专利名称：新福菌素精制工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新福菌素精制工艺。
背景技术：
新福菌素(ACT23-21)是我国科学工作者首先发现抗肿瘤抗生素，具有高效、低毒、广谱的特点，优于目前国内外多种同类抗肿瘤药品。新福菌素以抑制DNA为模板的RNA多聚酶，从而抑制RNA的合成，具有很广泛的抑瘤谱；该药静脉注射后迅速分布至人体各组织，广泛与组织结合，为药物抑杀人体内各组织的肿瘤细胞提供了必要条件。经近30年的反复临床研究论证，证明本品对30余种肿瘤的疗效优异。新福菌素已经成为临床应用十分广泛的肿瘤化疗药物。
新福菌素由发色环和多肽两个部分组成，主要含有Actinomycin D和ActinomycinS3，分别占总量的50-70％和25-40％，Act23-21的抗癌效应主要由这两个组份决定，药理与临床验证认为Actinomycin D和Actinomycin S3构成的比例恰当时，其疗效有协同作用，且副反应较轻。从化学组成看，Act23-21是一新类型的，由链霉菌经培养和发酵后提取得多组分的放射菌素放线菌素。
原有的提纯精制工艺不能有效去除组分I、II、IV，所得新福菌素为5种组分的混合物，其中II、IV95％，III50～70％。经过分离提纯后的几个组分的LD50(狗)分析(见下表)
经理化性质及结构研究组分III与放射性菌素D同质，组份IV与放线菌素S3同质，组份I、II、V没有活性。(I组份为3β羟基5α雄甾17酮；II组份为17α甲基17β13β1二羟基17α甲基5α雄甾烷；III组份为17β羟基3α雄甾酮；IV组份为17α甲基17β羟基5α雄甾2酮肟3酮；V组份为17α甲基17β羟基5α雄甾2.3二酮肟)新的提纯工艺能有效地去除I、II、V等组份，使有效成分III的组份大于65％，总的III、IV混合物达到98％以上，确保了药物的纯度，减少无效物质的毒副作用，提高疗效。该原料于2002年由地方标准升为国家标准，纯度及检测方法等均有大幅提高，能确保疗效和用药安全。
其中组份I为放线菌素X类；组份II、V为放射菌素C类；组份III为放射菌素C1；组份IV为放射菌素X2.5种组份均为放线菌素，且为C类X类组成的混合物。
发明内容
本发明的目的在于提出一种工艺步骤简单、精制得率高以及所得产品纯度较高的新福菌素精制工艺。
本发明采用的技术方案是1)放线菌素D和放线菌素S3混合物分离用适量的丙酮-水复合溶剂常温溶解放线菌素D和放线菌素S3混合物，静置后得溶液；所得溶液过滤，滤饼用丙酮-水复合溶剂洗涤3次，滤液合并；将适量纯化水缓慢滴加入所得滤液中，滴加结束后，静置，即得纯新福菌素溶液；2)新福菌素精制过程将纯新福菌素溶液放置在冰箱，在0-5℃温度下，静置，结晶，得结晶液；将结晶液真空抽滤，获得新福菌素晶体滤饼，新福菌素晶体滤饼用适量无水乙醇洗涤，得无水乙醇洗涤液；将已洗涤的新福菌素晶体滤饼放在表面皿上，放入真空干燥器中，控制真空度不低于0.05Mpa，室温下干燥，得精制新福菌素晶体。
上述的无水乙醇洗涤液回收新福菌素粗品方法无水乙醇洗涤液真空浓缩，浓缩是在温度≤50℃、真空度为0.05MPa下进行；当温度超过50℃，真空度大于0.05Mpa时，停止浓缩；上述的浓缩液滴加适量纯化水，放置冰箱，在0-5℃温度下，静置至少8小时，将所得的溶液用布氏漏斗过滤，滤饼用适量纯化水洗涤，滤液和洗涤液废弃；将滤饼放在表面皿上，放入真空干燥器中，控制真空度不低于0.05Mpa，室温下干燥至少5小时，得新福菌素回收粗品。
上述复合溶剂的丙酮水体积配比优选范围为10∶1.8；以不超过10∶2.5为限。
真空干燥器条件控制真空度不低于0.05Mpa，室温下干燥至少5小时。
真空浓缩条件温度≤50℃，真空度0.05MPa下浓缩，当温度超过50℃，真空度大于0.05Mpa时，停止浓缩。
本发明由于采用丙酮-水溶液作为复合溶剂溶解放线菌素D和放线菌素S3混合物，把放线菌素D、放线菌素S3混合物中的粗副产品放射菌素组分I、组分II、组分V分离掉，从而减少非药物作用的副产品，增加疗效；又由于采用无水乙醇洗涤，因而更能把残留的副产品放射菌素组分I、组分II、组分V洗涤掉，本发明工艺简单，纯度提高2～3％；由于纯度提高，反映在本工艺精制的新福菌素作为药品用时，疗效增加，毒副作用减少，产品质量提高，2002年，产品标准由地方标准升为国家标准。本发明的提纯工艺能有效地去除组分I、组分II、组分V等组份，使有效成分组分III的组份(以重量百份比计)大于65％，总的组分III、组分IV混合物达到98％以上，确保了药物的纯度，减少无效物质的毒副作用，提高疗效。该原料于2002年由地方标准升为国家标准，纯度及检测方法等均有大幅提高，能确保疗效和用药安全。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明进行详细描述
具体实施例方式实施例一1)量取纯化水36ml，丙酮200ml。
2)将纯化水、丙酮混合，配制成丙酮-水溶液(体积配比为10∶1.8)作为复合溶剂。
3)称取放线菌素D和放线菌素S3混合物40g，投入到500ml具塞锥形瓶中。
4)量取75ml步骤2)所制的丙酮-水复合溶液，加入到步骤3)操作所用的锥形瓶中。
5)手摇震荡，使放线菌素D和放线菌素S3混合物固体常温下溶解制得溶液，静置30分钟。
6)将上述步骤5)制得的溶液用布氏漏斗过滤，滤饼用上述丙酮-水溶液75ml洗涤，滤液合并。
7)滤饼再用丙酮-水溶液75ml洗涤，滤液合并，放在1000ml具塞锥形瓶中。
8)量取200ml纯化水。将纯化水缓慢滴加入滤液中，滴加结束后，静置1小时。
9)将上述所有滤液放置在冰箱(温度为2℃)，静置36小时，结晶，得结晶液。
10)将结晶液用布氏漏斗真空抽滤，滤液按规定废弃，晶体滤饼用无水乙醇20ml洗涤。
11)将晶体滤饼放在表面皿上，放入真空干燥器中，控制真空度为0.05Mpa，室温下干燥5小时，得新福菌素晶体，取样检验，包装入库。
实施例二1)量取纯化水36ml，丙酮200ml。
2)将纯化水、丙酮混合，配制成丙酮-水溶液(体积配比为10∶1.8)作为复合溶剂。
3)称取放线菌素D和放线菌素S3混合物40g，投入到500ml具塞锥形瓶中。
4)量取75ml步骤2)所制的丙酮-水复合溶液，加入到步骤3)操作所用的锥形瓶中。
5)手摇震荡，使放线菌素D和放线菌素S3混合物固体常温下溶解制得溶液，静置30分钟。
6)将上述步骤5)制得的溶液用布氏漏斗过滤，滤饼用上述丙酮-水溶液75ml洗涤，滤液合并。
7)滤饼再用丙酮-水溶液75ml洗涤，滤液合并，放在1000ml具塞锥形瓶中。
8)量取200ml纯化水。将纯化水缓慢滴加入滤液中，滴加结束后，静置1小时。
9)重复步骤7)～步骤8)操作二次。
10)将上述所有滤液放置在冰箱(温度为5℃)，静置38小时，结晶，得结晶液。
11)将结晶液用布氏漏斗真空抽滤，滤液按规定废弃，晶体滤饼用无水乙醇20ml洗涤。
12)将晶体滤饼放在表面皿上，放入真空干燥器中，控制真空度0.06Mpa，室温下干燥7小时，得新福菌素晶体，取样检验，包装入库。
13)将步骤11)中的无水乙醇洗涤液采用真空浓缩(在温度50℃，真空度为0.05MPa)，浓缩液滴加30ml纯化水，放置冰箱(温度为0℃)，静置8小时。
14)将步骤13)所得的浓缩溶液用布氏漏斗过滤，滤饼用10ml纯化水洗涤，滤液和洗涤液按规定废弃。
15)将步骤14)所得滤饼放在表面皿上，放入真空干燥器中，控制真空度为0.05Mpa，室温下干燥5小时，得新福菌素回收粗品。
16)步骤15)的新福菌素回收粗品重复步骤3)到步骤12)的放线菌素D+放线菌素S3混合物分离方法，操作一次，即得回收的纯新福菌素成品。
权利要求
1.一种新福菌素精制工艺，其特征在于依序包括如下步骤1)放线菌素D和放线菌素S3混合物分离用适量的丙酮-水复合溶剂常温溶解放线菌素D和放线菌素S3混合物，静置后得溶液；所得溶液过滤，得滤液；滤饼用丙酮-水复合溶剂洗涤3次，得滤液；将适量纯化水缓慢滴加入上述所得滤液中，滴加结束后，静置，即得纯新福菌素溶液；2)新福菌素精制过程将纯新福菌素溶液放置在冰箱，在0-5℃温度下，静置，结晶，得结晶液；将结晶液真空抽滤，获得新福菌素晶体滤饼，新福菌素晶体滤饼用适量无水乙醇洗涤，得无水乙醇洗涤液；将已洗涤的新福菌素晶体滤饼放在表面皿上，放入真空干燥器中，控制真空度不低于0.05Mpa，室温下干燥，得精制新福菌素晶体。
2.根据权利要求1所述的新福菌素精制工艺，其特征在于所述的无水乙醇洗涤液回收新福菌素粗品方法无水乙醇洗涤液真空浓缩，浓缩是在温度≤50℃、真空度为0.05MPa下进行；上述的浓缩液滴加适量纯化水，放置冰箱，在0-5℃温度下，静置至少8小时，将所得的溶液用布氏漏斗过滤，滤饼用适量纯化水洗涤，滤液和洗涤液废弃；将滤饼放在表面皿上，放入真空干燥器中，控制真空度不低于0.05Mpa，室温下干燥至少5小时，得新福菌素回收粗品。
3.根据权利要求1所述的新福菌素精制工艺，其特征在于所述丙酮-水复合溶剂的丙酮∶水体积配比为10∶1.8。
全文摘要
本发明公开了一种新福菌素精制工艺，依序包括如下步骤1)用适量的丙酮－水复合溶剂常温溶解放线菌素D和放线菌素S3混合物，静置后得溶液；所得溶液过滤，得滤液；滤饼用丙酮－水复合溶剂洗涤适宜次数，得滤液；将适量纯化水缓慢滴加入上述所得滤液中，滴加结束后，静置，即得纯新福菌素溶液；将纯新福菌素溶液放置在冰箱，在0－5℃温度下，静置，结晶，得结晶液；将结晶液真空抽滤，获得新福菌素晶体滤饼，新福菌素晶体滤饼用适量无水乙醇洗涤，将已洗涤的新福菌素晶体滤饼真空干燥，控制真空度不低于0.05Mpa，室温下干燥，得精制新福菌素晶体。本发明的提纯工艺能有效地去除副产物，总有效组分达到98％以上，确保了药物的纯度。
文档编号C07K14/36GK101089016SQ20061001939
公开日2007年12月19日 申请日期2006年6月14日 优先权日2006年6月14日
发明者徐燕和, 郭文璟, 徐敏华, 林东武, 陈才河, 俞宁 申请人:徐燕和