可诱导一氧化氮合成酶二聚化的抑制剂的制作方法

专利名称：可诱导一氧化氮合成酶二聚化的抑制剂的制作方法
本申请要求2005年4月14日提交的美国临时申请60/672,001，和2004年12月1日提交的美国临时申请60/631,971的优先权。
发明领域 本发明涉及抑制一氧化氮合成酶的化合物、其合成及其作为用于治疗疾病的药物的应用。

背景技术：
一氧化氮(NO)与许多生理过程的调节以及多种疾病的病理生理学有关。通过酶NO合成酶(NOS)的三种独特的同工型由许多组织和细胞类型中的L-精氨酸酶促地合成。这些同工型中的两种，内皮NOS(eNOS)和神经元NOS(nNOS)是以组成型的方式表达并且是钙/钙调节蛋白依赖性的。内皮NOS通过内皮和其它细胞类型而表达并且与心血管的体内稳态有关。神经元NOS组成型地存在于中枢和外周神经系统，其中NO起神经递质的作用。在正常的生理状况下，当细胞内钙浓度提高时组成型形式的NOS产生较少的、短暂水平的NO。这些较低水平NO发挥调节血压、血小板粘附、胃肠活动性、支气管肌紧张和神经传递的作用。
相反地，NOS的第三种同工型，基本上非钙依赖性的酶可诱导NOS(iNOS)，不存在于静止细胞中，但是当有刺激如内毒素和/或细胞因子时在基本上所有有核哺乳动物细胞中被迅速地表达。该可诱导同工型既不被钙所刺激也不被钙调蛋白拮抗剂所阻滞。它含有几种紧密结合的辅因子，包括FMN、FAD和四氢生物喋呤。在暴露于炎性细胞因子或脂多糖之后，一氧化氮合成酶的可诱导同工型(NOS2或iNOS)在基本上所有有核哺乳动物细胞中被表达。
酶iNOS合成酶是含有130kDa亚基的同型二聚体。每个亚基包括氧合酶域和还原酶域。重要的是，iNOS合成酶的二聚化是酶活性的要求。如果二聚化机制被破坏，那么通过可诱导NOS酶来产生一氧化氮就被抑制。
在巨噬细胞和肺表皮细胞中存在iNOS是非常重要的。一旦存在，iNOS合成的NO比组成型酶合成的多100-1000倍且这样持续较长的时间。这种过量产生的NO和得到的NO衍生的代谢物(例如，过氧亚硝酸盐)导致细胞毒性和组织损伤，其引起许多疾病、紊乱和疾患的病理生理学。
由可诱导形式NOS产生的一氧化氮还涉及炎性疾病的发病机理中。在实验动物中，由脂多糖或肿瘤坏死因子α诱导的低血压可被NOS抑制剂逆转。导致细胞因子诱导低血压的疾患包括败血症休克、血液透析和癌症患者中白介素治疗。已表明iNOS可有效地治疗细胞因子诱导的低血压、炎性肠道疾病、脑缺血、骨关节炎、哮喘以及神经病如糖尿病神经病和带状疱疹后的神经痛。
此外，一氧化氮以较高的数量存在于发炎组织中，这已表明可局部地诱导疼痛并且可增强中枢以及外周的刺激。因为炎性反应产生的一氧化氮被认为是由iNOS合成的，所以抑制iNOS二聚化在患者中产生预防和治疗性止痛。
因此，在过量产生一氧化氮是有害的情况下，寻找iNOS特异性抑制剂以减少NO产生将是有益的。但是，考虑到组成型iNOS同工型扮演重要的生理角色，抑制iNOS必须对eNOS和nNOS活性具有尽可能小的作用。
发明概述 本发明已发现了可抑制可诱导NOS合成酶单体二聚化的新化合物和药物组合物，以及合成和应用这些化合物的方法，包括通过给药该化合物抑制或调节一氧化氮合成和/或降低患者中一氧化氮水平的方法。
一方面，本发明提供了式I化合物
其中 T、V、X和Y独立地选自CR4和N； Z选自CR3和N； R1和R2独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)R12、-NSO2N(R11)R12、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)-[C(R14)R15]rR12、-[C(R14)R15]r-OR11、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R13)-[C(R14)R15]r-R12、-C(O)-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-N(R13)C(O)-L-(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-N(R11)C(O)N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-L-C(O)N(R11)R12； t为0至2的整数； r为0至5的整数； L选自任选地取代的3-至7-元碳环基团、任选地取代的3-至7-元杂环基团、任选地取代的6-元芳基，以及任选地取代的6-元杂芳基； R3、R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；或者R14和R15可一起不存在，形成另外的键； R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-OR17、-S(O)tR17、-[C(R14)R15]r-C(O)OR17、-[C(R14)R15]r-N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R16)C(O)N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)OR18、-[C(R14)R15]r-R17和-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)R18；或者R11或R12可以由以下结构来定义

和
其中 u和v独立地为从0至3的整数；和 X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、任选地取代的低级烷基、任选地取代的低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
本发明进一步提供了式II化合物
其中 T、V、X和Y独立地选自CR4和N； Z选自CR3和N； W和W’独立地选自CH2、CR7R8、NR9、O、N(O)、S(O)q和C(O)； n、m和p独立地为0至5的整数； q为0、1或2； R3、R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；或者R14和R15可一起不存在，形成另外的键； R5、R6、R7、R8和R9独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)R12、-NSO2N(R11)R12、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)-[C(R14)R15]rR12、-[C(R14)R15]r-OR11、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R13)-[C(R14)R15]r-R12、-C(O)-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-N(R13)C(O)-L-(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-N(R11)C(O)N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]-L-R12和-L-C(O)N(R11)R12；或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基、或任选地取代的杂环烷基； t为0至2的整数； r为0至5的整数； L选自任选地取代的3-至7-元碳环基团、任选地取代的3-至7-元杂环基团、任选地取代的6-元芳基，以及任选地取代的6-元杂芳基； R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-OR17、-S(O)tR17、-[C(R14)R15]r-C(O)OR17、-[C(R14)R15]r-N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R16)C(O)N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)OR18、-[C(R14)R15]r-R17和-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)R18；或者R11或R12可以由以下结构来定义

和
其中 u和v独立地为从0至3的整数；和 X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、任选地取代的低级烷基、任选地取代的低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
本发明进一步提供了式III化合物
其中 V、T、X和Y独立地选自CR4和N； Q选自NR5、O和S； Z选自CR3和N； R1和R2独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)R12、-NSO2N(R11)R12、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)-[C(R14)R15]rR12、-[C(R14)R15]r-OR11、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R13)-[C(R14)R15]r-R12、-C(O)-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-N(R13)C(O)-L-(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-N(R11)C(O)N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]-L-R12和-L-C(O)N(R11)R12；或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基、或任选地取代的杂环烷基； t为0至2的整数； r为0至5的整数； L选自任选地取代的3-至7-元碳环基团、任选地取代的3-至7-元杂环基团、任选地取代的6-元芳基，以及任选地取代的6-元杂芳基； R3、R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；或者R14和R15可一起不存在，形成另外的键； R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-OR17、-S(O)tR17、-[C(R14)R15]r-C(O)OR17、-[C(R14)R15]r-N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R16)C(O)N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)OR18、-[C(R14)R15]r-R17和-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)R18；或者R11或R12可以由以下结构来定义

和
其中 u和v独立地为从0至3的整数；和 X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、任选地取代的低级烷基、任选地取代的低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
本发明进一步提供了式IV化合物
或者其盐、酯或前药，其中 T、X和Y独立地选自CR4、N、NR4、O和S； U为CR10或N； V为CR4或N； R1和R2独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)R12、-NSO2N(R11)R12、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)-[C(R14)R15]rR12、-[C(R14)R15]r-N(R11)-C(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)S(O)t-C(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-OR11、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R13)-[C(R14)R15]r-R12、-C(O)-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-N(R13)C(O)-L-(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-N(R11)C(O)N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-L-C(O)N(R11)R12；或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基、或任选地取代的杂环烷基； t为0至2的整数； r为0至5的整数； L选自任选地取代的3-至7-元碳环基团、任选地取代的3-至7-元杂环基团、任选地取代的6-元芳基，以及任选地取代的6-元杂芳基； R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；或者R14和R15可一起不存在，形成另外的键； R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-OR17、-S(O)tR17、-[C(R14)R15]r-C(O)OR17、-[C(R14)R15]r-N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R16)C(O)N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)OR18、-[C(R14)R15]r-R17和-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)R18；或者R11或R12可以由以下结构来定义

和
其中 u和v独立地为从0至3的整数；和 X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、任选地取代的低级烷基、任选地取代的低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
本发明进一步提供了式V化合物
其中 T、X和Y独立地选自CR4、N、NR4、S和O； U选自CR10和N； V选自CR4和N； W和W’独立地选自CH2、CR7R8、NR9、O、N(O)、S(O)q和C(O)； n、m和p独立地为0至5的整数； q为0、1或2； R3、R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；或者R14和R15可一起不存在，形成另外的键； R5、R6、R7、R8和R9独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-C(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)R12、-NSO2N(R11)R12、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)-[C(R14)R15]rR12、-[C(R14)R15]r-OR11、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R13)-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)-C(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)S(O)t-C(O)N(R11)R12、-C(O)-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-N(R13)C(O)-L-(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-N(R11)C(O)N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-L-C(O)N(R11)R12；或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基、或任选地取代的杂环烷基； t为0至2的整数； r为0至5的整数； L选自任选地取代的3-至7-元碳环基团、任选地取代的3-至7-元杂环基团、任选地取代的6-元芳基，以及任选地取代的6-元杂芳基；和 R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-OR17、-S(O)tR17、-[C(R14)R15]r-C(O)OR17、-[C(R14)R15]r-N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R16)C(O)N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)OR18、-[C(R14)R15]r-R17和-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)R18；或者R11或R12可以由以下结构来定义

和
其中 u和v独立地为从0至3的整数；和 X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、任选地取代的低级烷基、任选地取代的低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
在主要的方面，本发明提供了新的化合物、药物组合物以及制备和应用该化合物和组合物的方法。这些化合物拥有有用的一氧化氮合成酶抑制或调节活性，并且可被用于治疗或预防疾病或疾患，其中一氧化氮合成或过量合成形成贡献的部分。这些化合物能抑制和/或调节一氧化氮合成酶的可诱导异构体而非一氧化氮合成的组成型异构体。
发明的详细描述 本发明提供了如上所述式I、II、III、IV和IV化合物的iNOS二聚化抑制剂的。
本发明提供了式II化合物，其中V为CR4。
本发明提供了式II化合物，其中Z为CR3且Y为N。
本发明提供了式II化合物，其中T为CR4。
本发明提供了式II化合物，其中X为N。
本发明提供了式II化合物，其中X为CR4。
本发明提供了式II化合物，其中T为N。
本发明提供了式II化合物，其中X为N。
本发明提供了式II化合物，其中 R5、R6、R7、R8和R9独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R12)-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-N(R11)C(O)N(R12)R13-[C(R14)R15]r-L-R12；或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基、或任选地取代的杂环烷基； R3、R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯和低级炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；和 R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的杂芳基、低级烯和低级炔；或者R11或R12可以由以下结构来定义

和
其中 u和v独立地为从0至3的整数；和 X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
在某些实施方案中，本发明进一步提供了式II化合物，其中 R7、R8和R9独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]t-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-N(R11)C(O)N(R12)R13-[C(R14)R15]r-L-R12；并且 R5和R6独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12和-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12，或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或任选地取代的杂环烷基。
本发明提供了式II化合物，其中R7和R8独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12和-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12。
本发明提供了式II化合物，其中W为CH2且W’为NR9。本发明提供了式II化合物，其中n、m和p各自独立地为从0至2的整数。本发明进一步提供了式II化合物，其中R9选自-C(O)N(R11)R12和-[C(R14)R15]r-N(R11)R12。本发明还进一步提供了式II化合物，其中R9为-[C(R14)R15]r-N(R11)R12。本发明更进一步提供了式II化合物，其中r为2。
本发明进一步提供了式II化合物，其中R11选自氢和低级烷基。本发明进一步提供了式II化合物，其中R11选自氢和甲基。本发明更进一步地提供了式II化合物，其中R11为氢。
本发明提供了式II化合物，其中R12被定义为如下的结构式
其中u和v独立地为从0至3的整数。本发明进一步提供了式II化合物，其中u和v独立地为1或2。
本发明提供了式II化合物，其中p和m为1且n为0。
本发明提供了式II化合物，其中R14和R15为氢。
本发明提供了式II化合物，其中R4、R5、R6和R10为氢。
本发明提供了式II化合物，其中R3为甲基。
本发明提供了式II化合物，其中u和v各自为1。
本发明提供了式II化合物，其中T为CR4且X为N。
本发明提供了式IV化合物，其中T和X独立地选自CR4和N，并且Y选自S和O。
本发明提供了式IV化合物，其中T选自S和O，并且X和Y独立地选自CR4和N。
本发明提供了式IV化合物，其中Y为N。
本发明提供了式IV化合物，其中X为N。
本发明提供了式IV化合物，其中T为S。
本发明提供了式IV化合物，其中V为CR4。
本发明提供了式IV化合物，其中 R1和R2独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R12)-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)-C(O)N(R11)R12、[C(R14)R15]r-N(R13)S(O)t-C(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-N(R11)C(O)N(R12)R13-[C(R14)R15]r-L-R12；或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或任选地取代的杂环烷基； R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯和低级炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；和 R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的杂芳基、低级烯和低级炔；或者R11或R12可以由以下结构来定义

和
其中 u和v独立地为从0至3的整数；和 X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
本发明进一步提供了式IV化合物，其中 R1选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)-C(O)N(R11)R12和-[C(R14)R15]r-N(R13)S(O)t-C(O)N(R11)R12；和 R2选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12和-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12， 本发明还进一步提供了式IV化合物，其中，R1选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)-C(O)N(R11)R12和-[C(R14)R15]r-N(R13)S(O)t-C(O)N(R11)R12。
本发明提供了式IV化合物，其中U为N。
本发明提供了式IV化合物，其中R1选自-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)-C(O)N(R11)R12和-[C(R14)R15]r-N(R13)S(O)t-C(O)N(R11)R12。
本发明提供了式IV化合物，其中R12选自NH2和杂芳基，或者以如下结构式定义

和
其中 u和v独立地为从0至3的整数；和 X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
本发明进一步提供了式IV化合物，其中X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基。
本发明提供了式IV化合物，其中R9为-[C(R14)R15]r-N(R11)R12。
本发明提供了式IV化合物，其中R12以如下结构式定义
并且u和v独立地为1或2。
本发明提供了式IV化合物，其中R14和R15都是氢。
本发明提供了式IV化合物，其中R2选自氢和低级烷基。
本发明提供了式IV化合物，其中R11是氢或甲基。
本发明提供了式IV化合物，其中R2是甲基。
本发明提供了式IV化合物，其中R10、R11和R4是氢，且u和v为1。
本发明提供了式IV化合物，其中Y和X为N，T为S，且V为CR4。
本发明提供了式IV化合物，其中T和X独立地选自CR4和N，并且Y选自S和O。
本发明提供了式IV化合物，其中T选自S和O，并且X和Y独立地选自CR4和N。
本发明提供了式V化合物，其中Y是N。
本发明提供了式V化合物，其中X是N。
本发明提供了式V化合物，其中T是S。
本发明提供了式V化合物，其中V是CR4。
本发明提供了式V化合物，其中Y是CR4。
本发明提供了式V化合物，其中 R5、R6、R7、R8和R9独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-C(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R12)-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-N(R11)C(O)N(R12)R13-[C(R14)R15]r-L-R12；或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基、或任选地取代的杂环烷基； R3、R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯和低级炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；和 R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的杂芳基、低级烯和低级炔；或者R11或R12可以由以下结构来定义

和
其中 u和v独立地为从0至3的整数；和 X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
本发明进一步提供了式V化合物，其中 R7、R8和R9独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-C(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-N(R11)C(O)N(R12)R13-[C(R14)R15]r-L-R12；并且 R5和R6独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12和-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12，或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或任选地取代的杂环烷基。
本发明还进一步提供了式V化合物，其中R7和R9独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12和-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12。
本发明提供了式V化合物，其中R12是以如下结构式定义的
其中u和v独立地为从0至3的整数。本发明进一步提供了式V化合物，其中u和v独立地为1或2。
本发明提供了式V化合物，其中R11选自氢和低级烷基。本发明进一步提供了式V化合物，其中R11选自氢和甲基。本发明还进一步提供了式V化合物，其中R3是甲基。
本发明提供了式V化合物，其中U是N，W是CH2，且W’是CR7R8。
本发明提供了式V化合物，其中U是CR4，W是CH2，且W’是NR9。
本发明提供了式V化合物，其中n、m和p各自独立地为从0至2的整数。
本发明进一步提供了式V化合物，其中R8选自-C(O)N(R11)R12和-[C(R14)R15]r-N(R11)R12。
本发明提供了式V化合物，其中R14和R15是氢。
本发明提供了式V化合物，其中r是1至3。
本发明提供了式V化合物，其中R7是氢。
本发明提供了式V化合物，其中R5选自氢、-OR11、-S(O)t-R11、和-N(R11)R12。
本发明提供了式V化合物，其中R11是氢或甲基。
本发明提供了式V化合物，其中R12以如下结构式定义的
并且u和v独立地为从1或2。
本发明提供了式V化合物，其中R4和R6是氢。
本发明的化合物既可以粗化学品来给药，也可以药物制剂来提供。因此，本发明提供了一种药物制剂，它包含化合物或其药学上可接受的盐、酯、前药或溶剂化物，以及其一种或多种药学上可接受的其载体以及任选地一种或多种其它治疗成分。所述的载体必须是“可接受的”，即与其它的制剂成分是相容的，并且对其接受体是无害的。适当的制剂取决于所选的给药途径。任何已知的技术、载体以及赋形剂都可以适当的和现有技术中所理解的来应用；例如Remington’sPharmaceutical Sciences。本发明的药物组合物可以本身已知的方式制造，例如通过常规的混合、溶解、制粒、包糖衣、研磨、乳化、包囊、包封或压制工艺。
所述制剂包括那些适宜口服、非胃肠道(包括皮下、皮内、肌肉内、静脉内、关节内和髓内)、腹膜内、经粘膜、经皮、直肠和局部(包括皮肤、口腔、舌下和眼内)给药，尽管最适宜的途径依赖于例如接受体的疾患和疾病。所述的制剂可呈现为单位剂量形式，并可以药学领域中熟知的方法来制备。所有的方法都包括将本发明的化合物或者其药学上可接受的盐、酯、前药或溶剂化物(“活性成分”)与构成一种或多种辅助成分的载体相结合的步骤。一般地，所述制剂是这样制备的，使活性成分与液体载体或精细分散的固体载体或者两者均匀地且紧密地结合，然后，必要时，将产品成型为想要的制剂。
适于口服给药的本发明的制剂可以是分散单元如胶囊、扁囊剂、片剂，每个都含有预定量的活性成分；粉末或颗粒；含水或不含水液体中的溶液剂或者混悬液；或者水包油液态乳剂或油包水的液态乳剂。活性成分也可呈现为丸剂、药糖剂或糊剂。
可口服应用的药物制剂包括片剂、明胶制成的推进-配合式(push-fit)胶囊剂、以及明胶和增塑剂如甘油或山梨醇制成的软密封胶囊剂。片剂可通过压制或成模来制备，任选地用一种或多个辅助成分。通过用适宜的机器压制任选地与粘合剂、惰性稀释剂或润滑剂、表面活性剂或分散剂相混合、自由流动形式如粉末或颗粒的活性成分，可制备压制片。通过用适宜的机器将惰性液体稀释剂湿润的粉末状化合物混合物成模，可制备模制片。所述的片剂可任选地被包衣或划痕，并且可制成便于提供其中活性成分的缓慢或控制释放的制剂。所有口服给药的制剂都应当是以适于这种给药的剂量。所述推进-配合式胶囊剂可含有活性成分，其预混合了填充剂如乳糖、粘合剂如淀粉、和/或润滑剂如滑石粉或硬脂酸镁和任选地稳定剂。在软胶囊中，该活性化合物可溶于或悬浮于适宜的液体中，例如脂肪油、液体石蜡或液态聚乙二醇。此外，可添加稳定剂。为糖衣片包适宜的包衣。为此，可使用浓的糖溶液，其任选地含有阿拉伯胶、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆凝胶、聚乙二醇、和/或二氧化钛、漆溶液、以及适宜的有机溶剂或溶剂混合物。可对片剂或糖衣片包衣添加染料或颜料，以鉴别或表征活性化合物剂量的不同组合。
所述的化合物可被制成用于通过注射如推注或连续灌输的非胃肠道给药。用于注射的制剂可以是以单位剂量形式，例如，安瓿瓶或多剂量容器，带有防腐剂。所述的组合物可采用这样的形式，如含油性或含水载体的混悬液、溶液剂或乳剂，而且可含有制剂用物质如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。所述的制剂可以是以单位剂量的或多剂量的容器，例如密封的安瓿和药瓶，而且可以粉末形式或以冷冻-干燥(冻干)贮藏，需要的条件仅为在使用前迅速添加无菌液态载体，例如盐水或无菌无热原水。即用型注射液和混悬液可从上述的无菌粉末、颗粒和片剂来制备。
用于非胃肠道给药的制剂包括活性化合物的含水和非含水(油性)无菌注射液，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂等渗于接受体血液的溶质；而含水和非含水无菌混悬液可包含助悬剂和增稠剂。适宜的冻干用溶剂或载体包括脂肪油如芝麻油，或合成脂肪酸酯如油酸乙酯或甘油三酸酯，或脂质体。含水注射混悬液可含有增加该混悬液粘度的物质例如羧甲基纤维素钠，山梨醇，或葡聚糖。任选地，所述混悬液也可含有适宜的稳定剂或增加所述化合物溶解度的物质以制备高浓度的溶液。
除了上述的制剂之外，所述化合物也可制成储库制剂。这种长效制剂可通过植入(例如皮下或肌肉内)或通过肌肉内注射而给药。因此，例如，所述化合物可用适宜的聚合或疏水材料(例如在可接受油中的乳剂)或离子交换树脂、或难溶性衍生物例如难溶性盐配制。
对于口腔或舌下给药，所述的组合物可采用常规方式制备的片剂、锭剂(lozenges)、软锭剂(pastilles)或凝胶。这种组合物可含有在调味基基如蔗糖和阿拉伯胶或黄耆胶中的活性成分。
所述的化合物也可制成直肠用组合物如栓剂或滞留型灌肠剂，例如含有常规的栓剂基质如可可脂、聚乙二醇或其它的甘油酯。
本发明的化合物也可局部给药，即非全身给药。这包括将本发明的化合物外用于表皮或口腔以及将这种化合物滴入耳、眼和鼻，这样所述的化合物不会显著地进入血流中。相反地，全身给药是指口服、静脉内、腹腔内和肌肉内给药。
适于局部给药的制剂包括适于从皮肤渗透至发炎部位的液态或半液态制剂，例如凝胶、搽剂、洗剂、乳膏、软膏或糊剂，和适于对眼、耳和鼻给药的滴剂。用于局部给药，所述的活性成分可占制剂重量的0.001至10重量％，例如从1％至2％重量比。它也可占制剂的10重量％，优选地占小于5重量％，更优选地从0.1至1重量％。
本发明化合物局部或经皮给药的凝胶通常可包含挥发性溶剂、非挥发性溶剂和水的混合物。缓冲溶剂系统的挥发性溶剂组分可优选地包括低级(C1-C6)烷基醇、低级烷基二元醇和低级二元醇聚合物。更优选地，所述的挥发性溶剂是乙醇。所述的挥发性溶剂组分被认为起到渗透促进剂的作用，同时当其蒸发时也在皮肤上产生清凉的作用。缓冲溶剂系统的非挥发性溶剂部分选自低级亚烷基二元醇和低级二元醇聚合物。优选地，应用丙二醇。所述的非挥发性溶剂减速挥发性溶剂的蒸发并且降低缓冲溶剂体系的蒸气压。这种非挥发性溶剂组分以及挥发性溶剂的数量，是由所用的药物化合物或药物决定的。当体系中非挥发性溶剂太少时，药物化合物可能由于挥发性溶剂的蒸发而结晶。当过量时，由于药物从溶剂混合物中释放较差而导致缺乏生物利用度。缓冲溶剂体系的缓冲组分可选自现有技术中常用的任何缓冲剂；优选地，使用水。各成分优选的比例为约20％的非挥发性溶剂、约40％的挥发性溶剂和约40％的水。有几种任选的、可添加至局部用组合物的组分。这些包括但不限于螯合剂、胶凝剂。适宜的胶凝剂可包括但不限于半合成纤维素衍生物(例如羟丙甲纤维素)和合成聚合物和美容物质。
根据本发明的洗剂包括那些适用于皮肤和眼的。眼用洗剂可含有无菌水溶液，任选地含有杀菌剂，并且可用类似于制备滴剂的那些方法来制备。用于皮肤的洗剂或搽剂还可含有快速干燥和清凉皮肤的物质，例如乙醇或丙酮，和/或保湿剂如甘油或者油如蓖麻油或花生油。
根据本发明的乳膏、软膏或糊剂是外用的半固态活性成分制剂。可通过借助于适当的机械，将精细分散或粉末化形式、单独地或者在含水或非含水流体的溶液或混悬液中的活性成分与油脂或非油脂基质相混合而制造它们。所述的基质包括烃类如硬石蜡、软石蜡或液态石蜡、甘油、蜂蜡、金属皂；胶浆剂；天然油如杏仁油、玉米油、花生油、蓖麻油或橄榄油；羊毛脂或其衍生物或者脂肪酸如硬脂酸或油酸，以及醇如丙二醇或大粒凝胶。所述的制剂可加入任何适宜的表面活性剂例如阴离子、阳离子或非离子表面活性剂如山梨醇酯或其聚氧乙烯衍生物。还可以包括助悬剂例如天然胶、纤维素衍生物或者无机物质如硅石(silicaceous silicas)，和其它成分如羊毛脂。
根据本发明的滴剂可包括无菌含水的或油性溶液或者混悬液，并可通过将活性成分溶于适宜的杀菌剂和/或杀真菌剂和/或其它的任何适宜的防腐剂的水溶液中而制备，而且优选地含有表面活性剂。然后可通过过滤澄清得到的溶液，转移至适当的容器，随后密封，并用高压蒸汽灭菌或维持于98-100℃半小时进行灭菌。或者，可通过过滤对所述溶液灭菌，并通过无菌技术转移至容器。适于滴剂中包含的杀菌剂和杀真菌剂的实例是硝酸或乙酸苯汞(0.002％)、苯扎氯铵(0.01％)和醋酸氯己定(0.01％)。用于制备油性溶液的适宜溶剂包括甘油、稀释的乙醇和丙二醇。
用于口内局部给药例如口腔或舌下给药的制剂包括锭剂，其含有在调味基如蔗糖和阿拉伯胶或黄耆胶中的所述活性成分；和含有在基质如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶中的所述活性成分的软锭剂。
对于吸入给药，根据本发明的化合物可方便地从吹入器、加压包装的雾化器或者其它传输气雾喷雾的常规装置传输。加压包装可包括适宜的推进剂如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它适宜的气体。对于加压的气雾剂，单位剂量可用所提供的传输计量的阀来确定。或者，对于吸入或吹入给药，根据本发明的化合物可采用干粉组合物的形式，例如化合物与适宜的粉末基质如乳糖或淀粉的粉状混合物。所述的粉状组合物可以是以单位剂量的形式，例如，胶囊、盒、明胶或泡罩包装，籍此借助于吸入器或吹入器来给药粉末。
优选的单位剂量制剂是指含有活性成分的有效剂量或者其适当部分的那些，如下所述。
应当理解的是，除了上面特别提到的成分之外，考虑到所述制剂的类型，本发明的制剂可包括现有技术中常规的其它物质，例如那些适于口服给药的可包括调味剂。
本发明的化合物可口服或注射给药，剂量为每日0.1至500mg/kg。成人的剂量范围通常为5mg至2g/日。片剂或者以离散单元提供的其它形式可以方便地含有在这样的剂量或多个这样的剂量下有效的本发明化合物，例如，含有5mg至500mg，通常大约10mg至200mg的单元。
可与载体材料组合以生产单个剂量形式的活性成分的量取决于治疗的宿主以及特定的给药模式。
本发明的化合物可以各种模式给药，例如口服、局部或者注射。对患者给药精确数量的化合物是出诊医生的职责。对任一特定患者的特异用量取决于多种因素，包括所用特定化合物的活性、年龄、体重、总的健康、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄率、药物联合、待治疗的明确疾病，以及适应症或待治疗疾患的严重程度。给药途径还可根据疾患及其严重程度而改变。
在某些情况下，应当将另一种治疗剂与至少一种这里所述的化合物(或者药学上可接受的盐、酯、酰胺、前药，或者溶剂化物)联合在一起给药。仅作示例用，如果接受其中一种这里所述化合物治疗的患者所经历的其中一种副作用是高血压，那么应当与初始治疗剂联合给药抗高血压剂。或者，仅作示例用，其中一种这里所述化合物的治疗有效性可通过给药辅助剂(即，辅助剂本身仅具有非常小的治疗益处，但是与另一种治疗剂联合，提高了对患者的总治疗益处)而提高。或者，仅作示例用，通过与另一种也具有治疗益处的治疗剂(也包括治疗方案)一起给药其中一种这里所述的化合物，可提高患者所经历的益处。仅作示例用，给药其中一种这里所述的化合物来治疗糖尿病时，也对患者提供另一种糖尿病治疗剂，这样可导致提高治疗益处。在任何情况下，无论待治疗的是何种疾病、障碍或疾患，患者所经历的总的益处可能是两种活性治疗剂的简单加和，或者患者可能经历协同的益处。
可能联合治疗的特定的、非限定性的实例包括应用本发明的化合物以及a)皮质类激素，包括二丙酸倍他米松(增强型和非增强型)、戊酸倍他米松、丙酸氯倍他索、二醋酸双氟拉松、丙酸卤倍他索、安西缩松、dexosimethasone、肤轻松、醋酸氟轻松、卤轻松(halocinonide)、clocortalone pivalate、dexosimetasone、flurandrenalide；b)非甾体抗炎药，包括双氯芬酸、酮洛芬、吡罗昔康；c)肌松剂以及与其它药物的组合，包括环苯扎林、巴氯芬、环苯扎林/利多卡因、巴氯芬/环苯扎林、以及环苯扎林/利多卡因/酮洛芬；d)麻醉剂以及与其它药物的组合，包括利多卡因、利多卡因/脱氧-D-葡萄糖(抗病毒)、丙胺卡因、以及EMLA乳膏[局部麻醉药的共熔混合物(利多卡因2.5％和丙胺卡因2.5％；一种乳剂，其中油相是1∶1重量比的利多卡因与丙胺卡因的共熔混合物。这种共熔混合物具有低于室温的熔点，因此两种局部麻醉药是以液态油而以非晶体存在)]；e)祛痰药以及与其它药物的组合，包括愈创甘油醚以及愈创甘油醚/酮洛芬/环苯扎林；f)抗抑郁药，包括三环类抗抑郁药(例如阿米替林、多虑平、脱甲丙咪嗪、丙咪嗪、阿莫沙平、氯米帕明、去甲替林和普罗替林)、选择性5-羟色胺/去甲肾上腺素再摄入抑制剂包括(例如度洛西汀和米氮平)、以及选择性去甲肾上腺素再摄入抑制剂(例如尼索西汀、马普替林、瑞波西汀)、选择性5-羟色胺再摄入抑制剂(例如氟西汀、氟伏沙明)；g)抗惊厥药西平、carbamezipine、唑尼沙胺、美西率、加巴喷丁/可乐定、加巴喷丁/卡马西平、以及卡马西平/环苯扎林；h)抗高血压药，包括可乐定；i)阿片样物质，包括洛哌丁胺、曲马多、吗啡、芬太尼、羟可酮、左啡诺、以及布托啡诺；j)局部抗刺激药，包括薄荷醇、冬青油、樟脑、桉树油以及松节油；k)局部用大麻酚类物质，包括选择性以及非-选择性CB1/CB2配体；以及其它的药物，如辣椒素。
在任何情况下，多重治疗剂(其中至少一种是这里所述的式I至V的化合物)可以任何次序或者甚至同时给药。如果是同时给药，所述多重治疗剂可以是单个、统一的形式、或者是多重的形式(仅作为示例用，以单个药丸或以两个分开的药丸)。在多重用药中可给予其中一种治疗剂、或者作为多重用药给予两种。如果不是同时给药，多重用药之间的计时可以是任何期间的时间，范围为从几分钟至四个星期。
本发明的化合物在治疗一氧化氮合成酶介导的疾病、紊乱和疾患方面是有用的，而且特别地适于作为一氧化氮合成酶二聚化的抑制剂。本发明的化合物是用于治疗这些患者，其患有神经病或炎性疼痛诸如反射性交感营养不良/灼痛(神经损伤)、外周神经病(包括糖尿病神经病)、难治的癌症痛、复杂性区域痛综合症、以及夹压神经病(腕管综合症)。在治疗急性带状疱疹(带状疱疹)、疱疹后神经痛(PHN)相关的疼痛，以及相关疼痛综合症例如眼睛痛方面，所述的化合物也是有用的。所述的化合物进一步用作治疗疼痛如手术止痛的止痛药、或者作为治疗发热的解热药。疼痛适应症包括，但是不限于，包括心脏手术后的各种手术方法的术后疼痛，牙痛/拔牙，癌症引起的疼痛，肌肉痛，乳腺痛，皮肤损伤引起的疼痛，下背痛，各种病因的头痛，包括偏头痛等。所述的化合物也用于治疗疼痛相关的紊乱，诸如触觉性痛觉超敏和痛觉过敏。所述的疼痛可以是体因性的(痛觉的或神经病的)、急性的和/或慢性的。本发明的一氧化氮二聚化抑制剂也可用于这种疾患，当NSAID、吗啡或芬太尼麻醉剂和/或其它阿片类止痛剂传统上可给药时。
此外，本发明的化合物可用于治疗或预防需要延长鸦片止痛剂的患者中的鸦片耐受性、和服用苯并二氮患者中的苯并二氮耐受性、以及其它成瘾性行为，例如，尼古丁成瘾、酒精成瘾和饮食紊乱。而且，本发明的化合物和方法是用于治疗或预防药物戒断症，例如治疗或预防从鸦片、酒精或烟草成瘾戒断的症状。
此外，本发明的化合物可用于治疗胰岛素抗性以及通常与放大炎性信号传导相关的其它代谢紊乱如动脉粥状硬化。
本发明包括应用新的选择性iNOS抑制剂的治疗方法来治疗或预防呼吸道疾病或疾患，其包括应用在治疗或预防呼吸道疾病或疾患药品中的治疗方法，所述的呼吸道疾病或疾患包括哮喘性疾患，包括过敏原诱导的哮喘、运动诱导的哮喘、污染诱导的哮喘、感冒诱导的哮喘以及病毒诱导的哮喘；慢性阻滞性肺病，包括气流正常的慢性支气管炎、气道阻滞的慢性支气管炎(慢性阻滞性支气管炎)、肺气肿、哮喘性支气管炎以及大泡性疾病；以及其它涉及炎性的肺病，包括细支气管扩张性囊纤维化、饲鸽者肺、农民肺、急性呼吸窘迫综合征、肺炎、吸气或吸入损伤、肺部内的脂肪栓塞、肺部的酸中毒炎症、急性肺水肿、急性高山病、急性肺高血压、新生儿持续性肺高血压、持续性吸入综合症、肺透明膜病、急性肺血栓栓塞、肝素-精蛋白反应、败血症、哮喘持续状态和缺氧。
可有利地用本发明的化合物治疗的其它紊乱或疾患包括炎症。本发明的化合物可用作抗炎剂，额外的益处是其具有显著的、较少有害的副作用。所述的化合物用于治疗关节炎，包括但不限于，风湿性关节炎、脊柱关节病、痛风性关节炎、骨关节炎、系统性红斑狼疮、青少年关节炎、急性风湿性关节炎、肠病性关节炎、神经病关节炎、银屑病关节炎、化脓性关节炎。所述的化合物还用于治疗骨质疏松以及其它相关的骨异常。这些化合物也可用于治疗胃肠道疾患诸如逆流食道炎、腹泻、炎性肠道疾病、克罗恩氏病、胃炎、应激性肠综合症和溃疡性结肠炎。所述的化合物也可用于治疗肺部炎症，例如那些与病毒感染有关的以及胞囊纤维化。此外，本发明的化合物也可用于器官移植患者，单独地或者与常规的免疫调节剂联合使用。而且本发明的化合物用于搔痒症和白癜风。
本发明的化合物还用于治疗如下疾病中的组织损伤，诸如血管疾病、偏头痛、结节性动脉周围炎、甲状腺炎、再生障碍性贫血、何杰金氏病、硬皮病、风湿热、I型糖尿病、神经肌肉接头病包括重症肌无力、白质疾病包括多发性硬化、结节病、肾炎、肾病综合症、白塞综合征、多发性肌炎、牙龈炎、牙周炎、超敏反应、创伤后肿胀、局部缺血包括心肌缺血、心血管缺血和心脏骤停继发的局部缺血等。
本发明的化合物还用于治疗神经系统的某些疾病和紊乱。中枢神经系统紊乱，其中一氧化氮抑制是有用的，包括皮层痴呆，该痴呆包括阿尔茨海默氏病、中风导致的中枢神经系统损伤，局部缺血包括大脑缺血(局灶性缺血、栓塞性中风)和全脑缺血(例如，心脏骤停继发的)、以及创伤。神经变性紊乱，其中一氧化氮抑制是有用的，包括紊乱中神经的退化或者神经坏死，诸如缺氧、低血糖、癫痫，以及出现中枢神经系统(CNS)创伤(如脊髓和头部的损伤)，高压氧惊厥和中毒，痴呆例如早老性痴呆和AIDS相关的痴呆，恶病质，薛登汉氏舞蹈症，亨廷顿氏症，帕金森氏症，肌萎缩性侧索硬化(ALS)，科尔萨科夫氏症(Korsakoffsdisease)，与脑血管异常相关的痴愚，睡眠障碍，精神分裂症，抑郁症，与经前综合症(PMS)相关的抑郁症或其它症状，以及焦虑症。
此外，本发明的化合物还可用于抑制从L-精氨酸产生NO，包括与各种药物诱导的脓毒性和/或毒性失血性休克相关的全身性低血压；用细胞因子如TNF、IL-1和IL-2的治疗；和作为在移植治疗中短期免疫抑制的辅助剂。这些化合物也可用于治疗过敏性鼻炎、呼吸窘迫综合症、内毒素休克综合症以及动脉粥状硬化。
另外，优选用本发明化合物治疗的其它紊乱或疾患包括，癌症的预防和治疗，诸如结肠直肠癌，以及乳腺、肺、前列腺、膀胱、宫颈和皮肤的癌症。本发明的化合物可用于治疗和预防肿瘤的形成，包括但不限于脑癌、骨癌，白血病，淋巴瘤，上皮细胞衍生的肿瘤(上皮癌)例如基底细胞癌、腺癌，胃肠道癌例如唇癌、口腔癌、食管癌、小肠癌和胃癌，结肠癌，肝癌，膀胱癌，胰腺癌，子宫癌，宫颈癌，肺癌，乳腺癌和皮肤癌，例如鳞状细胞和基底细胞癌，前列腺癌，肾细胞癌，以及其它已知的、作用于全身上皮细胞的癌症。所述肿瘤的形成选自胃肠道癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、子宫癌、前列腺癌、宫颈癌、肺癌、乳腺癌以及皮肤癌，诸如鳞状细胞和基底细胞癌。本发明的化合物和方法还可用于治疗放射治疗产生的纤维化。本发明的化合物和方法可用于治疗患有腺瘤息肉病的个体，包括具有家族性腺瘤息肉病(FAP)的那些。此外，本发明的化合物和方法可用于预防有FAP风险的患者形成息肉。
本发明的化合物可用于治疗眼科疾病，诸如青光眼、视网膜神经节变性、眼缺血、视网膜炎、视网膜病、葡萄膜炎、眼恐光症、以及与眼组织急性损伤相关的炎症和疼痛。更明确地，所述的化合物可用于治疗青光眼视网膜病和/或糖尿病视网膜病。所述的化合物可用于治疗术后的炎症和疼痛，例如源自眼科手术，比如白内障手术和屈光手术。
而且，本发明的化合物可用于治疗月经痛、月经失调、早产、肌腱炎、滑囊炎、皮肤相关的疾患如银屑病、湿疹、烧伤、晒伤、皮炎、胰腺炎、肝炎等。本发明化合物通过抑制一氧化氮而提供优势的其它疾患，包括糖尿病(I型或II型)、充血性心衰、心肌炎、动脉粥状硬化以及主动脉瘤。
本发明的化合物也可用于共同治疗，部分地或者全部地，替代其它常规抗炎治疗，例如一起应用甾体、NSAID、COX-2选择性抑制剂、5-脂肪氧合酶抑制剂、LTB4拮抗剂和LTA4水解酶抑制剂。本发明的化合物当与抗菌剂或抗病毒剂联合治疗应用时也可用于预防组织损伤。
除了用于人类治疗之外，这些化合物也可用于兽用治疗同伴动物、外来动物和农场动物，包括哺乳动物、啮齿动物等。更优选的动物包括马、狗和猫。
这里单独地或联合地所用的术语“酰基”，是指羰基连接至烯基、烷基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环基或者任何其它的基团，只要连接至羰基的原子是碳原子。“乙酰基”是指-C(O)CH3基团。酰基的实例包括甲酰基、烷酰基和芳酰基。
术语“酰基氨基”包括用酰基取代的氨基。“酰基氨基”的实例是乙酰基氨基(CH3C(O)NH-)。
这里单独地或联合地所用的术语“烯基”，是指直链的或支链的烃基，具有一个或多个双键并且含有从2至20，优选地2至6个碳原子。亚烯是指碳-碳双键体系在两个或多个位置连接，例如亚乙烯[(-CH＝CH-)，(-C::C-)]。适宜的烯基实例包括乙烯基、丙烯基、2-甲基丙烯基、1，4-丁二烯基等。
这里单独地或联合地所用的术语“烷氧基”，是指烷基醚基团，其中术语烷基如下面的定义。适宜的烷基醚基团实例包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、异丙氧基、正-丁氧基、异-丁氧基、仲-丁氧基、叔-丁氧基等。
这里单独地或联合地所用的术语“烷氧基烷氧基”，是指一个或多个烷氧基通过另一个烷氧基连接至母体分子部分。实例包括乙氧基乙氧基、甲氧基丙氧基乙氧基、乙氧基戊氧基乙氧基乙氧基等。
这里单独地或联合地所用的术语“烷氧基烷基”，是指烷氧基通过烷基连接至母体分子部分。术语“烷氧基烷基”也包括具有一个或多个烷氧基连接至烷基的烷氧基烷基，即形成单烷氧基烷基和双烷氧基烷基。
这里单独地或联合地所用的术语“烷氧基羰基”，是指烷氧基通过羰基连接至母体分子部分。这种“烷氧基羰基”的实例包括甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、丁氧基羰基和己氧基羰基。
这里所用的术语“烷氧基羰基烷基”，包括具有取代至烷基的如上所述的“烷氧基羰基”的基团。更优选的烷氧基羰基烷基是“低级烷氧基羰基烷基”，具有如上定义的低级烷氧基羰基被连接至1至6个碳原子。这种低级烷氧基羰基烷基的实例包括甲氧基羰基甲基。
这里单独地或联合地所用的术语“烷基”，是指直链或支链烷基，其含有1至，以及包括20，优选地1至10，和更优选地1至6个碳原子。烷基可被任选地取代，如这里所定义的。烷基的实例包括甲基、乙基、正-丙基、异丙基、正-丁基、异丁基、仲-丁基、叔-丁基、戊基、异-戊基、己基、辛基、壬基(noyl)等。这里所用的术语“亚烷基”，单独地或联合地，是指衍生自直链或支链的饱和烃类、在两个或多个位置连接的饱和脂肪族基团，如亚甲基(-CH2-)。
这里单独地或联合地所用的术语“烷基氨基”，是指通过烷基连接至母体分子部分的氨基。
这里单独地或联合地所用的术语“烷基氨基羰基”，是指通过羰基连接至母体分子部分的烷基氨基。这种基团的实例包括N-甲氨基羰基和N，N-二甲基羰基。
这里单独地或联合地所用的术语“烷基羰基”和“烷酰基”，是指通过羰基连接至母体分子部分的烷基。这种基团的实例包括甲基羰基和乙基羰基。
这里单独地或联合地所用的术语“亚烷基”(alkylidene)是指烯基，其中碳-碳双键的一个碳原子属于该烯基所连接的部分。
这里单独地或联合地所用的术语“烷基亚磺酰基”，是指通过亚磺酰基连接至母体分子部分的烷基。烷基亚磺酰基的实例包括甲基亚磺酰基、乙基亚磺酰基、丁基亚磺酰基和己基亚磺酰基。
这里单独地或联合地所用的术语“烷基磺酰基”，是指通过磺酰基连接至母体分子部分的烷基。烷基亚磺酰基的实例包括甲磺酰基、乙磺酰基、叔-丁磺酰基等。
这里单独地或联合地所用的术语“烷基硫基”，是指烷基硫醚(R-S-)基团，其中术语烷基定义如上。适宜的烷基硫醚基团的实例包括甲硫基、乙硫基、正-丙硫基、异丙硫基、正-丁硫基、异-丁硫基、仲-丁硫基、叔-丁硫基、乙氧基乙硫基、甲氧基丙氧基乙硫基、乙氧基戊氧基乙氧基乙硫基等。
术语“烷基硫基烷基”包括被连接至烷基的烷基硫基。烷基硫基烷基包括“低级烷基硫基烷基”，其带有1至6个碳原子的烷基和如上定义的烷基硫基。这种基团的实例包括甲硫基甲基。
这里单独地或联合地所用的术语“炔基”，是指直链或支链的烃基，其带有一个或多个三键并且含有2至20个、优选地2至6个、更优选地2至4个碳原子。“亚炔基”是指在两个位置被连接的碳-碳三键，例如(-C:::C-，-C≡C-)。炔基的实例包括乙炔基、丙炔基、羟丙炔基、丁炔-1-基、丁炔-2-基、戊炔-1-基、戊炔-2-基、4-甲氧基戊炔-2-基、3-甲基丁炔-1-基、己炔-1-基、己炔-2-基、己炔-3-基、3，3-二甲基丁炔-1-基等。
这里单独地或联合地所用的术语“酰胺基”，是指氨基通过羰基连接至母体分子部分，如下面所描述。这里所用的术语“C-酰胺基”，单独地或联合地，是指-C(＝O)-NR2，R如这里所定义的。这里单独地或联合地所用的术语“N-酰胺基”是指RC(＝O)NH-，R如这里所定义的。
这里单独地或联合地所用的术语“氨基”是指NRR’，其中R和R’独立地选自氢、烯基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、芳基、芳烯基、芳烷基、环烷基、卤代烷基羰基、杂芳基、杂芳基烯基、杂芳基烷基、杂环、杂环烯基以及杂环烷基，其中所述的芳基、芳烯基、芳烷基的芳基部分、杂芳基、杂芳烯基和杂芳烷基的杂芳基部分、杂环、以及杂环烯基和杂环烷基的杂环部分可以任选地被一个、两个、三个、四个或五个取代基所取代，所述的取代基独立地选自烯基、烷氧基、烷氧基烷基、烷基、氰基、卤代、卤代烷氧基、卤代烷基、羟基、羟基-烷基、硝基以及氧代。
这里单独地或联合地所用的术语“氨基烷基”，是指氨基通过烷基连接至母体分子部分。实例包括氨基甲基、氨基乙基和氨基丁基。术语“烷基氨基”表示已经被一个或两个烷基取代的氨基。适宜的“烷基氨基”可以是单烷基化或二烷基化的，形成这样的基团，例如，N-甲基氨基、N-乙基氨基、N，N-二甲基氨基、N，N-二乙基氨基等。
这里单独地或联合地所用的术语“氨基羰基”和“氨甲酰基”，是指氨基取代的羰基，其中所述的氨基可以是伯或仲氨基，其含有选自烷基、芳基、芳烷基、环烷基、环烷基烷基等的取代基。
这里单独地或联合地所用的术语“氨基羰基烷基”，是指氨基羰基被连接至烷基，如这里所述的。这种基团的实例是氨基羰基甲基。术语“脒基”是指-C(NH)NH2基团。术语“氰基脒基”是指-C(N-CN)NH2。
这里单独地或联合地所用的术语“芳烯基”或“芳基烯基”，是指芳基通过烯基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“芳烷氧基”或“芳基烷氧基”，是指芳基通过烷氧基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“芳烷基”或“芳基烷基”，是指芳基通过烷基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“芳烷基氨基”或“芳基烷基氨基”，是指芳基烷基通过氮原子连接至母体分子部分，其中所述的氮原子被氢取代。
这里单独地或联合地所用的术语“芳亚烷基”或“芳基亚烷基”，是指芳基通过亚烷基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“芳烷基硫基”或“芳基烷基硫基”，是指芳基烷基通过硫原子连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“芳炔基”或“芳基炔基”，是指芳基通过炔基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“芳烷氧基羰基”，是指式芳烷基-O-C(O)-的基团，其中术语“芳烷基”具有上述的含义。芳烷氧基羰基的实例是苄氧羰基(Z或Cbz)和4-甲氧苯基甲氧基羰基(MOS)。
这里单独地或联合地所用的术语“芳烷酰基”，是指酰基衍生自芳基-取代的烷基羧酸，例如苯甲酰基、苯乙酰基、3-苯基丙酰基(氢化肉桂酰基)、4-苯基丁酰基、(2-萘基)乙酰基、4-氯代氢化肉桂酰基、4-氨基氢化肉桂酰基、4-甲氧基氢化肉桂酰基等。术语“芳酰基”是指酰基基团衍生自芳基羧酸，“芳基”具有以下给出的含义。这种芳酰基的实例包括取代的和非取代的苯甲酰基或萘甲酰基，例如苯甲酰基、4-氯代苯甲酰基、4-羧基苯甲酰基、4-(苄氧羰基)苯甲酰基、1-萘甲酰基、2-萘甲酰基、6-羧基-2-萘甲酰基、6-(苄氧羰基)-2-萘甲酰基、3-苄氧基-2-萘甲酰基、3-羟基-2-萘甲酰基、3-(苄氧甲酰胺基)-2-萘甲酰基等。
这里单独地或联合地所用的术语“芳基”，是指碳环芳香性系统，其含有一个、两个或三个环，其中这种环可以外悬的方式连接在一起或者稠合在一起。术语“芳基”包括芳香性基团，例如苄基、苯基、萘基、蒽基、菲基、茚满基、茚基、轮烯基、蔥基、四氢萘基以及联苯基。
这里单独地或联合地所用的术语“芳基氨基”，是指芳基通过氨基连接至母体部分，例如甲基氨基、N-苯基氨基等。
这里单独地或联合地所用的术语“芳基羰基”和“芳酰基”，是指芳基通过羰基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“芳氧基”，是指芳基通过氧原子连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“芳基磺酰基”，是指芳基通过磺酰基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“芳硫基”，是指芳基通过硫原子连接至母体分子部分。
这里单独地所用的术语“羧”或“羧基”，或与其他术语联合地所用，例如“羧烷基”，是指-CO2H。
这里单独地或联合地所用的术语“苯并”(benzo，benz)，是指衍生自苯的二价基团C6H4＝。实例包括苯并噻吩和苯并咪唑。
这里单独地或联合地所用的术语“O-氨基甲酰基”，是指-OC(O)NR基团，R如这里所定义的。
这里单独地或联合地所用的术语“N-氨基甲酰基”，是指ROC(O)NH-基团，R如这里所定义的。
这里所用的术语“羰基”，单独时它包括甲酰基[-C(O)H]，联合时为-C(O)-。
这里所用的术语“羧基”是指-C(O)OH或者相应的“羧酸根”阴离子，例如在羧酸盐中的情形。“O-羧基”是指RC(O)O-基团，而R如这里所定义的。“C-羧基”是指-C(O)OR基团，而R如这里所定义的。
这里单独地或联合地所用的术语“氰基”是指-CN。
这里单独地或联合地所用的术语“环烷基”，是指饱和的或者部分饱和的单环、双环或三环烷基基团，其中每个环部分含有3至12个、优选地5至7个碳原子的环成员，其可任选地为苯并稠合环系统，该系统可被任选地取代，如这里所定义的。这种环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、八氢萘基、2，3-二氢-1H-茚基、金刚烷基等。这里所用的“双环”和“三环”包括稠合环系统，例如十氢萘、八氢萘以及多重环(多中心)的饱和或部分饱和类型。后者类型异构体的实例一般为双环[2，2，2]辛烷、双环[2，2，2]辛烷、双环[1，1，1]戊烷、樟脑和双环[3，2，1]辛烷。术语“环烷基”包括具有3至10个碳原子的基团，诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
这里单独地或联合地所用的术语“酯”，是指羰基桥接两个在碳原子处被连接的部分。
这里单独地或联合地所用的术语“醚”，是指氧基桥接两个在碳原子处被连接的部分。
这里单独地或联合地所用的术语“卤代”或“卤素”，是指氟、氯、溴或者碘。
这里单独地或联合地所用的术语“卤代烷氧基”，是指卤代烷基通过氧原子连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“卤代烷基”，是指具有上述定义含义的烷基，其中一个或多个氢用卤素来代替。具体地说，它包括单卤代烷基、二卤代烷基和多卤代烷基。单卤代烷基，例如，在该基团内可具有碘原子、溴原子、氯原子或氟原子。二卤代和多卤代基团可具有两个或多个相同的卤素原子或者不同卤代基团的组合。卤代烷基的实例包括氟代甲基、二氟代甲基、三氟甲基、氯代甲基、二氯代甲基、三氯甲基、三氯甲基、五氟乙基、七氟丙基、二氟氯甲基、二氯氟甲基、二氟乙基、二氟丙基、二氯乙基和二氯丙基。“卤代亚烷基”是指在两个或多个位置连接的卤代烃基。实例包括氟代亚甲基(-CFH-)、二氟代亚甲基(-CF2-)、氯代亚甲基(-CHCl-)等。这种卤代烷基的实例包括氯代甲基、1-溴代乙基、氟代甲基、二氟代甲基、三氟甲基、1，1，1-三氟乙基、全氟癸基等。
这里单独地或联合地所用的术语“杂烷基”，是指稳定的直链或者支链、或环烃基团或者它们的组合，完全饱和的或者含有1至3个不饱和度，由所述数量的碳原子以及1至3个选自O、N和S的杂原子组成，而且其中氮原子和硫原子可任选地被氧化，以及氮杂原子可任选地被季铵化。该杂原子O、N和S可被安置于杂烷基内部的任意位置。最多两个杂原子可以是连续的，例如，-CH2-NH-O-CH3。
这里单独地或联合地所用的术语“杂芳基”，是指其中至少一个原子选自O、S和N的3至7元的、优选地5至7元的不饱和杂环。杂芳基举例为含有1至4个氮原子的不饱和3至7元杂单环基团，例如，吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基[例如，4H-1，2，4-三唑基，1H-1，2，3-三唑基，2H-1，2，3-三唑基等]、四唑基[例如，1H-四唑基，2H-四唑基等]等；含有1至5个氮原子的不饱和缩合的杂环基团，例如吲哚基、异吲哚基、中氮茚基(indolizinyl)、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑并哒嗪基[如四唑并[1，5-b]哒嗪基等]等；包括氧原子的不饱和3至6元杂单环基团，例如，吡喃基、呋喃基等；包括硫原子的不饱和3至6元杂单环基团，例如噻吩基等；包括1至2个氧原子和1至3个氮原子的不饱和3至6元杂单环基团，例如，噁唑基、异噁唑基、噁二唑基[例如，1，2，4-噁二唑基，1，3，4-噁二唑基，1，2，5-噁二唑基等]等；含有1至2个氧原子和1至3个氮原子的不饱和缩合的杂环基团，[如苯并噁唑基，苯并噁二唑基等]；包括1至2个硫原子和1至3个氮原子的不饱和3至6元杂单环基团，例如噻唑基、噻二唑基[例如，1，2，4-噻二唑基，1，3，4-噻二唑基，1，2，5-噻二唑基等]以及异噻唑基；含有1至2个硫原子和1至3个氮原子的不饱和缩合的杂环基团，[如苯并噻唑基，苯并噻二唑基等]等。该术语也包括杂环基团与芳基稠合的基团。这种稠合的双环基团的实例包括苯并呋喃、苯并噻吩基等。
这里单独地或联合地所用的术语“杂芳烯基”或者“杂芳基烯基”，是指杂芳基通过烯基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“杂芳烷氧基”或者“杂芳基烷氧基”，是指杂芳基通过烷氧基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“杂芳烷基”或者“杂芳基烷基”，是指杂芳基通过烷基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“杂芳亚烷基”或者“杂芳基亚烷基”，是指杂芳基通过亚烷基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“杂芳氧基”，是指杂芳基通过氧原子连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“杂芳基磺酰基”，是指杂芳基通过磺酰基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“杂环烷基”以及可互换的“杂环”，每一个都是指饱和的、部分饱和的或者完全不饱和的单环、双环或者三环的杂环基团，其含有至少一个，优选地1至4而且更优选地1至2个杂原子作为环成员，其中每一所述的杂原子可独立地选自氮、氧和硫，而且其中在每个环中优选地有3至8个环成员，更优选地在每个环中有3至7个环成员，最优选地在每个环中有5至6个环成员。“杂环烷基”和“杂环”也包括了砜、亚砜、叔氮环成员的N-氧化物，以及碳环稠合和苯并稠合的环系统；此外，两个术语也包括杂环被稠合至如这里所定义的芳基、或者另外的杂环基团的系统。本发明的杂环基举例为氮杂环丙烷基、氮杂环丁烷基、1，3-苯并二氧戊环、二氢异吲哚基、二氢异喹啉基、二氢噌啉基、二氢苯并二噁英基(dihydrobenzodioxinyl)、二氢[1，3]噁唑并[4，5-b]吡啶基、苯并噻唑基、二氢吲哚基、二氢吡啶、1，3-二氧六环基、1，4-二氧六环基、1，3-二氧戊环基、异二氢吲哚基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基、四氢吡啶基、哌啶基、硫代吗啉基等。所述的杂环可任选地被取代，除非明确地禁止。
这里单独地或联合地所用的术语“杂环烯基”，是指杂环通过烯基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“杂环烷氧基”，是指杂环通过氧原子连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“杂环烷基”，是指如上定义的烷基，其中至少一个氢原子被如上定义的杂环基团所替换，例如，吡咯烷基甲基、四氢噻吩基甲基、吡啶基甲基等。
这里单独地或联合地所用的术语“杂环亚烷基”，是指杂环通过亚烷基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“肼基”，是指两个氨基通过单键相连，即-N-N-。
这里单独地或联合地所用的术语“羟基”，是指-OH。
这里单独地或联合地所用的术语“羟烷基”，是指线性的或分支的、具有1至约10个碳原子的烷基，其中任意一个碳原子可被一个或多个羟基取代。这种基团的实例包括羟甲基、羟乙基、羟丙基、羟丁基和羟己基。
这里单独地或联合地所用的术语“羟烷基”，是指羟基通过烷基连接至母体分子部分。
这里单独地或联合地所用的术语“亚氨基”，是指＝N-。
这里单独地或联合地所用的术语“亚氨基羟基”，是指＝N(OH)和＝N-O-。
短语“在主链中”是指从基团与本发明的化合物的连接点开始的，最长的连续或邻接的碳原子链。
术语“异氰酸基”是指-NCO基团。
术语“异硫氰酸基”是指-NCS基团。
短语“线性原子链”是指最长的原子直链，该原子独立地选自碳、氮、氧和硫。
这里单独地或联合地所用的术语“低级的”，是指含有从1至并包括6个碳原子。
这里单独地或联合地所用的术语“巯基烷基”，是指R’SR-基团，其中R和R’为如这里所定义的。
这里单独地或联合地所用的术语“巯基巯基”是指RSR’S-基团，其中R为如这里所定义的。
这里单独地或联合地所用的术语“巯基”是指RS-基团，其中R为如这里所定义的。
术语“不存在”是指孤电子对。
这里单独地或联合地所用的术语“硝基”是指-NO2。
这里单独地或联合地所用的术语“氧基”或“氧杂”是指-O-。
这里单独地或联合地所用的术语“氧代”是指＝O。
术语“全卤代烷氧基”是指所有的氢原子都被卤原子替代的烷氧基基团。
这里单独地或联合地所用的术语“全卤代烷基”，是指所用的氢原子都被卤原子替代的烷基基团。
这里单独地或联合地所用的术语“氧代”，是指双键的氧。
这里单独地或联合地所用的术语“磺酸化物”、“磺酸”和“磺酸基的”，是指-SO3H基团及磺酸用作盐形式时其阴离子。
这里单独地或联合地所用的术语“硫烷基”是指-S和-S-。
这里单独地或联合地所用的术语“亚磺酰基”是指-S(O)-。
这里单独地或联合地所用的术语“磺酰基”是指-S(O)2-。
术语“N-磺酰胺基”是指RS(＝O)2NH-基团，其中R如这里所定义的。
术语“S-磺酰胺基”是指-S(＝O)2NR2基团，其中R如这里所定义的。
这里单独地或联合地所用的术语“硫杂”和“硫代”是指-S-基团或者氧被硫替代的醚。硫代基团的被氧化衍生物，即亚磺酰基和磺酰基，包括在硫杂和硫代的定义中。
这里单独地或联合地所用的术语“硫醚”是指硫基(thio group)桥接在碳原子处相连的两部分。
这里单独地或联合地所用的术语“硫醇”是指-SH基团。
这里所用的术语“硫代羰基”，当单独地使用时包括硫代甲酰基-C(S)H而当联合地使用时是-C(S)-基团。
术语“N-硫代氨甲酰基”是指ROC(S)NH-基团，其中R如这里所定义的。
术语“O-硫代氨甲酰基”是指-OC(S)NR基团，其中R如这里所定义的。
术语“硫代氰酸基”是指-CNS基团。
术语“三卤代甲磺酰胺基”是指X3CS(O)2NR-基团，其中X是卤素并且R如这里所定义的。
术语“三卤代甲磺酰基”是指X3CS(O)2-，其中X是卤素。
术语“三卤代甲氧基”是指X3CO-基团，其中X是卤素。
这里单独地或联合地所用的术语“三取代甲硅烷基”，是指硅酮基(siliconegroup)在其三个自由价被这里所列的基团取代，所述基团如在取代的氨基的定义下所列的基团。实例包括三甲基甲硅烷基、叔-丁基二甲基甲硅烷基、三苯基甲硅烷基等。
不对称中心存在于本发明的化合物中。根据在手性碳原子周围的取代基构型，这些中心被指定为符号“R”或“S”。应当理解的是，本发明拥有所有的立体化学异构体形式，包括非对映异构体的、对映体的和差向异构体的形式或者它们的混合物。各个立体异构体的化合物可从商业上可获得的、含有手性中心的起始原料开始合成制备，或者借助于制备对映体产物的混合物，然后分离，例如转化成非对映异构体的混合物，然后分离或重结晶、色谱分离技术，用手性色谱柱直接分离对映体，或者现有技术中已知的任何其它方法。具有特定立体化学的起始化合物是商业上可获得的，或者用现有技术中技术可制备和拆分的。此外，本发明的化合物可以几何异构体而存在。本发明包括所有的顺式、反式、顺(syn)、反(anti)、entgegen(E)以及zusammen(Z)异构体，及其适当的混合物。此外，化合物也以互变异构体存在；本发明提供了所有的互变异构体。此外，本发明的化合物可以非溶剂化以及与药学上可接受的溶剂例如水、乙醇等的溶剂化形式存在。对于本发明的目的而言，一般认为溶剂化形式等同于非溶剂化形式。
术语“任选地取代”是指先前的基团可以是取代的或未取代。当取代时，“任选地取代”的基团的取代基可包括但不限于一个或多个独立地选自下列基团或它们指定的子集的取代基，单独地或组合地低级烷基、低级烯基、低级炔基、低级烷酰基、低级杂烷基、低级杂环烷基、低级卤代烷基、低级卤代烯基、低级卤代炔基、低级全卤代烷基、低级全卤代烷氧基、低级环烷基、苯基、芳基、芳氧基、低级烷氧基、低级卤代烷氧基、氧代、低级酰氧基、羰基、羧基、低级烷基羰基、低级羧酸酯、低级甲酰胺基、氰基、氢、卤素、羟基、氨基、低级烷氨基、芳氨基、酰胺基、硝基、硫醇、低级烷基硫基、芳硫基、低级烷基亚磺酰基、低级烷基磺酰基、芳基亚磺酰基、芳基磺酰基、芳硫基、磺酸酯、磺酸、三取代甲硅烷基、N3、NHCH3、N(CH3)2、SH、SCH3、C(O)CH3、CO2CH3、CO2H、C(O)NH2、吡啶基、噻吩基、呋喃基、低级氨基甲酸酯以及低级脲。两个取代基可连接在一起以形成稠合的5、6或7元碳环或者杂环，含有0至3个杂原子，例如形成亚甲基二氧或者亚乙基二氧。任选地取代的基团可以是未取代的(例如-CH2CH3)、全部取代的(例如-CF2CF3)、单取代的(例如-CH2CH2F)或者取代的程度介于全部取代的与单取代的之间任意值(例如-CH2CF3)。当所述取代基未限定为被取代时，则取代和未取代形式都包括。当取代基限定为“被取代”时，则具体是指被取代的形式。
除非另有说明，术语R或术语R’自己出现并且未指定数字时，是指任选地取代选自烷基、环烷基、杂烷基、芳基、杂芳基和杂环烷基的基团。应当将这种R和R’理解为可被任选地取代，如这里所定义的。无论R基团是否指定数字，每一个R基团包括R、R’和Rn，这里n＝(1，2，3，...n)，每一个取代基以及每一个术语，在选择基团时都应当被理解为彼此独立的。如果任何的变量、取代基或者术语(例如，芳基、杂环、R等)在化学式或通式结构中出现一次以上，则在每次出现中其定义都是独立于其它情况下的定义。
术语“键”是指两个原子的共价连接，或当被键连接的原子被认为是较大亚结构的一部分时为两个部分间的共价连接。除非另有说明，键可以是单键、双键或者三键。
术语“前药”是指在体内活性更高的化合物。本发明的化合物也可以前药而存在。这里所述化合物的前药是结构上被修饰的该化合物形式，它在生理条件下易于进行化学变化来提供该化合物。此外，前药可通过化学或生物化学的方法在先体外后体内(ex vivo)环境中转化为所述化合物。例如，当被放置于包含适当酶或化学试剂的经皮贴片储库时，前药被缓慢地转化为化合物。前药常常是有用的，因为在有些情况下它们比化合物或母体药物更易于给药。例如，通过口服给药它们是可以生物利用的，而母体药物却不能。前药也可比其母体药物提高在药物组合物中的溶解度。现有技术中已知各种前药衍生物，例如那些依赖水解断裂或者氧化活化的前药。前药的实例可以是但不限于作为随后被代谢水解为活性实体羧酸的酯(“前药”)给药的化合物。另外的实例包括化合物的肽衍生物。术语“治疗上可接受的前药”是指那些适合用于接触患者的组织而没有不当的毒性、刺激性以及过敏反应，具有相当合理的益处/风险比，而且对于预期应用有效的前药或者两性离子。
术语“联合治疗”是指给药两种或多种治疗剂以治疗这里所描述的治疗疾患或疾病。这种给药包括以基本上同时的方式共同给药这些治疗剂，例如用具有固定比例活性成分的单个胶囊，或者用每个活性成分的多重的、分开的胶囊。此外，这种给药也包括以依次的方式应用每个类型的治疗剂。在任何情况下，治疗方案在治疗这里所述疾患或异常方面需提供药物联合的有益效果。
术语“治疗上有效的”是用于限定联合治疗中活性成分的组合量。这种组合量会实现减少或消除高脂血疾患的目标。
如这里所用的，涉及患者的“治疗”包括预防。术语“患者”是指任何的哺乳动物，包括人。患者的实例包括人、牛、狗、猫、山羊、绵羊、猪和家兔。优选地，所述的患者是人。
这里所用的术语“治疗上可接受的盐”，表示本发明化合物的盐或者两性离子形式，它是水溶性的或油溶性的或水可分散或油可分散的；适于治疗疾病而没有不当的毒性、刺激性以及过敏反应；具有相当合理的益处/风险比；而且对于预期的应用是有效的。所述的盐可以在化合物的最终分离和纯化过程中制备，或者分别地用游离碱形式的适宜化合物与适当的酸反应。代表性的酸加成盐包括醋酸盐、己二酸盐、藻酸盐、L-抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐(besylate)、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、枸掾酸盐、二葡萄糖酸盐、甲酸盐、富马酸盐、龙胆酸盐、戊二酸盐、甘油磷酸盐、乙醇酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐(依西酸盐(isethionate))、乳酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、DL-扁桃酸盐、均三甲基苯磺酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐(pamoate)、果胶酸盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、膦酸盐、苦味酸盐、三甲基乙酸盐、丙酸盐、焦谷氨酸盐、琥珀酸盐、磺酸盐、酒石酸盐、L-酒石酸盐、三氯醋酸盐、三氟醋酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐(p-tosylate)以及十一酸盐。此外，本发明化合物中的碱性基团也可以是用以下物质季铵化的，甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物以及碘化物；硫酸二甲酯、二乙酯、二丁酯和二戊酯；癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物以及碘化物；和苄基以及苯乙基溴化物。可应用以形成治疗上可接受加成盐的酸的实例，包括无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸，以及有机酸如草酸、马来酸、琥珀酸和枸掾酸。
碱加成的盐可在所述化合物的最终分离和纯化的过程中制备，用羧基与适当的碱反应，适宜的碱例如金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或者碳酸氢盐，或者使用氨水或有机的伯、仲、或叔胺。治疗上可接受盐的阳离子包括锂、钠、钾、钙、镁和铝以及无毒性的季铵阳离子如铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺、三丁胺、吡啶、N，N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基吗啉、二环己胺、普鲁卡因、二苄基胺、N，N-二苄基苯乙胺、1-二苯羟甲胺(ephenamine)以及N，N’-二苄基乙二胺。其它的可用于形成碱加成盐的代表性有机碱包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌嗪。
本发明的化合物可以治疗上可接受的盐而存在。本发明包括以上所列的、盐形式的化合物，特别是酸加成盐。适宜的盐包括与有机的和无机的酸形成的那些。这种酸加成的盐通常是药学上可接受的。但是非药学上可接受盐的盐也可应用在所讨论化合物的制备和纯化中。
本发明的若干化合物，被编号于下面的实施例中，制备为各种的盐，而且本发明提供了这些盐。在现有技术中存在熟知的各种技术用于制备盐，而且，本发明不限于涵盖这些方法。应用了两套方案以最初筛选了大约24种酸在制备盐的适用性，描述如下。
在一种方案中，实验是在96孔、聚丙烯底的微孔板中进行的。将50μL等分试样的约40mg/mL的N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺在甲醇中的母液加入微孔板的孔中，离心浓缩约2分钟以除去过量甲醇，剩余约2mg的游离碱化合物。每个孔加入15μL甲醇，随后加入55.9μL的0.1M特定羧酸的甲醇溶液，使微孔板蒸发过夜。然后加入50μL一份的甲醇、95∶5/乙醇∶H2O、异丙醇和二氯甲烷。将微孔板密封并维持在约55℃约3小时，然后降至室温。随后使溶剂在通风橱中蒸发。最后回收样品并用现有技术中已知的标准技术进行检验。预计用N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺进行筛选也会产生相似的结果。
在另一个方案中，分别进行微量实验，而且，一般地都涉及制备含有等摩尔量的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺(来自125mg/mL的甲醇母液或者其油状残留物)与酸的溶于适宜溶剂(甲醇、乙腈、四氢呋喃、乙酸乙酯、甲叔丁醚(MTBE)、甲苯，及其混合物)中的溶液，随后加入第二种溶剂或者抗溶剂以促进沉淀、和/或蒸发(慢速、快速、闪速(flash))，任选地伴有超声。在慢速和快速蒸发模式中，将样品小瓶用刺有一个小洞或者大洞(分别地)的铝箔覆盖，使其在室温下慢速地蒸发；在闪速蒸发模式中，将小瓶用刺有一个大洞的铝箔覆盖，使其在室温下迅速地蒸发，然后旋转蒸发(retovapped)。在各种时间长度——从在沉淀和/或蒸发之后立即至三天回收固体，然后用现有技术中已知技术来检定。预计用N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺进行筛选也会产生相似的结果。
两种筛选相同的若干种酸产生了特别引起兴趣的样品作为适于本发明化合物的盐。因此，优选的盐包括本发明化合物的盐酸盐、氢溴酸盐、醋酸盐、己二酸盐、对甲基苯磺酸盐、乙醇酸盐、草酸盐、富马酸盐以及膦酸盐。尤其优选的盐包括本发明化合物的盐酸盐、氢溴酸盐、醋酸盐和己二酸盐。本发明提供了N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺盐酸盐、N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺氢溴酸盐、N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺醋酸盐、N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺己二酸盐、N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺盐酸盐、N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺对甲苯磺酸盐、N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺乙醇酸盐、苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-吡啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺盐酸盐、N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺草酸盐、N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺富马酸盐、以及N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺膦酸盐。
本申请中所引用的美国或外国的、专利或者申请、所有参考文献，都在此引入作为参考，如写入此处。
可应用下列的路线来实施本发明。
制备化合物的通用合成方法 应用下面路线I中提出的通用合成方法，可合成实施例2、6-12、15-22、30-36、46-63、79-88、101-106、127-128和145。
路线I
应用下面路线II中提出的通用合成方法，可合成实施例1、38、43-45、64-65、68、97-100、121和130-131。
路线II
应用下面路线III中提出的通用合成方法，可合成实施例3-5、37、39、90-93、124-125、132-134和137-142。
路线III
应用下面路线IV中提出的通用合成方法，可合成实施例23-29、94-96、120、122-123、126和129。
路线IV
应用下面路线V中提出的通用合成方法，可合成实施例135和136。
路线V
应用下面路线VI中提出的通用合成方法，可合成实施例41和42。
路线VI
应用下面路线VII中提出的通用合成方法，可合成实施例78和143-144。
路线VII
应用下面路线VIII中提出的通用合成方法，可合成实施例74和75。
路线VIII
应用下面路线IX中提出的通用合成方法，可合成实施例76。

应用下面路线X中提出的通用合成方法，可合成实施例77。

应用下面路线XI中提出的通用合成方法，可合成实施例40、67和73。
路线XI
应用下面路线XII中提出的通用合成方法，可合成实施例13-14和69-71。
路线XII
应用下面路线XIII中提出的通用合成方法，可合成实施例107-119。
路线XIII
应用下面路线XIV中提出的通用合成方法，可合成实施例89。
路线XIV
在上面的路线I至XIV中R基团只是为了便利，并且目的是表示通用合成路线上下文中在不同位置上的变异性，而不是为了对应于在式I至V中所定义的那些。同样地，在上面的路线中，带有R11和R12取代的苄基所表示的部份，应当被理解为任何本领域的技术人员认为在这种位置是适当的环状的或非环状的、含杂原子或不含的部份。这符合在以上路线中仅为便利的缘故。对于本发明提供的结构式的全面描述以及在各种位置上允许的基团，参见上文的发明概述和发明的详细描述。
用下面的实施例来进一步说明本发明。
实施例1
步骤1 制备化合物1b{2-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯。
将胡椒醛(5.00g，33.3mmol)和N-(2-氨基乙基氨基甲酸叔丁酯(5.00g，31.2mmol)的干燥二氧六环(70mL)和AcOH(10mL)溶液加热至80℃、2h，在依次加入无水THF(50mL)、MeOH(20mL)和三乙酸基硼氢化钠(15.8g，74.5mmol)之前，先蒸干溶剂。将混合物再搅拌30min，然后真空下除去溶剂。加入NaOH溶液(20％水溶液，w/w)以得到碱性溶液(pH 9)，用EtOAc(150mL)萃取该溶液。当用盐水洗时，在漏斗中形成沉淀。过滤，干燥并得到白色固体7.50g(82％){2-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯。
步骤2 制备化合物1c[2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-甲基-氨基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯 将37重量％水合甲醛(9mL)，冰的AcOH(14mL)以及NaBH3CN(5.00g，79.6mmol)加至1b(10.0g，34.0mmol)的MeOH(80mL)混合物中。室温搅拌20min，将溶剂蒸发。加入NaOH溶液(20％水溶液，w/w)以得到碱性溶液(pH 9)。用乙酸乙酯(2×150mL)萃取该溶液，Na2SO4干燥，蒸去溶剂得到无色油状的8.00g(76％)[2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-甲基-氨基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯。[M+H]+ 309.07。
步骤3 制备化合物1dN-1-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-1-甲基-乙烷-1，2-二胺 将1c(8.00g，25.9mmol)的TFA/DCM(50％，40mL)溶液室温搅拌20min。蒸去溶剂并加入NaOH溶液(1M，30mL)以得到碱性的混合物(pH 9)。用乙酸乙酯(2×100mL)萃取该溶液，Na2SO4干燥，过滤并加压浓缩，得到澄清油状的5.05g(94％)N-1-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-1-甲基-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+ 209.09. 步骤4 制备化合物1f2-氯代-6-甲基-嘧啶-4-羧酸 室温下将酯1e(3.7g，20mmol)加入NaOH(960mg，24mmol)水溶液(70mL)以及THF(5mL)的溶液。搅拌得到的溶液2h并浓缩，加入盐酸(2.5mL)。用乙酸乙酯(2×150mL)萃取该溶液，Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到3.4g(99％)白色固体的2-氯代-6-甲基-嘧啶-4-羧酸。
步骤5 制备化合物1g2-氯代-6-甲基嘧啶-4-羧酸-O，N-二甲酰胺 三乙胺(42mL，0.30mol)滴加(15分钟)至2-氯代-6-甲基嘧啶-4-羧酸(33g，0.19mol)、3-羟基苯并三唑水合物(28g，0.21mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(40g，0.21mol)、O，N-二甲基胺盐酸盐(20g，0.21mol)以及N，N-二甲基甲酰胺(400mL)的溶液中，在搅拌并有氮气保护的情况下，充分地冷却(冰-水浴)以维持内部温度低于26℃。在添加完成后，混合物室温搅拌20分钟。然后在乙酸乙酯(400mL)与水(500mL)之间进行分配。用乙酸乙酯(3×400mL)萃取水相。合并的有机萃取物用水洗(3×400mL)，经硫酸镁干燥，并在真空下浓缩。用硅胶色谱法(己烷至1∶2己烷/EtOAc)纯化残留物而获得23g(56％)黄色油状的2-氯代-6-甲基嘧啶-4-羧酸-O，N-二甲酰胺。[M+H]+216.03，217.98. 步骤6 制备化合物1h2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-羧酸甲氧基-甲基-酰胺 在氮气保护、室温的条件下，迅速地将2-氯代-6-甲基嘧啶-4-羧酸-O，N-二甲酰胺(1.70g，7.88mmol)全部地加入咪唑(1.70g，18.9mmol)与DMSO(15mL)的溶液。搅拌反应混合物1h，然后加入水(40mL)。用乙酸乙酯萃取(3×150mL)得到的溶液，盐水洗并经Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到1.40g(72％)白色固体的2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-羧酸甲氧基-甲基-酰胺[M+H]+248.04；1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.65(s，1H)，7.92(s，1H)，7.26(s，1H)，7.18(s，1H)，3.80(s，3H)，3.40(s，3H)，2.63(s，3H). 步骤7 制备化合物1i1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酮 在0℃将MeMgBr(0.8mL，3M在Et2O中，2.40mmol)加入2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(162mg，0.800mmol)的THF(10mL)溶液。将溶液升温至室温并搅拌20min。加水，并用乙酸乙酯萃取，盐水洗，并经Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到143mg(88％)黄色固体的1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酮。[M+H]+ 203.17. 步骤8 制备化合物1N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N’-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-N-甲基-丙烷-1，3-二胺 在氮气保护下将含有催化量TsOH(110mg)的1d(1.85g，8.90mmol)与1i(1.09g，5.40mmol)的干燥二氧六环(20mL)溶液于65-70℃加热4h。然后将反应降至室温并加入干燥的THF(25mL)和NaBH3CN(2.50g，25.7mmol)。加水之前将反应混合物再搅拌1h。将溶液用乙酸乙酯萃取(2×200mL)，盐水洗，并经Na2SO4干燥。蒸发溶剂并且色谱柱纯化(EtOAc至1∶3EtOAc∶MeOH)得到580mg(27％)澄清油状的N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N’-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+395.06；1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.72(s，IH)，8.04(s，IH)，7.29(s，IH)，7.12(s，IH)，6.78(s，IH)，6.77(m，2H).5.94(s，2H)，3.93(q，IH)，3.57(m，2H)，3.38(m，2H)，2.73(m，2H)，2.60(s，3H)，2.27(s，3H)，1.47(d，3H)；13C-NMR(100MHz，CD3OD)δ173.5，170.8，154.2，147.9，147.3，136.0，130.5，129.0，122.7，116.9，116.3，109.3，107.6，101.1，61.5，57.6，55.0，43.6，40.9，23.0，20.3. 实施例2
步骤1 制备化合物2b苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-溴代-丙基)-胺 在氮气环境下用CHCl3(1.50L)混悬3-溴代丙基-1-胺氢溴酸盐(65.6g，300mmol)。将三乙胺(44.0mL，315mmol)迅速、全部地加入搅拌均匀的悬浮液中。混合物室温搅拌30分钟。依次加入胡椒醛(45.0g，300mmol)和MgSO4(75g)，并且将悬浮液室温搅拌20h。过滤该混悬物并浓缩至白色悬浮液。用Et2O(1L)滴定(titurated)悬浮液，过滤除去TEA-HBr盐，并浓缩滤液可得澄清油状的亚胺(80.7g，数量(quant))。将亚胺(80.7g，300mmol)稀释于干燥乙醇(600mL)和乙酸(50mL)，降至0℃时得到澄清的黄色溶液。将NaHB(OAc)3(191g，900mmol)按份地加入排气的反应混合物中(10g份一个多小时)。撤去冰浴，使溶液1h后升温至室温。将混合物浓缩至白色浆体、用冰-水(1L)稀释，得到澄清溶液，冷却至0℃并用K2CO3溶液(每1L中150g)骤停。然后将盐水(1L)加入部分白色的悬浮液，产生大量的产物沉淀。过滤产物，用水(1L)和Et2O(1L)洗并真空下干燥过夜，得到67.8g(84％)白色固体的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-溴代-丙基)-胺。[M+H]+ 271.90，273.94；1H-NMR(400MHz，DMSO)δ7.25(s，1H)，7.04(d，IH)，6.96(d，IH)，6.05(s，2H)，4.04(s，2H)，3.61(t，2H)，2.94(t，2H)，2.24(t，2H)；13C-NMR(100MHz，DMSO)δ148.1，147.7，126.1，124.6，110.8，108.7，101.8，50.1，45.2，31.9，29.1 步骤2 制备化合物2c苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-溴代-丙基)-氨基甲酸叔丁酯 将三乙胺(15mL)加至在THF(80mL)和MeOH(80mL)中的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-溴代-丙基)-胺(10.0g，36.8mmol)与二碳酸二叔丁酯(9.00g，41.2mmol)。溶液室温搅拌30min。蒸去溶剂然后加入乙酸乙酯(20mL)和二乙基醚(20mL)。将形成的白色固体滤除。干燥滤液及色谱层析(1∶10EtOAc∶己烷)从而得到11.5g(84％)澄清油状的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-溴代-丙基)-氨基甲酸叔丁酯。
步骤3 制备化合物2d苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-甲基氨基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯 在氮气环境、室温的条件下，将苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-溴代-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(23.0g，61.8mmol)稀释于甲胺(2.00M在THF中，300mL，600mmol)中，并室温搅拌16h。蒸去溶剂并加入饱和的碳酸钠溶液。用乙酸乙酯(2×150mL)萃取该溶液，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，从而得到18.2g(91％)澄清油状的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-甲基氨基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯。[M+H]+323.09. 步骤4 制备化合物2e苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(3-氯代-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯 室温下搅拌苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-甲基氨基-丙基)-氨基甲酸叔丁(10g，46mmol)、3，5-二氯代-1，2，4-噻二唑(7.1g，46mmol)、DMSO(20mL)以及TEA(20mL)的溶液20min。加入水(150mL)并用乙酸乙酯(2×150mL)萃取该溶液，盐水洗并经Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到14g(69％)澄清胶质状的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(3-氯代-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯。产物直接地用于下一步。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ6.77(m，3H)，5.96(s，2H)，4.35(s，2H)，3.4-3.0(m，6H)，1.84(br s，3H)，1.50(s，9H). 步骤5 制备化合物2f苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯 将氢化钠(60％分散于矿物油中，4.00g，100mmol)加入咪唑(10.0g，111mmol)的DMSO(50mL)溶液。将得到的溶液直接地加至苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(3-氯代-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯(15.8g，33.3mmol)、将溶液加热至85℃，12h。加入水并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取该溶液，盐水洗并经Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到残留物，用色谱柱纯化(1∶1己烷∶EtOAc)从而获得10.6g(67％)无色油状的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯。[M+H]+ 473.06；1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.32(s，IH)，7.68(s，IH)，7.12(s，IH)，6.62-6.80(m，3H)，5.96(s，2H)，4.38(s，2H)，3.0-3.6(m，6H)，1.88(br s，3H)，1.52(s，9H). 步骤6 制备化合物2N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺 室温下搅拌苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯(10.6g，22.4mmol)的TFA/DCM(50％，70mL)溶液30min。蒸去溶剂并加入饱和碳酸钾溶液(50mL)以使其为碱性(pH 9)。用乙酸乙酯(2×200mL)萃取该溶液，盐水洗并经Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到8.30g(99％)无色油状的N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+373.26；1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.28(s，IH)，7.63(s，IH)，7.07(s，IH)，6.79(s，IH)，6.72(s，2H)，5.92(s，2H)，3.67(s，3H)，3.60(br s，IH)，3.10(br s，2H)，2.66(t，2H)，2.0(br s，2H)，1.87(q，2H)；13C-NMR(IOO MHz，CD3OD)δ184.3，156.7，147.7，146.6，136.4，133.8，129.9，121.2，117.1，108.6，108.1，100.9，53.7，45.7，27.1. 实施例3
步骤1 制备化合物3a2-氯羰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯 在氮气环境下将草酰氯(1.21mL，14.0mmol)滴加(15分钟)至N-苄氧羰酰-D，L-脯氨酸(2.50g，10.0mmol)、二甲基甲酰胺(1滴，催化)和二氯甲烷(无水，25mL)的0℃溶液。将混合物从冰浴上移开，并室温搅拌1h。将反应混合物浓缩从而得到2.63g(98％)橙色油状的2-氯羰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯。产物可直接地用于随后的步骤。
步骤2 制备化合物3b2-(2-叔丁氧羰基-3-氧代-丁酰)-吡咯烷-1-羧酸苄酯 将乙酰乙酸叔丁酯(7.90g，50.0mmol)的无水THF(50mL)溶液冷却至4℃(冰水浴)，然后以温度不超过10℃的速度滴加甲基氯化镁(16.3mL、3.00M的THF溶液，50.0mmol)。滴完后，移开冷却浴。当温度达到15℃时，将2-氯羰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯(6.60g，25.0mmol)滴加1h以上，然后升温至室温并搅拌12h。用饱和NH4CI水溶液(30mL)骤停反应。将有机层从固态残留物中分离，并真空下浓缩从而得到9.74g(数量)黄色油状的2-(2-叔丁氧羰基-3-氧代-丁酰)-吡咯烷-1-羧酸苄酯。产物直接用于随后的步骤无需进一步纯化。
步骤3 制备化合物3c2-(3-氧代-丁酰)-吡咯烷-1-羧酸苄酯 将2-(2-叔丁氧羰基-3-氧代-丁酰)-吡咯烷-1-羧酸苄酯(9.74g，25.0mmol)溶于甲苯(40mL)，并用1N HCl(2×50mL)洗。向得到的溶液中加入对甲苯磺酸一水合物(1.00g，5.00mmol)，而且在氮气下将溶液加热至80℃，4小时。将黑色的混合物冷却，并用水洗(3×100mL)。将有机层浓缩从而得到6.87g(95％)琥珀色油状的2-(3-氧代-丁酰)-吡咯烷-1-羧酸苄酯。产物直接用于随后的步骤无需进一步纯化。[M+H]+290.03. 步骤4 制备化合物3d2-(2-氨基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯 在氮气下室温将金属钠(550mg，25.0mmol)按份地加入搅拌的无水乙醇(30mL)溶液中。当全部的钠溶解时，向该溶液加入盐酸胍(2.28g，25.0mmol)的乙醇(20mL)溶液。将得到的混合物搅拌20分钟。通过过滤除去沉淀的氯化钠，并向澄清的滤液加入2-(3-氧代-丁酰)-吡咯烷-1-羧酸苄酯(6.87g，23.7mmol)。然后将玻璃瓶用Dean-Stark管固定，在氮气下溶液被加热至回流12h，可除去20mL馏出物。将混合物冷却至室温，然后逐渐地冷却至-5℃。通过过滤收集得到的固体，空气吹干从而得到3.37g(46％)乳色结晶的2-(2-氨基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯。[M+H]+ 312.88. 步骤5 制备化合物3e2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯 室温下，将2-(2-氨基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯(2.65g，8.48mmol)稀释于二氧六环(31.2mL)和水(4.24mL)中。用H3PO4(470μL)将pH值调至2，得到黄色混悬液。加入乙二醛(40重量％的水中，1.23g，8.48mmol)、多聚甲醛(254mg，8.48mmol)和水(8.48mL)，并将混悬液加热至80℃。在80℃向澄清黄色溶液逐滴加入饱和NH4Cl(453mg，2.4mL水中8.48mmol)，然后在100℃加热2h。将澄清的黑红色溶液冷却至室温并用4MNaOH调至pH 12，然后用乙酸乙酯萃取。将合并的有机相用盐水洗，经MgSO4干燥，过滤和浓缩。将粗的残留物通过SiO2填料并用5∶1乙酸乙酯/己烷洗脱，从而得到1.98g(64％)白色固体的2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯。[M+H]+363.78. 步骤6 制备化合物3f2-咪唑-1-基-4-甲基-6-吡咯烷-2-基-嘧啶 室温下将10％Pd/C(12mg)加入2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯(112mg，0.308mmol)和乙醇(3mL)中。将反应用N2吹真空，然后在H2气球下搅拌4h。将反应混合物过滤通过硅藻土并浓缩。柱色谱法(10g，DCM至20％MeOH/DCM)得到63mg(89％)的2-咪唑-1-基-4-甲基-6-吡咯烷-2-基-嘧啶。[M+H]+230.16；1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ′8.74(s，1H)，8.05(s，IH)，7.31(s，1H)，7.14(s，1H)，4.95(s，2H)，4.25(t，1H)，3.25(m，1H)，3.05(m，IH)，2.59(s，3H)，2.35(m，1H)，1.90(m，2H)；13C-NMR(IOO MHz，CD3OD)δ173.4，170.4，153.9，136.0，128.9，116.8，116.0，62.1，46.5，32.7，25.3，22.7. 步骤7 制备化合物3g2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-甲基-氨基)-乙醇 在氮气、-78℃、搅拌的条件下，将2-(甲氨基)乙醇(22.0g，290mmol)迅速地全部加入3，4-亚甲基二氧苄基氯(25.0g，147mmol)的DCM(45mL)溶液中，在-78℃搅拌15分钟后升温至室温过夜(16h)。用1.2M NaOH(100mL)骤停反应，水洗两次，MgSO4干燥并过滤。减压浓缩得到25.3g(83％)澄清油状的2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-甲基-氨基)-乙醇，其适于用于下一步。
步骤8 制备化合物3h苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(2-氯代-乙基)-甲基-胺盐酸盐 在氮气下，将亚硫酰氯(60mL)用30多分钟滴加至2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-甲基-氨基)-乙醇(22.2g，110mmol)的DCM(250mL)0℃溶液中。移开冰浴，并将溶液室温搅拌过夜(16h)。将白色浆状物减压浓缩，用盐水(150mL)和乙酸乙酯(200mL)稀释，并通过真空过滤来收集沉淀物。用乙酸乙酯冲洗固体并真空下干燥过夜，从而得到26.5g(91％)白色粉末状的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(2-氯代-乙基)-甲基-胺盐酸盐。
步骤9 制备化合物3苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺 在氮气保护、室温、搅拌的条件下，将2-咪唑-1-基-4-甲基-6-吡咯烷-2-基-嘧啶(2.1g，9.2mmol)的DMF(15mL)溶液全部迅速地加至苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(2-氯代-乙基)-甲基-胺盐酸盐(2.2g，8.1mmol)、DMF(10mL)与二异丙基乙基胺(2.5mL)的混合物中。然后加入催化量的碘化钾(340mg，2.0mmol)。将混合物加热至80℃，3h。然后将溶液冷却至室温，骤停至200mL的1N磷酸氢二钾溶液(pH 9)中，用乙酸乙酯萃取。用MgSO4干燥合并的有机相，过滤并浓缩至红色残留物。通过硅胶柱色谱法(DCM至4∶1DCM/MeOH)纯化得到2.0g(52％)红色油状的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺。[M+H]+421.30；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(s，1H)，7.89(s，1H)，7.30(s，1H)，7.10(s，1H)，6.78(s，1H)，6.67(m，2H)，5.88(s，2H)，3.52(t，1H，J＝6.8Hz)，3.6(m，3H)，2.77(m，1H)，2.2-2.6(m，8H)，2.35(s，3H)，1.62-1.95(m，3H).13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ175.7，169.6，154.0，147.6，146.5，136.2，132.8，130.1，121.9，116.6，115.0，109.2，107.8，100.8，69.8，62.3，56.0，54.3，53.1，42.5，33.2，24.2，23.4. 实施例4
制备化合物42-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺. 2-咪唑-1-基-4-甲基-6-吡咯烷-2-基-嘧啶(21.8mg，0.095mmol)、3，4-亚甲基二氧苯乙基异氰酸酯(29mg，0.151mmol)和三乙胺(0.4mL)的无水THF(1.5mL)溶液反应10min。加水并用乙酸乙酯萃取该溶液(2×3mL)，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂和TLC板纯化得到36mg(90％)白色固体的2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺。[M+H]+421.15；1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.65(s，IH)，7.99(s，IH)，7.14(s，IH)，7.11(s，IH)，6.65(m，3H)，5.88(s，2H)，4.98(m，IH)，3.62(m，IH)，3.55(m，IH)，3.34(m，2H)，2.69(m，2H)，2.56(s，3H)，2.41(m，IH)，2.03(m，3H)；13C-NMR(100MHz，CD3OD)δ173.9，170.3，166.5，157.7，147.6，145.9，133.2，128.9，121.3，115.0，108.6，107.6，106.9，61.4，46.4，41.8，35.7，32.4，23.3，22.8. 实施例5
步骤1 制备化合物3f根据实施例3中所述的制备化合物3f化合物的方法来制备2-咪唑-1-基-4-甲基-6-吡咯烷-2-基-嘧啶。
步骤2 制备化合物52-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-羧酸(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-酰胺. 将4b(21.0mg，0.092mmol)、N-Boc-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)氨基]乙酸(39mg，0.126mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(28mg，0.146mmol)和1-羟基苯并三唑(20mg，0.148mmol)的干燥DMF(1.5mL)溶液搅拌30min。加水并用乙酸乙酯萃取该溶液(2×10mL)，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂和TLC板纯化得到目的产物5a(48mg)。将5a的TFA(0.5mL)和DCM(0.5mL)溶液搅拌20min。蒸发溶剂并加入饱和的碳酸钠水溶液。然后用乙酸乙酯萃取该溶液(2×5mL)，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到目的产物5(25mg)。[M+H]+421.07；1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.67(s，IH)，8.00(s，IH)，7.23(s，IH)，6.86(s，IH)，6.78(m，2H)，6.53(s，IH)，5.93(s，IH)，3.83(m，IH)，3.70-3.50(m，6H)，3.34(s，IH)，2.58(s，3H)，2.50-1.90(m，4H). 实施例6
步骤1 制备化合物6a(3-甲基氨基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯 (3-溴代-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(11.2g，47.0mmol)与THF(100mL，200mmol)中的2.0M甲胺合并在一起，并室温搅拌4h。在这个时间之后，在溶液中形成沉淀。将溶液过滤并减压浓缩从而得到7.58g(86％)澄清油状的(3-甲基氨基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯。[M+H]+ 188.94. 步骤2 制备化合物6b{3-[(3-氯代-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯 (3-甲基氨基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(7.00g，36.8mmol)和3，5-二氯代-[1，2，4]噻二唑(4.75g，30.7mmol)溶于DMSO(150mL)中。最后，加入三乙胺(3mL)，室温搅拌混合物24h。在这个时间之后，将盐水(100mL)倾入反应容器并将该混合物转移至分液漏斗。用DCM(3×300mL)萃取得到的层。然后经无水Na2SO4干燥DCM层。应用闪式硅胶色谱层析法(DCM至9∶1DCM/MeOH)纯化粗产物，从而得到6.5g(69％)澄清油状的{3-[(3-氯代-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯。[M+H]+307.40. 步骤3 制备化合物6c{3-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯 将{3-[(3-氯代-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯(6.50g，21.2mmol)与咪唑(7.20g，105mmol)合并在一起并溶于咪唑DMSO(100mL)。随后，加入氢化钠(833mg、60％分散于矿物油中，57.8mmol)，将反应混合物60℃搅拌过夜。在这个时间之后，将盐水加至反应混合物并将其转移至分液漏斗。用大量的DCM萃取并经无水Na2SO4干燥有机层。应用闪式硅胶色谱层析法(己烷至1∶4己烷/乙酸乙酯)纯化粗产物，从而得到6.78g(94％)澄清油状的{3-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯。[M+H]+339.10. 步骤4 制备化合物6N-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-1-甲基-丙烷-1，3-二胺 将{3-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯(450mg，1.33mmol)溶于DCM(2mL)中，随后加入TFA(2mL)。混合物室温搅拌2小时。在这个时间之后，在N2气下干燥混合物。将残留物溶于DCM并用1M NaOH(2×25mL)洗涤。将有机层与水相层分离、经无水Na2SO4干燥并真空下浓缩。应用闪式硅胶色谱层析法(DCM至9∶1DCM/MeOH)纯化该残留物，从而得到303mg(96％)白色固体的N-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-1-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+239.08. 实施例7
制备化合物7N’-(4-氯代-苄基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺. 将N-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-1-甲基-丙烷-1，3-二胺(150mg，0.64mmol)和4-氯代-苯甲醛(90mg，0.64mmol)溶于无水乙醇(2mL)和冰醋酸(150μL)中。将反应混合物于60℃搅拌过夜。在该时间之后，真空下浓缩反应混合物并加入乙醇(2mL)。将溶液冷却至0℃并加入三乙酰氧基硼氢化钠(270mg，1.3mmol)。将反应物室温搅拌过夜。在这个时间之后，浓缩该溶液并将残留物溶于DCM并用饱和NaHCO3(2×25mL)洗涤。将有机层经无水Na2SO4干燥并真空下浓缩。应用闪式硅胶色谱层析法(DCM至1∶19MeOH/DCM)纯化粗品，从而得到37mg(16％)澄清玻璃状油的7。[M+H]+363.00；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(d，1H)，7.64(s，1H)，7.25(q，4H)，7.09(d，1H)3.75(s，2H)，3.62(t，2H)，3.12(s，3H)，2.68(t，2H)，1.86(q，2H)，1.78(s，1H). 实施例8
制备化合物8根据制备实施例7中描述的方法应用4-甲氧基苯甲醛制备N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-(4-甲氧基-苄基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+360.40；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，7.67(s，1H)，7.25(d，2H)，7.13(s，1H)6.86(d，2H)，3.82(s，3H)，3.79(s，2H)，3.52(d，2H)，3.12(s，1H)，3.12-2.73(m，2H)，2.07(s，3H)，2.07-1.96(m，2H). 实施例9
制备化合物9根据制备实施例7中描述的方法应用3，4-二氟代-苯甲醛制备N’-(3，4-二氟代-苄基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+365.01；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.31(s，1H)，7.65(d，1H)，7.18-7.01(m，4H)，3.74(s，2H)3.70-3.49(m，2H)，3.14(s，3H)，2.70-2.67(t，2H)，1.93-1.87(m，2H). 实施例10
制备化合物10根据制备实施例7中描述的方法应用2，6-二氯代-苯甲醛制备N’-(2，6-二氯代-苄基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+398.90；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.31(s，1H)，7.93(s，1H)，7.44(s，1H)，7.36-7.28(m，3H)4.15(s，2H)，3.79(s，1H)，3.22-3.18(t，2H)，3.12(s，2H)，2.68(s，3H)，2.30-2.27(m，2H). 实施例11
制备化合物11根据制备实施例7中描述的方法应用4-三氟甲基-苯甲醛制备N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-N’-(4-三氟甲基-苄基)-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+396.70；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.49(s，1H)，7.93(s，1H)，7.60(s，4H)，7.39(s，1H)4.23(s，2H)，3.80(br s，1H)，3.51(s，2H)，3.12-3.09(m，2H)，2.68(s，3H)，2.20-2.14(m，2H). 实施例12
制备化合物12根据制备实施例7中描述的方法应用苯甲醛制备N’-苄基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+ 329.20；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.32(s，1H)，7.67(s，1H)，7.35-7.28(m，5H)，7.12-7.11(d，1H)，3.80(s，2H)，3.52(m，2H)，3.15(s，3H)，2.74-2.71(t，2H)，1.93-1.90(m，2H)，1.66(s，1H). 实施例13
步骤1 制备化合物13bC-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-甲胺 室温下将二异丁基氢化铝(15mL，1M在甲苯中，15mmol)加入13a(1.0g，5.4mmol)的二氯甲烷(40mL)中。将溶液搅拌1h并加入盐水。用乙酸乙酯萃取该溶液(2×200mL)，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂以及柱色谱层析法纯化(10∶1EtOAc/MeOH至MeOH)得到0.12g(11％)油状的13b。[M+H]+ 190.10. 步骤2 制备化合物131-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-3-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-脲 室温下使13b(46mg，0.24mmol)、3，4-亚甲基二氧苯乙基异氰酸酯(46mg，0.24mmol)以及三乙胺(0.5mL)的干燥THF(1.5mL)溶液反应10min。加水并用乙酸乙酯萃取该溶液(2×3mL)，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂以及预制TLC纯化而得到42mg(46％)白色固体的13。[M+H]+381.13；1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.70(s，1H)，8.03(s，1H)，7.19(s，1H)，7.15(s，1H)，6.73(m，3H)，5.91(s，2H)，4.43(s，2H)，3.38(t，2H)，2.74(t，2H)，2.58(s，3H). 实施例14
步骤1 制备化合物14a苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{[(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-氨甲酰基]-甲基}-氨基甲酸叔丁酯 将13b(55mg，0.29mmol)、N-Boc-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)氨基]乙酸(84mg，0.27mmol)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(80mg，0.42mmol)以及1-羟基苯并三唑(40mg，0.30mmol)的干燥DMF(1.5mL)溶液搅拌20min。加水并用乙酸乙酯萃取该溶液(2×10mL)，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂以及预制TLC纯化而得到70mg(54％)的14a。[M+H]+481.07. 步骤2 制备化合物141-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-3-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-脲 室温下搅拌14a(70mg，0.15mmol)的TFA/DCM(1mL，50％)溶液20min。蒸发溶剂并加入饱和碳酸钠水溶液。用乙酸乙酯萃取该溶液(2×5mL)，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂而得到56mg(98％)的14。[M+H]+381.04；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.61(s，1H)，8.20(br s，1H)，7.87(s，1H)，7.13(s，1H)，6.98(s，1H)，6.75(s，3H)，5.93(s，2H)，4.55(d，2H)，3.75(s，2H)，3.41(s，2H)，2.55(s，3H). 实施例15
制备化合物15N′-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺 将N-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-1-甲基-丙烷-1，3-二胺(150mg，0.63mmol)溶于DCE(4mL)中，然后加入胡椒基酰氯(140mg，0.76mmol)。最后，加入DIEA(130μL，0.76mmol)并室温下搅拌反应过夜。在这段时间之后，在N2气下干燥反应物。将残留物溶于DCM中并用大量的饱和NaHCO3洗涤。将有机层从水相中分离出来并经Na2SO4干燥。真空下浓缩粗品并用制备HPLC纯化，从而得到102.1mg(42％)的15。[M+H]+387.03；1H NMR(400MHz，CDC13)δ13.0(s，1H)，9.25(s，1H)，7.82(d，1H)，7.40(d，1H)7.25(d，1H)，7.20(s，1H)，6.78(d，1H)，6.01(s，2H)，3.48(s，2H)，3.15(s，2H)，3.12(bs，2H)，2.65(s，3H)，2.05(m，2H). 实施例16
制备化合物16根据制备实施例7中描述的方法应用2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-甲醛制备N’-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+ 386.86；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，7.64(s，1H)，7.27(s，1H)，7.08(s，1H)，6.79(d，1H)，6.75(d，1H)，4.24(s，4H)，3.67(s，3H)，2.67(t，2H)，1.87(t，4H). 实施例17
制备化合物17根据制备实施例7中描述的方法应用2，4-二甲氧基苯甲醛制备N’-(2，4-二甲氧苄基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+ 389.01；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，7.64(s，1H)，7.08(t，2H)，6.43(d，1H)，6.40(d，1H)，3.81(s，6H)，3.74(s，2H)，3.12(bs，3H)，2.68(t，2H)，2.45(bs，2H)，1.92(t，2H). 实施例18
制备化合物18根据制备实施例7中描述的方法应用1H-吲哚-5-甲醛制备N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-(1H-吲哚-5-基甲基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+368.04；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，7.63(s，1H)，7.59(s，1H)，7.38(d，1H)，7.22(d，1H)，7.18(d，1H)，7.08(s，1H)，6.52(d，1H)，3.94(s，2H)，3.18(bs，3H)，2.78(t，2H)，1.98(t，2H). 实施例19
制备化合物19根据制备实施例7中描述的方法应用1-甲基-1H-吲哚-2-甲醛制备N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-N’-(1-甲基-1H-吲哚-2-基甲基)-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+382.07；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.34(s，1H)，7.65(s，1H)，7.60(d，1H)，7.33(d，1H)，7.24(t，1H)，7.13(t，1H)，6.41(s，1H)，3.98(s，2H)，3.80(s，2H)，3.24(bs，3H)，2.78(t，2H)，1.92(t，2H). 实施例20
制备化合物20根据制备实施例7中描述的方法应用噻吩-2-甲醛制备N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-N’-噻吩-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+335.11；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.32(s，1H)，7.67(s，1H)，7.22(dd，1H)，7.11(t，1H)，6.97(dd，1H)，6.92(s，1H)，4.01(s，2H)，3.62(bs，2H)，3.08(bs，3H)，2.78(t，2H)，1.90(t，2H). 实施例21
制备化合物21根据制备实施例7中描述的方法应用吡啶-4-甲醛制备N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-N’-吡啶-4-基甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+330.05；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60-8.52(m，2H)，8.32(s，1H)，7.66(d，1H)，7.36-7.25(m，2H)，7.08(d，1H)，4.80(s，3H)，3.82(m，2H)，3.20(s，1H)，2.65(t，2H)，1.95(m，2H)，1.05(m，2H). 实施例22
制备化合物22根据制备实施例7中描述的方法应用3，4-二甲氧基-苯甲醛制备N’-(3，4-二甲氧基-苄基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+389.02；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.33(s，1H)，7.66(d，1H)，7.30(s，1H)，7.11(d，1H)，6.91(d，1H)16.83(d，1H)，3.90(s，3H)，3.88(s，3H)，3.76(s，2H)，3.15(bs，3H)，2.73(t，2H)，1.94(t，2H). 实施例23
步骤1 制备化合物23a5-氯代-[1，2，4]噻二唑-3-基胺 将三氯甲磺酰氯(20.0g，107mmol)和盐酸胍加入-10℃的DCM(200mL)溶液。然后，将在水(43mL)中的NaOH(43g，1.08mmol)溶液逐滴加入反应，同时维持温度在-10℃至-20℃之间。随着NaOH溶液的加入，橙色沉淀形成。将反应于-10℃搅拌3小时。当搅拌过夜时，使反应为室温。过滤混合物通过硅藻土，并且将得到的滤液转移至分液漏斗。有机层从水层分离开来。再用DCM(100mL)萃取水层。合并有机层，经Na2SO4干燥并浓缩。通过闪式色谱法纯化(DCM至9∶1DCM/MeOH)粗品从而得到2.15g(4％)的5-氯代-[1，2，4]噻二唑-3-基胺。
步骤2 制备化合物23b5-氯代-3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑. 将5-氯代-[1，2，4]噻二唑-3-基胺(1.00g，7.40mmol)和乙二醛40％重量(535g，92.0mmol)溶于乙醇(100mL)中。将溶液于80℃搅拌4小时。将氯化铵(1.97g，37.0mmol)、甲醛(2.97g，37.0mmol)以及磷酸(2.97g，30.0mmol)加入该溶液并搅拌过夜。真空下浓缩反应并且重新溶于水(50mL)中。用乙酸乙酯(2×50mL)萃取该溶液。用1M NaOH中和水层，乙酸乙酯萃取(2×50mL)，经MgSO4干燥并且在真空下浓缩，从而得到200mg(20％)的5-氯代-3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.84(s，1H)，7.75(d，1H)，7.22(d，1H). 步骤3 制备化合物23c(S)-[1-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基氨甲酰基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯. Boc-Ala-OH(222mg，1.20mmol)溶于DCE(4mL)中，随后加入CDI(209mg，1.20mmol)。室温搅拌混合物30min。加入盐酸3，4-亚甲基二氧苯乙胺(240mg，1.20mmol)和TEA(2.4mmol)，并且氮气保护下，室温搅拌反应物，16小时。然后，减压浓缩反应混合物并将残留物溶于DCM，接着转移至分液漏斗，用饱和NaHCO3(aq)洗。用Na2SO4干燥有机层并浓缩至干。用闪式色谱法纯化(DCM至9∶1DCM/MeOH)粗品而获得350mg(88％)的(S)-[1-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基氨甲酰基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯。[M+H]+337.05. 步骤4 制备化合物23d(S)-2-氨基-N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-丙酰胺. 将[1-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基氨甲酰基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(350mg，1.04mmol)溶于TFA∶DCM(1∶1，4mL)中并且室温搅拌2h。此后，在氮气保护下浓缩该溶液并溶于DCM。用1M NaOH(aq)洗数次。用干燥有机层，并在N2下浓缩。用闪式色谱法纯化(DCM至9∶1DCM/MeOH)粗品而获得189mg(77％产量)的(S)-2-氨基-N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-丙酰胺。[M+H]+237.10. 步骤5 制备化合物23(S)-N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基氨基)-丙酰胺. 将2-氨基-N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-丙酰胺(190mg，0.80mmol)溶于DMSO(2mL)中，随后加入实施例23b(74mg，0.40mmol)和TEA(0.8mmol)。室温下搅拌反应混合物16小时。此后，停止反应并转移至分液漏斗。加入盐水并且用乙酸乙酯萃取产物。将乙酸乙酯用Na2SO4干燥并浓缩而得到粗品。然后用闪式色谱法纯化(DCM至9∶1DCM/MeOH)这种物质从而得到77mg(50％)产物。[M+H]+ 386.94；1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.36(s，1H)，7.77(s，1H)，7.11(s，1H)，6.68(s，1H)，6.61(d，2H)，5.86(dd，2H)，3.47(t，2H)，2.75(t，2H)，1.46(d，3H). 实施例24
制备化合物24根据制备实施例23中描述的方法应用Boc-Val-OH制备 (S)-N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基氨基)-3-甲基-丁酰胺。[M+H]+ 414.98.1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.52(s，1H)，7.72(s，1H)，7.00(s，1H)，6.62(d，1H)，6.58(d，1H)，5.98(s，1H)，5.91(dd，2H)，3.51(t，2H)，2.79(t，2H)，1.03(d，6H)，1.00(d，1H)，0.80(d，1H). 实施例25
制备化合物25根据制备实施例23中描述的方法应用Boc-Pro-OH制备(S)-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺。[M+H]+ 412.98；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.19(s，1H)，7.59(s，1H)，7.04(s，1H)，6.54(d，1H)，6.53(s，1H)，6.43(d，1H)，5.93(dd，2H)，3.58(m，1H)，3.45(t，2H)，2.70(t，2H)，2.42(t，2H)，2.20(m，4H). 实施例26
制备化合物26根据制备实施例23中描述的方法应用(R)-(+)-N-Boc-2-哌啶羧酸制备(R)-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-哌啶-2-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺。[M+H]+ 426.56；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.23(s，1H)，7.59(s，1H)，7.01(s，1H)，6.59(d，1H)，6.58(s，1H)，6.45(d，1H)，5.84(dd，2H)，3.52(m，2H)，3.51(t，1H)，3.43(t，2H)，2.70(t，2H)，1.58-1.80(m，6H). 实施例27
制备化合物27根据制备实施例23中描述的方法应用反式-N-t-Boc-4-羟基-D-脯氨酸制备(2S，4R)-4-羟基-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺。[M+H]+ 428.75；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ9.35(s，1H)，7.81(s，1H)，7.40(s，1H)，6.59(s，1H)，6.51(s，1H)，6.58(d，1H)，5.82(dd，2H)，3.68(m，1H)，3.44(m，2H)，3.42(t，2H)，2.70(t，2H)，2.50(d，1H)，2.31(m，2H). 实施例28
制备化合物28根据制备实施例23中描述的方法应用顺式-N-t-Boc-4-羟基-D-脯氨酸制备(2R，4R)-4-羟基-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺。[M+H]+ 428.91；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ9.35(s，1H)，7.81(s，1H)，7.40(s，1H)，6.59(s，1H)，6.58(s，1H)，6.51(d，1H)，5.82(dd，2H)，3.68(m，1H)，3.44(m，2H)，3.42(t，2H)，2.70(t，2H)，2.50(d，1H)，2.31(m，2H). 实施例29
制备化合物29根据制备实施例23中描述的方法应用Boc-D-pro-OH制备(R)-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺。[M+H]+ 412.93；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.19(s，1H)，7.59(s，1H)，7.04(s，1H)，6.54(d，1H)，6.53(s，1H)，6.43(d，1H)，5.93(dd，2H)，3.58(m，1H)，3.45(t，2H)，2.70(t，2H)，2.42(t，2H)，2.20(m，4H). 实施例30
步骤1 制备化合物30aN-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-氯代-乙酰胺 将盐酸3，4-亚甲基二氧苯乙基胺(101mg，0.5mmol)溶于DCE(2mL)和TEA(70μL)中。然后，加入氯代乙酰氯(48μL，0.6mmol)并使反应于室温搅拌16小时。此后，在N2保护下浓缩。将残留物再溶于DCM，用饱和NaHCO3(aq)洗涤并经Na2SO4干燥。用Prep-LCMS纯化粗品从而得到32mg(27％)的N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-氯代-乙酰胺。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ6.75-6.62(m，3H)，5.92(s，2H)，4.01(s，2H)，3.52-3.47(m，2H)，2.79-2.72(t，2H). 步骤2 制备化合物30bN-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-甲基氨基-乙酰胺. 将N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-氯代-乙酰胺(32mg，0.13mmol)溶于无水乙醇的甲胺(33％重量比，5mL)溶液。室温下搅拌该溶液16小时。此后，在N2保护下，浓缩该溶液。用Prep-LCMS纯化粗品从而得到21mg(68％)的N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-甲基氨基-乙酰胺。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ6.73-6.65(m，3H)，5.89(s，2H)，3.46-3.39(t，2H)，3.31-3.29(m，2H)，2.74-2.70(t，2H)，2.35(s，3H) 步骤3 制备化合物30根据制备实施例23中步骤3描述的方法制备N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-乙酰胺。[M+H]+386.84；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.24(s，1H)，7.62(d，1H)，7.12(d，1H)，6.62-6.48(m，3H)，6.00(s，1H)，5.82(s，2H)，4.18(s，2H)，3.45(m，2H)，3.12(s，3H)，2.65(m，2H). 实施例31
步骤1 制备化合物31a根据制备实施例30中步骤3描述的方法、应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-丙胺-丙基)-氨基甲酸叔丁酯制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-丙基-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯. 步骤2 制备化合物31根据制备实施例23中步骤2描述的方法制备N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-丙基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+400.90；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，1H)，7.62(s，1H)，7.04(d，1H)，6.80(d，1H)，5.92(s，2H)，3.64(s，2H)，2.64(t，2H)，1.88(t，3H)，1.71(q，2H)，1.60(m，2H)，0.99(t，4H). 实施例32
制备化合物32根据制备实施例31中描述的方法应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-环丙基氨基-丙基)-氨基甲酸叔丁酯制备N′-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-环丙基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+407.10；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.26(s，1H)，7.62(s，1H)，7.07(s，1H)，7.79(s，1H)，6.70(t，2H)，5.93(s，2H)，3.74(t，2H)，3.63(s，2H)，2.72(quin，1H)，2.65(2H，t)，1.93(td，2H)，1.29(t，2H)，0.92(m，2H). 实施例33
制备化合物33根据制备实施例23中步骤1描述的方法应用1-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-哌嗪制备1-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-4-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-哌嗪。[M+H]1″370.96；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，7.65(d，1H)，7.09(d，1H)，6.87(s，1H)，6.75(d，2H)，5.97(s，2H)，3.57(bs，4H)，2.57(t，4H)，1.95(s，2H). 实施例34
制备化合物34N-{3-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-4-三氟甲氧基-苯磺酰胺. N-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-1-甲基-丙烷-1，3-二胺(100mg，0.43mmol)溶于DCE(1mL)中。然后，加入4-(三氟甲氧基)-苯磺酰氯(146μL，0.86mmol)和DIEA(150μL)。室温下搅拌反应物16小时。此后，在N2保护下浓缩该溶液。将残留物溶于DCM并转移至分液漏斗。用饱和NaHCO3(aq)洗涤有机层，Na2SO4干燥。真空下浓缩该有机层以得到粗品。用预制的LCMS纯化该粗产品从而得到34mg(32％)的N-{3-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-4-三氟甲氧基-苯磺酰胺。[M+H]+ 462.83；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ9.38(bs，1H)，8.01(d，1H)，7.91(d，2H)，7.43(s，1H)，7.36(d，2H)，3.30(s，3H)，3.08(t，2H)，2.00(t，2H). 实施例35
制备化合物35乙酸4-[((4-乙酰氧基-苄基)-{3-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基)-甲基]-苯基酯. 将4-乙酰氧基苯甲醛(80mg，0.49mmol)和6(120mg，0.50mmol)在含有催化量的对甲苯磺酸(15mg，0.09mmol)的THF(2mL)中于80℃加热0.5h。冷却溶液至室温，然后加入冰醋酸(0.3mL)和三乙酰氧基硼氢化钠(800mg，3.8mmol)。搅拌混合物过夜。减压下蒸掉大部分的溶剂，加入饱和的碳酸钠水溶液使溶液为碱性(pH 9)。乙酸乙酯萃取该溶液，盐水洗并经Na2SO4干燥。蒸发溶剂和柱分离获得26mg(10％)的乙酸4-[((4-乙酰氧基-苄基)-{3-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-丙基}-氨基)-甲基]-苯基酯。[M+H]+536.32；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.27(s，1H)，7.60(s，1H)，7.35(d，4H)，7.02(m，5H)，3.55(s，4H)，3.42(br s，2H)，2.95(br s，2H)，2.48(t，2H)，2.29(s，6H)，1.83(t，2H，). 实施例36
制备化合物36根据制备实施例35中描述的方法制备N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’，N’-双-(4-羟基-苄基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+450.99；1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ8.28(s，1H)，7.65(s，1H)，7.10(d，4H)，7.03(s，1H)，6.72(d，4H)，3.36(m，7H)，2.95(br s，2H)，2.38(m，2H)，1.77(m，2H). 实施例37
制备化合物37N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙酰胺. 将溶于DMF(0.5mL)与TEA(0.2mL)的3f(4mg，0.02mmol)和N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-2-氯代-乙酰胺(4mg，0.02mmol)于60℃加热20h。加水并且用乙酸乙酯萃取该混合物，盐水洗再经Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到残留物，用TLC板纯化从而得到5mg(60％)的N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙酰胺。[M+H]+421.09. 实施例38
步骤1 制备化合物38a苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯. 将1i(0.28g，1.4mmol)和(2-氨基-乙基)-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-氨基甲酸叔丁酯(0.40g，1.4mmol)以及催化量的对甲苯磺酸溶于干燥的苯(benene)(6mL)以及THF(3mL)中，于65-70℃加热4h，然后冷却至室温并在氮气保护下搅拌12h。加入MeOH(3mL)和NaHB(OAc)3(1.8g，8.5mmol)，并将反应物搅拌4小时。加水并且用乙酸乙酯萃取(100ml×2)该溶液，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂以及柱色谱法纯化而得到155mg(23％)澄清油状的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯。[M+H]+ 481.00. 步骤2 制备化合物38N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N’-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-乙烷-1，2-二胺. 将苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(155mg，0.320mmol)溶于DCM/TFA(50％，5mL)搅拌0.5h。蒸去溶剂并加入K2CO3饱和水溶液。用乙酸乙酯萃取该混合物，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到110mg(90％)红色油状的N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N’-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+380.96；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.59(s，1H)，7.87(s，1H)，7.09(s，1H)，7.05(s，1H)，6.79(s，1H)，6.71(s，2H)，5.90(s，2H)，3.74(q，1H)，3.66(s，2H)，2.70-2.50(m，6H)，2.2(br s，2H)，1.37(d，3H)；13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ175.6，170.0，154.6，147.9，146.8，136.4，134.2，130.5，121.4，116.8，115.6，108.8，108.3，101.1，58.8，53.8，48.9，47.4，24.4，22.4. 实施例39
步骤1 制备化合物39a根据制备实施例3中描述的方法、应用3f制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯。
步骤2 制备化合物39根据制备实施例38中步骤2描述的方法制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺。[M+H]+406.97；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.54(s，1H)，7.83(s，1H)，7.19(s，1H)，7.04(s，1H)，6.71(s，1H)，6.64(m，2H)，5.85(s，2H)，3.60-3.20(m，5H)，2.80-2.20(m，9H)，1.90-1.60(m，2H)；13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ175.6，170.0，154.2，147.9，146.8，136.4，133.7，130.2，121.4，116.9，115.4，108.7，108.2，101.1，69.9，54.6，54.2，53.7，50.2，47.6，33.6，24.4，23.7. 实施例40
步骤1 制备化合物40a5-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-戊酸乙酯 将NaH(70mg、60％分散于矿物油中，1.8mmol)以及苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-溴代-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(370mg，1.0mmol)依次地加入(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-乙酸乙酯(240mg，1.0mmol)的DMSO(2mL)溶液。在60℃搅拌该溶液2h。加水(4mL)并且用乙酸乙酯萃取该溶液，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂以及柱色谱法纯化而得到370mg(70％)红色油状的5-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-戊酸乙酯。
步骤2 制备化合物40b5-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-戊酸乙酯. 将5-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-戊酸乙酯(150mg，0.28mmol)的甲胺/乙醇(33wt％，10mL)溶液在微波反应器中加热至95℃，90min。蒸发溶剂并用预制的TLC纯化残留物而得到86mg(60％)的5-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-戊酸乙酯。[M+H]515.05. 步骤3 制备化合物40根据制备实施例38中步骤2所述的方法制备5-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-戊酸甲基酰胺。[M+H]+415.03；1H-NMR(400MHz，(CD3OD)8.48(s，1H)，7.84(s，1H)，7.13(s，1H)，6.80(s，1H)，6.70(m，2H)，5.89(s，2H)，3.59(s，2H)，3.30(m，1H)，2.80(s，3H)，2.54(t，2H)，2.05-1.98(m，2H)，1.62-1.50(m，2H)；13C-NMR(100MHz，CD3OD)δ172.5，158.9，148.0，147.0，136.4，133.2，129.2，129.0，121.7，117.7，108.6，107.8，101.1，52.9，33.5，26.1，25.4. 实施例41
步骤1 制备化合物41a(二苯亚甲基-氨基)-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酸乙酯. 在室温、氮气保护的条件下，将NaH(600mg、60％分散在矿物油中，15.0mmol)缓慢地加入(二苯亚甲基-氨基)-乙酸乙酯(2.67g，10.0mmol)的DMSO(50mL)溶液，并搅拌混合物5min。然后，加入4-氯代-2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶(1.95g，10.0mmol)的DMSO(15mL)溶液，而且室温搅拌混合物过夜。加水并且用乙酸乙酯萃取该溶液，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂以及柱色谱法纯化而得到1.30g(31％)的(二苯亚甲基-氨基)-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酸乙酯。[M+H]+ 426.18. 步骤2 制备化合物41b氨基-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酸乙酯. 将(二苯亚甲基-氨基)-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酸乙酯(460mg，1.10mmol)的THF(4mL)、水(3mL)以及盐酸(1mL，37％)溶液室温搅拌0.5h。加入饱和的K2CO3溶液使得溶液为碱性(pH 9)。用乙酸乙酯(2×100ml)萃取该混合物，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂以及柱色谱法纯化而得到200mg(70％)的氨基-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酸乙酯。[M+H]+262.64. 步骤3 制备化合物41c根据制备实施例14a中所述的方法制备[2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-乙酰氨基]-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酸乙酯. 步骤4 制备化合物41根据制备实施例38中步骤2所述的方法制备{2-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-乙酰氨基}-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酸乙酯。[M+H]+453.01；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.66(d，1H)，8.51(s，1H)，7.18(s，1H)，7.06(s，1H)，6.72(s，1H)，6.70(m，2H)55.86(s，2H)，5.64(d，1H)，4.20(m，2H)，3.70(q，2H)，3.34(m，2H)，2.53(s，3H)，1.20(t，3H)；13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ171.9，171.1，168.4，164.9，154.5，148.0，147.0，136.4，133.3，130.7，121.6，117.5，116.8，108.8，108.4，101.2，62.7，56.5，53.9，51.8，24.4，14.3. 实施例42
步骤1 制备化合物42a根据制备实施例40中步骤2所述的方法制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-({[(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-甲基氨甲酰基-甲基]-氨甲酰基}-甲基)-氨基甲酸叔丁酯. 步骤2 制备化合物42根据制备实施例38中步骤2所述的方法制备2-{2-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-乙酰氨基}-2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-N-甲基-乙酰胺。[M+H]+ 437.98；1H-NMR(400MHz，(CDCl3)8.86(d，1H)，8.57(s，1H)，7.81(s，1H)，7.09(s，1H)，7.06(s，1H)，6.83(s，1H)，6.71(m，2H)，5.91(s，2H)，5.50(d，1H)，3.73(m，2H)，3.40(m，2H)，2.78(s，3H)，2.50(s，3H)；13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ172.6，171.0，167.8，166.3，154.1，148.1，147.1，136.4，133.2，130.6，121.7，116.8，115.6，108.9，108.4，101.2，57.5，54.1，51.9，26.9，24.5. 实施例43
制备化合物43根据制备实施例38中步骤1所述的方法、应用1i和2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲氧基)-乙胺制备[2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲氧基)-乙基]-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-胺。[M+H]+382.89；1H NMR(400MHz，d5-DMSO)δ8.55(s，1H)，7.91(d，1H)，7.47(s，1H)，7.37(s，1H)，7.11(d，1H)，6.87-6.75(m，2H)，5.99(s，2H)，4.68(q，1H)，4.33(s，2H)，3.44(t，2H)，2.64(t，2H)，2.45(s，3H)，1.42(d，3H). 实施例44
制备化合物44N-(1-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-N’-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-乙烷-1，2-二胺. 在氮气环境下，将3，4-(亚甲基二氧)苯乙酮(95.0mg，577μmol)和(2-氨基-乙基)-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(200mg，577μmol)在1，4-二氧六环(4mL)中加热至70℃，16h。然后将反应冷却至室温，并加入NaHB(OAc)3(367mg，1.73mmol)。在额外搅拌1小时之后，加水并用乙酸乙酯萃取(2×50mL)该溶液，盐水洗且经Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到黄色的残留物，将其溶于TFA/DCM(1∶1，5mL)并且室温下搅拌30min。蒸发溶剂而得到橙色残留物。用EtOAc(50mL)稀释该粗品，用1MNaOH(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至油状。应用柱色谱法进行纯化(CH2Cl2至4∶1CH2Cl2/MeOH)而得到198mg(87％)澄明玻璃状的N-(1-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-N’-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+395.05；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.87(s，1H)，8.09(s，1H)，7.42(s，1H)，7.36(s，1H)，7.00(d，1H)，6.91(dd，1H)，6.78(dd，1H)，5.96(s，2H)，4.30(q，1H)，3.57(m，2H)，3.38(q，1H)，2.73(m，4H)，2.60(s，3H)，1.60(d，3H)，1.48(d，3H). 实施例45
制备化合物45根据制备实施例44中所述的方法，应用1，4-苯并二氧六环-6-甲醛制备N-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-N’-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+395.10；1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.60(s，1H)，7.96(s，1H)，7.40(s，1H)，7.14(s，1H)，6.86(s，1H)，6.79(m，2H)，4.22(s，4H)，3.75(q，1H)，3.66(s，2H)，3.36(br s，2H)，2.63-2.58(m，4H)，2.54(s，3H)，1.31(d，3H). 实施例46
制备化合物46根据制备实施例23中步骤3所述的方法、应用(1-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-吡咯烷-3-基甲基)-甲基-胺以及5-氯代-3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑制备(1-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-吡咯烷-3-基甲基)-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-胺。[M+H]+ 398.99；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，1H)，7.63(s，1H)，7.06(s，1H)，6.81(s，1H)，6.70-6.67(m，2H)，5.89(s，2H)，3.14(s，2H)，2.92(s，2H)，2.90(m，2H)，2.65-2.47(m，2H)，2.58(s，3H)，2.00(m，2H)，1.72(m，1H). 实施例47
制备化合物47N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-乙烷-1，2-二胺. 将苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(2-甲基氨基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(200mg，649μmol)、5-氯代-3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑(121mg，649μmol)以及TEA(181μL，1.30mmol)的DMSO(6mL)溶液室温搅拌21h。加水(50mL)并用乙酸乙酯萃取(2×25mL)该溶液，盐水洗且经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至澄清油状物。将粗残留物溶于TFA/DCM(1∶1，4mL)并且室温下搅拌30min。蒸发溶剂而得到橙色油状物。用EtOAc(50mL)稀释该粗品，用1M NaOH(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至油状。应用柱色谱法进行纯化(CH2Cl2至4∶1CH2Cl2/MeOH)而得到21.3mg(9％)白色固体的N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+358.92；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，7.64(s，1H)，7.07(s，1H)，6.81(s，1H)，6.73(m，2H)，5.92(s，2H)，3.76(s，3H)，3.65(br s，1H)，3.14(m，4H)，2.95(t，2H). 实施例48
制备化合物48根据制备实施例47中所述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(4-甲基氨基-丁基)-氨基甲酸叔丁酯制备N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丁烷-1，4-二胺。[M+H]+386.90；1HNMR(400MHz，Ci6-DMSO)δ8.34(s，1H)，7.75(s，1H)，7.11(s，1H)，6.93(s，1H)，6.86-6.78(m，2H)，6.00(s，2H)，3.63(s，3H)，3.36(s，2H)，3.20-3.05(m，5H)，1.72(dtt，2H)，1.49(tt，2H). 实施例49
制备化合物49根据制备实施例47中所述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(噻唑-2-基甲基)-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯制备N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+455.87；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.33(s，1H)，7.74(d，1H)，7.66(s，1H)，7.33(d，1H)，7.09(s，1H)，6.83(s，1H)，6.73(m，2H)，5.92(s，2H)，5.03(br s，2H)，3.70(s，2H)，3.68(br s，1H)，3.61(m，2H)，2.68(t，2H)，1.95(m，2H). 实施例50
制备化合物50根据制备实施例47中所述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(噻吩-2-基甲基)-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯制备N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-噻吩-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+455.27；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.34(s，1H)，7.67(s，1H)，7.28(d，1H)，7.09(s，1H)，7.07(d，1H)，6.97(dd，1H)，6.86(s，1H)，6.78-6.72(m，2H)，5.92(s，2H)，4.83(s，2H)，3.72(s，2H)，3.57(m，2H)，2.72(t，2H)，1.96(m，2H). 实施例51
制备化合物51根据制备实施例47中所述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(呋喃-2-基甲基)-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯制备N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-呋喃-2-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+439.40；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.31(s，1H)，7.64(s，1H)，7.39(d，1H)，7.08(s，1H)，6.85(s，1H)，6.75-6.72(m，2H)，6.39-6.34(m，2H)，5.93(s，2H)，4.60(s，2H)，3.73(s，2H)，3.61(s，2H)，2.70(t，2H)，1.95(m，2H). 实施例52
制备化合物52根据制备实施例47中所述的方法，应用{3-[(噻唑-2-基甲基)-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯制备N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N’-噻唑-2-基甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+ 321.94；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.85(s，1H)，7.81(d，1H)，7.46(s，1H)，7.41(d，1H)，7.31(s，1H)，4.78(s，2H)，4.27(br s，1H)，3.72(t，2H)，3.49(t，2H)，3.09(br s，1H)，2.20(m，2H) 实施例53
制备化合物53根据制备实施例47中所述的方法，应用[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-丙基氨基]-乙酸乙酯制备[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸乙酯。[M+H]+444.95；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.27(s，1H)，7.63(s，1H)，7.09(S3 1H)，6.81(s，1H)，6.74(m，2H)，5.94(s，2H)，4.27(br s，2H)，4.24(q，2H)，3.71(s，2H)，3.56(br s，2H)，2.74(t，2H)，1.90(m，2H)，1.30(t，3H). 实施例54
制备化合物542-[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酰胺. 将来自步骤1的[[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-丙基]-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸乙酯(115mg，211μmol)以及在MeOH(10mL)中2.0M NH3的混合物室温搅拌24h。浓缩反应混合物至黄色油状物。将粗的残留物溶于TFA/DCM(1∶1，3mL)并且室温下搅拌30min。蒸发溶剂而得到橙色油状物。用EtOAc(50mL)稀释该粗品，用1M NaOH(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至油状物。应用柱色谱法进行纯化(CH2Cl2至4∶1CH2Cl2/MeOH)而得到53mg(60％)白色固体的2-[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酰胺。[M+H]+415.97；1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.29(s，1H)，7.72(s，1H)，7.63(br s，1H)，7.28(br s，1H)，7.09(s，1H)，6.92(s，1H)，6.82(m，2H)，5.98(s，2H)，4.20(br s，1H)，3.60(s，2H)，3.33(s，2H)，2.54(m，4H)，1.80(m，2H). 实施例55
步骤1 制备化合物55a[[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-丙基]-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸. 将[[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-丙基]-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸乙酯(489mg，898μmol)、1.0M的LiOH水溶液(1.35mL，1.35mmol)以及THF(10mL)的溶液室温搅拌18h。减压下浓缩反应混合物而得到白色固体。加入EtOAc(100mL)并将该溶液用1.0M盐酸(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至白色固体。得到452mg(97％)的[[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-丙基]-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸。[M+H]+517.01. 步骤2 制备化合物55[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸. 将[[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-丙基]-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸(70mg，140μmol)溶于TFA/DCM(1∶1，2mL)并室温搅拌30min。加入SiO2(3g)并且蒸发溶剂以得到白色浆状体。应用柱色谱法进行纯化(CH2Cl2至4∶1CH2Cl2/MeOH)而得到58mg(99％)白色固体的[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸。[M+H]+416.92；1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.05(s，1H)，8.79(br s，1H)，8.00(s，1H)，7.49(s，1H)，7.06(s，1H)，6.97(m，2H)，6.06(s，2H)，4.39(brs，2H)，4.26(s，2H)，3.66(m，2H)，3.00(m，2H)，2.01(m，2H). 实施例56
制备化合物562-[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-N-甲基-乙酰胺. 将BOP-Cl(170mg，686μmol)全部迅速地加入[[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-丙基]-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸(177mg，343μmol)与DCM(3mL)的溶液并搅拌30min，然后加入2.0M MeNH2的THF(686μL，1.37mmol)溶液.将反应混合物在室温再搅拌20h，然后直接装载到SiO2柱上(EtOAc至9∶1EtOAc/MeOH)从而得到白色固体(120mg)。将该白色固体溶于TFA/DCM(1∶1，3mL)并室温搅拌30min。蒸发溶剂而得到橙色固体。用EtOAc(50mL)稀释该粗品，用1M NaOH(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至油状物。应用柱色谱法进行纯化(CH2Cl2至4∶1CH2Cl2MeOH)而得到89mg(60％)白色固体的2-[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-N-甲基-乙酰胺。[M+H]+429.99；1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.31(s，1H)，8.00(br s，1H)，7.72(s，1H)，7.10(s，1H)，6.93(s，1H)，6.82(m，2H)，5.99(s，2H)，3.98(s，2H)，3.64(br s，2H)，3.19(t，2H)，2.99(s，3H)，2.88(t，2H)，2.54(br s，1H)，1.84(m，2H). 实施例57
制备化合物57根据制备实施例56中所述的方法，应用[[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-丙基]-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸与Me2NH制备2-[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-N，N-二甲基-乙酰胺。[M+H]+443.99；1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.34(s，1H)，7.75(s，1H)，7.12(s，1H)，6.99(s，1H)，6.87(m，2H)，6.03(s，2H)，4.51(br s，1H)，3.78(br s，2H)，3.38(br s，2H)，3.05(s，3H)，2.89(s，3H)，2.75(m，2H)，2.53(m，2H)，1.89(m，2H). 实施例58
制备化合物58根据制备实施例54中所述的方法，应用[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-甲基-氨基)-丙基氨基]-乙酸乙酯制备[[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-甲基-氨基)-丙基]-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸乙酯。[M+H]+458.98；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.26(s，1H)，7.63(s，1H)，7.07(s，1H)，6.82(s，1H)，6.73(m，2H)，5.93(s，2H)，4.28(s，2H)，4.23(q，2H)，3.52(s，2H)，3.43(m，2H)，2.46(t，2H)，2.21(s，3H)，1.91(m，2H)，1.29(t，3H). 实施例59
制备化合物59根据制备实施例56中所述的方法，应用[[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-甲基-氨基)-丙基]-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酸乙酯和NH3制备2-[[3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-甲基-氨基)-丙基]-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙酰胺。[M+H]+429.87；1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.24(s，1H)，7.68(s，1H)，7.54(br s，1H)，7.18(br s，1H)，7.06(s，1H)，6.86-6.70(m，3H)，5.98(s，2H)，3.45-3.35(m，4H)，3.31(s，2H)，2.36(m，2H)，2.10(s，3H)，1.72(m，2H). 实施例60
制备化合物60根据制备实施例47中所述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-[3-(氰基甲基-氨基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯制备[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙腈。[M+H]+397.90；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.32(s，1H)，7.67(s，1H)，7.11(s，1H)，6.81(s，1H)，6.80-6.73(m，2H)，5.94(s，2H)，4.58(s，2H)，3.69(s，2H)，3.60(t，2H)，2.72(t，2H)，1.92(tt，2H). 实施例61
制备化合物61N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-(1H-四唑-5-基甲基)-丙烷-1，3-二胺. 将溶于2∶1H2O/iPrOH(1mL)的[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙腈(37mg，91μmol)、叠氮化钠(12mg，184μmol)以及溴化锌(II)(10mg，46μmol)加热至150℃，24h。将反应混合物冷却至室温，然后直接装载SiO2柱(CH2Cl2至4∶1CH2Cl2/MeOH)从而获得14mg(35％)白色固体的N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-(1H-四唑-5-基甲基)-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+ 441.01；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.35(s，1H)，7.74(s，1H)，7.07(s，1H)，6.85-6.74(m，3H)，5.92(s，2H)，4.43(s，2H)，4.06(s，2H)，3.81(br s，2H)，3.31(t，2H)，3.06(t，2H)，2.17(tt，2H). 实施例62
制备化合物622-[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙脒N’-甲基-肼. 室温下，将甲基肼(37μL，700μmol)全部迅速地加至[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙腈(27mg，70μmol)的EtOH(500μL)溶液中。室温搅拌反应混合物19h，然后浓缩至白色固体。用柱色谱法纯化(CH2Cl2至4∶1CH2Cl2/MeOH)残留物而得到14mg(45％)白色固体的2-[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙脒N’-甲基-肼。[M+H]+444.53；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.34(s，1H)，7.73(s，1H)，7.07(s，1H)，6.83(s，1H)，6.77-6.72(m，2H)，5.88(s，2H)，4.23(br s，2H)，3.70(d，3H)，3.68(s，2H)，3.61(s，2H)，3.30(s，2H)，2.72(m，2H)，1.96(tt，2H). 实施例63
制备化合物632-[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-N-羟基-乙脒. 室温下将羟胺(1.0mL、50％重量比水溶液，15mmol)全部迅速地加入[{3-[((苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-乙腈(30mg，75μmol)的MeOH(1.0mL)溶液。将反应混合物室温搅拌30h，然后浓缩至白色固体。用柱色谱法纯化(CH2Cl2至4∶1CH2Cl2/MeOH)残留物而得到7.0mg(22％)白色固体的2-[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-N-羟基-乙脒。[M+H]+ 430.91；1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.39(s，1H)，7.79(s，1H)，7.76(s，1H)，7.07(s，1H)，6.82(s，1H)，6.76-6.70(m，2H)，5.89(s，2H)，4.19(s，2H)，3.65(s，2H)，3.58(m，2H)，2.63(t，2H)，1.94(tt，2H). 实施例64
步骤1 制备化合物64a1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-乙酮. 在室温、氮气保护的条件下，将催化量的二氯化钯(II)双(三苯基膦)(189mg，268μmol)加至5-氯代-3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑(500mg，2.68mmol)与三丁基-(1-乙氧-乙烯基)-锡(904μL，2.68mmol)的DMF(10mL)溶液中，然后于65-70℃加热21h。然后，将反应冷却至室温，加入H2O(70mL)，用硅藻土过滤，并用EtOAc(200mL)冲洗。分离有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至黄色残留物。用5∶1的5N HCl/THF(48mL)混合物稀释该黄色残留物，并且室温搅拌2小时，然后浓缩至白色残留物。用EtOAc(100mL)稀释该粗品，用1M NaOH(75mL)、盐水(75mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至白色固体。应用柱色谱法进行纯化(CH2Cl2至9∶1CH2Cl2/MeOH)而得到398mg(77％)白色固体的1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-乙酮。[M+H]+195.35. 步骤2 制备化合物64N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N′-[1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-乙基]-乙烷-1，2-二胺. 在氮气环境、室温的条件下，将催化量的TsOH(20mg)加入步骤1得到的1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-乙酮(233mg，1.20mmol)以及(2-氨基-乙基)-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-氨基甲酸叔丁酯(565mg，1.92mmol)的1，4-二氧六环(10mL)溶液中，然后于65-70℃加热4h。随后将反应冷却至室温并加入NaHB(OAc)3(763mg，3.60mmol)。在额外搅拌1小时之后，加入水并用乙酸乙酯萃取(2×70mL)该溶液，盐水洗，经Na2SO4干燥。蒸发溶剂而得到黄色残留物，将其溶于TFA/DCM(1∶1，6mL)中，并室温搅拌30min。蒸发溶剂而得到黄色固体。用EtOAc(100mL)稀释该粗品，用1M NaOH(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至橙色固体。应用柱色谱法进行纯化(CH2Cl2至4∶1CH2Cl2/MeOH)而得到31mg(7％)白色固体的N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N′-[1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-乙基]-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+372.97；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.40(s，1H)，7.74(s，1H)，7.13(s，1H)，6.84(s，1H)，6.76(m，2H)，5.93(s，2H)，4.12(q，1H)，3.73(d，2H)，2.91-2.77(m，4H)，2.19(br s，2H)，1.54(d，3H). 实施例65
制备化合物65根据制备实施例64步骤2中所述的方法，应用2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲氧基)-乙胺制备[2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲氧基)-乙基]-[1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-乙基]-胺。[M+H]+373.90；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.42(d，1H)，7.75(d，1H)，7.13(s，1H)，6.81(s，1H)，6.76(m，2H)，5.94(s，2H)，4.41(s，2H)，4.22(q，1H)，3.63(m，2H)，2.97(m，2H)，1.71(d，3H). 实施例66
制备化合物66根据制备实施例56中所述的方法，应用2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基-丙酸和(2-氨基-乙基)-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-氨基甲酸叔丁酯制备N-{2-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-乙基}-2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-异丁酰胺。[M+H]+423.26；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.70(s，1H)，8.00(s，1H)，7.35(s，1H)，7.14(s，1H)，6.94-6.80(m，3H)，5.98(s，2H)，4.10(s，2H)，3.53(t，2H)，3.13(t，2H)，2.58(s，3H)，1.63(s，6H). 实施例67
步骤1 制备化合物67a2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-琥珀酸1-乙酯. 在氮气环境下，将LiHMDS(4.62mL、1.0M的THF溶液，4.62mmol)滴加至-78℃的(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-乙酸乙酯(1.00g，4.20mmol)以及THF(42mL)溶液。搅拌反应混合物30分钟，然后升温至-40℃并且加入叔丁基溴代乙酸酯(620μL，4.20mmol)。将反应物在-40℃搅拌15分钟，然后缓慢地升温至室温并再搅拌6h。加入饱和的NH4Cl(100mL)，分离有机层，用EtOAc萃取水溶液，有机层经Na2SO4干燥、过滤并浓缩至黄色固体。将该黄色固体溶于TFA/DCM(1∶1，10mL)并室温搅拌45min。蒸发溶剂从而得到583mg(47％)白色固体的2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-琥珀酸1-乙酯。该产品无需纯化直接用于下一步。
步骤2 制备化合物67N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-琥珀酸乙酯. 将BOP-Cl(784mg，3.08mmol)全部迅速地加至2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-琥珀酸1-乙酯(389mg，1.54mmol)与DCM(10mL)的溶液并室温搅拌30min，然后加入2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙胺(620mg，3.08mmol)和TEA(859μL，6.16mmol)。将反应混合物于室温再搅拌20h。蒸去溶剂从而得到白色浆状物，用EtOAc(50mL)稀释，用饱和NaHCO3(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至白色固体。应用柱色谱法进行纯化(CH2Cl2至4∶1CH2Cl2/MeOH)而得到17mg(3％)白色固体的N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-琥珀酸乙酯。[M+H]+443.90；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.50(s，1H)，7.74(s，1H)，7.15(s，1H)，6.66-6.52(m，3H)，6.04(br s，1H)，5.86(s，2H)，4.31(q，2H)，3.78(t，1H)，3.63(t，2H)，3.16(t，2H)，2.83(d，2H)，1.32(t，3H). 实施例68
步骤1 制备化合物68a2-咪唑-1-基-噻唑-4-羧酸甲氧-甲基-酰胺. 在氮气环境、室温的条件下，将碳酸铯(II)(1.36g，4.18mmol)加入2-溴代-噻唑-4-羧酸甲氧-甲基-酰胺(500mg，1.99mmol)与咪唑(135mg，1.99mmol)的DMF(5mL)之中，然后在微波反应器中于120℃加热40分钟。然后将反应冷却至室温，用EtOAc(100mL)稀释，用1M NaOH(75mL)、盐水(75mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至白色固体。应用柱色谱法进行纯化(CH2Cl2至9∶1CH2Cl2/MeOH)而得到435mg(92％)白色固体的2-咪唑-1-基-噻唑-4-羧酸甲氧-甲基-酰胺。[M+H]+239.02. 步骤2 制备化合物68b1-(2-咪唑-1-基-噻唑-4-基)-乙酮 在氮气环境下，将氯化甲基镁(II)(1.12mL、3.0M的THF溶液，3.36mmol)滴加至0℃、从步骤1得到的、2-咪唑-1-基-噻唑-4-羧酸甲氧-甲基-酰胺(400mg，1.68mmol)的THF(5mL)溶液中。然后将反应升温至室温，2小时后，加入饱和的NH4Cl(50mL)并用甲叉二氯萃取(2×70mL)该溶液，盐水洗涤并经Na2SO4干燥。蒸去溶剂得到319mg(98％)白色固体的1-(2-咪唑-1-基-噻唑-4-基)-乙酮，其可用于后续的步骤而无需进一步纯化。[M+H]+194.06. 步骤3 制备化合物68根据制备实施例64中描述的方法，应用1-(2-咪唑-1-基-噻唑-4-基)-乙酮以及(2-氨基-乙基)-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-氨基甲酸叔丁酯制备N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N’-[1-(2-咪唑-1-基-噻唑-4-基)-乙基]-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+372.01；1H NMR(400MHz，ds-DMSO)δ8.38(s，1H)，7.82(d，1H)，7.31(s，1H)，7.18(d，1H)，6.92(d，1H)，6.84(d，1H)，6.77(dd，1H)，6.00(s，2H)，4.14(br s，2H)，3.82(q，1H)，3.60(s，2H)，3.21(s，2H)，2.57(s，2H)，1.34(d，3H). 实施例69
步骤1 制备化合物69a[(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-氨基]-乙酸乙酯. 在25mL回收烧瓶中装入NaH(12mg，0.29mmol，60％、分散于矿物油中)以及THF∶DMF的5∶1混合物，得到约0.05M溶液。将该烧瓶在冰浴中冷却至0℃。然后逐份地加入13b(50mg，0.26mmol)并使反应搅拌15-20min。然后，逐滴加入溴乙酸乙酯(31口L，0.29mmol)。将混合物升温至室温，6h以上。通过缓慢地加水骤停反应，用EtOAc(5×25mL)萃取，水、盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空浓缩而获得粗品，用柱色谱法纯化(DCM to 4∶1DCM/MeOH)从而得到40mg(55％)[(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-氨基]-乙酸乙酯。这无需纯化就可使用。
步骤2 制备化合物69[3-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-脲基]-乙酸乙酯. 在装有磁搅拌棒、带有隔膜的N2入口的、烘干10-mL回收烧瓶中装入[(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-氨基]-乙酸乙酯(0.20g，0.72mmol)并溶于CH2Cl2从而得到约0.2M溶液。室温下通过注射器向该溶液中加入相应的异氰化物(0.15g，0.79mmol)并在此温度下搅拌约4h。然后通过缓慢地加水骤停反应，用EtOAc(5×25mL)萃取，水、盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空浓缩该溶液而获得粗品油，用柱色谱法纯化(EtOAc)从而得到260mg(77％)的[3-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-脲基]-乙酸乙酯。[M+H]+467.00；1H NMR(400MHz，CDCl3)58.53(s，1H)，7.79(s，1H)，7.14(s，1H)，7.07(s，1H)，6.61-6.53(m，2H)，5.88(s，2H)，5.00(br，1H)，4.46(s，2H)，4.18(q，2H)，4.12(s，2H)，3.44(q，2H)，2.73-2.70(m，2H)，2.54(s，3H)，1.26(t，3H). 实施例70
制备化合物70(2-[3-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-脲基]-乙酰胺). 在装有磁搅拌棒、带有隔膜的N2入口的、烘干10-mL回收烧瓶中装入酯69(30mg，0.064mmol)并溶于MeOH从而得到约0.05M溶液。室温下通过注射器向该溶液中加入2M的NH3在MeOH中的溶液(0.16mL，0.32mmol)并在此温度下搅拌过夜。然后用水骤停该混合物，用EtOAc(5×25mL)萃取，水、盐水洗涤并经Na2SO4干燥。真空下浓缩该溶液而获得粗品油，用柱色谱法纯化、100％EtOAc洗脱从而得到28mg(定量quant.)的(2-[3-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-脲基]-乙酰胺)。[M+H]+-NH2 420.91；1H NMR(400MHz，CDCl3)58.60(s，1H)，7.85(s，1H)，7.19(s，1H)，7.99(s，1H)，6.77-6.72(m，2H)，5.95(s，2H)，4.65(br，1H)，4.06(s，2H)，3.79(t，2H)，2.92(t，2H)，2.60(s，3H). 实施例71
制备化合物71(2-[3-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-磺酰胺). 将13b(100mg，0.530mmol)和盐酸3，4-亚甲基二氧苯乙胺(106mg，0.530mmol)溶于CH2Cl2(2.65mL)中。将该溶液冷却至-78℃并用注射器滴加1M磺酰氯溶液(530μL，0.530mmol)。将反应维持于此温度数分钟以利于搅拌。然后使反应恢复至室温，5小时以上。用水(25mL)骤停该混合物，用EtOAc(5×25mL)萃取，水(25mL)、盐水(25mL)洗并经Na2SO4干燥。真空下浓缩该溶液而获得粗品油，用预制的TLC纯化从而得到2mg(1％)的(2-[3-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-磺酰胺)。1HNMR(400MHz，CDCl3)D 8.60(s，1H)，7.85(s，1H)，7.19(s，1H)，6.77-6.72(m，2H)，6.64(s，1H)，5.95(s，2H)，4.01(s，2H)，3.5(t，2H)，2.65(t，2H)，2.45(s，3H). 实施例72
步骤1 制备化合物72a3-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-丙烯酸乙酯. N2保护下，将氢化钠(60％矿物油分散体，10.0g，250mmol)悬浮于THF(100ml)。滴加2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(56.0g，219mmol)，同时维持内部的温度于40℃。然后滴加胡椒胺(37.5g，248mmol)，30min以上。将反应加热至65℃，1小时。将溶液升温至室温，然后用THF滴加(tritrated)。从反应混合物倾出滤液并真空下浓缩从而得到43.0g(57％)的化合物72a，无需进一步纯化即可使用。
步骤2 制备化合物72b3-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-丙酸乙酯. 将Pd/C(725mg，6.81mmol)和72a(15.0g，68.1mmol)悬浮于甲醇中(100mL)并在H2下室温搅拌3小时。过滤混合物并在真空下将滤液浓缩而得到14.3g(95％)的化合物72b，无需纯化即可使用。
步骤3 制备化合物72c3-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-丙酸. 将72b(14.3g，66.3mmol)和NaOH(10％w/w，10ml)溶于甲醇(100mL)中并在室温下搅拌2小时。用EtOAc(2×100mL)洗该溶液，并将有机层从水层分离开。水层酸化至pH＝5，用EtOAc(2×100mL)萃取，并经Na2SO4干燥。真空下浓缩有机层从而达到13.2g(100％)的化合物72c，无需纯化即可使用。
步骤4 制备化合物72d3-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-丙酰胺. 在装有搅拌器的250mL单口烧瓶中，将化合物72c(1.4g)溶入20ml SOCl2，然后加热回流4h。当将混合物冷却至室温时，在真空下除去溶液，并用2.0M NH3甲醇溶液(200mL)处理残留物。搅拌混合物30min，然后真空下浓缩从而得到1.20g白色固体的72d。将产物直接用于随后的步骤5中。
步骤5 制备化合物72e3-(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基)丙烷-1-胺. 将LiAlH4(1M的THF溶液，1.80g，47.4mmol)按份地加入装有THF(100mL)的烧瓶中，同时冷却至-5℃。当维持温度低于-5℃时，滴加72d(4.60g，23.8mmol)的THF(10mL)溶液。室温下搅拌混合物30min。真空下除去溶剂并将残留物溶于水(100mL)中，用CH2Cl2(3×50mL)萃取。合并有机层，经硫酸钠干燥并在减压下浓缩从而得到3.7g(88％)的72e.[M+H]+180.01；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.61(s，1H)，6.57(s，1H)，6.51(s，1H)，5.91(s，2H)，2.65(m，2H)，2.55(m，2H)，2.00(s，2H)，1.88(m，2H). 步骤6 制备化合物72g2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基-丙酸. 将72f(1.2g，4.4mmol)溶于乙醇(20mL)中。向反应容器中加入氢氧化钠(200mg，5.0mmol)水溶液(5mL)。室温下搅拌混合物16小时。真空下浓缩反应物并将残留物溶于水(20mL)并且用EtOAc(2×10mL)萃取。弃去有机层并用浓HCl将水层酸化至pH＝5。产物沉淀，为白色固体。通过过滤收集并真空下干燥从而得到800mg(74％)的72g，无需进一步纯化即可使用。
步骤7 制备化合物722-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-N-(3-(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基)丙基)-2-甲基丙酰胺. 将72g(300mg，1.22mmol)和三乙胺(180mg，1.78mmol)溶于THF(40mL)。溶解后，将混合物冷却至-10℃，加入氯甲酸乙酯(200mg，1.84mmol)并将混合物搅拌2h。将溶液维持于-10℃，同时加入3-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基)丙烷-1-胺(330mg，1.84mmol)。再将混合物搅拌2小时。将反应混合物倾入水中(20mL)并用EtOAc(2×20mL)萃取。通过硫酸钠干燥有机层并浓缩从而得到粗品。通过闪式色谱法纯化粗品(己烷至1∶1己烷/EtOAc)从而得到320mg(66％)的72。[M+H]+408.05；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.64(s，1H)，7.92(s，1H)，7.12(d，1H)，6.99(s，1H)，6.80(m，3H)，5.94(s，2H)，5.84(d，1H)，4.14(t，1H)，3.34(d，2H)，2.66(s，3H)，2.13(s，3H)，1.89(m，2H)，1.69(s，6H). 实施例73
制备化合物732-(3-(1H-咪唑-1-基)-1，2，4-噻二唑-5-基)-N-(3-(苯并[δ][1，3]二氧戊环-4-基)丙基)乙酰胺 将2-(3-(1H-咪唑-1-基)-1，2，4-噻二唑-5-基)乙酸乙酯(320mg，1.30mmol)和72e (300mg，1.60mmol)溶于对二甲苯/1，4-二氧六环(v/v 1∶1，30mL)并回流24h。将混合物浓缩并用闪式色谱法纯化(DCM至1∶19MeOH/DCM)从而得到80mg(13％)的73。[M+H]+372.16. 实施例74
步骤1 制备化合物74b2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基-丙烷-1-醇. 将氢化铝锂(100mg，2.64mmol)溶于无水的THF(25mL)并在N2下冷却至-20℃。将溶于THF(5mL)的74a(1.0g，3.65mmol)滴加至反应混合物同时维持温度低于-20℃。用水骤停反应并用硅藻土过滤。用EtOAc(25mL)萃取滤液并从水层分离。经硫酸钠干燥有机层并浓缩从而得到粗品。用闪式色谱法纯化(己烷至4∶1乙酸乙酯/己烷)粗品从而得到370mg的74b。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(s，1H)，7.86(s，1H)，7.14(s，1H)，7.09(s，1H)，3.81(s，2H)，2.56(s，3H)，1.36(s，6H). 步骤2 制备化合物74c2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基-丙醛. 将0.63g的草酰二氯(630mg，4.96mmol)溶于甲叉二氯(10mL)。将反应容器冷却至-50℃并向反应物中滴加二甲亚砜(790mg，10.11mmol)的无水甲叉二氯溶液(5mL)。搅拌反应物5分钟。将溶于甲叉二氯(5mL)的74b(370mg，1.59mmol)加入烧瓶，同时维持温度低于-50℃。使反应继续1h。将三乙胺(665μL，4.77mmol)加入反应，然后通过加水(50mL)骤停反应。将甲叉二氯层从水层分离出来并重新用甲叉二氯(10mL)萃取水层。用硫酸钠干燥甲叉二氯层并真空浓缩从而得到74c(280mg).1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.75(s，1H)，8.60(s，1H)，7.88(s，1H)，7.14(s，1H)，7.05(s，1H)，2.55(s，1H)，1.51(s，1H). 制备化合物74d4-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-4-甲基-戊-2-烯酸乙酯. 将氢化钠(240mg，6.0mmol)溶于干燥的THF(10mL)。将烧瓶冷却至0℃，并且滴加2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(1.68g，6.56mmol)。当不再有气体产生时，将溶于THF(20mL)的74c(1.38g，5.99mmol)加至反应，同时维持温度在0℃左右。将反应搅拌1小时，加水(50mL)骤停反应。用EtOAc(50mL×3)萃取混合物。合并有机层，经硫酸钠干燥并浓缩，从而得到粗品。用闪式色谱法纯化(0-33％己烷/乙酸乙酯梯度)该粗品从而得到1.45g(81％)的74d。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.68(s，1H)，7.93(s，1H)，7.21(s，1H)，7.17(s，1H)，6.99(d，1H)，5.90(d，1H)，4.23(q，2H)，2.54(s，3H)，1.53(s，6H)，1.30(t，3H). 制备化合物74e4-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-4-甲基戊-2-烯酸. 将74d(1.00g，3.33mmol)溶于乙醇(20mL)中。随后，将溶于水(5mL)的氢氧化钠(150mg，3.75mmol)加入反应容器。室温下搅拌反应混合物16小时。真空下浓缩反应混合物。将残留物溶于水(20mL)并用EtOAc(2×10mL)萃取。弃去有机层并用浓HCl酸化水层至pH＝5。通过过滤收集沉淀而且真空下干燥，得到800mg(88％)的74e，无需进一步纯化即可使用。
制备化合物74(E)-4-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-N-(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基甲基)-4-甲基戊-2-烯酰胺. 将74e(70mg，0.26mmol)溶于THF(20mL)并冷却至-10℃。将氯甲酸乙酯(45mg，0.41mmol)加入反应容器并搅拌10min。加入三乙胺(60mg，0.59mmol)并搅拌混合物1.5h。维持反应混合物于-10℃并且加入胡椒基胺(50mg，0.33mmol)。搅拌反应混合物2h。下一步，将反应混合物倾入水(20mL)中并且用EtOAc(2×20mL)萃取。用硫酸钠干燥有机层，然后浓缩从而得到粗品。用闪式色谱法纯化该粗品(0-33％乙酸乙酯/己烷梯度)从而获得55mg(55％)的74.[M+H]+406.05；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.64(s，1H)，7.92(s，1H)，7.12(d，1H)，6.99(s，1H)，6.80(m，3H)，5.94(s，2H)，5.84(d，1H)，4.42(d，2H)，2.53(s，3H)，1.51(s，6H)。
实施例75
制备化合物754-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-N-(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基甲基)-4-甲基戊酰胺. 将74(100mg，0.25mmol)溶于冰醋酸(10mL)中。在N2环境下将10％Pd/C(10mg，0.025mmol)加至反应容器。然后将反应置于H2环境下并于室温搅拌30分钟。将水(10mL)加至反应容器并过滤该溶液。用二氯甲烷(3×10mL)萃取滤液。用20％氢氧化钠(10mL)洗涤合并的有机层。该有机层经硫酸钠干燥并浓缩从而得到80mg(80％)的75。[M+H]+408.05；1H-NMR(400MHz，CHCl3)δ8.75(s，IH)，7.99(s，IH)，7.24(m，IH)，7.13(m，IH)，6.83(m，IH)，6.81(m，IH)，6.77(m，IH)，6.02(s，2H)，5.66(m，IH)，4.35(s，2H)，2.62(s，3H)，2.20(t，2H)，2.11(t，2H)，1.44(s，6H). 实施例76
制备化合物764-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-N-(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基甲基)-4-甲基戊-1-胺. 将75(100mg，0.30mmol)溶于无水的THF(10mL)。将反应混合物冷却至0℃并向反应中加入硼氢化钠(1.4g，36mmol)，将冰醋酸(3g)加至反应混合物，有气体产生。反应混合物回流4小时。一旦反应混合物恢复至室温，加入氢氧化钾(20％w/w于水中，50mL)。用乙酸乙酯(3×20mL)萃取该溶液。合并有机层，经硫酸钠干燥并真空浓缩而得到粗品。应用闪式色谱法纯化该粗品(0-5％MeOH/DCM梯度)而得到30mg(31％)的76。[M+H]+394.29；1H NMR(400MHz，CHCl3)δ8.75(s，IH)，7.99(s，IH)，7.24(m，IH)，7.13(m，IH)，6.83(m，IH)，6.81(m，IH)，6.77(m，IH)，6.02(s，2H)，5.66(m，IH)，4.35(s，2H)，2.65(m，2H)，2.62(s，3H)，2.20(m，2H)，2.11(m，2H)，1.44(s，6H). 实施例77
步骤1 制备化合物77a苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(2-氧代-乙基)-氨基甲酸叔丁酯. 将草酰二氯(3.80g，29.9mmol)溶于二氯甲烷(50mL)中并冷却至-50℃。向反应中滴加DMSO(2.50g，32.0mmol)并搅拌该混合物1h。然后将苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(2-羟基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(3.50g，11.9mmol)加至反应并维持温度低于-50℃。将反应搅拌1小时。向反应中加入三乙胺(5.10g，50.4mmol)并升温至-15℃。加水(15mL)并搅拌该混合物30分钟。然后将有机层从水层分离开来，经硫酸钠干燥从而得到3.1g(.81％)的77a，直接用于下面的步骤。
步骤2 制备化合物77b1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-乙胺. 将Br2(1.60g，10.0mmol)加至0℃氢氧化钠(2.40g，60.0mmol)水(10mL)溶液中。将1ml制得母液加至反应容器。向反应容器中加入2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-异丁酰胺(250mg，1.02mmol)并搅拌该混合物1h。此后，加热溶液并于50℃搅拌1小时。溶液转移至分液漏斗并用乙酸乙酯萃取(3×10mL)。合并有机层，经硫酸钠干燥，真空浓缩并用闪式色谱法纯化(0-10％甲醇/二氯甲烷梯度从而得到80mg(38％)的77b。
步骤3 制备化合物77c苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-乙基氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯. 将77b(80mg，0.37mmol)溶于甲醇(5mL)随后加入77a(300mg，1.0mmol)。搅拌混合物3h。然后加入NaBH4(240mg，6.3mmol)。室温搅拌混合物15h。真空下浓缩反应混合物。将粗品溶于水(5mL)中并用乙酸乙酯萃取(3×10mL)。用硫酸钠干燥有机层并浓缩。应用闪式色谱法纯化该粗品(0-10％MeOH/DCM梯度)从而得到50mg(31％)的77c。
步骤4 制备化合物77盐酸N-1-(2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)丙烷-2-基)-N-2-(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基甲基)乙烷-1，2-二胺. 将3N盐酸乙醚溶液(15mL)加至77c(50mg，0.10mmol)同时在冰浴中冷却至0℃。搅拌该混合物6h并过滤从而得到固体，用无水乙醚洗(2×5mL)该固体。真空下浓缩滤液而得到26mg的77。[M+H]+395.28；1H NMR(400MHz，CHCl3)δ9.50(s，IH)，8.30(s，IH)，7.55(m，IH)，6.87(m，IH)，5.98(s，2H)，4.1(m，2H)，4.23(m，2H)，3.78(m，2H)，2.57(s，3H)，1.67(s，6H). 实施例78
步骤1 制备化合物78a3-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-丙-1-醇. 将3-(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基)丙酸(3.61g，18.6mmol)溶于无水的THF(5mL)并滴加至0℃的LiAlH4(710mg，18.6mmol)与无水THF(100mL)溶液中。在完成添加后，使混合物回流16小时。然后冷却该溶液至0℃，向反应中加水(10mL)，并且搅拌溶液20分钟。然后用乙酸乙酯(3×20mL)萃取该溶液。用硫酸钠干燥有机层并浓缩，从而得到3.20g(96％)的78a。
步骤2 制备化合物78b3-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-丙醛. 二氯甲烷(15mL)并且冷却至-50℃。然后将在二氯甲烷(5mL)中的草酰氯(18.4g，14.5mmol)加至反应。然后于-50℃滴加在二氯甲烷(5mL)中的DMSO(2.27g，29.0mmol)。5分钟后，滴加在二氯甲烷(10mL)中的78a(870mg，4.83mmol)。-50℃搅拌混合物3h，然后滴加三乙胺(5滴)并搅拌混合物10min。向反应中加水(20mL)并用二氯甲烷(3×20mL)萃取溶液。合并有机层，经无水硫酸钠干燥并真空下浓缩。应用闪式色谱法纯化该粗品(0-25％乙酸乙酯/己烷)从而得到700mg(81.4％)的78b。
步骤3 制备化合物78盐酸(3-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-丙基)-{2-[2-(2H-咪唑-1-基)-6-甲基-嘧啶-4-基]-2-甲基-丙基}-胺. 将2-[2-(2H-咪唑-1-基)-6-甲基-嘧啶-4-基]-2-甲基-丙胺(0.15g，0.65mmol)与78b(0.12g，0.65mmol)溶于甲醇(10mL)。加入冰醋酸(2滴)在冰浴中于0℃搅拌混合物3h。分批加入NaBH3CN(50mg，0.78mmol)并于室温搅拌混合物16h。将得到的溶液真空下浓缩并加入水(20mL)。用二氯甲烷(3×20mL)萃取该溶液，用无水硫酸钠干燥并浓缩，而得到粗品。应用闪式色谱法纯化该粗品(0-10％MeOH/DCM梯度)从而得到无色油状物。然后将得到的油状物溶于甲醇(10mL)。加入1M HCl溶液直至pH＝2并干燥该混合物2小时。浓缩该溶液得到30mg(11％)的78.[M+H]+394.28；NMR(400MHz，CHCl3)δ9.58(s，IH)，8.25(s，IH)，7.54(d，2H)，6.69(d，IH)，6.57(d，IH)，5.87(s，IH)，3.47(s，2H)，3.24(s，6H)，2.90(m，2H)，2.56(s，2H)，2.47(m，2H)，1.82(m，2H)，1.32(s，3H). 实施例79
制备化合物79根据制备实施例1c中描述的方法，应用N′-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺制备N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N′-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N，N’-二甲基-丙烷-1，3-二胺.[M+H]+387.66；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.29(s，IH)，7.64(t，IH)，7.07(t，IH)，6.81(s，IH)，6.72(m，2H)，5.93(s，2H)，3.60-3.50(s，3H)，3.39(s，3H)，3.11(br s，2H)，2.40(t，2H)，2.18(t，2H)，1.87(m，2H) 实施例80
制备化合物80根据制备实施例2e中描述的方法，应用4-碘代-1H-咪唑制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-{[3-(4-碘代-咪唑-1-基)-[1，2，4]噻二唑-5-基]-甲基-氨基}-丙基)-氨基甲酸叔丁酯。[M+H]+598.90. 实施例81
制备化合物81根据制备实施例2中描述的方法、应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(3-{[3-(4-碘代-咪唑-1-基)-[1，2，4]噻二唑-5-基]-甲基-氨基}-丙基)-氨基甲酸叔丁酯制备N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-[3-(4-碘代-咪唑-1-基)-[1，2，4]噻二唑-5-基]-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+ 499.32；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.12(s，IH)，7.71(s，IH)，6.76(s，IH)，6.70(m，2H)，5.91(s，2H)，3.65(s，3H)，3.70-3.50(br s，2H)，3.09(br s，2H)，2.64(t，2H)，1.87(m，2H)，1.62(br s，IH). 实施例82
制备化合物82根据制备实施例1c中描述的方法，应用N’-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺制备N-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-N′-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N，N’-二甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+ 401.55；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，IH)，7.64(s，IH)，7.10(s，IH)，6.80-6.75(m，3H)，4.24(s，4H)，3.67(s，3H)，3.14(s，3H)，2.67(t，2H)，1.87(t，4H). 实施例83
步骤1 制备化合物83a根据制备实施例23中描述的方法，应用(2-甲基氨基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯制备{2-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯。[M+H]+325.12. 步骤2 制备化合物83b根据制备实施例2中描述的方法，应用{2-[(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-甲基-氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯制备N-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-1-甲基-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+225.07. 步骤3 制备化合物83根据制备实施例127中描述的方法，应用(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙醛制备N’-[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+ 387.74；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.36(s，IH)，7.64(s，IH)，7.06(s，IH)，6.73(d，IH)，6.66(d，IH)，6.61(dd，2H)，4.21(s，4H)，3.74(br s，2H)，3.13(s，3H)，3.06(t，2H)，2.98(t，2H)，2.78(t，2H). 实施例84
制备化合物84根据制备实施例1c中描述的方法，应用N’-[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-乙烷-1，2-二胺制备N-[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N，N’-二甲基-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+401.33；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.31(s，IH)，7.69(s，IH)，7.04(s，IH)，6.70-6.50(m，3H)，4.13(s，4H)，3.74(br s，2H)，3.03(s，3H)，2.68(t，2H)，2.60-2.50(m，4H)，2.32(s，3H). 实施例85
制备化合物85根据制备实施例127中描述的方法，应用6和(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙醛制备N’-[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+401.29；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.33(s，IH)，7.65(s，IH)，7.08(s，IH)，6.76(d，IH)，6.68(d，IH)，6.63(dd，IH)，4.22(s，4H)，3.70-3.50(br s，2H)，3.11(s，3H)，2.89(t，2H)，2.80-2.70(m，4H)，1.97(m，2H). 实施例86
制备化合物86根据制备实施例1c中描述的方法，应用N’-[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺制备N-[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N，N’-二甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+415.86；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.29(s，IH)，7.64(s，IH)，7.06(s，IH)，6.74(d，IH)，6.67(d，IH)，6.62(dd，IH)，4.19(s，4H)，3.60-3.30(br s，2H)，3.08(s，3H)，2.68-2.52(m，4H)，2.41(t，2H)，2.27(s，3H)，1.83(m，2H). 实施例87
制备化合物87根据制备实施例127中描述的方法，应用6以及苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙醛制备N’-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+387.30；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.31(s，IH)，7.65(s，IH)，7.08(s，IH)，6.70(d，IH)，6.67(d，IH)，6.62(dd，IH)，5.91(s，2H)，3.70-3.50(br s，2H)，3.11(s，3H)，2.85(t，2H)，2.76-2.68(in，4H)，1.83(m，2H). 实施例88
制备化合物88根据制备实施例1c中描述的方法、应用N′-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-丙烷-1，3-二胺制备N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N，N’-二甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+401.30；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.28(s，IH)，7.63(s，IH)，7.06(s，IH)，6.69(d，IH)，6.65(d，IH)，6.60(dd，IH)，5.88(s，2H)，3.55-3.30(br s，2H)，3.08(s，3H)，2.66(t，2H)，2.55(t，2H)，2.42(t，2H)，2.27(s，3H)，1.81(m，2H). 实施例89
步骤1 制备化合物89a吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄酯. 将氯甲酸苄酯(29.7g，174mmol)滴加至溶于1N NaOH(350mL)的吡咯烷-2-羧酸(20.0g，174mmol)0℃溶液。在0℃搅拌该溶液30min。使溶液与室温相平衡同时搅拌过夜。通过加入1M HCl使溶液酸化至pH＝3。用乙酸乙酯(3×300mL)萃取得到的溶液。合并有机层，经MgSO4干燥并真空下浓缩从而得到40.4g(89％)无色油状的吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄酯粗品。
步骤2 制备化合物89b2-氨甲酰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯. 将吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄酯(30.0g，121mmol)溶于DCM(180mL)。使溶液冷却至0℃并于10min之后加入N-甲基-吗啉(12.8g，127mmol)。然后使溶液冷却至-15℃并滴加溶于DCM(30mL)之中的氯甲酸乙酯(13.7g，126mmol)。然后于-25℃搅拌该溶液2小时。下一步，将溶液至于NH3(气)下，同时维持温度低于-20℃。然后搅拌反应混合物1小时，而且使温度恢复至0℃。将溶液倾入H2O(120mL)中并将有机层从水层分离开来。然后用1N HCl(2×50mL)、1NNaHCO3(2×50mL)洗涤有机层，经MgSO4干燥并真空下浓缩而得到27.8g(88％)的无色油状的2-氨甲酰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯。
步骤3 制备化合物89c2-氰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯. 在N2环境下，将氨甲酰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯(25.0g，101mmol)溶于吡啶(125mL)中，并冷却至-10℃。将氧氯化磷(12.6mL，135mmol)溶于DCM(25mL)并40min以上滴加至吡啶溶液。维持反应混合物的温度在-10℃并搅拌溶液2小时。通过加入水/冰(100g)骤停反应并转移至分液漏斗。以乙醚(3×200mL)萃取该溶液。合并有机层并以饱和硫酸铜(200mL)洗涤。以MgSO4干燥有机层并真空下浓缩从而得到20.0g(82％)绿色油状的2-氰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯。
步骤4 制备化合物89d2-乙氧基碳亚氨基-吡咯烷-1-羧酸苄酯. 将2-氰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯(17.0g，73.9mmol)溶于二乙醚(100mL)中。加入乙醇(20.4g，444mmol)并使气态的HCl鼓泡通过反应混合物，同时温度维持于-20℃。保持该温度12小时同时搅拌。真空下浓缩反应混合物从而得到22.0g(95％)红色油状的2-乙氧基碳亚胺酰-吡咯烷-1-羧酸苄酯。
步骤5 制备化合物89e2-乙氧基硫代羰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯. 将盐酸2-乙氧基碳亚胺酰-吡咯烷-1-羧酸苄酯(42.8g，146.0mmol)溶于THF(150mL)中并冷却至-20℃。将吡啶(80ml)加至反应并使H2S鼓泡通过反应物60min。反应温度维持于-20℃、2小时同时搅拌。通过加入5M HCl调节pH值至pH＝4。将得到溶液转移至分液漏斗，并用二乙醚(3×100mL)萃取。合并有机层并用盐水(100ml)洗。以MgSO4干燥有机层并真空下浓缩从而得到20.0g(47％)黄色油状的2-乙氧基硫代羰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯。
步骤6 制备化合物89f2-(N’-乙酰基-胍基硫代甲酰基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯. 将1-乙酰胍(7.20g，71.0mmol)溶于THF(100mL)。冷却溶液至0℃并且向反应物以小批量地、5min以上加入NaH(1.90g，80.0mmol)。然后，将在THF(50mL)中的2-乙氧基硫代羰基-吡咯烷-1-羧酸苄酯(19.6g，66.9mmol)滴加至反应物，30分钟以上，同时维持温度于0-5℃之间。使反应恢复至室温，同时再搅拌12小时。加入石油醚使产物沉淀。弃去有机层而保留固体并且重新溶于水(300mL)。加入乙酸调pH至pH＝3。将得到的溶液转移至分液漏斗并以DCM(3×250mL)萃取。合并有机层，经MgSO4干燥并真空下浓缩从而得到13.0g(56％)2-(N’-乙酰基-胍基硫代甲酰基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯。
步骤7 制备化合物89g氢溴酸2-(3-乙酰氨基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯. 将2-(N’-乙酰基-胍基硫代甲酰基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯(13.0g，37.4mmol)溶于乙醇(80mL)中。将该乙醇溶液冷却至0℃并且将溶于氯仿(30mL)中的溴(6.50g，40.6mmol)滴加，5分钟以上。使得到的溶液恢复至室温同时搅拌3小时。真空下浓缩该反应混合物从而得到14.0g(88％)的氢溴酸2-(3-乙酰氨基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯。
步骤8 制备化合物89h2-(3-氨基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯. 将氢溴酸2-(3-乙酰氨基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯(14.0g，37.8mmol)溶于乙醇(80mL).使反应混合物冷却至0℃并且加入K2CO3(15.0g，108.7mmol)的H2O(40mL)溶液。使溶液恢复至室温同时搅拌30min。浓缩该溶液，重新溶于水(100mL)中并用DCM(3×50mL)萃取。合并有机层并用盐水(3×50mL)洗。将有机层从水层分离出来，经MgSO4干燥并真空下浓缩从而得到9.4g(94％)黄色油状的2-(3-氨基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯。
步骤9 制备化合物89i2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯. 将2-(3-氨基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯(9.40g，30.9mmol)溶于乙醇(80mL)，将乙二醛(40％重量比)(19.6g，101.4mmol)加至反应，并且使溶液回流达3小时。加入氯化铵(7.80g，146mmol)和磷酸钙(11.0g，110mmol)随后依次加入福尔马林(11.0g、40％水溶液，147mmol)同时将反应维持于回流16小时。真空下浓缩溶液。将粗的残留物溶于水(20mL)中并用乙酸乙酯(15mL)洗涤。以1N NaOH将水层碱化至pH＝9。然后用乙酸乙酯(2×100mL)萃取该水层。合并有机层并真空下浓缩从而得到7.2g(66％)红色油状的2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-1-羧酸苄酯。
步骤10 制备化合物89j3-咪唑-1-基-5-吡咯烷-2-基-[1，2，4]噻二唑. 将2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(359mg，1.01mmol)溶于二氧六环(2mL)和6M HCl(aq)(2mL)。将反应密封并加热至100℃，1h。使反应恢复至室温同时保持过夜。将反应混合物转移至分液漏斗并用1MNaOH(30mL)洗涤。将该水层重新用DCM(50mL)萃取。合并有机层，经Na2SO4干燥并真空下浓缩从而得到179mg(80.4％)3-咪唑-1-基-5-吡咯烷-2-基-[1，2，4]噻二唑。[M+H]+221.87. 步骤11 制备化合物89苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-甲基-胺. 将溶于DMF(1.8mL)中的盐酸苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-(2-氯代-乙基)-甲基-铵(130mg，492μmol)、3-咪唑-1-基-5-吡咯烷-2-基-[1，2，4]噻二唑(110mg，497μmol)、碘化钾(20mg，120μmol)以及TEA(200μL，1.44mmol)在140℃加热7min。将反应混合物冷却至室温并倾入10mL的1N K2HPO4(aq)/EtOAc(1∶1)。分离有机层并浓缩至粗的残留物。应用反相HPLC(5％至100％乙腈/H2O，0.1％TFA)纯化从而得到10mg(4％)苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-甲基-胺TFA盐。[M+H]+412.85；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.23(s，1H)，7.95(s，1H)，7.46(s，1H)，6.88(s，1H)，6.81(m，2H)，6.01(s，2H)，4.24(m，1H)，4.15(m，2H)，3.0-3.4(m，5H)，2.72(s，3H)，2.58(m，1H)，2.40(m，1H)，1.98(m，2H)，1.90(m，1H). 实施例90
步骤1 制备化合物90a根据制备实施例3中所描述的方法，应用(2-溴代-乙基)-氨基甲酸叔丁酯和3f制备[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺。[M+H]+373.47. 步骤2 制备化合物90b根据制备实施例2中所描述的方法，应用{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯制备2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙胺。[M+H]+273.81. 步骤3 制备化合物90根据制备实施例127中所描述的方法，应用(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙醛和2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙胺制备[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺。[M+H]+435.54；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.59(s，1H)，7.85(s，1H)，7.15(s，1H)，7.10(s，1H)，6.75(d，1H)，6.70-6.60(m，2H)，4.18(s，4H)，3.54(t，1H)，3.15(m，1H)，2.94-2.74(m，5H)，2.52(s，3H)，2.40-2.20(m，4H)，1.95-1.66(m，4H). 实施例91
制备化合物91根据制备实施例127中所描述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙醛和2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙胺制备(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺。[M+H]+421.55；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.57(s，1H)，7.86(s，1H)，7.17(s，1H)，7.10(s，1H)，6.90(d，1H)，6.65(d，1H)，6.60(dd，1H)，5.88(s，2H)，3.50(t，1H)，3.21(m，1H)，2.82-2.64(m，5H)，2.50(s，3H)，2.40-2.20(m，4H)，1.95-1.66(m，4H). 实施例92
制备化合物92(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺. 将溶于二氧六环(3mL)中的2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙胺(78mg，286μmol)、2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-甲醛(47mg，286μmol)以及对甲苯磺酸一水合物(5mg，26μmol)于60℃加热16h。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(180mg，860μmol)。室温搅拌反应混合物l小时。然后加入EtOAc(25mL)和1N NaOH(25mL)。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。硅胶色谱法(0％至10％MeOH/DCM)得到69mg(57％)的(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺。[M+H]+421.23；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(s，1H)，7.89(s，1H)，7.23(s，1H)，7.12(s，1H)，6.68-6.79(m，3H)，4.21(s，4H)，3.54(t，1H)，3.22(m，1H)，2.70-2.82(m，2H)，2.20-2.60(m，9H)，1.84(m，2H)，1.70(m，1H). 实施例93
制备化合物93(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-甲基-胺. 将溶于MeOH(1mL)中的(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基-吡咯烷-1-基)]-乙基}-胺(65mg，156μmol)、福尔马林(63μL，780μmol)以及乙酸(170μL，2.83mmol)室温搅拌5min。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(99mg，470μmol)。室温搅拌反应混合物20min然后浓缩至残留物。加入EtOAc(5mL)和1N NaOH(5mL)。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。硅胶色谱法(0％至10％MeOH/DCM)得到60mg(89％)的(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-甲基-胺。[M+H]+435.32；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.61(s，1H)，7.88(s，1H)，7.33(s，1H)，7.12(s，1H)，6.65-6.79(m，3H)，4.21(s，4H)，3.54(t，1H)，3.24-3.42(m，3H)，2.76(m，1H)，2.11-2.55(m，8H)，2.15(s，3H)，1.84(m，2H)，1.70(m，1H). 实施例94
制备化合物94根据制备实施例23中所描述的方法，应用5-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基氨甲酰基)-吡咯烷-2-羧酸乙酯制备5-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基氨甲酰基)-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸乙酯。分离得到消旋的3.14∶1.00旋光体混合物；[M+H]+486.15. 实施例95
制备化合物95根据制备实施例54中所描述的方法，应用5-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基氨甲酰基)-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸乙酯制备1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2，5-二羧酸2-酰胺5-[(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺。[M+H]+456.56. 实施例96
制备化合物96根据制备实施例54中所描述的方法，应用5-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基氨甲酰基)-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸乙酯和甲胺制备1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2，5-二羧酸2-[(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺]5-甲基酰胺。[M+H]+470.55. 实施例97
制备化合物97根据制备实施例44中所描述的方法，应用4-吡咯-1-基-苯甲醛制备N-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-N’-(4-吡咯-1-基-苄基)-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+402.25. 实施例98
根据制备实施例44中所描述的方法，应用3-氟代-4-甲氧基-苯甲醛制备N-(3-氟代-4-甲氧基-苄基)-N’-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+385.05. 实施例99
制备化合物99根据制备实施例44中所描述的方法，应用4-异丙氧基-苯甲醛制备N-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-N′-(4-异丙氧基-苄基)-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+395.40. 实施例100
制备化合物100根据制备实施例44中所描述的方法，应用3-羟基-4-甲氧基-苯甲醛制备5-({2-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基氨基]-乙基氨基}-甲基)-2-甲氧基-苯酚。[M+H]+383.06. 实施例101
制备化合物101根据制备实施例47中所描述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(苯并呋喃-5-基甲基)-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯制备N′-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-苯并呋喃-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+489.39. 实施例102
制备化合物102根据制备实施例47中所描述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(吡啶-3-基甲基)-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯制备N′-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-吡啶-3-基甲基-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+450.55. 实施例103
制备化合物103根据制备实施例47中所描述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-[3-(4-羟基-苄基氨基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯制备4-{[{3-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-丙基}-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-氨基]-甲基}-苯酚。[M+H]+464.96. 实施例104
制备化合物104根据制备实施例47中所描述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-[3-(4-甲硫基-苄基氨基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯制备N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-(4-甲硫基-苄基)-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+495.59. 实施例105
制备化合物105根据制备实施例47中所描述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-[3-(4-二甲基氨基-苄基氨基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯制备N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N’-(4-二甲基氨基-苄基)-N′-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+492.64. 实施例106
制备化合物106根据制备实施例47中所描述的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{3-[(1-甲基-1H-咪唑-4-基甲基)-氨基]-丙基}-氨基甲酸叔丁酯制备N’-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-(1-甲基-1H-咪唑-4-基甲基)-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+453.58. 实施例107
步骤1 制备化合物107a2-[(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-氨甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸9H-芴-9-基甲酯. 室温下将Fmoc-脯氨酸-OH(40mg，0.12mmol)加至13b(23mg，0.12mmol)二甲酰胺(2.0mL)溶液中，盐酸1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(30mg，0.16mmol)随后加入。搅拌溶液1h然后减压下浓缩反应混合物。用DCM(10mL)稀释残留物，水洗，经MgSO4干燥。过滤且浓缩得到44mg白色固体的2-[(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-氨甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸9H-芴-9-基甲酯。[M+H]+509.38. 步骤2 制备化合物107b吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺. 室温下将哌啶(800μL，8.09mmol)加至2-[(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-氨甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸9H-芴-9-基甲酯(435mg，0.855mmol)的二甲酰胺(3.2mL)溶液中。搅拌溶液20min然后真空下浓缩从而得到244mg棕色油状的吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+287.28. 步骤3 制备化合物1071-(4-三氟甲基-苄基)-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺. 室温下，将4-(三氟甲基)苯甲醛(22μL，0.16mmol)和醋酸(.075mL)加入吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺(43mg，0.15mmol)的二甲酰胺(1.5mL)溶液中。搅拌溶液2小时。室温下向该溶液中添加三乙酰氧基硼氢化钠(107mg，0.50mmol)。搅拌溶液16小时然后真空下浓缩。用DCM稀释得到的残留物，用NaOH(1N，30mL)以及水(30mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。应用质触发(mass-triggered)的LCMS纯化产物从而得到5mg白色固体的1-(4-三氟甲基-苄基)-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+444.96. 实施例108
制备化合物108根据制备实施例107中所描述的方法，应用3-三氟甲基-苯甲醛制备1-(3-三氟甲基-苄基)-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+445.01. 实施例109
制备化合物109根据制备实施例107中所描述的方法，应用吡啶-2-甲醛制备1-吡啶-2-基甲基-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+377.95. 实施例110
制备化合物110根据制备实施例107中所描述的方法，应用3，5-二甲氧基-苯甲醛制备1-(3，5-二甲氧基-苄基)-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+437.86. 实施例111
制备化合物111根据制备实施例107中所描述的方法，应用4-氟代-苯甲醛制备1-(4-氟代-苄基)-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+395.52. 实施例112
制备化合物112根据制备实施例107中所描述的方法，应用3，4-二氟代-苯甲醛制备1-(3，4-二氟代-苄基)-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+413.55. 实施例113
制备化合物113根据制备实施例107中所描述的方法，应用4-氯代-苯甲醛制备1-(4-氯代-苄基)-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+412.99. 实施例114
制备化合物114根据制备实施例107中所描述的方法，应用3-羟基-4-甲氧基-苯甲醛制备1-(3-羟基-4-甲氧基-苄基)-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+423.64. 实施例115
制备化合物115根据制备实施例107中所描述的方法，应用4-异丙氧基-苯甲醛制备1-(4-异丙氧基-苄基)-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+435.67. 实施例116
制备化合物116根据制备实施例107中所描述的方法，应用胡椒醛制备1-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+421.58. 实施例117
制备化合物117根据制备实施例107中所描述的方法，应用4-(2-羟基-乙氧)-苯甲醛制备1-[4-(2-羟基-乙氧基)-苄基]-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+437.62. 实施例118
制备化合物118根据制备实施例107中所描述的方法，应用呋喃-2-甲醛制备1-呋喃-2-基甲基-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+367.57. 实施例119
制备化合物119根据制备实施例107中所描述的方法，应用噻吩-3-甲醛制备1-噻吩-3-基甲基-吡咯烷-2-羧酸(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-酰胺。[M+H]+383.77. 实施例120
制备化合物120根据制备实施例23中所描述的方法，应用Boc-D-Pro-OH和2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙胺制备1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-酰胺。[M+H]+427.31；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.19(s，1H)，7.56(s，1H)，7.10(s，1H)，6.63-6.49(m，3H)，4.18-4.15(m，4H)，3.54-3.49(m，3H)，3.38-3.28(m，2H)，2.5(m，2H)，2.15(m，2H)，1.85(m，2H). 实施例121
步骤1 制备化合物121a2-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯. 将Boc-D-Pro-OH(209mg，0.970mmol)溶于DMF(4mL)中，随后加入HBTU(552mg，1.46mmol)以及三乙胺(270μL)。室温搅拌溶液30分钟，然后加入胡椒基胺(121μL，0.970mmol)。室温搅拌反应混合物16h然后将溶液转移至含有DCM(50mL)的分液漏斗。用NaHCO3(2×50mL，饱和溶液)洗有机层，经Na2SO4干燥。将所得溶液浓缩并以预制LCMS纯化，从而得到278.0mg(82.5％)的2-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯。[M+H]+349.09. 步骤2 制备化合物121b吡咯烷-2-羧酸(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-酰胺. 将2-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(278mg，0.80mmol)溶于DCM∶TFA(1∶1，6mL)中并室温搅拌3小时。此后，真空下浓缩得到的溶液。将粗产物稀释于DCM(50mL)中并用1M NaOH(aq)(50mL)洗涤从得到粗的残留物。应用闪式色谱法纯化该粗品(0-10％甲醇/DCM梯度)从而得到85.1mg(43％)吡咯烷-2-羧酸(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-酰胺。[M+H]+249.08. 步骤3 制备化合物1211-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-吡咯烷-2-羧酸(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-酰胺. 将吡咯烷-2-羧酸(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-酰胺(85mg，0.34mmol)溶于二氧六环(2.5mL)中。下一步，加入TsOH一水合物(30mg)以及1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙酮(69mg，0.34mmol)并将反应混合物于130℃微波化20min。在完成加热之后，使溶液恢复至室温并向反应容器中加入三乙酰氧基硼氢化钠(145mg，0.68mmol)，而且使其于室温再搅拌16小时。此后，真空下浓缩得到的溶液，用乙酸乙酯(50mL)稀释并转移至分液漏斗。用1M NaOH(50mL)洗涤有机层，经Na2SO4干燥并真空浓缩从而得到粗品。应用闪式色谱法纯化该产物(0-40％ACN/DCM梯度)从而得到12mg(8％)的1-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-吡咯烷-2-羧酸(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-酰胺。分离的产品为非对映体的混合物。[M+H]+435.03. 实施例122
步骤1 制备化合物122a(R)-[1-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基氨甲酰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯. 将Boc-D-Val-OH(282mg，1.30mmol)溶于DCE(5mL)中，随后加入CDI(253mg，1.56mmol)。室温搅拌反应溶液30分钟以使酸活化。此后，将3，4-亚甲基二氧苯乙胺HCl(263mg，1.30mmol)以及三乙胺(363μL)加至反应容器并室温搅拌16小时。下一步，真空下浓缩反应混合物。将粗产物重新溶于(edissolved)DCM(50mL)中，转移至分液漏斗，用饱和的NaHCO3(aq)(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩从而得到447.1mg(94.6％)的粗品，[1-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基氨甲酰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯，将其以粗品使用。[M+H]+365.00. 步骤2 制备化合物122b(R)-2-氨基-N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-3-甲基-丁酰胺. 将[1-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基氨甲酰基)-2-甲基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(447.1mg，1.23mmol)溶于1∶1TFA∶DCM(6mL)中并室温搅拌3小时。此后，真空除去溶剂。将粗产物溶于DCM(75mL)中并用1M NaOH(aq)(75mL)洗涤而得到游离碱的粗品。应用闪式色谱法(0-10％甲醇/DCM梯度)纯化该产物从而得到270.7mg(83.5％)的纯品，2-氨基-N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-3-甲基-丁酰胺。[M+H]+265.1 步骤3 制备化合物122(R)-N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基氨基)-3-甲基-丁酰胺. 将2-氨基-N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-3-甲基-丁酰胺(135mg，0.51mmol)溶于DMSO(2mL)以及三乙胺(150μL)中。下一步，将5-氯代-3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑(95.1mg，0.51mmol)加至反应容器并室温搅拌16小时。此后，加入一部分的盐水(50mL)并将混合物转移至分液漏斗，用乙酸乙酯(75mL)萃取。经Na2SO4干燥有机层，并真空下浓缩。应用闪式色谱法(0-50％ACN/DCM梯度)纯化该粗产物从而得到20.4mg纯品，N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基氨基)-3-甲基-丁酰胺。[M+H]+414.84；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.52(s，1H)，7.71(s，1H)，6.99(s，1H)，6.62-6.52(m，3H)，5.82-5.80(m，2H)，4.0(Br s，1H)，3.64-3.47(m，3H)，2.76-2.72(m，2H)，2.30-2.29(m，1H)，1.03-1.01(m，6H). 实施例123
制备化合物123(2R，4R)-4-羟基-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-酰胺. 根据制备实施例23中所描述的方法，应用顺式-D-4-羟基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯以及2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙胺制备(2R，4R)-4-羟基-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-酰胺。[M+H]+443.27；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.17(s，1H)，7.53(s，1H)，7.46(Br m，1H)7.09(s，1H)，6.65-6.51(m，3H)，4.61(m，1H)，4.19-4.14(m，4H)，3.61-3.46(m，4H)，2.74-2.36(m，6H). 实施例124
步骤1 制备化合物124a2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-吡咯烷-3-羧酸乙酯. 将2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶4-基)-吡咯烷-3-羧酸乙酯(300mg，0.996mmol)、37重量％的甲醛水溶液(500μL)、甲醇(8mL)以及乙酸(550μL)全部地合并在反应容器中并搅拌30min。下一步，加入三乙酰氧基硼氢化钠(530mg，2.49mmol)并室温下再搅拌溶液30min。此后，真空下浓缩反应混合物，溶于乙酸乙酯(75mL)中并倾入冰(25mL)中。用1M NaOH调节pH至pH＝8。将有机层与水层分离开，经Na2SO4干燥浓缩从而得到粗品。应用闪式色谱法(0-10％甲醇/DCM梯度)纯化该产物从而得到130mg(42％)2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-吡咯烷-3-羧酸乙酯。[M+H]+316.56. 步骤2 制备化合物124b2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-吡咯烷-3-羧酸. 将2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-吡咯烷-3-羧酸乙酯(130mg，0.41mmol)转移至20mL闪烁瓶(scintillation vial)并溶于THF(550μL)以及甲醇(550μL)中。下一步，将1M LiOH溶液(620μL)加入该瓶。室温搅拌该混合物1小时。在此时间之后，反应尚未完成，因此使其继续搅拌过夜。此后，浓缩反应物从而得到97mg的2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-吡咯烷-3-羧酸锂盐，直接用于后续的步骤。[M+H]+288.54. 步骤3 制备化合物1242-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-吡咯烷-3-羧酸[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-酰胺. 将2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-吡咯烷-3-羧酸(27.0mg，0.094mmol)溶于DMF(1mL)。下一步，加入HBTU(54.0mg，0.141mmol)。室温搅拌反应物30分钟，然后加入2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙胺(17.0mg，0.094mmol)以及三乙胺(50μL)。室温搅拌反应12h，然后加热至60℃、16h。此后，将反应混合物转移至含有乙酸乙酯(20mL)的分液漏斗。分别用饱和NaHCO3(aq)(30mL)和H2O(30mL)洗涤有机层。用乙酸乙酯重新萃取水层并且合并所有的有机层，经Na2SO4干燥并真空下浓缩。应用闪式色谱法(10g，0-10％甲醇/DCM梯度)从而得到3.3mg的2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-吡咯烷-3-羧酸[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-酰胺。分离的产物为非对映体的混合物；[M+H]+449.84. 实施例125
制备化合物1252-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-吡咯烷-3-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺. 将2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-吡咯烷-3-羧酸(31.9mg，0.111mmol)溶于DMF(1mL)。下一步，加入HBTU(64.0mg，0.167mmol)。室温搅拌反应物30分钟，然后加入盐酸3，4-亚甲基二氧苯乙胺(22.4mg，0.111mmol)以及三乙胺(50μL)。室温搅拌反应物12h，然后加热至60℃、16h。此后，将反应混合物转移至含有乙酸乙酯(20mL)的分液漏斗。用饱和NaHCO3(aq)(30mL)和H2O(30mL)洗涤有机层。用乙酸乙酯重新萃取水层并且合并所有的有机相，经Na2SO4干燥并真空下浓缩。应用闪式色谱法(10g，0-10％甲醇/DCM梯度)从而得到2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-1-甲基-吡咯烷-3-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺，分离的产物为非对映体的混合物；[M+H]+435.63. 实施例126
制备化合物126(2R，4S)-4-羟基-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-酰胺. 根据制备实施例23中所描述的方法，应用(2R，4S)-4-羟基-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-吡咯烷-2-羧酸[2-(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基)-乙基]-酰胺。[M+H]+443.79；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.31(s，1H)，7.73(s，1H)，7.07(s，1H)，6.65-6.62(m，3H)，4.57(m，1H)，4.17(m，4H)，3.86-3.82(m，1H)，3.45-3.40(m，3H)，2.72-2.69(m，2H)，2.38-3.32(m，2H)，2.19-2.17(m，2H). 实施例127
制备化合物127N’-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-乙烷-1，2-二胺. 将N-1-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-乙烷-1，2-二胺(1.94g，8.64mmol)溶于DCM(36mL)以及最小量的甲醇。然后加入苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙醛(709mg，0.930mmol)并室温搅拌该溶液10分钟。此后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.75g，12.9mmol)并且室温搅拌该反应物1小时。真空下浓缩反应混合物，溶于DCM(75mL)并转移至分液漏斗。然后用1M NaOH(aq)(100mL)以及盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。应用闪式色谱法(0-10％甲醇/乙酸乙酯至0-10％甲醇/DCM梯度)纯化粗产物从而获得875mg(55％)产物，N’-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+373.23；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，7.62(s，1H)，7.04(s，1H)，6.65-6.56(m，3H)，5.90(s，2H)，3.60(Br s，2H)，3.12(m，3H)，2.93(m，2H)，2.87(m，2H)，2.69(m，2H). 实施例128
制备化合物128N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N，N’-二甲基-乙烷-1，2-二胺. 将N’-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-N-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N-甲基-乙烷-1，2-二胺(438mg，1.20mmol)溶于甲醇(8mL)和乙酸(1.0mL)中并室温搅拌15分钟。此后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(750mg，3.60mmol)并且室温搅拌反应物。然后，真空下浓缩反应混合物。应用预制的LCMS纯化粗产物并将馏分浓缩。然后用1M NaOH中和该产物并且用DCM萃取，从而得到303mg的N-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-N’-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-N，N’-二甲基-乙烷-1，2-二胺。[M+H]+387.31；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.26(s，1H)，7.62(s，1H)，7.05(s，1H)，6.66-6.53(m，3H)，5.85(s，1H)，3.12(m，3H)，2.68-2.60(m，6H)，2.31(s，3H). 实施例129
步骤1 制备化合物129a(R)-3-(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基氨甲酰基)-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-羧酸叔丁酯. 将Boc-[3R]-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(277mg，1.00mmol)、盐酸2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙胺(202mg，1.00mmol)、HBTU(450mg，1.19mmol)以及三乙胺(0.5mL)混合于DMF(3mL)中，室温搅拌2h。加水并且用乙酸乙酯(2×30mL)萃取该溶液，盐水洗并经硫酸钠干燥。蒸发溶剂并应用柱色谱法纯化从而得到目标产物129a(520mg).[M+H]+425.00. 步骤2 制备化合物129b(R)-1，2，3，4-四氢-异喹啉-3-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基乙基)-酰胺. 室温搅拌129a的TFA/DCM(50％，5mL)溶液20min。蒸发溶剂并应用柱色谱法纯化从而得到289mg澄清油状的1，2，3，4-四氢-异喹啉-3-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基乙基)-酰胺。[M+H]+325.40. 步骤3 制备化合物129根据制备实施例23中所描述的方法制备(R)-2-(3-咪唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-1，2，3，4-四氢-异喹啉-3-羧酸(2-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-乙基)-酰胺。[M+H]+475.54. 实施例130 制备化合物130根据制备实施例1中所描述的方法制备N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N’-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-N-甲基-乙烷-1，2-二胺。应用手性HPLC(chiralcel ODH，4.6×150mm，Hex/IPA 96∶4(v/v)，流速1.0mL/min)分离得到实施例1的单一对映体。分析数据与实施例1相同。
实施例131 制备化合物131根据制备实施例1中所描述的方法制备N-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N’-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基]-N-甲基-乙烷-1，2-二胺。应用手性HPLC(chiralcel ODH，4.6×150mm，Hex/IPA 96∶4(v/v)，流速1.0mL/min)分离得到实施例1的单一对映体。分析数据与实施例1相同。
实施例132 制备化合物132根据制备实施例3中所描述的方法制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺。应用手性HPLC(chiralpak ADRH，4.6×150mm，10mM NH4OAc/EtOH 4∶6(v/v)，流速0.5mL/min)分离得到实施例3的单一对映体。分析数据与实施例3相同。
实施例133 制备化合物133根据制备实施例3中所描述的方法制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺。应用手性HPLC(chiralpak ADRH，4.6×150mm，10mM NH4OAc/EtOH 4∶6(v/v)，流速0.5mL/min)分离得到实施例3的单一对映体。分析数据与实施例3相同。
实施例134
步骤1 制备化合物134a二苯亚甲基-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-胺. 将盐酸(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)甲胺(20.4g，90.3mmol)和三乙胺(60.0mL，452mmol)混合于二氯甲烷(300mL)中室温搅拌30min，然后将该混合物真空下浓缩。将残留物溶于甲苯(500mL)，然后将二苯甲酮(57.5g，316mmol)以及对甲苯磺酸一水合物(4.50g，23.7mmol)加至该溶液。将得到的混合物加热至110℃，12h，然后真空下浓缩。用乙酸乙酯(2×500mL)萃取残留物，水洗(2×100mL)，经无水硫酸钠干燥并浓缩。应用柱色谱法纯化(1∶10EtOAc/己烷至EtOAc)产物从而得到黄色固体的二苯亚甲基-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基甲基)-胺(14.0g，42.6％)。
步骤2 制备化合物134b2-咪唑-1-基-4-甲基-6-哌啶-2-基-嘧啶. 氮气保护下，将正丁基锂(7.00mL、2.82M的环己烷溶液，19.8mmol)滴加至0℃的二异丙胺(2.8mL，19.8mmol)的无水THF(20mL)溶液，10分钟以上。在氮气保护下，将该溶液转移至-78℃的134a(5.00g，14.2mmol)与无水THF(200mL)的混合物。混合物升温至-45℃然后搅拌30min，然后滴加1，4-二碘代丁烷(6.60g，21.3mmol)，15分钟以上。将反应混合物升温至0℃并搅拌4小时。加入HCl(200mL、10％v/v溶液)水溶液并室温搅拌该混合物20min。用乙酸乙酯(2×100mL)萃取该混合物并且以NaOH(2N水溶液)调节水相层至pH＝10。用二氯甲烷(3×100mL)萃取该溶液并且通过无水硫酸钠干燥合并的有机层。浓缩并且应用柱色谱法纯化而得到1.38g的2-咪唑-1-基-4-甲基-6-哌啶-2-基-嘧啶。[M+H]+244.00. 步骤3 制备化合物134苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-哌啶-1-基]-乙基}-胺. 将甲磺酰氯(470mg，4.10mmol)于0℃滴加至2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-甲基-氨基)-乙醇(720mg，3.4mmol)的DCM(15mL)和吡啶(3mL)溶液，10分钟以上。撤去冰水浴并且使溶液于室温反应20min。真空下浓缩该反应物并加入乙腈(30mL)、三乙胺(2mL)以及134b(830mg，2.43mmol)。将溶液于65℃加热2h，然后冷却至室温而且搅拌12h。加水并且用乙酸乙酯(2×100mL)萃取该溶液，盐水洗并且经Na2SO4干燥。浓缩以及应用柱色谱法纯化从而得到293mg黄色油状的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-哌啶-1-基]-乙基}-胺。[M+H]+435.65.1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.58(s，1H)，7.86(s，1H)，7.20(s，1H)，7.09(s，1H)，6.68(s，1H)，6.62(m，2H)，5.86(s，2H)，3.59(t，1H)，3.40(s，1H)，3.00-3.30(m，3H)，2.30-2.60(m，6H)，2.00-2.20(m，6H)，1.30-1.80(m，4H).13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ175.7，169.6，154.3，147.8，146.6，136.4，133.1，130.4，122.0，116.8，115.8，109.3，107.9，101.0，69.5，62.6，58.4，54.4，53.4，42.8，41.7，34.8，25.8，24.3. 实施例135
步骤1 制备化合物135a3-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氧代丙酸乙酯. 将甲磺酸(200μL，3.08mmol)滴加至锌粉(70.4g，1.08mol)的无水THF(228mL)悬浮液并且加热该混合物至67℃。1小时后，加入2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-腈(20.0g，108mmol)的THF(120mL)溶液，随后依次滴加2-溴代乙酸乙酯(90.8g，540mmol)，1.5h以上。于67℃再搅拌该混合物30分钟，然后冷却至室温。通过真空过滤除去无机固体，以THF(200mL)洗，并且用3M的盐酸(200mL)将滤液调至pH＝1。室温搅拌溶液30分钟，然后真空下除去溶剂。得到黄色固体的3-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氧代丙酸乙酯并且直接用于下一步骤。
步骤2 制备化合物135b3-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-(2-(叔丁氧羰基)乙基亚氨基)丙酸(Z)-乙酯. 将2-氨基乙基(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.17g，7.37mmol)迅速地全部加至3-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-氧代丙酸乙酯(2.00g，7.29mmol)、乙醇(50mL)、甲叉二氯(50mL)以及4分子筛型(5g)的混合物。加入乙酸(417μL，7.29mmol)，然后加热至58℃，12h。冷却反应混合物至室温，通过过滤除去固体并且真空下浓缩滤液，从而得到淡黄色固体的(Z)-3-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-(2-(叔丁氧羰基)乙基亚胺基)丙酸乙酯。
步骤3 制备化合物135c3-[2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-乙基氨基]-3-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-丙酸乙酯. 室温下，将10％Pd/C(80mg)迅速地全部加至真空净化的(Z)-3-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-(2-(叔丁氧羰基)乙基亚胺基)丙酸乙酯(0.79g，1.4mmol)与乙醇(15ml)的溶液。在氢气环境下，搅拌反应混合物16h，然后通过硅藻土过滤。真空下浓缩滤液，并且应用柱色谱法(DCM至9∶1DCM/MeOH)纯化从而得到350mg(44％)黄色油状的3-[2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-乙基氨基]-3-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-丙酸乙酯。
步骤4 制备化合物135根据制备实施例2中所用的方法，应用3-[2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-乙基氨基]-3-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-丙酸乙酯制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-乙氧羰基-1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-乙基氨基]-乙基}-三氟乙酸铵。[M+H]+453.42. 实施例136
步骤1 制备化合物136a苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基氨甲酰基-乙基氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯. 将甲胺(800μL，40wt％水溶液)加至3-[2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-乙基氨基]-3-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-丙酸乙酯(15mg，0.027mmol)的THF(0.8mL)溶液。室温搅拌反应物16h，然后减压下浓缩。应用柱色谱法纯化(DCM至9∶1DCM/MeOH)得到的残留物从而得到14mg(96％)澄清油状的苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基氨甲酰基-乙基氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯。
步骤2 制备化合物136根据制备实施例2中所用的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基氨甲酰基-乙基氨基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[1-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基氨甲酰基-乙基氨基]-乙基}-三氟乙酸铵。[M+H]+438.57. 实施例137
步骤1 制备化合物137a2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-(甲基氨甲酰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯. 将甲胺(35mL、25wt％的THF溶液)迅速地全部加至1-叔丁基-3-乙基2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)吡咯烷-1，3-二羧酸酯(650mg，1.6mmol)THF(30mL)溶液。将反应混合物加热至60℃，12小时，然后冷却至室温。加水(50mL)并且用EtOAc(3×10mL)萃取得到的溶液。经Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并且真空下浓缩，从而得到黄色油状的2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-(甲基氨甲酰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(620mg)。
步骤2 制备化合物137b2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-N-甲基吡咯烷-3-甲酰胺. 将2，2，2-三氟乙酸(20.0mL，269mmol)于0℃滴加至2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-(甲基氨甲酰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(720mg，1.86mmol)的CH2Cl2(20mL)溶液，5分钟以上。将反应混合物升温至室温，30分钟以上，然后用Na2CO3(400mL，饱和水溶液)调至pH＝8。用CH2Cl2(5×30mL)萃取得到的混合物，用Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并真空下浓缩从而得到黄色油状的2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-N-甲基吡咯烷-3-甲酰胺(230mg，43％)。
步骤3 制备化合物137c2-(2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-(甲基氨甲酰基)吡咯烷-1-基)乙基(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基甲基)氨基甲酸叔丁酯. 将NaBH3CN(76mg，1.2mmol)迅速地全部加至搅拌的2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-N-甲基吡咯烷-3-氨甲酰胺(230mg，0.80mmol)、苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基甲基(2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(280mg，0.95mmol)、乙酸(100μL，1.59μmol)以及原甲酸三甲酯(20ml)的溶液中。室温下搅拌反应混合物16h，然后加水(20mL)。用EtOAc(2×20mL)萃取得到的溶液，用Na2SO4干燥合并的有机层，过滤和真空下浓缩。应用柱色谱法纯化(20∶1CHCl3/MeOH)该残留物从而得到100mg(22％)无色油状的2-(2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-(甲基氨甲酰基)吡咯烷-1-基)乙基(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基甲基)氨基甲酸叔丁酯。
步骤4 制备化合物1372-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基甲基氨基)乙基)-N-甲基吡咯烷-3-氨甲酰胺. 将2，2，2-三氟乙酸(5.00mL，67.3mmol)滴加至0℃的2-(2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-(甲基氨甲酰基)吡咯烷-1-基)乙基(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基甲基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.18mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液，5分钟以上。将反应混合物升温至室温，30分钟以上，然后加水(20mL)。用氢氧化铵(100mL)将溶液调至pH＝9，以CH2Cl2(3×10mL)萃取，用Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并真空下浓缩从而得到50mg(61％)黄色油状的2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-1-(2-(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基甲基氨基)乙基)-N-甲基吡咯烷-3-甲酰胺。[M-H]+462.00. 实施例138
步骤1 制备化合物138a氨基-4-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-丁酸乙酯. 在N2环境、0℃的条件下，将正丁基锂(1.50mL、2.82M己烷溶液，4.23mmol)滴加至二异丙胺(370mg，3.66mmol)和无水THF(10mL)的溶液，10分钟以上。搅拌该混合物10分钟，然后在N2环境下插管至(cannulated)-45℃的(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-N-(二苯亚甲基)甲胺(1.00g，2.83mmol)与无水THF(10mL)的溶液。搅拌反应混合物30分钟，然后滴加丙烯酸乙酯(341mg，3.41mmol)，10分钟以上。将反应混合物升温至室温，然后搅拌12h。将混合物冷却至0℃然后滴加HCl(50ml，10％v/v水溶液)，15分钟以上。将溶液升温至室温，用乙醚(3×30mL)萃取，而且用固体K2CO3调节水相层至pH＝8.5。用DCM(3×30mL)萃取得到的溶液，以Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并真空下浓缩从而得到1.10g棕色固体的氨基-4-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-丁酸乙酯。
步骤2 制备化合物138b根据制备实施例77c中的方法，应用氨基-4-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-丁酸乙酯以及77a制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-5-氧代-吡咯烷-1-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.60(s，1H)，7.90(s，1H)，7.18(s，1H)，6.93(s，1H)，6.72(s，2H)，6.68(s，1H)，5.94(s，2H)，4.97(m，1H)，4.60(m，1H)，4.30(m，1H)，4.07(m，2H)，2.90(m，1H)，2.59(s，3H)，2.48(m，2H)，2.04(m，1H)，1.50(s，9H). 步骤3 制备化合物138根据制备实施例2中的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-5-氧代-吡咯烷-1-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯制备盐酸1-{2-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-乙基}-5-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-2-酮。[M+H]+420.95.1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.52(s，1H)，8.18(s，1H)，7.59(s，1H)，7.40(s，1H)，6.75(m，3H)，5.93(s，2H)，4.91(m，1H)，4.29(m，1H)，4.05(m，2H)，3.10(m，1H)，2.99(m，2H)，2.60(m，1H)，2.58(s，3H)，2.44(m，1H)，2.00(m，1H). 实施例139
步骤1 制备化合物139a根据制备实施例77c中的方法，应用4-氨基-4-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-丁酸乙酯以及(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-(2-氧代-乙基)-氨基甲酸叔丁酯制备(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-5-氧代-吡咯烷-1-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯。
步骤2 制备化合物139根据制备实施例2中的方法，应用(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-5-氧代-吡咯烷-1-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯制备盐酸1-{2-[(2，3-二氢-苯并[1，4]二噁英-6-基甲基)-氨基]-乙基}-5-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-2-酮。[M+H]+435.48. 实施例140
步骤1 制备化合物140a根据制备实施例54中的方法，应用2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1，3-二羧酸1-叔丁酯3-乙酯制备3-氨甲酰基-2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯。
步骤2 制备化合物140b2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-3-硫代氨甲酰基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯. 在室温、N2环境下，将P2S5(60mg，0.27mmol)加至3-氨甲酰基-2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(110mg，0.30mmol)的二甲氧乙烷(10mL)溶液。将反应混合物加热至100℃、2小时，然后冷却至室温。加水(20mL)并用DCM(3×30mL)水萃取该溶液。用Na2SO4干燥被合并的有机层，过滤并且真空下浓缩从而得到100mg(86％)黄色油状的2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-3-硫代氨甲酰基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯。
步骤3 制备化合物140c2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-3-噻唑-2-基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯. 在室温、N2环境下，将碳酸钾(700mg，5.20mmol)和2-氯乙醛(400mg，5.20mmol)依次加入到2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-3-硫代氨甲酰基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(400mg，1.04mmol)的DME(10mL)溶液中。室温搅拌反应混合物16h，然后真空下过滤。浓缩滤液并将残留物溶于DME(10mL)中，然后冷却至0℃。加入三氟乙酸酐(655mg，3.12mmol)和吡啶(575mg，7.28mmol)并且室温下搅拌反应混合物4h。浓缩该混合物而且用DCM(20mL)稀释得到的残留物。水洗该溶液(2×30mL)，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。应用柱色谱法纯化(DCM至9∶1DCM/MeOH)该粗产物从而得到黄色油状的2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-3-噻唑-2-基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(200mg，50％)。
步骤4 制备化合物140d根据制备实施例2中的方法，应用2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-3-噻唑-2-基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯制备2-咪唑-1-基-4-甲基-6-(3-噻唑-2-基-吡咯烷-2-基)-嘧啶。
步骤5 制备化合物140e根据制备实施例77c中的方法，应用2-咪唑-1-基-4-甲基-6-(3-噻唑-2-基-吡咯烷-2-基)-嘧啶和77a制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-3-噻唑-2-基-吡咯烷-1-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯。
步骤6 制备化合物140根据制备实施例2中的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-3-噻唑-2-基-吡咯烷-1-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-3-噻唑-2-基-吡咯烷-1-基]-乙基}-胺。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，7.74(d，1H)，7.46(s，1H)，7.27(s，1H)，7.12(d，1H)，7.10(s，1H)，6.54-6.46(m，3H)，5.90(s，2H)，3.91(m，1H)，3.81(s，2H)，3.25(m，1H)，2.65(t，2H)，2.48(t，2H)，2.35(s，3H)，2.30-2.20(m，2H)，2.00(m，1H)，1.75(m，1H). 实施例141
制备化合物141a2-[1-叔丁氧羰基-2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-3-基]-噻唑-4-羧酸乙酯. 在室温、N2环境下，将3-溴代-2-氧代丙酸乙酯(350mg，1.79mmol)加至基2-(2-(1H-咪唑-1-基)-6-甲基嘧啶-4-基)-3-硫代氨甲酰吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(700mg，1.80mmol)的DCM(20mL)溶液。将反应混合物加热至100℃、2小时，然后冷却至室温。加入碳酸氢钠(20mL，饱和水溶液)并且用DCM(2×20mL)萃取该混合物。用Na2SO4干燥被合并的有机层，过滤并浓缩。然后应用柱色谱法纯化(DCM至9∶1DCM/MeOH)残留物从而得到500mg(80％)黄色油状的2-[1-叔丁氧羰基-2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-3-基]-噻唑-4-羧酸乙酯。
步骤2 制备化合物141b根据制备实施例2中的方法，应用2-[1-叔丁氧羰基-2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-3-基]-噻唑-4-羧酸乙酯制备2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-3-基]-噻唑-4-羧酸乙酯。
步骤3 制备化合物141c根据制备实施例77c中的方法，应用2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-3-基]-噻唑-4-羧酸乙酯和77a制备2-[1-[2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-乙基]-2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-3-基]-噻唑-4-羧酸乙酯。
步骤4 制备化合物141根据制备实施例2中的方法，应用2-[1-[2-(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-叔丁氧羰基-氨基)-乙基]-2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-3-基]-噻唑-4-羧酸乙酯制备2-[1-{2-[(苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基)-氨基]-乙基}-2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-吡咯烷-3-基]-噻唑-4-羧酸乙酯。[M+H]+562.45；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，7.90(s，1H)，7.46(s，1H)，7.27(s，1H)，7.10(s，1H)，6.54-6.46(m，3H)，5.90(s，2H)，4.29(q，2H)，3.91(m，1H)，3.81(s，2H)，3.25(m，1H)，2.65(t，2H)，2.48(t，2H)，2.35(s，3H)，2.30-2.20(m，2H)，2.00(m，1H)，1.75(m，1H)，1.30(t，3H). 实施例142
步骤1 制备化合物142a根据制备实施例77c中的方法，应用2-咪唑-1-基-4-甲基-6-哌啶-2-基-嘧啶和77a制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-哌啶-1-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯。
步骤2 制备化合物142根据制备实施例2中的方法，应用苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-哌啶-1-基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯制备苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-{2-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-哌啶-1-基]-乙基}-胺。[M+H]+421.39. 实施例143
制备化合物1433-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-N-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基-丙基]-丙酰胺. 将苯并[1，3]二氧戊环-5-基-丙酸(2.50g，12.9mmol)和亚硫酰氯(20mL，274mmol)加热至79℃，4小时，然后浓缩从而得到棕色油状的3-(苯并[d][1，3]二氧戊环-5-基)丙酰氯。加入2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基-丙胺(100mg，0.432mmol)和甲叉二氯(20mL)并且室温下搅拌反应混合物，约2小时。过滤反应混合物，用K2CO3(100mL，饱和水溶液)洗滤液，并且经Na2SO4干燥有机层。过滤，浓缩并应用柱色谱法纯化而得到40mg白色固体的3-苯并[1，3]二氧戊环-5-基-N-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基-丙基]-丙酰胺。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.90(s，1H)，7.92(s，1H)，7.05(s，1H)，6.90(s，1H)，6.70(m，3H)，5.90(s，2H)，3.59(d，2H)，2.94(t，2H)，2.57(s，3H)，2.40(t，2H)，1.28(s，6H). 实施例144
制备化合物144根据制备实施例13中的方法，应用2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基-丙胺制备1-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-3-[2-(2-咪唑-1-基-6-甲基-嘧啶-4-基)-2-甲基-丙基]-脲。[M+H]+409.04. 实施例145
制备化合物145根据制备实施例2中所述的方法，应用1，2，4-三唑钠制备N′-苯并[1，3]二氧戊环-5-基甲基-N-甲基-N-(3-[1，2，4]三唑-1-基-[1，2，4]噻二唑-5-基)-丙烷-1，3-二胺。[M+H]+374.12；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.91(s，1H)，8.06(s，1H)，6.84(s，1H)，6.74(d，1H)，6.69(d，1H)，5.91(s，2H)，3.85(s，3H)，3.64(br s，1H)，3.09(br s，2H)，2.82(t，2H)，2.05(m，2H)，1.99(s，2H). 应用上述的方法通常可制备如下化合物。可预料的是，一旦制备了这些化合物，它们将具有相似于上面实施例中已制备那些的活性。







下面的检验表明了在实施例1-145中的化合物作为NO合成酶抑制剂的活性。上面列出的其它化合物，尽管没有制备，但是可以预料在这些检验中也具有活性。
生物活性试验 酶的来源 一氧化氮合成酶(NOS)酶的来源可以产自于几种方法，包括如现有技术中已知的在各种细胞类型中应用细胞因子和/或脂多糖(LPS)诱导内源性iNOS。此外，如现有技术中已知，可以克隆编码酶的基因，并且通过来自具有适宜蛋白表达特征的、暂时或稳定表达质粒的异种表达可在细胞中产生所述酶。如现有技术中熟知，酶的活性(一氧化氮制造)对于iNOS而言是钙非依赖性的，而组成型NOS同工型nNOS和eNOS随着被添加至细胞培养基或提取物的各种辅因子的加入变成具有活性。表1中所示的酶是在用被标示的NOS同工型暂时转染的HEK293细胞中表达。
DAN检验 一氧化氮的主要代谢途径是成为硝酸盐和亚硝酸盐，它们在组织培养物、组织、血浆和尿中是稳定的代谢物(S Moncada，A Higgs，N Eng J Med 329，2002(1993))。在人类中进行的示踪剂试验已经证明，可能50％的全身硝酸盐/亚硝酸盐源自NO合成的底物、L-精氨酸(PM Rhodes，AM Leone，PL Francis，AD Struthers，S Moncada，Biomed Biophys Res.Commun.209，590(1995)；L.Castillo等，ProcNatl Acad Sci USA 90，193(1993)。尽管硝酸盐和亚硝酸盐不是生物学活性NO的计量，但是在合适的一段时间的禁食之后，以及任选地在给予控制饮食(较低硝酸盐/较低精氨酸)之后，从个体中获得的血浆和尿液样品允许硝酸盐和亚硝酸盐用作NO活性的系数(C Baylis，P Vallance，Curr Opin Nephrol Hypertens 7，59(1998))。
样品中硝酸盐或亚硝酸盐的水平可用现有技术中已知的任意提供了适当的灵敏度和重现性方法进行定量。也已描述了各种通过离子色谱法(例如，SAEverett等，J.Chromatogr.706，437(1995)；JM Monaghan等，J.Chromatogr.770，143(1997))、高效液相色谱法(如，M Kelm等，Cardiovasc.Res.41，765(1999))以及毛细管电泳法(MA Friedberg等，J.Chromatogr.781，491(1997))用于检测和定量在生物流体中亚硝酸盐和硝酸盐水平的方案。例如，2，3-二氨基萘与自发形成于NO的亚硝鎓离子反应，形成荧光产物1H-萘并三唑。应用2，3-二氨基萘(“DAN”)，研究人员已开发了一种快速、定量的荧光检验法，可检测10nM至10μM亚硝酸盐，并且兼容于多孔微孔板格式。DAN是Se和亚硝酸根离子的高度选择性光检测和荧光检测的试剂。DAN与亚硝酸根离子发生反应，产生荧光性的萘并三唑(MC Carré等，Analusis 27，835-838(1999))。表1提供了应用DAN检验的各种本发明化合物的检测结果。
如各种定量方法所要求的、或者为了改进结果、或者为了研究者的便利，可以先处理样品，然后检测硝酸盐或亚硝酸盐。例如，处理可包括离心、过滤或者均化样品。如果样品是全血，可将血液离心以除去细胞，并在血浆或者血清部分中进行硝酸盐或者亚硝酸盐的检验。如果样品是组织，那么在测定硝酸盐或亚硝酸盐之前，可以用现有技术中已知的方法分散或者均化该组织。优选地，用离心或另一种方法来除去细胞和其它残骸，仅使用样品流体的部分或者样品细胞外流体部分来测定硝酸盐或亚硝酸盐水平。也可以将样品保存用于以后的检测，例如冷冻尿或血浆样品。适当时，可向样品中加入添加剂以保存或者改善其用于硝酸盐或亚硝酸盐检验的特征。
硝酸盐、亚硝酸盐或其它NO相关产物的“水平”通常是指样品中或者样品的流体部分中硝酸盐或亚硝酸盐的浓度(以摩尔每升、微摩尔每升或者其它合适的单位)。但是，也可以使用其它的计量单位来表示硝酸盐或亚硝酸盐的水平。例如，可使用绝对量(以微克、毫克、纳摩尔、摩尔或者其它合适的单位)，尤其是当所述数量是指所涉及样品的常量(例如，克、千克、毫升、升或者其它适宜的单位)。可使用许多商业上可获得的试剂盒。
表1 角叉菜胶试验 将角叉菜胶皮下注射至大鼠后足(爪)诱导牢固的炎症和疼痛。炎性反应开始于角叉菜胶注射后的1-2小时并在接种后持续至少5小时。此外，与对侧的后足相比，大鼠发炎的后足对有害的(痛觉过敏)或者无害的(痛觉超敏)刺激敏感。可在这个模型中评价化合物的抗疼痛过敏和抗炎的活性。给药后，在给药后的反应的阈值或时间普遍提高表明具有止痛的功效。给药后，足肿胀的普遍降低表明具有抗炎的功效。可能有些化合物作用于发炎足而对对侧足没有作用。
实现角叉菜胶足水肿实验的实施方案所用的材料、试剂以及方法基本上如Winter等所描述的(Proc.Soc.Exp.Biol.Med.，111，544(1962))。每组中都选用了雄性Sprague-Dawley大鼠，因此平均体重尽可能相近(175-200g)。评价这些大鼠对有害的(足夹紧、足跖实验)或者无害的(低温板，von Frey细丝)刺激的反应性。
在预防性实施方案中，在测定“角叉菜胶前”反应后，经足跖(subplantar)注射给药试验化合物或安慰剂。在测定“角叉菜胶前”反应后，将大鼠的左后足用毛巾包裹，这样它的右后足伸出来。1小时后，同样地，皮下注射100μL、1％角叉菜胶/无菌生理盐水溶液至右后足的足跖。角叉菜胶注射3小时(以及任选地5小时)后，评价大鼠对有害或无害刺激的反应性，并且再次测量足的体积。将药物治疗组动物的收足阈值和平均足肿胀与安慰剂治疗组动物的那些相比较，并且测定抑制疼痛和/或水肿的百分数(Otterness和Bliven，Laboratory Models forTesting NSAIDs，in Non-steroidal Anti-Inflammatory Drugs，(J.Lombardino，ed.1985))。
在治疗性实施方案中，测定“角叉菜胶前”反应之后，经足跖注射给药100μL、1％角叉菜胶/无菌生理盐水溶液。在注射角叉菜胶后2小时，评价大鼠对有害的或无害的刺激的反应性，并且测量足的体积。该检测后，给药试验化合物或安慰剂的足跖注射液。在角叉菜胶注射3小时和5小时(在化合物/安慰剂注射1和3小时)后，评价大鼠对有害的或无害的刺激的反应性，而且再次测量足的体积。将药物治疗组动物的收足阈值和平均足肿胀与安慰剂治疗组动物的那些相比较，并且测定抑制疼痛和/或水肿的百分数。
福尔马林试验 皮下注射稀释福尔马林至大鼠的后足来诱导慢性疼痛。为了检验预防和治疗药物的有效性，在给药后观测一段时间的疼痛相关行为。测量咬后足、抓后足以及缩后足行为，以确定对试验化合物的反应。通常，注射福尔马林后，可观察到大量的咬和缩后足行为(“急性期”)，随后一段时间的无动作(10-15分钟，“中期”)，随后检验后期的疼痛行为复发(15-60分钟，“慢性期”)。与生理盐水治疗大鼠相比，用典型的止痛剂如吗啡治疗的大鼠表现更少的这些疼痛相关的行为。
大鼠的重量必须为250-300g，并且如果是未试验过的大鼠，使用前应当处理一次。可用试验过的大鼠，条件是它们已有至少5天的恢复，没有以前操作的残留影响，并且属于这种体重范围内。在8:00-2:00使用个体以最小化试验中白天时间的影响。
在预防性实施方案中，经足跖注射给药试验化合物或安慰剂。1小时后，皮下注射给药50μL、5％福尔马林/无菌盐水。然后如上所述，评价疼痛相关的行为。
在治疗性实施方案中，皮下注射给药50μL、5％福尔马林/无菌盐水。15分钟后(即，“中期”之中)，经足跖注射给药检验的化合物或者安慰剂。然后如上所述，评价疼痛相关的行为。
辣椒素试验 皮下注射稀释的辣椒素至大鼠后足，产生暂时性但是显著性的痛觉过敏、痛觉超敏以及疼痛。这种影响可通过以适当的药物如局部麻醉剂或止痛剂预处理而减轻，而且通过评价响应于上述有害的或无害的刺激的疼痛相关行为可定量化这种减轻的程度；用已知止痛剂预处理的大鼠表现为比对照更少的疼痛和痛觉超敏相关行为。也可以以这种方式评价化合物作为潜在止痛剂的功效。
使用体重为180至250克之间的雄性Lewis大鼠。将大鼠的右后足浸入载体(100％丙酮)或在载体中的化合物内30秒，然后使其风干30秒。为了防止动物将化合物从足舔掉，用湿纸巾将足擦拭两次。在应用载体或化合物后15分钟，将0.1mg的10μL辣椒素注射至右后足。在注射辣椒素后0.5至1小时，进行痛觉超敏的测量。
一种定量痛觉超敏的方法可测量大鼠响应于存在的直径增加的von Frey细丝的行为。将每只大鼠放置于在可升降筛上的小透明笼中。开始于4.31，von Frey细丝垂直于右中部足跖后足6-8秒，力量足以产生轻轻的扣紧。如果演示提高了后足，那么不予考虑，原因是它改变了刺激的性质。如果足在刺激开始或初级阶段急剧地收缩，那么记录为阳性的反应。移动被认为是模糊的反应，因此重复演示。刺激可以连续的方式而演示。阳性反应需要接着立刻演示更低重量的细丝；同样地，无反应则需要更强的。演示继续直至一系列六个连续的反应，从记录的第一个变化计。然后试验下一个大鼠。这种方法是现有技术中用于测量痛觉超敏的标准，但是也可以使用现有技术中已知的可提供合适的灵敏度和重现性的任何其它方法来代替。
脊椎神经结扎手术 在大鼠中可诱导脊神经后根L5和L6的神经病。Kim S.H.，和Chung J.M.，Anexperimental model for peripheral neuropathy produced by segmental spinal nerveligation in the rat.Pain 50355-363(1992)。这些神经根的紧密结扎产生慢性神经性疼痛症状，表现为痛觉超敏和痛觉过敏。在大鼠中可以评估潜在止痛剂对痛觉超敏和痛觉过敏的功效，其方案和步骤描述于并由Yaksh.Yaksh T.等，Physiologyand Pharmacology of Neuropathic Pain，Anesthesiology Clinics of North America，Vol.14，Number 2(1997)，334至352页改编。
测量足的体积(水肿) 当注射刺激物如CFA i.pl.导致与未注射的足相比足的体积增加，则可通过测量足的体积(用ml)定量化炎症或水肿。因此，足体积的测量是可用于定量在给予炎性剂后减轻炎症的治疗能力的方法。
利用UGO Basile器官血流测定仪以ml测量足体积来进行这种操作。起始工作包括将溶液充入仪器，然后校准设备。每2至3天必须改变溶液，进行每次实验时均应当确定校准。涉及设备操作的详细说明包括在手册中，这里不予描述。
足体积测量的操作比较简单。对于每只动物，设备应当首先调至零处。然后，将动物的被刺激足放入测量仪接受器，这样上至踝的整个足都被浸入。当足被正确地浸入并且限制活动时，压下足踏板。这种踏板用作此刻设备测量在测量室内(和因此足体积)的体积变化。将动物放回其原来的笼中，然后试验下一个动物。
有时，测量接受器必须重新填充至最高线，因为重复的动物试验使溶液离开接受器到动物的足上，从而逐渐地消耗了设备中溶液的量。现在可以将设备调至零处并且可准备再次使用。
一般地在炎性诱导之前(基线)以及发炎后几个时间点获得足体积测量值。可以使用这些物质，例如CFA、角叉菜胶和辣椒素，但是，这些物质产生的炎症发生于不同的时间。
LPS激发 用LPS激发可以定量iNOS诱导的抑制。在注射脂多糖(LPS)——一种革兰氏阴性细菌产生的物质之后，可以观测到发炎、水肿以及脓血症发生。已表明注射LPS诱导iNOS转录，导致可检测的iNOS和NO提高。(Iuvone T等，Evidencethat inducible nitric oxide synthase is involved in LPS-mediated plasma leakage in ratskin through the activation of nuclear factor-κB，Br J Pharm 1998123 1325-1330.)。如上所述，样品中一氧化氮的水平可通过与由化学发光、荧光、光度法分析测定的血浆硝酸盐或亚硝酸盐水平的相关性定量化，或者应用现有技术中已知的、可提供合适灵敏度和重现性的所有方法，包括上面描述的方法定量化。
在试验中使用重量为150-250g的雄性Lewis大鼠。在给药LPS之前，可将大鼠禁食最多16小时。保持可自由获得水。与LPS一同或者单独地给药试验化合物。将化合物溶于用于口服给药的、0.5％methycele/0.025％吐温20或者20％encapsin的载体。对于静脉内用药，将化合物溶于生理盐水或者0.5-3％DMSO/20％encapsin中。用药的体积为口服1-2ml、静脉内给药0.3-1ml。
将在生理盐水中的LPS(麻醉下)静脉内或者腹膜内注射，剂量为0.1-10mg/kg、体积不超过1ml。针头为26-30号。在LPS注射之后，大鼠通常表现为流感样症状，主要包括缺乏活动以及腹泻。在常规的筛选实验中，在LPS注射1.5-6小时后处死大鼠，在麻醉下进行肢端放血从而收集1-3ml血样，然后将动物以CO2实施安乐死。
下面的表2列出了根据上述实验检验的本发明化合物。
表2 从以上的描述中，本领域的技术人员可以容易地确定本发明的基本特征，并且没有离开本发明的精神和范围的情况下，可以对本发明作出改变和修饰，使其适于各种用途和情况。
权利要求
1.一种式II的化合物
或者其盐、酯或前药，其中
T、V、X和Y独立地选自CR4和N；
Z选自CR3和N；
W和W’独立地选自CH2、CR7R8、NR9、O、N(O)、S(O)q和C(O)；
n、m和p独立地为0至5的整数；
q为0、1或2；
R3、R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；或者R14和R15可一起不存在，形成另外的键；
R5、R6、R7、R8和R9独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)R12、-NSO2N(R11)R12、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)-[C(R14)R15]rR12、-[C(R14)R15]r-OR11、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R13)-[C(R14)R15]r-R12、-C(O)-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-N(R13)C(O)-L-(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-N(R11)C(O)N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-L-C(O)N(R11)R12；或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基、或任选地取代的杂环烷基；
t为0至2的整数；
r为0至5的整数；
L选自任选地取代的3-至7-元碳环基团、任选地取代的3-至7-元杂环基团、任选地取代的6-元芳基，以及任选地取代的6-元杂芳基；
R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-OR17、-S(O)tR17、-[C(R14)R15]r-C(O)OR17、-[C(R14)R15]r-N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R16)C(O)N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)OR18、-[C(R14)R15]r-R17和-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)R18；或者R11或R12可以由以下的结构来定义
和
其中
u和v独立地为从0至3的整数；和
X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、任选地取代的低级烷基、任选地取代的低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基；和
条件是
当Z为CR3，以及T和Y各是CR4，那么X不是N；
Z、T、Y或X的至少一个是N；和
由
部分形成的6-元环取代基不是5，6，7，8-四氢吡啶并[3，4-d]嘧啶的一部分。
2.如权利要求1所述的化合物，其中V是CR4。
3.如权利要求2所述的化合物，其中Z是CR3且Y是N。
4.如权利要求3所述的化合物，其中T是CR4。
5.如权利要求4所述的化合物，其中X是N。
6.如权利要求4所述的化合物，其中X是CR4。
7.如权利要求3所述的化合物，其中T是N。
8.如权利要求7所述的化合物，其中X是N。
9.如权利要求5所述的化合物，其中
R5、R6、R7、R8和R9独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R12)-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-N(R11)C(O)N(R12)R13-[C(R14)R15]r-L-R12；
R3、R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯和低级炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；和
R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的杂芳基、低级烯和低级炔；或者R11或R12可以由以下结构来定义
和
其中
u和v独立地为从0至3的整数；和
X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
10.如权利要求9所述的化合物，其中
R7、R8和R9独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-N(R11)C(O)N(R12)R13-[C(R14)R15]r-L-R12；并且
R5和R6独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12和-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12，或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或任选地取代的杂环烷基。
11.如权利要求10所述的化合物，其中R7或R9独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12和-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12。
12.如权利要求11所述的化合物，其中W为CH2且W’为NR9，而且n、m和p各自独立地为从0至2的整数。
13.如权利要求12所述的化合物，其中R9选自-C(O)N(R11)R12和-[C(R14)R15]r-N(R11)R12。
14.如权利要求13所述的化合物，其中R9为-[C(R14)R15]r-N(R11)R12。
15.如权利要求14所述的化合物，其中r是2。
16.如权利要求15所述的化合物，其中R11选自氢和低级烷基。
17.如权利要求16所述的化合物，其中R12被定义为如下的结构式
其中
u和v独立地为从0至3的整数。
18.如权利要求17所述的化合物，其中u和v独立地为1或2。
19.如权利要求18所述的化合物，其中R11选自氢和甲基。
20.如权利要求19所述的化合物，其中R11为氢。
21.如权利要求20所述的化合物，其中p和m为1且n为0。
22.如权利要求21所述的化合物，其中R14和R15为氢。
23.如权利要求22所述的化合物，其中R4、R5、R6和R10为氢。
24.如权利要求23所述的化合物，其中R3为甲基。
25.如权利要求24所述的化合物，其中u和v各自为1。
26.如权利要求25所述的化合物，其中T为CR4且X为N。
27.一种式IV的化合物
或者其盐、酯或前药，其中
T、X和Y独立地选自CR4、N、NR4、S和O；
U为CR10或N；
V为CR4或N；
R1和R2独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)R12、-NSO2N(R11)R12、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]rN(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)-[C(R14)R15]rR12、-[C(R14)R15]r-N(R13)-C(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)S(O)t-C(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-OR11、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R13)-[C(R14)R15]r-R12、-C(O)-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-N(R13)C(O)-L-(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-N(R11)C(O)N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-L-C(O)N(R11)R12；
t为O至2的整数；
r为0至5的整数；
L选自任选地取代的3-至7-元碳环基团、任选地取代的3-至7-元杂环基团、任选地取代的6-元芳基，以及任选地取代的6-元杂芳基；
R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；或者R14和R15可一起不存在，形成另外的键；
R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-OR17、-S(O)tR17、-[C(R14)R15]r-C(O)OR17、-[C(R14)R15]r-N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R16)C(O)N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)OR18、-[C(R14)R15]r-R17和-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)R18；或者R11或R12可以由以下结构来定义
和
其中
u和v独立地为从0至3的整数；和
X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、任选地取代的低级烷基、任选地取代的低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基；
条件是
当T是NR4时，那么被键合在T上的R4取代基不是甲基、正丁基或者CH(O-乙基)2；
当T和Y各自是NR4时，那么X不是NR4；
当T是N、X是S、Y是N、U是N并且R1是氢时，R2不是氢、甲基、苯基、-C(O)R或者-C(S)R；
当T是CR4、X是S、Y是CR4、U是CR10、R1是氢并且R2是氢时，R10取代基不是-C(O)H、烯基或者-CH2C(O)CH3；
当U是CR10时，那么R1、R2或R4都不是OH；
当X是NR4时，那么键合在X上的R4取代基不是氢或者取代的苯基；
当Y是NR4时，那么被键合在Y上的R4取代基不是甲基、苯基或者取代的苯基；
当Y是CR4时，那么R4不是苯基或取代的苯基；并且
Z、T、Y或X的至少一个是S、O或NR4。
28.如权利要求27所述的化合物，其中
T和X独立地选自CR4和N，并且
Y选自S和O。
29.如权利要求27所述的化合物，其中
T选自S和O，并且
X和Y独立地选自CR4和N。
30.如权利要求29所述的化合物，其中Y是N。
31.如权利要求30所述的化合物，其中X是N。
32.如权利要求31所述的化合物，其中T是S。
33.如权利要求32所述的化合物，其中V为CR4。
34.如权利要求29所述的化合物，其中
R1和R2独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R12)-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)-C(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)S(O)t-C(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-N(R11)C(O)N(R12)R13-[C(R14)R15]r-L-R12；或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或任选地取代的杂环烷基；
R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯和低级炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；和
R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的杂芳基、低级烯和低级炔；或者R11或R12可以由以下结构来定义
和
其中
u和v独立地为从0至3的整数；和
X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
35.如权利要求34所述的化合物，其中
R1选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)-C(O)N(R11)R12和-[C(R14)R15]r-N(R13)S(O)t-C(O)N(R11)R12；和
R2选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12和-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12。
36.如权利要求35所述的化合物，其中R1选自氢、卤素、低级烷基、卤代烷基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、低级烯、低级炔、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)H、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)-C(O)N(R11)R12和-[C(R14)R15]r-N(R13)S(O)t-C(O)N(R11)R12。
37.如权利要求36所述的化合物，其中U是N。
38.如权利要求37所述的化合物，其中R1选自-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-C(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)-C(O)N(R11)R12和-[C(R14)R15]r-N(R13)S(O)t-C(O)N(R11)R12。
39.如权利要求37所述的化合物，其中R12选自NH2和杂芳基，或者以如下结构式定义
和
其中
u和v独立地为从0至3的整数；和
X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
40.如权利要求39所述的化合物，其中X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基。
41.如权利要求39所述的化合物，其中R9为-[C(R14)R15]r-N(R11)R12。
42.如权利要求40所述的化合物，其中R12以如下结构式定义
并且u和v独立地为1或2。
43.如权利要求42所述的化合物，其中R14和R15都是氢。
44.如权利要求43所述的化合物，其中R2选自氢和低级烷基。
45.如权利要求45所述的化合物，其中R11是氢或甲基。
46.如权利要求46所述的化合物，其中R2是甲基。
47.如权利要求47所述的化合物，其中R10、R11和R4是氢，且u和v为1。
48.如权利要求48所述的化合物，其中Y和X为N，T为S，且V为CR4。
49.一种抑制iNOS二聚化的方法，其包括对个体给药一种式II的化合物
或者其盐、酯或前药，其中
T、V、X和Y独立地选自CR4和N；
Z选自CR3和N；
W和W’独立地选自CH2、CR7R8、NR9、O、N(O)、S(O)q和C(O)；
R3、R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；或者R14和R15可一起不存在，形成另外的键；
R5、R6、R7、R8和R9独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)R12、-NSO2N(R11)R12、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)-[C(R14)R15]rR12、-[C(R14)R15]r-OR11、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R13)-[C(R14)R15]r-R12、-C(O)-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-N(R13)C(O)-L-(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-N(R11)C(O)N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-L-C(O)-N(R11)R12；或者R5和R6可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基、或任选地取代的杂环烷基；
t为0至2的整数；
r为0至5的整数；
L选自任选地取代的3-至7-元碳环基团、任选地取代的3-至7-元杂环基团、任选地取代的6-元芳基，以及任选地取代的6-元杂芳基；
R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-OR17、-S(O)tR17、-[C(R14)R15]r-C(O)OR17、-[C(R14)R15]r-N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R16)C(O)N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)OR18、-[C(R14)R15]r-R17和-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)R18；或者R11或R12可以由以下结构来定义
和
其中
u和v独立地为从0至3的整数；和
X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、任选地取代的低级烷基、任选地取代的低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
50.一种抑制iNOS二聚化的方法，其包括对个体给药一种式IV的化合物
或者其盐、酯或前药，其中
T、X和Y独立地选自CR4、N、NR4、S和O；
U为CR10或N；
V为CR4或N；
R1和R2独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-(O)N(R11)R12、-P(O)[N(R11)R12]2、-SO2NHC(O)R11、-N(R11)SO2R12、-SO2N(R11)R12、-NSO2N(R11)R12、-C(O)NHSO2R11、-CH＝NOR11、-OR11、-S(O)t-R11、-N(R11)R12、-N(R11)C(O)N(R12)R13、-N(R11)C(O)OR12、-N(R11)C(O)R12、-[C(R14)R15]r-R12、-[C(R14)R15]r-C(O)OR11、-[C(R14)R15]r-[C(O)OR11]2、-[C(R14)R15]rC(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R11)-[C(R14)R15]rR12、-[C(R14)R15]r-N(R13)-C(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-N(R13)S(O)t-C(O)N(R11)R12、-[C(R14)R15]r-OR11、-N(R11)-[C(R14)R15]r-R12、-N(R11)C(O)N(R13)-[C(R14)R15]r-R12、-C(O)-[C(R14)R15]r-N(R11)R12、-N(R13)C(O)-L-(R11)R12、-N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-N(R11)C(O)N(R11)-[C(R14)R15]r-L-R12、-[C(R14)R15]r-L-R12和-L-C(O)N(R11)R12；
t为0至2的整数；
r为0至5的整数；
L选自任选地取代的3-至7-元碳环基团、任选地取代的3-至7-元杂环基团、任选地取代的6-元芳基，以及任选地取代的6-元杂芳基；
R4、R10、R14、R15、R16、R17和R18独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、任选地取代的卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔；或者R14和R15可一起形成羰基、任选地取代的碳环或任选地取代的杂环；或者R14和R15可一起不存在，形成另外的键；
R11、R12和R13独立地选自氢、卤素、任选地取代的烷基、卤代烷基、卤代烷氧基、任选地取代的芳烷基、任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的杂芳烷基、任选地取代的烯、任选地取代的炔、-OR17、-S(O)tR17、-[C(R14)R15]r-C(O)OR17、-[C(R14)R15]r-N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R16)C(O)N(R17)R18、-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)OR18、-[C(R14)R15]r-R17和-[C(R14)R15]r-N(R17)C(O)R18；或者R11或R12可以由以下结构来定义
和
其中
u和v独立地为从0至3的整数；和
X1和X2独立地选自氢、卤素、羟基、低级酰氧基、任选地取代的低级烷基、任选地取代的低级烷氧基、低级卤代烷基、低级卤代烷氧基和低级全卤代烷基；或者X1和X2可一起形成任选地取代的芳基、任选地取代的杂芳基、任选地取代的环烷基或者任选地取代的杂环烷基。
51.一种药物组合物，其含有如权利要求1或27所述的化合物以及药学上可接受的载体。
52.如权利要求51所述的药物组合物，其被制成用于局部给药的制剂。
53.一种治疗在一氧化氮产生方面异常而导致的疾患的方法，其包括对哺乳动物给予治疗上有效量的如权利要求1或27所述的化合物，该哺乳动物具有在-氧化氮产生方面异常而导致的疾患。
54.如权利要求53所述的方法，其中所述的疾患选自神经性疼痛、疱疹后神经痛以及类风湿性关节炎。
55.一种在有此需要的个体中治疗疼痛的方法，所述的方法包括对所述个体给予治疗上有效量的如权利要求1或27所述的化合物。
56.如权利要求1或27所述的化合物或者组合物，其用于制造用于预防或治疗通过iNOS抑制而改善的疾病或疾患的药品。
57.一种选自实施例1至145的化合物。
全文摘要
本发明涉及用作一氧化氮合成酶抑制剂的化合物和方法。本发明的某些化合物具有如下的结构式其中T、V、X和Y独立地选自CR4和N；Z选自CR3和N；W和W’独立地选自CH2、CR7R8、NR9、O、N(O)、S(O)q和C(O)；n、m和p独立地为从0至5的整数；q为0、1或2；而且其它的取代基如这里所定义。本发明的其它化合物具有如这里所定义的结构式。这里还公开了药物组合物，其含有本发明的化合物。
文档编号C07D405/14GK101123962SQ200580040524
公开日2008年2月13日 申请日期2005年11月28日 优先权日2004年12月1日
发明者T·C·加曼, H·朗, M·R·赫伯特, A·M·塞耶, C·A·哈西格, S·A·诺布尔, R·D·卡曾斯, H·庄, C·R·桑托斯, X·陈 申请人:凯利普西斯公司