼痛(2001年1月25日公布的WO01/05390)和抑制急性髓性白血病细胞生长(Milella等，J Clin Invest2001，108(6)，851-859)。
已经公开了一些小分子MEK抑制剂。在最近的几年中，至少出现了13项专利申请1995年1月24日提交的US 5,525,625；1998年10月8日公布的WO 98/43960；1999年1月14日公布的WO99/01421；1999年1月14日公布的WO 99/01426；2000年7月20日公布的WO 00/41505；2000年7月20日公布的WO 00/42002；2000年7月20日公布的WO 00/42003；2000年7月20日公布的WO00/41994；2000年7月20日公布的WO 00/42022；2000年7月20日公布的WO 00/42029；2000年11月16日公布的WO 00/68201；2001年9月20日公布的WO 01/68619和2002年1月24日公布的WO02/06213。

发明内容
本发明提供用于治疗过度增殖性疾病的新型杂环化合物及其药学可接受的盐和前药。特别地，本发明的一方面涉及作为MEK抑制剂的式I的化合物。本发明还提供治疗癌症的方法。本发明还提供包含式I的化合物的制剂以及使用该化合物治疗有此需要的患者的方法。此外，本发明描述了制备式I的抑制性化合物的方法。
因此，本发明提供式I的化合物及其药学可接受的盐、前药和溶剂合物， 其中
R1、R2、R7、R8、R9和R10独立地为氢、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-杂芳基、-NR4(CR4R5)m-杂芳基、-O(CR4R5)m-杂环基或-NR4(CR4R5)m-杂环基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R3为氢、三氟甲基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、磷酸盐(phosphate)或氨基酸残基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SR’、-S(O)””、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基，
或者R3和R4与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述碳环、杂芳基环或杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R’、R”和R独立地为氢、低级烷基、低级烯基、芳基和芳基烷基，而R””为低级烷基、低级烯基、芳基或芳基烷基，或者R’、R”、R或R””中的任意两个与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、碳环、杂芳基环或杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R4和R5独立地为氢或C1-C6烷基，或者R4和R5与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述烷基或所述碳环、杂芳基环和杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R””、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R6为三氟甲基、C1-C10烷基、C3-C10环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，其中所述烷基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R’、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；W为杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)、-CONH(SO2)CH3或CR3OR3，其中所述杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)、-CONH(SO2)CH3和CR3OR3中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代-NR3R4、-OR3、-R2、C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基，其中所述C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自-NR3R4和-OR3的基团取代；m为0、1、2、3、4或5；j为0、1或2；且Y为连接基。
在另一个实施方案中，本发明涉及通式II的化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R′、R″、R、R″″、W、Y、m和j如上所定义，且R11为氢、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-杂芳基、-NR4(CR4R5)m-杂芳基、-O(CR4R5)m-杂环基或-NR4(CR4R5)m-杂环基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基。
在另一个实施方案中，本发明涉及通式III的化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R′、R″、R、R″″、W、Y、m及j如上所定义。
在另一个实施方案中，本发明涉及通式IV的化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R′、R″、R、R″″、W、Y、m和j如上所定义。
在另一个实施方案中，本发明涉及通式V的化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R′、R″、R、R″″、W、Y、m和j如上所定义。
另一方面，本发明提供抑制MEK的组合物，所述组合物包含式I-V的化合物。
本发明还涉及式I-V的化合物的药学可接受的前药、药学活性代谢物以及药学可接受的盐。本发明还描述了制备式I-V的化合物的方法。
另一方面，本发明提供一种使用本发明的化合物治疗由MEK介导的疾病或医学病症的方法。例如，本发明提供一种治疗哺乳动物中过度增殖性疾病的方法，该方法包括给予所述哺乳动物有效治疗所述过度增殖性疾病的量的一种或多种式I-V的化合物或其药学可接受的盐或前药。
另一方面，本发明提供一种治疗或预防MEK介导的病症的方法，该方法包括给予有此需要的人或动物有效治疗或预防所述MEK介导的病症的量的式I-V的化合物或其药学可接受的盐或在体内可裂解的前药。
本发明的化合物还可以有利地与其它已知的治疗活性剂(agent)组合使用。
本发明还涉及药物组合物，所述组合物包含有效量的选自式I-V的化合物或其药学可接受的前药、代谢物或药学可接受的盐的活性剂。
本发明的其它优点和新的特征将在下面的实施方式中部分地阐述，对于本领域技术人员而言，当阅读下面的说明书时这些其它优点和新的特征会部分地变得清楚，或通过实践本发明可以了解它们。利用所附的权利要求书中特别指出的手段、组合、组合物和方法可以实现和获得本发明的这些优点。
附图简述引入本文并作为说明书一部分的附图例示本发明的非限制性实施方案，并且其和具体实施方式
一起用于解释本发明的原理。
在附图中

图1显示化合物10a的合成反应路线。
图2显示化合物12a的合成反应路线。
图3显示化合物13a的合成反应路线。
图4显示化合物12b的合成反应路线。
图5显示化合物19的合成反应路线。
图6显示化合物21的合成反应路线。
图7显示化合物30的合成反应路线。
图8显示化合物31的合成反应路线。
图9显示化合物33a的合成反应路线。
图10显示化合物36-38的合成反应路线。
图11显示化合物39的合成反应路线。
图12显示化合物44a和44b的合成反应路线。
图13显示化合物47a和47b的合成反应路线。
图14显示化合物53a、53b和54a的合成反应路线。
图15显示化合物57a和57b的合成反应路线。
图16显示化合物63的合成反应路线。
图17显示化合物73a和73b的合成反应路线。
图18显示化合物74的合成反应路线。
图19A-19G例示了本发明的特定化合物。
具体实施例方式
本发明的式I-V的创造性化合物及其药学可接受的盐和前药用于治疗过度增殖性疾病。具体而言，本发明一方面涉及用作MEK抑制剂的式I-V的化合物。一般地，本发明的一方面涉及通式I的化合物及其药学可接受的盐、前药和溶剂合物 其中
R1、R2、R7、R8、R9和R10独立地为氢、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-杂芳基、-NR4(CR4R5)m-杂芳基、-O(CR4R5)m-杂环基或-NR4(CR4R5)m-杂环基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R3为氢、三氟甲基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、磷酸盐或氨基酸残基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SR’、-S(O)R””、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基，或者R3和R4与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述碳环、杂芳基环或杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R’、R”和R独立地为氢、低级烷基、低级烯基、芳基或芳基烷基，而R””为低级烷基、低级烯基、芳基或芳基烷基，或者R’、R”、R或R””中的任意两个与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、碳环、杂芳基环或杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R4和R5独立地为氢或C1-C6烷基，或者R4和R5与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述烷基或所述碳环、杂芳基环和杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R””、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R6为三氟甲基、C1-C10烷基、C3-C10环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，其中所述烷基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R’、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；W为杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)、-CONH(SO2)CH3或CR3OR3，其中所述杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)、-CONH(SO2)CH3和CR3OR3中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代-NR3R4、-OR3、-R2、C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基，其中所述C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自-NR3R4和-OR3的基团取代；m为0、1、2、3、4或5；j为0、1或2；且Y为连接基。
式I的优选实施方案具有其中(a)R1为2-Cl；(b)R7为Me、NH2或H；(c)R8为Br或Cl；(d)R9为F；(e)W为-C(O)OH、-C(O)NHOCH2-(环丙基)、-C(O)NHO(CH2)2OH或-CONH(SO2)CH3；或(f)或上述的组合的结构。
“连接基”是通过共价或非共价相互作用连接两个或多个分子实体的分子实体。连接基的实例包括但不限于NR3、O、S、S(O)、S(O)2、C(O)和CH2，其中R3如上所定义。
图1-6显示具有通式I的本发明的化合物合成的非限制性实例。
除通式I的化合物以外，本发明还包括通式II的化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R′、R″、R、R″″、W、Y、m和j如上所定义，且R11为氢、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-杂芳基、-NR4(CR4R5)m-杂芳基、-O(CR4R5)m-杂环基或-NR4(CR4R5)m-杂环基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基。
式II的优选实施方案具有其中(a)R1为Cl；(b)R7为H、1-(4-甲基哌嗪基)、吗啉基、-NMe2或-CH2(哌啶基)；(c)R8为Cl或Br；(d)R9为Cl或H；(e)W为-COOH、-C(O)NHOCH2-(环丙基)或-C(O)NHO(CH2)2OH；或(f)或上述的组合的结构。
图7-13显示具有通式II的本发明的化合物合成的非限制性实例。图18显示具有通式II的化合物的磷酸酯前药的合成。
在另一个实施方案中，本发明涉及通式III的化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R′、R″、R、R″″、W、Y、m和j如上所定义。
式III的优选实施方案具有其中(a)R1为Cl；(b)R7为甲基或苄基；(c)R8为Br；(d)R9为Cl；(e)W为-C(O)NHOCH2-(环丙基)或-C(O)NHO(CH2)2OH；或(f)或上述的组合的结构。
图14显示具有通式III的本发明的化合物合成的非限制性实例。
在另一个实施方案中，本发明涉及通式IV的化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R′、R″、R、R″″、W、Y、m和j如上所定义。
式IV的优选实施方案具有其中(a)R1为2-Cl；(b)R7为甲基；(c)R9为F；(d)W为-COOH或-C(O)NHO(CH2)2OH；或(e)或上述的组合的结构。
图15显示具有通式IV的本发明的化合物合成的非限制性实例。
在另一个优选实施方案中，本发明涉及通式V的化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R′、R″、R、R″″、W、Y、m和j如上所定义。图16-17显示具有通式V的本发明的化合物合成的非限制性实例。
式V的优选实施方案具有其中(a)R1为2-Cl、2-H或2-F；(b)R8为Cl或Br；(c)R9为H、F或Cl；(d)W为-C(O)OH、-C(O)NHOCH2-(环丙基)、-C(O)NHO(CH2)2OH或-CONH(SO2)CH3或(e)或上述的组合的结构。
如本文所用，术语“C1-C10烷基”、“烷基”和“低级烷基”指具有1-10个碳原子的饱和直链或支链一价烃基，其中所述烷基基团可以任选独立地被一个或多个下面描述的取代基取代。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、己基、2-己基、3-己基、3-甲基戊基、庚基、辛基等。
术语“C2-C10烯基”、“低级烯基”和“烯基”指具有2-10个碳原子和至少一个双键的直链或支链一价烃基，包括但不限于乙烯基、丙烯基、1-丁-3-烯基、1-戊-3-烯基、1-己-5-烯基等，其中所述烯基基团可以任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代，且包括具有“顺式”和“反式”取向或者“E”和“Z”取向的基团。
术语“C2-C10炔基”、“低级炔基”和“炔基”指含有至少一个三键的2-12个碳原子的直链或支链一价烃基。实例包括但不限于乙炔基、丙炔基戊-2-炔基等，其中所述炔基基团可以任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。
术语“烯丙基”指具有式RC＝CHCHR的基团，其中R为烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基或本文定义的任何取代基，其中所述烯丙基可以任选独立地被本文所述的一个或多个取代基取代。
术语“碳环”、“碳环基”、“环烷基”或“C3-C10环烷基”指具有3-10个碳原子的饱和或部分不饱和的环烃基。术语“环烷基”包括单环和多环(例如二环和三环)环烷基结构，其中所述多环结构任选包括与饱和或部分不饱和的环烷基环或杂环烷基环或芳基环或杂芳基环稠合的饱和或部分不饱和的环烷基。环烷基基团的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。所述环烷基可以在一个或多个可取代位置任选独立地被各种基团取代。例如，这些环烷基基团可以任选被例如C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、单(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基、氨基(C1-C6)烷基、单(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基或二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基取代。
术语“杂烷基”指1-12个碳原子的饱和直链或支链一价烃基，其中至少一个碳原子被选自N、O或S的杂原子替代，并且其中该基团可以是碳基团或杂原子基团(即，杂原子可以在基团的中间位置或者在基团的末端)。杂烷基基团可以任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。术语“杂烷基”包括烷氧基和杂烷氧基基团。
术语“杂环烷基”、“杂环”或“杂环基”指3-8个环原子的饱和或部分不饱和的碳环基，其中至少一个环原子为选自N、O和S的杂原子，其余的环原子为C，其中一个或多个环原子可以任选独立地被一个或多个下文所述的取代基取代。所述基团可以是碳基团或杂原子基团。该术语还包括杂环与芳族基稠合的稠环体系。“杂环烷基”还包括其中杂环基团与芳族环或杂芳族环稠合的基团。杂环烷基环的实例包括但不限于吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶子基、吗啉代、硫代吗啉代、噻噁烷基、哌嗪基、高哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基(thietanyl)、高哌啶基、氧杂环庚烷基(oxepanyl)、氧氮杂环庚烷基(oxazepanyl)、硫杂环庚烷基(thiepanyl)、氧氮杂基(oxazepinyl)、二氮杂基(diazepinyl)、硫氮杂基(thiazepinyl)、1，2，3，6-四氢吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3-二氧戊环基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫戊环基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂二环[3.1.0]己烷基、3-氮杂二环[4.1.0]庚烷基、氮杂二环[2.2.2]己烷基、3H-吲哚基和喹嗪基。螺环基团也包括在这一定义的范围内。在C-连接或N-连接可能的情况下，衍生自上述基团的前述基团也可以是C-连接或N-连接基团。例如，衍生自吡咯的基团可以是吡咯-1-基(N-连接)或吡咯-3-基(C-连接)。另外，衍生自咪唑的基团可以是咪唑-1-基(N-连接)或咪唑-3-基(C-连接)。其中2个环碳原子被氧代(＝O)基团取代的杂环基的实例是1，1-二氧代-卤代吗啉基。本文的杂环基是未取代的，或者如所定义的，在一个或者多个可取代的位置上被各种基团取代。例如，这些杂环基可任选地被例如C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、单(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基、氨基(C1-C6)烷基、单(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基或二(C1-C6)烷基氨基(C1-C6)烷基取代。
术语“芳基”指具有单环(如苯基)、多环(如联苯基)或其中至少一个是芳香性的多个稠环(如1，2，3，4-四氢萘基、萘基)的一价芳族碳环基，其任选被例如卤素、低级烷基、低级烷氧基、三氟甲基、芳基、杂芳基和羟基单、二或三取代。
术语“杂芳基”指5-、6-或7-元环的一价芳族基，其包括稠环系(其中至少一个是芳香性的)，其具有含至少一个且最多4个选自氮、氧或硫的杂原子的5-10个原子。杂芳基的实例为吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、中氮茚基、2，3-二氮杂萘基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃并吡啶基。螺环基团也包括在这一定义的范围内。杂芳基任选地被例如卤素、低级烷基、低级烷氧基、卤代烷基、芳基、杂芳基和羟基单、二或三取代。
术语“卤素”包括氟、溴、氯和碘取代基。
术语“芳基烷基”指被(如上定义的)一个或多个芳基基团取代的(也如上定义的)烷基基团。更优选的芳基烷基为芳基-C1-3-烷基。实例包括苄基、苯基乙基等。
术语“杂芳基烷基”指被(如上定义的)杂芳基基团取代的(也如上定义的)烷基基团。更优选的杂芳基烷基基团是5-或6-元杂芳基-C1-3-烷基。实例包括噁唑基甲基、吡啶基乙基等。
术语“杂环基烷基”指被(如上定义的)杂环基基团取代的(也如上定义的)烷基基团。更优选的杂环基烷基基团是5或6元杂环基-C1-3-烷基。实例包括四氢呋喃基甲基。
术语“环烷基烷基”指被(如上定义的)环烷基基团取代的(也如上定义的)烷基基团。更优选的环烷基烷基基团是5或6元环烷基-C1-3-烷基。实例包括环丙基甲基。
术语“Me”指甲基，“Et”指乙基，“Bu”指丁基，而“Ac”指乙酰基。
一般地，式I-V的化合物的各种基团或官能团可以任选被一个或多个取代基取代。适于本发明目的的取代基的实例包括但不限于氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基，其中R3、R4、R5和R6如本文所定义。
应理解，在依次用两个或者多个基团定义与一结构连接的取代基的情况下，则第一个命名的基团被认为是端基，而最后命名的基团被认为与所述结构连接。因此，例如，芳基烷基通过烷基与所述结构连接。
在本发明的化合物中，在使用术语例如(CR4R5)m或(CR4R5)t时，R4和R5可随1以上的m或t而每次不同。例如，如果m或t为2，则术语(CR4R5)m或(CR4R5)t等于-CH2CH2-或-CH(CH3)C(CH2CH3)(CH2CH2CH3)-或任意数目的在R4和R5定义范围内的类似基团。
本发明的化合物可以具有一个或多个不对称中心；因此这些化合物可以被制备成单个(R)-或(S)-立体异构体或者它们的混合物。除非另外说明，说明书和权利要求中特定化合物的描述或命名意指包括单个对映体以及它们的非对映异构体混合物、外消旋体等。因此，本发明还包括式I-V的包括非对映异构体混合物和纯对映体在内的所有这些异构体。基于它们的物理化学差异，通过本领域技术人员已知的方法例如通过色谱法或分级结晶法可将非对映异构体混合物分离为它们的单个非对映异构体。可以通过如下分离对映异构体通过与合适的旋光化合物(如醇)反应将对映体混合物转化为非对映异构体混合物，分离非对映异构体并将单个非对映异构体转化(例如水解)为相应的纯对映体。立体异构体的立体化学测定和分离的方法在本领域是公知的(参见“Advanced Organic Chemistry”，4th edition，J.March，John Wiley and Sons，New York，1992第四章的讨论)。
本发明还包括含有式I-V的化合物的药物组合物以及通过给予本发明的化合物治疗增殖性疾病或异常细胞生长的方法。具有游离氨基、酰氨基、羟基或羧基的本发明的化合物可转化为药学可接受的前药。
术语“前药”指例如通过式I-V化合物的官能团在血中的水解而在体内快速转化产生式I-V的母体化合物的化合物。“药学可接受的前药”是在生理条件下或者通过溶剂分解可以转化成特定的化合物或者该化合物的药学可接受的盐的化合物。前药包括其中氨基酸残基或两个或多个(如2、3或4个)氨基酸残基的多肽链通过酰胺或酯键共价地与本发明的化合物的游离氨基、羟基或羧酸基团连接的化合物。氨基酸残基包括但不限于20种通常用三个字母符号表示的天然氨基酸，而且还包括4-羟脯氨酸、羟赖氨酸、锁链素(demosine)、异锁链素(isodemosine)、3-甲基组氨酸、正缬氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸、高半胱氨酸、高丝氨酸、鸟氨酸和甲硫氨酸砜。本发明的一种优选前药是与磷酸残基共价连接的式I-V的化合物。本发明的另一种优选前药是与缬氨酸残基共价连接的式I-V的化合物。
还包括其它类型的前药。例如，具有游离羧基的式I-V的化合物可衍生作酰胺或烷基酯。具有游离羟基的式I-V的化合物可以使用包括但不限于如Advanced Drug Delivery Reviews，1996，19，115中所述的磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲基氨基乙酸酯和磷酰氧基甲氧基羰基的基团来衍生。还包括具有羟基和氨基的式I-V的化合物的氨基甲酸酯前药，例如具有羟基的式I-V的化合物的碳酸酯前药、磺酸酯前药和硫酸酯前药。还包括羟基衍生得到的式I-V化合物的(酰基氧基)甲基和(酰基氧基)乙基醚前药，其中所述酰基可以是烷基酯，任选被包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团取代，或者其中所述酰基是如上所述的氨基酸酯。这一类型的前药在J.Med.Chem.1996，39，10中有描述。具有游离胺的式I-V的化合物还可衍生作酰胺、磺酰胺或膦酰胺前药。所有这些前药基团可掺入包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团。
另外，本发明还包括式I-V的化合物的溶剂合物、药学活性代谢物和药学可接受的盐。
术语“溶剂合物”指分子和一种或多种溶剂分子的聚集体。
“药学活性代谢物”是特定化合物或其盐通过在体内代谢而产生的药学活性产物。可以使用本领域已知的常规技术鉴定化合物的代谢物，并且可使用例如本文所述的试验测定它们的活性。
化合物的前药和活性代谢物可使用本领域已知的常规技术进行鉴定。前药的各种形式在本领域是已知的。关于这些前药衍生物的实例，参见例如a)Design of Prodrugs，H.Bundgaard编辑，(Elsevier，1985)和Methods in Enzymology Vol.42，p.309-396，K.Widder等编辑(Academic Press，1985)；b)A Textbook of Drug Design andDevelopment，Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard编辑，H.Bundgaard的第五章“Design and Application of Prodrugs”，p.113-191(1991)；c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，8，1-38(1992)；d)H.Bundgaard等，Journal of Pharmaceutical Sciences，77285(1988)；和e)N.Kakeya等，Chem.Pharm.Bull.，32692(1984)，这些文献中的每一篇均特别地引入本文作为参考。
除非另外说明，如本文所用，“药学可接受的盐”包括保留特定化合物的游离酸和游离碱的生物效用的盐，并且该盐不是生物学或其它方面不期望的。本发明的化合物可具有足够酸性的官能团、足够碱性的官能团或这两种官能团均具有，并因此与许多无机或有机碱以及无机和有机酸反应以形成药学可接受的盐。药学可接受的盐的实例包括本发明的化合物与无机或有机酸或者无机碱反应制备的那些盐，这些盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐(dinitromenzoate)、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、γ-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐和扁桃酸盐。因为本发明的单个化合物可以包含一个以上的酸性或碱性基团，所以本发明的化合物在单个化合物中可以包含单、二或三盐。
如果本发明的化合物是碱，可根据本领域中已有的任何适当的方法制备期望的药学可接受的盐，例如用酸性化合物，特别是无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，或者用有机酸如乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、α-羟基酸如柠檬酸或酒石酸、氨基酸如天冬氨酸或谷氨酸、芳香酸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸如对甲苯磺酸或乙磺酸等处理游离碱。
如果本发明的化合物是酸，可通过任何适当的方法，例如用无机碱或有机碱处理游离酸来制备期望的药学可接受的盐。优选的无机盐是碱金属或碱土金属如锂、钠、钾、钡和钙形成的盐。优选的有机碱盐包括例如铵、二苄基铵、苄基铵、2-羟基乙基铵、双(2-羟基乙基)铵、苯基乙基苄胺、二苄基-亚乙基二胺等盐。酸性基团的其它盐可以包括例如那些用普鲁卡因、奎宁和N-甲基葡糖胺形成的盐，以及用碱性氨基酸如甘氨酸、鸟氨酸、组氨酸、苯基甘氨酸、赖氨酸和精氨酸形成的盐。
本发明的化合物可使用如下所述的反应途径和合成路线，采用本领域现有的技术使用通过本领域已知的方法可以容易地获得或可以合成的原料来制备。
路线1-9中显示了制备本发明化合物的例示。
路线1
路线2
路线3
路线4 路线5
路线6 路线7
路线8 路线9
路线1例示了制备式I的化合物的一种方法。羧酸102可以通过如下从芳烃101制备低温(-100至-60℃)下在合适的醚溶剂如THF或乙醚中去质子化，然后用二氧化碳终止反应，该终止反应也可用固体干冰进行。去质子化可以在-78℃下用于THF中的LDA来完成。一种终止反应的方法包括在-78℃下经插管向于THF中的干冰饱和溶液中加入芳基锂THF溶液，然后暖至室温。苯胺103可通过如下制备低温(-100至-60℃)下在合适的醚溶剂如THF或乙醚中用KHMDS、LiHMDS、NaHMDS或LDA对合适的2-取代苯胺进行去质子化，然后加入羧酸102并暖至室温。在一个实施方案中，去质子化用-78℃下于THF中的LDA，然后加入羧酸102并暖至室温来完成。酯104可通过标准方法制备，所述标准方法包括但不限于Fisher酯化(MeOH、H2SO4)，与在MeOH中的TMSCHN2或TMSCl反应。乙炔衍生物105通过在25至100℃的温度下使用合适的取代乙炔、CuI、胺碱、钯催化剂和有机溶剂例如DME、THF或DMF与溴化物104进行Sonagashria偶联来制备。合适的钯催化剂包括但不限于PdCl2(dppf)、Pd(Ph3P)4和Pd2dba3/dppf。合适的胺碱包括但不限于Et3N、Hunig’s碱和二异丙胺。在一个实施方案中，Pd(O)介导的制备乙炔105的偶联通过在室温下在THF中的Pd(PPh3)2、CuI、二异丙胺和合适的取代乙炔完成。乙炔105制备酮106的水解可通过标准方法完成，所述标准方法包括但不限于H2SO4、TFA、三氟磺酰胺、FeCl3或HgSO4/H2SO4。苯并异噁唑107可从酮106经两步方法来制备。在-78至5℃的温度下加入在合适的有机溶剂例如THF或Et2O中的丙酮肟的钾盐，然后进行酸催化的环化。丙酮肟的加成通过在0℃下将酮106的THF溶液加入该盐中而非常容易地完成。环化可在一定的温度下用多种酸性溶液条件完成。在一个实施方案中，环化通过在回流下用在甲醇中的5％盐酸溶液处理异亚丙基氨氧基苯甲酸甲酯来完成。形成苯并异噁唑108的卤化通过使用标准方法例如于DMF中的NCS或NBS来完成。酯108形成羧酸109的水解可在标准条件下进行。该酸可通过标准偶联方法转化为异羟肟酸酯110或酰胺112，所述标准偶联方法包括但不限于EDCI/HOBt、PyBOP或DIC和合适的羟胺或胺。或者，异羟肟酸酯110或酰胺112可通过如下两步制备初始使用标准方法转化为酰氯，然后加入羟胺或胺。酰基磺酰胺111可以通过在适当的有机溶剂例如THF中制备羧酸109的活性酯，然后用合适的磺酰胺和叔胺碱处理来合成。在一个实施方案中，酰基磺酰胺111通过在升高的温度(50℃)下在THF中用CDI处理羧酸109，然后用合适的磺酰胺和DBU处理来制备。
路线2例示了合成式I的化合物的另外方法。腈113可通过在50至120℃的升高的温度下在合适的有机溶剂例如DMA、NMP或DMF中溴化物104与氰化锌进行钯介导的偶联来制备。可使用多种钯催化剂，包括但不限于具有配体如dppe、dppp、dppf或BINAP的Pd(PPh3)4、PdCl2(dppf)或Pd2dba3。在一个实施方案中，通过在120℃下用在NMP中的氰化锌、Pd2dba3和dppf处理溴化物104制备腈113。氨基苯并异噁唑114可通过如下两步方法从腈113制备在-78至5℃的温度下加入在适当的有机溶剂例如THF或Et2O中的丙酮肟的钾盐，然后进行酸催化的环化。在一个实施方案中，丙酮肟的加成通过将腈113的THF溶液加入0℃的在THF中的该盐中，然后暖至室温来完成。环化可在一定的温度下在多种酸性条件下完成。在一个实施方案中，环化方法包括用于Et2O中的2M HCl处理于MeOH中的肟加成产物。形成苯并异噁唑115的卤化通过使用标准方法例如于DMF的NCS或NBS来完成。化合物116经两步制备，其包括标准条件下将酯115水解生成相应的羧酸，然后经标准偶联方法将羧酸转化为异羟肟酸酯116，所述标准偶联方法包括并不限于EDCI/HOBt3、PyBOP或DIC和合适的羟胺。
路线3例示了合成式II的化合物的一种方法。4，6-二氯烟酸118可由4，6-二羟基烟酸乙酯117经两步制备。第一步，使用合适的试剂例如POCl3、草酰氯或亚硫酰氯对4，6-二羟基烟酸乙酯117进行氯化。在一个实施方案中，氯化通过在升高的温度下用POCl3和Et3N来完成。得到的二氯乙酯水解获得化合物118可在标准条件下进行。苯胺119可通过如下制备低温(-100至-60℃)下在适当的醚溶剂例如THF或乙醚中用KHMDS、LiHMDS、NaHMDS或LDA对适当的取代苯胺进行去质子化，然后加入羧酸118并暖至室温。在一个实施方案中，去质子化用在-78℃下于THF中的LiHMDS，然后加入羧酸118并暖至室温来完成。氨基吡啶120是由苯胺119经三步反应制备。第一步，通过在25-75℃的温度下用在THF中的2-叔丁基-1，3-二异丙基异脲处理酸119制备叔丁酯。第二步，在80℃下将叔丁酯加入于DMF中的叠氮化钠中。氨基吡啶120通过在标准条件下还原该叠氮化物来制备，该标准条件包括但不限于锌粉/AcOH、在氢气存在下的Pt/C或PtO2、Ph3P或SnCl2/MeOH。在一个实施方案中，叠氮化物的还原通过用在二氯甲烷和乙酸的混合物中的锌粉处理来完成。其中Z＝F的咪唑并吡啶121由氨基吡啶120经两步反应制备。第一步，通过用在甲醇和水或pH 7的磷酸盐缓冲液的混合物中的SELECTFLUORTM处理氨基吡啶完成氟化。环化形成咪唑并吡啶121(Z＝H或F)可通过在升高的温度(50至120℃)下在适当的有机溶剂例如DMF或EtOH中经氯乙醛或溴乙醛处理来完成。在一个实施方案中，环化通过在70℃下用于乙醇中的氯乙醛处理来实现。或者，苯胺119可以经两步转化为二氯酯122。第一步，在标准条件例如在DMF中的NCS下进行氯化。第二步，通过标准方法实现酯化，所述标准方法包括但不限于Fisher酯化(MeOH、H2SO4)，与于MeOH中的TMSCHN2或TMSCl反应。氨基吡啶123可如上关于氨基吡啶120所述来制备，只是叠氮化钠的添加可以在室温下完成。环化(如上对咪唑并吡啶121所述实现)，然后进行标准碱性皂化得到咪唑并吡啶124。异羟肟酸酯125可由咪唑并吡啶121或124使用偶联方法制备，所述偶联方法包括但不限于EDCI/HOBt、PyBOP或DIC和适当的羟胺。或者，异羟肟酸酯125可通过初始经标准方法转化成酰氯，然后加入羟胺的两步反应制备。
路线4例示了制备式II的化合物的另外方法。在合适有机溶剂例如二氯甲烷或二氯乙烷中的适当官能化的2-氨基吡啶126与路易斯酸例如溴化锌和Katritzky等(J.Org.Chem.2003，68，4935-4937J.Org.Chem，1990，55，3209-3213)公开的缩合物(127)反应得到3-二烷基氨基咪唑并[1，2-a]吡啶环系统128。缩合物127(即乙二醛、苯并三唑和仲胺的缩合)可通过使用苯并三唑、乙二醛和任何适当的仲胺制备，所述仲胺包括但不限于二甲胺、二乙胺、吡咯烷、哌啶、吗啉、1-甲基哌嗪、N-甲基丙烯胺、二丙烯胺和N-甲基苄胺。酯128经标准皂化方法水解，得到的酸可经标准偶联方法转化为异羟肟酸酯129，该标准偶联方法包括但不限于EDCI/HOBt、PyBOP或DIC和适当的羟胺。或者，异羟肟酸酯129可通过初始经标准方法转化成酰氯或活性酯，然后加入羟胺的两步反应制备。
路线5例示了制备式II的化合物的另外方法。例示了使用Kercher等(准备中的手稿本)建立的改良Mannich反应方法制备3-氨甲基咪唑并[1，2-a]吡啶131。反应通常通过将37％的甲醛和在6∶1乙腈/水中的适当的胺混合来进行。可以应用几种仲胺，其包括但不限于吡咯烷、哌啶、吗啉、二甲胺、N-BOC-哌嗪和1-甲基哌嗪。将胺和甲醛的溶液搅拌约半小时，之后依次加入三氟甲基磺酸钪(scandium triflate)和适当的咪唑并[1，2-a]吡啶130。Mannich反应优先被一组IIIA镧系元素的三氟甲磺酸盐(triflate)催化，优选三氟甲基磺酸钪，不过另外其也可以使用过量的质子酸(AcOH或HCl)或升高温度进行。
路线6例示了制备式II的化合物的另外方法。在路线6中例示了经还原烷基化制备3-氨甲基咪唑并[1，2-a]吡啶134。第一步，使用标准还原方法由合适的3-甲酰基-咪唑并[1，2-a]吡啶132和适当的胺制备3-氨甲基咪唑并[1，2-a]吡啶133，所述标准还原方法例如在合适的惰性有机溶剂例如二氯甲烷、乙腈或四氢呋喃中的Na(CN)BH3、Na(OAc)3BH、NMe4BH(OAc)3，加或不加乙酸。还原氨化通常通过在室温下用于四氢呋喃中的胺和乙酸处理乙醛衍生物132，然后加入Na(OAc)3来完成。在R”＝H的情况下，相应的仲胺133可任选例如用酸不稳定保护基如氨基甲酸叔丁酯(BOC)保护以有利于后续步骤的处理。第二步，通过标准皂化方法将酯水解，得到的酸可通过标准偶联方法转化为异羟肟酸酯134，所述标准偶联方法包括但不限于EDCl/HOBt、PyBOP或DIC和适当的羟胺。或者，异羟肟酸酯134可通过初始经标准方法将羧酸转化为酰氯或活性酯，然后加入羟胺的两步反应制备。如果存在保护基，则在偶联后将其除去。
路线7例示了制备式III的化合物的一种方法。在路线7中，例示了3-烷基-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶衍生物的制备。化合物136由化合物135经两步反应制备。通过与肼反应将合适的官能化的2-氯吡啶衍生物135转化为2-肼基吡啶。该反应通常通过在升高的温度(50-100℃)下在惰性有机溶剂例如DMF或DMA中肼与2-氯吡啶衍生物135反应来完成。然后2-肼基吡啶用在适当的惰性有机溶剂例如二氯甲烷中的适当的羧酸卤化物例如氟化物、氯化物或溴化物，或者合适的羧酸酐或混合酐且在适当的碱例如三乙胺、二异丙基乙胺或吡啶存在下酰化得到中间体136。或者2-肼基吡啶的酰化可通过标准肽偶联方法使用适当的羧酸和适当的偶联试剂来完成，该偶联方法包括但不限于EDCI/HOBt、PyBOP或DIC。通过用在回流的二氯甲烷中的过量的磷酰氯处理将中间体136转化为3-烷基-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶137。酯137经标准皂化方法水解，得到的酸138可通过标准肽偶联方法转化为异羟肟酸酯139，该偶联方法包括但不限于EDCI/HOBt、PyBOP或DIC和合适的羟胺。或者，异羟肟酸酯139可通过初始经标准方法将羧酸转化为酰氯或活性酯，然后加入羟胺的两步反应制备。
路线8例示了制备式IV的化合物的一种方法。在路线8中，例示了3-甲基-苯并[c]异噁唑衍生物的合成。化合物141由化合物140经两步反应制备。在升高的温度下(回流)用在3∶1丙酮/水中的叠氮化钠处理甲酯140以实现亲核取代。然后分离4-叠氮基衍生物，并在回流水中加热以实现环化形成苯并[c]异噁唑环系统141。酯141通过标准皂化方法水解，得到的羧酸通过标准肽偶联方法转化为异羟肟酸酯142，该偶联方法包括但不限于EDCI/HOBt、PyBOP或DIC和合适的羟胺。或者，异羟肟酸酯142可通过初始经标准方法将羧酸转化为酰氯或活性酯，然后加入羟胺的两步反应制备。
路线9例示了制备式V的化合物的一种方法。2-氯-4-甲基-5-硝基吡啶143可经三步顺序转化为氨基吡啶144。第一步，在25-100℃的温度下使用TMS-乙炔、CuI、胺碱、钯催化剂和有机溶剂例如DME、THF或DMF的Sonagashria偶联得到硝基乙炔型吡啶(nitroacetylenicpyridine)。适当的钯催化剂包括但不限于PdCl2(dPPf)、Pd(Ph3P)4、Pd(PPh3)2Cl2和Pd2dba3/dppf。适当的胺碱包括但不限于Et3N、Hunig’s碱和二异丙胺。然后氨基吡啶144通过在标准条件例如于MeOH中的K2CO3下除去TMS，然后使用Zn粉/AcOH、Fe或SnCl2/MeOH还原硝基来制备。对于Z＝H，在环化反应中直接使用氨基吡啶144。当Z＝Cl时，在标准条件下用在DMF中的NCS将氨基吡啶144卤化，然后进行环化。当Z＝F时，用于DMSO中的KF、Kryptofix处理2-氯-3-氨基吡啶中间体以制备氨基吡啶145。生成吡唑并[1，5-a]吡啶146的环化通过在室温和碱例如K2CO3存在下用在适当的有机溶剂如DMF中的O-(4-硝苯基)-羟胺处理氨基吡啶145来完成。例如，羧酸149可使用以下途径之一制备。一条途径涉及钯介导的、与适当的取代溴苯和氨基吡唑并[1，5-a]吡啶146进行的交叉偶联。在这种情况下，交叉偶联可通过在60-120℃的温度下用钯催化剂和有机溶剂例如DME、THF、二噁烷和甲苯完成。适当的钯催化剂包括但不限于Pd(OAc)2、PdCl2(dppf)、Pd2(bda)3和Pd(dba)2。适当的配体包括但不限于BINAP、DPPF和(o-tol)3P。适当的胺碱包括但不限于NaOt-Bu、KOt-Bu和Cs2CO3。第二条途径涉及与氨基吡唑并[1，5-a]吡啶146和合适的取代2-氟硝基苯进行的SNAr反应。在这种情况下，偶联可通过在升高的温度(80-150℃)下将这两种成分在适当的有机溶剂例如二甲苯、甲苯、DMSO或DMF中混合来完成。任选在SNAr偶联例如K2CO3或Cs2CO3中可使用碱。然后通过该芳族环官能化然后氧化来制备羧酸149。在第一种情况下，官能化包括在于DMF中的NCS或者NBS存在的标准条件下进行卤化。在第二种情况下，官能化包括将硝基芳烃转化为所需的芳烃或芳基卤(硝基还原；重氮化；卤化或质子化)的Sandmeyer化学。在这两种途径中，制备羧酸149的最后一步是甲苯甲酰基团的氧化。这可以使用标准方法实现，所述标准方法包括但不限于KMnO4、NaOCl/RuCl3或Na2Cr2O7/HCl。得到的羧酸149可通过标准肽偶联方法转化为异羟肟酸酯150，该偶联方法包括但不限于EDCI/HOBt、PyBOP或DIC和合适的羟胺。或者，异羟肟酸酯150可通过初始经标准方法将羧酸转化为酰氯或活性酯，然后加入羟胺的两步反应制备。
本发明还涉及用于治疗哺乳动物中过度增殖性疾病的药物组合物，所述组合物包含治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、前药或水合物和药学可接受的载体。在一个实施方案中，所述药物组合物用于治疗癌症，例如脑、肺、鳞状细胞、膀胱、胃、胰腺、乳腺、头、颈、肾的、肾、卵巢、前列腺、结肠直肠、食管、睾丸、妇科或甲状腺癌。在另一个实施方案中，所述药物组合物用于治疗非癌症性过度增殖性疾病，例如良性的皮肤增生(如银屑病)、再狭窄增生或前列腺增生(如良性前列腺肥大(BPH))。
本发明还涉及用于治疗哺乳动物中的胰腺炎或肾脏疾病(包括增生性肾小球肾炎和糖尿病诱导的肾病)或治疗疼痛的药物组合物，所述组合物包含治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、前药或水合物和药学可接受的载体。
本发明还涉及用于防止哺乳动物中胚细胞植入的药物组合物，所述组合物包含治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、前药或水合物和药学可接受的载体。
本发明还涉及用于治疗哺乳动物中与血管生成或血管发生有关的疾病的药物组合物，所述组合物包含治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、前药或水合物和药学可接受的载体。在一个实施方案中，所述药物组合物用于治疗选自以下的疾病肿瘤血管发生，慢性炎性疾病如类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、炎症性肠病，皮肤疾病如银屑病、湿疹(excema)和硬皮病，糖尿病，糖尿病性视网膜病变，早产儿视网膜病变，年龄相关性黄斑变性，血管瘤，神经胶质瘤，黑色素瘤，卡波西氏肉瘤及卵巢癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌和表皮样癌。
本发明还涉及治疗哺乳动物中过度增殖性疾病的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、前药或水合物。在一个实施方案中，所述方法涉及治疗癌症例如脑、肺、鳞状细胞、膀胱、胃、胰腺、乳腺、头、颈、肾的、肾、卵巢、前列腺、结肠直肠、食管、睾丸、妇科或甲状腺癌。在另一个实施方案中，所述方法涉及治疗非癌症性过度增殖性疾病如良性的皮肤增生(如银屑病)、再狭窄增生或前列腺增生(如良性前列腺肥大(BPH))。
本发明还涉及用于治疗哺乳动物中过度增殖性疾病的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物治疗有效量的本发明的化合物或其药物学可接受的盐、前药或水合物以及选自以下的抗肿瘤药有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢药、嵌入性抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、生物反应调节剂、抗激素药、血管发生抑制剂和抗雄激素。
本发明还涉及治疗哺乳动物中胰腺炎或肾脏疾病的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、前药或水合物。
本发明还涉及防止哺乳动物中胚细胞植入的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、前药或水合物。
本发明还涉及治疗哺乳动物中与血管生成或血管发生相关的疾病的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物治疗有效量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、前药或水合物。在一个实施方案中，所述方法用于治疗选自以下的疾病肿瘤血管发生，慢性炎性疾病如类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、炎症性肠病，糖尿病性视网膜病变，早产儿视网膜病变，年龄相关性黄斑变性，血管瘤，神经胶质瘤，黑色素瘤，卡波西氏肉瘤及卵巢癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌和表皮样癌。
根据本发明的方法可用本发明的化合物或其药学可接受的盐、前药或水合物治疗的患者包括已被诊断患有下述疾病的患者银屑病、再狭窄、动脉粥样硬化、BPH、肺癌、骨癌、CMML、胰腺癌、皮肤癌、头及颈部癌、皮肤或眼内黑色素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛门区域的癌症、胃癌、结肠癌、乳癌、睾丸癌、妇科肿瘤(如子宫肉瘤、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌或外阴癌)、何杰金氏病、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌症(如甲状腺癌、甲状旁腺癌或肾上腺癌)、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、儿童实体瘤、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾或输尿管癌(如肾细胞癌、肾盂癌)或者中枢神经系统的肿瘤(如原发性中枢神经系统淋巴瘤、脊髓轴肿瘤、脑干神经胶质瘤或垂体腺瘤)。
本发明还涉及用于抑制哺乳动物中异常细胞生长的药物组合物，所述组合物包含一定量的本发明的化合物或其药学可接受的盐或溶剂合物或前药以及一定量的化疗剂，其中所述化合物、盐、溶剂合物或前药的量与所述化疗剂的量为一起有效地抑制异常细胞生长。许多化疗剂目前在本领域中是已知的。在一个实施方案中，所述化疗剂选自有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢药、嵌入性抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、生物反应调节剂、抗激素药、血管发生抑制剂以及抗雄激素。
本发明还涉及用于抑制哺乳动物中异常细胞生长或治疗过度增殖性疾病的方法，该方法包括给予所述哺乳动物一定量的本发明的化合物或其药学可接受的盐、前药或水合物并与放射治疗联合，其中所述组合物、盐、溶剂合物或前药与放射治疗联合有效地抑制所述哺乳动物中异常细胞生长或治疗过度增殖性疾病。给予放射治疗的技术在本领域中是已知的，并且这些技术均可用于本文所述的联合治疗中。在这一联合治疗中本发明的化合物的给予可如本文所述进行确定。
认为本发明的化合物可使异常细胞对于用于杀死和/或抑制这些细胞生长的放射治疗更敏感。因此，本发明还涉及用于增加哺乳动物中异常细胞对放射治疗敏感性的方法，所述方法包括给予哺乳动物一定量的本发明的化合物或其药学可接受的盐或溶剂合物或前药，所述量对于增加异常细胞对放射治疗的敏感性是有效的。该方法中所述化合物、盐或溶剂合物的量可根据本文所述的用于测定这些化合物的有效量的方法来确定。
本发明还涉及抑制哺乳动物中异常细胞生长的方法和药物组合物，所述组合物包含一定量的本发明的化合物或其药物可接受的盐或溶剂合物、前药或同位素标记衍生物以及一定量的一种或多种选自抗血管发生剂、信号转导抑制剂、抗增殖药的物质。
抗血管发生剂如MMP-2(基质-金属蛋白酶2)抑制剂、MMP-9(基质-金属蛋白酶9)抑制剂和COX-II(环加氧酶II)抑制剂可与本发明的化合物以及本文所述的药物组合物联合使用。有用的COX-II抑制剂的实例包括CELEBREXTM(alecoxib)、伐地考昔、艾托考昔、鲁米考昔和罗非考昔。有用的基质金属蛋白酶抑制剂的实例在以下文献中描述WO 96/33172(1996年10月24日公开)、WO 96/27583(1996年3月7日公开)、欧洲专利申请97304971.1(1997年7月8日提交)、欧洲专利申请99308617.2(1999年10月29日提交)、WO 98/07697(1998年2月26日公开)、WO 98/03516(1998年1月29日公开)、WO 98/34918(1998年8月13日公开)、WO 98/34915(1998年8月13日公开)、WO98/33768(1998年8月16日公开)、WO 98/30566(1998年7月16日公开)、欧洲专利公布606,046(1994年7月13日公开)、欧洲专利公布931,788(1999年7月28日公开)、WO 90/05719(1990年5月31日公开)、WO 99/52910(1999年10月21日公开)、WO 99/52889(1999年10月21日公开)、WO 99/29667(1999年6月17日公开)、PCT国际申请PCT/IB98/01113(1998年7月21日提交)、欧洲专利申请99302232.1(1999年3月25日提交)、英国专利申请9912961.1(1999年6月3日提交)、美国临时申请60/148,464(1999年8月12日提交)、美国专利5,863,949(1999年1月26日授权)、美国专利5,861,510(1999年1月19日授权)以及欧洲专利公布780,386(1997年6月25日公开)，所有这些文献以其全部内容引入本文作为参考。优选的MMP-2和MMP-9抑制剂是那些对于抑制MMP-1几乎没有或者没有活性的抑制剂。更优选的MMP-2和MMP-9抑制剂是那些相对于其它基质-金属蛋白酶(即MMP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12和MMP-13)而言选择性抑制MMP-2和/或MMP-9的抑制剂。
术语“异常细胞生长”和“过度增殖性疾病”在本申请中可以相互交换使用。
除非另有说明，如本文所用，术语“异常细胞生长”指不依赖于正常细胞调节机制(如接触抑制丢失)的细胞生长。这包括例如以下的异常生长(1)通过表达突变的酪氨酸激酶或者受体酪氨酸激酶过度表达而增殖的肿瘤细胞(肿瘤)；(2)其中发生异常酪氨酸激酶激活的其它增殖性疾病的良性和恶性细胞；(3)任何通过受体酪氨酸激酶增殖的肿瘤；(4)任何通过异常丝氨酸/苏氨酸激酶活化而增殖的肿瘤；以及(5)其中发生异常丝氨酸/苏氨酸激酶激活的其它增殖性疾病的良性和恶性细胞。
除非另有说明，如本文所用，术语“治疗(treating)”指逆转、缓解、抑制该术语适用的疾病或病症或这些疾病或病症的一种或多种症状的进展或者预防它们。除非另有说明，如本文所用，术语“治疗(treatment)”指如上所定义的治疗的行为。
与这样的量相应的给定活性剂的量将取决于诸如特定的化合物、病症及其严重程度、需要治疗的哺乳动物特征(如体重)等因素，尽管如此但是其仍可以由本领域技术人员常规地确定。“治疗”意指哺乳动物如人的病症的至少减轻，所述病症至少部分地是由MEK的活性所影响，而且治疗包括但不限于预防哺乳动物病症的发生，特别是当发现哺乳动物有患该病症的倾向但还没有诊断出患有该疾病时；调节和/或抑制病症；和/或缓解病症。
为了使用式I-V的化合物、其药学可接受的盐或前药用于包括人在内的哺乳动物的治疗(包括预防性治疗)，通常根据标准的药学实践将其配制成药物组合物。根据本发明的这一方面，本发明提供了一种包含上文定义的式I-V的化合物或其药学可接受的盐或前药以及药学可接受的稀释剂或载体的药物组合物。
本发明的组合物可以是适于口服使用的形式(例如片剂、锭剂、硬或软胶囊剂、水或油混悬剂、乳剂、可分散性散剂或颗粒剂、糖浆剂或酏剂)、适于局部使用的形式(例如乳膏、软膏、凝胶剂或水或油溶液剂或混悬剂)、适于吸入给药的形式(例如微细散剂或液态气雾剂)、适于吹入给药的形式(例如微细散剂)或者适于肠胃外给药的形式(例如用于静脉内、皮下或肌内给药的无菌水或油溶液或用于直肠给药的栓剂)。例如，用于口服使用的组合物可以包含例如一种或多种着色剂、甜味剂、调味剂和/或防腐剂。
合适的用于片剂的药学可接受的赋形剂包括例如惰性稀释剂如乳糖、碳酸钠、磷酸钙或碳酸钙；成粒剂和崩解剂如玉米淀粉或藻酸(algenic acid)；粘合剂如淀粉；润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石；防腐剂如对羟基苯甲酸乙酯或丙酯和抗氧化剂如抗坏血酸。片剂可以是未包衣的，或者是包衣的以改进它们在胃肠道内的崩解和随后的活性成分的吸收或者改善它们的稳定性和/或外观，不论那种情况，均使用本领域熟知的常规包衣剂和方法进行。
用于口服使用的组合物可以是其中活性成分与惰性固体稀释剂如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合的硬胶囊的形式，或者是其中活性成分与水或油如花生油、液体石蜡或橄榄油混合的软胶囊的形式。
水混悬剂通常包含细粉末形式的活性成分和一种或多种助悬剂如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍树胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂如卵磷脂或环氧烷与脂肪酸的缩合物(如聚氧乙烯硬脂酸酯)或环氧乙烷与长链脂族醇的缩合物如十七烷乙烯氧基十六醇或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合物如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合物如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水混悬剂还可以包含一种或多种防腐剂(如对羟基苯甲酸乙酯或丙酯)、抗氧化剂(如抗坏血酸)、着色剂、调味剂和/或甜味剂(如蔗糖、糖精或天冬甜素)。
可通过将活性成分悬浮在植物油(如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)或矿物油(如液体石蜡)中来制备油混悬剂。油混悬剂还可以包含增稠剂如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。还可以加入甜味剂，如上文所述的那些和调味剂以得到一种可口的口服制剂。还可以通过加入抗氧化剂如抗坏血酸以使这些组合物防腐。
适于通过加入水而制备水悬浮液的可分散性散剂和颗粒剂通常包含活性成分以及分散剂或润湿剂、助悬剂和一种或多种防腐剂。适当的分散剂或润湿剂以及助悬剂的实例如上文所提及的那些。还可以存在其它的赋形剂如甜味剂、调味剂和着色剂。
本发明的药物组合物还可以是水包油型乳剂的形式。油相可以是植物油如橄榄油或花生油，或矿物油如液体石蜡，或它们的任意混合物。适当的乳化剂可以是例如天然胶如阿拉伯树胶或黄蓍树胶、天然磷脂如大豆、卵磷脂、衍生于脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(如脱水山梨糖醇单油酸酯)和所述偏酯和环氧乙烷的缩合物如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。乳剂还可以包含甜味剂、调味剂和防腐剂。
可以用甜味剂如甘油、丙二醇、山梨糖醇、天冬甜素或蔗糖配制糖浆剂和酏剂，并且糖浆剂和酏剂还可包含缓和剂(demulcent)、防腐剂、调味剂和/或着色剂。
该药物组合物还可以是无菌可注射用水或油混悬剂的形式，其可以根据已知方法使用一种或多种合适的如上所述的分散剂或润湿剂和助悬剂进行配制。无菌可注射用制剂还可以是于无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射用溶液或悬浮液，如在1，3-丁二醇中的溶液。
栓剂可通过将活性成分和合适的非刺激性赋形剂混合来制备，所述非刺激性赋形剂在常温下是固体但在直肠温度下为液体，因此可以在直肠中融化释放出药物。合适的赋形剂包括例如可可脂和聚乙二醇。
局部用制剂如乳膏、软膏、凝胶剂和水或油溶液剂或混悬剂通常可通过使用本领域熟知的常规方法用活性成分和常规的局部可接受的载体或稀释剂配制而获得。
通过吹入给予的组合物可以是含有平均直径为例如30μm或更小的颗粒的微细散剂形式，该散剂本身仅包含活性成分或者包含用一种或多种生理学可接受的载体如乳糖稀释的活性成分。然后将用于吹入的散剂方便地保存在胶囊中，该胶囊包含例如1-50mg活性成分，通过涡轮吸入装置如用于吹入已知药物色甘酸钠的装置使用。
通过吸入给药的组合物可以是常规的用于将活性成分分散成包含微细固体粒子或液滴的气溶胶的加压气雾剂形式。可以使用常规的气雾剂推进剂如挥发性氟代烃或烃，并且气雾剂装置方便地用于分配计量量的活性成分。
关于制剂的更多信息，参见Comprehensive Medicinal Chemistry第5卷第25.2章(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board)，Pergamon Press 1990，将该文献特别地引入本文作为参考。
与一种或多种赋形剂组合生产单个剂型的本发明的化合物的量将必须根据治疗的对象、疾病或病症的严重程度、给药频率、该化合物的处置以及处方医生的判断而变化。不过，有效剂量为约0.001至约100mg/kg体重/日，优选约0.5-约35mg/kg/日，单次或分开给予。对于70kg的人，给药量将为约0.05-7g/日，优选约0.05-约2.5/日。在一些情况下，低于前述范围的下限的剂量水平可能是更合适的，而在另一些情况下可以使用较大的剂量而不引起任何有害的副作用，条件是该较大的剂量首先分成几份小的剂量在该天中给予。有关给药途径和用药法的更多信息，参见Comprehensive Medicinal Chemistry第5卷第25.3章(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board)，PergamonPress 1990，将该文献特别地引入本文作为参考。
式I-V的化合物用于治疗或预防目的的剂量大小一般将根据众所周知的用药原则，根据病症的性质和严重程度、动物或患者的年龄和性别以及给药途径而变化。
本发明的化合物可单独与用于治疗将得益于抑制MEK的疾病状态的其它药物和治疗方法组合使用。例如，本发明的化合物可以用于与一种或多种其它抗肿瘤物质组合使用，这些抗肿瘤物质包括但不限于有丝分裂抑制剂如长春碱；烷化剂如顺铂、卡铂和环磷酰胺；抗代谢药如5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷和羟基脲，或者例如欧洲专利申请239362中公开的优选抗代谢药之一，如N-(5-[N-(3，4-二氢-2-甲基-4-氧代喹唑啉-6-基甲基)-N-甲基氨基]-2-噻吩甲酰基)-L-谷氨酸；生长因子抑制剂；信号转导抑制剂，例如能够抑制EGFR(表皮生长因子受体)反应的活性剂如EGRF抗体、EGF抗体以及EGFR抑制剂分子如化合物ZD-1839(AstraZeneca)和BIBX-1382(Boehringer Ingelheim)；VEGF抑制剂如SU-6668(Sugen Inc.，South San Francisco，California，USA)或California，South San Francisco的Genentech，Inc.的抗-VEGF单克隆抗体；细胞周期抑制剂；嵌入性抗生素如阿霉素和博来霉素；酶如干扰素；以及抗激素，例如抗雌激素如NolvadexTM(他莫昔芬)；或者例如抗雄激素如CasodexTM(4’-氰基-3-(4-氟苯基磺酰基)-2-羟基-2-甲基-3’-(三氟甲基)-N-丙酰苯胺)。这些组合治疗可通过同时、序惯或单独给予单个治疗成分的方式来实现。
虽然式I-V的化合物主要是作为用于温血动物(包括人)的治疗活性剂有价值，但是在需要抑制MEK作用的任何时候其均是有用的。因此，它们作为用于开发新的生物学试验和研究新的药理学活性剂的药理学标准物是有用的。
本发明的化合物的活性可通过以下方法进行测定。在大肠杆菌(E.coli)中表达N-末端6His-标记的组成型活性MEK-1(2-393)，并通过常规方法纯化蛋白(Ahn等，Science 1994，265，966-970)。MEK1的活性通过以下方法进行评估在MEK1存在下测量来自γ-33P-ATP的γ-33P-磷酸在N-端His标记的ERK2中的掺入，该N-端His标记的ERK2在大肠杆菌中表达并通过常规方法纯化。该测定在96孔聚丙烯板上进行。温育混合物(100μL)包含25mM Hepes，pH 7.4、10mMMgCl2、5mM β-甘油磷酸盐、100μM原钒酸钠、5mM DTT、5nMMEK1和1μM ERK2。将抑制剂悬浮于DMSO中，包括对照在内的所有的反应均在最终浓度为1％的DMSO下进行。通过添加10μMATP(0.5μCiγ-33P-ATP/孔)使反应开始，并在室温下温育45分钟。添加等体积的25％TCA终止反应，并使蛋白沉淀。沉淀的蛋白截留在玻璃纤维B过滤板上，并用Tomtec MACH III收集器洗去过量的标记ATP。使板空气干燥，之后添加30μL/孔的Packard Microscint 20，并使用Packard TopCount对板进行计数。在该测定中，本发明的化合物表现出少于50μM的IC50。
由本发明涵盖的本发明的代表性化合物包括但不限于实施例中的化合物以及它们的药学可接受的酸或碱加成盐或其前药。下面所示的实施例意欲例示本发明的具体实施方案，但无意于以任何方式限制本申请的说明书或权利要求书的范围。
本申请中公开的全部文章和参考文献包括专利均引入本文作为参考。
实施例为例证本发明，引入以下的实施例。然而，要理解，这些实施例并不限制本发明而仅是意欲提出一种实践本发明的方法。本领域技术人员将认识到所描述的化学反应可容易地适于制备多种本发明的其它MEK抑制剂，而且制备本发明的化合物的其它方法也认为在本发明的范围之内。例如，通过对本领域技术人员而言清楚的修改，例如通过适当保护干扰基团、通过利用除了那些已描述的试剂以外的本领域已知的其它合适试剂和/或通过对反应条件进行常规修改可以成功地进行根据本发明的未例示化合物的合成。另外，应认识到，本文公开的或者本领域已知的其它反应物适用于制备本发明中的其它化合物。
在下面描述的实施例中，除非另有说明，所有温度均以摄氏温度表述。除非另有说明，试剂购自商业供应商如Aldrich ChemicalCompany、Lancaster、TCI或Maybridge，并且使用时没有进一步纯化。四氢呋喃(THF)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二氯甲烷、甲苯、二噁烷和1，2-二氟乙烷以全密封瓶(Sure seal bottle)购自Aldrich，并按原样使用。
下述反应一般在氮气或氩气正压下或使用干燥管(除非另有说明)在无水溶剂中进行，反应瓶通常配备橡胶隔片以经注射器引入底物和试剂。玻璃器皿烘干和/或热干。
柱色谱法在带有硅胶柱的Biotage系统(制造商Dyax Corporation)上或在硅胶SepPak cartridge(Waters)上进行。
使用Bruker仪器于300MHz下操作或使用Varian仪器于400MHz下操作记录1H-NMR谱。使用氯仿作为参比标准(7.25ppm)，得到CDCl3溶液的1H-NMR谱(以ppm报告)。如果需要使用其它的NMR溶剂。当报告多个峰时，使用以下缩略词s(单峰)、d(双峰)、t(三重峰)、m(多重峰)、br(宽峰)、dd(双二重峰)、dt(双三重峰)。给出偶合常数时，以赫兹(Hz)报告。
实施例1
6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(9a)的合成化合物9a的合成反应路线显示于图1中。
步骤A制备5-溴-2，3，4-三氟苯甲酸(2)在-78℃下向1-溴-2，3，4-三氟苯(1)(5.0mL，41.7mmol)在THF(120mL)中的溶液中加入LiHMDS(2.0M溶液，21mL，42mmol)。在-78℃下搅拌1小时后，将混合物加入CO2在THF(1L)中的溶液中。移去干冰浴，将反应混合物于室温下搅拌过夜。将反应混合物用10％HCl水溶液(835mL)终止反应，浓缩并用乙醚(250mL)洗涤。合并的有机物用5％NaOH水溶液(300mL)和水(100mL)洗涤。将水层用浓HCl酸化(pH 0)。得到的悬浮液用乙醚(2×300mL)萃取，用MgSO4干燥，过滤，减压浓缩，得到所需产物(2)7.70g(收率72％)。
步骤B制备5-溴-2-(2-氯苯氨基)-3，4-二氟苯甲酸(3))在-78℃下向LiHMDS(49.0mL，2M，在THF/庚烷中)在THF(40mL)中的溶液中加入2-氯苯胺(6.40mL，60.6mmol)。剧烈搅拌10分钟后，加入5-溴-2，3，4-三氟-苯甲酸(2)(7.70g，30.2mmol))在THF(60mL)中的溶液。移去干冰浴，将反应混合物于室温下搅拌4小时。将混合物浓缩，用10％HCl水溶液(75mL)处理，并用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取液用MgSO4干燥，过滤并浓缩。用沸腾的CH2Cl2研磨进行纯化得到所需酸(3)7.24g(66％)，为黄色固体。
步骤C制备5-溴-2-(2-氯苯氨基)-3，4-二氟苯甲酸甲酯(4)在室温下向5-溴-2-(2-氯苯氨基)-3，4-二氟苯甲酸(3)(4.50g，12.4mmol)在3∶1的THF∶MEOH混合物(32mL)中的溶液中加入(三甲基甲硅烷基)-重氮甲烷(8.10mL，2M溶液，在己烷中)。搅拌2小时后，将反应混合物用乙酸终止反应，用EtOAc稀释，并用水洗涤。干燥有机层(MgSO4)，减压浓缩，得到所需甲酯(4)4.35g(93％)。
步骤D制备2-(2-氯苯氨基)-3，4-二氟-5-三甲基硅烷基乙炔基苯甲酸甲酯(5)在常温下将5-溴-2-(2-氯苯氨基)-3，4-二氟苯甲酸甲酯(4)(101mg，0.268mmol)、TMS-乙炔(0.045mL，0.31mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(18.7mg，0.0261mmol)、CuI(5.1mg，0.027mmol)和i-Pr2NH(0.075mL，0.53mmol)在THF(1.5mL)中的混合物搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩，并用EtOAc稀释。有机层用饱和NH4Cl水溶液和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(100％己烷至在己烷中的1％EtOAc)纯化，得到所需产物(5)81.3mg(收率77％)。
步骤E制备5-乙酰基-2-(2-氯苯氨基)-3，4-二氟苯甲酸甲酯(6)将2-(2-氯苯氨基)-3，4-二氟-5-三甲基硅烷基乙炔基苯甲酸甲酯(5)(79.4mg，0.20mmol)、HgSO4(59.8mg，2.0mmol)和浓H2SO4(0.02mL，0.40mmol)在80％丙酮水溶液(2.5mL)中的混合物回流48小时。将反应物减压浓缩，并用EtOAc稀释。有机层用水和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并浓缩，得到所需产物(6)50.1mg(73％)。
步骤F制备6-(2-氯苯氨基)-7-氟甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(7)将t-BuOK(0.47mL，1.0M，在THF中)加入丙-2-酮肟中。搅拌30分钟后，加入THF(0.5mL)，将反应混合物冷却至-78℃。加入5-乙酰基-2-(2-氯苯氨基)-3，4-二氟苯甲酸甲酯(6)(50.0mg，0.147mmol)在THF (1mL)中的溶液。将反应混合物缓慢暖至0℃，并搅拌2小时。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液终止反应，用EtOAc和水稀释。分离水层并用EtOAc进行萃取。将合并的有机萃取液用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到5-乙酰基-2-(2-氯苯氨基)-3-氟-4-异亚丙基氨基氧基苯甲酸甲酯。将回收的肟悬浮在1∶1的5％HCl水溶液和MeOH的混合物中，加热回流。1小时后，将反应混合物冷却至室温并用EtOAc稀释。将有机层用水洗涤，用MgSO4干燥，并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(40％二氯甲烷，在己烷中)纯化，得到所需产物(7)17mg(两步35％)。
步骤G制备6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(8a)将6-(2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(7)(18.6mg，0.0556mmol)和N-溴琥珀酰亚胺(12.0mg，0.0667mmol)在DMF(1mL)中搅拌16小时。将反应混合物用EtOAc稀释，用水(2x)洗涤。将有机层用MgSO4干燥，过滤并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(10％EtOAc，在己烷中)纯化，得到所需产物(8a)12.6mg(55％)。
步骤H制备6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(9a)室温下向6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(8a)(200mg，0.48mmol)在THF-水(3mL/1.5mL)中的溶液中加入LiOH水溶液(1M，1.00mL)。15小时后，将反应混合物用HCl水溶液(1M)酸化至pH 1，用水稀释，用EtOAc/THF萃取。有机层用水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗制酸(9a)191.5mg(99％)，其使用时没有经过进一步纯化。测得MS APCI(-)m/z 397，399(M+，Br，Cl图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.55(s，1H)，8.37(s，1H)，7.75(s，1H)，7.42(d，1H)，6.97(t，1H)，2.60(s，3H)19FNMR(376MHz，DMSO-d6)-140.15(s)。
实施例2
6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸环丙基甲氧基酰胺(10a)的合成化合物10a的合成反应路线显示于图1中。室温下向6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(9a)(50.0mg，0.125mmol)在DMF(1mL)中的溶液中加入HOBt(24.6mg，0.161mmol)、Et3N(0.060mL，0.43mmol)、O-环丙基甲基-羟胺(15.5mg，0.178mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCl)(32.2mg，0.168mmol)。6天后，将反应混合物用EtOAc稀释，用饱和NH4Cl水溶液、盐水、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，并使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(0.5％MeOH，在氯仿中)纯化，得到所需产物(10a)27.6mg(收率47％)。测得MSAPCI(-)m/z 466，468(M+，Br，Cl图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.82(s，1H)，7.57(d，1H)，7.31(dd，1H)，6.74(dd，1H)，3.73(d，2H)，2.60(s，3H)，1.16(m，1H)，0.55(m，2H)，0.28(m，2H)19F NMR(376MHz，CD3OD)-140.96(s)。
实施例3
6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(12a)的合成化合物12a的合成反应路线显示于图2中。
步骤A制备6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)-酰胺(11a)室温下向6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(10a)(75.2mg，0.188mmol)在DMF(1.5mL)中的溶液中加入HOBt(38.2mg，0.249mmol)、Et3N(0.080mL，0.571mmol)、O-(2-乙烯氧基乙基)羟胺(28.5mg，0.276mmol)和EDCI(47.2mg，0.246mmol)。6天后，将反应混合物用EtOAc稀释，用饱和NH4Cl水溶液、盐水、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，并使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(3％MeOH，在氯仿中)纯化，得到所需产物(11a)57.8mg(63％)。
步骤B制备6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(12a)室温下将在EtOH(3mL)中的6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)酰胺(11a)(55.4mg，0.114mmol)和HCl水溶液(1M，0.23mL)搅拌2小时。将反应混合物的pH用NaOH水溶液(2M)调至6-7。反应物用EtOAc稀释。有机层用水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到所需产物(12a)50.2mg(收率96％)。测得MS APCI(-)m/z 456，458(M+，Br，Cl图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.87(s，1H)，7.57(d，1H)，7.31(dd，1H)，6.74(dd，1H)，4.01(t，2H)，3.74(t，2H)，2.60(s，3H)19F NMR(376MHz，CD3OD)-140.85(s)。
实施例4
N-[6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羰基]-甲磺酰胺(13a)的合成化合物13a的合成反应路线显示于图3中。
在50℃下将6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(9a)(41mg，0.102mmol)和羰基二咪唑(23mg，0.140mmol)在THF(1mL)中的混合物于密封管反应器中搅拌。将反应混合物冷却至室温，加入甲磺酰胺(17mg，0.179mmol)，随后加入DBU(0.025mL，0.164mmol)。在50℃下搅拌1小时后，将反应混合物冷却至室温，用EtOAc稀释。有机层用水、1N HCl和盐水洗涤。干燥有机层(MgSO4)并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(7％甲醇，在氯仿中)纯化，得到所需产物(13a)34mg(收率65％)。测得MS APCI(-)m/z 474，476(M+，Br，Cl图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.27(s，1H)，7.53(s，1H)，7.27(d，1H)，6.73(t，1H)，3.11(s，3H)，2.55(s，3H)19FNMR(376MHz，CD3OD)-141.84(s)。
实施例5 6-(2，4-二氯-苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(9b)的合成化合物9b的合成反应路线显示于图1中。
步骤A制备6-(2，4-二氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(8b)将在DMF (5mL)中的6-(2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(7)(129mg，0.384mmol)和N-氯琥珀酰亚胺(57mg，0.421mmol)搅拌16小时。加入浓HCl(3μL)，搅拌反应混合物2小时。将反应混合物用EtOAc稀释，用水(2×)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(5％EtOAc，在己烷中)纯化，得到所需产物(8b)73mg(收率52％)。
步骤B制备6-(2，4-二氯-苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(9b)根据实施例1步骤H使用6-(2，4-二氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(8b)制备化合物9b，得到所需产物(9b)68mg(收率98％)。测得MS APCI(-)rm/z 353，355(M+，Br，Cl图形)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.58(s，1H)，8.34(s，1H)，7.65(d，1H)，7.31(dd，1H)，7.04(dd，1H)，2.60(s，3H)19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-140.36(s)。
实施例6 6-(2，4-二氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基]酰胺(12b)的合成如图4所示，根据实施例3步骤A和B使用6-(2，4-二氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[d]异噁唑-5-羧酸(9b)作为原料进行化合物12b的合成反应路线，得到12b 29mg(两步收率38％)。测得MS APCI(-)m/z 412，414(M+，Br，Cl图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.87(s，1H)，7.45(m，1H)，7.19(m，1H)，6.80(m，1H)，4.02(t，2H)，3.75(t，2H)，2.60(s，3H)19F NMR(376MHz，CD3OD)-141.05(s)。
实施例7 3-氨基-6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟苯并[d]异噁唑-5-羧酸(19)的合成化合物19的合成反应路线显示于图5中。
步骤A制备2-(2-氯苯氨基)-5-氰基-3，4-二氟苯甲酸甲酯(15)在密封管反应器中加热5-溴-2-(2-氯苯氨基)-3，4-二氟苯甲酸甲酯(14)(3.01g，7.99mmol)、1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁(dppf)(93mg，0.162mmol)、Pd2dba3(73mg，0.080mmol)和Zn(CN)2(573mg，4.78mmol)在1-甲基-2-吡咯烷酮(NMP4.5mL)中的混合物。20小时后，将反应混合物冷却至室温，通过加入4∶1∶4(体积)的饱和NH4Cl、浓NH4OH和水的混合物8mL终止反应，用EtOAc/THF的混合物进行萃取。将合并的有机萃取液用4∶1∶4(体积)的饱和NH4Cl、浓NH4OH和水的混合物以及盐水洗涤。干燥有机层(MgSO4)并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(两次100％己烷至在己烷中的35％CH2Cl2；然后在己烷中的30％二氯甲烷)纯化，得到所需产物(15)1.33g(52％)。
步骤B制备3-氨基-6-(2-氯苯氨基)-7-氟苯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(17)室温下向丙-2-酮肟(285mg，3.82mmol)在THF(5mL)中的搅拌溶液中加入t-BuOK(3.80mL，1.0M溶液，在THF中)。将反应混合物用THF(20mL)进一步稀释，30分钟后冷却至0℃。加入在THF(5mL)中的2-(2-氯苯氨基)-5-氰基-3，4-二氟苯甲酸甲酯(15)(600mg，1.86mmol)。将反应混合物缓慢暖至室温。90分钟后，将反应混合物用饱和NH4Cl终止反应，用EtOAc稀释。有机层用饱和NH4Cl和盐水洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩。将残余物(16)用MeOH(10mL)稀释，加入2M HCl在乙醚(10mL)中的溶液。16小时后，将反应混合物用EtOAc稀释，用水、饱和NaHCO3和水洗涤。干燥有机层(MgSO4)并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(1.5％甲醇，在CH2Cl2中)纯化，得到所需产物(17)399mg(64％)。
步骤C制备3-氨基-6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟苯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(18)根据实施例1步骤G使用化合物17作为原料制备化合物18。
步骤D制备3-氨基-6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟苯并[d]异噁唑-5-羧酸(19)化合物19根据实施例1步骤H使用3-氨基-6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟苯并[d]异噁唑-5-羧酸甲酯(18)作为原料来进行制备，得到188mg(收率98％)化合物19。测得MS APCI(-)m/z 398，400(M+，Br，Cl图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.47(s，1H)，8.49(s，1H)，7.73(m，1H)，7.41(dd，1H)，6.92(t，1H)，6.76(s，2H)19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-141.48(s)。
实施例8 3-氨基-6-(4-溴-2-氯-苯氨基)-7-氟苯并[d]异噁唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(21)的合成如图6所示，化合物21的合成反应路线根据实施例3步骤A和B使用3-氨基-6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟苯并[d]异噁唑-5-羧酸(19)作为原料完成，得到16mg(两步收率23％)化合物21。测得MS APCI(-)m/z 457，459(M+，Br，Cl图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.92(s，1H)，8.59(s，1H)，7.94(s，1H)，7.69(s，1H)，7.36(d，1H)，6.75(dd，1H)，6.71(s，2H)，4.73(s，1H)，3.87(s，2H)，3.59(s，2H)19F NMR(376MHz，DMSO-d6)-140.64(s)。
实施例9 7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(30)的合成化合物30的合成反应路线显示于图7中。
步骤A制备4，6-二氯烟酸乙酯(22)将POCl3(100mL，1092mmol)加入4，6-二羟基烟酸乙酯(J.Heterocyclic Chem.1983，20，1363)(20.0g，109mmol)中。将得到的悬浮液冷却至0℃，并以使得反应混合物内部温度保持低于25℃的速度逐滴加入三乙胺(15.2mL，109mmol)。当加入完成时，将反应混合物暖至室温然后至80℃。4小时后，将反应混合物冷却至室温并搅拌16小时。将反应混合物小心倾倒在2L碎冰上。将混合物用EtOAc和乙醚萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。将暗褐色液体通过硅胶短柱(plug)(CH2Cl2)纯化，得到所需产物(22)，为低熔点黄色固体(18.7g，78％)。
步骤B制备4，6-二氯烟酸(23)将氢氧化钠(40mL，6.25M溶液)加入4，6-二氯烟酸乙酯(22)(25.95g，118mmol)在4∶1∶1的THF/MeOH/水(600mL)中的搅拌溶液中。30分钟后，将反应混合物用浓HCl酸化至pH 2，用1∶1的EtOAc/Et2O稀释，并用水和盐水洗涤。干燥(Na2SO4)有机层并浓缩。将得到的灰白色固体从甲苯中浓缩两次，得到所需产物(23)，为白色固体(21.73g，96％)。
步骤C制备4-(4-溴-2-氯苯氨基)-6-氯烟酸盐酸盐(24)30分钟内将LiHMDS(261mL，1M溶液，在己烷中)逐滴加入-78℃的4-溴-2-氯苯氨基(35.0g，172mmol)在THF(80mL)中的溶液中。1小时后，在30分钟内将4，6-二氯烟酸(23)(15.7g，81.7mmol)逐滴加入。将反应混合物缓慢暖至室温并搅拌16小时。将反应混合物用水终止反应，用EtOAc稀释，并用1M HCl酸化。得到的沉淀经过滤分离，并用EtOAc洗涤。将固体从甲苯中浓缩两次，用CH2Cl2研磨，并经过滤收集。将固体从甲苯(3×)中进一步浓缩，然后真空干燥，得到含有少量水的所需产物(24)(36.0g)。
步骤D制备4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5，6-二氯烟酸(25)将N-氯琥珀酰亚胺(13.0g，99.0mmol)加入4-(4-溴-2-氯苯氨基)-6-氯烟酸(24)(32.54g，89.9mmol)在DMF(500mL)中的悬浮液中。将悬浮液在室温下搅拌过夜。将反应混合物用饱和亚硫酸氢钠(200mL)和水(1L)稀释，使得形成粘稠的白色沉淀，此沉淀经过滤分离并用水洗涤。将固体溶解于THF中。加入两体积乙醚，有机溶液用盐水洗涤，用NaSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到橙色固体。将此固体用乙醚研磨，得到所需产物(25)，为灰白色固体(13.34g，37％)。测得MS(APCI-)m/z393，395，397(M-；Cl，Br图形)。
或者，4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5，6-二氯烟酸(25)可以通过下面描述的路线和方法合成。
将N-氯琥珀酰亚胺(56.5g，423mmol)分批加入4，6-二氯烟酸甲酯(70.5g，385mmol)在DMF(705mL)中的悬浮液中。加入浓HCl(3.20mL，38.5mmol)。搅拌2.5小时后，将产物用水和Na2S2O3(70mL)进行沉淀。将浆状物用2M HCl(30mL)酸化至pH 3。经过滤分离所需产物5-氯-4，6-二羟基烟酸乙酯，为浅黄色固体(75.7g，90％)。测得MS ESI(+)m/z 218，220(M+，Cl图形)。
将5-氯-4，6-二羟基烟酸乙酯(8.05g，37mmol)悬浮于三氯氧化磷(30mL，296mmol)中。将混合物冷却至0℃，加入三乙胺(5.16mL，37.0mmol)。将反应物加热至60℃，保持3小时。将溶液冷却至室温，倾倒在冰上，搅拌15分钟，用乙酸乙酯(2×)和乙醚(1×)萃取。将合并的有机萃取液用盐水(3×)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到棕色液体。将粗制产物通过硅胶短柱用二氯甲烷洗脱。得到所需产物4，5，6-三氯烟酸乙酯，为黄色固体(7.76g，82％)。
将氢氧化钠(1.0M溶液，61.0mL，61.0mmol)加入4，5，6-三氯烟酸乙酯(7.76g，30.5mmol)在4∶1的THF/MeOH(150mL)中的溶液中。搅拌30分钟后，通过加入浓HCl将反应物酸化至pH 1，用乙酸乙酯稀释，用水(3×)和盐水(2×)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到所需产物4，5，6-三氯烟酸，为灰白色固体(6.77g，98％)。
将LiHMDS(1.0M溶液，在己烷中，53.0mL，53.0mmol)逐滴加入冷却至-78℃的4-溴-2-氯苯胺(7.10g，35.0mmol)在THF(15mL)中的搅拌溶液中。1小时后，将4，5，6-三氯烟酸(3.73g，16.5mmol)以于THF(12mL)中的溶液逐滴加入。使反应物缓慢暖至室温，同时搅拌过夜。将悬浮液用1M HCl和乙酸乙酯稀释，水相用乙酸乙酯(3×)萃取。将合并的有机相用Na2SO4干燥并浓缩，得到褐色固体。将固体用乙醚研磨过夜，经过滤分离固体，得到所需产物(25)，为褐色固体(4.85g，75％)。测得MS APCI(-)m/z 395，397(M-，Cl，Br图形)。
步骤E制备4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5，6-二氯烟酸甲酯(26)将三甲基甲硅烷基重氮甲烷(2.0M溶液，在己烷中，37mL，74mmol)缓慢加入4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5，6-二氯烟酸(25)(14.67g，37mmol)的悬浮液中。加入完成后，将得到的浆状物用己烷(600mL)稀释，经过滤分离固体并用己烷洗涤。分离所需产物，为灰白色固体(10.06g)。将己烷洗液浓缩，将固体通过硅胶短柱用二氯甲烷洗脱。将含有产物的部分浓缩，得到另外的3.83g所需产物(26)，总共13.89g(91％)。测得MS(APCI+)m/z 409，411，413(M+；Cl，Br图形)。
步骤F制备6-叠氮基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯烟酸甲酯(27)将叠氮化钠(4.4g，68mmol)加入4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5，6-二氯烟酸甲酯(26)(13.89g，33.8mmol)在DMF(200mL)中的悬浮液中，将混合物在室温下搅拌过夜。将溶液用水(600mL)稀释，得到的白色沉淀经过滤收集并用水洗涤。将固体溶解于THF中。加入两体积的乙醚，有机溶液用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到所需产物(27)，为浅黄色固体(12.94g，92％)。
步骤G制备6-氨基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯烟酸甲酯(28)将锌粉(10g，155mmol)分批加入6-叠氮基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯烟酸甲酯(27)(12.94g，31mmol)在3∶1的二氯甲烷/乙酸(300mL)中的悬浮液中。15分钟后，将反应混合物倾倒入700mL乙酸乙酯中，用水、饱和碳酸氢铵和盐水洗涤。将有机溶液用NaSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到所需产物(28)，为灰白色固体(11.85g，98％)。测得MS(APCI+)m/z 390，392，394(M+；Cl，Br图形)。
步骤H制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(29)将氯乙醛(50％水溶液，0.70mL，5.7mmol)加入盛于密封管中的6-氨基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯烟酸甲酯(28)在DMF(7mL)中的悬浮液中。将反应混合物在80℃下加热四小时，然后使之冷却至室温，并搅拌过夜。将暗褐色溶液用水(70mL)稀释，得到的浅棕色沉淀经过滤收集，并用水洗涤。将固体溶解于THF中。加入两体积的乙醚，有机溶液用盐水洗涤，用NaSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到棕色固体。将含水滤液用乙酸乙酯萃取，有机萃取液用NaSO4干燥，过滤，并真空浓缩。将该物质与先前分离的棕色固体合并在一起，将合并物进行柱色谱(二氯甲烷，然后20∶1的二氯甲烷/甲醇)。分离所需产物(29)，为浅黄色固体(0.752g，64％)。测得MS(APCI+)m/z 414，416，418(M+；Cl，Br图形)。
步骤I制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(30)将氢氧化钠(1.0M水溶液，14.6mL，14.6mmol)加入7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(29)在甲醇(30mL)中的溶液中，并使溶液在室温下搅拌过夜。经旋转蒸发除去甲醇，将溶液用水稀释，并通过加入1.0M HCl酸化至pH 2。将含水悬浮液用4∶1的乙酸乙酯/THF进行萃取。将有机萃取液用盐水洗涤，用NaSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到所需产物(30)，为浅橙色固体。测得MS(APCI+)m/z 400，402，404(M+Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ9.01(s，1H)，7.83(s，1H)，7.51(s，2H)，7.25(d，1H)，6.60(d，1H)。
下面的化合物通过图7中所示类似的方式合成。
8-氯-7-(2，4-二氯苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS APCI(+)m/z 356，358(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ9.16(s，1H)，8.00(d，1H)，7.72(d，1H)，7.51(d，1H)，7.25(dd，1H)，7.02(d，1H)。
8-氯-7-(2-氟-4-碘苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS APCI(+)m/z 432，434(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.31(s，1H)，8.11(s，1H)，7.71(s，1H)，7.61(d，1H)，7.37(d，1H)，6.62(t，1H)。
8-氯-7-(2，4-二氟苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS APCI(+)m/z 324，326(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.27(s，1H)，8.06(s，1H)，7.65(s，1H)，7.29(t，1H)，6.96(m，2H)。19F(376MHz，DMSO-d6)-118.9(s)，-124.8(s)。
7-(4-溴-2-甲基苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS APCI(+)m/z 380，382(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.31(s，1H)，8.09(s，1H)，7.69(s，1H)，7.42(s，1H)，7.24(d，1H)，6.64(d，1H)，2.28(s，3H)。
实施例10 1-[7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基]乙酮从实施例9步骤H的产物化合物29制备该化合物。将Tebbe试剂(μ-氯-μ-亚甲基[双(环戊二烯基)钛]二甲基-铝，1M溶液，在甲苯中，0.12mL，0.12mmol)加入冷却至0℃的7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(29)(25mg，0.061mmol)在THF(1mL)中的溶液中。将反应混合物暖至室温，并搅拌1.5小时。加入HCl(10％水溶液，1mL)，将混合物搅拌16小时。将反应物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸钠水溶液洗涤，用MgSO4干燥，浓缩。将粗品通过闪蒸柱色谱法(二氯甲烷至100∶1的二氯甲烷/甲醇)纯化，得到所需产物(6.8mg，28％)。测得MS APCI(-)m/z 396，398，400(M-，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.05(br s，1H)，8.81(s，1H)，7.71(s，2H)，7.55(d，1H)，7.22(dd，1H)，6.55(d，1H)，2.67(s，3H)。
实施例11 3-溴-7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺该化合物的合成反应路线如下所示。
步骤A制备3-溴-7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯。将N-溴琥珀酰亚胺(14mg，0.080mmol)加入7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(30mg，0.072mmol)在氯仿(1.0mL)中的溶液中。搅拌5小时后，将反应物用乙酸乙酯稀释，用NaHSO3、盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色固体(33mg，92％)。测得MS APCI(+)m/z 494，496，498(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.82(s，1H)，8.65(s，1H)，7.67(s，1H)，7.55(dd，1H)，7.22(dd，1H)，6.53(d，1H)，3.98(s，3H)。
步骤B制备3-溴-7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺。标题化合物的合成根据实施例1步骤H以及实施例3步骤A和B使用3-溴-7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯为原料进行，得到所需产物20mg，为浅黄色固体。测得MS APCI(+)m/z 539，541，543(M+，Cl，Br图形)。
实施例12 7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基-酰胺的合成该化合物的合成反应路线如下所示。
步骤A制备4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5，6-二氯烟酸叔丁酯将2-叔丁基-1，3-二异丙基-异脲(10.6g，53mmol)加入4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5，6-二氯烟酸(4.21g，10.6mmol)在THF(200mL)中的溶液中。将反应物加热回流。30分钟后，将反应物冷却至室温，并用EtOAc稀释。将有机层用饱和K2CO3(2×)、盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩。将黄色固体用二氯甲烷研磨，经过滤除去白色固体。将滤液真空浓缩，得到所需产物，为黄色固体(5.53g，97％)。测得MS APCI(-)m/z451，453(M-，Cl，Br图形)。
步骤R制备4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯-6-(2-羟基丙氨基)-烟酸叔丁酯将1-氨基-丙-2-醇(2.44g，30.3mmol)和三乙胺(0.42mL，3.03mmol)加入4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5，6-二氯烟酸叔丁酯(1.37g，3.03mmol)在乙腈(30mL)中的溶液中。将反应物加热回流。23小时后，将反应物冷却至室温，用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3、水、盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到白色固体。通过闪蒸柱色谱法(20∶1的二氯甲烷/甲醇)纯化，得到所需产物，为白色固体(1.11g，75％)。测得MS APCI(+)m/z 492，494(M+，Cl，Br图形)。
步骤C制备4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯-6-(2-氧代丙氨基)-烟酸叔丁酯将4分子筛和N-甲基吗啉(0.10g，0.85mmol)加入4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯-6-(2-羟基丙氨基)-烟酸叔丁酯(0.28g，0.57mmol)在乙腈(1.1mL)中的溶液中。将混合物冷却至0℃，并加入过镣酸四丙基铵(0.030g，0.085mmol)。搅拌1小时后，将反应物通过硅胶短柱过滤，用EtOAc洗涤。将滤液浓缩。通过闪蒸柱色谱法(20∶1的己烷/乙酸乙酯)纯化，得到所需产物，为白色固体(86mg，31％)。测得MSAPCI(+)m/z 490，492(M+，Cl，Br图形)。
步骤D制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸将4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯-6-(2-氧代丙氨基)-烟酸叔丁酯(0.075g，0.15mmol)溶解于浓H2SO4(0.50mL)中。10分钟后，加入冰水，并将混合物搅拌10分钟。将混合物用EtOAc稀释，用1M NaOH中和，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到所需产物，为灰白色固体。测得MS APCI(+)m/z 416，418(M+，Cl，Br图形)。
步骤E制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基-酰胺根据实施例2使用7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸作为原料进行标题化合物的合成，得到8mg(18％)的所需产物，为黄色固体。测得MS APCI(+)m/z 485，487(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.68(s，1H)，7.72(m，1H)，7.54(m，1H)，7.20(dd，1H)，6.42(d，1H)，3.58(d，2H)，2.57(s，3H)，0.64(m，1H)，0.57(m，2H)，0.23(m，2H)。
实施例13
7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(31)的合成图8显示化合物31的合成反应路线，该化合物根据实施例2的方法使用7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(30)作为原料进行制备，得到4.1g(收率53％)的化合物31。测得MS(APCI-)m/z 467，469，471(M-Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.76(s，1H)，7.95(d，1H)，7.64(d，1H)，7.56(d，1H)，7.26(dd，1H)，6.56(d，1H)，3.57(d，2H)，1.10(m，1H)，0.54(m，2H)，0.24(m，2H)。
下面的化合物通过图7、8和9中所示的类似方式使用实施例9步骤C中的适当苯胺来合成。
7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺测得MS ESI(+)m/z 453，455，457(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.70(s，1H)，7.95(s，1H)，7.67(s，1H)，7.34(m，1H)，7.20(m，1H)，6.79(m，1H)，3.49(m，2H)，1.08(m，1H)，0.55(m，2H)，0.26(m，2H)。19F NMR(376MHz，CD3OD)δ-127.4。
8-溴-7-(2-氟苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺测得MS ESI(+)m/z 375，377(M+，Cl图形)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.70(s，1H)，7.91(s，1H)，7.60(s，1H)，7.09(m，1H)，7.00(m，1H)，6.95(m，1H)，6.77(m，1H)，3.47(d，2H)，1.05(m，1H)，0.51(m，2H)，0.22(m，2H)。19F NMR(376MHz，CD3OD)δ-132.1。
7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺测得MS ESI(+)m/z 443，445，447(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.74(s，1H)，7.91(s，1H)，7.61(s，1H)，7.32(m，1H)，7.16(m，1H)，6.68(m，1H)，3.84(t，2H)，3.66(t，2H)。19F NMR(376MHz，CD3OD)δ-128.9。
8-氯-7-(2-氟苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺测得MS ESI(+)m/z 365，367(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.73(s，1H)，7.89(s，1H)，7.59(s，1H)，7.10(m，1H)，7.00(m，1H)，6.94(m，1H)，6.77(m，1H)，3.78(t，2H)，3.62(t，2H)。19F NMR(376MHz，CD3OD)δ-131.9。
8-氯-7-(2，4-二氯苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺测得MS APCI(-)m/z 413，415，417(M-，Cl图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.78(s，1H)，7.90(s，1H)，7.87(s，1H)，7.10(dd，1H)，6.61(d，1H)，4.0(m，2H)，3.72(m，2H)。
7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS ESI(+)m/z 384，386，388(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.29(s，1H)，8.10(s，1H)，7.68(s，1H)，7.53(m，1H)，7.23(m，1H)，6.75(m，1H)。19F NMR(376MHz，DMSO-d6)δ-127.9。
8-氯-7-(2-氟苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS ESI(+)m/z 306，308(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.30(s，1H)，8.09(s，1H)，7.67(s，1H)，7.22(dd，1H)，7.06(dd，1H)，6.98(m，1H)，6.84(m，1H)。19F NMR(376MHz，DMSO-d6)δ-130.5。
8-氯-7-(4-氯-2-氟苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS ESI(+)m/z 340，342(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.29(s，1H)，8.10(s，1H).7.68(s，1H)，7.43(m，1H)，7.12(m，1H)，6.83(m，1H)。19F NMR(376MHz，DMSO-d6)δ-127.8。
8-氯-7-(4-氯-2-氟苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺测得MS ESI(+)m/z 409，411(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ9.97(br s，1H)，8.82(s，1H).7.73(s，1H)，7.71(s，1H)，7.18(m，1H)，6.97(m，1H)，6.56(m，1H)，6.47(br s，1H)，3.60(m，2H)，1.00(m，1H)，0.56(m，2H)，0.24(m，2H)。19F NMR(376MHz，CD3OD)δ-128.7。
实施例14
7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺的合成化合物33a的合成反应路线显示于图9中，该化合物根据实施例3步骤A和B使用7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]-6-羧酸(30)进行制备，得到所需产物44mg(两步收率40％)。测得MS(APCI+)m/z459，461，463(M+Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.90(s，1H)，8.08(s，1H)，7.93(s，1H)，7.69(s，1H)，7.45，(d，1H)，7.06(m，1H)，3.86(br s，2H)，3.72(br s，2H)。
实施例15 7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(36)化合物36的合成反应路线显示于图10中。
步骤A7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(34)通过修改的Katritzky等的方法(J.Org.Chem.，2003，68，4935-4937J.Org.Chem.，1990，55，3209-3213)来完成制备。将双(苯并三唑)(bis(benzotriazazole))加合物(用1-甲基哌嗪形成)(106mg，0.230mmol)加入6-氨基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯烟酸甲酯(28)(30mg，0.076mmol)在二氯乙烯(1mL)中的悬浮液中，然后加入ZnBr2(52mg，0.230mmol)。将反应混合物回流下搅拌10小时，然后在室温下搅拌16小时。将反应混合物用CH2Cl2稀释，并过滤。将滤液用水洗涤。将水层用CH2Cl2萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(60∶1的CH2Cl2/MeOH)纯化，得到所需产物(34)，为黄色固体(31mg，79％)。
步骤B7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(36)将氢氧化钠(59μL，1M溶液)加入7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(34)在MeOH(1mL)中的悬浮液中。搅拌18小时后，将反应混合物浓缩至干。将残余物(35)用甲苯稀释并浓缩(重复)，将回收的31mg黄色残余物(35)用于下步而没有纯化。将残余物(35)悬浮在CH2Cl2(1mL)中，冷却至0℃，加入草酰氯(150μL，2M溶液，在CH2Cl2中)。加入一滴DMF，将反应混合物暖至室温。10分钟后，将该混合物浓缩，然后从甲苯中浓缩两次，然后真空干燥。将得到的黄色固体悬浮在CH2Cl2(1mL)中，冷却至0℃，加入环丙基甲基羟胺(16mg，0.180mmol)。将反应混合物暖至室温并搅拌16小时后，将其用EtOAc稀释。将有机层用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(15∶1的CH2Cl2/MeOH)纯化，得到所需产物(36)，为浅黄色固体(12mg，37％)。测得MS ESI(+)m/z 567，569，571(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.35(s，1H)，7.55(d，1H)，7.38(s，1H)，7.25(dd，1H)，6.54(d，1H)，3.59(d，2H)，3.17(t，4H)，2.74(m，4H)，2.43(s，3H)，1.09(m，1H)，0.54(m，2H)，0.24(m，2H)。
实施例16
7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-吗啉-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(37)的合成化合物37的合成反应路线显示于图10中。化合物37根据实施例15的步骤A和B使用6-氨基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯烟酸甲酯(28)和双(苯并三唑)加合物(用吗啉形成)进行制备，得到所需产物(37)2mg(两步收率8％)。测得MS ESI(+)m/z 554，556，558(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.41(s，1H)，7.55(d，1H)，7.38(s，1H)，7.26(dd，1H)，6.54(d，1H)，3.91(t，4H)，3.59(d，2H)，3.11(t，4H)，1.08(m，1H)，0.54(m，2H)，0.24(m，2H)。
实施例17 7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-二甲氨基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(38)的合成化合物38的合成反应路线显示于图10中。化合物38根据实施例15的步骤A和B使用6-氨基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯烟酸甲酯(28)和双(苯并三唑)加合物(用二甲胺形成)进行制备，得到所需产物(38)16mg(两步收率37％)。测得MS ESI(+)m/z 512，514，516(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.37(s，1H)，7.54(d，1H)，7.30(s，1H)，7.24(dd，1H)，6.52(d，1H)，3.59(d，2H)，2.86(s，6H)，1.07(m，1H)，0.53(m，2H)，0.23(m，2H)。
实施例18 7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-哌啶-1-基甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺(39)的合成化合物39的合成反应路线显示于图11中。化合物39通过修改T.Kercher等的方法(准备中的手稿本)进行制备。将吡啶(4μL，0.043mmol)和37％甲醛水溶液(5μL，0.065mmol)溶解于6∶1的MeCN/水(0.5ml)中，并搅拌30分钟。加入7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺(33a)(10mg，0.022mmol)，然后加入三氟甲基璜酸钪(1mg，0.002mmol)。搅拌16小时后，加入另外的三氟甲基璜酸钪(1mg)、哌啶(3.8μL)和甲醛水溶液(3.8μL)。约60小时后，将反应混合物用EtOAc稀释，用水、10％K2CO3和盐水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(40∶1的CH2Cl2/MeOH至20∶1的CH2Cl2/MeOH至9∶1的CH2Cl2/MeOH)纯化，得到所需产物(39)，为白色固体(6mg，50％)。测得MS APCI(+)m/z 556，558，560(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.83(s，1H)，7.56(s，1H)，7.54(s，1H)，7.27(dd，1H)，6.56(d，1H)，3.91(m，4H)，3.70(m，2H)，2.51(宽s，4H)，1.60(宽s，4H)，1.50(宽s，2H)。
下面的化合物通过图11中所示的类似方式合成。
7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基-酰胺7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-吗啉-4-基甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基-酰胺的合成反应路线与图11中所示的路线类似，使用7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺(33a)和吗啉，得到所需产物。测得MS APCI(+)m/z 568，570，572(M+，Cl，Br图形)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.76(s，1H)，8.04(s，1H)，7.56(d，1H)，7.21(dd，1H)，6.68(d，1H)，4.51(s，2H)，4.00(m，4H)，3.78(d，2H)，1.68(m，1H)，0.56(m，2H)，0.26(m，2H)。
7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-二甲氨基甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-二甲氨基甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺的合成反应路线与图11所示的路线类似，使用7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺(33a)和二甲胺，得到所需产物。测得MS APCI(+)m/z 528，530，532(M+，Cl，Br图形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.71(s，1H)，7.50(d，1H)，7.44(s，1H)，7.20(dd，1H)，6.55(d，1H)，3.80(s，2H)，3.74(d，2H)，2.04(s，6H)，1.18(m，1H)，0.51(m，2H)，0.27(m，2H)。
4-[7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-6-环丙基甲氧基氨基甲酰基咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基甲基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯4-[7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-6-环丙基甲氧基氨基甲酰基咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基甲基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯的合成反应路线与图11中所示的路线类似，使用7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺(33a)和哌嗪-1-羧酸叔丁酯，得到所需产物。测得MS APCI (+)m/z 669，671，673(M+，Cl，Br图形)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.80(s，1H)，8.00(s，1H)，7.56(d，1H)，7.27(dd，1H)，6.67(d，1H)，4.54(s，2H)，3.76(d，4H)，3.27(m，4H)，1.50(s，9H)，1.12(m，1H)，0.55(m，2H)，0.28(m，2H)。
7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺的合成反应路线与图11中所示的路线类似，使用7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺(33a)和1-甲基哌嗪，得到所需产物。测得MS APCI(+)m/z 581，583，585(M+，Cl，Br图形)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.90(s，1H)，7.57(s，1H)，7.56(d，1H)，7.22(dd，1H)，6.47(d，1H)，3.83(s，2H)，3.60(d，2H)，2.47(m，8H)，2.31(s，3H)，1.02(m，1H)，0.56(m，2H)，0.26(m，2H)。
7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氟-3-吗啉-4-基甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸乙氧基酰胺7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氟-3-吗啉-4-基甲基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸乙氧基酰胺的合成反应路线与图11中所示的路线类似，使用7-(4-溴-2-氟-苯氨基)-8-氟-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸乙氧基酰胺和吗啉，得到所需产物。测得MS ESI(+)m/z 510，512(M+，Br图形)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.72(s，1H)，7.39(s，1H)，7.29(dd，1H)，7.17(d，1H)，6.76(m，1H)，3.99(q，2H)，3.85(s，2H)，3.68(m，4H)，2.49(br s，4H)，1.29(t，3H)。19F NMR(376MHz，CD3OD)-129.97(s，1F)，-142.85(s，1F)。
实施例19
7-(4-溴-2-氯苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(44a)的合成化合物44a的合成反应路线显示于图12中。
步骤A制备4-(4-溴-2-氯苯氨基)-6-氯烟酸叔丁酯(40)将2-叔丁基-1，3-二异丙基异脲(8.04g，40.1mmol)加入4-(4-溴-2-氯苯氨基)-6-氯烟酸盐酸盐(24)(2.91g，7.31mmol)在THF(165mL)中的悬浮液中。室温下搅拌2小时并回流下搅拌30分钟后，将反应混合物冷却至室温，并用EtOAc稀释。将有机层用10％K2CO3和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。将得到的残余物溶解于CH2Cl2中并过滤。将滤液浓缩，并使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(CH2Cl2)纯化，得到所需产物(40)(3.28g，78％)。
步骤B制备6-叠氮基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)烟酸叔丁酯(41)将叠氮化钠(1.51g，23.2mmol)加入4-(4-溴-2-氯苯氨基)-6-氯烟酸叔丁酯(40)(3.23g，7.73mmol)在DMF(60mL)中的混合物中。将反应混合物加热至80℃，并搅拌16小时。冷却至室温后，将反应物用EtOAc稀释，并用水、饱和NaHCO3和盐水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(CH2Cl2)纯化(重复)，得到所需产物(41)(1.41g，43％)。
步骤C制备6-氨基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-烟酸叔丁酯(42)化合物42如实施例9步骤G中所述使用6-叠氮基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)烟酸叔丁酯(41)制备。
步骤D制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(43)将氯乙醛(12μL，0.188mmol)加入6-氨基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-烟酸叔丁酯(42)(50mg，0.125mmol)在EtOH(630μL)中的混合物中。将反应混合物在80℃下搅拌5小时后，另外加入12μL氯乙醛，并连续加热10小时。将反应混合物冷却至室温，并用EtOAc稀释，得到浑浊的半溶液。将有机层用水、饱和NaHCO3和盐水洗涤。有机层含有沉淀，通过过滤收集沉淀，得到所需产物(43)(15mg，33％)。测得MSAPCI(-)m/z 364，366，(M-，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.12(s，1H)，8.31(s，1H)，7.91(s，1H)，7.80(s，1H)，7.65-7.54(m，2H)，6.91(s，1H)。
步骤E制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(44a)在0℃下将草酰氯(2.0M溶液，在CH2Cl2，102μL)加入7-(4-溴-2-氯苯氨基)咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(43)(15mg，0.041mmol)在CH2Cl2(1mL)中的搅拌悬浮液中。加入一滴DMF。将反应混合物暖至室温，搅拌25分钟，然后浓缩。将残余物从甲苯中浓缩两次，并真空干燥。将残余物悬浮在CH2Cl2(1mL)中，冷却至0℃，加入环丙基甲基羟胺(36mg，0.409mmol)。将反应混合物暖至室温，搅拌2小时，并用EtOAc稀释。将有机层用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(40∶1的CH2Cl2/MeOH至20∶1的CH2Cl2/MeOH)纯化，得到所需产物(44a)，为褐色固体(6mg，31％)。测得MS APCI(-)m/z 433，435(M-，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.68(s，1H)，7.69(m，1H)，7.67(d，1H)，7.52-7.44(m，3H)，7.08(s，1H)，3.83(d，2H)，0.90(m，1H)，0.62(m，2H)，0.35(m，2H)。
下面的化合物通过图12中所示的类似方式使用实施例9步骤C中的适当苯胺进行合成。
7-(4-溴-2-氟苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS ESI(+)m/z 350，352(M+，Br图形)。(400MHz，DMSO-d6)δ9.13(s，1H)，7.94(d，1H)，7.70(dd，1H)，7.67(d，1H)，7.59(t，1H)，7.47(m，1H)，6.84(s，1H)。19F NMR(376MHz，DMSO-d6)δ-128.9。
7-(4-溴-2-氟苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺测得MS ESI(+)m/z 419，421(M+，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.91(br s，1H)，8.79(s，1H)，8.72(br s，1H)，7.81(s，2H)，7.64(m，1H)，7.50(m，1H)，7.45(m，1H)，7.39(m，1H)，6.90(s，1H)，3.74(d，2H)，1.14(m，1H)，0.55(m，2H)，0.29(m，2H)。19F NMR(376MHz，DMSO-d6)δ-124.3。
7-(4-溴-2-氟苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺测得MS ESI(+)m/z 409，411(M+，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.02(br s，1H)，8.83(s，1H)，7.80(s，1H)，7.63(s，1H)，7.51(m，1H)，7.45(m，1H)，7.39(m，1H)，6.91(s，1H)，4.79(br s，1H)，3.94(t，2H)，3.64(t，2H)。19F NMR(376MHz，DMSO-d6)δ-124.4。
实施例20 7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(47a)的合成化合物47a的合成反应路线显示于图13中。
步骤A制备6-氨基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氟烟酸叔丁酯(45)将1-氯甲基-4-氟-1，4-二氮鎓二环[2，2，2]辛烷双(四氟硼酸盐)(889mg，2.508mmol)加入6-氨基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)烟酸叔丁酯(42)(1.00g，2.51mmol)在1∶1的MeOH/水(25mL)中的混合物中。约2小时后，将反应混合物用EtOAc和水稀释。分层，将有机层用0.5N HCl和盐水洗涤。将该含水洗液用EtOAc反萃取。将合并的有机萃取液干燥(Na2SO4)，并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(20∶1的己烷/EtOAc至15∶1的己烷/EtOAc)纯化，得到所需产物(45)，为黄色固体(75mg，7％)。
步骤B制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(46)将氯乙醛(23μL，0.360mmol)加入6-氨基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氟烟酸叔丁酯(45)(75mg，0.180mmol)在EtOH(1mL)中的混合物中。在70℃下将反应混合物搅拌10小时后，另外加入10μL氯乙醛，并连续加热33小时。将反应混合物冷却至室温，经过滤收集所需产物(46)。将滤液用EtOAc稀释，用水、饱和NaHCO3和盐水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)并浓缩，得到另外的产物(46)(51mg，合并收率74％)。测得MS APCI(-)m/z 382，384，386(M-，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.86(s，1H)，7.85(s，1H)，7.53(s，2H)，7.32(d，1H)，6.82(t，1H)。19F NMR(376MHz，CD3OD)-148.3(s)。
或者，7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(46)通过下面所示的路线合成。
在该可选方法的第一步骤中，根据实施例9步骤B中所述的可选方法使用4，6-二氯-5-氟烟酸(J.Heterocyclic Chemistry 1993，30，855-859)合成4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-溴-6-氯烟酸。
步骤C制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(47a)化合物47如实施例19步骤E中所述使用7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(46)进行制备，得到所需产物(47a)15mg(24％)，为白色固体。测得MS APCI(+)m/z453，455，457(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.66(s，1H)，7.93(m，1H)，7.61(s，1H)，7.56(d，1H)，7.32(dd，1H)，6.73(q，1H)3.70(d，2H)，1.14(m，1H)，0.56(m，2H)，0.26(m，2H)19F(400MHz，CD3OD)-139.4(s)。
下面的化合物通过如图13中所示的类似方式合成。
7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺测得MS APCI(+)m/z 443，445，447(M+，Cl，Br图形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.69(s，1H)，7.89(m，1H)，7.59(s，1H)，7.55(d，1H)，7.31(dd，1H)，6.72(q，1H)，4.01(t，2H)，3.76(t，2H)；19F(400MHz，CD3OD)-139.7(s)。
7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS ESI(+)m/z 368，370(M+，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.21(s，1H)，8.08(m，1H)，7.66(s，1H)，7.55(dd，1H)，7.29(d，1H)，6.92(m，1H)。19F(376MHz，DMSO-d6)-127.9(s，1F)，-141.1(s，1F)。
7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺测得MS ESI(+)m/z 437，439(M+，Br图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ9.55(br s，1H)，8.57(s，1H).7.68(s，2H)，7.65(s，1H)，7.28(m，1H)，7.14(m，1H)，6.78(br s，1H)，6.63(m，1H)，3.72(m，2H)，1.07(m，1H)，0.59(m，2H)，0.28(m，2H)。19F NMR(376MHz，CD3OD)δ-128.9(s，1F)，-138.1(s，1F)。
7-(4-溴-2-甲基苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS APCI(+)m/z 364，366(M+，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.22(s，1H)，8.07(m，1H)，7.68(s，1H)，7.42(d，1H)，7.28(dd，1H)，6.78(t，1H)，2.29(s，3H)。19F(376MHz，DMSO-d6)-142.5(s)。
7-(2，4-二氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS APCI(+)m/z 440，442(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.27(s，1H)，8.13(s，1H)，7.71(s，1H)，7.62(s，1H)，7.32(dd，1H)，6.95(t，1H)。19F(376MHz，DMSO-d6)-129.9(s)。
8-氟-7-(2-氟-4-甲基苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS APCI(+)m/z 304(M+1)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.48(br s，1H)，9.32(s，1H)，8.12(s，1H)，7.86(s，1H)，7.12(m，2H)，6.98(d，1H)，2.31(s，3H)。19F(376MHz，DMSO-d6)-128.1(s，1F)，-148.8(s，1F)。
7-(4-氯-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS APCI(+)m/z 324，326(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.19(s，1H)，8.07(m，1H)，7.64(s，1H)，7.45(dd，1H)，7.17(d，1H)，6.98(m，1H)。19F(376MHz，CD3OD)-128.8(s，1F)，-154.8(s，1F)。
实施例21 3-氯-7-(2，4-二氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺该化合物的合成反应路线显示如下
步骤A制备3-氯-7-(2，4-二氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯将以与实施例20步骤B中所述的可选方法类似的方式得合成的7-(2，4-二氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(57.0mg，0.16mmol)溶于DMF(3ml)中。加入N-氯琥珀酰亚胺(17.0mg，0.13mmol)和HCl(1.0M水溶液，16μL，0.016mmol)。搅拌16小时后，用EtOAc稀释该悬浮液，用NaHSO3、水(2×)、盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色固体。用闪蒸柱色谱法(4∶1己烷/EtOAc)纯化，得到所需产物，为浅黄色固体(40mg，64％)。测得MS APCI(+)m/z 388，390(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.70(s，2H)，7.58(s，1H)，7.40(d，1H)，7.14(dd，1H)，6.77(t，1H)，4.02(s，3H)19FNMR(376MHz，CDCl3)-135.84(s)。
步骤B制备3-氯-7-(2，4-二氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-乙烯氧基乙氧基)-酰胺将LiHMDS(1.0M，在己烷中，0.34ml，0.34mmol)加入冷却至0℃的3-氯-7-(2，4-二氯苯氨基)-8-氟-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(38mg，0.098mmol)和O-(2-乙烯氧基-乙基)羟胺(25mg，0.24mmol)在1.0ml THF中的溶液中。将溶液暖至室温，并搅拌16小时。用乙酸乙酯稀释溶液，用饱和NaHCO3、水(3×)、盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色液体。用闪蒸柱色谱法(20∶1至10∶1二氯甲烷/MeOH)纯化，得到所需产物，为黄色固体(42mg，93％)。测得MS APCI(+)m/z 459，461(M+，Cl图形)。
步骤C制备3-氯-7-(2，4-二氯苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基-乙氧基)-酰胺3-氯-7-(2，4-二氯-苯氨基)-8-氟-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-乙烯氧基-乙氧基)-酰胺根据实施例3步骤B而转化成所需要产物，得到所需产物31mg(78％)，为浅黄色固体。测得MS APCI(+)m/z 433，435(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.52(s，1H)，7.57(s，1H)，7.42(d，1H)，7.16(dd，1H)，6.79(dd，1H)，4.07(m，2H)，3.80(m，2H)。19F NMR(376MHz，CD3OD)-140.83(s)。
实施例22 7-(4-乙基-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸乙氧基酰胺该化合物的合成反应路线显示如下。
步骤A制备8-氟-7-(2-氟-4-乙烯基苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯将以与实施例20步骤B中所述的可选方法类似的方式合成的8-氟-7-(2-氟-4-碘苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(250mg，0.58mmol)悬浮于异丙醇(6ml)和四氢呋喃(1ml)中。加入乙烯基三氟硼酸钾(90mg，0.67mmol)和三乙胺(0.165ml，1.2mmol)，这时反应混合物成为溶液。用氮气净化反应混合物。然后加入PdCl2(dppf)-CH2Cl2(2mol％，9mg)，将反应物加热至90℃，在氮气下搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，用水稀释，然后用乙酸乙酯(2×)萃取。用饱和NaCl洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。用闪蒸柱色谱法(30∶1二氯甲烷/甲醇)纯化粗产物，得到所需产物(143mg，81％)，为深黄色固体。测得MS ESI(+)m/z 330(M+1)。
步骤B制备7-(4-乙基-2-氟-苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯将8-氟-7-(2-氟-4-乙烯基-苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(165mg，0.50mmol)悬浮于乙醇(5ml)中，加入10％Pd/C(267mg，0.25mmol)，置于氢气氛下。室温下剧烈搅拌反应混合物16小时。通过硅藻土(celite)过滤反应混合物，用乙醇和四氢呋喃洗涤，将滤液浓缩，得到黄色油状物。用闪蒸柱色谱法(梯度二氯甲烷至20∶1二氯甲烷/甲醇)纯化粗产物，得到所需产物，为深黄色固体(110mg，66％)。测得MS ESI(+)m/z 332(M+1)。
步骤C制备7-(4-乙基-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸乙氧基酰胺将7-(4-乙基-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(40mg，0.12mmol)根据实施例21步骤B使用O-乙基-羟胺-盐酸盐转化为所需产物，得到所需产物，为黄色固体(31mg，71％)。测得MS ESI(+)m/z 361(M+1)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.62(s，1H)，7.86(s，1H)，7.56(s，1H)，6.97(d，1H)，6.90-6.80(m，2H)，3.88(q，2H)，2.60(q，2H)，1.23(m，9H)。19F(376MHz，CD3OD)-132.7(s，1F)，-145.2(s，1F)。
实施例23
3-乙基-8-氟-7-(2-氟-4-甲基苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-乙酸(2-羟基乙氧基)-酰胺该化合物的合成反应路线显示如下。
步骤A制备8-氟-7-(2-氟-4-甲基-苯氨基)-3-碘咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯将N-碘琥珀酰亚胺(134mg，0.60mmol)一次性加入8-氟-7-(2-氟-4-甲基-苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(172mg，0.54mmol)在乙腈(10ml)中的溶液中，搅拌10分钟后得到粘稠沉淀物。用乙酸乙酯稀释悬浮液，用NaHSO3、饱和NaHCO3、水、盐水洗涤，用Na2SO4干燥。浓缩得到所需要产物，为黄色固体(241mg，100％)。测得MS APCI(+)m/z 444(M+1)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.78(s，1H)，7.62(s，1H)，6.95(m，3H)，4.00(s，3H)，2.33(s，3H)。19FNMR(376MHz，CD3OD)-131.11(s，1F)，-146.71(s，1F)。
步骤B制备8-氟-7-(2-氟-4-甲基-苯氨基)-3-三甲基硅烷基乙炔基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯将THF(1.0ml)、二异丙胺(95μL，0.68mmol)和三甲基甲硅烷基乙炔(38μL，0.27mmol)加入8-氟-7-(2-氟-4-甲基-苯氨基)-3-碘-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(100mg，0.23mmol)、CuI(4.0mg，0.023mmol)和PdCl2(PPh3)2(16mg，0.023mmol)的混合物中。在室温下搅拌溶液16小时。用乙酸乙酯稀释反应物，用饱和NaHCO3(3×)和盐水(2×)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到深棕色固体。经闪蒸柱色谱法(40∶1二氯甲烷/MeOH)得到所需产物(30mg，32％)，为黄色固体。测得MS APCI(+)m/z 414(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.77(s，1H)，8.61(s，1H)，7.80(s，1H)，6.90(m，3H)，4.00(s，3H)，2.32(s，3H)，0.33(s，9H)。19F NMR(376MHz，CDCl3)-129.12(s，1F)，-141.99(s，1F)。
步骤C制备3-乙炔基-8-氟-7-(2-氟-4-甲基-苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯将碳酸钾(70mg，0.51mmol)加入于MeOH(5ml)中的8-氟-7-(2-氟-4-甲基-苯氨基)-3-三甲基烷基乙炔基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯中，室温下搅拌2小时。用乙酸乙酯稀释混合物，用盐水(2×)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到棕色残余物。经闪蒸柱色谱法(二氯甲烷至80∶1二氯甲烷/MeOH)得到所需产物(16mg，65％)，为黄色固体产物。测得MS APCI(+)m/z 342(M+1)。
步骤D制备3-乙基-8-氟-7-(2-氟-4-甲基苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯将3-乙炔基-8-氟-7-(2-氟-4-甲基-苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(16mg，0.047mmol)和10％Pd/C(5mg)的混合物在氢气氛(气球)下剧烈搅拌一小时。将混合物通过经二氯甲烷清洗的短柱过滤，浓缩得到所需产物(14mg，86％)，为黄色泡沫状物。测得MS APCI(+)m/z 346(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.51(s，1H)，8.31(s，1H)，7.38(s，1H)，6.91(d，1H)，6.84(s，2H)，3.97(s，3H)，2.86(q，2H)，2.30(s，3H)，1.43(t，3H)。
步骤E制备3-乙基-8-氟-7-(2-氟-4-甲基-苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基-乙氧基)酰胺将3-乙基-8-氟-7-(2-氟-4-甲基-苯氨基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(14mg，0.041mmol)根据实施例21步骤A和实施例3步骤B转化成所需产物，得到所需产物(盐酸盐)，为褐色固体(9mg，两步51％)。测得MS APCI(+)m/z 391(M+1)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.63(s，1H)，7.65(s，1H)，7.16(m，1H)，7.01(m，2H)，4.04(br s，2H)，3.79(br s，2H)，2.97(q，2H)，2.35(2，3H)，1.45(t，3H)。19F NMR(376MHz，CD3OD)-127.69(s，1F)，-155.07(s，1F)。
实施例24 7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基-[1，2，4]-三唑并-[4，3-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(53a)的合成化合物53a的合成反应路线显示于图14中步骤A制备4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯-6-肼基烟酸乙酯(49)4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5，6-二氯烟酸乙酯(48)通过常规方法由4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5，6-二氯烟酸生成。将肼一水合物(0.59ml，12.16mmol)加入4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5，6-二氯烟酸乙酯(48)(1.72g，4.05mmol)在N，N-二甲基乙酰胺(20ml)中的溶液中。于90℃下搅拌1小时后，将反应混合物冷却至室温，用EtOAc进行稀释。用水和盐水洗涤有机层，干燥(Na2SO4)并浓缩。用Biotage系统经闪蒸柱色谱法(20∶1CH2Cl2/EtOAc)纯化得到所需产物(49)(307mg，18％)。
步骤B制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-羧酸乙酯(51a)将乙酸酐(22μL，0.238mmol)在0℃下加入于CH2Cl2(2.5ml)中的4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯-6-肼基烟酸乙酯(49)(0.100g，0.238mmol)和三乙胺(66μL，0.476mmol)中，然后将溶液暖至室温，得到化合物50a(未分离)。10分钟后，逐滴加入POCl3(87μL，0.952mmol)，将反应混合物暖至室温。16小时后，将反应混合物加热回流，搅拌三天。将反应混合物冷却至室温并浓缩。将残余物用EtOAc稀释，加入饱和NaHCO3，搅拌混合物20分钟。分层，将有机层用盐水洗涤。将该含水洗液用EtOAc进行反萃取。干燥(Na2SO4)合并的有机萃取液并浓缩。用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(9∶1CH2Cl2/EtOAc)纯化得到化合物51a(80mg，75％)。
步骤C制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-羧酸(52a)将氢氧化钠(715μL，1M溶液)加入7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-羧酸乙酯(51a)(79mg，179mmol)在3∶1THF∶水(4.5ml)中的溶液中。16小时后，将反应混合物倒入分液漏斗中，用盐水稀释，用1M HCl酸化至约pH 2。用1∶1EtOAc/THF萃取水层。干燥(Na2SO4)合并的有机萃取液并浓缩，将残余物(52a)用于以后步骤而没有进一步纯化。
步骤D制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(53a)化合物53a如实施例2所述使用7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-羧酸(52a)进行制备，得到所需产物2mg(5％)。测得MS APCI(-)m/z 482，484，486(M-，Cl，Br图形)。
实施例25
7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(54a)的合成化合物54a的合成反应路线显示于图14中。化合物54a如本文所述从7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲基-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-羧酸(52a)起始来制备，得到所需产物(54a)1mg(两步2％)。测得MSAPCI(-)m/z 472，474，476(M-，Cl，Br图形)。
实施例26 3-苄基-7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(53b)的合成化合物53b的合成反应路线显示于图14中。
步骤A制备3-苄基-7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-羧酸甲酯(51b)在0℃下将苯乙酰氯(152μL，1.148mmol)加入4-(4-溴-2-二氯苯氨基)-5-氯-6-肼基烟酸甲酯(49)(0.233g，0.574mmol)和三乙胺(160μL，1.148mmol)在CH2Cl2(5.7ml)中的溶液中。暖至室温后，另外加入75μL苯乙酰氯。6小时后，将反应混合物浓缩并用EtOAc稀释。用水和盐水洗涤有机层，干燥(Na2SO4)并浓缩。将残余物(50b)用二氯乙烯(2ml)稀释，加入POCl3(465μL，5.082mmol)。回流下搅拌12小时后，将反应混合物冷却至室温并浓缩。用EtOAc稀释残余物，加入饱和NaHCO3，并搅拌混合物20分钟。通过过滤收集所得的固体，得到所需产物(51b)(97mg，30％)。
步骤B制备3-苄基-7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(53b)化合物53b如实施例24步骤C和实施例2所述使用3-苄基-7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-6-羧酸甲酯(51b)作为原料来制备，得到所需产物(53b)5mg(两步4％)。测得MS APCI(-)m/z 558，560，562(M-，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.22(s，1H)，7.30(m，6H)，6.50(d，1H)，4.53(s，2H)，3.49(m，2H)，0.94(m，1H)，0.51(m，2H)，0.19(m，2H)。
实施例27 6-(2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[c]异噁唑-5-羧酸(56)的合成化合物56的合成显示于图15中。
步骤A制备6-(2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基-苯并[c]异噁唑-5-羧酸甲酯(55)将叠氮化钠(128mg，1.95mmol)加入5-乙酰基-2-(2-氯苯氨基)-3，4-二氟苯甲酸甲酯(6)(601mg，1.59mmol)在3∶1丙酮∶水(16ml)中的混合物中，并加热回流。16小时后，将反应混合物冷却至室温，用EtOAc和水进行稀释。用水洗涤有机层，干燥(MgSO4)并浓缩。将得到的残余物用水(8mL)稀释并加热回流。5小时后，将混合物冷却至室温，用EtOAc进行稀释。用水洗涤有机层，干燥(MgSO4)并浓缩。使用Biotage系统通过闪蒸柱色谱法(20％EtOAc，在己烷中)纯化得到所需产物(55)(410mg，77％)。
步骤B制备6-(2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[c]异噁唑-5-羧酸(56)向6-(2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[c]异噁唑-5-羧酸甲酯(55)(100mg，0.299mmol)在6∶1 THF/水(3.5ml)中的溶液中加入LiOH(0.60ml，1M溶液，在水中)。1小时后，用1N HCl将反应物酸化至pH 1，用水稀释，用EtOAc萃取。用水洗涤合并的有机萃取液，干燥(MgSO4)并浓缩，得到所需产物(56)(87mg，91％)。测得MS APCI(-)m/z 319，321(M+，Cl图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.45(s，1H)，7.38(dd，1H)，7.20(m，1H)，6.91(m，2H)，2.88(s，3H)19F NMR(376MHz，CD3OD)-136.40(s)。
实施例28 6-(2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[c]异噁唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺(57a)的合成化合物57a如图15所示使用6-(2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[c]异噁唑-5-羧酸(56)制备，得到所需产物35mg(44％)。测得MS APCI(-)m/z 388，390(M+，Cl图形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.73(s，1H)，7.36(d，1H)，7.17(t，1H)，6.89(t，1H)，6.81(dd，1H)，3.72(d，2H)，2.87(s，3H)，1.15(m，1H)，0.54(d，2H)，0.26(d，2H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-135.08(s)。
实施例29
6-(2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[c]异噁唑-5-羧酸环丙基甲氧基-酰胺(57b)的合成化合物57b如图15所示和实施例2中所描述使用6-(2-氯苯氨基)-7-氟-3-甲基苯并[c]异噁唑-5-羧酸(56)制备，得到所需产物35mg(44％)。测得MS APCI(-)m/z 388，390(M+，Cl图形)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.73(s，1H)，7.36(d，1H)，7.17(t，1H)，6.89(t，1H)，6.81(dd，1H)，3.72(d，2H)，2.87(s，3H)，1.15(m，1H)，0.54(d，2H)，0.26(d，2H)；19F NMR(376MHz，CD3OD)-135.08(s)。
实施例30 7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲氨基甲基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基-酰胺(63)的合成化合物63的合成显示于图16中。
步骤A制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲酰基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(58)将6-氨基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-氯-烟酸甲酯(28)(1.06g，2.72mmol)和2-氯-丙二醛(malonaldehyde)(587mg，5.43mmol)的悬浮液加热至80℃，保持45分钟。使溶液冷却至室温，然后用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。将有机层用NaSO4干燥，过滤，真空浓缩，并通过柱色谱法(20∶1二氯甲烷/甲醇)纯化，得到所需产物，为深黄色固体。将固体用乙酸乙酯研磨，并通过过滤分离，得到所需产物，为黄色固体(0.436g，36％)。测得MS(APCI+)m/z 442，444，446(M+；Cl，Br图形)。
步骤B制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲氨基甲基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(59)将7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲酰基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(58)(25mg，0.056mmol)、乙酸(7μL，0.11mmol)和甲胺(2.0M溶液，在THF中，56μL，0.11mmol)的悬浮液搅拌0.5小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠(36mg，0.17mmol)，并将溶液搅拌过夜。将反应混合物浓缩至干，并通过闪蒸柱色谱法(二氯甲烷，然后10∶1二氯甲烷/甲醇)纯化，得到所需产物，为黄色固体(12mg，46％)。测得MS(APCI+)m/z 455，457，459(M+；Cl，Br图形)。
步骤C制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-3-[(叔丁氧羰基-甲基-氨基)-甲基]-8-氯咪唑并]1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(60)将二碳酸二叔丁酯(6mg，0.029mmol)和三乙胺(4μL，0.029mmol)加入7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲氨基甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(59)(12mg，0.026mmol)在二氯甲烷中的溶液中。将溶液在室温下搅拌0.5小时，之后HPLC分析指示反应已完全。将溶液旋转蒸发(rotovapped)至干，得到所需产物，为黄色泡沫状物(15mg，定量)。测得MS(APCI+)m/z557，559，561(M+；Cl，Br图形)。
步骤D制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-3-[(叔丁氧羰基-甲基氨基)-甲基]-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(61)将氢氧化钠(1.0M水溶液，0.16mL，0.16mmol)加入7-(4-溴-2-氯苯氨基)-3-[(叔丁氧羰基甲基氨基)-甲基]-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯(60)(15mg，0.026mmol)在4∶1MeOH/水(5mL)中的溶液中。当反应完成时，将溶液用水稀释，加入1.0M HCl水溶液酸化至pH 3，用乙酸乙酯萃取。将有机萃取液用NaSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到所需产物，为白色结晶固体(12mg，84％)。测得MS(APCI-)m/z 541，543，545(M-；Cl，Br图形)。
步骤E制备[7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-6-环丙基甲氧基氨基甲酰基咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基甲基]-甲基氨基甲酸叔丁酯(62)将EDCl(6mg，0.033mmol)和HOBt(5mg，0.033mmol)加入7-(4-溴-2-氯苯氨基)-3-[(叔丁氧羰基甲基氨基)-甲基]-8-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(61)在二甲基乙酰胺(0.4mL)中的溶液中。将黄色溶液在室温下搅拌0.5小时，之后加入O-环丙基甲基-羟胺(6mg，0.066mmol)和三乙胺(6μL，0.044mmol)，将溶液搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释反应混合物，并用水、饱和氯化铵水溶液、饱和碳酸钾水溶液和盐水洗涤。将有机层用NaSO4干燥，过滤，真空浓缩，得到所需产物，为黄色残余物(11.5mg，85％)。测得MS(APCI+)m/z 612，614，616(M+；Cl，Br图形)。
步骤F制备7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-3-甲氨基甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸环丙基甲氧基酰胺(63)将[7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯-6-环丙基甲氧基-氨基甲酰基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基甲基]-甲基-氨基甲酸叔丁酯(62)在1∶1二氯甲烷/三氟乙酸中的溶液搅拌两小时。减压下去除溶剂，将残余物再溶解于乙酸乙酯中。用饱和碳酸钾水溶液和盐水洗涤有机溶液。将该含水洗液用乙酸乙酯反萃取。用NaSO4干燥合并的有机萃取液，过滤并真空浓缩，得到所需产物，为黄色固体(8mg，83％)。测得MS(APCI+)m/z 512，514，516(M+；Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.72(s，1H)，7.58(s，1H)，7.54(s，1H)，7.25(d，1H)，6.55(d，1H)，4.23(s，2H)，3.67(d，2H)，2.51(s，3H)，1.13(m，1H)，0.50(d，2H)，0.24(d，2H)。
实施例31
6-(4-溴-2-氯苯氨基)-吡唑并[1，5-a]吡啶-5-羧酸(2-羟基乙氧基)酰胺(73a)的合成其中W＝Br、Y＝Cl且X＝H的化合物73a可以如图17所示制备。
实施例32 6-(4-溴-2-氯苯氨基)-7-氟吡唑并[1，5-a]吡啶-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(73b)的合成其中W＝Br、Y＝Cl且X＝F的化合物73b可以如图17所示制备。
实施例33 磷酸单(2-{[7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羰基]-氨氧基}-乙基)酯(74)的合成化合物74的合成显示于图18中。在干燥氮气氛下将7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(33a)(100mg，0.234mmol)、四唑(23mg，0.327mmol)和二异丙基氨基磷酸二叔丁酯(di-tert-butyl diisopropylphosphoramidite)(0.096mL，0.304mmol)溶解/悬浮于30mL无水DMF中。将反应混合物搅拌大约3小时，之后将反应物冷却至-78℃，并加入叔丁基过氧化氢(0.100mL，70％溶液，在水中)。然后移去冷却浴，将反应物缓慢暖至室温，反应过夜。然后将反应混合物在乙醚/乙酸乙酯(5∶1)和饱和NaHCO3水溶液之间分配。保留有机层，并用10％亚硫酸钠水溶液、水(三次)、最后盐水依次洗涤。将得到的有机层用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。在干燥氮气氛下将残余物溶于3mL TFA/DCM(2∶1)溶液中。将反应物在室温下搅拌大约2小时，之后将其真空浓缩，将得到的残余物在甲醇中搅拌大约1小时。经抽吸过滤收集灰白色固体，用甲醇之后乙醚洗涤，然后风干，得到所需化合物(74)。
实施例34 7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸该化合物通过下面显示的路线合成。
根据实施例9步骤D的可选合成方法中描述的步骤将4，6-二氯-5-甲基烟酸(J.Heterocyclic Chemistry 1999，36，953-957)转化为7-(4-溴-2-氯苯氨基)-8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸。测得将叠氮化钠加入4-(4-溴-2-氯-苯氨基)-6-氯-5-甲基-烟酸甲酯中间体需要加热至50℃，其得到可分离的所需甲酯6-叠氮基-4-(4-溴-2-氯苯氨基)-5-甲基-烟酸甲酯及相应的羧酸的混合物。测得MS ESI(+)m/z 380，382(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.46(s，1H)，9.40(br s，1H)，8.25(d，1H)，8.12(d，1H)，7.79(m，1H)，7.42(dd，1H)，6.80(d，1H)，2.07(s，3H)。
如以上实施例所述制备下面的化合物，在第一步骤中使用4-溴-2-氟苯胺 7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-甲基-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸测得MS ESI(+)m/z 364，366(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.40(s，1H)，9.26(br s，1H)，8.22(d，1H)，8.10(d，1H)，7.61(dd，1H)，7.29(dd，1H)，6.87(t，1H)，2.14(s，3H)。19F(376MHz，DMSO-d6)-125.7(s)。
实施例35 [6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基]-(4-溴-2-氟苯基)-胺该化合物通过以下所示的路线合成。
步骤A制备7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸酰肼根据实施例3步骤A中所述的偶联条件将7-(4-溴-2-氟-苯氨基)-8-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸转化为该酰肼。或者，可以通过与肼在乙醇中回流直接从7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸甲酯制备该酰肼。测得MS ESI(+)m/z 398，400(M+，Cl，Br图形)。
步骤B制备[6-(5-氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基]-(4-溴-2-氟-苯基)-胺将7-(4-溴-2-氟-苯氨基)-8-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸酰肼(100mg，0.25mmol)悬浮于二噁烷(2mL)中。加入溴化氰(27mg，0.253mmol)，然后加入碳酸氢钠(21mg，0.25mmol)在H2O(1.2mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌16小时。用乙酸乙酯稀释反应混合物，并用水和饱和NaCl水溶液洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到所需产物(97mg，91％)，为白色固体。测得MS ESI(+)m/z 423，425(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.98(s，1H)，7.95(s，1H)，7.61(s，1H)，7.33(d，1H)，7.17(d，1H)，6.78(t，1H)。19F(376MHz，CD3OD)-128.6(t)。
实施例36
5-[7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基]-[1，3，4]噁二唑-2-硫醇该化合物通过下面所示的路线合成。
将7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸酰肼(50mg，0.13mmol)悬浮于乙醇(2.5mL)中并冷却至0℃。加入二硫化碳(22mg，0.29mmol)，然后加入粉末状氢氧化钾(7mg，0.13mmol)。在氮气下，将反应混合物于0℃下搅拌1小时，然后于室温下搅拌30分钟。然后将反应混合物回流并在氮气下搅拌5天。用水稀释反应混合物，并用1M HCl水溶液酸化至pH 1-2。然后将该混合物用乙酸乙酯(2×)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液、饱和NaCl水溶液洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。用闪蒸柱色谱法(梯度二氯甲烷至15∶1二氯甲烷/甲醇)对粗产物进行纯化，然后用乙醚和二氯甲烷研磨，得到所需产物(17mg，31％)，为黄色固体。测得MS ESI(+)m/z 440，442(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.29(s，1H)，8.16(s，1H)，8.08(br s，1H)，7.73(s，1H)，7.49(d，1H)，7.15(d，1H)，6.59(t，1H)。19F(376MHz，DMSO-d6)-128.7(s)。
实施例37 5-[7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基]-3H-[1，3，4]噁二唑-2-酮该化合物通过下面所示的路线合成。
将根据实施例35步骤A制备的7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸酰肼(373mg，0.98mmol)溶于二甲基甲酰胺(5mL)中。加入固体羰基二咪唑(166mg，1.02mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。然后用乙酸乙酯稀释，并用水洗涤。将水层用乙酸乙酯(3×)反萃取。用饱和NaCl水溶液洗涤合并的有机层，Na2SO4干燥并浓缩。通过用乙酸乙酯和乙醚研磨对粗产物进行纯化。将得到的固体过滤，用乙醚洗涤，收集并真空干燥。浓缩滤液，并重复研磨步骤。将固体合并得到所需产物(334mg，84％)，为黄色固体。测得MS ESI(+)m/z 408，410(M+，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.69(brs，1H)，9.05(s，1H)，8.11(d，1H)，7.89(s，1H)，7.67(s，1H)，7.51(dd，1H)，7.20(d，1H)，6.77(m，1H)。19F(376MHz，DMSO-d6)-128.9(t，1F)，-139.5(s，1F)。
实施例38 [6-(5-氨甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基]-(4-溴-2-氟苯基)-胺该化合物通过下面所示的路线合成。
步骤A制备7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸N′-(2-氯-乙酰基)-酰肼将实施例35步骤A的7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸酰肼(100mg，0.25mmol)悬浮于二氯甲烷(2mL)中，并加入4-甲基吗啉(0.040mL，0.36mmol)。将混合物冷却至0℃，然后逐滴加入氯乙酰氯(0.029mL，0.36mmol)。将反应混合物暖至室温，在氮气下搅拌1小时。用少量的四氢呋喃和甲醇将反应混合物洗入分液漏斗中，然后用乙酸乙酯稀释。用水和饱和NaCl水溶液洗涤有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。用闪蒸柱色谱法(20∶1二氯甲烷/甲醇)对粗产物进行纯化，得到所需产物(64mg，54％)，为黄色固体。测得MS ESI(+)m/z474，476(M+，Cl，Br图形)。
步骤B制备(4-溴-2-氟苯基)-[8-氯-6-(5-氯甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基]-胺将7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-6-羧酸N′-(2-氯-乙酰基)-酰肼(63mg，0.13mmol)悬浮于POC13(1mL)中。将反应混合物加热至100℃，保持8小时，在此期间变成亮红色溶液。将反应混合物冷却至室温，并减压下蒸发溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯中，并用饱和NaHCO3水溶液、饱和NaCl水溶液洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。粗产物(38mg，62％)在下一步骤中使用而没有进一步纯化。得到MS ESI(+)m/z 456，458(M+，Cl，Br图形)。
步骤C制备[6-(5-氨甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基]-(4-溴-2-氟-苯基)-胺将(4-溴-2-氟-苯基)-[8-氯-6-(5-氯甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基]-胺(38mg，0.083mmol)溶于四氢呋喃(1mL)中。加入碘化钾(14mg，0.083mmol)，然后加入氨(7M溶液，在甲醇中，0.30mL，2.08mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。减压下去除溶剂，并用闪蒸柱色谱法(梯度20∶1二氯甲烷/甲醇至5∶1二氯甲烷/甲醇)纯化粗产物，得到所需产物(26mg，71％)，为黄色固体。测得MS ESI(+)m/z 437，439(M+，Cl，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.35(s，1H)，8.33(s，1H)，8.17(d，1H)，7.70(d，1H)，7.51(dd，1H)，7.16(d，1H)，6.65(t，1H)，3.94(s，2H)。19F(376MHz，DMSO-d6)-128.3(t)。
实施例39
2-{5-[7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基]-[1，3，4]噁二唑-2-基氨基}-乙醇该化合物通过下面所示的路线合成。
将实施例37的5-[7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基]-3H-[1，3，4]噁二唑-2-酮依照WO 04/056789中所述的方法经两步转化成所需产物。测得MS ESI(+)m/z 451，453(M+，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.96(s，1H)，8.42(s，1H)，8.13(d，1H)，7.98(t，1H)，7.64(d，1H)，7.55(dd，1H)，7.26(d，1H)，6.87(m，1H)，4.78(t，1H)，3.56(q，2H)，3.30(m，2H)。19F(376MHz，DMSO-d6)-128.3(t，1F)，-139.6(s，1F)。
实施例40
N-{5-[7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基]-[1，3，4]噁二唑-2-基}-N′-甲基-乙烷-1，2-二胺该化合物通过下面所示的路线合成。
将实施例37的5-[7-(4-溴-2-氟苯氨基)-8-氟咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基]-3H-[1，3，4]噁二唑-2-酮依照WO 04/056789所述的方法经三步转化成所需产物，分离作HCl盐。测得MS ESI(+)m/z 464，466(M+，Br图形)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.26(s，1H)，8.95(br s，1H)，8.86(br s，2H)，8.39(t，1H)，8.25(s，1H)，7.93(s，1H)，7.64(dd，1H)，7.36(d，1H)，7.13(m，1H)，3.59(q，2H)，3.17(m，2H)，2.59(t，3H)。
实施例41羟胺的制备用于合成本发明的化合物的羟胺可以如下制备 (i).(S)-O-[2-(叔丁基-二甲基硅烷氧基)-丙基]-羟胺和(R)-O-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基]-羟胺通过如下的方法分别从(S)-(-)-环氧丙烷和(R)-(+)-环氧丙烷制备(S)-O-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基]-羟胺和(R)-O-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基]-羟胺步骤A制备(S)-1-碘丙-2-醇和(R)-1-碘-丙-2-醇将乙酸(12.8mL，224mmol)和(S)-(-)-环氧丙烷或(R)-(+)-环氧丙烷(16.0mL，224mmol)依次加入冷却至0℃的碘化锂(15.0g，112mmol)在THF(200mL)中的溶液中。将得到的粘稠悬浮液暖至室温，并搅拌16小时。将该悬浮液用乙醚稀释，用水(3×)、饱和NaHCO3(3×)、盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到所需产物，为黄色固体(19.5g，94％)。
步骤B制备(S)-叔丁基-(2-碘-1-甲基-乙氧基)-二甲基-硅烷和(R)-叔丁基-(2-碘-1-甲基-乙氧基)-二甲基-硅烷将吡啶(9.50mL，118mmol)加入冷却至0℃的(S)-1-碘-丙-2-醇或(R)-1-碘-丙-2-醇(19.9g，107mmol)和TBSCl(17.0g，113mmol)在DMF(100mL)中的溶液中。搅拌两天后，将溶液用己烷稀释，并用水(3×)和盐水洗涤。将该含水洗液用1∶1己烷/乙酸乙酯反萃取。将合并的有机相用Na2SO4干燥。浓缩得到所需产物，为黄色固体(26.7g，83％)。
步骤C制备(S)-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙氧基]-异吲哚-1，3-二酮和(R)-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙氧基]-异吲哚-1，3-二酮将(S)-或(R)-叔丁基-(2-碘-1-甲基-乙氧基)-二甲基-硅烷(22.7g，75.4mmol)、N-羟基邻苯二甲酰亚胺(14.8g，90.5mmol)和二异丙基乙胺(15.8mL，90.5mmol)溶液在75℃下加热48小时。将溶液冷却至室温，用水稀释，并用1∶1己烷/乙酸乙酯(2×)和乙醚(2×)萃取。用水(3×)、盐水(2×)洗涤合并的有机萃取液，用Na2SO4干燥并浓缩，得到红色液体。用闪蒸柱色谱法(二氯甲烷)纯化粗产物，得到所需产物，为黄色固体(12.8g，50％)。
步骤D制备(S)-O-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基]-羟胺或(R)-O-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙基]-羟胺将甲基肼(2.12mL，39.9mmol)加入(S)-或(R)-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丙氧基]-异吲哚-1，3-二酮(12.8g，38.0mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液中，并将得到的悬浮液搅拌16小时。将悬浮液过滤以去除固体，并将滤液浓缩，得到黄色液体。闪蒸柱色谱法(2∶1己烷/乙酸乙酯)得到所需产物，为嫩黄色液体(6.37g，82％)。测得MS APCI(+)m/z 206(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.44(br s，2H)，4.03(m，1H)，3.58(m，1H)，3.51(m，1H)，1.12(d，3H)，0.90(s，9H)，0.08(s，6H)。
(ii).下面的羟胺以适宜的末端环氧化物起始类似地制备。异吲哚-1，3-二酮中间体和最终的羟胺通过闪蒸柱色谱法纯化。
(S)-O-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丁基]-羟胺和(R)-O-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丁基]-羟胺羟胺(S)-O-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丁基]-羟胺和(R)-O-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-丁基]-羟胺分别由纯手性末端环氧化物(S)-和(R)-1，2-环氧丁烷来制备，该(S)-和(R)-1，2-环氧丁烷通过如J.Am.Chem.Soc.，2002，1241307中所述的动力拆分1，2-环氧丁烷获得。测得MS APCI(+)m/z 220(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.41(br s，2H)，3.79(m，1H)，3.60(m，2H)，1.54(m，1H)，1.44(m，1H)，0.90(s，9H)，0.08(s，3H)，0.07(s，3H)。
O-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷氧基)-3-甲基-丁基]-羟胺测得MS APCI(+)m/z 234(M+1)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.38(br s，2H)，3.64(m，3H)，1.75(m，1H)，0.90(m，15H)，0.08(s，3H)，0.05(s，3H)。
(iii).1-氨氧基-3，3-二甲基-丁-2-醇步骤A制备2-(2-羟基-3，3-二甲基-丁氧基)-异吲哚-1，3-二酮向3，3-二甲基-1，2-环氧丁烷(5.0mL，41.0mmol)在DMF(100mL)中的溶液中加入N-羟基邻苯二甲酰亚胺(8.03g，49.2mmol)和三乙胺(6.90mL，49.2mmol)。将溶液在75℃下加热两天。将溶液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，用水(2×)、饱和碳酸钾(3×)、盐水(2×)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到橙色固体。使用闪蒸柱色谱法(二氯甲烷)纯化，得到所需产物，为白色固体(1.50g，14％)。
步骤B制备1-氨氧基-3，3-二甲基-丁-2-醇向冷却至0℃的2-(2-羟基-3，3-二甲基-丁氧基)-异吲哚-1，3-二酮(1.47g，5.60mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入甲基肼(0.31mL，5.90mmol)。将白色悬浮液在室温下搅拌16小时。加入乙醚(50mL)，并通过过滤去除固体。浓缩滤液，用乙醚稀释，并通过过滤去除固体。重复该步骤两次，浓缩终滤液，得到所需产物，为黄色液体(0.643g，86％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.87(br s，2H)，3.85(q，1H)，3.58(q，2H)，0.93(s，9H)。
(iv).(2-氨氧基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯步骤A制备2-叔丁氧羰基氨基甲磺酸乙酯将甲磺酰氯(0.60mL，7.76mmol)加入冷却至0℃的(2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(1.04g，6.46mmol)和三乙胺(1.35mL，9.70mmol)在二氯甲烷(35mL)中的溶液中。将溶液搅拌一小时，之后将其用乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3(2×)、盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到粘稠无色液体(1.37g，89％)。
步骤B制备[2-(1，3-二氧代-1，3-二羟-异吲哚-2-氧基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯将N-羟基邻苯二甲酰亚胺(1.12g，6.87mmol)和三乙胺(0.96mL，6.87mmol)加入2-叔丁氧羰基氨基甲磺酸乙酯(1.37g，5.73mmol)在DMF(20mL)中的溶液中。将溶液加热至50℃，保持16小时，之后将其冷却至室温。将溶液用乙酸乙酯稀释，用水(2×)、饱和K2CO3洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到橙色固体(747mg，43％)，将其用于下步而没有纯化。
步骤C制备(2-氨氧基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯根据实施例41(i)步骤D使用[2-(1，3-二氧代-1，3-二羟-异吲哚-2-氧基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯作为原料进行标题化合物的合成，得到255mg(71％)的所需化合物，为黄色液体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.50(br s，2H)，5.02(br s，1H)，3.71(t，2H)，3.36(q，2H)，1.45(s，9H)。
下面的羟胺使用(3-羟基丙基)-氨基甲酸叔丁酯作为原料类似地制备。
(3-氨氧基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.41(br s，2H)，4.76(br s，1H)，3.73(t，2H)，3.21(q，2H)，1.78(m，2H)，1.44(s，9H)。

(v).(3-氨氧基-2，2-二甲基丙基)-氨基甲酸叔丁酯步骤A制备(3-羟基-2，2-二甲基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯将在THF(10mL)中的Boc酐(13.07g，59.9mmol)逐滴加入溶解于1∶1THF/水(50mL)中的3-氨基-2，2-二甲基-丙-1-醇(5.15g，49.9mmol)和NaOH(2.40g，59.9mmol)溶液中。将溶液在室温下搅拌72小时。减压下浓缩溶液至反应体积的一半。将剩余的溶液酸化至pH6，然后用乙酸乙酯(2×)萃取。用水、盐水洗涤有机萃取液，用Na2SO4干燥并浓缩，得到所需产物(10.2g，定量)，为白色固体。
步骤B制备[3-(1，3-二氧代-1，3-二羟-异吲哚-2-氧基)-2，2-二甲基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯将偶氮二羧酸二乙酯(8.26mL，52.4mmol)加入(3-羟基-2，2-二甲基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(10.2g，49.9mmol)、N-羟基邻苯二甲酰亚胺(8.15g，49.9mmol)和三苯膦(13.1g，49.9mmol)在THF(200mL)中的溶液中。将溶液在室温下搅拌16小时，之后用二氯甲烷稀释，并通过硅胶短柱，用二氯甲烷洗脱。将含有产物的部分浓缩，得到黄色液体，将其用闪蒸柱色谱法(二氯甲烷至4∶1二氯甲烷/乙酸乙酯)进一步纯化，得到所需产物(1.98g，11％)，为苍白色固体。
步骤C制备(3-氨氧基-2，2-二甲基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯根据实施例41步骤D使用[3-(1，3-二氧代-1，3-二羟-异吲哚-2-氧基)-2，2-二甲基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯作为原料进行标题化合物的合成，得到998mg(80％)所需产物，为浅黄色液体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ5.45(br s，2H)，4.94(br s，1H)，3.44(s，2H)，3.03(br d，2H)，1.45(s，9H)，0.88(s，6H)。
(vi).(3-氨氧基-1-甲基丙基)-氨基甲酸叔丁酯步骤A制备3-氨基-丁-1-醇将氢化铝锂(1.0M，在THF中，43.8mL，43.8mmol)在一小时内逐滴加入冷却至0℃的3-氨基丁酸(2.26g，21.9mmol)在THF(100mL)中的悬浮液中。然后将溶液回流16小时，之后将其冷却至0℃，并通过小心地依次加入水(2mL)、15％NaOH(2mL)水溶液和水(2mL)来终止反应。将混合物搅拌15分钟，通过Celite过滤，用THF洗涤滤垫。将滤液浓缩得到所需产物(1.43g，73％)，为澄清油状物。
步骤B制备(3-氨氧基-1-甲基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯根据上述实施例41(iii)中的步骤A、B和C使用3-氨基-丁-1-醇作为原料进行标题化合物的合成，得到所需产物998mg(80％)，为浅黄色液体。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ5.39(br s，2H)，4.52(br s，1H)，3.72(m，3H)，1.70(m，2H)，1.43(2，9H)，1.14(d，3H)。
(vii).下面的羟胺如WO 02/06213中所述制备O-(2-乙烯氧基-乙基)-羟胺；O-(2-甲氧基-乙基)-羟胺；2-氨氧基-丙-1-醇；3-氨氧基-丙-1-醇；1-氨氧基-2-甲基-丙-2-醇；1-氨氧基-3-甲氧基-丙-2-醇；3-氨氧基-1，1，1-三氟-丙-2-醇；2-氨氧基-2-甲基-丙-1-醇；(2-氨氧基-乙基)-甲基-氨基甲酸叔丁酯；(R)-O-2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲基)-羟胺；(S)-O-2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基甲基)-羟胺。
(viii).通过J.Heterocyclic Chemistry 2000，37，827-830中所述的方法由适宜的烷基卤和N-羟基邻苯二甲酰亚胺制备下面的羟胺的异吲哚-1，3-二酮中间体O-丙基-羟胺；O-异丙基-羟胺；O-环丙基甲基-羟胺。通过上述的方法对异吲哚-1，3-二酮进行脱保护。
(ix).下面的羟胺从商业来源获得甲氧胺盐酸盐；O-乙基羟胺盐酸盐；O-(叔丁基)胺盐酸盐；O-烯丙胺盐酸盐。
本发明的其它化合物在图19A-19G中显示。
在前的描述仅作为对本发明原理的例证。此外，由于多种修改和变化对本领域技术人员而言是非常清楚的，因此不希望本发明限于上述具体结构和方法。因此，认为所有适当的修改和等价物将落入所附的权利要求书所定义的本发明的范围内。
词语“包含”，“包括”，“含有”当在本发明的说明书和所附的权利要求书中使用时，用于明确所述的特征、整数、成分或步骤的存在，但是它们并不排除其一种或多种其它特征、整数、成分、步骤或基团的存在或加入。
权利要求
1.式(I)的化合物及其药学可接受的盐、前药和溶剂合物， 其中R1、R2、R7、R8、R9和R10独立地为氢、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-杂芳基、-NR4(CR4R5)m-杂芳基、-O(CR4R5)m-杂环基或-NR4(CR4R5)m-杂环基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R3为氢、三氟甲基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、磷酸盐或氨基酸残基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R、-NR’ C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SR’、-S(O)R””、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基，或者R3和R4与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述碳环、杂芳基环或杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R’、R”和R独立地为氢、低级烷基、低级烯基、芳基或芳基烷基，而R””为低级烷基、低级烯基、芳基或芳基烷基，或者R’、R”、R或R””中的任意两个与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、碳环、杂芳基环或杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R4和R5独立地为氢或C1-C6烷基，或者R4和R5与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述烷基或所述碳环、杂芳基环和杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R””、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R6为三氟甲基、C1-C10烷基、C3-C10环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，其中所述烷基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R’、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；W为杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)、-CONH(SO2)CH3或CR3OR3，其中所述杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)、-CONH(SO2)CH3和CR3OR3中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代-NR3R4、-OR3、-R2、C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基，其中所述C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自-NR3R4和-OR3的基团取代；m为0、1、2、3、4或5；且j为0、1或2。
2.权利要求1的化合物，其中R1为2-Cl。
3.权利要求1的化合物，其中R7为Me、NH2或H。
4.权利要求1的化合物，其中R8为Br或Cl。
5.权利要求1的化合物，其中R9为F。
6.权利要求1的化合物，其中W为-C(O)OH、-C(O)NHOCH2-(环丙基)、-C(O)NHO(CH2)2OH或-CONH(SO2)CH3。
7.权利要求1的化合物，所述化合物具有下式
8.权利要求1的化合物，所述化合物具有下式
9.权利要求1的化合物，所述化合物具有下式
10.权利要求1的化合物，所述化合物具有下式
11.权利要求1的化合物，所述化合物具有下式
12.权利要求1的化合物，所述化合物具有下式
13.权利要求1的化合物，所述化合物具有下式
14.权利要求1的化合物，所述化合物具有下式
15.权利要求1的前药，所述前药包含与氨基酸残基共价偶联的式I的化合物。
16.权利要求1的前药，其中所述氨基酸残基为缬氨酸。
17.权利要求1的前药，其中所述前药为式I的化合物的磷酸酯。
18.一种组合物，所述组合物包含权利要求1的化合物和药学可接受的载体。
19.一种抑制哺乳动物中MEK活性的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效抑制所述MEK活性的量的一种或多种权利要求1的化合物。
20.一种治疗哺乳动物中过度增殖性疾病的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效治疗所述过度增殖性疾病的量的一种或多种权利要求1的化合物。
21.式(II)的化合物及其药学可接受的盐、前药和溶剂合物， 其中R1、R2、R7、R8、R9、R10和R11独立地选自氢、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-杂芳基、-NR4(CR4R5)m-杂芳基、-O(CR4R5)m-杂环基和-NR4(CR4R5)m-杂环基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；或者R7和R11与它们连接的原子一起形成4-10元饱和、不饱和或部分饱和的碳环或杂环，其中所述饱和、不饱和、部分饱和的碳环或杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R3选自氢、三氟甲基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、磷酸盐和氨基酸残基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SR’、-S(O)R””、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基，或者R3和R4与它们连接的原子一起形成4-10元饱和、不饱和或部分饱和的杂环，其中所述饱和、不饱和或部分饱和的杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R’、R”和R独立地选自氢、低级烷基、低级烯基、芳基和芳基烷基；R””选自低级烷基、低级烯基、芳基和芳基烷基，或者R’、R”、R或R””中的任意两个与它们连接的原子一起形成4-10元饱和、不饱和或部分饱和的杂环，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、饱和、不饱和或部分饱和的杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R4和R5独立地代表氢或C1-C6烷基；R6为三氟甲基、C1-C10烷基、C3-C10环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，其中所述烷基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R’、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；W选自杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)和-CR3OR3，其中所述杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)和-CR3OR3中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代-NR3R4、-OR3、-R2、C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基，其中所述烷基、烯基和炔基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自-NR3R4和-OR3的基团取代；m为0、1、2、3、4或5；且j为0、1或2。
22.权利要求21的化合物，其中R1为Cl。
23.权利要求21的化合物，其中R7为H、1-(4-甲基哌嗪基)、吗啉基、-NMe2或-CH2(哌啶基)。
24.权利要求21的化合物，其中R8为Cl或Br。
25.权利要求21的化合物，其中R9为Cl或H。
26.权利要求21的化合物，其中W为-COOH、-C(O)NHOCH2-(环丙基)或-C(O)NHO(CH2)2OH。
27.权利要求21的化合物，所述化合物具有下式
28.权利要求21的化合物，所述化合物具有下式
29.权利要求21的化合物，所述化合物具有下式
30.权利要求21的化合物，所述化合物具有下式
31.权利要求21的化合物，所述化合物具有下式
32.权利要求21的化合物，所述化合物具有下式
33.权利要求21的化合物，所述化合物具有下式
34.权利要求21的化合物，所述化合物具有下式
35.权利要求21的化合物，所述化合物具有下式
36.权利要求21的化合物，所述化合物具有下式
37.一种组合物，所述组合物包含权利要求21的化合物和药学可接受的载体。
38.权利要求21的前药，所述前药包含与氨基酸残基共价偶联的式II的化合物。
39.权利要求38的前药，其中所述氨基酸残基为缬氨酸。
40.权利要求21的前药，其中所述前药为式II的化合物的磷酸酯。
41.权利要求40的前药，其中所述前药具有下式
42.一种抑制哺乳动物中MEK活性的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效抑制所述MEK活性的量的一种或多种权利要求21的化合物。
43.一种治疗哺乳动物中过度增殖性疾病的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效治疗所述过度增殖性疾病的量的一种或多种权利要求21的化合物。
44.式III的化合物及其药学可接受的盐、前药和溶剂合物， 其中R1、R2、R7、R8、R9和R10独立地选自氢、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-杂芳基、-NR4(CR4R5)m-杂芳基、-O(CR4R5)m-杂环基和-NR4(CR4R5)m-杂环基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R3为氢、三氟甲基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、磷酸盐或氨基酸残基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SR’、-S(O)R””、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基，或者R3和R4与它们连接的原子一起形成4-10元饱和、不饱和或部分饱和的杂环，其中所述饱和、不饱和或部分饱和的杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR‘C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R’、R”和R独立地为氢、低级烷基、低级烯基、芳基或芳基烷基；R””为低级烷基、低级烯基、芳基或芳基烷基，或者R’、R”、R或R””中的任意两个与它们连接的原子一起形成4-10元饱和、不饱和或部分饱和的杂环，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、饱和、不饱和或部分饱和的杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R4和R5独立地为氢或C1-C6烷基；R6为三氟甲基、C1-C10烷基、C3-C10环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，其中所述烷基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R’、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；W为杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)或-CR3OR3，其中所述杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)和CR3OR3中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代-NR3R4、-OR3、-R2、C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基，其中所述C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自-NR3R4和-OR3的基团取代；m为0、1、2、3、4或5；且j为0、1或2。
45.权利要求44的化合物，其中R1为Cl。
46.权利要求44的化合物，其中R7为甲基或苄基。
47.权利要求44的化合物，其中R8为Br。
48.权利要求44的化合物，其中R9为Cl。
49.权利要求44的化合物，其中W为-C(O)NHOCH2-(环丙基)或-C(O)NHO(CH2)2OH。
50.权利要求44的化合物，所述化合物具有下式
51.权利要求44的化合物，所述化合物具有下式
52.权利要求44的化合物，所述化合物具有下式
53.一种组合物，所述组合物包含权利要求44的化合物和药学可接受的载体。
54.权利要求44的前药，所述前药包含与氨基酸残基共价偶联的式III的化合物。
55.权利要求54的前药，其中所述氨基酸残基为缬氨酸。
56.权利要求44的前药，其中所述前药为式III的化合物的磷酸酯。
57.一种抑制哺乳动物中MEK活性的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效抑制所述MEK活性的量的一种或多种权利要求44的化合物。
58.一种治疗哺乳动物中过度增殖性疾病的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效治疗所述过度增殖性疾病的量的一种或多种权利要求44的化合物。
59.式IV的化合物及其药学可接受的盐、前药和溶剂合物， 其中R1、R2、R7、R8、R9和R10独立地为氢、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-杂芳基、-NR4(CR4R5)m-杂芳基、-O(CR4R5)m-杂环基或-NR4(CR4R5)m-杂环基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R3为氢、三氟甲基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、磷酸盐或氨基酸残基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SR’、-S(O)R””、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR” R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基，或者R3和R4与它们连接的原子一起形成4-10元饱和、不饱和或部分饱和的杂环，其中所述饱和、不饱和或部分饱和的杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R’、R”和R独立地为氢、低级烷基、低级烯基、芳基或芳基烷基；R””为低级烷基、低级烯基、芳基或芳基烷基，或者R’、R”、R或R””中的任意两个与它们连接的原子一起形成4-10元饱和、不饱和或部分饱和的杂环，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、饱和、不饱和或部分饱和的杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R4和R5独立地为氢或C1-C6烷基；R6为三氟甲基、C1-C10烷基、C3-C10环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，其中所述烷基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R””、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R’、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；W为杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)或-CR3OR3，其中所述杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)和CR3OR3中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代-NR3R4、-OR3、-R2、C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基，其中所述C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自-NR3R4和-OR3的基团取代；m为0、1、2、3、4或5；且j为0、1或2。
60.权利要求59的化合物，其中R1为2-Cl。
61.权利要求59的化合物，其中R7为甲基。
62.权利要求59的化合物，其中R9为F。
63.权利要求59的化合物，其中W为-COOH或-C(O)NHO(CH2)2OH。
64.权利要求59的化合物，所述化合物具有下式
65.权利要求59的化合物，所述化合物具有下式
66.一种组合物，所述组合物包含权利要求59的化合物和药学可接受的载体。
67.权利要求59的前药，所述前药包含与氨基酸残基共价偶联的式IV的化合物。
68.权利要求59的前药，其中所述氨基酸残基为缬氨酸。
69.权利要求59的前药，其中所述前药为式IV的化合物的磷酸酯。
70.一种抑制哺乳动物中MEK活性的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效抑制所述MEK活性的量的一种或多种权利要求59的化合物。
71.一种治疗哺乳动物中过度增殖性疾病的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效治疗所述过度增殖性疾病的量的一种或多种权利要求59的化合物。
72.式V的化合物及其药学可接受的盐、前药和溶剂合物， 其中R1、R2、R7、R8、R9、R10和R11独立地选自氢、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-杂芳基、-NR4(CR4R5)m-杂芳基、-O(CR4R5)m-杂环基和-NR4(CR4R5)m-杂环基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；或者R7和R11与它们连接的原子一起形成4-10元饱和、不饱和或部分饱和的碳环或杂环，其中所述饱和、不饱和或部分饱和的碳环或杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R3选自氢、三氟甲基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、磷酸盐和氨基酸残基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SR’、-S(O)R””、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；或者R3和R4与它们连接的原子一起形成4-10元饱和、不饱和或部分饱和的杂环，其中所述饱和、不饱和及部分饱和的杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R’、R”和R独立地选自氢、低级烷基、低级烯基、芳基和芳基烷基；R””选自低级烷基、低级烯基、芳基和芳基烷基；或者R’、R”、R或R””中的任意两个与它们连接的原子一起形成4-10元饱和、不饱和或部分饱和的杂环，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、饱和、不饱和或部分饱和的杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R4和R5独立地代表氢或C1-C6烷基；R6为三氟甲基、C1-C10烷基、C3-C10环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，其中所述烷基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R’、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；W选自杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)、-CONH(SO2)CH3和-CR3OR3，其中所述杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)、-CONH(SO2)CH3和CR3OR3中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代-NR3R4、-OR3、-R2、C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基，其中所述烷基、烯基和炔基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自-NR3R4和-OR3的基团取代；m为0、1、2、3、4或5；且j为0、1或2。
73.权利要求72的化合物，其中R1为2-Cl、2-H或2-F。
74.权利要求72的化合物，其中R8为Cl或Br。
75.权利要求72的化合物，其中R9为H、F或Cl。
76.权利要求72的化合物，其中W为-C(O)OH、-C(O)NHOCH2-(环丙基)、-C(O)NHO(CH2)2OH或-CONH(SO2)CH3。
77.一种组合物，所述组合物包含权利要求72的化合物和药学可接受的载体。
78.权利要求72的前药，所述前药包含与氨基酸残基共价偶联的式V的化合物。
79.权利要求72的前药，其中所述氨基酸残基为缬氨酸。
80.权利要求72的前药，其中所述前药为式V的化合物的磷酸酯。
81.一种抑制哺乳动物中MEK活性的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效抑制所述MEK活性的量的一种或多种权利要求72的化合物。
82.一种治疗哺乳动物中过度增殖性疾病的方法，所述方法包括给予所述哺乳动物有效治疗所述过度增殖性疾病的量的一种或多种权利要求72的化合物。
83.式(I)的化合物及其药学可接受的盐、前药和溶剂合物， 其中R1、R2、R7、R8、R9和R10独立地为氢、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-OR3、-C(O)R3、-C(O)OR3、-NR4C(O)OR6、-OC(O)R3、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-NR3R4、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、-S(O)j(C1-C6烷基)、-S(O)j(CR4R5)m-芳基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、-O(CR4R5)m-芳基、-NR4(CR4R5)m-芳基、-O(CR4R5)m-杂芳基、-NR4(CR4R5)m-杂芳基、-O(CR4R5)m-杂环基或-NR4(CR4R5)m-杂环基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR4SO2R6、-SO2NR3R4、-C(O)R3、-C(O)OR3、-OC(O)R3、-NR4C(O)OR6、-NR4C(O)R3、-C(O)NR3R4、-NR3R4、-NR5C(O)NR3R4、-NR5C(NCN)NR3R4、-OR3、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R3为氢、三氟甲基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基、C3-C10环烷基烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、磷酸盐或氨基酸残基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SR’、-S(O)R””、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR” R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基，或者R3和R4与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述碳环、杂芳基环或杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R’、R”和R独立地为氢、低级烷基、低级烯基、芳基或芳基烷基，而R””为低级烷基、低级烯基、芳基或芳基烷基，或者R’、R”、R或R””中的任意两个与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述烷基、烯基、芳基、芳基烷基、碳环、杂芳基环或杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R4和R5独立地为氢或C1-C6烷基，或者R4和R5与它们连接的原子一起形成4-10元碳环、杂芳基环或杂环，其中所述烷基或所述碳环、杂芳基环或杂环中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R””、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R”、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；R6为三氟甲基、C1-C10烷基、C3-C10环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基，其中所述烷基、环烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基部分中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代氧代、卤素、氰基、硝基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、叠氮基、-NR’SO2R””、-SO2NR’R”、-C(O)R’、-C(O)OR’、-OC(O)R’、-NR’C(O)OR””、-NR’C(O)R”、-C(O)NR’R”、-SO2R””、-NR’R’、-NR’C(O)NR”R、-NR’C(NCN)NR”R、-OR’、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基、杂环基和杂环基烷基；W为杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)或-CR3OR3，其中所述杂芳基、杂环基、-C(O)OR3、-C(O)NR3R4、-C(O)NR4OR3、-C(O)R4OR3、-C(O)(C3-C10环烷基)、-C(O)(C1-C10烷基)、-C(O)(芳基)、-C(O)(杂芳基)、-C(O)(杂环基)和CR3OR3中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代-NR3R4、-OR3、-R2、C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基，其中所述C1-C10烷基、C2-C10烯基和C2-C10炔基中的任意一个均任选被一个或多个独立地选自-NR3R4和-OR3的基团取代；m为0、1、2、3、4或5；j为0、1或2；且Y为连接基。
84.根据权利要求1、21、44、56、59或72的化合物，所述化合物用作药物。
85.根据权利要求1、21、44、56、59或72的化合物在生产用于治疗过度增殖性疾病的药物中的用途。
全文摘要
本发明公开了式(I)的化合物及其药学可接受的盐和前药，其中R
文档编号C07DGK1874769SQ200480032655
公开日2006年12月6日 申请日期2004年9月1日 优先权日2003年9月3日
发明者伊莱·华莱士, 布赖恩·赫尔利, 杨鸿云, 约瑟夫·莱希凯托斯, 阿莉森·L.·马洛, 吉姆·布莱克 申请人:阵列生物制药公司