抗il-22ra抗体和结合伴侣及其在炎症中的使用方法

专利名称：：抗il-22ra抗体和结合伴侣及其在炎症中的使用方法
技术领域：
：本发明涉及阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-22和/或IL-2的多肽分子。具体而言，本发明提供了IL-22RA抗体和结合伴侣，即可溶性IL-22RA受体和中和性抗IL-22RA抗体。本发明进一步提供了所述拮抗剂在炎性疾病中的使用，以及相关的组合物和方法。
背景技术：
：相关申请的引用本申请要求2004年10月22日提交的美国临时申请系列号60/621,553的利益，该临时申请在此引用作为参考。细胞因子是介导各种生物学效应的可溶性小蛋白，所述效应包括生长的调节和许多细胞类型的分化(参见，例如，Arai等人，Annu.Rev.Biochem.59:783(1990);Mosmann，Curr.Opin.Immunol.3:311(1991);Paul和Seder,Cell76:241(1994))。构成细胞因子群体的蛋白包括白细胞介素、干扰素、集落剌激因子、肿瘤坏死因子和其他调节分子。例如，人白细胞介素-17是刺激白细胞介素-6、细胞内粘着分子1、白细胞介素-8、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和前列腺素E2表达的细胞因子，并且在CD34+造血前体优先地成熟为嗜中性粒细胞中起着重要作用(Yao等人，J.Immunol.155:5483(1995);Fossiez等人,J.Exp.Med.183:2593(1996))。结合细胞因子的受体一般由一种或多种整联膜蛋白构成，所述膜蛋白高度亲和性地结合细胞因子并将该结合事件通过某些受体亚基的细胞质部分传导给细胞。根据细胞因子受体的细胞外配体结合结构域的相似性可以将细胞因子受体分成几类。例如，负责结合和/或传递干扰素效果的受体链是II类细胞因子受体家族的成员，基于其200个残基的细胞外结构域的特征。细胞因子和其受体所表现出的的体内活性表明了对其他的细胞因子、细胞因子受体、细胞因子激动剂和细胞因子拮抗剂的临床应用潜力和对其的需求。例如，促炎细胞因子家族所表现出的体内活性说明促炎分子的拮抗剂的巨大临床潜力和对其的需求。本发明通过提供促炎细胞因子IL-20和IL-22的拮抗剂来满足该需求。本发明的这些拮抗剂可以阻断、抑制、降低、拮抗或中和IL-22、IL-20、或IL-20与IL-22两者的活性，所述的拮抗剂包括可溶性IL-22RA受体和中和性抗IL-22RA抗体。本发明进一步提供了所述的拮抗剂在炎性疾病中的<吏用，以及相关的组合物和方法
发明内容1.概述和其它发明相比，本发明提供了新型的名为"Zcytorll"或"IL-22RA"的可溶性受体、和IL-22RA细胞因子受体的中和性抗体的使用。本发明还提供了可溶性IL-22RA多肽片段和融合蛋白质，其用于人炎症和自身免疫疾病。本发明的抗IL-22RA抗体和可溶性IL-22RA受体，包括本发明的中和性抗IL-22RA抗体，能够在治疗特定的人类疾病中用于阻断、抑制、降低、拮抗或中和IL-22或IL-20、或IL-20与IL-22这两者的活性，所述疾病例如牛皮癣、牛皮癣性关节炎、关节炎、内毒素血症、炎性肠病(IBD)、结肠炎和如此处所述的其它炎症病症。SEQIDNO:1提供了编码人Zcytorll(IL-22RA)的说明性核苷酸序列；编码的多肽显示于SEQIDNO:2。IL-22RA是IL-20和IL-22这两者的受体亚基。Zcytorll(IL-22RA)公开于共同拥有的美国专利申请号5，965，704、共同拥有的WIP0公开号W002/l2345和共同拥有的WIP0公开号W002/072607。对编码IL-22RA(SEQIDNO:l)的人cDNA克隆的分析揭示了一个编码574个氨基酸(SEQIDNO:2)的开放阅读框，其包含一个大约211个氨基酸残基(SEQIDNO:2的残基18-228;SEQIDNO:3)的细胞外配体结合结构域，一个大约23个氨基酸残基(SEQIDNO:2的残基229-251)的跨膜结构域，和一个大约313个氨基酸残基(SEQIDNO:2的残基252-574)的细胞内结构域。因此，本发明的分子包括了含有细胞因子结合结构域的多肽，该结合结构域含有SEQIDNO:2的氨基酸残基18-228;SEQIDNO:3。在本发明的一个可溶性受体实施方案中，可溶性IL-22R被融合到重链(代表性地显示于SEQIDNO:4)恒定区。本领域的技术人员能够意识到这些结构域的边界是近似的。可以在结构域的末端删减残基。如下所述，本发明提供了包含这样的氨基酸序列的分离的多肽，该序列和参照氨基酸序列SEQIDNO:2的18-228具有至少70°/4、至少80%或至少90%、或超过95%例如96%、97%、98%或大于99%或更大的同一性，该序列也显示于SEQIDNO:3,其中所述分离的多肽特异性地结合这样的抗体，该抗体特异性地结合包含SEQIDN0:3的氨基酸序列的多肽。说明性多肽包括包含SEQIDNO:3或SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。并且，本发明也提供了和上面公开的一样结合IL-22(例如，显示于SEQIDNO:6的人IL-22多肽序列)的分离的多肽。人IL-22多核苷酸序列显示于SEQIDNO:5。小鼠IL-22多核苷酸序列显示于SEQIDNO:10，相对应的多肽显示于SEQIDNO:11。本发明还提供了分离的多肽，和上面公开的一样结合IL-20(例如，显示于SEQIDNO:8的人IL-20多肽序列；WIPO公开号WO99/27103)。人IL-20多核苷酸序列显示于SEQIDNO:7。本发明还提供了包含SEQIDNO:3氨基酸序列的至少15个连续氨基酸残基的分离的多肽和表位。说明性多肽包括包含或由SEQIDNO:3、其抗原表位或其功能性IL-20或IL-22结合片段构成的多肽。本发明还包括变体IL-22RA多肽，变体多肽的氨基酸序列和SEQIDNO:3的氨基酸残基具有至少70%的同一性、至少80%的同一性、至少90%的同一性、至少95°/。的同一性或大于95%例如96°/。，97%，98%或超过99%或更高的同一性，其中变体多肽的氨基酸序列和SEQIDNO:3的相应的氨基酸序列之间的任何差异是由于一个或多个保守性氨基酸替代造成的。此处描述了这些保守性氨基酸替代。此外，本发明也提供了上面公开的结合、阻断、抑制、降低、拮抗或中和IL-22或IL-20的活性的分离的多肽。本发明进一步提供了特异性结合这些多肽的抗体和抗体片段。示例性抗体包括中和抗体、多克隆抗体、鼠类单克隆抗体、衍生自鼠类单克隆抗体的人源化抗体和人单克隆抗体。说明性的抗体片段包括F(ab')2、F(ab)2、Fab'、Fab、Fv、scFv和最小识别单位。中和抗体优先结合IL-22RA，这样就阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-20和IL-22与IL-22RA的相互作用；本发明也可包含阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-20或IL-22与IL-22RA的结合的抗-IL-22RA中和抗体。即，本发明的抗-IL-22RA中和抗体可单独地结合、阻断、抑制、减少、拮抗或中和各IL-20或IL-22，或同时结合、阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-2G和IL-22。本发明还包括包含此处描述的载体和肽、多肽或抗体的组合物。此外，本发明提供了这样的药物组合物，其包含药物可接受栽体和这样的表达载体中的或包含这些表达载体的重组病毒中的至少一种。本发明还包括包含此处描述的药物可接受的载体和多肽或抗体的药物组合物。本发明也涉及这样的抗独特型抗体、或抗独特型抗体片段，所述抗体或抗体片段与特异性结合包含SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽或其片段的抗体或抗体片段特异性结合。示例性抗独特型抗体与特异性结合由SEQIDNO:3构成的多肽的抗体特异性结合。本发明也提供了包含IL-22RA多肽和免疫球蛋白部分的融合蛋白。在这些融合蛋白中，免疫球蛋白部分可以是免疫球蛋白重链恒定区，例如人F。片段。本发明也包括分离的编码这些融合蛋白的核酸分子。本发明也提供了结合这样的多肽的多克隆和单克隆抗体，所迷多肽包含IL-22RA细胞外结构域，例如单体、同型二聚体、异二聚体和多聚体受体，包括可溶性受体。此外，可使用这些抗体拮抗IL-22RA配体IL-22(SEQIDN0:6)和IL-20(SEQIDNO:8)单独地或一起地和IL-22RA受体的结合。另外，人牛皮瓣损伤和人特应性皮炎皮肤样本中出现IL-22和IL-20过量表达或上调，表明IL-22象IL-20—样也参与人牛皮癣、特应性皮炎或其它皮肤和上皮组织炎性疾病。另外，如此处所述，在转基因小鼠中过量表达IL-20或IL-22表现出表皮增厚和免疫细胞参与特征的牛皮癣表型；并且给正常小鼠增加注射IL-22表现出表皮增厚和免疫细胞参与特征的牛皮辨表型，可以用可溶性受体拮抗剂IL-22RA2(zcytorl6;WIPOPublicationNo.WO01/40467)去除此表型。这些体内数据进一步表明，促炎性IL-22参与牛皮癣、特应性皮炎或其它皮肤和上皮组织炎性疾病。同样，拮抗IL-22和IL-20活性，例如IL-22RA可溶性受体和抗体，也包括本发明中的抗人IL-22RA单克隆和中和抗体，可用于炎性疾病的治疗，尤其是作为IL-22和IL-20单独或共同拮抗剂用于治疗牛皮辨。另外，IL-22活性拮抗剂，例如IL-22RA可溶性受体和抗体，也包括本发明的抗-人-IL-22RA单克隆和中和抗体，可用于其它炎性疾病的治疗，例如作为结合、阻断、抑制、降低、拮抗或中和IL-22和IL-20(单独或一起)用于治疗特应性皮炎、IBD、结肠炎、内毒素血症、关节炎、类风湿性关节炎和牛皮癣关节炎成人呼吸道疾病(ARD)、感染性休克、多器官衰竭、炎性肺损伤例如哮喘或支气管炎、细菌性肺炎、牛皮癣、湿渗、特应性和接触性皮炎、和炎性肠病例如溃疡性结肠炎和局限性肠炎。通过参考下面的详细描述，本发明的这些方面和其他方面将变得明了。此外，下面给出了各种参考资料并以其全文在此引用作为参考。2.定义在下面的描述中，广泛地使用了许多术语。提供下列定义以帮助理解本发明。如此处所用，"核酸"或"核酸分子"是指多核苷酸，例如脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)、寡核苷酸、由聚合酶链式反应(PCR)产生的片段以及通过连接作用、剪断作用(scission)、内切核酸酶作用和外切核酸酶作用中的任一种产生的片段。核酸分子可由天然存在的核苷酸的单体构成(例如DM和RNA)、或天然发生的核苷酸的类似物(例如，天然存在的核苷酸的cc-对映体形式)的单体构成、或这两种单体的组合构成。修饰的核普酸可在糖部分和/或嘧啶或噪呤碱基部分具有变化。糖修饰作用包括，例如，用囟素、烷基、胺基和叠氮基替换一个或多个羟基，或可将糖官能化为醚或酯类的形式。此外，可用立体化学和电子相似的结构例如氮杂-糖和碳环糖类似物替代整个糖部分。碱基部分中修饰的示例包括烷基化的嘌呤和嘧啶、酰化的嘌呤或嘧啶、或其他熟知的杂环取代。可通过磷酸二酯键或这些键的类似键连接核酸单体。磷酸二酯键的类似物包括硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、硒代磷酸酯、二硒代磷酸酯、phosphoroanilothioate、phosphoranilidate、氨基磷酸(phosphoramidate)等。术语"核酸分子"也包括所谓的"肽核酸"，其包含附着至聚酰胺主链的天然发生的或修饰的核酸碱基。核酸可以是单链的或双链的。术语"核酸分子的互补链"是指和参照核苷酸序列相比，具有互补的核苷酸序列和相反的方向的核酸分子。例如，序列5'ATGCACGGG3'和CCCGTGCAT3'互补。术语"简并核苷酸序列"是指和编码多肽的参照核酸分子相比，包含一个或多个筒并密码子的核苷酸序列。简并密码子包含不同的核苷酸三联体，但编码相同的氨基酸残基(即，GAU和GAC三联体各自编码Asp)。术语"结构基因"是指转录成信使RNAOnRNA)的核酸分子，然后该RM被翻译成特定多肽特有的氨基酸序列。"分离的核酸分子"是未整合入生物体的基因组DM中的核酸分子。例如，已从细胞的基因组中分离的编码生长因子的DM分子是分离的DNA分子。分离的核酸分子的另一个示例是未整合入生物的基因组中的化学合成的核酸分子。已从特定的物种分离的核酸分子比来自该物种的染色体的完全DM分子小。"核酸分子构建体"是这样的单链或双链的核酸分子，即其通过人工干预被修饰，从而包含以自然界中不存在的排列方式组合和并列的核酸的片段。"线性DM"是指具有游离5'和3'末端的非环形DNA分子。可通过酶促降解或物理破坏从封闭的环形DNA分子例如质粒制备线性DNA。"互补DNA(cDNA)"是通过逆转录酶从mRNA模板形成的单链DNA分子。一般地，使用和mRNA的部分互补的引物起始反转录。本领域技术人员也使用术语"cDM"表示由这样的单链DNA分子和其互补DNA链构成的双链DNA分子。术语"cDNA"也指从RNA模板合成的cDNA分子的克隆。"启动子"是指导结构基因转录的核苷酸序列。一般地，启动子位于基因的5'非编码区，邻近结构基因的转录起始位点。在转录的起始中发挥作用的启动子内的序列元件的特征通常在于一致核苷酸序列。这些启动子元件包括RNA聚合酶结合位点、TATA序列、CAAT序列、分化特异性元件(differentiation-specificelements)(DSEs;McGehee等人，Mol.Endocrinol.7:551(1993))、环AMP效应元件(CREs)、血清效应元件(serumresponseelements)(SREs;Treisman，SeminarsinCancerBiol.1:47(1990))、糖皮质类固醇应答元件(GREs)和其他转录因子例如CRE/ATF(O'Reilly等人，J.Biol.Chem.267:19938(1992))、AP2(Ye等人，J.Biol.Chem.269:25728(1994))、SP1、cAMP效应元件结合蛋白(CREB;Loeken，GeneExpr.3:253(1993))和八聚体因子(octamerfactors)(参见，一般，Watson等人，eds"MolecularBiologyoftheGene，第4版.(TheBenjamin/Cu,ingsPublishingCompany,Inc.1987)，和Lemaigre和Rousseau,Biochem.J.303:1(1994))的结合位点。如果启动子是可诱导的启动子，那么转录速率应答诱导剂而增加。相反地，如果启动子是组成型启动子，则不能通过诱导剂调控转录速率。阻抑型启动子也是已知的。"核心启动子"包含启动子发挥作用所必需的核苷酸序列，包括TATA盒和转录起始位点。根据该定义，核心启动子在可增强活性或提"调控元件"是调节核心启动子的活性的核苷酸序列。例如，调控元件可包含这样的核苷酸序列，该序列结合使转录专门地或优先地在特定的细胞、组织或器官中进行的细胞因子。这些类型的调控元件一般和以"细胞特异性"、"组织特异性"或"器官特异性"的方式表达的基因关联。"增强子"是这样的类型的调控元件，无论增强子相对于转录起始位点的距离或排列方向如何，其都可增加转录的功效。"异源DNA"是指在给定的宿主细胞内非天然存在的DNA分子或DM分子的群体。相对于特定的宿主细胞异源的DM分子可包含来源于宿主细胞物种的DNA(即，内源DNA)，只要将该宿主DNA和非宿主DNA(即，外源DNA)组合。例如，包含这样的编码多肽的非宿主DNA片段的DM分子被认为是异源DNA分子，所述非宿主DNA片段有效地连接至包含转录启动子的宿主DNA片段。相反地，异源DNA分子可包含有效地和外源启动子连接的内源基因。作为另一个说明性示例，如果包含来源于野生型细胞的基因的DM分子被导入缺少该野生型基因的突变细胞，则该DM分子被认为是异源DM。"多肽"是无论天然产生的或通过合成产生的、通过肽键连接的氨基酸残基的多聚体。少于大约10个氨基酸残基的多肽通常称为"肽"。"蛋白"是包含一个或多个多肽链的大分子。蛋白也可包含非肽组分，例如糖类。可通过这样的细胞给蛋白加上糖和其他非肽取代基，在所述细胞中，产生该蛋白，所述糖和其他非肽取代基随细胞类型的变化而变化。此处以其氨基酸主链的结构定义蛋白；取代基例如糖基一般不指明，虽然如此，但其仍可以存在。由非宿主DNA分子编码的肽或多肽是"异源"肽或多肽。"克隆载体"是能够在宿主细胞中自主复制的核酸分子例如质粒、粘粒或噬菌体。克隆栽体一般包含一个或少数限制性内切核酸酶识别位点和编码这样的标记基因的核苷酸序列，所述识别位点允许以可确定的方式插入核酸分子而不丢失载体的基本生物学功能，所述标记基因适合用于鉴定和选择用该克隆栽体转化的细胞。标记基因一般包括提供四环素抗性或氨节青霉素抗性的基因。"表达载体"是编码在宿主细胞中表达的基因的核酸分子。一般地，表达载体包含转录启动子、基因和转录终止子。基因表达一般置于启动子的控制之下，这样的基因被认为"有效地连接至"启动子。类似地，如果调控元件调控核心启动子的活性，那么该调控元件和核心启动子是有效地连接的。"重组宿主"是包含异源核酸分子例如克隆载体或表达栽体的细胞。在本文中，重组宿主的一个示例是从表达载体产生IL-22RA的细胞。相反地，可通过是IL-22RA的"天然来源"或缺少表达栽体的细胞产生IL-22RA。"整合转化子"是这样的重组宿主细胞，在该重组细胞中，异源DNA已被整合入该细胞的基因组。"融合蛋白"是通过包含至少2个基因的核苷酸序列的核酸分子表达的杂合蛋白。例如，融合蛋白可包含和结合亲和基质的多肽融合的IL-22RA多肽的至少一部分。这样的融合蛋白提供了使用亲和层析法分离大量IL-22RA的手段。术语"受体"是指结合称为"配体"的生物活性分子的细胞关联性蛋白。该相互作用介导配体对细胞的效应。受体可以是膜结合受体、细胞溶胶或细胞核中的受体；单体(例如，促甲状腺激素受体、p-肾上腺素能受体)或多聚体(例如，PDGF受体、生长激素受体、IL-3受体、GM-CSF受体、G-CSF受体、促红细胞生成素受体和IL-6受体)。膜结合受体的特征在于包含细胞外配体结合结构域和细胞内效应结构域(通常参与信号转导)的多结构域结构。在某些膜结合受体中，细胞外配体结合结构域和细胞内效应结构域位于分开的、包含完整功能性受体的多肽中。一般地，配体和受体的结合导致受体的构象变化，这使效应结构域和细胞内其他分子之间产生相互作用，该相互作用依次导致细胞的代谢作用上的改变。通常和受体-配体相互作用关联的代谢事件包括基因转录、磷酸化作用、去磷酸化作用、环AMP产物的增加、细胞钙的动员、膜脂质的动员、细胞粘着、肌醇脂质的水解和磷脂的水解。"可溶性受体"是不和细胞膜结合的受体多肽。可溶性受体是最普遍的缺少跨膜和细胞质结构域、以及和细胞膜的其他连接例如通过糖基磷酸肌醇(gpi)的连接的配体结合性受体。可溶性受体可包含额外的氨基酸残基，例如提供多肽的纯化或提供多肽至基质的附着位点的亲和标签、或免疫球蛋白恒定区序列。许多细胞表面受体具有天然发生的、可溶性对应物，该对应物通过蛋白水解作用产生或通过可变剪接的mRNA翻译产生。可溶性受体可以是单体、同二聚体、异二聚体或多聚体，多聚体受体一般包含不超过9个亚基，优选地不超过6个亚基和最优选地不超过3个亚基。当受体多肽缺乏充分的跨膜和细胞内多肽片段以至不能分别提供膜锚定或信号转导时，认为其基本上不含有这些片段。I型和II型细胞因子受体的可溶性受体一般包含细胞外细胞因子结合结构域，无跨膜结构域和细胞内结构域。例如，代表性可溶性受体包括如SEQIDNO:44和SEQIDNO:45中所示的CRF2-4(a丄a.，IL-10RB)(Genbank编号Z17227)的可溶性受体;如SEQIDN0:46中所示的IL-10RA(Genbank编号U00672和NM-001558)的一个可溶性受体；如SEQIDN0:47中所示的pDIRSl(a.k.a.，IL-20RB)(Genbank编号AY358305)的一个可溶性受体；如SEQIDNO:3中所示的IL-22RA(美国专利号5，965，704)的一个可溶性受体。描述已知的I型或II型细胞因子受体序列包含细胞外细胞因子结合结构域的序列，无跨膜结构域和细胞内结构域，完全在本领域技术人员的水平之内。此外，本领域技术人员可使用遗传密码子容易地确定编码这些可溶性受体多肽的多核苷酸。术语"分泌信号序列"是指编码这样的肽("分泌肽")的DM序列，该肽，作为更大的多肽的组成部分，指导该更大的多肽通过合成其的细胞的分泌途径。在通过分泌途径的运输过程中，一般切断更大的肽以除去分泌肽。"分离的多肽"是这样的多肽，即其基本上不含在天然状态下和该多肽结合的污染性细胞组分例如糖、脂质或其他蛋白性质的杂质。一般地，分离的多肽的制剂包含以高度纯化的形式即至少大约80%的纯度、至少大约90°/。的纯度、至少大约95%的纯度、高于95%的纯度例如96°/。、97%或98%或更高的纯度或高于99%的纯度的该多肽。显示特定蛋白制剂包含分离的多肽的一个方法是通过蛋白制剂的十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶的考马斯亮蓝染色后，显现出单一的条带来进行显示。然而，术语"分离的"不排除相同的多肽以可选择的物理形式例如二聚体或可选择地糖基化或衍生形式存在。此处使用术语"氨基端"和"羧基端"表示多肽中的位置。在上下文允许的情况下，使用这些关于多肽的特定序列或部分的术语表示临近或相对的位置。例如，多肽内的某些位于参照序列的羧基端的序列位于临近参照序列的羧基末端，但不必在全长多肽的羧基末端。术语"表达"是指基因产物的生物合成。例如，在结构基因的情况下，表达包括将结构基因转录成mRM和将mRNA翻译成一种或多种多肽。此处使用术语"剪接变体"表示从基因转录的RM的可变形式。剪接变异通过使用转录的RNA分子内的可变剪接位点天然地产生，或其较不普遍地产生于分开转录的RNA分子之间，其可产生转录自相同基因的几种mRM。剪接变体可编码具有改变的氨基酸序列的多肽。此处也使用术语剪接变体表示由转录自基因的mRM的剪接变体编码的多肽。如此处所用的，术语"免疫调节剂"包括细胞因子、干细胞生长因子、淋巴毒素、共刺激分子、造血因子等、和这些分子的合成的类似物。术语"互补/反互补对(complement/anti-complementpair)"是指在合适的条件下形成非共价结合的稳定配对的不相同的部分。例如，生物素和抗生物素蛋白(或链霉抗生物素蛋白)是互补/反互补对的原型成员。其他互补/反互补对包括受体/配体对、抗体/抗原(或半抗原或表位)对、有义/反义多核苷酸对等。在想要随后分离互补/反互补对的情况下，互补/反互补对优选地具有低于109NT的结合亲和力。"抗独特型抗体"是和免疫球蛋白的可变区结构域结合的抗体。在本说明书中，抗独特型抗体和抗-IL-22RA抗体的可变区结合，从而，抗独特型抗体模拟了IL-22RA的表位。"抗体片段"是抗体的部分例如F(ab02、F(ab)2、Fab'、Fab等。无论怎样的结构，抗体片段和被该完整的抗体识别的相同抗原结合。例如，抗-IL-22RA单克隆抗体片段结合IL-22RA的表位。术语"抗体片段"也包括结合特定抗原的合成的或经基因工程改造的多肽，例如由轻链可变区构成的多肽、由重链和轻链可变区构成的"Fv"片段、其中轻链和重链可变区通过肽连接体连接的重组单链多肽分子("scFv蛋白")和由模拟高变区的氨基酸残基构成的最小识别单位。"嵌合抗体"是这样的重组蛋白，该重组蛋白包含来自啮齿类抗体的可变结构域和互补决定区，同时抗体的剩余部分来源于人抗体。"人源化抗体，，是这样的重组蛋白，在该重组蛋白中，单克隆抗体的鼠类互补决定区已从鼠类免疫球蛋白的重链和轻链可变区转移入人可变结构域。这样的人源化抗体的构建在本领域技术人员的技术范围之内，所述人源化抗体是衍生自鼠类抗体、在人中用于治疗用途的抗体，例如结合或中和人蛋白的抗体。如此处所用的，"治疗剂"是被缀合至抗体部分以产生用于治疗的缀合物的分子或原子。治疗剂的示例包括药物、毒素、免疫调节剂、螯合剂、硼化合物、光活化剂或染料以及放射性同位素。"可检测的标记物"是可被缀合至抗体部分以产生用于诊断的分子的分子或原子。可检测的标记物的示例包括螯合剂、光活化剂、放射性同位素、荧光剂、顺磁性离子或其他标志物部分。术语"亲和标签"此处用于表示可附着至第二多肽以提供第二多肽的纯化或检测或提供第二多肽附着至基质的位点的多肽片段。原则上，可将可获得其抗体或其他特异性结合剂的任何多肽或蛋白用作亲和标签。亲和标签包括多组氨酸片段、A蛋白(Nilsson等人，EMBOJ.4:1075(1985);Nilsson等人，MethodsEnzymol.198:3(1991))、谷胱苷肽S转移酶(Smith和Johnson,Gene67:31(1988))、Glu-Glu亲和标签(Grusse画yer等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA82:7952(1985))、P物质、FLAG肽(Hopp等人，Biotechnology6:1204(1988))、链霉抗生物素结合肽或其他抗原表位或结合结构域。一般参见，Ford等人，ProteinExpressionandPurification2:95(1991)。可从提供商(例如，PharmaciaBiotech,Piscataway，NJ)商购获得编码亲和标签的DNA分子。"棵露抗体"是完整的抗体，和抗体片段相反，其不与治疗剂缀合。棵露抗体包括多克隆抗体和单克隆抗体，以及某些重组抗体例如嵌合抗体和人源化抗体。如此处所用的，术语"抗体组分"包括完整的抗体和抗体片段。"免疫交联物"是交联抗体组分的治疗剂或可检测标记物。如此处所用的，术语"抗体融合蛋白"是指包含抗体组分和IL-22RA多肽组分的重组分子。抗体融合蛋白的示例包括包含IL-22RA细胞外结构域和Fc结构域或抗原结合区的蛋白。"靶多肽，，或"靶肽"是这样的氨基酸序列，该氨基酸序列包含至少一个表位并在靶细胞例如胂瘤细胞或携带感染剂抗原的细胞上表达。T细胞识别由主要组织相容性复合物分子呈递的靶多肽或靶肽的肽表位和一般裂解靶细胞或将其他免疫细胞招募至靶细胞的位置，从而杀死靼细胞。"抗原肽"是这样的肽，该肽结合主要组织相容性复合物分子以形成被T细胞识别的MHC-肽复合物，从而在呈递至T细胞后诱导细胞毒性淋巴细胞应答。因此，抗原肽能够结合合适的主要组织相容性复合物分子和诱导细胞毒性T细胞应答，例如细胞裂解或抗靼细胞(其结合或表达该抗原)的特异性细胞因子释放。可将抗原肽结合在抗原呈递细胞或靶细胞上的I类或II类主要组织相容性复合物分子。在真核生物中，RNA聚合酶II催化结构基因的转录，产生mRNA。可设计核酸分子使之包含这样的RNA聚合酶II的模板，在该模板中RNA转录物具有和特定的mRNA的序列互补的序列。所述RNA转录本被称为"反义RNA",编码反义RNA的核酸分子被称为"反义基因"。反义RNA分子能够结合mRNA分子，导致mRNA翻译的抑制。"对IL-22RA特异性的反义寡核苷酸"或"IL-22RA反义寡核苷酸"是这样的寡核苷酸，该寡核苷酸具有(a)能够和IL-22RA基因的部分形成稳定的三链体的序列，或(b)能够和IL-22RA基因的mRNA转录物的部分形成稳定的双链体的序列。"核酶"是包含催化中心的核酸分子。该术语包括RNA酶、自我拼接RNAs、自我切割RNA和进行这些催化功能的核酸分子。编码核酶的核酸分子被称为"核酶基因"。"外在引导序列(externalguidesequence)"是这样的核酸分子，该分子指导内源核酶，RN酶P至特定种类的细胞内mRNA,导致通过RN酶P产生的mRNA的断裂。编码外在引导序列的核酸分子被称为"外在引导序列基因"。术语"变体IL-22RA基因"是指编码具有这样的氨基酸序列的多肽的核酸分子，该序列是SEQIDN0:3的变体。这些变体包括天然发生的IL-22RA基因的多态性，和包含SEQIDN0:3的氨基酸序列的保守性氨基酸替代的合成的基因。IL-22RA基因的其他变体形式是包含此处描述的核苷酸序列的插入或缺失的核酸分子。变体IL-22RA基因可通过例如在严紧条件下，确定该基因是否和具有SEQIDNO:l或其互补序列杂交来进行鉴定。可选择地，可通过序列比较来鉴定变体IL-22RA基因。当就最大对应性进行比对时，如果两个氨基酸序列的氨基酸残基相同，那么这两个氨基酸序列具有"100%氨基酸序列同一性"。类似地，当就最大对应性进行比对时，如果两个核苷酸序列的核苷酸残基相同，那么这两个核苷酸序列具有"100%的核苷酸序列同一性"。可使用标准软件程序，例如由DMSTAR(Madison,Wisconsin)生产的LASERGENE生物信息学计算套件中包含的程序，进行序列比较。用于通过确定最优比说是熟悉的(参见，例如，Peruski和Peruski,TheInternetandtheNewBiology:ToolsforGenomicandMolecularResearch(ASMPress,Inc.1997)，Wu等人(eds.)，"InformationSuperhighwayandComputerDatabasesofNucleicAcidsandProteins,"inMethodsinGeneBiotechnology,pages123-151(CRCPress,Inc.1997)，和Bishop(ed.)，GuidetoHumanGenomeComputing,笫2版(AcademicPress,Inc.1998))。下面描述用于确定序列同一性的特定方法。不管用于鉴定变体IL-22RA基因或变体IL-22RA多肽的特定方法如何，可功能性地表征变体基因或由变体基因编码的多肽特异性结合抗IL-22RA抗体的能力。也可通过使用此处描述的生物学或生物化学测定法功能性地表征变体IL-22RA基因或变体IL-22RA多肽结合其配体例如IL-22的能力。此处所用的术语"等位变体"是指占据相同染色体基因座的基因的两种或更多种可选择形式的任一形式。等位变异天然地通过突变产生，其可导致群体内的表型多态性。基因突变可以是沉默的(在编码的多肽上无变化)或可以编码具有改变的氨基酸序列的多肽。此处也使用术语等位变体表示由基因的等位变体编码的蛋白。术语"直系同源物(orthologs)"是指从一个物种获得的这样的多肽或蛋白，所述多肽或蛋白是来自不同物种的多肽或蛋白的功能性对应物。直系同源物中的序列差异是物种形成的结果。"旁系同源物(Paralogs)"是由生物产生的不同的但结构相关的蛋白。据认为旁系同源物是通过基因复制产生的。例如，a-球蛋白、p-球蛋白和肌红蛋白是相互的旁系同源物。本发明包括IL-22RA基因的功能性片段。在本发明的说明书中，IL-22RA基因的"功能性片段"是指编码IL-22RA多肽的部分的核酸分子，该多肽的部分是此处描述的结构域或至少特异性地结合抗-IL-22RA抗体。由于标准分析方法的不精确性的原因，聚合物的分子量和长度理解为近似值。当该值表达为"大约"x或"近似"x时，所述的x的值被理解为精确到±10%。3.IL-22RA多核苷酸或基因的产生可通过使用基于SEQIDNO:1的多核苷酸探针筛选人cDNA或基因组文库来获得编码人IL-22RA基因的核酸分子。这些技术是标准的和已建立好的，可使用购自商业提供者的克隆试剂盒进行这些技术。参见，例如，Ausubel等人(eds.)，ShortProtocolsinMolecularBiology,第3版，JohnWiley和Sons1995;Wu等人，MethodsinGeneBiotechnology,CRCPress,Inc.1997'，Aviv和Leder，Proc.Nat，1Acad.Sci.USA69:1408(1972);Huynh等人，"ConstructingandScreeningcDNALibrariesin入gtlOandXgtll，"inDNACloning:APracticalApproachVol.I，Glover(ed.)，page49(IRLPress,1985);Wu(1997)atpages47-52。也可使用聚合酶链式反应(PCR)和这样的寡核苷酸引物获得编码人IL-22RA基因的核酸分子，所述寡核苷酸引物具有基于IL-22RA基因或cDNA的核苷酸序列的核苷酸序歹'。用PCR筛选库的常用方法来自，例如，Yu等人，"UseofthePolymeraseChainReactiontoScreenPhageLibraries,"inMethodsinMolecularBiology,第15巻PCRProtocols:CurrentMethodsandApplications,White(ed.)，HumanaPress,Inc.,1993。此外，用PCR分离相关基因的技术被描述于，例如，Preston,"UseofDegenerateOligonucleotidePrimersandthePolymeraseChainReactiontoCloneGeneFamilyMembers,"inMethodsinMolecularBiology,第15巻PCRProtocols:CurrentMethodsandApplications,White(ed.)，HumanaPress,Inc.1993。作为另一选择，可通过4吏用交互引物(mutuallypriming)长寡核苷酸和此处描述的(参见，例如Ausubel(1995))核苷酸序列合成核酸分子来获得IL-22RA基因。使用聚合酶链式反应的已建立的技术提供了合成长度至少为2千碱基的DNA分子的能力(Adang等人，PlantMolec.Biol.21:1131(1993),Bambot等人，PCRMethodsandApplications2:266(1993)，Dillon等人，"UseofthePolymeraseChainReactionfortheRapidConstructionofSyntheticGenes,"inMethodsinMolecularBiology,第15巻PCRProtocols:CurrentMethodsandApplications,White(ed.)，pages263-268，(HumanaPress,Inc.1993)，和Holowachuk等人，PCRMethodsAppl.4:299(1995))。关于多核苷酸合成的综述，参见，例如，Glick和Pasternak,MolecularBiotechnology,PrinciplesandApplicationsofRecombinantDNA(ASMPress1994),Itakura等人，Annu.Rev.Biochem.53:323(1984)，和Climie等人，Proc.Nat'lAcad.Sci.USA87:633(1990)。4.IL-22RA基因变体的产生本发明提供了编码此处公开的IL-22RA多肽的多种核酸分子，包括DM和RNA分子。本领域技术人员容易地认识到，考虑到遗传密码的简并性，在这些多核苷酸分子中可能存在相当多的序列变化。此外，本发明也提供了分离的可溶性单体、同型二聚体、异二聚体和多聚体受体多肽，所述受体多肽包含至少一个和SEQIDN0:3的受体多肽基本上同源的IL-22RA受体亚基。因此，本发明涉及包含SEQIDNO:1的简并核苷酸的IL-22RA多肽编码性核酸分子和其RNA等同物。表1列出了单字母密码以表示筒并核苷酸的位置。"方案"是由密码字母表示的核苷酸。"互补物"表示互补核苷酸的密码。例如，密码Y表示C或T，其互补物R表示A或G，A对于T是互补的，G对于C是互补的。表1<table>complextableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>简并密码子，包括给定的氨基酸的所有可能的密码子，列于表2。表2<table>complextableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>LeuCTACTCCTGCTTTTATTGYTNValVGTAGTCGTGGTTGTNPhe'FTTCTTTTTYTyrYTACTATTAYTrpWTGGTGGTerTAATAGTGATRRAsn1AspBRAYGlulGlnZSARAnyXNNN本领域技术人员将认识到，在确定简并密码子(其代表了编码氨基酸的所有可能的密码子)中引入了不确定性。例如，丝氨酸的简并密码子(WSN),在一些情况下，可编码精氨酸(AGR)，精氨酸的简并密码子(MGN),在一些情况下，可编码丝氨酸(AGY)。类似的关系存在于编码苯丙氨酸和亮氨酸的密码子之间。因此，由简并序列包含的一些多核苷酸可编码变体氨基酸序列，但本领域技术人员通过参考SEQIDNO:3的氨基酸序列可容易地鉴定这些变体序列。可按此处的描述容易地对变体序列进行功能性检测。不同的物种可展示"偏爱密码子使用(preferentialcodonusage)",一般参见，Grantham等人，Nucl.AcidsRes.8:1893(1980):Haas等人Curr.Biol.6:315(1996),Wain-Hobson等人，Gene13:355(1981)，Grosjean和Fiers，Gene18:199(1982)，Holm，Nuc.AcidsRes.14:3075(1986)，Ikemura，J.Mol.Biol.158:573(1982)Sharp和Matassi，Curr.Opin.Genet.Dev.4:851(1994)，Kane,Curr.Opin.Biotechnol.6:494(1995)，和Makrides，Microbiol.Rev.60:512(1996)。如此处所用的，术语"偏爱密码子使用"或"偏爱密码子"是本领域的术语，其是指在某些物种的细胞中最频繁使用的蛋白翻译密码子，从而偏向使用编码各氨基酸的可能的密码子(参见表2)中的一个或少数几个代表。例如，氨基酸苏氨酸(Thr)可由ACA、ACC、ACG或ACT编码，但在哺乳动物细胞中ACC是最常使用的密码子；在其他物种中，例如，昆虫细胞、酵母、病毒或细菌中，不同的Thr密码子是优选的。可通过本领域中已知的各种方法将特定物种的偏爱密码子导入本发明的多核苷酸中。将偏爱密码子序列导入重组DNA可以，例如，通过使蛋白在特定的细胞类型或物种中更有效地翻译来增加蛋白的生产。因此，此处公开的简并密码子序列用作这样的模板，该模板用于在本领域内普遍使用的和此处公开的各种细胞类型和物种中多核苷酸的最优化表达。在不同物种中进行表达可以检验和优化包含偏爱密码子的序列，并按此处公开对其进行功能性检验。可通过各种方法，例如通过使用完整的或部分的人cDNA或用基于公开的序列的一组或多组简并探针进行探测来分离编码IL-22RA的cDNA。也可使用聚合酶链式反应和根据此处公开的代表性人IL-22RA序列设计的引物来克隆cDNA。此外，可使用cDNA文库转化或转染宿主细胞，可用抗IL-22RA多肽的抗体检测目的cDNA的表达。本领域技术人员认识到，SEQIDN0:1中公开的序列代表人IL-22RA的单个等位基因，认识到预期发生其等位变异和可变剪接。可按照标准的方法通过探测来自不同的个体的cDNA或基因组文库来克隆该序列的等位基因变体。此处公开的核苷酸序列的等位变体，包括包含沉默突变的变体和其中突变导致氨基酸序列改变的变体，在本发明的范围之内，作为此处公开的氨基酸序列的等位变体的蛋白也在本发明的范围之内。从可变剪接的mRNA产生的、保持IL-22RA多肽的性质的cDNA分子包含在本发明的范围之内，由该cDNA和mRNA编码的多肽也在本发明的范围之内。可按照本领域已知的标准方法，通过探测来自不同个体或组织的cDNA或基因组文库来克隆这些序列的等位变体和剪接变体。通过使用上述方法，本领域的普通技术人员可制备各种包含可溶性IL-22RA受体亚基的多肽，所述多肽和SEQIDNO:1的氨基酸基本上同源，或编码SEQIDNO:3的氨基酸或其等位变体并保持野生型IL-22RA受体的配体结合特性。这些多肽也可以包括此处一般公开的其他的多肽区段。在本发明的某些实施方案中，在严紧条件下，分离的核酸分子可和包含此处公开的核酸序列互补。例如，这些核酸分子可在严紧条件下和包含SEQIDN0:1的核苷酸序列的核酸分子或和包含与SEQIDNO:1互补的核苷酸序列的核酸分子或其片段杂交。一般地，选择严紧条件，使其在确定的离子强度和pH下比特定序列的热解链点(thermalmeltingpoint)(T)低大约5'C。L是这样的温度，在该温度下，(在确定的离子强度和pH下)50%的耙序列和完全匹配的探针杂交。杂交后，可在严紧条件下或在高度严紧条件下洗涤核酸分子以除去非杂交核酸分子。参见，例如，Sambrook等人，MolecularCloning:ALaboratoryManual,第2版(ColdSpringHarborPress1989)5Ausubel等人,(eds,)，CurrentProtocolsinMolecularBiology(JohnWileyandSons,Inc.1987);Berger和Kimmel(eds.)，GuidetoMolecularCloningTechniques,(AcademicPress,Inc.1987);和Wetmur，Crit.Rev.Biochem.Mol.Biol.26:227(1990))。序列分析软件例如OLIGO6.0(LSR;LongLake,MN)和PrimerPremier4.0(PremierBiosoftInternational;PaloAUo，CA)，以及存在于因特网上的软件，都是可获得的用于基于用户定义的标准分析给定的序列和计算L的工具。釆用杂交和洗涤条件以使之适合用于特定多核苷酸的杂交在本领域技术人员的能力范围之内。本发明也提供了这样的分离的IL-22RA多肽，该肽和SEQIDNO:3的多肽或其直系同源物具有基本上相似的序列同一性。此处使用的术语"基本上相似的序列同一性"是指多肽和SEQIDN0:3显示的序列或其直向同源物具有至少70%、至少80°/。、至少90%、至少95%例如96%、97%、98%或高于95%的序列同一性。例如，可使用变体和直系同源IL-22RA受体产生针对人IL-22RA的免疫应答和交叉反应性抗体。可按此处所描述对这些抗体进行人源化和修饰，将其治疗性地用于治疗牛皮癣、牛皮癣性关节炎、IBD、结肠炎、内毒素血症以及此处描述的其他治疗性应用。本发明也涉及这样的IL-22RA变体核酸分子，可使用2个标准来鉴定该变体核酸分子编码的多肽和SEQIDN0:3的氨基酸序列之间的相似性的确定，和杂交测定法。这些IL-22RA变体包括这样的核酸分子，即(l)在这样的严紧洗涤条件下保持和具有SEQIDN0:1的核苷酸序列(或其互补链)的核酸分子杂交的核酸分子，在所述严紧洗涤条件下，洗涤严紧度为55-65TC下的含O.1%SDS的0.5x-2xSSC，和(2)编码和SEQIDNO:3的氨基酸序列具有至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或高于95%例如96%、97%、98%或99%的序列同一性的核酸分子。可选择地，可将IL-22RA变体表征为这样的核酸，即(1)在这样的高度严紧洗涤条件下保持和具有SEQIDNO:1的核苷酸序列(或其互补链)的核酸分子杂交的核酸分子，在所述高度严紧洗涤条件中，洗涤严紧度为50-65X:下的含O.1%SDS的0.lx-O.2xSSC，和(2)编码和SEQIDNO:3的氨基酸序列具有至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或高于95%例如96%、97%、98%或99%或更高的序列同一性的多肽。通过常规方法确定百分比序列同一性。参见，例如，Altschul等人，Bull.Math.Bio.48:603(1986)，和Henikoff和Henikoff，Pro"Natl.Acad.Sci.USA89:10915(1992)。简而言之，通过使用值为10的缺口开放罚分、值为1的缺口延伸罚分和表3(氨基酸以标准的单字母代码标示)中所示的Henikoff和Henikoff(同上)"BL0SUM62"评分矩阵，排列2个氨基酸序列以最优化比对评分。然后将百分比同一性计算为([相同匹配的总数]/[较长序列的长度加上引入至较长序列以比对2个序列的缺口的数目])(100)。表3<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage33</formula>本领域技术人员知道存在许多可获得的用于比对两个氨基酸序列的已建立的算法。Pearson和Lipman的"FASTA"相似性搜索算法是用于检查此处公开的氨基酸序列和假定的IL-22RA变体的氨基酸序列所共有的相似性水平的合适的蛋白质比对方法。FASTA算法由Pearson和Lipman，Proc.Nat'1Acad.Sci.USA85:2444(1988)，和PearsonMeth,Enzymol.183:63(1990)进行描述。简而言之，FASTA首先在不考虑保守性氨基酸替代、插入或缺失的情况下，通过鉴定查询序列(例如，SEQIDNO:2或SEQIDNO:3)和测试序列共有的具有最高一致性密度(如果ktup变量-l)或成对一致性(如果ktup-2)的区域来表征序列相似性。然后通过使用氨基酸替代矩阵比较所有成对氨基酸的相似性来给具有最高密度的一致性的10个区域重新打分，"修剪"所述区域的末端使之只包含对最高分值有贡献的残基。如果存在几个具有高于"截止"值的评分(基于序列长度和ktup值通过预设的公式计算的)的区域，那么检查经修剪的起始区域以确定是否可连接该区域以形成具有缺口的近似比对。最后，使用考虑氨基酸插入和缺失的Needleman-Wunsch-Sellers算法的修改方案(Needleman和Wunsch，JMol.Biol.48:444(1970);Sellers,SIAMJ.Appl.Math.26:787(1974))对两个氨基酸序列的最高评分区域进行比对。FASTA分析的说明性参数是ktup=l、缺口开放罚分=10、缺口延伸罚分=1、取代矩阵-BLOSUM62。可通过修改评分矩阵文件("SMATRIX")来将这些参数引入FASTA程序中，如在Pearson,Meth.Enzymol.183:63(1990)的附录2中所解释的。也可利用上面公开的比率，使用FASTA确定核酸分子的序列同一性。对于核苷酸序列的比较，ktup值可在1至6之间，优选地从3至6的范围内变化，最优选地是3，如上所述设置其他参数。本发明包括编码这样的多肽的核酸分子，该多肽和此处公开的氨基酸序列相比具有保守性氨基酸改变。例如，可获得包含SEQIDN0:3的一个或多个氨基酸替代的变体，在该变体中，烷基氨基酸在IL-22RA氨基酸序列中替代烷基氨基酸，芳香族氨基酸在IL-22RA氨基酸序列中替代芳香族氨基酸，含硫氨基酸在IL-22RA氨基酸序列中替代含硫氨基酸，包含羟基的氨基酸在IL-22RA氨基酸序列中替代包含羟基的氨基酸，酸性氨基酸在IL-22RA氨基酸序列中替代酸性氨基酸，碱性氨基酸在IL-22RA氨基酸序列中替代碱性氨基酸，二元单羧基氨基酸(dibasicmonocarboxylicaminoacid)在IL-22RA氨基酸序歹'J中替代二元单羧基氨基酸。在普通氨基酸中，例如，通过下列组中的各组内的氨基酸之间的替代来举例说明"保守性氨基酸替代"(1)甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸，(2)苯丙氨酸、酪氨酸和色氛酸，(3)丝氨酸和苏氛酸，(4)天冬氨酸和谷氨酸，(5)谷氨酰胺和天冬酰胺，和(6)赖氨酸、精氨酸和组氨酸。BLOSUM62表是氨基酸取代矩阵，其产生自代表超过500组关联蛋白的高度保守区域的蛋白序列区段的大约2，OOO个局部多重比对(Henikoff和Henikoff，Proc.Nat"Acad.Sci.USA89:10915(1992))。因此，可4吏用BLOSUM62取代频率定义可被引入本发明的氨基酸序列的保守性氨基酸替代。尽管可能只基于化学性质(如上所述的性质)设计氨基酸替代，但术语"保守性氨基酸替代"优选地是指由大于-1的BL0SUM62值代表的替代。例如，如果替代的特征在于为0、1、2或3的BLOSUM62值，那么该氨基酸替代是保守的。根据该系统，优选的保守性氨基酸替代的特征在于至少为1(例如，1、2或3)的BL0SUM62值，更优选的保守性氨基酸替代的特征在于至少为2(例如2或3)的BLOSUM62值。IL-22RA的特定的变体的特征在于其和对应的氨基酸序列(例如，SEQIDNO:3)具有至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或高于95%例如96%、97%、98%或99%或更高的序列同一性，其中氨基酸序列上的变异是由于一个或多个保守性氨基酸替代造成的。可通过例如用核苷酸替代SEQIDN0:1中列举的核苷酸来在IL-22RA基因中引入保守性氨基酸变换。可通过寡核苷酸指导的诱变、接头分区诱变、使用聚合酶链式反应的诱变等(参见Ausubel(1995);和McPherson(ed.)，DirectedMutagenesis:APracticalApproach(IRLPress1991))来获得这些"保守性氨基酸，，变体。可就特异性地结合抗IL-22RA抗体的能力鉴定变体IL-22RA多肽。本发明的蛋白也可包含非天然发生的氨基酸残基。非天然发生的氨基酸残基包括，但不限于，反式-3-甲基脯氨酸、2，4-甲醇基脯氨酸、顺式-4-羟脯氨酸、反式-4-羟脯氨酸、N-甲基甘氨酸、别苏氨酸、甲基苏氨酸、羟乙基半胱氨酸、羟乙基高半胱氨酸、硝基谷氨酰胺、高谷氨酰胺(homoglutamine)、哌可酸、噢唑烷羧酸、脱氬脯氨酸、3-和4-甲基脯氨酸、3，3-二甲脯氨酸、叔-亮氨酸、正缬氨酸、2-氮杂苯丙氨酸、3-氮杂苯丙氨酸、4-氮杂苯丙氨酸和4-氟苯丙氨酸。用于将非天然发生的氨基酸残基整合入蛋白的几种方法在本领域是已知的。例如，可使用其中使用经化学方法氨基酰化的抑制型tRNA抑制无义突变的体外系统。用于合成氨基酸和氨基酰化的tRNA的方法在本领域是已知的。一般在包含大肠杆菌(E.coli)S30提取物和可商购获得的酶和其他试剂的无细胞系统中转录和翻译包含无义突变的质粒。通过层析纯化蛋白。参见，例如Robertson等人，J.Am.Chem.Soc.113:2722(1991)，Ellman等人，MethodsEnzymol.202:301(1991)，Chung等人，Science259:806(1993)，和Chung等人，Proc.Nat，1Acad.Sci.USA90:10145(1993)。在第二种方法中，通过显微注射突变的mRNA和化学氨基酰化的抑制型tRNA来在爪蟾卵中进行翻译(Turcatti等人，J.Biol.Chem.271:19991(1996))。在第三种方法中，在要被替代的天然氨基酸(例如，苯丙氨酸)不存在的情况下和在想要的非天然发生的氨基酸(例如，2-氮杂苯丙氨酸、3-氮杂苯丙氨酸、4-氮杂苯丙氨酸或4-氟苯丙氨酸)存在的情况下培养大肠杆菌细胞。将非天然发生的氨基酸整合入蛋白以替代其天然的对应物。参见，Koide等人，Biochem.33:7470(1994)。通过体外化学修饰可将天然发生的氨基酸残基转化成非天然发生的种类。可将化学修饰和定点诱变结合以进一步扩展替代的范围(Wynn和Richards,ProteinSci.2:395(1993))。可使用有限数目的非保守性氨基酸、非遗传密码子编码的氨基酸、非天然发生的氨基酸和非天然氨基酸替代IL-22RA的氨基酸残基。可根据本领域已知的方法，例如定点诱变或丙氨酸扫描述诱变(Cunningham和Wells,Science244:1081(1989)，Bass等人，Proc.Nat'lAcad.Sci.USA88:4498(1991)，Coombs和Corey,"Site-DirectedMutagenesisandProteinEngineering,"inProteins:AnalysisandDesign,Angeletti(ed.)，pages259-311(AcademicPress,Inc.1998))鉴定本发明的多肽中的必需氨基酸。在后一种技术中，在分子中的每一个残基上引入单个丙氨酸突变，就生物学活性检测所得的突变分子以鉴定对于该分子的活性是至关重要的氦基酸残基。也参见，Hilton等人，J.Biol.Chem.271:4699(1996)。尽管可使用序列分析进一步确定IL-22RA的配体结合区域，但也可通过结构(例如通过这些技术如核磁共振、晶体学、电子衍射或光亲和标记，结合假定的接触位点氨基酸的突变确定的结构)的物理分析确定在IL-22RA的结合活性(例如IL-22RA和IL-22配体结合，或和抗IL-22RA抗体的结合)中起作用的氨基酸。参见，例如，deVos等人，Science255:306(1992)，Smith等人，J.Mol.Biol.224:899(1992)，和Wlodaver等人，FEBSLett.309:59(1992)。可使用已知的i秀变和筛选的方法，例如由Reidhaar-01son和Sauer(Science241:53(1988))或Bowie和Sauer(Proc.Nat，1Acad.Sci.USA86:2152(1989))公开的方法产生和检测多个氨基酸替代。简而言之，这些发明者公开了这样的方法，该方法用于同时随机化多肽中的两个或更多个位点，选择功能性多肽，然后测定诱变处理的多肽的序列以确定各位点上的可允许的替代的镨。可使用的其他方法包括噬菌体展示法(例如，Lowman等人，Biochem.30:10832(1991)，Ladner等人，美国专利号5，223，409，Huse，国际公开号W092/06204和局部定点诱变(Derbyshire等人，Gene46:145(1986)，和Ner等人，DNA7:127，(1988))。此外，可将生物素或FITC标记的IL-22RA用于IL-22RA配体的表达克隆。也可由Ste,er，Nature370:389(1994)，Stemmer，Proc.Nat，1Acad.Sci.USA91:10747(1994)，和国际/^开号W097/20078公开的DM改组产生公开的IL-22RA核苷酸和多肽序列的变体。简而言之，通过亲本DNA的随机片段的体外同源重组，然后使用导致随机引入的点突变的PCR进行重新装配来产生变体DNA分子。可使用亲本DM分子的家族例如来自不同物种的等位变体或DNA分子来修饰该技术，从而将其他的可变性引入该方法。通过选择想要的突变同时进行抗有害变化的选择来就想要的活性进行选择或筛选，然后再进行另外的重复诱变和检测提供了序列的快速"进化"。可将此处公开的诱变方法和高通量、自动化的筛选方法结合，以在宿主细胞中检测克隆的、诱变处理的多肽的活性。可使用现代化设备从宿主细胞回收编码生物学活性多肽或结合抗-IL-22RA抗体的多肽的诱变处理的DNA分子并对其进行快速测序。这些方法使得能够快速确定目的多肽中的单个氨基酸的重要性，并可用于未知结构的多肽。本发明也包括IL-22RA多肽的"功能性片段"和编码这些功能性片段的核酸分子。可进行核酸分子的常规删除分析以获得编码IL-22RA多肽的核酸分子的功能性片段。作为说明，可用Bal31核酸酶降解具有SEQIDNO:1的核苷酸序列的DNA分子以获得系列嵌套缺失片段。然后将所述片段以符合正确的读框方式插入表达载体，就结合抗IL-22RA抗体的活性分离和检测表达的多肽。外切核酸酶降解的一个替代方案是使用寡核苷酸定位诱变以引入缺失或终止密码子，从而确定想要的片段的产生。可选择地，可使用聚合酶链式反应合成IL-22RA基因的特定片段。通过已由Horisberger和DiMarco，Pharmac.Ther.66:507(1995)概述的关于在干扰素的任一末端或两个末端截断的研究来举例说明该一般方法。此夕卜，由例如Treuter等人，Molec.Gen.Genet.240:113(1993)，Content等人，"Expressionandpreliminarydeletionanalysisofthe42kDa2-5Asynthetaseinducedbyhumaninterferon,winBiologicalInterferonSystems,ProceedingsofISIR-TNOMeetingonInterferonSystems,Cantell(ed.)，pages65-72(Nijhoff1987)，Herschman，"TheEGFReceptor,"inControlofAnimalCellProliferation,第1巻，Boynton等人,(eds.)pages169-199(AcademicPress1985)，Coumailleau等人，J.Biol.Chem.270:29270(1995);Fukunaga等人，J.Biol.Chem.270:25291(1995);Yamaguchi等人，Biochem.Pharmacol.50:1295(1995)，和Meisel等人，PlantMolec.Biol.30:1(1996)描述用于蛋白的功能性分析的标准技术。对此处公开的特定序列的分析提供了一组例证性功能性片段，见表4。编码此处所述的附加的人IL-22RA功能性变体结构域的核苷酸(没有示于表4)可以参考SEQIDN0:1进行确定。这些功能性片段包括例如下述核苷酸序列SEQIDNO:l的核苷酸85-381、206-717和SEQIDNO:1的核苷酸85-717，以及相对应的分别显示于SEQIDNO:2和SEQIDNO:3的编码的氨基酸序列。表4<table>complextableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>本发明也涉及和此处公开的氨基酸序列相比具有氨基酸改变的IL-22RA基因的功能性片段。如上所述，可通过确定和公开的核苷酸和氨基酸序列的同一性的水平，基于结构来鉴定变体IL-22RA基因。IL-22RA基因的核酸分子是否可与包含核苷酸序列例如SEQIDNO:1的核酸分子杂交。本发明也包括使用IL-22RA多肽的功能性片段、抗原表位、IL-22RA多肽的具有表位的部分、和编码这些功能性片段、抗原表位、IL-22RA多肽的具有表位的部分的核酸分子。使用这些片段产生用于产生这样的抗体和结合伴侣的多肽，所述抗体和结合伴侣结合、阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-22或IL-20和IL-22—起的活性。此处定义的"功能性"IL-22RA多肽或其片段的特征在于其阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-20或IL-22的炎症性、增殖性或分化活性的能力，在于其诱导或抑制特化的细胞功能的能力，或在于其特异性结合抗-IL-22RA抗体、细胞、IL-20或IL-22的能力。如此处前面所描述的，IL-22RA的特征在于此处所描述的独特的II型细胞因子受体结构和结构域。因此，本发明还涉及使用这样的融合蛋白，该融合蛋白包含(a)包含上述的结构域中的一个或多个结构域的多肽分子；和(b)包含这些结构域中的一个或多个结构域的功能性片段。融合蛋白的其他多肽部分可由另一种II型细胞因子受体例如IL-10R、IL-13R、IL-20RA、IL-20RB、IL-10RB(CRF2-4)、IL-22RA2提供，或由有助于融合蛋白分泌的非天然的和/或非关联的分泌信号肽提供。本发明也提供包含此处描述的IL-22RA多肽的具有表位的部分的多肽片段或肽。这些片段或肽可包含"免疫原表位"，该表位是当将整个蛋白用于免疫时引起抗体反应的蛋白的部分。可使用标准的方法鉴定具有免疫原表位的肽(参见，例如Geysen等人，Proc.Nat，1Acad.Sci.USA81:3998(1983))。相反地，多肽片段或肽可包含"抗原表位"，该表位是抗体可特异性结合的蛋白分子的区域。某些表位由氨基酸的线性或连续片段构成，这样的表位的抗原性不会被变性剂破坏。在本领域已知，可使用能模拟蛋白的表位的相对短的合成肽刺激抗该蛋白的抗体的产生(参见，例如，Sutcliffe等人，Science219:660(1983))。因此，本发明的具有抗原表位的肽、抗原性肽、表位和多肽用于产生和此处描述的多肽结合的抗体以及鉴定和篩选这样的抗-IL-22RA单克隆抗体，该单克隆抗体是中和性的，其可结合、阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-22和IL-20(单独地或一起地)的活性。本发明的这些中和单克隆抗体可结合IL-22RA抗原表位。可使用Hopp/Woods亲水性分布图确定SEQIDNO:3的最具抗原性潜能的区域(Hopp等人，Proc.Natl.Acad.Sci.78:3824-3828，1981;Hopp，J.Immun.Meth.88:卜18，1986和Triquier等人，ProteinEngineering11:153-169，1998)。该图基于滑动六残基窗口(slidingsix-residuewindow)。忽略埋藏的G、S和T残基以及暴露的H、Y和W残基。在IL-22RA中，可通过本领域4支术人员确定这些区域。此外，SEQIDNO:3中的IL-22RA抗原表位，如使用例如DNASTARProtean程序(DNASTAR，Inc.,Madison,WI)进行Jameson-Wolf作图预测的表位，用作优选的抗原表位，其可通过本领域技术人员进行确定。这些抗原表位包括(l)SEQIDNO:3的氨基酸残基1(脯氨酸)至6(天冬氨酸)；(2)SEQIDNO:3的氨基酸残基26(丝氨酸)至32(脯氨酸)；(3)SEQIDNO:3的氨基酸残基41(赖氨酸)至47(天冬氨酸)；(4)SEQIDNO:3的氨基酸残基49(缬氨酸)至62(半胱氨酸)；(5)SEQIDNO:3的氨基酸残基41(赖氨酸)至62(半胱氨酸)；(6)SEQIDNO:3的氨基酸残基84(丙氨酸)至97(丝氨酸)；(7)SEQIDNO:3的氨基酸残基103(苏氨酸)至108(天冬氨酸)；(8)SEQIDNO:3的氨基酸残基130(精氨酸)至135(组氨酸)；(9)SEQIDNO:3的氨基酸残基164(甘氨酸)至166(赖氨酸)；(10)SEQIDNO:3的氨基酸残基175(酪氨酸)至179(谷氨酸)；(11)SEQIDNO:3的氨基酸残基193(赖氨酸)至196(丙氨酸)；(12)SEQIDNO:3的氨基酸残基203(赖氨酸)至209(苏氨酸)。另外的表位包括如下肽，有可能用CnBr切割非还原的全长人IL-22RA得到肽6(SEQIDNO:56)、肽7(SEQIDNO:57)肽8(SEQIDNO:58);肽9(SEQIDNO:59);肽10(SEQIDNO:60);和肽11(SEQIDNO:61)。半胱氨酸形成二硫键，导致肽7(SEQIDNO:57)和10(SEQIDNO:60)有可能发生交联。特别是，SEQIDNO:56对应于SEQIDNO:3的氨基酸残基l(脯氨酸)至92(蛋氨酸)，SEQIDNO:57对应于SEQIDNO:3的氨基酸残基93(苏氨酸)至120(蛋氨酸)，SEQIDNO:58对应于SEQIDNO:3的氨基酸残基121(赖氨酸)至160(蛋氨酸)，SEQIDNO:59对应于SEQIDNO:3的氨基酸残基161(组氨酸)至185(蛋氨酸)，SEQIDNO:60对应于SEQIDNO:3的氨基酸残基186(异亮氨酸)至199(蛋氨酸)，SEQIDNO:61对应于SEQIDNO:3的氨基酸残基200(半胱氨酸)至211(苏氨酸)。另外，SEQIDNO:2(以及SEQIDNO:3的相应残基)的残基对配体-受体结合很重要，包括SEQIDNO:2的酪氨酸-60，苯丙氨酸-164，酪氨酸-93，精氨酸-112，赖氨酸-210，和谷氨酸-211和(SEQIDNO:3的相应残基)。另外，SEQIDNO:2的主要残基(和SEQIDNO:3的相应残基)对配体-受体直接结合重要，包括SEQIDNO:2的酪氨酸-60，和苯丙氨酸-164(和SEQIDNO:3的相应残基)，并且次级残基包括残基包括SEQIDNO:2的酪氨酸-93、精氨酸-112、赖氨酸-210、和谷氨酸-211(和SEQIDNO:3的相应残基)。在优选的实例中，本发明的中和抗体结合的抗原表位将包括SEQIDNO:2的残基(和SEQIDNO:3的相应残基)，这些残基对配体-受体结合很重要，例如，IL-22RA和IL-20或IL-22(分别或一起)。具有抗原表位的肽和多肽可包含此处公开的氨基酸序列的至少4至10个氨基酸、至少10至15个氨基酸或大约15至大约30个氨基酸。如此处所描述的，可通过使IL-22RA片段化或通过化学肽合成产生这些具有表位的肽和多肽。此外，可通过随机肽文库的噬菌体展示选择表位(参见，例如，Lane和Stephen,Curr.Opin.Immunol.5:268(1993)，和Cortese等人，Curr.Opin.Biotechnol.7:616(1996))。由例如，Mole,"EpitopeMapping,"inMethodsinMolecularBiology,第10巻，Manson(ed.)，pages105-116(TheH画naPressInc.1992)，Price,"ProductionandCharacterizationofSyntheticPeptide-DerivedAntibodies,"inMonoclonalAntibodies:Production,Engineering,andCIinicalApplication，Ritter和Ladyman(eds.)，pages60-84(CambridgeUniversityPress1995)，和Coligan等人(eds.)，CurrentProtocolsinImmunology,pages9，3.1-9.3.5和pages9.4.1-9.4.11(JohnWiley&Sons1997)描述用于鉴定表位和从包含表位的小肽产生抗体的标准方法。对于任何IL-22RA多肽，包括变体和融合蛋白，通过使用上面的表1和表2中所示的信息，本领域技术人员可容易地产生编码该变体的完全简并多核苷酸序列。此外，本领域技术人员可使用标准软件，基于此处描述的核苷酸和氨基酸序列设计IL-22RA变体。5.IL-22RA多肽的产生可在进行常规的技术之后，在重组宿主细胞中产生本发明的多肽，包括全长多肽、可溶性单体、同型二聚体、异二聚体和多聚体受体；全长受体；受体片段(例如，配体结合片段和抗原表位)、功能性片段和融合蛋白。为表达IL-22RA基因，必须将编码多肽的核酸分子有效地连接至在表达载体中控制转录表达的调控序列，然后将其导入宿主细胞。除了转录调控序列例如启动子和增强子外，表达载体可包含翻译调控序列和适合用于筛选具有表达载体的细胞的标记基因。适合用于在真核细胞中生产外源蛋白的表达栽体一般包含(1)原核DNA元件，所述元件编码细菌复制起点和抗生素抗性标记物，从而提供生长和在细菌宿主中选择表达栽体；(2)控制转录起始的真核DM元件，例如启动子，和(3)控制转录本的加工的DM元件，例如转录终止/聚腺苷酰化序列。如上所述，表达载体也可包括编码指导异源多肽进入宿主细胞的分泌途径的分泌序列。例如，IL-22RA表达载体可包含IL-22RA基因和来源于任何分泌基因的分泌序列。本发明的IL-22RA蛋白可在哺乳动物细胞中表达。合适的哺乳动物宿主细胞的示例包括非洲绿猴肾细胞(Vero;ATCCCRL1587)、人胚胎肾细胞(293-HEK;ATCCCRL1573)、幼仓鼠肾细胞(BHK-21、BHK-570;ATCCCRL8544、ATCCCRL10314)、犬肾细胞(MDCK、ATCCCCL34)、中国仓鼠卵巢细胞(CH0-K1、ATCCCCL61、CH0DG44(Chasin等人，Som.Cell.Molec.Genet.12:555，1986))、大鼠垂体细胞(GH1;ATCCCCL82)、HeLaS3细胞(ATCCCCL2.2)、大鼠肝细胞瘤细胞(H-4-II-E;ATCCCRL1548)、SV40转化的猴肾细胞(C0S-1;ATCCCRL1650)和鼠类胚胎细胞(NIH-3T3;ATCCCRL1658)。对于哺乳动物宿主，转录和翻译调控信号可来自哺乳动物病毒，例如，腺病毒、牛乳头状瘤病毒、猿猴病毒等，其中调控信号和具有高水平的表达的特定基因关联。也可从哺乳动物基因例如肌动蛋白、胶原蛋白、肌球蛋白和金属硫蛋白的基因获得合适的转录和翻译调控序列。转录调控序列包括足以指导RNA合成起始的启动子区域。合适的真核启动子包括小鼠金属硫蛋白I基因的启动子(Hamer等人，J.Molec.Appl.Genet.1:273(1982))、疱渗病毒的TK启动子(McKnight，Cell31:355(1982))、SV40早期启动子(Benoist等人，Nature290:304(1981))、劳斯肉瘤病毒启动子(Gorman等人，Proc.Nat'1Acad.Sci.USA79:6777(1982))、细胞巨化病毒启动子(Foecking等人，Gene45:101(1980))和小鼠乳腺瘤病毒启动子(一般参见，Etcheverry，"ExpressionofEngineeredProteinsinMammalianCel1Culture，，，inProteinEngineering:PrinciplesandPractice,Cleland等人(eds.)，pages163-181(JohnWiley&Sons,Inc.1996))。可选择地，如果原核启动子受真核启动子的调控，那么该原核启动子，例如噬菌体T3RNA聚合酶启动子，可用于在哺乳动物细胞中控制IL-22RA基因的表达(Zhou等人，Mol.Cell.Biol.10:4529(1990)，和Kaufman等人，Nucl.AcidsRes.19:4485(1991))。在某些实施方案中，将编码IL-22RA可溶性受体多肽、或IL-22RA他基因元件，通常包括转录启动子和终止子。所述载体一般也包含一种或多种选择标记物和一个或多个复制起始位点，尽管本领域技术人员认识到，在某些系统内，可在分开的载体上提供选择标志物，和通过将外源DNA整合入宿主细胞基因组中来提供其的复制。启动子、终止子、选择标志物、载体和其他元件的选择在本领域技术人员的水平之内的常规设计范围之内。在文献中描述了许多这些元件，并且其也可从提供商商购获得。可将可溶性受体复合物的多个组分以分开的表达栽体的形式共转染，或可将所述多个组分包含在单个表达载体内。表达蛋白复合物的多个组分的这些技术在本领域是熟知的。可使用各种标准方法(包括磷酸钙转染法、脂质体介导的转染、显微注射介导的递送、电穿孔等)将表达载体导入宿主细胞。可选择和繁殖转染细胞以提供包含稳定地整合入宿主细胞基因组的表达载体的重组宿主细胞。由例如，Ausubel(1995)和Murray(ed.)，GeneTransferandExpressionProtocols(HumanaPress1991)描述用于将载体导入真核细胞的技术和使用显性选择标记物选择这些稳定的转化子的技术。例如，一种合适的选择性标记物是提供对抗生素新霉素的抗性的基因。在该情况下，在新霉素类型药物例如G-418等存在的情况下进行选择。也可使用选择系统增加目的基因的表达水平，即称为"扩增"的方法。通过在低水平选择剂存在的情况下培养转染子，然后增加选择剂的量以筛选产生高水平的被导入基因的产物的细胞来进行扩增。合适的可扩增的选择标记物是二氢叶酸还原酶(DHFR),其可提供对氨甲蝶呤的抗性。也可使用其他抗性基因(例如，潮霉素抗性基因、广谦抗药基因、嘌呤霉素乙酰转移酶基因)。可选择地，可通过这些方法例如FACS分选法或磁珠分离技术，使用引入改变的表型的标记物，例如绿色荧光蛋白或细胞表面蛋白例如CD4、CD8、I类MHC、胎盘碱性磷酸酶，从未转染的细胞中将转染的细胞分选出来。也可通过使用病毒递送系统培养哺乳动物细胞来生产IL-22RA多肽。用于此目的的示例性病毒包括腺病毒、逆转录病毒、疱渗病毒、痘苗病毒和腺伴随病毒(AAV)。腺病毒，是双链DNA病毒，是目前研究最透彻的用于递送异源核酸的基因转移载体(关于综述，参见Becker等人，Meth.CeliBiol.43:161(1994)，和Douglas和Curiel,Science&Medicine4:44(1997))。腺病毒系统的有利方面包括容纳相对大的DNA插入物、培养至高滴度的能力、感染广泛的哺乳动物细胞类型的能力和允许和大量可获得的包含不同启动子的载体一起使用的适应性。通过删除腺病毒基因组的部分，可容纳更大的异源DNA的插入物(高达7kb)。可通过直接连接或通过和共转染的质粒的同源重组将这些插入物整合入病毒DM。将必需的El基因从病毒载体中删除是个选择，这导致不能复制，除非由宿主细胞提供E1基因才能进行复制。腺病毒转染的人293细胞(ATCC号CRL-1573、45504、45505),可以例如贴壁细胞方式或以相对高的细胞密度的悬浮培养方式进行培养以产生大量的蛋白(参见，Gamier等人，Cytotechnol.15:145(1994))。IL-22RA也可在其他高等真核细胞例如鸟类、真菌、昆虫、酵母或植物细胞中表达。杆状病毒系统提供了将克隆的IL-22RA基因导入昆虫细胞的有效方法。合适的表达载体基于苜蓿银紋夜蛾(Autographacalifornica)多核型多角体病毒(AcMNPV)，其包括熟知的启动子例如果蝇热激蛋白(hsp)70启动子、苜蓿银紋夜蛾多核型多角体病毒立刻早期基因启动子(ie-l)和晚早期39K启动子、杆状病毒pl0启动子和果蝇金属硫蛋白启动子。制备重组杆状病毒的笫二种方法使用由Luckow(Luckow，等人，J.Virol.67:4566(1993))描述的基于转座子的系统。使用转移载体的该系统以BAC-to-BAC试剂盒(LifeTechnologies,Rockville，MD)的形式出售。该系统使用转移载体，即包含Tn7转座子的PFASTBAC(LifeTechnologies)，将编码IL-22RA多肽的DNA转入杆状病毒基因组，该病毒基因组以称为"杆粒"的大质粒形式保持在大肠杆菌中。参见，Hill-Perkins和Possee，J.Gen.Virol.71:971(1990),Bonning，等人，J.Gen.Virol.75:1551(1994)，和Chazenbalk，和Rapoport，J.Biol,Chem.270:1543(1995)。此外，转移载体可包含在表达的IL-22RA多肽的C-或N-末端和编码表位标签的例如Glu-Glu表位标签(Grussenmeyer等人，Proc.Nat'1Acad.Sci.82:7952(1985))的DM按读码框融合的融合物。通过使用本领域已知的技术，将包含IL-22RA基因的转移载体转化入大肠杆菌，篩选包含指示重组杆状病毒的间断lacZ基因的杆粒。然后使用常用技术分离包含重组杆状病毒基因组的杆粒DNA。可将用作说明的PFASTBAC载体改造至变化相当大的程度。例如，Pcor、p6.9或MP启动子)替代，该碱性蛋白启动子在杆状病毒感染早期表达，并且已显示有利于表达分泌蛋白(参见，例如，Hill-Perkins和Possee，J.Gen.Virol.71:971(1990)，Bonning，等人，J.Gen.Virol.75:1551(1994)，和Chazenbalk和Rapoport,J.Biol.Chem.270:1543(1995)。在这些转移载体构建体中，可使用碱性蛋白启动子的短的或长的形式。此外，可构建用来源于昆虫蛋白的分泌信号序列取代天然的IL-22RA分泌信号序列的转移载体。例如，可在构建体中使用来自蜕皮甾类葡糖基转移酶(EGT)，蜜蜂的蜂毒素Melittin(InvitrogenCorporation;Carlsbad,CA)或杆状病毒gp67(PharMingen:SanDiego,CA)的分泌信号序列替代天然的IL-22RA分泌信号序列。使用重组病毒或杆粒转染宿主细胞。合适的昆虫宿主细胞包括来源于IPLB-Sf-21(草地夜蛾蛹卵巢细胞系)的细胞系，例如Sf9(ATCCC壯1711)、Sf21AE和Sf21(InvitrogenCorporation;SanDiego，CA)、和果錄Schneider-2细胞以及来源于粉紋夜蛾(Trichoplusiani)(美国专利号，5，300，435)的HIGHFIVEO细胞系(Invitrogen)。可使用可商购获得的无血清培养基培养和维持细胞。对于Sf9细胞合适的培养基是Sf900II(LifeTechnologies)或ESF921TM(ExpressionSystems);和对于粉紋夜蛾细胞使用的培养基是Ex-cel10405(JRHBiosciences,Lenexa，KS)或ExpressFiveO(LifeTechnologies)。当使用重组病毒时，一般将细胞从大约2-5x105个细胞的接种密度培养至1-2x106个细胞的密度，此时以0.l至10、更一般地接近3的感染复数(MOI)加入重组病毒贮存物。由Bailey等人，"ManipulationofBaculovirusVectors,"inMethodsinMolecularBiology,第7巻GeneTransferandExpressionProtocols,Murray(ed.)，pages147-168(TheHumanaPress,Inc.1991)，Patel等人，"Thebaculovirusexpressionsystem,"inDMCloning2:ExpressionSystems,第2版，Glover等人(eds.)，pages205-244(OxfordUniversityPress1995)，Ausubel(1995)atpages16-37至16-57，Richardson(ed.)，BaculovirusExpressionProtocols(TheHumanaPress,Inc.1995)，和Lucknow，"InsectCellExpressionTechnology,"inProteinEngineering:PrinciplesandPractice,Cleland等人(eds.)，pages183-218(JohnWiley&Sons,Inc.1996)提供用于在杆状病毒系统中生产重组蛋白的已建立的技术。也可使用真菌细胞，包括酵母细胞，表达此处描述的基因。在该方面特别有益的酵母种类包括酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、巴斯德毕赤氏酵母(Pichiapastoris)和甲醇毕赤酵母(Pichiamethanolica)。用于在酵母中表达的合适的启动子包括来自GALl(半乳糖)、PGK(磷酸甘油激酶)、ADH(醇脱氢酶)、A0X1(醇氧化酶)、HIS4(组氨醇脱氢酶)等的启动子。已设计了许多醇母克隆载体并且可容易地获得其。这些载体包括基于Yip的载体，例如YIP5，YRp载体，例如YRpl7，YEp栽体例如YEpl3和YCp载体，例如YCpl9。由例如，Kawasaki,美国专利号4,599,311，Kawasaki等人，美国专利号4，931，373,Brake,美国专利号4，870，008，Welch等人，美国专利号5，037,743，和Murray等人，美国专利号4，845，075公开了用外源DM转化酿酒酵母细胞和从其生产重组多肽的方法。通过由选择标记物确定的表型，通常为抗药性或在特定营养物(例如，亮氨酸)不存在的情况下的生长能力，选择转化的细胞。用于酿酒酵母的合适的载体系统是由Kawasaki等人(美国专利号4，931，373)公开的P0T1载体系统，该系统使得能够通过将细胞培养在含有葡萄糖的培养基上来选择转化的细胞。用于醇母的其他合适的启动子和终止子包括来自糖酵解酶基因(参见，例如，Kawasaki，美国专利号4,599,311，Kingsman等人，美国专利号4,615,974，和Bitter，美国专利号4,977，092)和醇脱氢酶基因的启动子和终止子。也参见美国专利号4,990,446、5，063，154、5，139，936和4，661，454。用于其他酵母，包括多形汉逊氏酵母(Hansenulapolymorpha)、粟酒裂殖糖酵母(Schizosaccharomycespombe)、乳克鲁维氏酵母(Kluyveromyceslactis)、脆壁克鲁维氏酵母(Kluyveromycesfragilis)、玉蜀黍黑粉菌(Ustilagomaydis)、巴斯德毕赤氏酵母、甲醇毕赤酵母、季也蒙氏毕赤氏酵母(Pichiaguillermondii)和麦芽糖假丝酵母(Candidamaltosa)的转化系统在本领域是已知的。参见，例如，Gleeson等人，J.Gen.Microbiol.132:3459(1986)，和Cregg，美国专利号4,882,279。根据McKnight等人，美国专利号4，935，349的方法可使用曲霉(Aspergillus)细胞。Sumino等人，美国专利号5，162，228公开了转化产黄顶头孢霉菌(Acremoniumchrysogenum)的方法。Lambowitz，美国专利号4，486，533/>开了转化脉孢菌(Neurospora)的方法。例如，由Raymond,美国专利号5，716，808，Raymond,美国专利号5，736，383，Raymond等人，Yeast14:11-23(1998)，和国际公开号WO97/17450、WO97/17451、W098/02536和W098/02565中公开了使用曱醇毕赤酵母作为宿主生产重组蛋白的用途。通常以双链、环形质粒的方式制备用于转化甲醇毕赤酵母的MA分子，在转化前，优选地将该质粒线性化。为了在甲醇毕赤酵母中生产多肽，质粒中的启动子和终止子可以是曱醇毕赤酵母基因例如曱醇毕赤酵母醇利用基因(AUG1或AUG2)的启动子和终止子。其他有用的启动子包括二羟基丙酮合酶(DHAS)、甲酸脱氢酶(FMD)和过氧化氢酶(CAT)基因的启动子。为了帮助将DNA整合入宿主染色体，优选地使质粒的整个表达片段在两个侧翼连接宿主的DNA序列。用于甲醇毕赤酵母的合适的选择标记物是甲醇毕赤酵母ADE2基因，该基因编码磷酸核糖5-氨基咪唑羧化酶(AIRC;EC4.1.1.21)，其允许ade2宿主细胞在缺少腺嘌呤的情况下生长。为了进行其中想要最少量地使用曱醇的大规模的、工业化的生产方法，可使用其中删除了甲醇利用基因(AUG1和AUG2)的宿主细胞。为了生产分泌蛋白，宿主细胞可以在液泡蛋白酶基因(PEP4和PRB1)上具有缺陷。使用电穿孔帮助将包含编码目的多肽的DNA的质粒导入甲醇毕赤酵母细胞。可使用呈指数式衰减、具有从2.5至4.5kV/cm(优选地大约3.75kV/cm)的场强的脉冲电场和从1至40毫秒(最优选地大约20亳秒)的时间常数(t)进行电穿孔来转化甲醇毕赤酵母细胞。也可将表达载体导入植物原生质体、完整的植物组织或分离的植物细胞。用于将表达载体导入植物组织的方法包括用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)直接感染或共培养植物组织、显微注射介导的递送、DNA注射、电穿孔等。参见，例如，Horsch等人，Science227:1229(1985)，Klein等人，Biotechnology10:268(1992)，和Miki等人，"ProceduresforIntroducingForeignDNAintoPlants,"inMethodsinPlantMolecularBiologyandBiotechnology,Glick等人(eds.)，pages67-88(CRCPress,1993)。可选择地，可在原核宿主细胞中表达IL-22RA基因。可用于在原核宿主中表达IL-22RA多肽的合适的启动子对于本领域技术人员来说是熟知的，其包括能够识别T4、T3、Sp6和T7聚合酶的启动子、入噬菌体的PR和Pt启动子、大肠杆菌的trp、recA、热激、lacUV5、tac、lpp-lacSpr、phoA和lacZ启动子、枯草芽孢杆菌(B.subtilis)的启动子、芽孢杆菌(Bacillus)的噬菌体的启动子、链霉菌(Streptomyces)的启动子、人谨菌体的int启动子、pBR322的bla启动子和氯霉素乙酰转移酶基因的CAT启动子。已由Glick，J.Ind.Microbiol.1:277(1987)，Watson等人，MolecularBiologyoftheGene，4thEd,(BenjaminCummins1987)，和Ausubel等人(1995)对原核启动子进行了综述。合适的原核宿主包括大肠杆菌和枯草芽孢杆菌。大肠杆菌的合适的林系包括BL21(DE3)、BL21(DE3)pLysS、BL21(DE3)pLysE、DH1、DH4I、DH5、DH5I、DH5IP、DH5IMCR、DH10B、DH10B/p3、DH11S、C600、HBIOI、JMIOI、JM105、JM109、JMllO、K38、RRl、Y1088、Y1089、CSH18、ER1451和ER1647(参见，例如，Brown(ed.)，MolecularBiologyLabfax(AcademicPress1991))。枯草芽孢杆菌的合适的林系包括BR151、YB886、MI119、MI120和B170(参见，例如，Hardy,"BacillusCloningMethods,"inDMCloning:APracticalApproach,Glover(ed.)(IRLPress1985))。当在细菌例如大肠杆菌中表达IL-22RA多肽时，可将多肽保留在细胞质中，通常以不溶性颗粒的形式保留，或可通过细菌分泌序列直接将多肽分泌至周质间隙。在前一种情况下，裂解细胞，回收所述颗粒并使用例如异硫氰酸胍或尿素使之变性。然后通过稀释变性剂(例如通过对尿素溶液和还原和氧化谷胱甘肽的组合透析来进行稀释)，之后对緩沖盐溶液进行透析来重折叠和二聚化变性的多肽。在后一种情况下，可从周质间隙以可溶性和功能性的形式回收多肽，通过破裂细胞(通过，例如，超声处理或渗透休克)以释放周质间隙的内容物和回收蛋白进行回收，从而避免了对变性和重折叠的需要。用于在原核宿主中表达蛋白的方法对于本领域技术人员来说是熟知的(参见，例如，Williams等人，"ExpressionofforeignproteinsinE.coliusingplasmidvectorsandpurificationofspecificpolyclonalantibodies,，，inDNACloning2:ExpressionSystems,第2版，Glover等人(eds.)，page15(OxfordUniversityPress1995),Ward等人，"GeneticManipulationandExpressionofAntibodies,，，inMonoclonalAntibodies:PrinciplesandApplications,page137(Wiley-Liss，Inc.1995)，和Georgiou，"ExpressionofProteinsinBacteria,"inProteinEngineering:PrinciplesandPractice,Cleland等人(eds.)，page101(JohnWiley&Sons,Inc.1996))用于将表达载体导入细菌、酵母、昆虫和植物细胞的标准方法由例如Ausubel(1995)提供。用于表达和回收由哺乳动物细胞系统产生的外源蛋白的一般方法由例如Etcheverry，"ExpressionofEngineeredProteinsinMammalianCellCulture,"inProteinEngineering:PrinciplesandPractice,Cleland等人(eds.)，pages163(Wiley-Liss,Inc.1996)提供。用于回收由细菌系统产生的蛋白的标准技术由例如Grisshammer等人，"Purificationofover-producedproteinsfromE.colicells,"in腿Cloning2:ExpressionSystems,第2版，Glover等人(eds.)，pages59-92(OxfordUniversityPress1995)提供。由Richardson(ed.)，BaculovirusExpressionProtocols(TheHumanaPress,Inc.1995)描述了用于从杆状病毒系统分离重组蛋白的已建立的方法。作为选择，可通过完全的固相合成、部分固相方法、片段缩合或经典的溶液合成来合成本发明的多肽。这些合成方法对于本领域技术人员来说是熟知的(参见，例如，Merrifield,J.Am.Chem.Soc.85:2149(1963)，Stewart等人，"SolidPhasePeptideSynthesis"(第2版)，(PierceChemicalCo.1984)，Bayer和Rapp，Chem.Pept.Prot.3:3(1986)，Atherton等人，SolidPhasePeptideSynthesis:APracticalApproach(IRLPress1989)，Fields和Colowick，"Solid-PhasePeptideSynthesis,"MethodsinEnzymologyVolume289(AcademicPress1997)，和Lloyd-WUUams等人，ChemicalApproachestotheSynthesisofPeptidesandProteins(CRCPress,Inc.1997))。总的化学合成策略上的变化，例如"天然的化学连接"和"表达的蛋白的连接，，也是标准的(参见，例如，Dawson等人，Science266:776(1994)，Hackeng等人，Proc.NatMAcad.Sci.USA94:7845(1997)，Dawson，MethodsEnzymo1.287:34(1997)，Muir等人，Proc.NatMAcad.Sci.USA95:6705(1998)，和Severi磨和Muir，J.Biol.Chem.273:16205(1998))。本发明的肽和多肽包含SEQIDNO:3的至少6个、至少9个或至少15个连续氨基酸残基。作为说明示例，多肽可包含SEQIDNO:3的至少6个、至少9个或至少15个连续氨基酸残基。在本发明的某些实施方案中，多肽包含这些氨基酸序列的20、30、40、50、100或更多个连续残基。编码这些肽和多肽的核酸分子可用作聚合酶链式反应的引物和探针。此外，IL-22RA多肽和其片段在高等真核细胞中可表达为单体、同型二聚体、异二聚体或多聚体。可使用这些细胞产生包含至少一个IL-22RA多肽("包含IL-22RA的受体"或"包含IL-22RA的受体多肽")的IL-22RA单体、同型二聚体、异二聚体和多聚体受体多肽，或可在筛选系统中将这些细胞用作测定细胞。在本发明的一个方面中，通过培养的细胞产生包含IL-22RA细胞外结构域的本发明的多肽，使用该细胞筛选受体的配体，包括天然配体，IL-22,或甚至天然配体的激动剂和拮抗剂。该方法概述如下，将编码受体的cDNA或基因和其表达所必需的其他基因元件(例如，转录启动子)组合在一起，将所得的表达载体插入宿主细胞。在各种筛选系统中选择和使用表达DNA和产生功能性受体的细胞。可在相同细胞中表达单体、同型二聚体、异二聚体和多聚体受体复合物的各组分。此外，也可将单体、同型二聚体、异二聚体和多聚体受体复合物的组分融合至跨膜结构域或其他膜融合部分以使能够装配复合物和篩选上述的转染子。为了测定本发明的IL-20和IL-22的拮抗剂多肽和抗体，适合用于表达包含IL-22RA的受体或已知结合IL-20或IL-22以及转导受体介导的信号的其他受体(例如，表达IL-22RA/CRF2-4;和IL-20RA，IL-20RB，IL-22RA/IL-20RB，或IL-20RA/IL-20RB的细胞)的哺乳动物细胞包括表达可与IL-22RA(或IL-20RA)—起形成功能性复合物的其他受体亚基的细胞。这些亚基可以包括那些属于干扰素受体家族的或其它II型或I型细胞因子受体的，例如，CRF2-4(Genbank编号Z17227)、IL-10R(Genbank编号U00672和NM-001558)、IL-22RA(共同拥有的美国专利号5,965,704)、zcytor7(IL-20RA)(共同拥有的美国专利号5,945,511)、IL-20RA/IL-20RB(WIPO公布号WO01/46232)和IL-9R。使用和要表达的受体一样来自相同的物种的细胞也是优选。在优选的实施方案中，所述细胞依赖于外源提供的用于其扩增的造血生长因子。该类型的优选细胞系是人TF-1细胞系(ATCC编号CRL-2003)和AML-193细胞系(ATCC编号CRL-9589)，所迷细胞系是GM-CSF依赖性人白血病细胞系和BaF3(Palacios和Stei謡tz，Cell41:727-734，(1985))，所述BaF3是IL-3依赖性鼠类pre-B细胞系。其他细胞系包括BHK、C0S-1和CHO细胞。可将适合的宿主细胞进行改造以产生必需的受体亚基或进行想要的细胞应答所需的其他细胞组分。该方法是有利的，因为可将细胞系进行改造以表达来自任何物种的受体亚基，从而克服由于物种特异性产生的潜在限制。可在来自相同的物种的细胞系中克隆和使用人受体cDNA的物种直向同源物，例如BaF3细胞系中的小鼠cDNA。因此可将依赖于一种造血生长因子例如GM-CSF或IL-3的细胞系进行改造，使之成为依赖于通过IL-22RA受体起作用的另一种细胞因子，例如IL-22。在筛选测定法中使用表达功能性受体的细胞。各种合适的测定法在本领域中是已知的。这些测定法基于靶细胞中的生物学反应的检测。一个这样的测定法是细胞增殖测定法。在受试化合物存在或不存在的情况下培养细胞，通过例如测量氖标记的胸苷的整合或通过基于3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基溴化四唑镇(MTT)(Mosman，J.Immunol.Meth.65:55-63，(1983))的代谢分解的比色测定法来检测细胞的增殖。一种替代的检测方式采用了进一步改造从而表达报告基因的细胞。将报告基因连接至对受体关联途径作出反应的启动子元件，该测定法检测报告基因的转录的激活。该方面中的优选的启动子元件是血清应答元件，或SRE。参见，例如，Shaw等人，Cell56:563-572，(1989)。优选的这样的报告基因是萤光素酶基因(deWet等人，Mol.Cell.Biol.7:725，(1987))。通过使用本领域已知的方法(例如，Baumgartner等人，J.Biol.Chem.269:29094-29101，(1994)，Schenborn和Goiffin，PromegaNotes41:11，1993)检测发光来检测萤光素酶基因的表达。萤光素酶活性测定试剂盒可从例如PromegaCorp.,Madison,WI商购获得。可使用该类型的把细胞系筛选化学试剂文库、细胞条件化的培养基、真菌液体培养基、土壤样品、水样品等。例如，可对靶细胞测定细胞条件化的培养基样品的文库以鉴定产生配体的细胞。然后使用阳性细胞在哺乳动物表达载体中产生cDNA文库，将该文库分为亚文库、转染入宿主细胞并进行表达。然后测定来自转染的细胞的培养基样品，随后对亚文库再细分，再转染、传代培养，和再次测定阳性细胞以分离编码配体的克隆的cDNA。本领域已知或能够构建几种IL-20应答性细胞系，例如Baf3/DIRSl/cytoR11细胞系(WIP0爿^开号W002/072607)。而且，已知几种IL-20应答性细胞系，(D画ntier等人，J.Immunol.164:1814-1819，2000;D國utier，L.等人，Proc.Nat".Acad.Sci.97:10144-10149，2000;XieMH等人，J.Biol.Chem.275:31335-31339，2000;KotenkoSV等人，J.Biol.Chem.276:2725-2732，2001)以及表达IL-22受体亚基IL-22RA的细胞系。例如，下述细胞对IL-22应答TK-10(XieMH等，如前所述.)(人肾癌)；SW480(ATCC号CCL-228)(人结肠腺癌);HepG2(ATCC号HB-8065)(人肝癌);PC12(ATCC号CRL-1721)(鼠神经元细胞模型；大鼠嗜铬细胞瘤)和MES13(ATCC号CRL-1927)(鼠肾小球膜细胞细胞系)。另外，一些表达IL-22RA(IL-22受体)的细胞系也可以作为对IL-22应答的候选细胞系A549(ATCC号CCL-185)(人肺癌);G-361(ATCC号CRL-1424)(人黑素瘤)和Caki-l(ATCC号HTB-46)(人肾癌)。另外，能够构建IL-22应答细胞系，例如，此处所述的Baf3/cytoRll/CRF2-4细胞系(WIP0公开号W002/12345)。这些细胞能够用于评价IL-22RA作为IL-20或IL-22拮抗剂或抗炎因子的功能的检测。由本发明提供的其他筛选方法包括杂合受体多肽的使用。这些杂合多肽大体分为2类。在第1类中，IL-22RA的细胞内结构域连接至第二受体的配体结合结构域。第2类杂合受体多肽包含IL-22RA(SEQIDNO:3)的细胞外(配体结合)结构域和第二受体(优选造血细胞因子受体)的细胞内结构域和跨膜结构域。本发明的该第2类受体的杂合IL-22RA单体、同型二聚体、异二聚体和多聚体在已知能够对第二受体转导的信号作出应答的细胞中表达。这两类杂合受体一起能够鉴定用于开发检测IL-22或IL-20的测定法的反应性细胞类型。此外，可在IL-22或IL-20存在的情况下使用这些细胞，以在竟争型测定法中检测本发明的可溶性受体拮抗剂。在该测定法中，在本发明的可溶性受体存在的情况下，增殖或IL-22或IL-20的信号转导活性降低证明了拮抗活性。此外，也可使用IL-22RA可溶性受体结合测定法(基于细胞的测定法)，确定可溶性受体是否结合、阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-22或IL-20的活性。6.IL-22RA融合蛋白和缀合物的产生IL-22RA类似物的一个大类是具有这样的氨基酸序列的变体，该序列是此处公开的氨基酸序列的突变。如下面所描述的，由抗独特型抗体和其片段提供另一大类IL-22RA类似物。此外，可将包含抗独特型可变结构域的重组抗体用作类似物(参见，例如，Monfardini等人，Proc.Assoc.Am.Physicians108:420(1996))。因为抗独特型IL-22RA抗体的可变结构域模拟IL-22RA，因此这些结构域可提供IL-22RA结合活性。产生抗独特型催化抗体的方法对于本领域技术人员来说是已知的(参见，例如，Joron等人，Ann.NYAcad.Sci.672:216(1992)，Friboulet等人，Appl.Biochem.Biotechnol.47:229(1994)，和Avalle等人，Ann.NYAcad.Sci.864:118(1998))。通过使用组合文库提供鉴定IL-22RA类似物的另一种方法。由例如Kay等人，PhageDisplayofPeptidesandProteins(AcademicPress1996)，Verdine，美国专利号5,783,384，Kay，等人，美国专利号5，747，334，和Kauffman等人，美国专利号5，723，323提供用于构建和筛选噬菌体展示和其他组合文库的方法。IL-22RA多肽具有体内和体外用途。作为说明示例，可向细胞培养基中加入IL-22RA的可溶性形式以抑制由培养细胞产生的IL-22RA配体的作用。可使用IL-22RA的融合蛋白在重组宿主中表达IL-22RA，和分离产生的IL-22RA。如下所述，特定的IL-22RA融合蛋白也在诊断和治疗上具有用途。一类融合蛋白包含引导来自重组宿主细胞的IL-22RA多肽的肽。为指导IL-22RA多肽进入真核宿主细胞的分泌途径，在IL-22RA表达载体中提供分泌信号序列(也称为信号肽，前导序列，前原(prepro)序歹寸或前序歹寸(presequence))。'尽管分泌信号序歹寸可来源于IL-22RA，但合适的信号序列也可以来自另一种分泌蛋白或从头合成。以这样的方式将分泌信号序列有效地连接至编码IL-22RA的序列，即，使得两个序列以正确的符合读框的方式连接和定位，从而指导新合成的多肽进入宿主细胞的分泌途径。分泌信号通常位于编码目的多肽的核普酸序列的5，，尽管某些分泌信号序列可位于目的核苷酸序列的其他位置(参见，例如，Welch等人，美国专利号5，037，743;Holland等人，美国专利号5，143，830)。尽管可将哺乳动物细胞产生的IL-22RA或另一种蛋白的分泌信号序列(例如，组织型纤溶酶原活化因子信号序列，如在例如美国专利号5,641,655中所描述的)用于在重组哺乳动物宿主表达IL-22RA，但在酵母细胞中表达时优选地使用酵母的信号序列。合适的酵母信号序列的示例是来源于酵母接合信息素a因子(由MFal基因编码)、转化酶(由SUC2基因编码)、或酸性磷酸酶(由PH05基因编码)的信号序列。参见，例如，Romanos等人，"ExpressionofClonedGenesinYeast,"inDNACloning2:APracticalApproach,第2版，GloverandHames(eds.)，pages123-167(OxfordUniversityPress1995)。可通过表达编码细胞外结构域，例如包含SEQIDN0:3的多肽或非人受体的对应区域的截短的DM来制备IL-22RA可溶性受体多肽。域多肽。为指导受体结构域通过宿主细胞外运，将受体DNA连接至编码分泌肽例如t-PA分泌肽的第二个DNA片段。为帮助分泌受体结构域的纯化，可将这样的C末端延伸物融合至受体多肽，所述C末端延伸物是例如多组氨酸标签、P物质、FlagTM肽(Hopp等人，Biotechnology6:1204-1210，(1988);可从EastmanKodakCo.，NewHaven，CT获得)或可获得其抗体或其他特异性结合剂的另外的多肽或蛋白。此外，也如上所述制备来自细胞外细胞因子结合结构域的IL-22RA抗原表位。在可选择的方法中，可以和免疫球蛋白重链恒定区(通常为Fc片段)的融合物的方式表达IL-22RA的受体细胞外结构域或其他I型或II型细胞因子受体组分，典型的是Fc片段，该片段包含2个恒定区结构域和一个铰链区，但缺少可变区(参见，Sledziewski，AZ等人，美国专利号6，018，026和5，750，375)。本发明的可溶性IL-22RA多肽包括这些融合物。一种这样的融合物示于SEQIDNO:4。这些融合物一般以多聚体分子的形式分泌，其中Fc部分相互之间通过二硫键连接，两个受体多肽相互之间非常紧密地靠近排列。该类型的融合物可用于从溶液中亲和纯化关联配体，作为体外测定工具，用于通过特异性地滴定完配体来阻断、抑制或减少体外信号，以及作为体内拮抗剂，通过肠胃外途径施用其以结合循环配体或从循环中将其清除。为纯化配体，在有助于受体-配体结合的条件(通常接近生理学温度、pH和离子强度)下，向包含配体的样品(例如，细胞条件化的培养基或组织提取物)加入IL-22RA嵌合体。然后通过使用固定在固体支持物(例如不溶性树脂小珠)的A蛋白进行混合来分离嵌合体-配体复合物。然后使用常规化学技术例如使用盐或pH梯度洗脱配体。在可选择的方法中，可将嵌合体自身结合至固体支持物，如上进行结合和洗脱。可在体内使用嵌合体以调节炎症反应，包括急性期反应例如血清淀粉样蛋白A(SAA)、C-反应性蛋白(CRP)等。可经肠胃外途径(例如，通过肌内、皮下或静脉内注射)施用具有高结合亲和力的嵌合体。循环分子结合配体并通过正常的生理学过程从循环中将其清除。为了用于测定法，通过Fc区域将嵌合体结合至支持物并用于ELISA形式。为帮助分离本发明的抗IL-22RA和结合伴侣，可有利地使用这样的测定系统，该测定系统使用配体结合受体(或抗体，互补/反互补对的一个成员)或其结合片段以及商购可方便的获得的生物传感装置(BIAcore，PharmaciaBiosensor,Piscataway，NJ)。将这些受体、抗体、互补/反互补对的成员或片段固定在受体芯片的表面。由Karlsson，J.Immunol.Methods145:229-40，1991和Cimningham和Wells，J.Mol.Biol.234:554-63，1993公开了该仪器的用途。使用胺或巯基化学试剂将受体、抗体、成员或片段共价地附着至葡聚糖纤维(其附着至流体小室内的金膜)。将受试样品通过所迷小室。如果配体、表位或互补/反互补对的相对成员存在于样品中，其将分别和固定的受体、抗体或成员结合，从而导致介质的折射率发生变化，将该变化通过金膜的表面等离子体共振的变化来进行检测。该系统允许确定这样的结合和解离率，根据所述结合和解离率可计算结合亲和力和确定结合的化学计量学。可选择地，可使用SELDI(TM)技术(Ciphergen，Inc.，PaloAlto，CA)分析配体/受体结合。此外，上述BIAC0RE技术通常可用于竟争性实验以确定不同的单克隆抗体是否结合IL-22RA多肽上的相同或不同的表位，这样，其可用于帮助本发明的中和抗体的表位作图，所述中和抗体结合、阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-22或IL-20和IL-22两者。也可在本领域已知的其他测定系统中使用配体结合性受体多肽。这些系统包括用于确定结合亲和力的Scatchard分析法(参见Scatchard，Ann.NYAcad.Sci.51:660-72，1949)和量热测定法calorimetricassays(Cunningham等人，Science253:545-48，1991;Cunningham等人，Science245:821-25，1991)。本发明还提供了各种其他多肽融合物和包含一个或多个多肽融合物的关联多聚体蛋白。例如，可以融合物的形式制备可溶性IL-22RA受体，形成美国专利号5，155，027和5,567,584中公开的二聚化蛋白。该方面中的优选的二聚化蛋白包括免疫球蛋白恒定区结构域，例如，IgGy1，和人K轻链。免疫球蛋白-可溶性IL-22RA融合物可在经改造的细胞中表达，从而产生各种多聚体IL-22RA受体类似物。可将辅助结构域融合至可溶性IL-22RA受体，从而将其乾向特定细胞、组织或大分子(例如，胶原、或表达IL-22RA配体IL-22或IL-20的细胞)。可将IL-22RA多肽融合至2个或多个部分，例如用于纯化的亲和标签和靶向性结构域。多肽融合物也可包含1个或多个切割位点，特别是在结构域之间。参见，T訓等人，ConnectiveTissueResearch34:1-9,1996。在细菌细胞中，通常想要以融合蛋白的形式表达异源蛋白以减少所表达的蛋白的毒性、增加其稳定性和提高其回收。例如，可以包含谷胱甘肽S-转移酶多肽的融合蛋白的形式表达IL-22RA。谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白通常是可溶性的，并且可容易地在固定的谷光甘肽柱子上从大肠杆菌裂解物中纯化其。在相似的方法中，可用直链淀粉树脂柱分离包含结合麦芽糖的蛋白多肽的IL-22RA融合蛋白，也可使用IgG-Sepharose纯化包含截断的A蛋白基因的C末端的融合蛋白。由例如Wi11iams等人，"ExpressionofForeignProteinsinE.coliUsingPlasmidVectorsandPurificationofSpecificPolyclonalAntibodies,"in腿Cloning2:APracticalApproach,第2版，GloverandHames(Eds.)，pages15-58(OxfordUniversityPress1995)描述了用于在细菌细胞中以融合蛋白的形式表达异源多肽的已建立的技术。此外，可商购获得表达系统。例如，PINPOINTXa蛋白纯化系统(PromegaCorporation;Madison,WI)提供了使用包含抗生物素蛋白的树脂分离这样的融合蛋白的方法，该融合蛋白包含在表达期间被生物素化的多肽。用于分离由原核或真核细胞表达的异源多肽的肽标签包括多组氨酸标签(其具有对镍螯合型树脂的亲和力)、c-myc标签、钧调蛋白结合蛋白(用钙调蛋白亲和层析分离的)、P物质、RYIRS标签(其结合抗-RYIRS抗体)、Glu-Glu标签和FLAG标签(其结合抗-FLAG抗体)。参见，例如，Luo等人，Arch.Biochem.Biophys.329:215(1996)，Morgan"等人，Biotechnol.Appl.Biochem.23:67(1996)，和Zheng等人，Gene186:55(1997)。可从例如Sigma-AldrichCorporation(St.Louis，MO)商购获得编码这些肽标签的核酸分子。融合蛋白的另一种形式包含IL-22RA多肽和免疫球蛋白重链恒定区(通常是Fc片段)，所述恒定区包含2个或3个恒定区结构域和铰链区但缺少可变区。作为说明示例，Chang等人，美国专利号5,723,125，描述了包含人干扰素和人免疫球蛋白Fc片段的融合蛋白。通过肽连接体部分将干扰素的C端连接至Fc片段的N端。肽连接体的示例是主要包含T细胞惰性序列(其是免疫学惰性的)的肽。示例性肽连接体具有氨基酸序列GGSGGSGGGGSGGGGS(SEQIDNO:9)。在该融合蛋白中，示例性Fc部分是在溶液中稳定的，具有极少或没有补体激活活性的人"链。因此，本发明涉及包含IL-22RA部分和人Fc片段的IL-22RA融合蛋白，其中IL-22RA部分的C端通过肽连接体附着至Fc片段的N端，例如包含SEQIDNO:4的氨基酸序列的肽。IL-22RA部分可以是IL-22RA分子或其片段。例如，融合蛋白可包含SEQIDNO:3的氨基酸和Fc片段(例如，人Fc片段)(SEQIDNO:4)。在另一个变化中，IL-22RA融合蛋白包含IgG序列、共价连接至IgG序列的氨基末端的IL-22RA部分和共价地连接至IL-22RA部分的氨基末端的信号肽，其中所述IgG序列以下列顺序由下列元件构成铰链区、CH2结构域和CH3结构域。因此，IgG序列缺少C&结构域。IL-22RA部分显示此处描述的IL-22RA活性，例如和IL-22RA的配体结合的能力。已由LaRochelle等人，EP742830(W095/21258)描述了产生包含抗体和非抗体部分的融合蛋白的该一般方法。可将包含IL-22RA部分和Fc部分的融合蛋白用作，例如，体外测定工具。例如，可使用IL-22RA-免疫球蛋白融合蛋白检测IL-22RA配体在生物学样品中的存在，其中IL-22RA部分用于结合配体，和大分子例如A蛋白或抗Fc抗体，用于将融合蛋白结合至固体支持物。可使用这些系统鉴定干扰IL-22RA配体，例如，IL-22或IL-20和IL-22两者与其受体的结合的激动剂和拮抗剂。抗体融合蛋白的其他示例包括包含抗原结合结构域的多肽和包含IL-22RA细胞外结构域的IL-22RA片段。可使用这些分子靶向特定的组织以使之获得IL-22RA结合活性的益处。本发明还提供了各种其他的多肽融合物。例如，可在本发明的IL-22RA和来自细胞因子受体家族的另一个成员的功能性等同结构域之间交换提供生物学活性的结构域的部分或全部。可在重組宿主细胞中表达多肽融合物以产生各种IL-22RA融合类似物。可将IL-22RA多肽融合至2个或多个部分或结构域，例如用于纯化的亲和标签和把向性结构域。多肽融合物也可包含一个或多个切割位点，特别是在结构域之间。参见，例如，Tuan等人，ConnectiveTissueResearch34:1(1996)。可通过本领域技术人员已知的方法，通过制备融合蛋白的各组分并通过化学方法将其缀合来制备融合蛋白。可选择地，可使用已知的技术产生按正确读框的方式编码融合蛋白的两种成分的多核苷酸，并通过此处描述的方法表达其。由例如Ausubel(1995)atpages16-19至16-25描述用于酶促和化学切割融合蛋白的一般方法。可通过由这些技术(如核磁共振、晶体学、电子衍射或光亲和标记)确定的结构的物理分析结合IL-22RA配体激动剂的假定的接触位点氨基酸的突变进一步表征IL-22RA结合结构域。参见，例如，deVos等人，Science255:306(1992)，Smith等人,J.Mol.Biol.224:899(1992)，和Wlodaver等人，FEBSLett.309:59(1992)。本发明也涉及经化学修饰的IL-22RA化合物，其中将IL-22RA多肽和聚合物连接。说明性IL-22RA多肽是缺少功能性跨膜结构域的可溶性多肽，例如由氨基酸残基SEQIDN0:3构成的多肽。一般地，聚合物是水溶性的，这样IL-22RA缀合物不会在水环境例如生理学环境中沉淀。合适的聚合物的示例是已被修饰从而具有单一反应性基团的聚合物，例如用于酰化作用的活性酯或用于烷基化的醛。通过该方法，可控制聚合的程度。反应性醛的示例是聚乙二醇丙醛、单-(Cl-ClO)烷氧基、或其芳氧基衍生物(参见，例如，Harris,等人，美国专利号5,252,714)。聚合物可以是分枝的或不分枝的。此外，可使用聚合物的组合物产生IL-22RA缀合物。用于治疗的IL-22RA缀合物可包含药物可接受的水溶性聚合物部分。适合的水溶性聚合物包括聚乙二醇(PEG)、单曱氧基-PEG、单-(C1-C10)烷氧基-PEG、芳氧基-PEG、聚-(N-乙烯基吡咯垸酮)PEG、2，2，2-三氟乙磺酰基单甲氧基PEG、PEG丙醛、二-琥珀酰亚胺碳酸酯PEG、丙二醇同聚物、共聚物、聚氧乙烯多元醇(例如，丙三醇)、聚乙烯醇、葡聚糖、纤维素或其他基于糖类的聚合物。合适的PEG可具有从大约600至大约60,000，包括，例如5，000、12,000、20，000和25，000的分子量。IL-22RA缀合物也可包含这些水溶性聚合物的组合物。IL-22RA缀合物的一个示例包含IL-22RA部分和附着至IL-22RA部分的N端的聚烷基氧化物部分。PEG是合适的聚烷基氧化物。作为说明性示例，可用PEG修饰IL-22RA，该方法称为"PEG化"。可通过本领域已知的PEG化反应的任一种进行IL-22RA的PEG化(参见，例如:EP0154316，Delgado等人，CriticalReviewsinTherapeuticDrugCarrierSystems9:249(1992)，Duncan和Spreafico，Clin.Pharmacokinet.27:290(1994)，和Francis等人，IntJHematol68:1(1998))。例如，可通过和反应性聚乙二醇分子的酰化反应或烷基化反应进行PEG化。在可选择的方法中，通过缩合活化的PEG形成IL-22RA缀合物，其中PEG的末端羟基或氨基已被活化的连接体取代(参见，例如，Karasiewicz等人，美国专利号5,382，657)。通过酰化作用进行的PEG化一般需要使活化的PEG的酯衍生物和IL-22RA多肽反应。活化的PEG的酯的示例是被酯化至N-羟基琥珀酰亚胺的PEG。如此处所用的，术语"酰化作用"包括下列类型的IL-22RA和水溶性聚合物之间的连接酰胺、氨基甲酸、尿烷等连接。用于通过酰化作用制备PEG化的IL-22RA的方法一般包括步骤(a)在使一个或多个PEG基团附着至IL-22RA的条件下，使IL-22RA多肽和PEG(例如PEG的醛衍生物的反应性酯)反应，和(b)获得反应产物。一般地，基于已知的参数和想要的结果确定酰化作用的最佳反应条件。例如，PEG:IL-22RA的比率越大，多PEG化的IL-22RA产物的百分比越高。通过酰化作用获得的PEG化的产物一般是多PEG化IL-22RA产物，其中通过酰基连接性基团PEG化赖氨酸s-氨基。连接键的示例是酰胺。一般地，所得的IL-22RA被至少95%单、二或三PEG化，尽管依赖于反应条件，可形成一些具有更高程度的PEG化的种类。可使用标准的纯化方法例如透析、超滤、离子交换层析、亲和层析等将PEG化种类和未缀合的IL-22RA多肽分离。通过烷化作用进行的PEG化一般包括在还原剂存在的情况下使PEG的末端醛衍生物和IL-22RA反应。通过-CH广NH基团可将PEG基附着至多肽。此外，可使用本领域已知的和此处描述的方法PEG化本发明的抗-IL-22RA抗体或抗体片段。通过还原性烷化作用产生单PEG化的产物的衍生作用利用不同类型的可获得的伯氨基的不同反应性进行衍生作用。一般地，在允许利用赖氨酸残基的s-氨基和蛋白的N端残基的ot-氨基之间的pKa差异的pH下进行反应。通过这样的选择性衍生作用，控制包含反应性基团例如醛的水溶性聚合物的附着。和聚合物的缀和反应主要在蛋白的N端上发生，而无其他反应性基团例如赖氨酸側链氨基的显著修饰。本发明提供了基本上均一的IL-22RA单聚合物缀合物制剂。产生单聚合物IL-22RA缀合分子的基本上均一的群体的还原性烷化作用可包括步骤(a)在还原性烷化作用的条件下，在适合于允许IL-22RA的氨基端上的a氨基进行选择性修饰的pH下，使IL-22M多肽和反应性PEG反应，和(b)获得反应产物。用于还原性烷化作用的还原剂在水溶液中应当是稳定的并且只能够还原在还原性烷化作用的最初过程中形成的希夫碱。说明性还原剂包括硼氢化钠、氰基硼氢化钠、二甲胺硼烷(dimethylamineborane)、三甲胺硼烷和吡咬硼烷(pyridineborane)。对于基本上均一的单聚合物IL-22RA缀合物的群体，还原性烷化反应条件是允许水溶性聚合物部分选择性地附着至IL-22RA的N端的条件。这些反应条件一般提供了赖氨酸氨基和N末端oc氨基之间的pKa的差异。pH也影响所用的聚合物对蛋白的比例。一般地，如果pH更低，聚合物对蛋白的更大的过量是想要的，因为N端ct基的反应性越小，就需要更多聚合物来达到最佳条件。如果pH更高，聚合物IL-22RA不必更大，因为可获得更多的反应性基团。一般地，pH在3至9、或3至6的范围之内。可使用该方法制备包含IL-22RA的同型二聚体、异二聚体或多聚体可溶性受体缀合物。另一个要考虑的因素是水溶性聚合物的分子量。一般地，聚合物的分子量越高，可附着至蛋白的聚合物分子的数目越少。对于PEG化反应，典型的分子量是大约2kDa至大约100kDa、大约5kDa至大约50kDa、或大约12kDa至大约25kDa。水溶性聚合物对IL-22RA的摩尔比一般地在1:1至100:1的范围之内。一般地，对于多PEG化，水溶性聚合物对IL-22RA的摩尔比是1:1至20:l,对于单PEG化是l:1至5:1。用于产生包含多肽和水溶性聚合物部分的缀合物的一般方法在本领域是已知的。参见，例如，Karasiewicz等人，美国专利号5，382,657Greenwald等人，美国专利号5，738，846，Nieforth等人，Clin,Pharmacol.Ther.59:636(1996)，Monkarsh等人，Anal.Biochem.247:434(1997))。可使用该方法制备包含IL-22M的同型二聚体、异二聚体或多聚体可溶性受体缀合物。本发明涉及包含肽或多肽例如此处描述的可溶性受体或抗体的组合物。此等組合物可进一步包含载体。载体可以是常规的有机或无机栽体。载体的示例包括水、緩冲液、醇、丙二醇、聚乙二醇、麻油、玉米油等。7.IL-22RA多肽的分离可将本发明的多肽纯化至，相对于污染性大分子(特别是其他蛋白和核酸)，至少大约80%的纯度、至少大约90%的纯度、至少大约95%的纯度、或大于95%的纯度例如96%、97%、98%或大于99%的纯度，并且不含感染性因子和致热性因子。也可将本发明的多肽纯化至药物纯状态，该纯度超过99.9%的纯度。在某些制剂中，纯化的多肽基本上不含其他多肽，特别是动物来源的其他多肽。可使用分级分离和/或常规的纯化方法获得从天然来源(例如，人组织来源)纯化的IL-22RA、合成的IL-22RA多肽和从重组宿主细胞纯化的重组IL-22RA多肽和融合IL-22RA多肽的制剂。一般地，可使用硫酸铵沉淀法或酸或离液剂提取法进行样品的分级分离。示例性纯化步骤可包括羟基磷灰石、大小排阻、FPLC和反相高效液相层析。合适的层析介质包括衍生化的葡聚糖、琼脂糖、纤维素、聚丙烯酰胺、特种硅土(specialtysilicas)等。PEI、DEAE、QAE和Q衍生物是合适的。示例性层析介质包括用苯基、丁基或辛基衍生的介质，例如苯基-SepharoseFF(Pharmacia)、Toyopearlbutyl650(TosoHaas，Montgomeryville,PA)、辛基-Sepharose(Pharmacia)等；或聚丙烯酸树脂，例如AmberchromCG71(TosoHaas)等。合适的固体支持物包括玻璃小珠、基于二氧化硅的树脂、纤维素树脂、琼脂糖小珠、交联的琼脂糖小珠、聚苯乙烯小珠、交联的聚丙烯酰胺树脂等，所述支持物在其被使用的条件下是不溶性的。可用可使蛋白通过氨基、羧基、巯基、羟基和/或糖部分附着的反应性基团修饰这些支持物。偶联化学试剂的示例包括溴化氰活化、N-羟基琥珀酰亚胺活化、环氧化物活化、巯基活化、酰肼活化和用于碳二亚胺偶联化学试剂的羧基和氨基衍生物。这些试剂和其他固体基质是本领域内熟知的和广泛使用的，并且可从提供商商购获得。用于多肽分离和纯化的特定方法的选择在常规技术范围之内并且可部分地通过选择的支持物的特性进行确定。参见，例如,AffinityChromatography:Principles&Methods(PharmaciaLKBBiotechnology1988)，和Doonan,ProteinPurificationProtocols(TheHumanaPress1996)。本领域技术人员可设计IL-22RA分离和纯化上的另外的变化。例如，可使用如下所述获得的抗IL-22RA抗体通过免疫亲和纯化分离大量的蛋白。也可通过利用特定性质分离本发明的多肽。例如，可使用固定化的金属离子吸附(IMAC)层析纯化富含组氨酸的蛋白，包括包含多组氨酸标签的蛋白。简而言之，首先用二价金属离子加载凝胶以形成螯合物(Sulkowski，TrendsinBiochem.3:1(1985))。依赖于所用的金属离子，可将富含组氨酸的蛋白以不同的亲和力吸附至该基质，通过竟争性洗脱、降低pH、或使用强螯合剂洗脱所述蛋白。纯化的其他方法包括通过凝集素亲和层析和离子交换层析纯化糖基化蛋白(M.Deutscher，(ed.)，Meth.Enzymol.182:529(1990))。在本发明的其他实施方案中，可构建目的多肽和亲和标签(例如，麦芽糖-结合蛋白质，免疫球蛋白的结构域)的融合物以帮助纯化。此外，可使用IL-22RA细胞外结构域的配体-结合特性，通过例如使用亲和层析纯化例如包含IL-22RA的可溶性受体，在所述亲和层析中，将IL-22配体结合至柱子，使用标准层析方法结合和随后洗脱包含IL-22RA的受体。也可通过上述的化学合成制备IL-22RA多肽或其片段。IL-22RA多肽可以是单体或多聚体、糖基化或非糖基化的、PEG化或非PEG化的、和可以包含或可以不包含起始甲硫氨酸残基。8.针对IL-22RA蛋白的抗体的产生可通过例如使用IL-22RA表达载体的产物或从天然来源分离的IL-22RA作为抗原来获得针对IL-22RA的抗体。特别有用的抗-IL-22RA抗体"特异性地结合"IL-22RA。如果抗体表现下列两种特性中的至少一种则该抗体被认为是特异性结合的(1)抗体以阈值水平的结合活性结合IL-22RA，和(2)抗体和与IL-22RA关联的多肽不发生显著的交叉反应。关于第1特性，如果抗体以106M—:或更大的、优选地107M^或更大的、更优选地108M—1或更大的、最优选地109M—'或更大的结合亲和力(Ka)结合IL-22RA多肽、肽或表位则其是特异性地结合。本领域技术人员通过例如Scatchard分析法(Scatchard,Ann.NYAcad.Sci.51:660(1949))可容易地确定抗体的结合亲和力。关于第2特征，例如，如果通过使用标准的Western印迹分析法，抗体检测IL-22RA，但不检测目前已知的多肽，那么抗体不和关联多肽发生显著的交叉反应。已知的关联多肽的示例包括已知的细胞因子受体。可使用具有抗原性IL-22RA表位的肽和多肽产生抗IL-22RA抗体。本发明的具有抗原性IL-22RA表位的肽和多肽包含SEQIDNO:3或此处公开的另一种氨基酸序列中的至少9个、或15至大约30个氨基酸的序列。然而，包含本发明的氨基酸序列的更大部分的肽或多肽，包含30至50个氨基酸或任何长度(包括长达和包含本发明的多肽的整个氨基酸序列的长度)，也用于诱导结合IL-22RA的抗体产生。选择在水溶剂中提供充分溶解性的具有表位的肽的氨基酸序列(即，所述序列包含相对亲水的残基，同时一般避免疏水性残基)是想要的。此外，对于抗体生产，包含脯氨酸残基的氨基酸序列也是想要的。作为说明示例，4吏用通过LASERGENE(DNASTAR;Madison，WI)的PROTEAN程序(版本3.14)进行的Jameson-Wolf方法，Jameson和WolfCABIOS4:181，(1988)鉴定了IL-22RA中的潜在的抗原性位点。在该分析中使用缺省参数。Jameson-Wolf法通过组合用于蛋白结构预测的6个主要子程序来预测潜在的抗原决定簇。简而言之，首先使用Hopp-Woods方法，Hopp等人，Proc.Nat'lAcad.Sci.USA78:3824(1981)，鉴定代表最大局部亲水性区域的氨基酸序列(参数平均7个残基)。在第2步骤中，使用Emini法，Emini等人，J.Virology55:836(1985)计算表面或然率(surfaceprobabilities)(参数表面决定阈值(0.6)=1)。第三，4吏用Karplus-Schultz法，Karplus和Schultz，Naturwissenschaften72:212(1985)预测主链柔度(backbonechainflexibility)(参数柔度阈值(0.2)=1)。在分析的第4和第5步骤中，使用Chou-Fasman，Chou，"PredictionofProteinStructuralClassesfromAminoAcidComposition,"inPredictionofProteinStructureandthePrinciplesofProteinConformation,Fasman(ed.)，pages549-586(PlenumPress1990),和Garnier-Robson，Garnier等人，J.Mol.Biol.120:97(1978)的方法对数据进行二级结构预测(Chou-Fasman参数构象表-64个蛋白；ot区域阈值-103;p区域阈值-105;Garnier-Robson参数ot和p决定常数-0)。在第6子程序中，使用柔度参数和亲水性/溶剂可接触性因子一起确定称为"抗原性指数，，的表面等值(surfacecontourvalue)。最后，将峰加宽函数用于抗原性指数，该函数通过加上峰值的20、40、60或80%来加宽主要表面峰以补偿从表面区域相对于内部区域的移动所产生的额外的自由能。然而，不将该计算用于存在于螺旋区域的任何主峰，因为螺旋区域倾向于较低的柔性。此分析表明随后的SEQIDNO:3氨基酸序列将提供合适的抗原肽可使用Hopp/Woods亲水性分布图确定在SEQIDNO:3内最具抗原性潜力的区域(Hopp等人，Proc.Natl.Acad.Sci.78:3824-3828，1981;Hopp，J.Immun.Meth.88:1-18，1986和Triquier等人，ProteinEngineering11:153-169，1998)。所述分布图基于滑动6残基窗口。忽略埋藏的G、S和T残基和暴露的H、Y和W残基。此外，将例如使用DNASTARProtean程序(DMSTAR，Inc.，Madison,WI)通过Jameson-Wolf作图预测的SEQIDNO:3中的IL-22RA抗原表位用作优选的抗原表位，其可通过本领域技术人员来确定。这些抗原表位包括(1)SEQIDNO:3的氨基酸残基1(脯氨酸)至氨基酸残基6(天冬氨酸)；(2)SEQIDNO:3的氨基酸残基26(丝氨酸)至氨基酸残基32(脯氨酸)；(3)SEQIDNO:3的氨基酸残基41(赖氨酸)至氨基酸残基47(天冬氨酸)；(4)SEQIDNO:3的氨基酸残基49(缬氨酸)至氨基酸残基62(半胱氨酸)；(5)SEQIDNO:3的氨基酸残基41(赖氨酸)至氨基酸残基62(半胱氨酸)；(6)SEQIDNO:3的氨基酸残基84(丙氨酸)至氨基酸残基97(丝氨酸)；(7)SEQIDNO:3的氨基酸残基103(苏氨酸)至氨基酸残基108(天冬氨酸)；和(8)SEQIDNO:3的氨基酸残基130(精氨酸)至氨基酸残基135(组氨酸)；(9)SEQIDNO:3的氨基酸残基164(甘氨酸)至氨基酸残基166(赖氨酸)；(10)SEQIDNO:3的氨基酸残基175(酪氨酸)至氨基酸残基179(谷氨酸)；(11)SEQIDNO:3的氨基酸残基193(赖氨酸)至氨基酸残基196(组氨酸)；(12)SEQIDNO:3的氨基酸残基203(赖氨酸)至氨基酸残基209(苏氨酸)。本发明涉及使用抗原表位1至12中的任一表位肽产生抗IL-22RA抗体或将其用作筛选或鉴定本发明的中和单克隆抗体的工具。本发明还涉及包含1到IO至少一个抗原肽多肽的多肽。本发明涉及使用此处描述的任何抗原肽或表位产生抗IL-22RA抗体以及鉴定和篩选这样的抗IL-22RA单克隆抗体，所述单克隆抗体是中和抗体，其可结合、阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-22和IL-20(单独地或一起地)的活性。此外，合适的抗原也包括这样的IL-22RA多肽，包含上面公开IL-22RA细胞因子结合或细胞外结构域和其它I型或II型细胞因子细胞外结构域的联合体，例如那些可形成可溶性IL-22RA异二聚体或多聚体多肽等的多肽，例如可溶性IL-22RA/CRF2-4、IL-22RA/zcytor11、IL-22RA/zcytor7等类似物质。可使用本领域技术人员熟知的方法制备抗重组IL-22RA蛋白或抗从天然来源分离的IL-22RA的多克隆抗体。参见，例如，Green等人，"ProductionofPolyclonalAntisera，"inImmunochemicalProtocols(Manson，ed.)，pagesl-5(HumanaPress1992)，和Williams等人，"ExpressionofforeignproteinsinE.coliusingplasmidvectorsandpurificationofspecificpolyclonalantibodies,"inDMCloning2:ExpressionSystems,第2版，Glover等人(eds.)，page15(OxfordUniversityPress1995)。通过使用佐剂例如明矾(氢氧化铝)或弗氏完全或不完全佐剂可增加IL-22RA多肽的免疫原性。用于免疫的多肽也包括融合多肽，例如IL-22RA或其部分和免疫球蛋白多肽或麦芽糖结合蛋白的融合物。多肽免疫原可以是全长分子或其部分。如果多肽部分是"半抗原样的"，可将该部分有利地结合至或连接至用于免疫的大分子载体(例如钥孔血蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)或破伤风类毒素)。尽管一般在动物例如马、牛、狗、鸡、大鼠、小鼠、兔、豚鼠、山羊或绵羊中生产多克隆抗体，但也可从类人灵长类动物的抗体衍生本发明的抗-IL-22RA抗体。可在例如Goldenberg等人，国际专利/>开号WO91/11465，和Losman等人，Int.J.Cancer46:310(1990)中查找到用于在狒狒中产生诊断和治疗用途的抗体的一般技术。可选择地，可产生单克隆抗IL-22RA抗体。可通过本领域技术人员已知的方法(参见，例如，Kohler等人，Nature256:495(1975)，Coligan等人(eds.)，CurrentProtocolsinImmunology,第1巻，pages2.5.1-2.6.7(JohnWiley&Sons1991)["Coligan"]，Picksley等人，"ProductionofmonoclonalantibodiesagainstproteinsexpressedinE.coli，"inDNACloning2:ExpressionSystems,第2版，Glover等人(eds.)，page93(OxfordUniversityPress1995))获得抗特定抗原的啮齿动物单克隆抗体。简而言之，可这样获得单克隆抗体，用包含IL-22RA基因产物的组合物注射小鼠，通过取出血清样品以验证抗体产物的存在，取出脾脏以获得B淋巴细胞，将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合以产生杂交瘤，克隆杂交瘤，选择产生抗所述抗原的抗体的阳性克隆，培养产生抗所述抗原的抗体的克隆，从杂交瘤培养物中分离抗体。此外，可从人单克隆抗体产生本发明的抗IL-22RA抗体。从已通过基因工程改造，产生对抗原攻击起反应的特异性人抗体的转基因小鼠获得人单克隆抗体。在该技术中，将人重链和轻链基因座的元件导入来源于胚胎干细胞系的小鼠品系，所述小鼠品系包含内源重链和轻链基因座的靶向断裂。转基因小鼠可合成对于人抗原是特异性的人抗体，可使用所述小鼠产生分泌人抗体的杂交瘤。由例如，Green等人，NatureGenet.7:13(1994)，Lonberg等人，Nature368:856(1994)，和Taylor等人，Int.Immun.6:579(1994)描述用于从转基因小鼠获得人抗体的方法。可通过各种已良好建立的技术从杂交瘤培养物中分离和纯化单克隆抗体。这些分离技术包括使用A蛋白Sepharose的亲和层析、大小排阻层析和离子交换层析(参见，例如，Coliganatpages2.7.1-2.7.12和pages2.9.1-2.9.3;Baines等人，"PurificationofImmunoglobulinG(IgG)，"inMethodsinMolecularBiology,第IO巻，pages79-104(TheH腿naPress,Inc.1992))。对于特定的用途，制备抗IL-22RA抗体的片段是想要的。可通过抗体的蛋白水解作用获得这些抗体片段。可通过常规的方法，用胃蛋白酶或木瓜蛋白酶降解完整的抗体来获得抗体片段。作为说明性示例，可通过使用胃蛋白酶酶促断裂抗体以提供称为F(ab')2的5S片段来产生抗体片段。可用巯基还原剂进一步断裂该片段，从而产生3.5SFab'单价片段。任选地，可使用二硫链断裂产生的巯基的封闭基团进行该断裂反应。作为另一种选择，使用胃蛋白酶的酶促断裂直接产生2个单价Fab片段和Fc片段。由例如，Goldenberg，美国专利号4，331，647:Nisonoff等人，ArchBiochem.Biophys.89:230(1960)，Porter,Biochem.J.73:119(1959)，Edelman等人，inMethodsinEnzymology第1巻，page422(AcademicPress1967)，和Coliganatpages2.8.1-2.8.10和2.10.-2.10.4描述这些方法。也可使用断裂抗体的其他方法，例如形成单价轻-重链片段的重链的分离、片段的进一步断裂，或其他酶促、化学或遗传技术，只要所述片段结合由该完全抗体识别的抗原。例如，Fv片段包含结合的VH和VL链。该结合可以是非共价的，如由Inbar等人，Proc.Nat"Acad.Sci.USA69:2659(1972)所描述的。可选择地，可通过分子间二硫键连接或通过化学试剂例如戊二醛(参见，例如，Sandhu，Crit.Rev.Biotech.12:437(1992))交联可变链。Fv片段可包含通过肽连接体连接的Vh和VL链。通过构建包含编码Vh和VL结构域的结构基因(所述Vh和VL结构域通过寡核苷酸连接)制备这些单链抗原结合蛋白(scFv)。将结构基因插入随后被导入宿主细胞例如大肠杆菌的表达载体。重组宿主细胞合成具有跨接2个V结构域的连接体肽的单个多肽链。由Whitlow等人，Methods:ACompaniontoMethodsinEnzymology2:97(1991)(也参见，Bird等人，Science242:423(1988)，Ladner等人，美国专利号4，946，778，Pack等人，Bio/Technology11:1271(1993)，和Sandhu,同上)描述用于产生scFvs的方法。作为说明性示例，可这样获得scFV，在体外将淋巴细胞暴露于IL-22RA多肽，选择噬菌体或相似的载体中的抗体展示文库(例如，通过使用固定的或标记的IL-22RA蛋白或肽)来获得scFV。可通过在噬菌体(噬菌体展示)或在细菌例如大肠杆菌上展示的随机肽文库来获得编码具有潜在的IL-22RA多肽结合结构域的多肽的基因。可通过许多方法例如通过随机诱变和随机多核苷酸合成来获得编码所述多肽的核苷酸序列。可使用这些随机肽展示文库选择和这样的已知的靼相互作用的肽，该靶可以是蛋白或多肽，例如配体或受体、生物大分子或合成的大分子、或有机或无机物。用于产生和筛选这些随机肽展示文库的技术在本领域是已知的(Ladner等人，美国专利号5,223,409，Ladner等人，美国专利号4,946,778，Ladner等人，美国专利号5,403,484，Ladner等人，美国专利号5,571,698，和Kay等人，PhageDisplayofPeptidesandProteins(AcademicPress,Inc.1996)),可从例如CL0NTECHLaboratories,Inc.(PaloAlto，CA)、InvitrogenInc.(SanDiego，CA)、NewEnglandBiolabs，Inc.(Beverly,MA)和PharmaciaLKBBiotechnologyInc.(Piscataway，NJ)商购获得用于篩选这些文库的随机肽展示文库和试剂盒。可使用此处公开的IL-22RA序列篩选随机肽展示文库以鉴定结合IL-22RA的蛋白。抗体片段的另一种形式是编码单个互补决定区(CDR)的肽。可通过构建编码目的抗体的CDR的基因来获得CDR肽("最小识别单位")。通过例如使用聚合酶链式反应合成来自产生抗体的细胞的RNA的可变区来制备这些基因(参见，例如，Larrick等人，Methods:ACompaniontoMethodsinEnzymology2:106(1991)，Courtenay-Luck，"GeneticManipulationofMonoclonalAntibodies,"inMonoclonalAntibodies:Production,EngineeringandClinicalApplication,Ritter等人(eds.)，page166(CambridgeUniversityPress1995)，和Ward等人,"GeneticManipulationandExpressionofAntibodies,"inMonoclonalAntibodies:PrinciplesandApplications,Birch等人，(eds.)，page137(Wiley-Uss，Inc.1995))。可选择地，可从"人源化的"单克隆抗体产生抗IL-22RA抗体。通过将来自小鼠免疫球蛋白的重链和轻链可变区的小鼠互补决定区转移至人可变结构域来产生人源化的单克隆抗体。然后在鼠类对应物的构架区内用人抗体的特有的残基进行取代。使用来自人源化单克隆抗体的抗体组分避免了和鼠类恒定区的免疫原性关联的潜在问题。用于克隆鼠类免疫球蛋白可变结构域的一般方法描述于例如0rlandi等人，Proc.Nat'1Acad.Sci.USA86:3833(1989)。由例如Jones等人，Nature321:522(1986)，Carter等人，Proc.Nat'1Acad.Sci.USA89:4285(1992)，Sandhu，Crit.Rev.Biotech.12:437(1992)，Singer等人，J.Immun.150:2844(1993)，Sudhir(ed.)，AntibodyEngineeringProtocols(HumanaPress,Inc.1995)，Kelley，"EngineeringTherapeuticAntibodies,"inProteinEngineering:PrinciplesandPractice,Cleland等人(eds.)，pages399-434(JohnWiley&Sons,Inc.1996)，和Queen等人，美国专利号5,693,762(1997)描述用于产生人源化单克隆抗体的技术。此外，可使用本领域内和此处描述的方法PEG化本发明的抗IL-22RA抗体或抗体片段。使用标准技术，用抗IL-22RA抗体或抗体片段免疫动物来制备多克隆抗独特型抗体。参见，例如，Green等人，"ProductionofPolyclonalAntisera,"inMethodsInMolecularBiology:ImmunochemicalProtocols,Manson(ed.)，pages1-12(HumanaPress1992)。也参见，Coliganatpages2.4.1-2.4.7。可选择地，使用上述技术，用抗IL-22RA抗体或抗体片段作为免疫原来制备单克隆抗独特型抗体。作为另一种选择，可使用上述技术制备人源化抗独特型抗体或类人灵长类动物抗独特型抗体。由例如Irie，美国专利号5,208,146，Greene,等人，美国专利号5，637，677，和Varthakavi和Minocha，J.Gen.Virol.77:1875(1996)描述用于产生抗独特型抗体的方法。可用可检测的标记物缀合抗IL-22RA抗体以形成抗IL-22RA免疫缀合物。合适的可检测的标记物包括，例如，放射性同位素、荧光标记物、化学发光标记物、酶标记物、生物发光标记物或胶体金。制备和检测这些可检测标记的免疫缀合物的方法对于本领域技术人员来说是熟知的，并在下面进行更详细的描述。可检测的标记物可以是通过放射自显影法检测的放射性同位素。对于本发明的目的特别有用的同位素是311、125I、131I、35S和"C。也可用荧光化合物标记抗IL-22RA免疫缀合物。通过将免疫缀合物暴露于合适波长的光并检测所得的荧光来确定焚光标记的抗体的存在。荧光标记化合物包括异硫氰酸荧光素、罗丹明、藻红蛋白、藻蓝蛋白、别藻蓝蛋白、邻苯二醛和荧光胺。可选择地，可通过将抗体组分偶联至化学发光化合物来可检测地标记抗IL-22RA免疫缀合物。通过检测化学反应过程产生的发光的存在来确定化学发光标记的免疫缀合物的存在。化学发光标记化合物的示例包括鲁米诺、4-氨基邻苯二甲酰肼、芳香族吖啶酯、咪唑、吖啶盐和草酸酯。类似地，可^f吏用生物发光化合物标记本发明的抗IL-22RA免疫缀合物。生物发光是在这样的生物系统中发现的化学发光类型，在所述生物系统中，催化蛋白增加了化学发光反应的效率。通过检测发光的存在来确定生物发光蛋白的存在。用于标记的生物发光化合物包括焚光素、萤光素酶和水母发光蛋白。可选择地，可通过将抗IL-22RA抗体组分连接至酶来可检测地标记抗IL-22RA免疫缀合物。当在合适的底物存在的情况下温育抗IL-22RA抗体-酶缀合物时，酶部分和底物反应，产生可通过例如分光光度计、荧光计或可视方法检测的化学部分。可用于可检测地标记多特异性的免疫缀合物的酶的示例包括p-半乳糖苷酶、葡糖氧化酶、过氧化物酶和碱性磷酸酶。本领域技术人员知道可根据本发明使用的其他合适的标记物。可使用本领域已知的标准技术来使标记物部分和抗IL-22RA抗体结合。由Kennedy等人，Clin.Chim.Acta70:1(1976)，Schurs等人，Clin.Chim.Acta81:1(1977)，Shih等人，Int'1J.Cancer46:1101(1990)Stein等人，CancerRes.50:1330(1990)，和Coligan,同上描述该方面的典型方法。此外，可使用已和抗生物素蛋白、链霉抗生物素和生物素缀合的抗IL-22RA抗体增加免疫化学检测的方便性和通用性(参见，例如，Wilchek等人(eds.)，"Avidin-BiotinTechnology,"MethodsInEnzymology，第184巻(AcademicPress1990)，和Bayer等人，"ImmunochemicalApplicationsofAvidin-BiotinTechnology,"inMethodsInMolecularBiology,第10巻，Manson(ed.)，pages149-162(TheHumanaPress,Inc.1992)。用于进行免疫测定法的方法是建立良好的方法。参见，例如，Cook和Self,"MonoclonalAntibodiesinDiagnosticImmunoassays,"inMonoclonalAntibodies:Production,Engineering,andClinicalApplication,RitterandLadyman(eds.)，pages180-208，(CambridgeUniversityPress,1995)，Perry,"TheRoleofMonoclonalAntibodiesintheAdvancementofImmunoassayTechnology,"inMonoclonalAntibodies:PrinciplesandApplications,Birch和Lennox(eds.),pages107-120(Wiley-LissInc.1995)，和Diamandis，Immunoassay(AcademicPress,Inc.1996)。本发明也涉及用于进行用于测定IL-22RA基因表达的免疫学诊断测定法的试剂盒。这些试剂盒包含至少一个装有抗IL-22RA抗体或抗体片段的容器。试剂盒也可包含装有一种或多种能够指示IL-22RA抗体或抗体片段存在的试剂的第二容器。这些指示剂的示例包括可检测的标记物例如放射性标记物、荧光标记物、化学发光标记物、酶标记物、生物发光标记物、胶体金等。试剂盒也可以包含递送给用户的使用IL-22RA抗体或抗体片段检测IL-22RA蛋白的手段。例如，书面说明书可声明，可使用包装的抗体或抗体片段检测IL-22RA。可将书面材料直接用于容器，或可以包装书明书的形式提供书面材料。9.抗IL-22RA抗体拮抗IL-22RA结合IL-22或IL-20和IL-22两者的用途用于产生或选择此处有用的抗体的可选择的技术包括在体外将淋巴细胞暴露于可溶性IL-22RA受体多肽或其片段(例如抗原表位)，并选择噬菌体或相似的载体中的抗体展示文库(例如，通过使用固定的或标记的可溶性IL-22RA受体多肽或其片段例如抗原表位进行筛选)。可通过篩选在噬菌体中展示(噬菌体展示)的或在细菌例如大肠杆菌中展示的随机肽文库来获得编码具有潜在的结合结构域的多肽的基因，所述多肽是例如可溶性IL-22RA受体多肽或其片段例如抗原表位。可通过许多方法例如通过随机诱变和随机多核苷酸合成法获得编码所述多肽的核苷酸序列。这些随机肽展示文库可用于筛选和已知的靶相互作用的肽，所述靶可以是蛋白或多肽，例如配体或受体、生物大分子或合成的大分子、或有机物或无机物。用于建立和筛选这些随机肽展示文库的技术在本领域是已知的(Ladner等人，美国专利号5,223,409;Ladner等人，美国专利号4，946，778;Ladner等人，美国专利号5,403,484和Ladner等人，美国专利号5，571，698),可从例如Clontech(PaloAlto，CA)、InvitrogenInc.(SanDiego，CA)、NewEnglandBiolabs、Inc.(Beverly,MA)和PharmaciaLKBBiotechnologyInc.(Piscataway，NJ)商购获得用于篩选这些文库的随机肽展示文库和试剂盒。可使用可溶性IL-22RA受体多肽或其片段(例如此处公开的抗原表位多肽)筛选随机肽展示文库来鉴定结合包含IL-22RA的受体多肽的蛋白。和包含可溶性IL-22RA的受体多肽相互作用的这些"结合多肽"可用于标记细胞；用于通过亲和纯化分离同源多肽；可将其直接或间接地缀合至药物、毒素、放射性核素等。也可将这些结合多肽用于这样的分析方法，所述方法用于例如篩选表达文库和中和活性，例如用于结合、阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-22配体和受体之间的相互作用，或病毒对受体的结合。也可将结合多肽用于这样的诊断测定法，该诊断测定法用于确定可溶性包含IL-22RA的受体多肽的循环水平；用于检测或定量作为潜在的病状或疾病的标志物的可溶性或非可溶性包含IL-22RA的受体。这些结合多肽也可用作在体外和体内阻断或抑制可溶性或膜结合的IL-22RA单体受体或IL-22RA同型二聚体、异二聚体或多聚体多肽结合(例如对配体的结合)和信号转导的"拮抗剂"。此外，这些结合多肽用作抗IL-22RA单体受体或抗IL-22RA同型二聚体、异二聚体或多聚体多肽和用于抑制IL-22或IL-20和IL-22两者一起的活性以及受体活性或蛋白结合。针对本发明的天然受体复合物产生的抗体和IL-22RA-表位-结合抗体、和抗IL-22RA中和性单克隆抗体可以是优选的实施方案，因为其可更特异性地抗IL-22RA和可抑制IL-22或同时抑制IL-20和IL-22。此外，可分别在IL-20或IL-22和包含IL-22RA的可溶性受体存在的情况下，在IL-20或IL-22扩增、信号捕获、萤光素酶或结合测定法体的拮抗和结合活性。抗可溶性IL-22RA受体多肽的抗体(例如针对SEQIDNO:3的抗体)或其片段例如抗原表位可用于在体内抑制IL-20、IL-22、或IL-20和IL-22两者一起的炎症效应，用于抵抗炎症和炎性疾病例如牛皮裤、异位性皮炎、炎性皮肤病、内毒素血症、关节炎、哮喘、炎性肠病(IBD)、结肠炎、牛皮癣性关节炎、类风湿性关节炎或其他IL-20和IL-22导致的炎性疾病；用于标记表达IL-22RA受体的细胞；用于通过亲和层析分离可溶性包含IL-22RA的受体多肽；用于确定可溶性包含IL-22RA的受体多肽的循环水平的诊断测定法；用于检测或定量作为潜在的病状或疾病的标志物的可溶性的包含IL-22RA的受体；用于使用FACS的分析方法；用于筛选表达文库；用于产生可用作IL-22或IL-20激动剂的抗独特型抗体；和用作在体外和体内结合、阻断、抑制、减少或拮抗IL-22RA受体功能或结合、阻断、抑制、减少或拮抗或中和IL-22和/或IL-20活性(单独地或一起地)的中和抗体或拮抗剂。合适的直接标签或标记物包括放射性核素、酶、底物、辅助因子、生物素、抑制剂、荧光标记物、化学发光标记物、磁颗粒等；间接标签或标记物可表征作为中间物的生物素-抗生物素蛋白或其他互补/反互补对的用途。此处的抗体也可直接或间接地缀合至药物、毒素、放射性核素等，这些缀合物用于体内诊断或治疗用途。此外，可在体外使用抗可溶性的包含IL-22RA的受体多肽或其片段的抗体检测变性的或非变性的包含IL-22RA的受体多肽或其片段，例如Western印迹法或本领域已知的其他测定法。抗可溶性IL-22RA受体或可溶性IL-22RA同型二聚体、异二聚体或多聚体受体多肽的抗体用于标记表达对应的受体的细胞并测定其表达水平，用于亲和纯化，在诊断测定法中用于确定受体多肽的循环水平，用于使用荧光激活的细胞分选的分析方法。此外，二价抗体和抗同种型抗体可用作模拟IL-22RA配体，IL-22或IL-20的效应的激动剂。也可将此处的抗体直接或间接地缀合至药物、毒素、放射性核素等，这些缀合物用于体内诊断或治疗用途。例如，可使用识别可溶性IL-22RA受体或可溶性IL-22RA同型二聚体、异二聚体或多聚体受体多肽的抗体或结合多肽鉴定或处理这样的组织或器官，所述组织或器官表达对应的反互补分子(即，包含IL-22RA的可溶性或膜结合受体)。更明确地，可将针对可溶性的包含IL-22RA的受体多肽的抗体或其生表达包含IL-22RA的受体的组织或器官的哺乳动物，例如表达IL-22RA的癌。合适的可检测的分子可直接或间接地附着至结合包含IL-22RA的受体多肽的多肽例如"结合多肽"(包括上述的结合肽)、抗体或其生物活性片段或部分。合适的可检测的分子包括放射性核素、酶、底物、辅助因子、抑制剂、荧光标记物、化学发光标记物、磁性颗粒等。合适的细胞毒性分子可直接或间接地附着至所述多肽或抗体，其包括细菌或植物毒素(例如，白喉毒素、假单胞菌(Pseudomonas)夕卜毒素、篦麻蛋白、相思豆毒蛋白等)，以及治疗性放射性核素，例如碘-131、铼-188或钇-90(直接地附着至多肽或抗体，或通过例如螯合部分间接地附着)。也可将结合性多肽或抗体缀合至细胞毒性药物，例如阿霉素。为了间接附着可检测的或细胞毒性分子，可将可检测的或细胞毒性分子和互补/反互补对的成员缀合，而将另一个成员结合至结合多肽或抗体部分。对于这些目的，生物素/链霉抗生物素是示例性互补/反互补对。在另一个实施方案中，可将结合性多肽-毒素融合蛋白或抗体-毒素融合蛋白用于被靶向的细胞或组织的抑制或切除(例如，治疗癌细胞或组织)。可选择地，如果结合性多肽具有多个功能结构域(即，激活结构域或配体结合结构域和靶向性结构域)，只包含靶向性结构域的融合蛋白可适合用于指导可检测的分子、细胞毒性分子或互补分子朝向目的细胞或组织类型。在当只包含单个结构域的融合蛋白包含互补分子的情况下，可将反互补分子缀合至可检测的或细胞毒性分子。因此这些结构域-互补分子融合蛋白代表了用于一般反互补-可检测的/细胞毒性分子缀合物的细胞/组织特异性递送的一般靼向性载体。在另一个实施方案中，IL-22RA结合性多肽-细胞因子或抗体-细胞因子融合蛋白可用于在体内增强杀伤靶组织(例如，脾、胰、血液、淋巴、结肠和骨髓癌)，如果结合性多肽-细胞因子或抗IL-22RA受体抗体靶向过度增殖的细胞(一般参见，Hornick等人，Blood89:4437-47，1997)。所述融合蛋白可使细胞因子靶向想要的作用位点，从而提供了提高的细胞因子的局部浓度。合适的抗IL-22RA单体、同型二聚体、异二聚体或多聚体抗体靶向不想要的细胞或组织(即，肿瘤或白血病)，融合的细胞因子通过效应细胞介导提高的把细胞裂解。例如，用于该目的合适的细胞因子包括白细胞介素2和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。可选择地，此处描述的结合IL-22RA受体的多肽或抗体融合蛋白可用于在体内通过直接刺激IL-22RA受体调控的细胞凋亡途径来增强杀伤靶组织，导致表达包含IL-22RA的受体的过度增殖的细胞的细胞死亡。10.具有IL-22RA活性的多肽或针对IL-22RA的抗体的治疗性用途可使用具有可溶性IL-22RA活性的氨基酸序列，通过结合IL-22RA配体IL-20和IL-22(单独地或一起地)，从而，阻断IL-22RA配体和内源IL-22RA受体的结合来调节免疫系统。也可使用IL-22RA拮抗剂，例如抗IL-22RA抗体，通过抑制IL-22RA配体和内源IL-22RA受体的结合来调节免疫系统。因此，本发明包括对这样的受治疗者使用具有IL-22RA活性的蛋白、多肽和肽(例如可溶性IL-22RA多肽、IL-22RA多肽片段、IL-22RA类似物(例如，抗IL-22RA抗同种型抗体)、和IL-22RA融合蛋白)，所述受治疗者缺乏足够量的该多肽，或产生过量的IL-22RA配体。也可使用IL-22RA拮抗剂(例如，抗IL-22RA抗体)治疗产生过量IL-22RA配体或IL-22RA的受治疗者。合适的受治疗者包括哺乳动物，例如人。例如，这些IL-22RA多肽和抗IL-22RA抗体用于结合、阻断、抑制、减少、拮抗或中和IL-20和IL-22(单独地或一起地)，用于治疗炎症和炎性疾病，所述病症是例如牛皮癣、特应性皮炎、炎性皮肤病、牛皮癣性关节炎、关节炎、内毒素血症、哮喘、炎性肠病(IBD)、结肠炎和此处公开的其他炎性病症。另外，我们已经表明IL-22RA受体结合被称为T细胞诱导因子(IL-22)卿IDNO:6;D翻utier，L.等人，Proc.Nat'1.Acad.Sci.97:10144-10149，2000;mouseIL-22sequenceisshowninD画ntieretal.，J.Immunol.164:1814-1819，2000)的配体。另外，共同拥有的zcytorll(IL-22RA)(USPatentNo.5,965,704)和CRF2-4受体还结合IL-22成为异源二聚体(见，WIPO公开号W000/24758;D画ntieretal.，J.Immunol.164:1814-1819，2000;Spencer，SDetal.，J.Exp.Med.187:571—578，1998;Gibbs，VCandPennicaGene186:97-101，1997(CRF2-4c腿)；Xie，MHetal.，J.Biol.Chem.275:31335-31339，2000;andKotenko，SVetal.，J.Biol.Chem.276:2725-2732，2001)。另外，IL-lOp受体可以作为IL-22的受体参与其中，并被认为和CRF2-4(Dumoutier，L.etal.，Proc.NatM.Acad.Sci.97:10144-10149，2000;LiuYetal，JImmunol.152;1821-1829，1994(IL-1ORcDNA)是相同的。另外，我们还表明IL-22RA受体结合被称为IL-20的配体(SEQIDNO:8;WIPO发明者A·W·西亚戴克,J·M·雷纳,M·D·摩尔,P·V·斯瓦库玛,S·R·迪隆,W·R·金德斯沃格尔,Y·A·钱德拉塞克尔,许文峰申请人:津莫吉尼蒂克斯公司