抑制β-分泌酶(SECRETASE)活性的化合物及其使用方法

文档序号:3557768阅读:466来源:国知局
专利名称:抑制β-分泌酶(SECRETASE)活性的化合物及其使用方法
相关申请的交叉参考
本申请要求于2005年4月8日提交的美国专利申请60/669,541及于2005年9月14日提交的美国专利申请60/717,541的权益,这些申请各自整体引入本文作为所有目的的参考。
关于对在联邦政府资助的研究或开发下
进行的发明的权利的声明
由政府支持、在由国立卫生研究院给予的资金AG-18933和AI-38189下进行了本发明。政府拥有本发明中的某些权利。
背景技术
阿尔茨海默病是一种人的进行性精神衰退,尤其导致记忆缺失、错乱和定向障碍。阿尔茨海默病占老年性痴呆的大部分,是成人死亡的主要原因(Anderson,R.N.,Natl.Vital Stat.Rep.491-87(2001),该文献的教导整体引入本文)。在组织学上,患有阿尔茨海默病的人的脑部特征为主要由脑内β-淀粉状蛋白(Aβ)积聚所引起的细胞内神经原纤维畸变以及存在老年斑,这些老年斑由具有淀粉状蛋白核心的颗粒状或丝状嗜银团所组成。Aβ积聚在该疾病的发生和发展中发挥着作用(Selkoe,DJ.,Nature 39923-31(1999)),其为淀粉样前体蛋白(APP)的蛋白水解片段。APP首先由β-分泌酶(还称为memapsin 2)切割、然后再由γ-分泌酶切割而生成Aβ(Lin,X.等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 971456-1460(2000);De Stropper,B.等人,Nature 397387-390(1998))。
需要开发用于治疗阿尔茨海默病的有效化合物和方法。本发明实现了这些及其它需要。
发明概述 本发明提供了新的β-分泌酶抑制剂及其使用方法、包括治疗阿尔茨海默病的方法。
一方面,本发明提供了具有(I)式的β-分泌酶抑制剂化合物
在式(I)中,R1是卤素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的C3-C20烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y。
R5是卤素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R2和R3独立地是卤素、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y。
R4是卤素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y。
R6和R7独立地是-S(O)2R11、-C(O)R12、-NR8R9、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y。
符号n表示0至2的整数。
R8独立地是-C(O)R13、-S(O)2R14、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R9独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R10独立地是-C(O)R13、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R11独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。如果n是2,则R11任选是-NR15R16。如果n是1或2,则R11不是氢。
R12独立地是-NR18R19、-OR19、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R13独立地是-OR19、-NR18R19、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R14独立地是-NR18R19、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R18和R19独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R15和R16独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
L1和L3独立地是价键、-NR17-、-S(O)q-、取代或未取代的亚烷基或者取代或未取代的杂亚烷基。L2是取代或未取代的亚烷基、-NR17-、-S(O)q-或者取代或未取代的杂亚烷基。
R17独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
符号q表示0至2的整数。
A1和A2独立地是取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。Y是载体部分。
L4是价键、-OP(OH)2O-、-C(O)OR20-、-C(O)NHR21-、-S(O)2NHR22-、取代或未取代的亚烷基、取代或未取代的杂亚烷基或者肽基连接基。
R20、R21和R22独立地是取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
在本发明的另一方面,本发明的β-分泌酶抑制剂化合物可以用于分别相对于在没有β-分泌酶抑制剂的存在下memapsin 2催化活性、β-分泌酶位点水解和β-淀粉状蛋白积聚的量而言降低memapsin 2催化活性、减少memapsin 2底物的β-分泌酶位点水解和/或减少β-淀粉状蛋白积聚的方法。
另一方面,本发明提供了包含本发明的memapsin 2 β-分泌酶抑制剂化合物或者memapsin 2 β-分泌酶抑制剂化合物与可药用载体的组合的药物组合物。
在本发明的另一方面,本发明的β-分泌酶抑制剂化合物可以用于治疗与β-分泌酶活性、β-淀粉样前体蛋白的β-分泌酶位点水解和/或β-淀粉状蛋白积聚有关的疾病或病症。一般地,治疗哺乳动物的疾病或病症。在示例性实施方案中,该疾病是阿尔茨海默病。
发明详述 缩略语和定义 本文所用的缩略语具有其在化学和生物学领域内的常规含义。本文提出的化学结构和化学式按照化学领域中已知的化学价的标准规则而构建。
当取代基基团由其从左向右书写的常规的化学式来说明时,它们同样包括由从右向左书写该结构所产生的化学上等同的取代基,例如-CH2O-等同于-OCH2-。
术语“烷基”本身或作为其它取代基的一部分表示直链(即无分枝)或支链或者二者的组合,这些链可以是完全饱和、单或多元不饱和的并且可以包括二价和多价基团,具有指定的碳原子数(即C1-C10表示1至10个碳),另有说明除外。饱和烃基团的实例包括但不限于例如如下基团甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、(环己基)甲基、同系物和异构体如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等的同系物和异构体。不饱和烷基是具有一条或多条双键或三键的烷基。不饱和烷基的实例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基、丁烯基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(1,4-戊二烯基)、乙炔基、1-和3-丙炔基、3-丁炔基以及更高级的同系物和异构体。烷氧基是通过氧连接基(-O-)与分子的剩余部分连接的烷基。
术语“亚烷基”本身或作为其它取代基的一部分表示由烷基衍生的二价基团,例如但不限于-CH2CH2CH2CH2-,该术语还包括下文作为“杂亚烷基”所述的那些基团。一般地,烷基(或亚烷基)可具有1至24个碳原子,在本发明中优选具有10个或更少碳原子的那些基团。“低级烷基”或“低级亚烷基”是通常具有8个或更少碳原子的短链烷基或亚烷基。
术语“杂烷基”本身或与其它术语组合时表示包括至少一个碳原子和至少一个选自O、N、P、Si和S的杂原子并且其中氮和硫原子可以任选被氧化且氮杂原子可以任选被季铵化的稳定的直链或支链或环状烃基团,或者它们的组合,另有说明除外。杂原子O、N、P和S以及Si可以位于杂烷基的任意内部位置或位于烷基与分子的剩余部分连接的位置。实例包括但不限于-CH2-CH2-O-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3、-CH2-CH2-N(CH3)-CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CH2-CH2、-S(O)-CH3、-CH2-CH2-S(O)2-CH3、-CH=CH-O-CH3、-Si(CH3)3、-CH2-CH=N-OCH3、-CH=CH-N(CH3)-CH3、O-CH3、-O-CH2-CH3和-CN。最多2个杂原子可以是相邻的,例如-CH2-NH-OCH3和-CH2-O-Si(CH3)3。类似地,术语“杂亚烷基”本身或作为其它取代基的一部分表示由杂烷基衍生的二价基团,例如但不限于-CH2-CH2-S-CH2-CH2-和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-。对于杂亚烷基,杂原子还可以占据两个链末端的任一端或两端(例如亚烷基氧基、亚烷基二氧基、亚烷基氨基、亚烷基二氨基等)。此外,对于亚烷基和杂亚烷基连接基团,连接基团没有通过连接基团的结构式书写的方向进行定位。例如,式-C(O)2R′-既表示-C(O)2R′-,又表示-R′C(O)2-。如上所述,如本文所用的杂烷基包括通过杂原子与分子的剩余部分连接的那些基团,例如-C(O)R′、-C(O)NR′、-NR′R″、-OR′、-SR′和/或-SO2R′。当描述“杂烷基”、然后描述特定的杂烷基如-NR′R″等时,应当理解,术语杂烷基和-NR′R″不是多余的或互相排斥的。更确切地说,描述特定的杂烷基可更加清楚。因此,术语“杂烷基”在本文中不应解释为排除特定的杂烷基、例如-NR′R″等。
术语“环烷基”和“杂环烷基”本身或与其它术语组合时分别表示“烷基”和“杂烷基”的环状形式,另有说明除外。此外,对于杂环烷基,杂原子还可以占据杂环与分子的剩余部分连接的位置。环烷基的实例包括但不限于环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基等。杂环烷基的实例包括但不限于1-(1,2,5,6-四氢吡啶基)、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-吗啉基、3-吗啉基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢噻吩-2-基、四氢噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基等。
术语“卤代基”或“卤素”本身或作为其它取代基的一部分表示氟、氯、溴或碘原子,另有说明除外。此外,术语如“卤代烷基”还意欲包括单卤代烷基和多卤代烷基。例如,术语“卤代(C1-C4)烷基”意欲包括但不限于三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。
术语“芳基”表示多元不饱和的芳香族烃取代基,所述芳香族烃取代基可以是单环或者稠合在一起或共价连接的多环(优选1至3个环),另有说明除外。术语“杂芳基”指含有1至4个选自N、O和S的杂原子的芳基基团(或环),其中氮和硫原子任选被氧化且氮原子任选被季铵化。杂芳基可以通过碳或杂原子与分子的剩余部分连接。芳基和杂芳基的非限制性实例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-联苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-唑基、4-唑基、2-苯基-4-唑基、5-唑基、3-异唑基、4-异唑基、5-异唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-异喹啉基、5-异喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。以上所指的各芳基和杂芳基环系统的取代基选自下述的可接受的取代基。
为了简短,当术语“芳基”与其它术语组合使用时(例如芳氧基、芳基硫氧基(arylthioxy)、芳基烷基),该术语既包括如上定义的芳基环,又包括如上定义的杂芳基环。因而,术语“芳基烷基”意欲包括其中芳基与烷基连接的那些基团(例如苄基、苯乙基、吡啶基甲基等),所述烷基包括其中碳原子(例如亚甲基)已经被例如氧原子替换的那些烷基(例如苯氧甲基、2-吡啶氧基甲基、3-(1-萘氧基)丙基等)。
如本文所用的术语“氧代基”表示通过双键与碳原子结合的氧。
如本文所用的术语“烷基磺酰基”表示具有式-S(O2)-R′的部分,其中R′是如上定义的烷基。R′可以具有特定数目的碳(例如“C1-C4烷基磺酰基”)。
以上术语(例如“烷基”、“杂烷基”、“芳基”和“杂芳基”)各自意欲包括所述基团的取代和未取代形式。各类型基团的优选的取代基在下文提供。
烷基和杂烷基(包括通常称为亚烷基、链烯基、杂亚烷基、杂链烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基和杂环烯基的那些基团)的取代基可以是一个或多个各种基团,所述基团选自但不限于-OR′、=O、=NR′、=N-OR′、-NR′R″、-SR′、-卤素、-SiR′R″R、-OC(O)R′、-C(O)R′、-CO2R′、-CONR′R″、-OC(O)NR′R″、-NR″C(O)R′、-NR′-C(O)NR″R、-NR″C(O)2R′、-NR-C(NR′R″R)=NR′、-NR-C(NR′R″)=NR、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)2NR′R″、-NRSO2R′、-CN和-NO2,其数目为0至(2m′+1),其中m′为所述基团中碳原子的总数。R′、R″、R和R′各自优选独立地指氢、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基(例如被1-3个卤素取代的芳基)、取代或未取代的烷基、烷氧基或硫代烷氧基或芳基烷基。当本发明的化合物包括一个以上R基团时,对各R基团进行独立的选择,如同各R′、R″、R和R′基团那样,如果存在一个以上这些基团的话。当R′和R″与同一氮原子连接时,它们可以与氮原子组合而形成4、5、6或7元环。例如,-NR′R″意欲包括但不限于1-吡咯烷基和4-吗啉基。由以上对取代基的讨论,本领域技术人员应当理解,术语“烷基”意欲包括如下基团包括与基团而非氢基团结合的碳原子的基团,例如卤代烷基(例如-CF3和-CH2CF3)和酰基(例如-C(O)CH3、-C(O)CF3、-C(O)CH2OCH3等)。
与对烷基所述的取代基类似,芳基和杂芳基的取代基有多种并且例如选自数目为0至芳香族环系统上开价的总数目的如下基团卤素、-OR′、-NR′R″、-SR′、-卤素、-SiR′R″R、-OC(O)R′、-C(O)R′、-CO2R′、-CONR′R″、-OC(O)NR′R″、-NR″C(O)R′、-NR′-C(O)NR″R、-NR″C(O)2R′、-NR-C(NR′R″R)=NR′、-NR-C(NR′R″)=NR、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)2NR′R″、-NRSO2R′、-CN和-NO2、-R′、-N3、-CH(Ph)2、氟(C1-C4)烷氧基和氟(C1-C4)烷基;其中R′、R″、R和R′优选独立地选自氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂芳基。当本发明的化合物包括一个以上R基团时,对各R基团进行独立的选择,如同各R′、R″、R和R′基团那样,如果存在一个以上这些基团的话。
芳基环或杂芳基环相邻原子上的取代基中的两个可以任选形成式-T-C(O)-(CRR′)q-U-的环,其中T和U独立地是-NR-、-O-、-CRR′-或单键,q是0至3的整数。或者,芳基环或杂芳基环相邻原子上的取代基中的两个可以任选被式-A-(CH2)r-B-的取代基替换,其中A和B独立地是-CRR′-、-O-、-NR-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-S(O)2NR′-或单键,r是1至4的整数。如此形成的新环的单键中的一条可以任选被双键替换。或者,芳基环或杂芳基环相邻原子上的取代基中的两个可以任选被式-(CRR′)s-X′-(C″R)d-的取代基替换,其中s和d独立地是0至3的整数,X′是-O-、-NR′-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-或-S(O)2NR′。取代基R、R′、R″和R″优选独立地选自氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂芳基。
如本文所用的术语“杂原子”或“环杂原子”意欲包括氧(O)、氮(N)、硫(S)、磷(P)和硅(Si)。
如本文所用的“取代基”表示选自以下部分的基团 (A)-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、氧代基、卤素、未取代的烷基、未取代的杂烷基、未取代的环烷基、未取代的杂环烷基、未取代的芳基、未取代的杂芳基,以及 (B)被至少一个选自如下的取代基取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基 (i)氧代基、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、卤素、未取代的烷基、未取代的杂烷基、未取代的环烷基、未取代的杂环烷基、未取代的芳基、未取代的杂芳基,以及 (ii)被至少一个选自如下的取代基取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基 (a)氧代基、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、卤素、未取代的烷基、未取代的杂烷基、未取代的环烷基、未取代的杂环烷基、未取代的芳基、未取代的杂芳基,以及 (b)被至少一个选自如下的取代基取代的烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基氧代基、-OH、-NH2、-SH、-CN、-CF3、-NO2、卤素、未取代的烷基、未取代的杂烷基、未取代的环烷基、未取代的杂环烷基、未取代的芳基和未取代的杂芳基。
如本文所用的“大小有限的取代基”或“大小有限的取代基基团”表示选自以上对“取代基”所述的所有取代基的基团,其中,取代或未取代的烷基各自是取代或未取代的C1-C20烷基,取代或未取代的杂烷基各自是取代或未取代的2至20元杂烷基,取代或未取代的环烷基各自是取代或未取代的C4-C8环烷基,取代或未取代的杂环烷基各自是取代或未取代的4至8元杂环烷基。
如本文所用的“低级取代基”或“低级取代基基团”表示选自以上对“取代基”所述的所有取代基的基团,其中,取代或未取代的烷基各自是取代或未取代的C1-C8烷基,取代或未取代的杂烷基各自是取代或未取代的2至8元杂烷基,取代或未取代的环烷基各自是取代或未取代的C5-C7环烷基,取代或未取代的杂环烷基各自是取代或未取代的5至7元杂环烷基。
术语“可药用盐”意欲包括用相对无毒的酸或碱制备的活性化合物的盐,这取决于在本文所述的化合物上发现的具体的取代基。当本发明的化合物含有相对酸性的官能团时,可以通过单独或在适宜的惰性溶剂中使这些化合物的中性形式与足量的所需碱接触,得到碱加成盐。可药用碱加成盐的实例包括钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、有机氢基盐或镁盐或者类似的盐。当本发明的化合物含有相对碱性的官能团时,可以通过单独或在适宜的惰性溶剂中使这些化合物的中性形式与足量的所需酸接触,得到酸加成盐。可药用酸加成盐的实例包括由无机酸和相对无毒的有机酸衍生的那些盐,所述无机酸的盐例如有盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐、硫酸盐、硫酸氢盐、氢碘酸盐或亚磷酸盐等,所述有机酸例如有乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、乳酸、扁桃酸、酞酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、枸橼酸、酒石酸、甲磺酸等。还包括氨基酸盐如精氨酸盐等以及有机酸盐如葡糖醛酸盐或半乳糖醛酸(galactunoric acid)盐等(例如参见Berge等人,“Pharmaceutical Salts”,Journal OF Pharmaceutical Science,1977,66,1-19)。本发明的某些特定的化合物既含有碱性官能团又含有酸性官能团,这些官能团允许化合物转化为碱或酸加成盐。
因此,本发明的化合物可以作为盐、例如与可药用酸的盐而存在。本发明包括这些盐。这些盐的实例包括盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、马来酸盐、乙酸盐、枸橼酸盐、富马酸盐、酒石酸盐(例如(+)-酒石酸盐、(-)-酒石酸盐或二者的混合物、包括外消旋混合物)、琥珀酸盐、苯甲酸盐和与氨基酸如谷氨酸的盐。可以通过本领域技术人员已知的方法来制备这些盐。
化合物的中性形式优选通过使盐与碱或酸接触并按常规方法分离母体化合物而重新生成。化合物的母体形式在某些物理性质、例如在极性溶剂中的溶解度上不同于各种盐形式。
除了盐形式外,本发明还提供了前药形式的化合物。本文所述的化合物的前药是易于在生理条件下经过化学变化而提供本发明的化合物的那些化合物。此外,还可以通过化学或生物化学方法在活体外环境中将前药转化为本发明的化合物。例如,当将前药置于含有适宜的酶或化学试剂的透皮贴剂贮库中时,该前药可以缓慢转化为本发明的化合物。
本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式以及包括水合形式在内的溶剂化形式而存在。通常,溶剂化形式等效于非溶剂化形式,并且被包括在本发明的范围内。本发明的某些化合物可以以多晶形或非晶形形式而存在。通常,对于本发明所考虑的用途而言,所有物理形式均是等效的,并且意欲包括在本发明的范围内。
本发明的某些化合物具有不对称碳原子(旋光中心)或双键;外消旋物、非对映异构体、互变异构体、几何异构体和单独的异构体被包括在本发明的范围内。本发明的化合物不包括本领域已知很不稳定以致于不能合成和/或分离的那些化合物。
本发明的化合物还可以在一个或多个构成这些化合物的原子处含有非天然比例的原子同位素。例如,可以用放射性同位素如氚(3H)、碘-125(125I)或碳-14(14C)将化合物进行放射性标记。本发明的化合物的所有同位素变体(无论是否为放射性)均被包括在本发明的范围内。
“疏水”基团是不会降低化合物在辛烷中的溶解度或增加化合物在辛烷中的溶解度的基团。疏水基团的实例包括脂肪族基团、芳基和芳烷基。
如本文所用的术语“天然氨基酸”指本领域已知的如下23种天然氨基酸(由它们的前3个字母缩写表示)Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Cys-Cys、Glu、Gln、Gly、His、Hyl、Hyp、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr和Val。如本文所用的术语“氨基酸的侧链”是在天然氨基酸α-碳上的取代基。
术语“非天然氨基酸”指式NH2-C(R32)2-COOH的化合物,其中R32各自独立地是本领域技术人员已知的任意侧链部分;非天然氨基酸的实例包括但不限于羟脯氨酸、高脯氨酸、4-氨基-苯丙氨酸、正亮氨酸、环己基丙氨酸、α-氨基异丁酸、N-甲基-丙氨酸、N-甲基-甘氨酸、N-甲基-谷氨酸、叔丁基甘氨酸、α-氨基丁酸、叔丁基丙氨酸、鸟氨酸、α-氨基异丁酸、2-氨基茚满-2-甲酸等以及它们的衍生物,尤其是当胺中的氮已经被单或二烷基化时。
肽取代基是通过酰胺键连接在一起的天然或非天然氨基酸的序列,该酰胺键通过使一个氨基酸的α-胺与相邻氨基酸的α-羧酸反应而形成。优选肽序列仅包括天然氨基酸。在一个实施方案中,肽取代基是约6个天然氨基酸的序列。在另一个实施方案中,肽取代基是2个天然氨基酸的序列。在另一个实施方案中,肽取代基是1个天然氨基酸。
如本文所用的“过渡态电子等排物”或“电子等排物”是包含羟乙胺连接基团-CH(OH)-CH2-NH-的化合物。该电子等排物在本文中还称为“羟乙胺电子等排物”。羟乙胺连接基团可以在肽的一对天然或非天然氨基酸之间找到。羟乙胺基团是酰胺键水解的过渡态的电子等排物。
如本文所用的“memapsin 2”指由国家生物技术信息中心(“NCBI”)登录号NP_036236所鉴定的蛋白质(有时称为“β-位点APP-切割酶1”或“BACE-1”),包括其保持蛋白水解活性的同系物、同工型和亚结构域(还称为β分泌酶)。活性memapsin 2蛋白质和蛋白片段(及其核苷酸编码序列)的序列鉴别先前已经在共同悬而未决的美国申请号20040121947和国际申请号PCT/USO2/34324(公开号WO 03/039454)中被公开和详细讨论,这些申请各自整体引入本文作为所有目的的参考。如本文所用的“memapsin 2蛋白质”表示全长的memapsin 2蛋白质或其保持蛋白水解活性的片段。
如本文所用的“memapsin 1”指由国家生物技术信息中心(“NCBI”)登录号NP_036237所鉴定的蛋白质(有时称为“β-位点APP-切割酶2”或“BACE-2”)和/或先前在共同悬而未决的美国申请号20040121947和国际申请号PCT/USO2/34324(公开号WO 03/039454)中被公开和详细讨论的那些(这些申请整体引入本文作为所有目的的参考),包括其保持蛋白水解活性的同系物、同工型和亚结构域。
如本文所用的“组织蛋白酶D”指由国家生物技术信息中心(“NCBI”)登录号NP_036236所鉴定的蛋白质(有时称为“β-位点APP-切割酶1”或“BACE-1”)和/或由酶结构数据库(Enzyme Structure Database)亚类EC3.4.23.5.所鉴定的蛋白质,包括其保持蛋白水解活性的同系物、同工型和亚结构域。
“β-分泌酶位点”是由活性memapsin 2或其活性片段切割的氨基酸序列。特异的β-分泌酶位点先前也已经在共同悬而未决的美国申请号20040121947和国际申请号PCT/USO2/34324(公开号WO 03/039454)中被提出和详细讨论(这些申请整体引入本文作为所有目的的参考),并且包括瑞典型突变序列(Swedish mutation sequence)和天然的β-淀粉样前体蛋白切割序列。因此,可以测定β-分泌酶抑制剂降低底物如β-淀粉样前体蛋白、β-淀粉样前体蛋白类似物或β-淀粉样前体蛋白片段的β-分泌酶位点水解的能力。
“β-分泌酶抑制剂”指相对于没有抑制剂时的活性而言能够降低memapsin 2的蛋白水解活性的化合物。
如本文所用的术语表示一个(种)或多个(种)。此外,如本文所用的短语“被...取代”表示所指的基团可以被任意或所有指定取代基中的一个或多个取代。例如,当基团如烷基或杂芳基“被未取代的C1-C20烷基或未取代的2至20元杂烷基取代”时,该基团可以含有一个或多个未取代的C1-C20烷基和/或一个或多个未取代的2至20元杂烷基。
本发明的化合物的“有效量”是有效地获得其预期目的的量。当术语“有效量”用于治疗受治疗者(例如哺乳动物、人等)的方法的上下文中时,该术语是治疗有效量(即对所述的疾病或疾病状态有效地获得治疗有效结果的量)。
“治疗”包括预防和改善特定的疾病或疾病状态,以及在一些情况下治愈疾病。
I.β-分泌酶抑制剂 一方面,本发明提供了抑制(即降低)β-分泌酶(memapsin 2)催化活性的化合物。这些化合物在本文中可以称为“本发明的化合物”、“β-分泌酶抑制剂化合物”或“memapsin 2 β-分泌酶抑制剂”。在该方面,化合物具有式(I)结构
在式(I)中,R1是卤素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的C3-C20烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y。
R5是卤素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R2和R3独立地是卤素、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y。
R4是卤素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y。
R6和R7独立地是-S(O)2R11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y。
符号n表示0至2的整数。
R8独立地是-C(O)R13、-S(O)2R14、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R9独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R10独立地是-C(O)R13、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R11独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。如果n是2,则R11任选是-NR15R16。如果n是1或2,则R11不是氢。
R12独立地是-NR18R19、-OR19、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R13独立地是-OR19、-NR18R19、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R14独立地是-NR18R19、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R18和R19独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
R15和R16独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
L1和L3独立地是价键、-NR17-、-S(O)q-、取代或未取代的亚烷基或者取代或未取代的杂亚烷基。L2是取代或未取代的亚烷基、-NR17-、-S(O)q-或者取代或未取代的杂亚烷基。
R17独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
符号q表示0至2的整数。
A1和A2独立地是取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。Y是载体部分。
L4是价键、-OP(OH)2O-、-C(O)OR20-、-C(O)NHR21-、-S(O)2NHR22-、取代或未取代的亚烷基、取代或未取代的杂亚烷基或者肽基连接基。
R20、R21和R22独立地是取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
在一些实施方案中,L3是未取代的C1-C5(例如C1-C3)亚烷基。L3还可以是未取代的2至5元杂亚烷基。在其它实施方案中,L3是-(CH2)e-S-。符号e表示0至10的整数。在一些实施方案中,e是1。
在一些实施方案中,R1是氢、卤素、-NR8R9、-OR10或-S(O)nR11。在其它实施方案中,R1是氢、-NR9S(O)nR14、-OR10或-S(O)nR11。R1还可以是氢或-NR9S(O)nR14。
R5、R8、R9、R10和R11可以独立地是氢、取代或未取代的C1-C20烷基、取代或未取代的2至20元杂烷基、取代或未取代的C5-C7环烷基、取代或未取代的5至7元杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y。
在式(I)的一些实施方案中,取代或未取代的亚烷基各自是R23-取代或未取代的C1-C20亚烷基,取代或未取代的杂亚烷基各自是R23-取代或未取代的2至20元杂亚烷基,取代或未取代的烷基各自是R23-取代或未取代的C1-C20烷基,取代或未取代的杂烷基各自是R23-取代或未取代的2至20元杂烷基,取代或未取代的环烷基各自是R23-取代或未取代的C5-C7环烷基,取代或未取代的杂环烷基各自是R23-取代或未取代的5至7元杂环烷基,取代或未取代的杂芳基各自是R24-取代或未取代的杂芳基,取代或未取代的芳基各自是R24-取代或未取代的芳基。
R23独立地是氧代基、卤素、-CN、-CF3、-OCF3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元杂烷基、R25-取代或未取代的C5-C7环烷基、R25-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R26-取代或未取代的杂芳基或者R26-取代或未取代的芳基。
R24独立地是卤素、-CN、-CF3、-OCF3、-OCH3、OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元杂烷基、R25-取代或未取代的C5-C7环烷基、R25-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R26-取代或未取代的杂芳基或者R26-取代或未取代的芳基。
符号t独立地是0至2的整数。
R27、R28和R29独立地是氢、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元杂烷基、R25-取代或未取代的C5-C7环烷基、R25-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R26-取代或未取代的杂芳基或者R26-取代或未取代的芳基。如果t是1或2,则R27不是氢。
R25独立地是氧代基、卤素、-CN、-OH、-CF3、-OCF3、-OCH3、未取代的C1-C20烷基、未取代的2至20元杂烷基、未取代的C5-C7环烷基、未取代的5至7元杂环烷基、未取代的芳基或未取代的杂芳基。R26独立地是卤素、-CN、-OH、-CF3、-OCF3、-OCH3、未取代的C1-C20烷基、未取代的2至20元杂烷基、未取代的C5-C7环烷基、未取代的5至7元杂环烷基、未取代的芳基或未取代的杂芳基。
在一些实施方案中,A1和/或A2独立地是R23-取代或未取代的C5-C7环烷基、R23-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R24-取代或未取代的杂芳基或者R24-取代或未取代的芳基。
在其它实施方案中,R2、R3、R8、R9、R10、R11和/或R12独立地是氢、R23-取代或未取代的C1-C20烷基、R23-取代或未取代的2至20元杂烷基、R23-取代或未取代的C5-C7环烷基、R23-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R24-取代或未取代的杂芳基或者R24-取代或未取代的芳基。R2、R3、R8、R9、R10、R11和/或R12可以是取代或未取代的C1-C20烷基或者取代或未取代的杂环烷基。R2、R3、R4、R8、R9、R10、R11和/或R12还可以是未取代的C1-C20烷基。R2、R3、R8、R9、R10、R11和/或R12还可以是未取代的C1-C5烷基。
R4、R6和/或R7可以独立地是氢、R23-取代或未取代的C1-C20烷基、R23-取代或未取代的2至20元杂烷基、R23-取代或未取代的C5-C7环烷基、R23-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R24-取代或未取代的杂芳基或者R24-取代或未取代的芳基。R4、R6和/或R7还可以独立地是氢或未取代的C1-C20烷基。在一些实施方案中,R4、R6和/或R7独立地是氢或未取代的C1-C5烷基。
R27、R28和R29可以独立地是氢、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元杂烷基。R23可以独立地是氧代基、卤素、-CN、-CF3、-OCF3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元杂烷基。R24可以独立地是卤素、-CN、-CF3、-OCF3、-OCH3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元杂烷基。
在一些实施方案中,R2和R3可以独立地是氢、卤素或未取代的C1-C20烷基。
R5可以是R23-取代或未取代的C5-C7环烷基、R23-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R24-取代或未取代的杂芳基或者R24-取代或未取代的芳基。R5还可以是R24-取代或未取代的杂芳基或者R24-取代或未取代的芳基。在一些实施方案中,R5是R24-取代或未取代的芳基。在一些相关的实施方案中,R24是卤素、-CN、-OH、-CF3、未取代的C1-C20烷基或未取代的烷氧基(例如C1-C20烷氧基)。R5还可以是卤代苯基(例如二氟苯基)或苯基。在一些相关的实施方案中,L3是未取代的C1-C5(例如C1-C3)亚烷基。
在一些实施方案中,R5选自取代或未取代的四氢呋喃基、取代或未取代的四氢吡喃基和取代或未取代的吡啶基甲基。在一些相关的实施方案中,L3是未取代的C1-C5烷基。在其它相关的实施方案中,L3是亚甲基。
在一些实施方案中,R5是R24-取代或未取代的芳基或者R24-取代或未取代的杂芳基(例如取代或未取代的噻唑基、取代或未取代的唑基、取代或未取代的咪唑基或者取代或未取代的吡唑基)。在一些实施方案中,R5是R24-取代或未取代的苯基(例如卤代苯基,如3,5-二氟苯基)或者R24-取代或未取代的噻唑基。在另一个相关的实施方案中,L3是亚甲基。
在一些实施方案中,R5选自取代或未取代的苯基、取代或未取代的吡唑基、取代或未取代的呋喃基、取代或未取代的咪唑基、取代或未取代的异唑基、取代或未取代的二唑基、取代或未取代的唑基、取代或未取代的吡咯基、取代或未取代的吡啶基、取代或未取代的嘧啶基、取代或未取代的哒嗪基、取代或未取代的噻唑基、取代或未取代的三唑基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的二氢噻吩并吡唑基、取代或未取代的硫茚基、取代或未取代的咔唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的苯并噻吩基、取代或未取代的苯并呋喃基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的喹啉基、取代或未取代的苯并三唑基、取代或未取代的苯并噻唑基、取代或未取代的苯并唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的异喹啉基、取代或未取代的异吲哚基、取代或未取代的吖啶基、取代或未取代的benzoisazolyl(苯并异唑基)、取代或未取代的二甲基乙内酰脲、取代或未取代的吡嗪基、取代或未取代的四氢呋喃基、取代或未取代的吡咯啉基、取代或未取代的吡咯烷基、取代或未取代的吗啉基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的二氮杂基、取代或未取代的氮杂基、取代或未取代的硫杂基或者取代或未取代的氧杂基。
A1和A2可以独立地是取代或未取代的C5-C7环烷基、取代或未取代的5至7元杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。A1和/或A2还可以独立地是取代或未取代的芳基(例如苯基)或者取代或未取代的杂芳基(例如吡啶基)。
在一些实施方案中,A1和A2独立地是取代或未取代的苯基、取代或未取代的吡唑基、取代或未取代的呋喃基、取代或未取代的咪唑基、取代或未取代的异唑基、取代或未取代的二唑基、取代或未取代的唑基、取代或未取代的吡咯基、取代或未取代的吡啶基、取代或未取代的嘧啶基、取代或未取代的哒嗪基、取代或未取代的噻唑基、取代或未取代的三唑基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的二氢噻吩并吡唑基、取代或未取代的硫茚基、取代或未取代的咔唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的苯并噻吩基、取代或未取代的苯并呋喃基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的喹啉基、取代或未取代的苯并三唑基、取代或未取代的苯并噻唑基、取代或未取代的苯并唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的异喹啉基、取代或未取代的异吲哚基、取代或未取代的吖啶基、取代或未取代的benzoisazolyl(苯并异唑基)、取代或未取代的二甲基乙内酰脲、取代或未取代的吡嗪基、取代或未取代的四氢呋喃基、取代或未取代的吡咯啉基、取代或未取代的吡咯烷基、取代或未取代的吗啉基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的二氮杂基、取代或未取代的氮杂基、取代或未取代的硫杂基、取代或未取代的哌啶基或者取代或未取代的氧杂基。
在一些实施方案中,L3和L1独立地是价键、未取代的亚烷基或未取代的杂亚烷基。在其它实施方案中,L3和L1独立地是价键、未取代的C1-C20亚烷基或未取代的2至20元杂亚烷基。L3和L1还可以独立地是价键、未取代的C1-C5亚烷基或未取代的2至5元杂亚烷基。L3还可以是C1-C5亚烷基。L1可以是支链未取代的C1-C5亚烷基。
在一些实施方案中,L2是未取代的C1-C20亚烷基或未取代的2至20元杂亚烷基。在其它实施方案中,L2是未取代的C1-C5亚烷基或未取代的2至5元杂亚烷基。L2可以是未取代的C1-C5亚烷基。L2可以是支链未取代的C1-C5亚烷基。L2还可以是亚甲基。在一些相关的实施方案中,A2是取代或未取代的杂芳基(例如吡啶基)或者取代或未取代的芳基(例如苯基)。在一些相关的实施方案中,A1是取代或未取代的杂芳基(例如吡啶基)或者取代或未取代的芳基(例如苯基)。
在一些实施方案中,当R1是-NR8R9且R8是-S(O)2R14时,则R6是氢。R7可以是取代或未取代的烷基。R7可以是未取代的C1-C5烷基。R2和R3可以均是氢。因此,在一些实施方案中,R1是-NR8R9,R8是-S(O)2R14,R6是氢,R7是未取代的C1-C5烷基,并且R2和R3是氢。
在一些实施方案中,当R1是氢时,则R6不是氢。在一些相关的实施方案中,R6是取代或未取代的烷基。在一些相关的实施方案中,R6是未取代的C1-C5烷基。在一些相关的实施方案中,R6是取代或未取代的C3-C6环烷基。在一些相关的实施方案中,R6是取代或未取代的环丙基。在一些相关的实施方案中,R7是氢。在一些相关的实施方案中,R2和R3是氢。
在一些实施方案中,R1是氢。R2、R3和R4可以是氢。A1可以是取代或未取代的杂芳基或者取代或未取代的杂环烷基。在一些相关的实施方案中,A1是取代或未取代的杂芳基(例如取代或未取代的噻唑基(thioazolyl)、取代或未取代的唑基、取代或未取代的咪唑基或者取代或未取代的吡唑基)。A2可以是取代或未取代的芳基或者杂芳基。A2还可以是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的吡啶基。R6可以是取代或未取代的烷基或者取代或未取代的环烷基(例如未取代的(C1-C6)烷基或未取代的(C3-C6)环烷基)。L1可以是未取代的亚甲基。L2可以是未取代的亚甲基。在一些相关的实施方案中,R6是甲基或环丙基,R7是氢,L1是未取代的亚甲基,并且L2是未取代的亚甲基。L3可以是未取代的亚甲基。R5可以是取代或未取代的苯基。在一些相关的实施方案中,A1是取代或未取代的2-噻唑基(例如未取代的2-噻唑基或者被取代或未取代的烷基、例如一个或多个未取代的(C1-C5)烷基取代的2-噻唑基)。例如,A1可以是2-(4-甲基噻唑基)。A2可以是取代或未取代的3-吡啶基或者取代或未取代的苯基(例如3-(5-取代的吡啶基)或间位取代的苯基)。在一些实施方案中,3-(5-取代的吡啶基)和间位取代的苯基被取代或未取代的烷基(例如未取代的C1-C5烷基或C1-C5卤代烷基)取代。本段中各取代基定义的一些或所有实施方案可以组合而形成适宜的亚属。因此,在一些实施方案中,R1、R2、R3和R4是氢,A1是取代或未取代的2-噻唑基,A2是取代或未取代的3-吡啶基或者取代或未取代的苯基,R6是未取代的(C1-C6)烷基或者未取代的(C3-C6)环烷基,R7是氢,并且L1、L2和L3是未取代的亚甲基。
在一些实施方案中,R1是-NR9S(O)nR14。R6可以是氢。A1可以是取代或未取代的苯基。A2可以是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的吡啶基。在一些相关的实施方案中,n是2,R9是未取代的(C1-C5)烷基(例如甲基),并且R14是未取代的(C1-C5)烷基(例如甲基)。L2可以是未取代的亚甲基。L1可以是甲基亚甲基。R2、R3和R4可以是氢。本段中各取代基定义的一些或所有实施方案可以组合而形成适宜的亚属。因此,在一些实施方案中,R1是-NR9S(O)nR14,R6是氢,A1是取代或未取代的苯基,A2是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的吡啶基,n是2,R9是未取代的(C1-C5)烷基(例如甲基),R14是未取代的(C1-C5)烷基(例如甲基),L2是未取代的亚甲基,L1是甲基亚甲基,并且R2、R3和R4是氢。
在一些实施方案中,β-分泌酶抑制剂化合物具有式(II)结构
在式(II)中,L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、A1和A2如上文式(I)的讨论中所定义。
在一些实施方案中,β-分泌酶抑制剂化合物具有式(III)结构
在式(III)中,L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、A1和A2如上文式(I)的讨论中所定义。
在另一个实施方案中,β-分泌酶抑制剂化合物具有式(IV)结构
在式(II)中,L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R23、A1和A2如上文式(I)的讨论中所定义。在一些实施方案中,R23是未取代的C1-C5烷基。
在另一个实施方案中,β-分泌酶抑制剂化合物具有式(V)结构
在式(V)中,L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R23、A1和A2如上文式(I)的讨论中所定义。在一些实施方案中,R23是未取代的C1-C5烷基。
在另一个实施方案中,β-分泌酶抑制剂化合物具有式(VI)结构
在式(VI)中,L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R23、A1和A2如上文式(I)的讨论中所定义。在一些实施方案中,R23是未取代的C1-C5烷基。
在另一个实施方案中,β-分泌酶抑制剂化合物具有式(VII)结构
在式(VII)中,L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R23、A1和A2如上文式(I)的讨论中所定义。在一些实施方案中,R23是未取代的C1-C5烷基。
在一些实施方案中,以上在式(I)-(VII)的化合物中所述的取代的基团各自被至少一个取代基基团取代。更特别地,在一些实施方案中,以上在式(I)-(VII)的化合物中所述的取代的烷基、取代的杂烷基、取代的环烷基、取代的杂环烷基、取代的芳基、取代的杂芳基、取代的亚烷基或取代的杂亚烷基各自被至少一个取代基基团取代。在其它实施方案中,至少一个或所有这些基团被至少一个大小有限的取代基基团取代。或者,至少一个或所有这些基团被至少一个低级取代基基团取代。
在式(I)-(VII)的化合物的其它实施方案中,取代或未取代的烷基各自是取代或未取代的C1-C20烷基,取代或未取代的杂烷基各自是取代或未取代的2至20元杂烷基,取代或未取代的环烷基各自是取代或未取代的C4-C8环烷基,取代或未取代的杂环烷基各自是取代或未取代的4至8元杂环烷基,取代或未取代的亚烷基各自是取代或未取代的C1-C20亚烷基,并且取代或未取代的杂亚烷基各自是取代或未取代的2至20元杂亚烷基。
或者,取代或未取代的烷基各自是取代或未取代的C1-C8烷基,取代或未取代的杂烷基各自是取代或未取代的2至8元杂烷基,取代或未取代的环烷基各自是取代或未取代的C5-C7环烷基,取代或未取代的杂环烷基各自是取代或未取代的5至7元杂环烷基,取代或未取代的亚烷基各自是取代或未取代的C1-C8亚烷基,并且取代或未取代的杂亚烷基各自是取代或未取代的2至8元杂亚烷基。
在一些实施方案中,本发明的化合物包括任意一种或所有表1的化合物。在一些实施方案中,本发明的化合物包括任意一种或所有以下实施例4的化合物。
A.载体部分 在共同悬而未决的美国申请号20040121947和国际申请号PCT/USO2/34324(公开号WO 03/039454)中(这些申请引入本文作为所有目的的参考),具有和不具有载体部分的电子等排物β-分泌酶抑制剂在表达人淀粉样前体蛋白的瑞典型突变的tg2576小鼠中显示出有效地减少Aβ的生成(Hsiao,K.等人,Science 274,99-102(1996))。因此,本领域技术人员将知道,本发明的化合物可以以具有或不具有载体部分的形式来施用。载体部分可以与本发明的化合物上任意适宜的部位连接。
如本文所用的“载体部分”指增强化合物穿过血脑屏障(BBB)能力的、与本发明的β-分泌酶抑制剂化合物共价或非共价连接的化学部分。本发明的β-分泌酶抑制剂可以通过共价相互作用(例如肽键)或通过非共价相互作用(例如离子键、氢键、范德华引力)与载体部分连接或结合。
血脑屏障是存在于脑内细胞外液和毛细血管腔内血液之间的通透性屏障。该屏障源自脑内毛细血管和其它组织内发现的毛细血管之间的结构差异。脑毛细血管的结构差异中最显著的差异是内皮细胞间的紧密连接。与位于脑外的毛细血管内皮细胞内的跨内皮电阻(3-33ohms/cm2)相比,这些特殊的紧密连接可产生非常高的跨内皮电阻(1500-2000ohms/cm2),从而减少了在其它器官中观察到的基于水性液的旁细胞扩散(Brightman,M.,Bradbury MWB(编者),Physiology and Pharmacology of the blood-brainbarrier.实验药理学手册(Handbook of experimental pharmacology)103,Springer-Verlag,柏林,(1992);Lo,E.H.等人,Brain Res.Rev.,38140-148,(2001))。因此,在一些实施方案中,本发明的化合物与载体部分(在上式中以符号Y表示)共价结合。
任意适宜的载体部分可以用于本发明。有用的载体部分例如包括亲脂性载体部分、酶底物载体部分、肽基载体部分和纳米粒载体部分。载体部分还可以包括低聚糖单元或者通过磷酸酯键或脂-酯键或其它可水解的键与化合物连接的其它分子,这些键可被溶酶体和内涵体中的糖苷酶、磷酸酶、酯酶、脂酶或其它水解酶切割。载体部分可以含有胍、氨基或咪唑官能团。
1.亲脂性载体部分 亲脂性载体部分可增加化合物的总亲脂性,由此有助于穿过BBB。可以使用本领域已知的任意适宜方法来定量亲脂性。例如,可以测定辛醇和水之间的分配系数(log Po/w),由此表示亲脂性的程度。在一些实施方案中,亲脂性载体部分具有的log Po/w为1.5-2.5。亲脂性载体部分是本领域广泛已知的,例如在Lambert,D.M.,Eur JPharm Sci.,11S15-27(2000)中有详细讨论。用于增加化合物亲脂性的示例性亲脂性载体部分包括修饰和未修饰的二甘油酯、脂肪酸和磷脂。
一些亲脂性载体部分在穿过BBB后经历酶介导的氧化,产生载体部分的亲水性膜不可通透的形式,其在BBB后仍被捕获(Bodor等人,PharmacolTher 761-27(1997);Bodor等人,American Chemical Society,Washington,DC第317-337页(1995);Chen等人,J Med Chem 413773-3781(1998);Wu等人,J Pharm Pharmacol 54945-950(2002))。经历酶介导的氧化的示例性亲脂性载体部分包括1,4-二氢胡芦巴碱(Palomino等人,J Med Chem,32622-625(1989));已经成功用于将睾酮和齐多夫定转运穿过血脑屏障的膦酸烷基酯载体部分(Somogyi,G.等人,Int J Pharm,16615-26(1998));和经酶氧化成离子吡啶盐的亲脂性二氢吡啶载体部分(Bodor等人,Science,214(18)1370-1372(1981))。
2.肽基载体部分 肽基载体部分是用于帮助化合物转运穿过BBB的部分或全部由肽(包括多肽、蛋白质、抗体和抗体片段)组成的部分(Wu等人,J Clin Invest1001804-1812(1997);美国专利号4,801,575;Pardridge等人,Adv DrugDeliv Rev,36299-321(1999))。
肽基载体部分可以与将相应的配体或受体靶向于BBB的内皮细胞的特异性肽转运系统、受体或配体相互作用。特异性转运系统可以包括载体介导或受体介导的穿过BBB的转运(美国专利申请号20040110928)。示例性肽基载体部分包括胰岛素(Pardridge等人,Nat Rev Drug Discov,1131-139(2002));较小的肽,例如脑啡肽、促甲状腺激素释放激素、精氨酸-加压素(Bergley,J Pharm Pharmacol,48136-146(1996);Banks等人,Peptides,131289-1294(1992);Han等人,AAPS Pharm.Si,2E6(2000));嵌合肽,例如WO-A-89/10134中描述的那些;氨基酸衍生物,例如美国专利申请号20030216589中公开的那些;反式激活因子肽(tat peptide)(Schwarze,S.R.等人,Science 2851569-1572(1999));聚精氨酸肽(Wender,P.A.等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 9713003-13008(2000));胰岛素样生长因子-1;胰岛素样生长因子-2;转铁蛋白;瘦素;低密度脂蛋白(Pardridge,Nat.Rev.DrugDiscov.1131-139(2002);Colma等人,Pharm.Res.17266-274(2000);Pardridge,Endocrine Rev,7314-330(1986);Golden等人,J Clin Invest,9914-18(1997);Bickel等人,Adv.Drug Deliv.Rev.46(1-3)247-79(2001));和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)(美国专利申请号20040102369)。
共同悬而未决的美国专利申请号20040121947和国际申请号PCT/USO2/34324(公开号WO 03/039454)公开了与结合有荧光反式激活因子的电子等排β-分泌酶抑制剂一起孵育的细胞的共聚焦显微图像显示出细胞内的不均匀分布。一些高的荧光强度显示在内涵体和溶酶体细胞内的囊状结构中。这表明反式激活因子载体部分可能已经在溶酶体或内涵体内被蛋白酶修饰了,从而产生不能离开溶酶体或内涵体室的抑制剂。溶酶体和内涵体含有多种蛋白酶,包括水解酶,例如组织蛋白酶A、B、C、D、H和L。这些酶中的一些是内肽酶,例如组织蛋白酶D和H。其它酶是外肽酶,例如组织蛋白酶A和C,而组织蛋白酶B既具有内肽酶活性,又具有外肽酶活性。这些蛋白酶的特异性的足够广泛从而水解反式激活因子肽远离抑制剂化合物,由此水解载体肽远离电子等排抑制剂。因此,已经表明,反式激活因子和其它载体肽可以特别用于将电子等排抑制剂特异地传递给溶酶体和内涵体。当通过诸如注射的机制施用于哺乳动物时,结合的化合物可穿透细胞并渗入到溶酶体和内涵体的内部。然后,溶酶体和内涵体中的蛋白酶可将反式激活因子水解,由此阻止从溶酶体和内涵体中逃逸。
载体肽可以是反式激活因子或者是可被溶酶体和内涵体的蛋白酶所水解的其它碱性肽、例如寡-L-精氨酸。可以装配对溶酶体或内涵体的蛋白酶切割敏感的特异性肽键,由此促进载体化合物从抑制剂移除。例如,二肽Phe-Phe、Phe-Leu、Phe-Tyr和其它可被组织蛋白酶D切割。
在一个实施方案中,肽基载体分子包括阳离子官能团如反式激活因子-肽(Schwarze,S.R.等人,Science 2851569-1572(1999))或9个精氨酸残基(Wender,P.A.等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 9713003-13008(2000))。有用的阳离子官能团例如包括胍、氨基和咪唑官能团。因此,阳离子官能团还包括氨基酸侧链如赖氨酸、精氨酸和组氨酸残基的侧链。在一些实施方案中,肽基载体分子可以包括1-10个阳离子官能团。当本发明的化合物与载体部分结合或连接时,所得结合物在本文中可以称为“载体肽-抑制剂”结合物或“CPI”。CPI结合物可以施用于体外样品或哺乳动物,由此用作本发明的化合物进入体外样品或哺乳动物的细胞内的转运载体。载体部分和CPI结合物可增强本发明的化合物有效地穿过细胞和血脑屏障来抑制memapsin 2切割APP、随后生成Aβ的能力。
吸附介导的胞转作用(AME)提供了肽基载体部分可以穿过BBB的供选机制。AME与其它形式的胞转作用的不同之处在于,载体部分与腔质膜的最初结合是通过与阴离子部位的静电相互作用或者与糖残基的特异性相互作用而被介导的。通过载体部分的C-末端结构和碱性来测定通过AME的摄取。示例性的吸附性肽基载体部分包括具有碱性等电点的肽和蛋白质(阳离子蛋白质)以及一些凝集素(糖蛋白结合蛋白)。参见Tamai,I.等人,J.Pharmacol.Exp.Ther.280410-415(1997);Kumagai,A.K.等人,J.Biol.Chem.26215214-15219(1987)。
肽基载体部分还包括抗体载体部分。抗体载体部分是包括抗体或其片段的载体部分。一般地,抗体或抗体片段是单克隆抗体或衍生自单克隆抗体。抗体载体部分与细胞受体或在脑毛细血管内皮细胞的腔表面上表达的转运蛋白结合(美国专利申请号20040101904)。示例性的抗体或其片段包括与人胰岛素受体结合的MAb 83-14(Pardridge等人,Pharm Res.12807-816(1995))、抗转铁蛋白抗体(Li,J.Y.等人,Protein Engineering 12787-796(1999))和模拟如上讨论已知可穿过BBB的内源性蛋白质或肽的单克隆抗体。
3.纳米粒载体部分 纳米粒载体部分是直径或长度通常小于1微米的固态胶体载体。化合物可以被包裹、吸附或共价连接在纳米粒载体部分的表面。纳米粒载体部分已经成功地用于将多种化合物传递到脑,这些化合物包括六肽dalagrin(脑啡肽类似物)、洛哌丁胺、tubocerarine和多柔比星(Ambikanandan等人,J.Pharm Pharmaceut Sci 6(2)252-273(2003))。除了帮助转运到脑内外,可以用于包裹纳米粒的非离子型清洁剂如聚山梨酯-80还可以用于抑制外流泵。Zordan-Nudo,T.等人,Cancer Res,535994-6000(1993)。用于制备纳米粒载体部分的示例性材料包括聚氰基丙烯酸烷基酯(PACA)(Bertling等人,Biotechnol.Appl.Biochem.13390-405(1991))、聚氰基丙烯酸丁酯(PBCA)(Chavany等人,Pharm.Res.9441-449(1992))、具有被吸收到表面并用聚山梨酯80包裹的肽-药物复合物的聚氰基丙烯酸丁酯(Kreuter,J.等人,Brain Res,674171-174(1995);Kreuter,J.,Adv Drug Deliv Rev,4765-81,(2001);Kreuter,J.,Curr Med Chem,2241-249(2002))、聚氰基丙烯酸异己酯(PIHCA)(Chavany等人,Pharm.Res.111370-1378(1994))、聚氰基丙烯酸己酯(PHCA)(Zobel等人,Antisense Nucleic Acid Drug Dev.7483-493(1997))和聚乙二醇化的聚氰基丙烯酸酯(Pilar,C.等人,Pharm Res18(8)1157-1166(2001))。
4.连接基部分 连接基部分可以用于将载体部分与本发明的β-分泌酶抑制剂连接。例如,可以采用聚合物技术(例如聚乙二醇化)以及引入长的间隔臂的连接基分子来阻止化合物与载体间的空间位阻(Yoshikawa,T.等人,J PharmacolExp Ther,263897-903,1992)。连接基部分可以是可切割或不可切割的。
可切割的连接基分子包括可切割的部分。任意适宜的可切割部分可用于本发明,例如包括磷酸酯、酯、二硫化物等。可切割的部分还包括能够被生物酶如肽酶、糖苷酶、磷酸酶、酯酶、脂酶或其它水解酶切割的那些部分。当载体部分干扰化合物的生物活性时,可切割的连接基分子是尤其有用的。示例性的可切割连接基分子包括N-琥珀酰亚氨基-3-2-吡啶基二硫基丙酸盐(SPDP)或N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)。
不可切割的连接基分子是参与载体部分与化合物通过通常对生物环境和酶稳定的键的连接的那些。当载体部分不干扰化合物的生物活性时,一般使用不可切割的连接基分子。示例性的不可切割的连接基分子包括硫醚(例如间-马来酰亚氨基苯甲酰基N-羟基琥珀酰亚胺酯(MBS))、酰胺(例如N-羟基琥珀酰亚胺(NHS-XX-))、扩展的酰胺(例如N-羟基琥珀酰亚胺聚乙二醇(NHS-PEG))和扩展的酰肼连接(例如酰肼-PEG-生物素-)、抗生物素蛋白-生物素以及PEG连接基(Ambikanandan等人,J.Pharm Pharmaceut Sci 6(2)252-273(2003);Pardridge,Adv Drug Deliv Rev,36299-321(1999);美国专利号6,287,792)。
II.示例性合成 通过通常众所周知的合成方法的适宜组合合成本发明的化合物。可用于合成本发明的化合物的技术对于相关领域技术人员而言既显而易见,又易于达到。以下讨论被提出用于说明可用于合成本发明的化合物的多种方法中的某些。但是,该讨论并非意欲限定可用于制备本发明的化合物的反应范围或反应顺序。
流程

图1
在流程图1、2和3中,L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、A1和A2如上所定义。某些1s和2s化合物的合成在以下实施例部分中有详述。将1s用三乙胺和甲磺酰氯处理,然后用叠氮化钠处理,然后进行钯还原反应,得到甲胺取代的环2s。通过在部分被保护的间苯二酸3s和甲胺2s之间形成酰胺键而形成间苯二甲酰胺4s。最后,通过使用烷基卤进行氢化钠介导的烷基化反应而产生烷基化的酰胺5s。
流程图2
或者,化合物5s可以按照流程图2中的顺序来制备,其中使醛6s与适宜的胺和氰基硼氢化钠进行还原性胺化反应,得到胺7s。然后,将胺7s与3s偶联,然后进行酯水解,得到烷基化的酰胺5s。
流程图3
将环氧化物8s用适宜的胺处理,得到氨基醇9s。用酸除去Boc保护基团,然后与片段5s偶联(流程图1),产生最终的抑制剂10s。
III.β-分泌酶抑制剂的活性 为了开发有用的β-分泌酶抑制剂,可以在体外鉴别能够选择性降低memapsin 2催化活性的候选抑制剂,随后可以测定其减少Aβ生成的能力。可以采用本领域已知的方法和/或本文提出的那些方法来测定抑制剂化合物的活性。
可以使用生物活性memapsin 2(重组或天然存在的)来鉴别和测定降低memapsin 2催化活性的化合物。memapsin 2可以在体外分离的天然细胞中找到,或者可以在细胞中被共表达或表达。可以使用多种本领域已知的方法来测定相对于没有抑制剂时的活性而言在抑制剂存在下的memapsin 2催化活性的降低。
例如,可以测定化合物在memapsin 2的存在下导致肽的β-分泌酶位点水解可被检测地降低的能力。这些数据可以例如表示为Ki、表观Ki、Vi/Vo或抑制百分率。Ki是表明化合物抑制给定酶(例如memapsin 2、memapsin 1和/或组织蛋白酶D)的能力的抑制平衡常数。Ki数值越小,表明本发明的化合物对酶的亲和力越高。Ki值与底物无关,可由表观Ki转化。
在底物存在下按照确立的技术(例如参见Bieth,J.,Bayer-Symposium V蛋白酶抑制剂,第463-469页,Springer-Verlag,柏林(1994))来测定表观Ki。表观Ki的标准误差是来自Vi/Vo数据的非线性回归的误差,这些Vi/Vo数据采用众所周知的技术(例如参见Bieth,J.,Bayer-Symposium V蛋白酶抑制剂,第463-469页,Springer-Verlag,柏林(1994);Ermolieff,J.等人,Biochemistry 3912450-12456(2000),这些文献的教导整体引入本文作为参考)在本发明的化合物的不同浓度(例如约10nM至约1000nM)下测定。Vi/Vo描述了在没有(Vo)或有(Vi)抑制剂时由酶引起的酶底物初始转化速率的比(Ermolieff等人,Biochemistry 4012450-12456(2000))。Vi/Vo值为1.0表明化合物没有抑制酶。Vi/Vo值小于1.0表明本发明的化合物抑制了酶的活性。
当鉴别出能够在memapsin 2的存在下减少肽的β-分泌酶位点水解的化合物后,可以进一步测定这些化合物相对于其它酶而言选择性抑制memapsin 2的能力。一般地,其它酶是肽水解酶,例如memapsin 1或组织蛋白酶D。可使用生物活性酶(重组或天然存在的)来测定降低组织蛋白酶D催化活性或memapsin 1催化活性的化合物。组织蛋白酶D或memapsin 1的催化活性可以在体外分离的天然细胞中找到,或者可以在细胞中被共表达或表达。可使用标准的体外或体内测定法、例如本领域众所周知的或如本文另外所述的那些测定法来测定本发明的化合物的抑制作用。
例如,可以通过测定与相同化合物抑制memapsin 1和/或组织蛋白酶D切割底物肽的β-分泌酶位点的程度相比memapsin 2水解底物肽的程度来测定选择性。可用于测定memapsin 2活性的示例性底物肽包括APP及其衍生物,例如FS-2(Bachem Americas,托兰斯,CA)。可用于测定memapsin 1和组织蛋白酶D的活性的示例性底物肽包括例如包括序列ELDLAVEFWHDR在内的肽。这些数据可以例如表示为Ki、表观Ki、Vi/Vo或抑制百分率,并且可以描述相对于memapsin 1或组织蛋白酶D的催化活性而言化合物对memapsin 2催化活性的抑制作用。例如,如果本发明的抑制剂化合物与memapsin 1或组织蛋白酶D之间的反应的Ki为1000并且本发明的抑制剂化合物与memapsin 2之间的反应的Ki为100,则抑制剂化合物对memapsin 2的β-分泌酶活性的抑制作用是对memapsin 1的抑制作用的10倍。
对于表现出在memapsin 2的存在下导致肽的β-分泌酶位点水解可被检测地降低(或者另外地,对memapsin 2的作用的选择性)的能力的化合物,可以在细胞模型或动物模型中测定它们引起β-淀粉状蛋白(Aβ)的量或生成可被检测地降低的能力。例如,已经测定了memapsin 2的电子等排抑制剂减少所培养细胞中Aβ生成的能力(共同悬而未决的美国申请号20040121947和国际申请号PCT/USO2/34324(公开号WO 03/039454))。简言之,可以将抑制剂加入到用编码人APP瑞典型突变体(或者伦敦型(London)突变或双重突变体)的核苷酸构建物以及如果需要的话用编码人memapsin 2的核苷酸构建物稳定转染的细胞(例如人胚肾(HEK293)细胞、HeLa细胞、中国仓鼠卵巢细胞或成神经细胞瘤系M17细胞)的培养物中。通过对Aβ进行免疫沉淀、然后进行SDS-凝胶电泳,对在有和无抑制剂时所生成的Aβ的量进行检测和定量。
除了细胞培养外,动物模型也可以用于测定memapsin 2的抑制剂减少Aβ生成的能力。例如,可以用抑制剂对表达人淀粉样前体蛋白的瑞典型突变的动物(例如tg2576小鼠)(Hsiao,K.等人,Science 274,99-102(1996)进行腹膜内注射。然后,可以收集血浆并通过捕获ELISA(BioSourceInternational,Camarillo,CA)来测定Aβ水平。
可以使用与抑制剂结合的荧光标记物并通过共聚焦显微镜显像来确定抑制剂在动物模型的器官中或在细胞腔隙内的存在(共同悬而未决的美国申请号20040121947和国际申请号PCT/USO2/34324(公开号WO03/039454))。
由哺乳动物获得的样品可以是液体样品、例如血浆或血清样品,或者可以是组织样品、例如脑活组织检查样品。可以使用标准技术(例如蛋白质印迹法和ELISA测定法)来测定β-淀粉状蛋白的量或β-淀粉状蛋白生成的减少。
在以下实施例部分中给出了鉴别memapsin 2-β-分泌酶抑制剂的测定法的另外的实例。测定memapsin 2、memapsin 1和组织蛋白酶D的活性以及降低这些酶活性的物质的活性的其它方法是本领域已知的。适宜测定方法的选择完全在本领域技术人员的能力范围之内。
IV.药物组合物 另一方面,本发明提供了包含本发明的β-分泌酶抑制剂化合物或者β-分泌酶抑制剂化合物与可药用载体的组合的药物组合物。该药物组合物包括本文公开的抑制剂的旋光异构体、非对映异构体或可药用盐。例如,在一些实施方案中,该药物组合物包括本发明的化合物和作为可药用盐的枸橼酸盐。该药物组合物中所包括的β-分泌酶抑制剂可以如上所述与载体部分共价连接。或者,该药物组合物中所包括的β-分泌酶抑制剂不与载体部分共价连接。
如本文所用的“适于药用的载体”指药物赋形剂,例如适于肠内或胃肠道外应用并且不会与本发明的化合物(extract)进行有害反应的可药用、生理上可接受的有机或无机载体物质。适宜的可药用载体包括水、盐溶液(例如林格溶液)、醇、油、明胶以及碳水化合物如乳糖、直链淀粉或淀粉、脂肪酸酯、羟甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷。可以将这些制剂灭菌,并且如果需要的话可以与不会与本发明的化合物进行有害反应的辅助物质如润滑剂、防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、影响渗透压的盐、缓冲剂、着色剂和/或芳香物质等混合。
本发明的化合物可以单独施用或者可以共同施用于患者。共同施用意欲包括单独或组合(一种以上化合物)来同时或依次施用化合物。因此,需要时,制剂还可以与其它活性物质(例如减少代谢性降解的物质)进行组合。
A.制剂 本发明的β-分泌酶抑制剂可以以多种口服、胃肠道外和局部剂型来制备和施用。因此,本发明的化合物可以通过注射(例如静脉内、肌内、皮内、皮下、十二指肠内或腹膜内注射)来施用。此外,本文所述的化合物还可以通过吸入(如鼻内)来施用。此外,本发明的化合物还可以透皮施用。还可以预想,多种施用途径(例如肌内、口服、透皮)可以用于施用本发明的化合物。因此,本发明还提供了包含可药用的载体或赋形剂以及一种或多种本发明的化合物的药物组合物。
为了由本发明的化合物制备药物组合物,可药用载体可以是固体或液体。固体形式的制剂包括粉末、片剂、丸剂、胶囊剂、扁囊剂、栓剂和可分散的颗粒剂。固体载体可以是还可以用作稀释剂、矫味剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或成囊材料的一种或多种物质。
在粉末中,载体是与细分的活性组分混合的细分的固体。在片剂中,将活性组分以适宜的比例与具有必需的粘合性质的载体混合并压缩成所需的形状和大小。
粉末和片剂优选含有5%至70%的活性化合物。适宜的载体是碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、蔗糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。术语“制剂”意欲包括活性化合物与作为载体的成囊材料的制剂,该载体可提供其中具有或不具有其它载体的活性组分被载体包围的胶囊,从而载体与其相联合。类似地,包括扁囊剂和锭剂。片剂、粉末、胶囊剂、丸剂、扁囊剂和锭剂可以用作适于口服施用的固体剂型。
为了制备栓剂,首先将低熔点蜡、例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物熔化,将活性组分均匀分散在其中,例如通过搅拌。然后将熔化的均匀混合物倒入大小适宜的模具中,使其冷却,由此而固化。
液体形式的制剂包括溶液剂、混悬剂和乳剂,例如水或水/丙二醇溶液剂。对于胃肠道外注射,可以将液体制剂配制成在水性聚乙二醇溶液中的溶液剂。
当需要或期望胃肠道外应用时,本发明化合物的特别适宜的混合物是可注射的无菌溶液、优选油性或水性溶液,以及混悬液、乳剂或植入剂,包括栓剂。特别地,胃肠道外施用的载体包括葡萄糖水溶液、盐水、纯水、乙醇、甘油、丙二醇、花生油、芝麻油、聚氧乙烯-嵌段聚合物等。安瓿剂是方便的单位剂量。还可以将本发明的化合物加入到脂质体中或者通过透皮泵或贴剂来施用。适用于本发明的药物混合物是本领域技术人员众所周知的,它们例如在药物科学(Pharmaceutical Sciences)(第17版,Mack出版公司,Easton,PA)和WO 96/05309中有描述,二者的教导引入本文作为参考。
适于口服使用的水溶液可以通过如下方法来制备将活性组分溶于水中,酌情加入适宜的着色剂、矫味剂、稳定剂和增稠剂。适于口服使用的水混悬液可以通过如下方法来制备将细分的活性组分分散在含有粘性材料如天然或合成的树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其它众所周知的助悬剂的水中。
还包括用于在临用前转变为口服施用的液体形式制剂的固体形式制剂。这类液体形式包括溶液、混悬液和乳剂。除了活性组分外,这类制剂还可以含有着色剂、矫味剂、稳定剂、缓冲剂、人造和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。
药物制剂优选是单位剂型。在这种形式中,制剂被再分为含有适宜量的活性组分的单位剂量。单位剂型可以是包装制剂,包装含有分离量的制剂,所述的包装制剂例如是被包装的片剂、胶囊剂和在小瓶或安瓿中的粉末。此外,单位剂型还可以是胶囊剂、片剂、扁囊剂或锭剂本身,或者它可以是被包装形式的适宜数目的任意这些剂型。
根据活性组分的具体应用和效能,单位剂量制剂中活性组分的量在0.1mg至10000mg、更通常为1.0mg至1000mg、最通常为10mg至500mg之间变化或调节。如果需要的话,组合物还可以含有其它可配伍的治疗剂。
一些化合物可能具有有限的水溶解度,因此,在组合物中可能需要表面活性剂或其它适宜的助溶剂。所述助溶剂包括聚山梨酯20、60和80;普流罗尼克F-68、F-84和P-103;环糊精;聚氧乙烯(35)蓖麻油;或本领域技术人员已知的其它物质。这类助溶剂通常以约0.01%至约2%重量的水平采用。
可能需要粘性高于单纯水溶液的粘性以减小分散制剂的变异性、减小混悬剂或乳剂制剂的组分的物理分离性和/或另外改善制剂。这类粘性构建剂(building agents)例如包括聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、硫酸软骨素及其盐、透明质酸及其盐、上述物质的组合以及本领域技术人员已知的其它物质。这些物质通常以约0.01%至约2%重量的水平采用。任意以上佐剂的可接受的量易于由本领域技术人员来确定。
本发明的组合物还可以包括提供缓慢释放和/或安慰的组分。这类组分包括高分子量的阴离子拟粘液(mucomimetic)聚合物、胶凝多糖和细分的药物载体物质。这些组分在美国专利4,911,920、5,403,841、5,212,162和4,861,760中有更详细的讨论。这些专利的全部内容整体引入本文作为所有目的的参考。
B.有效剂量 由本发明提供的药物组合物包括活性成分以治疗有效量、即以有效地获得其预期目的(以上定义)的量而被含在其中的组合物。对特定应用有效的实际量将尤其取决于所治疗的病症。例如,当在治疗阿尔茨海默病的方法中施用时,这类组合物将含有有效地获得所需结果(例如降低β-分泌酶活性或减少β-淀粉状蛋白生成)的量的活性成分。本发明化合物的治疗有效量的确定完全在本领域技术人员的能力范围之内,尤其可考虑本文的详细公开内容来确定。
施用于哺乳动物的剂量和频率(单或多剂量)可以根据多种因素而改变,所述因素包括导致memapsin 2活性增加或β-淀粉状蛋白积聚增加的疾病、哺乳动物是否患有其它疾病以及其施用途径;接受者的尺寸、年龄、性别、健康、体重、体重指数和饮食;所治疗疾病(例如阿尔茨海默病)的症状的性质和程度、共同治疗的种类、所治疗疾病的并发症或其它与健康有关的问题。其它治疗方案或物质可以与申请人的发明的方法和化合物联合使用。确定剂量(例如频率和持续时间)的调节和控制完全在本领域技术人员的能力范围之内。
对于本文所述的任意化合物而言,治疗有效量可以最初由细胞培养测定法来确定。目标浓度将是能够降低memapsin 2催化活性的活性化合物的那些浓度,如采用本文所述或本领域已知的方法所测定的。
如本领域众所周知的,用于人的治疗有效量还可以由动物模型来确定。例如,可以配制用于人的剂量以获得已经发现在动物中有效的浓度。用于人的剂量可以如上所述通过监测memapsin 2抑制和向上或向下调节剂量来进行调节。根据上述方法和如本领域众所周知的其它方法来调节剂量以在人中获得最大效能完全在普通技术人员的能力范围之内。
剂量可以根据患者的需要和所采用的化合物而改变。在本发明的上下文中,施用于患者的剂量应当足以随时间在患者中产生有益的治疗响应。剂量的大小还将由任意不良副作用的存在、性质和程度来确定。对特定情况确定恰当剂量在医师的技术范围之内。通常,用小于化合物最佳剂量的较小剂量开始治疗。此后,以较小的量增加剂量直到在这些情况下获得最佳作用。在本发明的一个实施方案中,剂量范围为0.001%至10%w/v。在另一个实施方案中,剂量范围为0.1%至5%w/v。
给药剂量和间隔可以单独进行调节,以提供对所治疗的特定临床适应症有效的所施用化合物的水平。这将提供与个体疾病状况的严重性相称的治疗方案。
利用本文提供的教导,可以设计不会引起显著毒性并且还完全有效地治疗特定患者所显示的临床症状的有效的预防性或治疗性治疗方案。该设计应当包括通过考虑诸如化合物的效能、相对生物利用度、患者体重、不良副作用的存在和严重性、优选的施用方式和所选物质的毒性性质来仔细选择活性化合物。
C.毒性 特定化合物的毒性和疗效之间的比值是其治疗指数,该比值可以表示为LD50(导致50%群体死亡的化合物的量)和ED50(对50%群体有效的化合物的量)之间的比值。优选显示出高治疗指数的化合物。由细胞培养测定法和/或动物研究所得到的治疗指数数据可以用于配制用于人的剂量范围。这些化合物的剂量优选在包括ED50并且毒性很小或无毒的血浆浓度范围内。剂量可以在该范围内改变,这取决于所采用的剂型和所利用的施用途径。例如参见Fingl等人,治疗的药理学基础(THE PHARMACOLOGICALBASIS OF THERAPEUTICS),第1章,第1页,1975。可以由个体医师考虑患者的病症和其中使用化合物的特定方法来选择确切的制剂、施用途径和剂量。
v.降低memapsin 2催化活性的方法 在本发明的另一方面,本发明的β-分泌酶抑制剂化合物可以用于分别相对于在没有β-分泌酶抑制剂的存在下memapsin 2催化活性、β-分泌酶位点水解和β-淀粉状蛋白积聚的量而言降低memapsin 2催化活性、减少memapsin 2底物的β-分泌酶位点水解和/或减少β-淀粉状蛋白积聚的方法。
在示例性实施方案中,提供了降低memapsin 2催化活性的方法。该方法包括使memapsin 2蛋白质与有效量的本发明的β-分泌酶抑制剂化合物接触。memapsin 2可以在任意适宜的环境中接触。相对于在没有β-分泌酶抑制剂存在下的活性的量而言,memapsin 2催化活性被降低。
在另一个示例性实施方案中,提供了使用本发明的抑制剂来选择性降低memapsin 2催化活性的方法。选择性降低memapsin 2的活性表示memapsin 2不仅相对于在没有抑制剂时的活性而言被降低,而且与由于对抗其它肽水解酶的抑制剂作用所引起的活性降低相比,memapsin 2以较大程度被降低。例如,如上所述,酶活性的降低可以以抑制常数(Ki)表示。当抑制剂选择性降低memapsin 2活性时,本发明的抑制剂化合物与memapsin 2之间反应的Ki小于本发明的抑制剂化合物和其它肽水解酶之间反应的Ki。
在示例性实施方案中,本发明的抑制剂化合物与memapsin 2之间反应的Ki比本发明的抑制剂化合物与其它肽水解酶之间反应的Ki至少低2倍。在另一个示例性实施方案中,本发明的抑制剂化合物与memapsin 2之间反应的Ki比本发明的抑制剂化合物与其它肽水解酶之间反应的Ki至少低10倍。在另一个示例性实施方案中,本发明的抑制剂化合物与memapsin 2之间反应的Ki比本发明的抑制剂化合物与其它肽水解酶之间反应的Ki至少低100倍。在另一个示例性实施方案中,本发明的抑制剂化合物与memapsin 2之间反应的Ki比本发明的抑制剂化合物与其它肽水解酶之间反应的Ki至少低1000倍。在另一个示例性实施方案中,本发明的抑制剂化合物与memapsin2之间反应的Ki比本发明的抑制剂化合物与其它肽水解酶之间反应的Ki至少低10000倍。
在一些相关的实施方案中,与memapsin 1相比,抑制剂选择性地降低memapsin 2的活性。在其它相关的实施方案中,与组织蛋白酶D相比,抑制剂选择性地降低memapsin 2的活性。
因此,本发明提供了选择性降低memapsin 2活性的方法。该方法包括使memapsin 2蛋白质与有效量的本发明的β-分泌酶抑制剂化合物接触。在相关的实施方案中,该方法包括在memapsin 1的存在下使memapsin 2与β-分泌酶抑制剂接触。在供选的相关实施方案中,该方法包括在组织蛋白酶D的存在下使memapsin 2与有效量的β-分泌酶抑制剂接触。在另一个相关的实施方案中,该方法包括在组织蛋白酶D和memapsin 1的存在下使memapsin 2与有效量的β-分泌酶抑制剂接触。
在一些实施方案中,可以通过测定β-分泌酶底物的β-分泌酶位点的水解来测定β-分泌酶的活性。因此,本发明还涉及通过使memapsin 2蛋白质与本发明的β-分泌酶抑制剂化合物接触来减少β-分泌酶底物的β-分泌酶位点水解的方法。在一些实施方案中,相对于在没有抑制剂时水解的量而言,β-分泌酶位点的水解被减少。在其它实施方案中,与由memapsin 1和/或组织蛋白酶D引起的水解相比,水解被选择性地减少。因此,提供了相对于memapsin 1和/或组织蛋白酶D而言选择性减少样品中β-淀粉样前体蛋白的β-分泌酶位点水解的方法。该方法包括使memapsin 2蛋白质与本发明的β-分泌酶抑制剂化合物接触。
在另一个实施方案中,本发明涉及通过使memapsin 2与有效量的本发明的β-分泌酶抑制剂化合物接触来减少样品中β-淀粉状蛋白的量的方法。相对于在没有抑制剂时样品中β-淀粉状蛋白的量而言,样品中β-淀粉状蛋白的量被减少。因此,β-淀粉状蛋白的积聚由此被减少。
memapsin 2可以在任意适宜的环境或任意适宜的样品中被接触。例如,memapsin 2可以在体外、在细胞内或在哺乳动物内被接触。一般地,选择体外溶液以便使组分基本上不干扰memapsin 2的酶活性(例如水溶液)。在一些实施方案中,体外溶液包括生物样品,例如哺乳动物样品。示例性哺乳动物样品包括血浆或血清样品以及组织样品、例如脑活组织检查样品。可以选择任意适当的细胞或细胞样品,其中使memapsin 2与抑制剂接触。细胞可以含有如前所述的内源性memapsin 2或重组memapsin 2 (共同悬而未决的美国申请号20040121947和国际申请号PCT/USO2/34324 (公开号WO 03/039454))。示例性细胞包括人胚肾(HEK293)细胞、HeLa细胞、中国仓鼠卵巢细胞或成神经细胞瘤系M17细胞Hela细胞、293细胞。在示例性实施方案中,本发明的化合物施用于哺乳动物(例如小鼠、兔或人)以抑制β-淀粉样前体蛋白的β-分泌酶位点的水解。
VI.治疗阿尔茨海默病的方法 在本发明的另一方面,本发明的β-分泌酶抑制剂化合物可以用于治疗与β-分泌酶活性、β-淀粉样前体蛋白的β-分泌酶位点水解和/或β-淀粉状蛋白积聚有关的疾病或病症。一般地,治疗哺乳动物的疾病或病症。在示例性实施方案中,该疾病是阿尔茨海默病。
因此,在一些实施方案中,本发明提供了在哺乳动物中治疗阿尔茨海默病的方法,该方法包括将有效量的本发明的β-分泌酶抑制剂施用于哺乳动物的步骤。用抑制剂治疗的哺乳动物可以是人灵长类、非人灵长类和/或非人哺乳动物(例如啮齿类、犬类)。在一个实施方案中,给哺乳动物施用降低β-分泌酶活性(抑制memapsin 1和memapsin 2催化活性)的本发明的化合物。在另一个实施方案中,给哺乳动物施用选择性降低memapsin 2催化活性的化合物。在相关的实施方案中,化合物对降低memapsin 1的催化活性具有最小影响或没有影响。因此,本发明还提供了在需要其的受治疗者中治疗阿尔茨海默病的方法,该方法包括给受治疗者施用β-分泌酶抑制剂化合物。在示例性实施方案中,β-分泌酶抑制剂化合物是药物制剂的一部分,如上文所述。
本发明的抑制剂化合物可以用于治疗与β-分泌酶活性有关的疾病或病症,这些抑制剂化合物可以阻止、逆转或减弱疾病或病症、特别是阿尔茨海默病的发展。除了降低memapsin 2催化活性的化合物外,选择性降低memapsin 2催化活性的化合物也可用于治疗与memapsin 2催化活性有关的疾病或病症或者生物学过程,而不是用于治疗与memapsin 2催化活性和其它肽水解酶(例如组织蛋白酶D或memapsin 1)均有关的疾病或病症或者生物学过程。
例如,memapsin 1和memapsin 2均在β-分泌酶位点切割淀粉样前体蛋白(APP)以形成β-淀粉状蛋白(本文还称为Aβ或β-淀粉状蛋白)。因此,memapsin 1和memapsin 2均具有β-分泌酶活性(Hussain,I.等人,J.Biol.Chem.27623322-23328(2001))。但是,memapsin 1的β-分泌酶活性显著低于memapsin 2的β-分泌酶活性(Hussain,I.等人,J.Biol. Chem.27623322-23328(2001))。memapsin 2位于脑和胰以及其它组织中(Lin,X.等人,Proc.Natl.Acad Sci.USA 971456-1460(2000)),而memapsin 1优先位于胎盘中(Lin,X.等人,Proc.Natl.Acad Sci. USA971456-1460(2000))。阿尔茨海默病与由β-分泌酶(本文还称为memapsin 2、ASP2和BACE)切割APP所引起的Aβ在脑内积聚有关。因此,采用相对于memapsin 1催化活性而言选择性抑制memapsin 2催化活性的化合物的方法在治疗与memapsin 2相关性疾病、例如阿尔茨海默病中可以是重要的。选择性抑制memapsin 2催化活性使本发明的化合物成为适用于治疗阿尔茨海默病的候选药物。
A.向CNS施用β-分泌酶抑制剂的方法 可以通过侵入性或非侵入性方法将本发明的抑制剂化合物施用于CNS。非侵入性施用方法包括不需要使用机械或物理方法就可突破血脑屏障完整性的那些方法。一般地,非侵入性方法包括使用免疫脂质体、血脑屏障分裂(blood-brain barrier disruption,BBBD)或嗅觉通道。
免疫脂质体是具有与脂质体表面连接的抗体或抗体片段的脂质体,所述抗体或抗体片段与脑毛细血管内皮细胞上表达的受体或转运蛋白结合。示例性免疫脂质体组合了聚合物(例如聚乙二醇化)技术和嵌合肽技术。例如,可以将β-分泌酶抑制剂包裹到含有PEG2000衍生物的单层脂囊泡中,所述PEG2000衍生物在一个末端含有反应活性基团,用于与抗体或其片段的互补反应活性基团连接。互补反应活性基团是本领域众所周知的,例如包括胺以及活化的羧酸、硫羟和马来酰亚胺等(Ambikanandan等人,J.PharmPharmaceut Sci 6(2)252-273(2003);Huwyler等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,9314164-14169(1996);和Huwyler等人,J Pharmcol Exp Ther.2821541-1546(1997);以及美国专利号6,372,250)。
血脑屏障分裂是包含血脑屏障的内皮细胞之间的紧密连接的完整性暂时丧失。通常,化合物通过全身或颈动脉间注射与暂时性血脑屏障分裂(BBBD)的联合来施用。可用于引起BBBD的示例性物质包括溶剂,例如二甲基亚砜(DMSO);乙醇(EtOH);金属(例如铝);X-辐射;病理学条件(例如高血压、高碳酸血、低氧或局部缺血)的诱导;抗肿瘤剂(例如VP-16、顺铂、羟基脲、氟脲嘧啶和依托泊苷);或同时全身施用惊厥药戊四氮(metrazol)和抗惊厥药戊巴比妥(Ambikanandan等人,J Pharm Pharmaceut Sci 6(2)252-273(2003));作用于血管的白细胞三烯(Black等人,J Neurosurg,81(5)745-751(1994));颈动脉内输注缓激肽、组胺或合成的缓激肽类似物RMP-7(Miller等人,Science 2971116-1118(2002);Matsukado等人,Neurosurgery39125-133(1996);Abbott等人,Mol Med Today 2106-113(1996);Emerich等人,Clin Pharmacokinet 40105-123(2001));透明质酸酶(美国专利申请号20030215432,Kreil等人,Protein Sci.,4(9)1666-1669(1995));和颈动脉间注射惰性高张溶液、例如甘露醇或阿拉伯糖(Neuwelt,E.A.等人,NeuweltEA(编者),Implications of the Blood Brain Barrier and its ManipulationClinical Aspects.第2卷,Plenum出版社,纽约,(1989);Neuwelt等人,J NuclMed,351831-1841(1994);Neuwelt等人,Pediatr Neurosurg 2116-22(1994);Kroll等人,Neurosurg,421083-1099(1998);Rapoport,Cell Mol Neurobiol20217-230(2000);和Doran等人,Neurosurg 36965-970(1995))。
嗅觉通道施用是将化合物经鼻内传递到鼻道上部三分之一的嗅神经。经鼻内传递后,化合物向后沿感觉嗅神经元传递,在脑脊髓液(CSF)和嗅球内产生显著的浓度(Thorne等人,Brain Res,692(1-2)278-282(1995);Thorne等人,Clin Pharmacokinet 40907-946(2001);Illum,Drug DiscovToday 71184-1189(2002);美国专利6,180,603;美国专利6,313,093;和美国专利申请号20030215398)。
侵入性施用方法是包括通常通过机械或物理方法使血脑屏障物理性突破以将化合物传入CSF中或直接传入脑实质中的那些方法。侵入性施用方法通常可以包括将化合物注射或手术植入。
在注射方法中,使用针头来物理性突破BBB并将化合物直接传递到CSF中。示例性注射方法包括心室内、鞘内或腰髓内施用,并且还可以包括通过身体外部的贮库来输注化合物(Krewson等人,Brain Res 680196-206(1995);Harbaugh等人,Neurosurg.23(6)693-698(1988);Huang等人,J Neurooncol 459-17(1999);Bobo等人,Proc Natl Acad Sci USA 912076-2082(1994);Neuwalt等人,Neurosurg.38(4)1129-1145(1996))。
在手术植入法中,将化合物直接置于脑实质中。示例性手术植入法可以包括将化合物加入到直接置于脑间质中的聚酐糯米纸囊剂中(Brem等人,Sci Med 3(4)1-11(1996);Brem等人,J Control Release 7463-67(2001))。
VII.结晶复合物 另一方面,本发明提供了含有memapsin 2蛋白质和本发明的β-分泌酶抑制剂的结晶复合物。可用于与电子等排化合物形成共结晶的memapsin 2蛋白质(例如memapsin 2蛋白片段、跨膜蛋白等)先前已经有详细讨论(共同悬而未决的美国申请号20040121947和国际申请号PCT/USO2/34324(公开号WO 03/039454))。这些memapsin 2蛋白质同样可用于与本发明的β-分泌酶抑制剂形成结晶复合物。
可以采用共同悬而未决的美国申请号20040121947和国际申请号PCT/USO2/34324(公开号WO 03/039454)中所述的技术形成结晶复合物。简言之,产生编码蛋白质的核苷酸构建物,将其在宿主细胞、例如哺乳动物宿主细胞(例如Hela细胞、293细胞)或细菌宿主细胞(例如大肠杆菌(E.coli)中表达,进行纯化,与本发明的化合物结晶。结晶蛋白质的衍射分辨率极限可以例如通过x-射线衍射或中子衍射技术来测定。
在示例性实施方案中,结晶蛋白质可以具有的x-射线衍射分辨率极限不高于约4.0Δ。结晶蛋白质还可以具有的x-射线衍射分辨率极限不高于约4.0Δ、约3.5Δ、约3.0Δ、约2.5Δ、约2.0Δ、约1.5Δ、约1.0Δ或约0.5Δ。在一些实施方案中,结晶蛋白质还可以具有的x-射线衍射分辨率极限不高于约2Δ。结晶蛋白质的衍射分辨率极限可以采用标准x-射线衍射技术来测定。
在其它示例性实施方案中,结晶复合物的β-分泌酶抑制剂在S3′结合袋、S4′结合袋和/或S4结合袋处与所述蛋白质相连。S3′、S4′和S4结合袋在共同悬而未决的美国申请号20040121947和国际申请号PCT/USO2/34324(公开号WO 03/039454)中有详细讨论。
本文已经采用的术语和表述可用作描述而非加以限制,并且并非意欲使用这些术语和表述来排除所示和所述特征的同等物或其部分,可以知道,在所要求的本发明的范围内各种变通是可能的。此外,本发明的任意实施方案的任意一个或多个特征可以与本发明的任意其它实施方案的任意一个或多个其它特征组合而不背离本发明的范围。例如,本发明的β-分泌酶抑制剂的特征同样可应用于治疗疾病状态的方法和/或本文所述的药物组合物。本文引用的所有出版物、专利和专利申请整体引入本文作为所有目的的参考。
VIII.实施例 以下实施例仅用于说明性目的而非意欲限制本发明的范围。
实施例1所选的B-分泌酶抑制剂化合物的制备 实施例1.13-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯的合成 于-78℃将在THF中的甲基噻唑(1.0g,10.1mmol)用n-BuLi(1.6M,7.56mL)处理30分钟,逐滴加入DMF(1.4mL,18.2mmol)。将所得反应混合物温热至室温。原料消失后(通过TLC),将反应混合物再次冷却至0℃,加入LAH(0.69g,18.5mmol)。将该混合物温热至室温,搅拌1小时,将反应物用NH4Cl水溶液淬灭,用EtOAc稀释。分离有机溶液,用EtOAc萃取2次,用Na2SO4干燥,浓缩。将残余物用快速色谱法纯化,得到浅黄色油状的相应的醇。
1H-NMR(300MHz,CDCl3),δ6.89(s,1H);4.95(s,2H);2.48(s,3H). 于0℃在二氯甲烷中将甲基噻唑甲醇(0.57g,4.4mmol)用甲磺酰氯(0.42mL,5.4mmol)和三乙基乙胺进行处理。将所得混合物搅拌20分钟,然后用NH4Cl水溶液淬灭。从有机层中蒸发溶剂,将残余物进行快速色谱法,得到油状的相应的甲磺酸酯。然后将甲磺酸酯(0.25g,1.2mmol)溶于DMF中,加入叠氮化钠(0.62g,9.6mmol)。将该混合物加热回流2小时,然后冷却,用NH4Cl水溶液洗涤。从有机层中蒸发溶剂,得到相应的叠氮化物。将叠氮化物(0.14g,0.91mmol)溶于乙酸乙酯中,加入Pd(OH)2(0.07g),在氢气氛围下将该混悬液搅拌5小时。将该混悬液通过Celite过滤。蒸发溶剂,将残余物进行快速色谱法,得到黄色油状的相应的甲基噻唑甲胺。
1H-NMR(300MHz,CDCl3),δ6.74(m,1H);4.09(m,2H);2.37(s,3H). 将间苯二酸一甲酯(0.054g,0.30mmol)用EDCI(0.064g,0.33mmol)、HOBt(0.046g,0.34mmol)、DIPEA(0.07mL,0.4mmol)和甲基噻唑甲胺(0.046g,0.36mmol)处理。在氩气下于室温将所得混合物搅拌15小时,然后用水淬灭。分层,将水层用CHCl3(2×20mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥,在减压下浓缩。将所得油状物溶于THF(5mL)中,向其中加入3mL1.0N LiOH(水溶液)。将所得混合物迅速搅拌1.5小时。通过旋转蒸发除去挥发物,将所得水溶液用CHCl3(×3)萃取。然后用1N HCl(水溶液)将该水溶液酸化至pH1,用CHCl3(×3)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥,在减压下浓缩,得到相应的间苯二酸。将该产物(0.042g,0.11mmol)溶于DMF中,用NaH(0.015g,0.62mmol)和MeI(0.04mL,0.64mmol)处理,搅拌过夜。通过旋转蒸发除去挥发物,将所得溶液用1N LiOH稀释,用CHCl3(×3)萃取。然后用1N HCl(水溶液)将该水溶液酸化至pH1,用CHCl3(×3)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥,在减压下浓缩,得到N-甲基-N-(4-甲基-噻唑-2-基甲基)-间氨甲酰苯甲酸。
1H-NMR(300MHz,CDCl3),δ8.16(m,2H),7.70(m,1H),7.51(m,1H),6.91(s,1H),5.05(s,1.5H),4.75(s,0.5H),3.2-3.0(m,3H),2.46(s,3H). 向搅拌的(1-环氧乙烷基-2-苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.5g,1.9mmol)在iPrOH中的溶液中加入3-甲氧基苄胺(0.28mL,2.1mmol)。将该混合物加热回流过夜,然后冷却,在减压下除去挥发物。将残余物进行快速色谱法,得到固态的相应的氨基醇。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.35-7.17(m,6H),6.93-6.78(m,3H),4.65(d,1H),3.90-3.7(m,5H),3.51(m,1H),3.15-2.65(m,6H),1.34(s,9H). 向搅拌的3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.032g,0.079mmol)在二氯甲烷中的溶液中加入TFA。将所得混合物搅拌1小时,然后在减压下除去挥发物。将该胺溶于二氯甲烷中,用DIPEA处理,将其加入到N-甲基-N-(4-甲基-噻唑-2-基甲基)-间氨甲酰苯甲酸(0.021g,0.071mmol)、EDCI(0.015g,0.078mmol)和HOBt(0.011g,0.081mmol)在二氯甲烷中的溶液中。于室温将所得混合物搅拌过夜,然后用水洗涤,用Na2SO4干燥,在减压下除去挥发物。将残余物进行快速色谱法,得到目标分子。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.8-7.M(m,11H),6.94-6.76(m,4H),4.95(s,1.5H),4.63(s,0.5H),4.38(m,1H),3.90-3.64(m,5H),3.18-2.74(m,9H),2.44(s,3H). 实施例1.2N1-(3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-(1-苯乙基)间苯二甲酰胺的合成 通过在2-丙醇中、在回流条件下(1-环氧乙烷基-2-苯乙基)-氨基甲酸叔丁酯与3-甲氧基苄胺的开环反应一步得到3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯。通过用在CH2Cl2或甲醇HCl中的TFA进行处理,将Boc基团脱保护,得到3-氨基-1-(3-甲氧基苄氨基)-4-苯基丁-2-醇,在N-乙基-N’-(二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)、1-羟基苯并三唑水合物和二异丙基乙胺的存在下、在DMF和CH2Cl2的混合物中将其与3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-(1-苯乙基氨甲酰基)苯甲酸直接进行肽偶联反应,得到N1-(3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-(1-苯乙基)间苯二甲酰胺。
通过在二氯甲烷中用甲磺酰氯和吡啶处理而将5-氨基间苯二酸二甲酯甲磺酰化。然后在NaH/DMF条件下用甲基碘进行N-烷基化,得到5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二酸二甲酯。将5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二酸二甲酯进行选择性水解,然后与α-甲基苄胺进行EDC/HOBT/DIPEA介导的偶联,得到3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-(1-苯乙基氨甲酰基)苯甲酸甲酯。在THF/MeOH的存在下使用1N NaOH水溶液进行酯水解,得到白色固态的纯3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-(1-苯乙基氨甲酰基)苯甲酸。
将搅拌的(1-环氧乙烷基-2-苯乙基)-氨基甲酸叔丁酯(131.6mg,0.5mmol)、3-甲氧基-苄胺(0.25mL,2mmol)在3mL 2-丙醇中的溶液加热回流12小时,得到4-(3-甲氧基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯。蒸发溶剂,将粗产物通过硅胶快速柱色谱法(在CHCl3中的5-10%MeOH)纯化,得到无色固态的4(154mg,产率77%)。
于室温向搅拌的5-氨基间苯二酸二甲酯(2.09g,10mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中加入吡啶(2.43mL,30mmol)。于0℃加入甲磺酰氯(0.86mL,11mmol),于室温将所得混合物搅拌过夜。然后将该反应混合物在减压下浓缩,加入乙酸乙酯(50mL)。将所得白色沉淀物过滤,用己烷洗涤,得到白色固态的磺酰胺(2.715g,产率95%)。
于室温向搅拌的NaH(0.24g,10mmol,60%,在油混悬液中)在10mLDMF中的混悬液中加入以上磺酰胺(1.435g,5mmol),然后加入碘代甲烷(0.62mL,10mmol)。5小时后,将反应物用H2O(25mL)淬灭。然后将反应混合物用EtOAc萃取,用H2O进一步洗涤以除去过量的DMF,通过无水Na2SO4干燥,浓缩。将由此得到的粗产物用己烷洗涤,得到白色固态的5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二酸二甲酯(1.37g,产率91%)。
将5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二酸二甲酯(0.842g,2.8mmol)溶于THF∶MeOH(1∶1)(8mL)和H2O(3mL)中。加入固态NaOH(0.112g,2.8mmol),于室温搅拌18小时。将反应混合物在减压下浓缩。将饱和NaHCO3(10mL)溶液加入到该反应混合物中,用甲苯萃取(以除去<10%未反应的原料)。将水溶液用稀HCl(10%)酸化,用EtOAc萃取,通过无水Na2SO4干燥。蒸发溶剂,在减压下干燥,得到白色固态的3-(甲氧羰基)-5-(N-甲基甲烷-5-基磺酰氨基)苯甲酸(75%,0.598g),其未经纯化用于进一步反应。
于室温向搅拌的3-(甲氧羰基)-5-(N-甲基甲烷-5-基磺酰氨基)苯甲酸(0.215g,0.75mmol)、EDC(0.172g,0.9mmol)、HOBt(0.122g,0.9mmol0在DMF/CH2Cl2(1∶5mL)中的溶液中加入α-甲基苄胺(0.1mL,0.75mmol),然后加入二异丙基乙胺(0.5mL)。于室温将反应混合物搅拌16小时。然后加入水,将该反应混合物用EtOAc萃取。将有机层通过Na2SO4干燥,浓缩。将由此得到的粗产物通过硅胶快速柱色谱法(在CHCl3中的3%MeOH)纯化,得到相应的酰胺10(0.343g),将其溶于THF∶MeOH(1∶1)(6mL)和H2O(2mL)中。加入固态NaOH(80mg,2.0mmol),于室温搅拌6小时。将反应混合物在减压下浓缩。将饱和NaHCO3(10mL)溶液加入到该反应混合物中,用甲苯萃取(以除去有机杂质)。将水性反应混合物用稀HCl(10%)酸化,用EtOAc萃取,通过无水Na2SO4干燥。蒸发溶剂,在减压下干燥,得到白色固态的3-(N-甲基甲烷-5-基磺酰氨基)-5-((1-苯乙基)氨甲酰基)苯甲酸(0.198g,60%)。
于室温向3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(40mg,0.1mmol)在CH2Cl2(1mL)中的溶液中加入TFA(0.5mL)。于室温将反应混合物搅拌30分钟。之后,将混合物在减压下浓缩,溶于CH2Cl2(1mL)中,与二异丙基乙胺(0.2mL)一起搅拌。将该混合物加入到搅拌的3-(N-甲基甲烷-5-基磺酰氨基)-5-((1-苯乙基)氨甲酰基)苯甲酸(37.6mg,0.1mmol)、EDC(24mg,0.125mmol)、HOBt(16.9mg,0.125mmol)在DMF/CH2Cl2(1∶2mL)中的溶液中。于室温将该反应混合物搅拌19小时。然后加入水,将该反应混合物用EtOAc萃取。将有机层通过Na2SO4干燥,浓缩。将由此得到的粗产物N1-(4-(3-甲氧基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲烷-5-基磺酰氨基)-N3-(1-苯乙基)间苯二甲酰胺通过硅胶快速柱色谱法(在CHCl3中的10%MeOH)纯化,得到白色固态的目标分子(22.3mg,34%)。
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.58(3H,d),2.72(3H,s),2.74-2.83(4H,m),3.22(3H,s),3.69-3.83(6H,m),4.29-4.33(1H,m),5.26(1H,q),6.78(1H,dd),6.85-6.86(2H,m),7.13-7.37(12H,m),7.76(1H,s),7.89(2H,s),8.11(1H,s). 实施例2所选的前体化合物的合成 以下合成的前体化合物可用于制备本文提供的本发明的化合物的方法。使用以上的示例性合成和实施例1中所提供的指导,本领域技术人员将立即知道,可以通过使用众所周知的技术修改以下合成来制备以下前体化合物,以获得多种抑制剂化合物。
实施例2.11-(吡啶-3-基)乙胺 于室温向3-乙酰吡啶(82.6mmol)在甲醇(200mL)中的溶液中一次性加入乙酸铵(1.03mol)。将混合物搅拌20分钟后,将氰基硼氢化钠(57.8mmol)加入到该混合物中。搅拌1天后,将6M盐酸加入到反应混合物中。将所得溶液用乙醚洗涤,然后用氢氧化钾将水相碱化至PH=10。将释放的胺用氯仿萃取,将合并的有机萃取液通过无水硫酸钠干燥。在减压下除去溶剂后,得到无色油状的粗胺,将其通过在减压下蒸馏而进一步纯化。
1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.552(d,1H),8.453(dd,1H),7.678(m,1H),7.206-7.261(m,1H),4.148(q,1H),1.378(d,3H). 以上方法还用于制备以下化合物 1-(3-甲氧基苯基)乙胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ7.274-7.219(m,1H),6.941-6.905(m,2H),6.796-6.757(m,1H),4.090(q,1H),3.811(s,3H),1.382(d,3H). 1-(3-氟苯基)乙胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ7.297-7.224(m,1H),7.105-7.032(m,2H),6.903-6.862(m,1H),4.100(q,1H),1.352(d,3H). 实施例2.2(3-甲基异唑-5-基)甲基氨基甲酸叔丁酯 将321mg(2.27mmol) 2-(3-甲基异唑-5-基)乙酸、0.5mL(2.32mmol)二苯基磷酰基叠氮化物(DPPA)和0.35mL(2.51mmol)三乙胺在30mL蒸馏叔丁醇中的溶液回流13.5小时。将该溶液浓缩,将粗残余物溶于EtOAc中。将有机层用1N HCl(3×10mL)和饱和NaHCO3溶液(3×10mL)洗涤。将有机层通过硫酸钠干燥,过滤,浓缩。通过快速硅胶色谱法(28%EtOAc/己烷)纯化,得到50mg(产率10%)淡黄色固态的被保护的胺。
实施例2.3(3-(甲氧基甲基)苯基)甲胺 使用在以下参考文献中找到的方法将1,3-亚苯基二甲醇转化为(3-(甲氧基甲基)苯基)甲醇Liu,Xuan;Zheng,Qi-Huang;Fei,Xiangshu;Wang,Ji-Quan;Ohannesian,David W.;Erickson,Leonard C.;Stone,K.Lee;Hutchins,Gary D.;Bioorg.Med.Chem.Lett.2003,13,641-644。按照标准反应、包括与DPPA形成叠氮化物和还原将(3-(甲氧基甲基)苯基)甲醇转化为目标分子。
实施例2.43-乙酰氨基苄基氨基甲酸叔丁酯 于0℃向搅拌的3-氨基苄基氨基甲酸叔丁酯(Hah,Jung-Mi;Martasek,Pavel;Roman,Linda J.;Silverman,Richard B.;J.Med.Chem.;2003,46,1661-1669)(287mg,1.29mmol)在CH2Cl2(10mL)中的溶液中加入Et3N(0.27mL,2.0mmol)和乙酰氯(0.10mL,1.4mmol),将所得溶液缓慢温热至室温。另外搅拌4小时后,将反应物用饱和NH4Cl水溶液淬灭。分层,将水层用CH2Cl2(2×20mL)萃取,将合并的有机层用水、盐水洗涤,用Na2SO4干燥,在减压下浓缩。将残余油状物通过柱色谱法(在己烷中的60%EtOAc)纯化,得到乙酰胺(123.1mg,36%)。
实施例2.53-(甲基氨基)苄基氨基甲酸叔丁酯 按照标准还原性胺化条件、使用甲醛和氰基硼氢化钠将3-氨基苄基氨基甲酸叔丁酯转化为目标分子。
实施例2.65-氟间苯二酸 向轻微回流的1.9g(15.3mmol)5-氟-间二甲苯在约13.5mL吡啶和约9.5mL水中的溶液中分数批加入13.8g(87.3mmol)KMnO4。将混合物回流约7小时后,加入亚硫酸钠以淬灭过量的KMnO4。将温热的混合物过滤,加入1N HCl至pH=3。将滤液用EtOAc洗涤,用NaCl饱和,用(80mL CHCl3∶10mL MeOH∶10mL H2O)的混合物的萃取剂萃取3-4次。将合并的萃取液通过硫酸钠干燥,过滤,浓缩,得到约400mg(产率14%)淡黄色固态的二酸。
实施例2.75-(苄氧基)烟酸甲酯 在Ar下于60℃将818mg(5.34mmol) 5-羟基烟酸、1.70g(12.3mmol)K2CO3和1.0mL(8.41mmol)溴化苄在25mL DMF中的混合物加热16小时。将该混合物通过棉布过滤,将残余物溶于CHCl3中。将有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤,通过Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过快速硅胶色谱法纯化,得到363mg(产率28%)橙色油状的苄基醚。
实施例2.8(5-(苄氧基)吡啶-3-基)甲醇 于0℃向搅拌的363mg(1.49mmol) 5-(苄氧基)烟酸甲酯在10mL THF中的溶液中加入141mg(3.71mmol)LiAlH4。移去冰浴,55分钟后,加入20.5mgLiAlH4。40分钟后,通过连续加入160μL H2O、160μL 15%NaOH水溶液和480μL盐水淬灭反应物。通过快速硅胶色谱法(2mL MeOH/100mLCHCl3)纯化,得到250mg(产率78%)醇(黄色油状物)。
实施例2.93-(叠氮基甲基)-5-(苄氧基)吡啶 向搅拌的250mg(1.17mmol)(5-(苄氧基)吡啶-3-基)甲醇在8mL甲苯中的溶液中加入310μL(1.44mmol)DPPA。将该混合物冷却至0℃,加入210μL(1.44mmol) 1,8-二氮杂二环[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)。移去冰浴,在温热至室温时继续搅拌。约20小时后,将溶液用EtOAc稀释,加入1N HCl至pH为7至8。将有机层用水(2×15mL)和盐水(15mL)洗涤,通过Na2SO4干燥。过滤并浓缩后,将粗产物通过快速硅胶色谱法(56-60%EtOAc/己烷)纯化,得到181mg(产率65%)无色油状的叠氮化物。
实施例2.10(5-(苄氧基)吡啶-3-基)甲胺 于0℃向搅拌的181mg 3-(叠氮基甲基)-5-(苄氧基)吡啶在6mL THF中的溶液中加入80.6mg(2.12mmol) LiAlH4。移去冰浴,在温热至室温时继续搅拌。30分钟后,通过连续加入160μL H2O、160μL 15% NaOH水溶液和480μL盐水淬灭反应物。将混合物通过Celite过滤,浓缩。粗产物未经进一步纯化用于下一反应。
实施例2.11(5-甲基吡啶-3-基)甲醇 于0℃向搅拌的233mg(1.70mmol)5-甲基烟酸(按照5-氟-间苯二酸的通用方法合成)在30mL THF中的溶液中加入181mg(4.76mmol) LiAlH4。25分钟后,通过连续加入180μL H2O、180μL 15%NaOH水溶液和540μL盐水淬灭反应物。将混合物通过Celite过滤,浓缩,得到87mg粗醇,其未经进一步纯化用于下一反应。
实施例2.12(5-甲基吡啶-3-基)甲胺 按照如上文对烟酸苄基醚衍生物所述的通用方法、由相应的醇合成了前体化合物。
实施例2.13(5-甲氧基吡啶-3-基)甲胺 按照如上文对烟酸苄基醚衍生物所述的通用方法、由羟基烟酸酯合成了前体化合物。
实施例2.144-氟-间苯二酸 按照对5-氟-间苯二酸所述的方法、由2-氟-5-甲基苯甲酸合成了前体化合物。
实施例2.154-甲基-间苯二酸 按照对5-氟-间苯二酸所述的方法、由2,5-二甲基苯甲酸合成了前体化合物。
实施例2.161-(4-甲基噻唑-2-基)乙基氨基甲酸叔丁酯 将BOC-丙氨酸-硫代酰胺(1.39g,6.81mmoles)、氯丙酮(0.65mL,8.18mmoles)和碳酸钙(1.0g,10.22mmoles)的混合物在乙醇(25mL)中回流4小时。将该反应物冷却至室温,用20mL饱和NaHCO3水溶液淬灭。在减压下蒸发乙醇,用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层通过Na2SO4干燥,浓缩。将残余物进行硅胶色谱法(20%乙酸乙酯/80%己烷),得到48%所需产物。
实施例2.174-((1H-苯并[d]咪唑-2-基)甲基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯 将1-(环氧乙烷-2-基)-2-苯乙基氨基甲酸叔丁酯(185mg,0.7mmoles)、(1H-苯并[d]咪唑-2-基)甲胺二盐酸盐(232mg,1.01mmoles)和Hunig氏碱(0.49mL,2.8mmoles)在iPrOH(6mL)中的溶液回流12小时。将该反应物冷却至室温,在减压下蒸发溶剂,进行色谱法(5%MeOH/95%CHCl3),得到175mg(61%)所需产物。
实施例2.18N1-(3-羟基-4-((1-异丁基哌啶-4-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-(1-苯乙基)间苯二甲酰胺二盐酸盐 于80℃将在异丙醇(20mL)中的1-(环氧乙烷-2-基)-N-((氧代硼基)亚甲基)-2-苯基乙胺(1.61mmol,424mg)和4-(氨甲基)哌啶-1-甲酸苄酯(1.94mmol,480mg)加热过夜。蒸发溶剂,通过快速色谱法纯化,得到4-((2-羟基-3-((氧代硼基)亚甲基氨基)-4-苯基丁基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯(880mg)。
1H NMR(300MHz,CDCl3),δ7.363-7.174(m,10H),5.118(s,2H),4.767(br,1H),4.187(m,2H),3.786(m,1H),3.458(m,1H),3.023-2.671(m,6H),2.484(d,J=6.6Hz,2 H),1.733(m,2H),1.600(m,1H),1.347(s,9H),1.13(m,2H). 将在二氯甲烷中的4-((2-羟基-3-((氧代硼基)亚甲基氨基)-4-苯基丁基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯(1.04mmol,530mg)加入到TFA(7.6mL)中,于室温搅拌40分钟。蒸发溶剂。将残余物溶于二氯甲烷中,加入二异丙基乙胺(4.14mmol,0.72mL),搅拌30分钟。然后将酸(1.04mmol,390mg)和BOP试剂(1.14mmol,504mg)加入到烧瓶中。将所得混合物搅拌过夜,蒸发溶剂。将残余物溶于氯仿中,用水和盐水洗涤。最后将黄色残余物通过快速色谱法纯化,得到产物(320mg)。
1HNMR(300MHz,CDCl3),δ7.992(s,1H),7.865(m,1H),7.715(s,1H),7.383-7.106(m,15H),5.241(m,1H),5.093(s,2H),4.291(m,1H),4.146(m,2H),3.843(m,1H),3.232(s,3H),3.065(m,1H),2.962-2.626(m,7H),2.779(s,3H),1.714(m,3H),1.579(d,J=6.9Hz,3H),1.120(m,2H). 将以上化合物(318mg,0.413mmol)溶于无水甲醇中,然后溶于三乙胺(0.2mL,过量)和焦碳酸叔丁酯(108.3mg,0.5mmol)中。将所得混合物搅拌过夜。然后蒸发溶剂,将残余物溶于甲醇中,在1atm下用Pd(OH)2氢化。过滤后,蒸发溶剂,将残余物通过快速色谱法纯化,得到产物(215mg)。
1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD),δ8.227-7.802(m,3H),7.365-7.059(m,10H),5.214(m,1H),4.308(br,1H),3.885(m,1H),3.467(m,1H),3.293-2.879(m,6H),3.211(s,3H),2.805-2.668(m,3H),2.782(s,3H),1.717(m,3H),1.562(d,J=6.9Hz,3H),1.386(s,9H),1.174(m,2H). 将溶于甲醇/乙腈(5/1)中的胺(50mg,0.068mmol)加入到异丁醛(0.1mL,过量)中,搅拌15分钟,然后加入NaBCNH3(12.8mg,0.2mmol),继续搅拌30分钟。将5滴乙酸加入到该反应混合物中,继续搅拌过夜。蒸发溶剂。然后将白色固体溶于氯仿中,用NaHCO3水溶液、盐水洗涤,过滤,用无水Na2SO4干燥。将所得残余物通过快速色谱法纯化,得到产物(40mg)。
1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.014(s,1H),7.902(s,1H),7.798(s,1H),7.372-7.087(m,10H),5.261(m,1H),4.340(m,1H),3.870(m,1H),3.420-3.207(m,3H),3.282(s,3H),3.103-2.890(m,4H),2.841(s,3H),2.610(m,3H),2.132(m,2H),1.935-1.774(m,3H),1.569(d,J=6.9Hz,3H),1.422(s,9H),1.302(m,2H),0.979(d,J=6.6Hz,3H), 将以上化合物溶于4M HCl二烷溶液中,搅拌1小时。蒸发溶剂,回收得到白色固态的N1-(3-羟基-4-((1-异丁基哌啶-4-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲基磺酰氨基)-N3-(1-苯乙基)间苯二甲酰胺二盐酸盐。
实施例2.193-(异丙基((4-甲基噻唑-2-基)甲基)氨甲酰基)苯甲酸甲酯 在Ar下将Et3N(1滴,催化)加入到搅拌的间苯二酸一甲酯(0.294mmol,1.0当量)在2mL SOCl2中的混悬液中。于90℃将该混合物加热回流2小时。将反应物冷却至室温,真空除去溶剂。将残余物置于Ar氛围下,溶于2mL无水CH2Cl2中。在Ar下将所得溶液用溶于1mL无水CH2Cl2中的N-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)丙-2-胺(0.294mmol,1.0当量,由4-甲基噻唑-2-甲醛与异丙胺的还原性胺化制得)溶液处理。于室温搅拌30分钟后,将反应物用ET3N(0.294mmol,1当量)处理。于室温搅拌30分钟后,将反应物倒入分液漏斗中,用饱和NaHCO3(×1)、水(×3)、盐水(×1)洗涤,通过Na2SO4干燥。通过过滤除去无机物,真空除去溶剂,得到粗产物(产率93%)。
实施例2.20(3-甲基异唑-5-基)甲基氨基甲酸叔丁酯 将321mg(2.27mmol)2-(3-甲基异唑-5-基)乙酸、0.5mL(2.32mmol)二苯基磷酰基叠氮化物(DPPA)和0.35mL(2.51mmol)三乙胺在30mL蒸馏叔丁醇中的溶液回流13.5小时。将该溶液浓缩,将粗残余物溶于EtOAc中。将有机层用1N HCl(3×10mL)和饱和NaHCO3溶液(3×10mL)洗涤。将有机层通过硫酸钠干燥,过滤,浓缩。通过快速硅胶色谱法(28%EtOAc/己烷)纯化,得到50mg(产率10%)淡黄色固态的(3-甲基异唑-5-基)甲基氨基甲酸叔丁酯。
实施例2.215-氟间苯二酸 向轻微回流的1.9g(15.3mmol)5-氟-间二甲苯在约13.5mL吡啶和约9.5mL水中的溶液中分数批加入13.8g(87.3mmol)KMnO4。将混合物回流约7小时后,加入亚硫酸钠以淬灭过量的KMnO4。将温热的混合物过滤,加入1N HCl至pH=3。将滤液用EtOAc洗涤,用NaCl饱和,用(80mL CHCl3∶10mL MeOH∶10mL H2O)的混合物的萃取剂萃取3-4次。将合并的萃取液通过硫酸钠干燥,过滤,浓缩,得到约400mg(产率14%)淡黄色固态的5-氟间苯二酸。
实施例2.22(5-(苄氧基)吡啶-3-基)甲胺 在Ar下于60℃将818mg(5.34mmol)5-羟基烟酸、1.70g(12.3mmol)K2CO3和1.0mL(8.41mmol)溴化苄在25mL DMF中的混合物加热16小时。将该混合物通过棉布过滤,将残余物溶于CHCl3中。将有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤,通过Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过快速硅胶色谱法纯化,得到363mg(产率28%)橙色油状的5-(苄氧基)烟酸甲酯。
于0℃向搅拌的363mg(1.49mmol) 5-(苄氧基)烟酸甲酯在10mL THF中的溶液中加入141mg(3.71mmol)LiAlH4。移去冰浴,55分钟后,加入20.5mgLiAlH4。40分钟后,通过连续加入160μL H2O、160μL 15%NaOH水溶液和480μL盐水淬灭反应物。通过快速硅胶色谱法(2mL MeOH/100mLCHCl3)纯化,得到250mg(产率78%)(5-(苄氧基)吡啶-3-基)甲醇(黄色油状物)。
向搅拌的250mg(1.17mmol)(5-(苄氧基)吡啶-3-基)甲醇在8mL甲苯中的溶液中加入310μL(1.44mmol)DPPA。将该混合物冷却至0℃,加入210μL(1.44mmol)1,8-二氮杂二环[5.4.0]-十一碳-7-烯(DBU)。移去冰浴,在温热至室温时继续搅拌。约20小时后,将溶液用EtOAc稀释,加入1N HCl至pH为7至8。将有机层用水(2×15mL)和盐水(15mL)洗涤,通过Na2SO4干燥。过滤并浓缩后,将粗产物通过快速硅胶色谱法(56-60%EtOAc/己烷)纯化,得到181mg(产率65%)无色油状的3-(叠氮基甲基)-5-(苄氧基)吡啶。
于0℃向搅拌的181mg 3-(叠氮基甲基)-5-(苄氧基)吡啶在6mL THF中的溶液中加入80.6mg(2.12mmol)LiAlH4。移去冰浴,在温热至室温时继续搅拌。30分钟后,通过连续加入160μLH2O、160μL 15%NaOH水溶液和480μL盐水淬灭反应物。将混合物通过Celite过滤,浓缩,得到粗(5-(苄氧基)吡啶-3-基)甲胺。粗产物未经进一步纯化使用。
实施例2.23(5-甲基吡啶-3-基)甲醇 于0℃向搅拌的233mg(1.70mmol)5-甲基烟酸(按照5-氟-间苯二酸的通用方法合成)在30mL THF中的溶液中加入181mg(4.76mmol) LiAlH4。25分钟后,通过连续加入180μL H2O、180μL 15%NaOH水溶液和540μL盐水淬灭反应物。将混合物通过Celite过滤,浓缩,得到87mg粗(5-甲基吡啶-3-基)甲醇,其未经进一步纯化用于下一反应。
实施例2.241,5-双(氯甲基)-2,4-二甲苯 于90℃将3mL(24.4mmol)间二甲苯、2.6g(28.5mmol)1,3,5-三烷和2.6g(19.0mmol) ZnCl2在100mL 1.0M HCl(在乙酸中)中的溶液加热。23小时后,加入水、NaHCO3和EtOAc。分层,将有机层用水(3-4×)和盐水洗涤,通过Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过快速硅胶色谱法(己烷至3%EtOAc/己烷)纯化,得到2.45g(产率49%)无色固态的1,5-双(氯甲基)-2,4-二甲苯。
实施例2.25(5-乙基吡啶-3-基)甲醇 于-78℃向搅拌的1.08g(12.0mmol)CuCN在20mL THF中的混合物中加入24mL EtMgBr(1M,在THF中)。搅拌20分钟后,加入在20mL THF中的387mg 5-(5-溴吡啶-3-基)甲醇,于-78℃继续搅拌3小时。然后使该反应混合物温热至室温,搅拌约17小时,加入氢氧化铵。将该混合物搅拌直至颜色变为品蓝,将其放置过夜。将其用CHCl3(2×)萃取,通过Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过快速硅胶色谱法(2.5%MeOH/CHCl3)纯化,得到37mg(产率13%)黄色油状的(5-乙基吡啶-3-基)甲醇。
实施例2.265-氟烟酸甲酯 于0℃向搅拌的243mg(1.6mmol)5-氨基烟酸甲酯在5mL HF-吡啶中的溶液中加入119mg(1.72mmol)NaNO2。于0℃将该混合物搅拌30分钟,于50℃搅拌1小时。将该反应物通过冰和饱和NaHCO3溶液淬灭。将水层用CHCl3萃取,通过Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过快速硅胶色谱法(1%MeOH/CHCl3)纯化,得到139mg(产率56%)黄色固态的5-氟烟酸甲酯。
实施例2.272-氯-1-(2,4-二氟-5-甲基苯基)乙酮 于0℃向搅拌的2,4-二氟甲苯溶液中加入6.3g(47.3mmol) AlCl3和3.4mL(42.6mmol)氯乙酰氯。于0℃将该混合物搅拌10分钟后,然后于45℃搅拌30分钟。使该混合物温热至室温,加入约16mL浓HCl、25mL水和100mL EtOAc。分离有机层,用盐水和饱和NaHCO3(2×)洗涤,通过Na2SO4干燥。将溶液过滤,浓缩,得到9.0g无色固态的2-氯-1-(2,4-二氟-5-甲基苯基)乙酮,其未经进一步纯化使用。
实施例2.285-异丙氧基烟酸甲酯 于60℃将677mg(3.28mmol)二环己基碳二亚胺(DCC)、0.3mL(3.92mmol)异丙醇和7.7mg(0.078mmol)CuCl的溶液加热。13小时后,加入460mg(3.0mmol) 5-羟基烟酸甲酯和10mL苯,于105℃加热24.5小时。将该混合物用氯仿稀释,过滤。将有机层用15mL饱和NaHCO3、水和盐水洗涤,通过Na2SO4干燥。通过快速硅胶色谱法(100%CHCl3)纯化,得到274mg(产率47%)黄色油状的5-异丙氧基烟酸甲酯。
实施例2.291-(3-甲基异唑-5-基)乙醇 于0℃历经2小时45分钟向搅拌的5.2mL(84.9mmol)乙醛肟、6.7mL(85.5mmol)3-丁炔-2-醇和1.2mL(8.6mmol)Et3N在20mL CH2Cl2中的溶液中加入275mL NaOCl。移去冰浴,于室温继续搅拌18小时。加入氯仿,分层。将有机层用CHCl3(2×)和(80mL CHCl3∶10mL H2O∶10mL MeOH)的混合物的萃取剂(2×)萃取。将合并的萃取液通过Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过快速硅胶色谱法(2%MeOH/CHCl3)纯化,得到2.2g(产率20%)橙黄色油状的1-(3-甲基异唑-5-基)乙醇。
实施例2.30(4-甲氧基吡啶-2-基)甲胺 于室温向搅拌的1.2g(9.67mmol)4-甲氧基吡啶-N-氧化物在18mLCH2Cl2中的混合物中加入1.6mL(12.0mmol)TMSCN。5分钟后,加入0.9mL(9.8mmol)二甲基氨甲酰氯。于室温将该溶液搅拌13小时,加入CHCl3和20mL 10%K2CO3。将水层用CHCl3萃取3次,将合并的萃取液通过Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过快速硅胶色谱法(38-44%EtOAc/己烷)纯化,得到949mg(产率73%)无色固态的4-甲氧基吡啶甲腈。
于0℃向搅拌的949mg 4-甲氧基吡啶甲腈在15mL THF中的溶液中加入约0.6g LiAlH4。反应变得非常放热。使该混合物温热至室温,40分钟后,连续加入以下物质0.4mL H2O、0.4mL 15%NaOH(水溶液)和1.2mL盐水。于室温将该混合物搅拌75分钟,然后通过Celite过滤,浓缩,得到377mg(4-甲氧基吡啶-2-基)甲胺,其未经进一步纯化用于下一反应。
实施例2.315-(二甲基氨基)烟酸甲酯 向搅拌的283mg(1.86mmol)5-氨基烟酸甲酯在19mL CH3CN和19mL37%甲醛(在H2O中)中的溶液中加入353mg(5.62mmol)NaCNBH3和50滴乙酸。于室温将该溶液搅拌18.5小时,加入40mL EtOAc和40mL饱和NaHCO3溶液。分层,将有机层用25mL饱和NaHCO3和25mL盐水洗涤,通过Na2SO4干燥,过滤,浓缩。通过快速硅胶色谱法(0.5%MeOH/CHCl3)纯化,得到124mg(产率37%)黄色油状的5-(二甲基氨基)烟酸甲酯。
实施例2.323-(2,2-二甲基-1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)肼羰基)苯甲酸甲酯 于室温向在CH2Cl2中的3-(甲氧基羰基)苯甲酸(253mg,1.40mmol)中加入EDCI(312mg,1.64mmol)和HOBT(189mg,1.40mmol),于室温搅拌20分钟。向该混合物中加入N,N-二甲基肼,然后加入DIPEA(404mg,14.0mmol)。于室温将反应混合物搅拌16小时。然后将反应混合物用氯仿稀释,用水、盐水洗涤,干燥。将粗残余物通过柱色谱法纯化,得到3-(2,2-二甲基肼羰基)苯甲酸甲酯(产率60%)。
于0℃向在THF(3mL)中的氢化钠(16mg,0.68mmol)中加入3-(2,2-二甲基肼羰基)苯甲酸甲酯(100mg,0.45mmol)。10分钟后,加入4-甲基-2-溴甲基噻唑(103mg,0.54mmol),于3-4℃将反应混合物搅拌过夜。将反应混合物用MeOH淬灭,用乙酸乙酯稀释。将有机层用水、盐水洗涤,干燥。将粗残余物通过柱色谱法纯化,得到3-(2,2-二甲基-1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)肼羰基)苯甲酸甲酯(产率70%)。
实施例2.333-(氟甲基)苄基氨基甲酸叔丁酯 于-78℃向在CH2Cl2(30mL)中的DAST(600mg,3.72mmol)中缓慢加入醇3-(羟基甲基)苄基氨基甲酸叔丁酯(630mg,2.65mmol)。于-78℃将反应混合物搅拌1小时,于室温另外搅拌1小时。然后将反应混合物用甲醇淬灭,然后用碳酸氢钠淬灭。除去溶剂后,将粗残余物进行柱色谱法,得到3-(氟甲基)苄基氨基甲酸叔丁酯(产率60%)。
实施例2.34(3-异丙基苯基)甲胺 于0℃向在THF中的溴化甲基三苯基(4.3gm,12mmol)中加入n-BuLi(1.6M,7.5mL,12mmol),搅拌30分钟。然后缓慢加入在THF中的3-乙酰基苄腈,于0℃将该反应混合物另外搅拌3小时。然后将反应混合物用氯化铵水溶液淬灭,用乙酸乙酯稀释。将有机层用水、盐水洗涤,干燥。将粗残余物进行柱纯化后,得到3-(丙-1-烯-2-基)苄腈(产率86%)。
向在乙酸乙酯(30mL)中的3-(丙-1-烯-2-基)苄腈(1.2gm,8.3mmol)中加入10%Pd/C(120mg),在氢气氛围下搅拌16小时。然后将该反应混合物过滤,蒸发溶剂,得到定量产率的3-异丙基苄腈。
于0℃向在THF中的3-异丙基苄腈中缓慢加入LAH(1.74gm,45.7mmol),使该反应混合物达到室温,于室温搅拌48小时。然后将反应混合物冷却至0℃,用乙醚稀释,用饱和硫酸钠溶液淬灭。将残余物过滤,蒸发溶剂,得到定量产率的胺(3-异丙基苯基)甲胺。
实施例2.353-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙烷-1-胺 于0℃向在THF(60mL)中的3-甲氧基-4-甲基苯甲酸甲酯(3gm,16.6mmol)中缓慢加入LAH(3gm,66.6mmol)。于0℃另外搅拌30分钟后,将反应混合物如上所述进行处理,得到定量产率的醇(3-甲氧基-4-甲基苯基)甲醇。
于0℃将Dess-Martin过碘烷(periodinane)(3gm,7.07mmol)加入到在CH2Cl2(35mL)中的(3-甲氧基-4-甲基苯基)甲醇(1gm,6.57mmol)中。于0℃搅拌0.5小时后,除去一些CH2Cl2,将反应混合物用乙醚稀释,用碳酸氢钠溶液、硫代硫酸钠溶液和水洗涤。将有机层干燥,蒸发,得到定量产率的3-甲氧基-4-甲基苯甲醛。
使3-甲氧基-4-甲基苯甲醛与氰甲基三苯基正膦进行Wittig反应,得到3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙烯腈(产率77%),使用上述方法将其进一步转化为3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙烷-1-胺。
实施例2.364-(3-乙炔基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯 向在三乙胺(3mL)中的3-溴苄基氨基甲酸叔丁酯(220mg,1mmol)中加入三甲基甲硅烷基乙炔(147mg,1.5mmol),然后加入碘化亚铜(8mg,0.04mmol)。搅拌5分钟后,加入二氯双(三苯膦)钯(II)(35mg,0.05mmol),于90℃将该反应混合物加热18小时。然后将该反应混合物过滤,用乙酸乙酯稀释,用水洗涤。将有机层干燥,蒸发,将粗残余物通过柱色谱法纯化,得到3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苄基氨基甲酸叔丁酯(产率67%)。
将Boc-基团从3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苄基氨基甲酸叔丁酯中除去,所得胺用于打开环氧化物(S)-1-((S)-环氧乙烷-2-基)-2-苯乙基氨基甲酸叔丁酯,得到3-羟基-1-苯基-4-(3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苄氨基)丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(产率60%)。
向在THF(2mL)和MeOH(2mL)的混合物中的3-羟基-1-苯基-4-(3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苄氨基)丁-2-基氨基甲酸叔丁酯中加入1M K2CO3(0.25mL),于室温将该反应混合物搅拌18小时。然后除去溶剂,将粗残余物重新溶于乙酸乙酯中,用水、盐水洗涤,干燥。进行柱纯化,得到4-(3-乙炔基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(产率85%)。
实施例2.375-(甲磺酰基甲基)间苯二酸二乙酯 于0℃向在THF(30mL)中的5-(羟基甲基)间苯二酸二乙酯(2.52gm,10mmol)中加入三苯基膦(5.25gm,20mmol),然后加入硫羟乳酸(1.52gm,20mmol)和偶氮二甲酸二异丙酯(4.04gm,20mmol)。然后使反应混合物达到室温,搅拌2小时。然后除去溶剂,将粗品重新溶于最少量的CH2Cl2中。在搅拌下加入己烷,弃去所得固体。将滤液蒸发至干,将残余物进行柱纯化,得到5-(乙酰基硫甲基)间苯二酸二乙酯(产率95%)。
向在THF(10mL)和MeOH(10mL)中的5-(乙酰基硫甲基)间苯二酸二乙酯(1.02gm,3.30mmol)中加入甲醇钠(207mg,3.63mmol),于室温搅拌2小时。然后分两批加入甲基碘(0.69mL,10.9mmol)。于室温搅拌4小时后,真空除去THF和MeOH,将该反应混合物用乙酸乙酯稀释。将有机层用水、盐水洗涤,干燥。将粗残余物进行柱纯化,得到5-(甲基硫甲基)间苯二酸二乙酯(产率55%)。
于0℃将m-CPBA(990mg,4.43mmol)加入到在CH2Cl2(10mL)中的S-甲基化合物(500mg,1.77mmol)中。搅拌15分钟后,使反应混合物达到室温,搅拌20小时。然后将反应混合物用CH2Cl2稀释,用碳酸氢钠溶液洗涤。将粗残余物进行柱纯化,得到5-(甲磺酰基甲基)间苯二酸二乙酯(产率73%)。
实施例3memapsin 2催化活性的抑制 通过测定化合物抑制memapsin 2对荧光底物的催化活性测定了它们的效能。使用如Ermolieff等人(Biochemistry 3912450-12456(2000),该文献的教导整体引入本文)所述的方法进行了动力学抑制实验。简言之,在pH4、37℃下通过将memapsin 2酶与化合物预孵育20分钟进行了试验。通过加入荧光底物FS-2(Bachem Americas,托兰斯,CA)开始活性测定。荧光信号随时间增加作为肽底物的水解速率而被测定。水解速率的抑制相对于未抑制的对照而言被表达并且拟合为紧密结合的抑制剂的模型(J.Bieth,“蛋白酶抑制剂,”Bayer专题讨论会V,463-469,1974)。结果示于下表1。
表1 在表1中,对于Ki数据,“+”表示Ki大于501nM,“++”表示Ki为500nm至301nm,“+++”表示Ki小于300nm。对于IC50数据,“+”表示IC50大于5μM,“++”表示IC50为1至5μM,“+++”表示IC50小于1μM。在上表1中,出现一次以上的化合物名称包括供选的立体化学构型。
实施例4鉴定数据 N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((4-甲基噻唑-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.56(d,3H),2.36(d,3H),2.85(s,3H),2.78-3.00(m,4H),3.30(s,3H),3.68-3.78(m,1H),4.01(s,2H),4.30-4.40(m,1H),5.20-5.35(m,1H),6.80(d,1H),7.10-7.40(m,10H),7.79-7.82(m,1H),7.90-7.92(m,1H),8.01-8.05(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.68(d,3H),2.41(d,3H),2.85(s,3H),2.70-3.02(m,4H),3.31(s,3H),3.75(s,3H),3.70-3.83(m,2H),4.30-4.40(m,1H),5.50-5.60(m,1H),6.72-6.90(m,3H),7.10-7.30(m,7H),7.79-7.82(m,1H),7.90-7.92(m,1H),8.05-8.10(m,1H). N1-((2S,3R)-4-(苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.56(d,3H),2.82(s,3H),2.68-3.02(m,4H),3.27(s,3H),3.70-3.85(m,3H),4.25-4.35(m,1H),5.20-5.30(m,1H),7.10-7.40(m,15H),7.75-7.77(m,1H),7.86-7.90(m,1H),8.01-8.03(m,1H). N1-苄基-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)2.84(s,3H),2.70-3.02(m,4H),3.30(s,3H),3.74(s,3H),3.70-3.83(m,3H),4.30-4.42(m,1H),4.58(s,2H),6.74-6.88(m,2H),7.10-7.38(m,12H),7.74-7.78(m,H),7.90-7.94(m,1H),8.05-8.10(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-硝基-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H MR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.59(d,3H),2.70-3.02(m,4H),3.73(s,3H),3.70-3.85(m,3H),4.28-4.39(m,1H),5.20-5.35(m,1H),6.72-6.88(m,2H),7.10-7.40(m,12H),8.42-8.44(m,1H),8.55-8.57(m,1H),8.74-8.77(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(吡嗪-2-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.58(d,3H),2.80(s,3H),2.70-3.02(m,4H),3.29(s,3H),3.60-3.72(m,1H),3.85-4.01(m,2H),4.34-4.48(m,1H),5.25-5.40(m,1H),7.12-7.40(m,10H),7.76-7.80(m,1H),7.93-7.97(m,1H),8.03-8.07(m,1H),8.40-8.42(m,1H),8.46-8.48(m,1H),8.59-8.61(m,1H).熔点75-80℃ N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.58(3H,d,J=7.0Hz),2.72(3H,s),2.74-2.83(4H,m),3.22(3H,s),3.69-3.83(6H,m),4.29-4.33(1H,m),5.26(1H,m),6.78(1H,m),6.85-6.86(2H,m),7.13-7.37(12H,m),7.76(1H,s),7.89(2H,s),8.11(1H,s);mp 77-80℃. N1-((2S,3R)-4-((1H-苯并[d]咪唑-2-基)甲基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.56(d,3H),2.81(s,3H),2.68-2.94(m,4H),3.24(s,3H),3.70-3.77(m,1H),3.90-4.01(m,2H),4.30-4.40(m,1H),5.20-5.30(m,1H),7.05-7.50(m,15H),7.75-7.77(m,1H),7.86-7.89(m,1H),8.03-8.06 (m,1H). N1-((2S,3R)-4-((2,5-二甲基唑-4-基)甲基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.48(d,3H),2.14(s,3H),2.24(s,3H),2.58-2.82(m,4H),2.78(s,3H),3.23(s,3H),3.36(s,2H),3.60-3.70(m,1H),4.25-4.32(m,1H),5.18-5.32(m,1H),7.05-7.32(m,10H),7.77-7.81(m,1H),7.90-7.94(m,1H),8.06-8.09(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((S)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.45(d,3H),1.55(d,3H,J=6.9Hz)2.37(d,3H),2.74-2.84(m,2H),2.81(s,3H),2.95(d,2H),3.30(s,3H),3.58-3.65(m,1H),4.00-4.12(m,1H),4.30-4.42(m,1H),5.22-5.34(m,1H),6.79(d,1H)7.10-7.32(m,10H),7.74-7.78(m,1H),7.94-7.96(m,1H),8.02-8.05(m,1H).熔点80-87℃ N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((R)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.43(d,3H),1.54(d,3H)2.33(d,3H),2.62-2.84(m,2H),2.84(s,3H),2.87(d,2H),3.27(s,3H),3.65-3.75(m,1H),4.00-4.12(m,1H),4.28-4.48(m,1H),5.18-5.32(m,1H),6.76(d,1H)7.05-7.35(m,10H),7.78-7.81(m,1H),7.87-7.90(m,1H),8.02-8.05(m,1H).熔点85-90℃ N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((S)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.61(d,3H),2.34(s,3H),2.68-2.88(m,4H),2.77(s,3H),3.23(s,3H),3.62-3.82(m,3H),3.70(s,3H),4.27-4.38(m,1H),5.40-5.51(m,1H),6.70-6.87(m,4H),7.05-7.50(m,5H),7.71-7.74(m,1H),7.86-7.89(m,1H),7.98-8.03(m,1H).熔点57-61℃ 5-(N-乙基甲磺酰氨基)-N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.06(t,3H),1.58(d,3H),2.68-3.02(m,4H),2.87(s,3H),3.62-3.84(m,3H),3.75(s,3H),4.25-4.36(m,1H),5.20-5.33(m,1H),6.73-6.90(m,4H),7.07-7.42(m,10H),7.66-7.72(m,1H),7.83-7.87(m,1H),8.02-8.06(m,1H).熔点110-116℃ N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NHMR(300MHz,CDCl3)1.60(d,3H,J=7.2 Hz),2.75(s,3H),2.77-3.07(m,8H),3.24(s,3H),3.74(s,3H),3.81-3.90(m,1H),4.28-4.40(m,1H),5.24-5.76(m,1H),6.72-6.75(m,3H),7.12-7.37(m,11H),7.80-7.91(m,3H),8.15(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)0.80-0.88(m,4H),2.45(s,3H),2.80-2.86(m,2H),2.92-3.02(m,2H),3.69-3.86 (m,6H),4.36-4.44(m,1H),4.96-5.12(m,2H),6.79-6.99(m,4H),7.15-7.26(m,8H),7.64-7.67(m,1H),7.82(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.64(d,3H,J=7.2Hz),2.33(s,3H),2.79-3.33(m,7H),3.29(s,3H),3.82-3.91(m,3H),4.24-4.41(m,1H),5.29-5.42(m,1H),6.93-7.43(m,14H),7.83(s,1H),7.94(s,1H),8.13(s,1H). N1-((2S,3R)-4-(3-氟苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.40(s,3H),2.76-2.81(m,2H),2.92-3.05(m,5H),3.71-3.78(m,3H),4.26-4.42(m,1H),4.86-4.96(m,2H),6.88-7.66(m,14H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((S)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.25(s,3H),2.38(s,3H),2.65-2.81(m,2H),2.92-3.13(m,5H),3.64-3.88(m,3H),4.22-4.39(m,1H),4.89(s,2H),6.82-7.59(m,14H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((3-甲基异唑-5-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.73-7.82(m,1H),7.64-7.66(m,1H),7.46-7.59(m,1H),7.37-7.42(m,1H),7.16-7.29(m,6H),7.08-7.11(m,1H),6.90-6.92(m,2H),6.80-6.83(m,1H),6.00-6.14(m,1H),4.77(m,1.5H),4.33-4.47(m,1.5H) 3.71-3.89(m,6H),3.00-3.08(m,5H),2.81-2.90(m,2H),2.47(s,1H),2.30(s,3H);m.p.46-56℃. N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(吡啶-2-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.50-8.51(m,1H),8.20(s,1H),8.10-8.13(m,1H),8.02(s,1H),7.88(s,1H),7.65-7.71(m,1H),7.15-7.31(m,14H),5.28-5.38(m,1H),4.39-4.48(m,1H),3.64-3.84(m,4H),3.30(s,3H),2.81-2.95(m,5H),2.63-2.69(m,1H),2.28(s,1H),1.53(d,3H);m.p.53-67℃. N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(吡啶-4-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.49-8.51(m,2H),7.93(s,1H),7.89(s,1H),7.75(s,1H),7.09-7.41(m,13H),6.87-6.97(m,1H),5.27-5.36(m,1H),4.31-4.40(m,1H),3.75-3.91(m,2H),3.62-3.70(m,2H),3.31(d,3H),2.96-2.98(m,2H),2.81(s,3H),2.74-2.76(m,2H),2.02(s,1H),1.62(d,3H);m.p.73-84℃. N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((3-甲基异唑-5-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.05(s,1H),7.97(s,1H),7.78(s,1H),7.20-7.40(m,10H),7.08-7.18(m,1H),6.97-7.08(m,1H),5.98(s,1H),5.26-5.41(m,1H),4.33-4.43(m,1H),3.82-4.01(m,2H)3.61-3.65(m,2H),3.33(s,3H),2.99-3.02(m,2H),2.83(s,3H),2.75-2.76(m,2H),2.21(s,3H),1.70(s,1H),1.62(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((5-羟基吡啶-3-基)甲基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.15(s,1H),7.81-7.98 (m,3H),7.72(s,1H),7.06-7.27(m,9H),6.86-6.89(m,2H),6.79-6.81(m,1H),4.34-4.46(m,2H),4.22-4.34(m,2H),3.95-4.03(m,1H),3.88-3.91(m,2H),3.60-3.80(m,4H),3.21(s,3H),2.77-2.98(m,7H),2.27(s,1H);m.p.100-113.5℃. 4-或6-氟-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.25-8.29(m,1H),7.78-7.85(m,1H),6.89-7.37(m,17H),6.66-6.82(m,1H),5.28-5.37(m,2H),4.32-4.44(m,1H),3.76-3.92(m,5H),2.95-3.06(m,2H),2.77-2.95(m,2H),2.17(s,1H),1.60(d,3H). 6-或4-氟-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.14-8.16 (m,1H),7.90-7.98(m,1H),7.00-7.32(m,13H),6.75-6.90(m,2H),6.64-6.74(m,2H),5.18-5.29(m,2H),4.26-4.42(m,1H),3.56-3.88(m,6H),2.89-3.08(m,2H),2.65-2.89(m,2H),2.23(s,1H),1.53-1.55(d,3H);m.p.55-67℃. N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-甲基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.46(s,1H),8.33-8.36(m 1H),8.19(s,1H),8.13(s,1H),8.04-8.07(m,1H),7.95-7.97(m,1H),7.69-7.72(m,1H),7.1 5-7.44(m,11H),6.89-6.95(m,1H),5.30-5.44(m,1H),4.32-4.41(m,1H),3.99-4.04(m,1H),3.57-3.83(m,2H),3.31(s,3H),2.94-3.09(m,2H),2.81(s,3H),2.61-2.62(m,2H),2.27(s,3H),2.03(s,1H),1.65(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-4-或6-甲基-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.61-7.63(m,1H),7.14-7.42(m,15H),6.88-6.95(m,2H),6.81-6.85(m,1H),6.16-6.29(m,1H),5.28-5.36(m,1H),4.30-4.43(m,1H),3.72-3.93(m,5H),3.02-3.04(m,2H),2.75-2.95(m,3H),2.42(s,3H),1.74(s,1H),1.60(d,3H);m.p.64-77℃. N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-6-或4-甲基-N1-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.66-7.91(m,1H),7.49(s,1H),7.08-7.40(m,13H),6.87-6.90(m,2H),6.77-6.83(m,1H),6.57(s,1H),6.32(s,1H),5.25-5.37(m,1H),4.30-4.43(m,1H),3.65-3.90(m,5H),2.95-3.16(m,2H),2.72-2.95(m,3H),2.13(s,3H),2.02(s,1H),1.60(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-甲氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.25(s,1H),8.09(s,1H),7.98(s,1H),7.76-7.82(m,1H),7.72(s,1H),7.16-7.44(m,14H),6.77-6.86(m,1H),5.30-5.45(m,1H),4.30-4.42(m,1H),4.00-4.12(m,1H),3.73-3.87(m,2H),3.55-3.73(m,2H),3.33(s,3H),2.98-3.03(m,2H),2.82(s,3H),2.60-2.69(m,2H),1.70(s,1H),1.66(d,3H). 4-或6-氟-N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.06(s,1H),7.61(s,1H),7.05-7.28(m,10H),6.85-7.05(m,2H),6.78-6.81(m,1H),4.89-5.02(m,2H),4.36-4.52(m,1H),3.69-3.87(m,5H),3.59-3.69(m,1H),2.96-3.16(m,5H),2.72-2.84(m,2H),2.44(s,3H),2.04(s,1H). 6-或4-氟-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-甲基-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.61-7.81(m,2H),7.03-7.45(m,10H),6.87-6.98(m,2H),6.77-6.87(m,1H),4.99(s,2H),4.32-4.46(m,1H),3.77-3.98(m,5H),3.62-3.70(m,1H),2.96-3.04(m,5H),2.76-2.93(m,2H),2.46(s,3H),1.68(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((6-甲基吡啶-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.28(s,1H),8.01(m,1H),7.87(m,1H),7.52-7.57(m,1H),7.11-7.29(m,10H),7.00-7.05 (m,2H),5.28-5.35(m,1H),4.40-4.46(m,1H),3.69-3.75(m,3H),3.27(s,3H),2.81-2.93(m,2H),2.78(s,3H),2.51-2.69(m,2H),2.42(s,3H),1.51(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(2-甲基-2-苯基肼基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 7.88-7.90(m,1H),7.84-7.85(m,1H),7.68-7.69(m,1H),7.16-7.37(m,12H),6.76-6.86(m,3H),5.22-5.28(m,1H),4.37-4.42(m,1H),4.11-4.14(m,1H),3.41-3.43(m,2H),3.27(s,3H),3.00-3.14(m,2H),2.96(s,3H),2.83(s,3H),1.60(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(2-羟基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.01(s,1H),7.88(s,1H),7.72(s,1H),7.12-7.38(m,11H),6.97-7.01(m,1H),6.77-6.81(m,2H),5.24-5.29(m,1H),4.30(m,1H),3.86-4.02(m,3H),3.23(s,3H),2.83-2.92(m,4H),2.78(s,3H),1.60(d,3H). N1-((2S,3R)-4-(3-乙酰氨基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.27(s,1H),7.90(s,1H),7.80(s,1H),7.50(s,1H),7.38-7.41(m,3H),7.11-7.26(m,10H),5.25-5.30(m,1H),4.26(m,1H),3.84(m,1H),3.64-3.76(m,2H),3.19(s,3H),2.75-2.85(m,4H),2.73(s,3H),1.98(s,3H),1.60(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((6-甲基吡啶-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 7.67-7.70(m,1H),7.51-7.56(m,2H),7.35-7.40(m,1H),7.16-7.25(m,6H),7.02-7.06(m,2H),6.88(s,1H),4.95(s,2H),4.43-4.48(m,1H),3.94-4.01(m,2H),3.79-3.82(m,1H),2.92-3.10(m,7H),2.50(s,3H),2.44(s,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-(甲氧基甲基)苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.06(s,1H),7.91-7.93(m,1H),7.78-7.79(m,1H),7.15-7.38(m,14H),5.26-5.31(m,1H),4.40(s,2H),4.31-4.36(m,1H),3.68-3.88(m,3H),3.34(s,3H),3.27(s,3H),2.86-2.89(m,2H),2.79-2.81(m,2H),2.77(s,3H),1.59(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-(甲基氨基)苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲基磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.31(s,1H),7.91(s,1H),7.83(s,1H),7.37-7.44(m,2H),7.07-7.25(m,9H),6.57-6.60(m,2H),6.47-6.49(m,1H),5.26-5.31(m,1H),4.29-4.33(m,1H),3.95-4.00(m,1H),3.75-3.89(m,2H),3.22(s,3H),2.78-2.82(m,4H),2.73(s,3H),2.72(s,3H),1.64(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(4-羟基-3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.09-8.10(m,1H),7.84-7.86(m,1H),7.73-7.74(m,1H),7.35-7.39(m,2H),7.09-7.29(m,8H),6.88(s,1H),6.72(s,2H),5.20-5.24(m,1H),4.16-4.21(m,1H),3.79-3.93(m,3H),3.75(s,3H),3.25(s,3H),3.09-3.15(m,1H),2.79-2.93(m,3H),2.81(s,3H),1.57(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.44(s,3H),2.80(d,2H),2.98(d,3H),2.95-3.14(m,2H),3.77(s,3H),3.64-3.86(m,3H),4.33-4.45(m,1H),4.63(bs,0.6H),4.95(bs,1.4H),6.76-6.92(m,4H),7.13-7.29(m,7H),7.33-7.40(m,1H),7.50-7.84(m,3H). N1-(1-(4-氟苯基)乙基)-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.53(d,3H),2.77(2s,3Htotal),2.80-2.91(m,3H),3.24(2s,3H total),3.74(2s,3H total),3.64-3.86(m,3H),4.27-4.40(m,1H),5.17-5.29(m,2H),6.73-6.81(m,1H),6.82-6.88(m,2H),6.90-7.02(m,2H),7.12-8.36(m,9H),7.72-7.78(m,1H),7.87-7.96(m,2H),8.01-8.07(m,1H). N1-((2S,3R)-4-(3-氟苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.57(d,3H),2.77(s,3H),2,72-2.80(m,2H),2.86-2.93(m,2H),3.25(s,3H),3.64-3.72(m,1H),3.72-3.89(m,2H),4.29-4.40(m,1H),5.22-5.33(m,1H),6.88-7.08(m,4H),7.12-7.38(m,11H),7.64(d,1H),7.74-7.77(m,1H),7.88-7.92(m,1H),7.99-8.02(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-((S)-1-苯基乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 m.p.103-108℃.1HNMR(300MHz,CDCl3带有少量的CD3OD),δ7.939(s,1H),7.791(s,1H),7.631(s,1H),6.985-7.296(m,15H),5.142(m,1H),4.055(m,1H),3.788(m,1 H),3.674(m,1H),3.176(s,3H),2.969(m,1H),2.785(s,3H),2.785(m,1H),2.567(m,2H),1.488(d,3H),1.371(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-((S)-1-苯基乙基氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 m.p.46-51℃.1H NMR(300MHz,CDCl3带有少量的CD3OD),δ7.485(m,2H),7.374(m,1H),7.292(m,1H),6.935-7.123(m,10H),6.803(s,3H),4.782(s,1.3H),4.496(s,0.7H),4.180(m,1H),3.611(m,1H),3.530(m,1H),2.893-2.945(m,1H),2.834(s 3H),2.653(m,1H),2.470(m,2H),2.273(s,3H),1.249(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-((R)-1-苯基乙基氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD),δ7.729(m,2H),7.516(m,1H),7.402(m1H),7.327-7.110(m,10H),6.861(s,1H),4.938(br,1.2H),4.634(br,0.8H),4.360(m,1H),3.752-3.635(m,2H),2.980(s 3H),2.894-2.557(m,4H),2.424(s,3H),1.400(d,J=6.6Hz,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-((S)-1-苯基丙基氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 m.p.50-55℃.1H NMR(300MHz,CDCl3带有少量的CD3OD),δ7.304-7.561(m,4H),6.998-7.208(m,10H),6.838(s,1H),4.836(m,2H),4.154(m,1H),3.551(m,1H),3.367(m,1H),2.876-2.998(m,1H),2.876(s,3H),2.730(m,1H),2.493(m,1H),2.328(s 3H),1.660-1.775(m,1H),1.536-1.633(m,1H),0.675(t,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-((S)-1-苯基丙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 m.p.74-77℃.1H NMR(300MHz,CDCl3带有少量的CD3OD),δ7.916(m,1H),7.826(m,1H),7.660(m,1H),7.050-7.334(m,15H),5.201(m,1H),4.214(m,1H),3.598(m,1H),3.411(m,1H),3.229(s,3H),3.938(m,1H),2.805-2.728(m,1H),2.805(s 3H),2.527(m,1H),1.699-1.835(m,1H),1.575-1.672(m,1H),1.523(d,3H),0.710(t,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基丙基)间苯二甲酰胺 m.p.92-94℃.1H NMR(300MHz,CDCl3带有少量的CD3OD),δ7.969(m,1H),7.814(m,1H),7.693(m,1H),7.026-7.307(m,11H),6.697-6.815(m,3H),4.913(m,1H),4.212(m,1H),3.625-3.787(m,3H),3.680(s,3H),3.217(s,3H),2.993(m,1H),2.650-2.816(m,3H),2.791(s,3H),1.807-1.912(m,2H),0.891(t,3H). N1-((2S,3R)-4-((R)-1-(4-氟苯基)乙基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 m.p.102-109℃.1H NMR(300MHz,CDCl3带有少量的CD3OD),δ7.979(m,1H),7.850(m,1H),7.718(m,1H),7.038-7.348(m,12H),6.889-6.947(m,2H),5.245(m,1H),4.177-4.245(m,1H),3.646-3.748(m,2H),3.259(s,3H),2.830(s,3H),2.700-3.013(m,2H),2.431-2.648(m,2H),1.546(d,3H),1.357(d,3H). N1-((2S,3R)-4-((S)-1-(4-氟苯基)乙基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 m.p.95-97℃.1HNMR(300MHz,CDCl3带有少量的CD3OD),δ7.956(m,1H),7.850(m,1H),7.696 (m,1H),7.066-7.362(m,12H),6.900-6.957(m,2H),5.233(m,1H),4.194-4.261(m,1H),3.625-3.768(m,2H),3.261(s,3H),2.950-3.013(m,1H),2.771-2.849(m,1H),2.830(s,3H),2.497-2.634(m,2H),1.553(d,3H),1.352(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-((R)-1-苯基乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 m.p.95-99℃.1H NMR(300MHz,CDCl3带有少量的CD3OD),δ8.013(m,1H),7.873(m,1H),7.754(m,1H),7.078-7.363(m,15H),5.245(m,1H),4.250(m,1H),3.651-3.737(m,2H),3.269(s,3H),2.712-2.883(m,2H),2.488-2.683(m,2H),2.834(s,3H),1.560(d,3H),1.378(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-((S)-1-(吡啶-3-基)乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 m.p.67-85℃.1HNMR(300MHz,CDCl3带有少量的CD3OD),δ8.323-8.493(m,2H),8.031(m,1H),7.945(s,1H),7.845-7.881(m,1H),7.606-7.700(m,1H),7.064-7.363(m,10H),5.241(m,1H),4.232(m,1H),3.790(m,1H),3.636(m,1H),3.263(s,3H),2.946-3.028(m,1H),2.769-2.867(m,1H),2.834(s,3H),2.587-2.650(m,1H),2.467-2.520(m,1H),1.555(d,J=7.2Hz,3H),1.379(d,J=5.3Hz,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-((R)-1-(吡啶-3-基)乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3带有少量的CD3OD),δ8.518(s,1H),8.355-8.334(m,2H),8.065(s,1H),7.890(m,1H),7.678-7.613(m,2H),7.378-7.104(m,10H),5.305-5.240(m,1H),4.279-4.209(m,1H),3.773-3.706(m,1H),3.648-3.596(m,1H),3.281(s,3H),3.027-2.745(m,2H),2.843(s,3H),2.613-2.560(m,1H),2.472-2.413(m,1H),1.587(d,3H),1.427(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-(1-(吡啶-3-基)乙基)间苯二甲酰胺 m.p.84-89℃.1H NMR(300MHz,CDCl3带有少量的CD3OD),δ8.654(s,1H),8.400-8.249(m,3H),7.969(d,1H),7.838-7.735(m,2H),7.397(m,1H),7.294-7.087(m,6H),6.903-6.801(m,3H),5.297(m,1H),4.264(m,1H),3.971-3.857 (m,3H),3.725(s,3H),3.132-2.836(m,4H),1.654-1.598(m,3H). 1-((2S,3R)-3-羟基-4-(1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-(1-(3-甲氧基苯基)乙基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.031(m,1H),7.933(m,1H),7.786(m,1H),7.287-7.117(m,6H),6.984-6.706(m,7H),5.257(m,1H),4.361(m,1H),3.767(m,6H),3.608-3.725(m,2H),3.299(s,3H),3.2.924(m,1H),2.842(m,1H),2.805(m,3H),2.717-2.567(m,2H),1.613-1.574(m,3H),1.442-1.406(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((R)-1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.025-7.919(m,2H),7.809-7.765 (m,1H),7.391-7.117(m,11H),6.942-6.754 (m,3H),5.359-5.249(m,1H),4.419-4.301(m,1H),3.744-3.576(m,2H),3.762(d,3H),3.298(s,3H),2.804(s,3H),2.936-2.565(m,4H),1.613(d,1.5H),1.604(d,1.5H),1.427-1.393(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((S)-1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 m.p.76-82℃.1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.026-7.922(m,2H),7.812-7.770(m,1H),7.401-7.120(m,11H),6.933-6.756(m,3H),5.363-5.252(m,1H),4.420-4.302(m,1H),3.761-3.581(m,2H),3.764(d,3H),3.303(s,3H),2.806(s,3H),2.938-2.564(m,4H),1.629-1.598(m,3H),1.434-1.401(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((S)-1-(3-甲氧基苯基)乙基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.007(m,1H),7.913(m,1H),7.780(m,1H),7.275-7.126(m,6H),6.972-6.742(m,7H),5.297-5.195(m,1H),4.405-4.320(m,1H),3.951-3.672(m,3H),3.772(s,3 H),3.753(s,3H),3.277(s,3H),2.920-2.882(m,2H),2.791(s,5H),1.580-1.558(m,3H). N1-((2S,3R)-4-(3,5-二氟苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.007(s,1H),7.945(m,1H),7.800(m,1H),7.408-7.141(m,9H),6.909-6.837(m,2H),6.748-6.638(m,2H),5.350-5.256(m,1H),4.415-4.321(m,1H),3.832(q,J=14.1;37.2Hz,2H),3.704-3.653(m,1H),3.326(s,3H),2.990(d,2H),2.818(s,3H),2.764-2.728(m,2H),1.621(d,3H). N1-((2S,3R)-4-((R或S)-1-(3-氟苯基)乙基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.021-7.924(m,2H),7.806-7.773(m,1H),7.400-7.145(m,10H),7.101-6.861(m,3H),6.790(m,1H),5.355-5.248(m,1H),4.407-4.302(m,1H),3.797-3.682(m,1H),3.630-3.554(m,1H),3.310(d,3H),2.960-2.857(m,2H),2.813(s,3H),2.707-2.581(m,2H),1.627-1.597(m,3H),1.420-1.386(m,3H). N1-((2S,3R)-4-((S或R)-1-(3-氟苯基)乙基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 m.p.84-88℃.1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.027-7.926(m,2H),7.814-7.781(m,1H),7.407-7.169(m,10H),7.109-6.866(m,3H),6.771(m,1H),5.360-5.260 (m,1H),4.407-4.302(m,1H),3.822-3.697(m,1H),3.640-3.554(m,1H),3.321(d,3H),2.965-2.893(m,2H),2.818(s,3H),2.675-2.561(m,2H),1.636-1.607(m,3H),1.432-1.405(m,3H). N1-((R或S)-1-(3-氟苯基)乙基)-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.116(m,1H),7.941(m,1H),7.806(m,1H),7.334-7.038(m,10H),6.979-6.869(m,2H),6.824-6.768(m,1H),5.313-5.213(m,1H),4.390(m,1H),3.893-3.742(m,3H),3.764(s,3H),3.300(s,3H),2.939(m,2H),2.803(m,5H),1.625-1.571(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-异丙基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.69-7.18(m,1H),6.91-6.79(m,5H),4.90(宽s,1.3H),4.64(宽s,0.7H)4.41(m,1H),3.96-3.69(m,7H),3.00(m,2H),2.81(m,2H),2.43(s,3H),1.29-1.16(m,7H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-异丁基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.77-7.22(m,11H),7.15-6.81(m,5H)5.00(宽s,1.2H),4.66(宽s,0.7H),4.40(m,1H),3.88-2.83(m,14H),2.46(s,3H),2.20-1.96(m,2H),0.99-0.70(m,7H). N1-乙基-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.71-7.18(m,12H),7.08-6.79(m,5H),4.96(宽s,1.2H),4.63(宽s,0.7H),4.40(m,1H),3.86-3.30(m,8H),3.02-2.82(m,5H),2.44(s,3H),1.11(m,4H)。
N1-苄基-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.84-7.15(m,17H),6.91-6.79(m,4H),4.93-4.55(m,4H),4.38(m,1H),3.85-3.68(m,6H),3.00-2.80(m,5H),2.43(s,3H). N1-环戊基-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.71-7.19(m,12H),7.06-6.81(m,5H),4.88(宽s,2H),4.41(m,1H),4.03-3.68(m,7H),3.02-2.82(m,4H),2.43(s,4H),1.68-1.38(m,8H). N1-((2S,3R)-4-(2-氟-3-甲氧基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ7.93(s,1H),7.83(s,1H),7.68(s,1H),7.01-7.29(m,10H),6.92(m,1H),6.76-6.81(m,2H),5.19(m,1H),4.26(m,1H),3.71-3.82(m,2H),3.77(s,3H),3.59-3.64(m,1H),3.16(s,3H),2.63-2.78(m,4H),2.69(s,3H),1.49(m,3H). N1-((2S,3R)-4-(3-((二甲基氨基)甲基)苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.10(m,1H),7.99 (m,1H),7.96(m,1H),7.19-7.33(m,2H),7.03-7.20(m,12H),5.26(m,1H),4.88(m,1H),3.68(m,1H),3.34-3.51(m,3H),3.29(s,3H),3.17(m,1H),3.00-3.04(m,2H),2.77-2.87(m,1H),2.79(s,3H),2.63-2.70(m,1H),2.17(s,6H),1.57(m,3H) N1-((2S,3R)-4-(2-氟-6-甲氧基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 7.99(s,1H),7.90(m,1H),7.75(m,1H),7.14-7.37(m,10H),6.93(m,1H),6.82-6.85(m,1H),6.70-6.75(m,1H),5.27(m,1H),4.33(m,1H),3.76-3.82(m,2H),3.72(s,3H),3.68-3.71(m,1H),3.24(s,3H),2.71-2.87(m,4H),2.76(s,3H),1.57(m,3H) N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(2-吗啉代基乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.68(s,1H),8.04-8.06(m,1H),8.01(m,1H),7.52-7.55(m,2H),7.18-7.35(m,8H),5.35(m,1H),4.51(m,1H),4.04(m,1H),3.33-3.44(m,4H),3.28(s,3H),3.02-3.20(m,4H),2.88-2.93(m,2H),2.85(s,3H),2.52-2.58(m,2H),2.36(m,2H),2.23(m,2H),1.72(m,3H) N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(2-(吡咯烷-1-基)乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.18(s,1H),7.95(m,1H),7.86(m,1H),7.40-7.43(m,2H),7.19-7.32(m,8H),5.31(m,1H),4.46(m,1H),3.75(m,1H),3.31(s,3H),3.06-3.13(m,1H),2.94-3.01(m,1H),2.80-2.89(m,4H),2.82(s,3H),2.69-2.71(m,2H),2.58-2.62(m,4H),1.74-1.77(m,4H),1.64(m,3H) N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(2-(哌啶-1-基)乙基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.12(s,1H),7.95(m,1H),7.86(m,1H),7.23-7.40(m,10H),5.31(m,1H),4.46(m,1H),3.69(m,1H),3.31(s,3H),3.06-3.13(m,1H),2.91-3.00(m,2H),2.70-2.88(m,3H),2.81(s,3H),2.43-2.48(m,2H),2.32-2.39(m,4H),1.62(m,3H),1.48-1.58(m,4H),1.39-1.42(m,2H) N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(2-(吡咯烷-1-基)乙基氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 7.72(m,1H),7.42(m,2H),7.17-7.29(m,6H),6.89(s,1H),4.96(s,2H),4.42(m,1H),3.66(m,1H),2.99-3.12(m,6H),2.76-2.82(m,4H),2.60-2.64(m,2H),2.56(m,4H),2.44(s,3H),1.78(s,3H) N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯-2-基)甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.29(m,1H), 8.00(m,1H),7.91(m,1H),7.47-7.49(m,2H),7.21-7.34(m,8H),6.77(m,1H),6.22(m,1H),6.10(m,1H),5.36(m,1H),5.22(m,2H),4.43(m,1H),3.98(m,2H),3.86(m,1H),3.45-3.52(m,2H),3.32(s,3H),2.79-3.02(m,4H),2.83(s,3H),1.69(m,3H),0.89(m,2H),0.00(s,9H) N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-4-基)甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 7.96-7.98(m,2H),7.75(m,1H),7.21-7.45(m,11H),6.90(s,1H),5.36(m,1H),5.30(s,2H),4.31(m,1H),3.87(m,2H),3.57(m,1H),3.48(m,2H),3.31(s,3H),3.01(m,2H),2.83(s,3H),2.73(m,2H),1.65(m,3H),3.90(m,2H),0.00(s,9H) N1-((2S,3R)-4-((1H-咪唑-4-基)甲基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.18(s,1H),7.91(m,1H),7.79(m,1H),7.18-7.47(m,11H),7.03(s,1H),5.28(m,1H),4.24(m,1H),3.91(m,1H),3.29(s,3H),3.27-3.33(m,2H),2.83-3.18(m,4H),2.87(s,3H),1.62(m,3H) N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.19(s,1H),8.01(m,1H),7.84(m,1H),7.17-7.34(m,10H),6.94(m,1H),6.90(m,1H),5.33(m,1H),5.25(s,2H),4.40(m,1H),3.74-3.94(m,2H),3.60(m,1H),3.48-3.55(m,2H),3.29(s,3H),2.93-3.00(m,1H),2.79-2.90(m,3H),2.81(s,3H),1.55(m,3H),0.89-0.95(m,2H),0.00(s,9H) N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((3-甲基-1H-吡唑-5-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 8.22(s,1H),8.12(m,1H),8.09(m,1H),7.16-7.44(m,10H),5.99(s,1H),5.38(m,1H),4.96(m,1H),3.85(m,1H),3.53-3.66(m,2H),3.40(s,3H),3.30-3.36(m,1H),3.11-3.22(m,1H),2.91(s,3H),2.76-2.98(m,2H),2.30(s,3H),1.70(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-甲基呋喃-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.093(s,1H),7.946(s,1H),7.850(s,1H),7.054-7.37(m,10H),6.094(m,1H),5.875(m,1H),5.343-5.248(m,1H),4.428-4.334(m,1H),3.777-3.667(m,3H),3.286(s,3H),2.951-2.750(m,4H),2.789(s,3H),2.167(s,3H),1.583(d,J=7.2Hz,3H). (2R,3S)-2-羟基-3-(3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-((R)-1-苯基乙基氨甲酰基)苯甲酰氨基)-4-苯基丁基(3-甲氧基苄基)氨基甲酸叔丁酯 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ7.951(m,1H),7.885(s,1H),7.771(s,1H),7.405-7.133(m,11H),6.768(m,3H),5.310(m,1H),4.457-4.298(m,3H),3.910(m,1H),3.753(s,3H),3.431-3.327(m,2H),3.328(s,3H),2.972(m,2H),2.829(s,3H),1.617(d,J=6.9Hz,3H),1.490(s,9H). N1-((2S,3R)-4-((S)-1-环己基乙基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.622(m,1H),7.956(m,2H),7.514-7.126(m,10H),5.307-5.215(m,1H),4.230(m,1H),3.849(m,1H),3.274(s,3H),3.079-2.812(m,4H),2.698(m,1H),1.713(d,J=6.93Hz,3H),1.668-1.428(m,3H),1.690(d,J=6.6Hz,3H),1.253-0.862(m,8H). 4-(((2R,3S)-2-羟基-3-(3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-((R)-1-苯基乙基氨甲酰基)苯甲酰氨基)-4-苯基丁基氨基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯 1HNMR(300MHz,CDCl3),δ8.105(s,1H),7.901(m,1H),7.792(m,1H),7.405-7.139(m,15H),5.326-5.231(m,1H),5.108(s,2H),4.377-4.278(m,1H),4.202-4.078(m,2H),3.748(m,1H),3.256(s,3H),3.024-3.608(m,6H),2.777(s,3H),2.584 (m,2H),1.711(m,3H),1.612(d,J=6.9 Hz,3H),1.125(m,2H). N1-((R)-1-环己基乙基)-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.023(s,1H),7.905(s,1H),7.780(m,1H),7.274-7.134(m,5H),6.893-6.772(m,4H),4.377-4.312(m,1H),4.050-3.977(m,1H),3.867-3.712(m,3H),3.768(s,3H),3.315(s,3H),3.014-2.733(m,4H),2.846(s,3H),1.802-1.605(m,6H),1.468-1.369(m,1H),1.238-0.974(m,4H),1.188(d,J=6.6Hz,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(哌啶-4-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD),δ8.226(s,1H),7.844(s,1H),7.757(s,1H),7.384-7.041(m,10H),5.184(m,1H),4.268(m,1H),4.126(m,1H),3.174(s,3H),2.778(s,3H),3.373-2.775(m,10H),2.118-1.861(m,3H),1.578(d,J=6.9Hz,3H),1.567-1.421(m,2H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(哌啶-3-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD),δ7.879-7.678(m,3H),7.528-7.115(m,10H),5.261-5.142(m,1H),4.479(m,1H),3.892(m,1H),3.324(s,3H),3.328-2.568(m,10H),2.875(s,3H),1.992-1.133(m,3H),1.560(d,J=6.6Hz,3H),1.536-1.362(m,2H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((1-甲基哌啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD),δ7.939-7.715(m,3H),7.528-7.115(m,10H),5.300-5.203(m,1H),3.834(m,1H),3.309(s,3H),3.052-2.590(m,6H),2.484-2.267(m,4H),2.355(s,3H),2.011-1.762(m,3H),1.572(br,s,3H),1.536-1.362(m,2H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD),δ7.961(s,1H),7.881(m,1H),7.685(m,1H),7.401-7.089(m,10H),5.276(m,1H),4.398(m,1H),3.862(m,1H),3.315(s,3H),3.280-2.646(m,6H),2.840(s,3H),2.278(s,3H),2.356-2.117(m,3H),2.019-1.674(m,4H),1.583(d,J=6.9Hz,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(((R)-1-异丙基吡咯烷-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD),δ7.945(s,1H),7.869(s,1H),7.686(s,1H),7.390-7.098(m,10H),5.269(m,1H),4.403(m,1H),3.672(m,1H),3.308(s,3H),3.056-2.659(m,6H),2.836(s,3H),2.447(m,4H),2.011-1.707(m,4H),1.576(d,J=6.9Hz,3H),0.953(d,J=6.3Hz,3H),0.921(d,J=6.3Hz,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((3-甲氧基环己基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.273-7.879(m,3H),7.395-7.061(m,10H),5.263(m,1H),4.249(m,1H),4.029(m,1H),3.496(m,1H),3.287-3.178(m,6H),3.139-2.677(m,6H),2.771(s,3H),2.077-1.466(m,12H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((1-异丁基哌啶-4-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺二盐酸盐 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD),δ8.272-7.836(br,3H),7.426-7.032(m,10H),5.172(br,1H),4.212(br,1H),3.882(br,1H),3.243(br,9H),2.768(br,7H),1.955(br,5H),1.569(br,3H),1.207(br,2H),0.959(br,6H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((1-(2-甲氧基苄基)哌啶-4-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺二盐酸盐 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.108(m,1H),7.894(m,1H),7.778(m,1H),7.395-7.088(m,12H),6.933-6.841(m,2H),5.244(m,1H),4.279(m,1H),3.814(m,1H),3.788(s,3H),3.642(s,2H),3.261(s,3H),3.136-2.513(m,10H),2.818(s,3H),2.141(m,2H),1.690(m,1H),1.586(d,J=7.2Hz,3H),1.370(m,2H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((1-(3-甲氧基苄基)哌啶-4-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.012(m,1H),7.872(m,1H),7.742(m,1H),7.369-7.081(m,11H),6.850-6.750(m,3H),5.245(m,1H),4.302-4.234(m,1H),3.764(s,3H),3.730(m,1H),3.436(s,2H),3.256(s,3H),3.104-2.814(m,6H),2.816(s,3H),2.725(m,2H),2.496(m,2H),1.932(m,2H),1.653(m,2H),1.564(d,J=6.9Hz,3H),1.461(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((R)-1-(3-甲氧基苯基)乙基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.039(m,1H),7.887(m,1H),7.763(m,1H),7.260-7.092(m,7H),6.966-6.742(m,6H),5.226(m,1H),4.295(m,1H),3.844-3.716(m,8H),3.272(s,3H),3.030-2.714(m,4H),2.823(s,3H),1.562(d,J=6.9Hz,3H). N1-((2S,3R)-4-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.100(m,1H),7.901(m,1H),7.790(m,1H),7.404-7.108(m,10H),6.800-6.696(m,3H),5.896(s,2H),5.273 (m,1H),4.316(m,1H),3.806-3.684(m,3H),3.280(s,3H),3.024-2.714(m,4H),2.815(s,3H),1.597(d,J=6.9Hz,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(3-(三氟甲基)苄氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.038(m,1H),7.896(m,1H),7.770(m,1H),7.565-7.111(m,14H),5.277 (m,1H),4.330(m,1H),3.924-3.722(m,3H),3.283(s,3H),2.992-2.761(m,4H),2.818(s,3H),1.584(d,J=6.9Hz,3H). N1-((2S,3R)-4-(3-(二氟甲氧基)苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.020(m,1H),7.888(m,1H),7.764(m,1H),7.384-6.975(m,14H),6.746(s,0.3H),6.500(s,0.4H),6.253(s,0.3H),5.263(m,1H),4.312(m,1H),3.861-3.731(m,3H),3.285(s,3H),3.021-2.801(m,2H),2.833(s,3H),2.761(m,2H),1.578(d,J=7.2Hz,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((S)-1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ7.987(m,1H),7.874(m,1H),7.727(m,1H),7.378-7.076(m,11H),6.850-6.721(m,3H),5.255(m,1H),4.268(m,1H),3.744(s,3H),3.739-3.635(m,2H),3.272(s,3H),3.002-2.778(m,2H),2.832(s,3H),2.608(m,2H),1.570(d,J=6.9Hz,3H),1.377(d,J=6.6Hz,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(3-(三氟甲基)苄氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ7.693-7.368(m,8H),7.264-7.131(m,5H),6.884(s,1H),4.943(br,1.5H),4.638(br,0.5H),4.339(m,1H),3.907-3.711(m,3H),3.097-2.881(m,5H),2.784(d,J=5.2Hz,2H),2.430(s,3H). N1-((2S,3R)-4-(3-(二氟甲氧基)苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ7.693-7.116(m,13H),6.876(s,1H),6.753(s,0.28H),6.507(s,0.44H),6.261(s,0.28H),4.93 1(br,1.3H),4.627(br,0.7H),4.328(m,1H),3.827-3.688(m,3H),3.087-2.859(m,5H),2.756(d,J=4.5Hz,2H),2.417(s,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(2-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ7.693-7.098(m,10H),6.927-6.862(m,4H),4.926(br,1.3H),4.623(br,0.7H),4.262(m,1H),4.105-3.934(m,3H),3.827(s,3H),3.177-2.787(m,5H),2.414(s,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(3-(三氟甲氧基)苄氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ8.021(m,1H),7.890 (m,1H),7.765(m,1H),7.378-7.072(m,14H),5.266(m,1H),4.330(m,1H),3.860-3.714(m,3H),3.276(s,3H),3.001-2.698(m,4H),2.826(s,3H),1.569(d,J=6.6Hz,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(4-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ7.673-7.353(m,4H),7.266-7.112(m,8H),6.877-6.812(m,3H),4.924(br,1.4H),4.620(br,0.6H),4.292(m,1H),3.827-3.702(m,3H),3.751(s,3H),3.073-2.735(m,7H),2.410(s,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(3-(三氟甲氧基)苄氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3),δ7.672-7.505(m,3H),7.41 1-7.076(m,10H),6.878(s,1H),4.930(br,1.3H),4.627(br,0.7H),4.320(m,1H),3.842-3.699(m,3H),3.083-2.852(m,5H),3.177-2.787(m,5H),2.754(d,J=4.5Hz,2H),2.416(s,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-1-苯基-4-(喹啉-3-基甲基氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 8.91-8.92(m,1H),8.03-8.07 (m,3H),7.93(s,1H),7.69-7.75(m,2H),7.64-7.69(m,1H),7.50-7.55(m,1H),7.32-7.41(m,3H),7.17-7.29(m,9H),7.04-7.06(m,1H),5.31-5.38(m,1H),4.34-4.44(m,1H),4.13-4.17(d,1H),3.90-3.95(d,1H),3.64-3.70(m,1H),3.30(s,3H),2.96-2.99(d,2H),2.72-2.84(m,5H),1.94(s,1H),1.62-1.65(d,3H) N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((3-甲基异唑-5-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3) δ7.65-7.83(m,2H),7.48-7.58(m,1H),7.39-7.44(m,1H),7.14-7.29(m,6H),6.80-6.99(m,2H),5.99(s,1H),4.96(s,2H),4.33-4.45(m,1H),3.83-3.94(m,2H),3.62-3.72 (m,1H),2.94-3.15(m,6H),2.73-2.85(m,2H),2.44(s,3H),2.26(s,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.72-7.77(m,2H),7.63-7.66(d,1H),7.16-7.32(m,6H),6.89-6.92(m,4H),6.79-6.82(m,1H),4.95(s,2H),4.32-4.44 (m,1H),3.78-3.90(m,5H),3.65-3.75(m,1H),3.33(s,3H),3.01-3.18(m,4H),2.97-2.99(d,2H),2.76-2.89(m,6H),2.45(s,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-4,6-二甲基-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.34-7.36(d,3H),7.11-7.32(m,7H),7.04-7.11(m,1H),7.02(s,1H),6.92(s,1H),6.85-6.87(m,2H),6.77-6.80(m,1H),6.38-6.51(m,1H),6.20-6.31(m,1H),5.18-5.29(m,1H),4.25-4.37(m,1H),3.72-3.83 (m,5H),3.63-3.71(m,1H),3.03-3.09(m,1H),2.71-2.80(m,5H),2.32(s,3H),2.09(s,3H),1.54-1.56(d,3H). N1-((2S,3R)-4-((5-乙基吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.48(s,1H),8.20-8.21(d,1H),8.13(s,1H),8.01-8.04(d,1H),7.97(s,1H),7.70-7.73(m,1H),7.41-7.44(m,2H),7.17-7.36(m,10H),6.77-6.90(m,1H),5.33-5.42(m,1H),4.30-4.42(m,1H),4.01-4.06(m,1H),3.65-3.69(d,1H),3.55-3.63(m,1H),3.32(s,3H),3.00-3.02(d,2H),2.80(s,3H),2.55-2.62(m,4H),2.02(s,1H),1.65-1.67(d,3H),1.17-1.22(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-甲基异唑-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.03(s,1H),7.95(s,1H),7.82(s,1H),7.63-7.74(m,1H),7.15-7.34(m,12H),6.90-7.00(m,1H),5.96(s,1H),5.25-5.35(m,1H),4.33-4.45(m,1H),3.77-3.88(m,2H),3.66-3.74 (m,1H),3.29(s,3H),2.84-3.02(m,4H),2.80(s,3H),2.38(s,3H),1.57-1.59(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-甲基异唑-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 7.63-7.84(m,2H),7.52-7.63 (m,1H),7.40-7.45(m,1H),7.17-7.30(m,5H),6.90(s,1H),6.69-6.86(m,2H),5.97(s,1H),4.97(s,2H),4.34-4.40(m,1H),3.85(s,2H),3.61-3.71(m,1H),2.96-3.16(m,5H),2.80-2.81(d,2H),2.45(s,3H),2.38(s,3H),1.82(s,1H). N1-((2S,3R)-4-((5-氟吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.44(s,1H),8.26-8.27(d,1H),8.04(s,1H),7.96(s,1H),7.74(s,1H),7.18-7.39(m,14H),6.81-6.98(m,1H),5.29-5.40(m,1H),4.30-4.39(m,1H),4.00-4.05(d,1H),3.72-3.76(d,1H),3.58-3.66(m,1H),3.32-3.33(m,3H),2.93-3.09(m,2H),2.82(s,3H),2.60-2.71(m,2H),1.63-1.65(d,3H). 4,6-二氟-N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.70-8.73(d,1H),7.72-7.74(d,1H),7.36-7.37(d,3H),7.16-7.33(m,8H),6.96-6.98(m,2H),6.73-6.84(m,2H),6.62-6.66(d,1H),5.28-5.39(m,1H),4.36-4.47(m,1H),3.88-3.95(m,4H),3.73-3.84(m,2H),3.64-3.73(m,1H),2.94-3.12(m,2H),2.88-2.93(m,1H),2.75-2.81(m,1H),2.00(s,1H),1.57-1.59(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-异丙氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.17(s,1H),8.11(s,1H),7.68-7.86(m,1H),7.63-7.66(d,1H),7.49-7.60(m,1H),7.38-7.43(m,1H),7.27-7.15(m,6H),6.94-7.05(m,1H),6.89(s,1H),4.96(s,2H),4.52-4.63(m,1H),4.28-4.44(m,1H),3.75-3.85(m,2H),3.61-3.74(m,1H),2.88-3.16(m,6H),2.80(s 3H),2.45(s,3H),1.32-1.34(d,6H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-异丙氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 8.23(s,1H),8.16(s,1H),8.06-8.07(d,1H),7.95-8.02(m,1H),7.74(s,1H),7.42-7.45(m,2H),7.17-7.35(m,12H),7.0-7.10(m,1H),5.30-5.44(m,1H),4.48-4.62(m,1H),4.29-4.40(m,1H),4.03-4.08(d,1H),3.62-3.84(m,2H),3.31(s,3H),2.93-3.08(m,2H),2.80(s,3H),2.65-2.73(m,2H),1.65-1.67(d,3H),1.29-1.31(d,6H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-异丙基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.49(s,1H),8.25(s,1H),8.17(s,1H),7.93-8.05(m,2H),7.74(s,1H),7.42-7.50(m,2H),7.14-7.35(m,9H),6.99-7.02(d,1H),5.32-5.43(m,1H),4.29-4.41(m,1H),4.03-4.08(d,1H),3.60-3.82(m,2H),3.31(s,3H),2.98-3.00(d,2H),2.76-2.94(m,5H),2.62-2.69(m,2H),2.03(s,1H),1.65-1.67(d,3H),1.20-1.26(m,6). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(1-(3-甲基异唑-5-基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.14(s,1H),7.98-7.99(m,1H),7.73-7.77(m,1H),7.54-7.57(d,1H),7.07-7.42(m,11H),6.85-6.94(m,1H),5.95(s,1H),5.27-5.41(m,1H),4.31-4.45(m,1H),4.03-4.15(m,1H),3.89-4.00(m,1H),3.54-3.65(m,1H),3.33(s,3H),2.96-3.04(m,2H),2.83(s,3H),2.58-2.77(m,2H),2.16-2.19(m,3H),1.61-1.64(m,3H),1.48-1.54(m,3H). N1-((2S,3R)-4-((5-乙氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.23(s,1H),8.16(s,1H),8.04-8.10(m,1H),7.97-8.04(m,1H),7.95(s,1H),7.73(s,1H),7.42-7.44(m,2H),7.12-7.33(m,12H),5.29-5.41(m,1H),4.28-4.40(m,1H),3.95-4.08(m,3H),3.63-3.82(m,2H),3.28(s,3H),2.88-3.06(m,2H),2.79(s,3H),2.63-2.70(m,2H),1.64-1.66(d,3H),1.34-1.39(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-甲氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.19(s,1H),8.14(s,1H),7.71(s,1H),7.61-7.64(m,1H),7.47-7.57(m,1H),7.35-7.40(m,1H),7.14-7.26(m,7H),7.04(s,1H),6.88(s,1H),4.96(s,2H),4.27-4.42(m,1H),3.74-3.88(m,5H),3.65-3.74(m,1H),3.36(s,1H),2.91-3.15(m,5H),2.78-2.79(d,2H),2.44(s,3H). N1-((2S,3R)-4-((5-乙氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.21(s,1H),8.16(s,1H),7.71-7.87(m,1H),7.62-7.71(m,1H),7.47-7.57(m,1H),7.30-7.47(m,2H),7.13-7.30(m,6H),6.90(s,1H),4.96(s,2H),4.28-4.43(m,1H),4.09-4.02(m,2H),3.86-3.97(m,2H),3.69-3.82(m,1H),2.93-3.16(m,7H),2.77-2.93(m,2H),2.45(s,3H),1.38-1.43(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-异丁基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.53(s,1H),8.28-8.31(m,1H),8.20(s,1H),7.94(s,1H),7.76(s,1H),7.51(s,1H),7.40-7.45(m,2H),7.13-7.29(m,11H),5.26-5.40(m,1H),4.18-4.36(m,1H),4.05-4.18(m,1H),3.70-3.95(m,2H),3.27-3.35(m,1H),3.24(s,3H),2.76-3.07(m,7H),2.38-2.40(d,2H),1.70-1.91(m,2H),1.64-1.67(d,2H),0.82-0.84(d,6H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((4-甲氧基吡啶-2-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.40-8.53(m,1H),8.20-8.27(m,1H),8.00(s,1H),7.84-7.98(m,2H),7.31-7.45(m,2H),7.08-7.31(m,12),6.66-6.75(m,2H),5.26-5.39(m,1H),4.36-4.52(m,1H),3.59-4.04(m,5H),3.26(s,3H),2.81-3.30(m,3H),2.78(s,3H),2.02(s,1H),1.59-1.61(d,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-甲基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.36(s,1H),8.32(s,1H),7.72-7.81(m,1H),7.63-7.66(m,1H),7.51(s,2H),7.36-7.41(m,1H),7.00-7.26(m,6H),6.88(s,1H),4.95(s,2H),4.28-4.42(m,1H),3.61-3.91(m,4H),2.89-3.11(m,5H),2.71-2.89(m,2H),2.44(s,3H),2.30(s,3H),2.02(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-异丁基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.38(s,1H),8.29(s,1H),7.64-7.82(m,1H),7.63-7.66(m,1H),7.49-7.55(m,1H),7.47(s,1H),7.36-7.41(m,1H),7.13-7.26(m,7H),7.02-7.13(m,1H),6.88(s,1H),4.95(s,2H),3.77-3.88(m,2H),3.66-3.76(m,1H),2.91-3.16(m,6H),2.80-2.81(d,2H),2.43-2.45(m,5H),1.77-1.89(m,1H),0.87-0.89(d,6H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-异丁氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.20-8.21(d,1H),8.14(s,1H),7.69-7.83(m,1H),7.65-7.67(d,1H),7.49-7.58(m,1H),7.37-7.43(m,1H),7.15-7.27(m,7H),6.92-7.03(m,1H),6.89(s,1H),4.96(s,2H),4.30-4.45 (m,1H),3.79-3.93H),2H),3.74-3.76(d,2H),2.93-3.17(m,7H),2.77-2.87(m,2H),2.45(s,3H),2.01-2.17(m,1H),1.01-1.03(d,6H). N1-((2S,3R)-4-((5-(二甲基氨基)吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.35-8.38(d,1H),8.24(s,1H),8.01(s,1H),7.95(s,2H),7.80-7.86(m,1H),7.73(s,1H),7.38-7.45(m,2H),7.13-7.31(m,11H),6.88-6.97(m,1H),5.26-5.44(m,1H),4.28-4.39(m,1H),4.17-4.28(m,1H),3.93-4.06(m,1H),3.60-3.82(m,3H),3.26(s,3H),2.97(s,3H),2.82-2.91(m,4H),2.77(s,3H),1.64-1.66(d,3H). N1-((2S,3R)-4-((5-乙基吡啶-3-基)甲基氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHZ,CDCl3)δ8.34-8.37(m,2H),7.68-7.84(m,1H),7.59-7.68(m,1H),7.51(s,2H),7.36-7.41(m,1H),7.10-7.27(m 6H),6.99-7.10(m,1H),6.88(s,1H),4.95(s,2H),4.29-4.43(m,1H),3.77-3.87(m,2H),3.63-3.76(m,1H),2.90-3.16(m,6H),2.79-2.81(d,2H),2.58-2.65(m,2H),2.44(s,3H),1.19-1.25(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-异丁氧基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.24(s,1H),8.18(s,1H),8.00-8.13(m,2H),7.95(s,1H),7.73(s,1H),7.42-7.44(m,2H),7.10-7.36(m,11H),5.28-5.42(m,1H)4.19-4.39(m,1H),3.99-4.19(m,1H),3.62-3.85(m,4H),3.28(s,3H),2.88-3.08(m,2H),2.79-2.84(m,4H),(2.64-2.76,2H),1.96-2.12(1H),1.64-1.67(d,3H),0.98-1.00(d,6H). N1-((2S,3R)-4-(3-乙氧基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.13(s,1H),7.92(s,1H),7.81(s,1H),7.67-7.78(m,1H),7.38-7.41 (m,2H),7.11-7.33(m,12H),6.87-6.93(m,2H),6.76-6.85(m,1H),5.24-5.36(m,1H),4.28-4.39(m,1H),3.94-4.01(m,2H),3.76-3.92(m,3H),3.26(s,3H),2.78-2.91(m,4H),2.76(s,3H),1.61-1.63(d,3H),1.34-1.38(m,3H). N1-((2S,3R)-4-(3-乙氧基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.70-7.86(m,1H),7.65-7.67(m,1H),7.48-7.60(m,1H),7.36-7.41(m,1H),7.12-7.29(m,8H),6.84-6.93(m,2H),6.78-6.82(m,1H),4.96(s,2H),4.33-4.45(m,1H),3.97-4.04(m,2H),3.77-3.89(m,2H),3.66-3.79 (m,3H),2.92-3.16(m,5H),2.73-2.92(m,2H),2.44(s,3H),1.36-1.41(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-异丙氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ.7.71-7.85(m,1H),7.60-7.71(m,1H),7.48-7.60(m,1H),7.36-7.41(m,1H),7.13-7.29(m,7H),6.84-6.92(m,3H),6.77-6.81(m,1H),4.96(s,2H),4.48-4.60(m,1H),4.32-4.44(m,1H),3.73-3.86(m,2H),3.68-3.77(m,3H),2.92-3.16(m,5H),2.74-2.91(m,2H),2.44(s,3H),1.30-1.32(d,6H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-异丁氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.75-7.86(m,1H),7.66-7.69(m,1H),7.51-7.60 (m,1H),7.38-7.43(m,1H),7.15-7.33(m,6H),6.86-6.94(m,4H),6.81-6.84(m,1H),4.97(s,2H),4.34-4.46(m,1H),2.82-3.95(m,2H),3.64-3.78(m,4H),2.95-3.18(m,5H),2.75-2.95(m,2H),2.45(s,3H),1.99-2.13(m,2H),1.00-1.02(d,6H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-异丙基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.38(s,2H),7.69-7.84(m,1H),7.63-7.66 (m,1H),7.48-7.59(m,1H),7.39-7.43(m,1H),7.15-7.29(m,7H),6.70-6.90(m,2H),4.96(s,2H),4.32-4.43(m,1H),3.77-3.87(m,2H),3.64-3.74(m,1H),2.95-3.16(m,6H),2.85-2.96(m,1H),2.79-2.80(d,2H),2.44(s,3H),1.23-1.26(d,6H). N1-((2S,3R)-4-(3-乙基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.18(t,3H,J=7.2Hz),1.58(d,3H,J=6.9Hz),2.56-2.84(m,9H),3.21(s,3H),3.67-3.85(m,3H),4.29-4.40(m,1H),5.23-5.32(m,1H),7.05-7.36(m,14H),7.79(s,1H),7.91(s,1H),8.06(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-异丙基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.19(s,3H),1.21(s,3H),1.59(d,3H,J=6.6Hz),2.77-2.94(m,8H),3.27(s,3H),3.72-3.88(m,3H),4.22-4.41(m,1H),5.26-5.33(m,1H),7.11-7.39(m,14H),7.77(s,1H),7.92(s,1H),8.07(s,1H). 2-氟-2-氟-N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.85(s,3H),2.90-3.18(m,7H),3.81(s,3H),3.99-4.60(m,5H),4.92-5.30(m,3H),6.86(m,4H),7.17-7.45(m,7H),7.45-7.52(m,1H),7.81-7.83(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-异丙基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.21(s,3H),1.23(s,3H),2.44(s,3H),2.75-3.20(m,8H),3.63-3.86(m,3H),4.35-4.43(m,1H),4.92(s,2H),6.82(s,1H),7.12-7.25 (m,10H),7.38-7.42(m,1H),7.7.46-7.83(m,2H). N1-((2S,3R)-4-(3-(氟甲基)苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.62(d,3H,J=7.2Hz),2.80-3.25(m,7H),3.31(s,3H),3.64-3.93(m,3H),4.15-4.39(m,1H),5.23-5.41(m,3H),7.16-7.46(m,14H),7.80(s,1H),7.93(s,1H),8.03(s,1H). N1-((2S,3R)-4-(3-(氟甲基)苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.41(s,3H),2.78-3.08(m,7H),3.74-3.85(m,3H),4.26-4.36(m,1H),4.93(s,2H),5.24-5.41(d,2H,J=47.4Hz),6.88(s,1H),7.1 5-7.41(m,10H),7.53-7.66(m,3H). N1-((2S,3R)-4-(3-乙基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.17-1.22(t,3H,J=7.8Hz),2.43(s,3H),2.57-2.65(q,2H,J=7.8Hz),2.75-3.10(m,7H),3.71-3.83(m,3H),4.32-4.41(m,1H),4.95(s,2H),6.87(s,1H),7.13-7.23(m,10H),7.35-7.40(m,1H),7.63-7.73(m,2H). 3-(2,2-二甲基-1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)肼羰基)-N-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)苯甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.43(s,3H),2.72-3.02(m,4H),3.43(s,6H),3.46-3.73(m,6H),4.28-4.38(m,1H),5.17(s,2H),6.75-6.88(m,4H),6.99(s,1H),7.09-7.26(m,6H),7.66-7.69(m,1H),7.99-8.02 (m,1H),8.17(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.42(s,3H),2.79-3.16(m,11H),3.76(s,3H),3.81-3.90(m,1H),4.25-4.34(m,1H),4.93(s,2H),6.73-6.78(m,3H),6.88(s,1H),7.13-7.25(m,7H),7.42-7.46(m,1H),7.69-7.72(m,2H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(4-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.54(d,3H,J=7.2Hz),2.67-2.87(m,11H),3.17(s,3H),3.67(s,3H),3.71-3.78(s,1H),4.22-4.36(m,1H),5.13-5.25(m,1H),6.69-6.71(d,2H,J=7.4Hz),6.97-7.33(m,13H),7.73(s,1H),7.84(s,1H),8.10(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(2-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.69(d,3H,J=7.2Hz),2.78(s,3H),2.97-3.31(m,11H),3.73 9s,3H),3.89-4.16(m,1H),4.35-4.43(m,1H),5.22-5.34(m,1H),6.76-6.81(m,1H),7.02-7.25(m,14H),7.46-7.49(m,1H),7.95-7.98(m,1H),8.57(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-异丁基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)0.79(d,6H,J=6.2Hz),1.53(d,3H,J=7.2Hz),1.64-1.82(m,1H),2.34-2.82(m,9H),3.21(s,3H),3.67-3.3.82(m,3H),4.22-4.39(m,1H),5.12-5.30,m,1H),6.97-7.30(m,14H),7.74(s,1H),7.85(s,1H),8.00(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((R)-1-(4-甲基噻唑-2-基)乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.88-1.94(br d,3H),2.65(s,3H),2.98-3.36(m,7H),3.93-4.07(m,6H),4.30-4.33(m,1H),4.46-4.54(m,1H),6.99-7.17(m,3H),7.33-7.47(m,4H),7.33-7.47(m,4H),7.63-7.68(m,1H),7.89-7.93(m,2H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-异丁基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)0.9(d,6H,J=6.2Hz),1.78-1.92(m,1H),2.45(s,3H),2.74-3.16(m,9H),3.78-3.92(m,3H),4.30-4.38(m,1H),4.93(s,2H),6.84-7.35(m,11H),7.44-7.59(m,1H),7.72-7.76(m,2H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-(3-甲氧基-4-甲基苯基)丙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.63(d,3H,J=.3 Hz),1.82-2.12(m,6H),2.34-2.62(m,3H),2.82-2.94(m,7H),2.96-3.10(m,2H),3.82(s,3H),4.68-4.73(m,1H),5.21-5.30(m,1H),6.60(s,1H),7.26-7.30(m,12H),8.36-8.38(m,2H),8.96(s,1H). N1-((2S,3R)-1-(3,5-二氟苯基)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.40(s,3H),2.72-2.85(m,3H),2.98-3.06(m,4H),3.67-3.84(m,6H),4.22-4.28(m,1H),4.93(s,2H),6.53-6.77(m,1H),6.78-7.05(m,6H),7.24-7.26(m,1H),7.38-7.43(m,1H),7.69-7.72(m,2H). N1-((2S,3R)-1-(3,5-二氟苯基)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.61(d,3H,J=7.2H),2.71-2.87(m,7H),3.31(s,3H),3.71-3.90(m,6H),4.25-4.36(m,1H),5.22-5.33(m,1H),6.58-6.91(m,7H),7.18-7.27(m,5H),7.83(s,1H),7.94(s,1H),8.03(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-(噻唑-4-基)丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.62(d,3H,J=7.2Hz),2.65-2.80(m,5H),3.01-3.05(m,1H),3.19-3.41(m,4H),3.71-3.83(m,6H),4.08-4.34(m,1H),5.29-5.38(m,1H),6.76-6.96(m,4H),7.14-7.25(m,6H),8.01(s,1H),8.05(s,1H),8.18(s,1H),8.75(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-羟基-4-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.63(d,3H,J=7.2Hz),2.60-2.89(m,11H),3.18(s,3H),3.64-3.78(m,4H),4.22-4.34(s,1H),5.14-5.32(m,1H),6.51-6.67(m,3H),7.06-7.38(m,10H),7.69(s,1H),7.86(s,1H),8.10(s,1H). N1-((2S,3R)-4-(3-乙炔基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)1.62(d,3H,J=7.2Hz),2.74-2.94(m,7H),3.28(s,1H),3.30(s,3H),3.71-3.88(m,3H),4.32-4.38(m,1H),5.25-5.34(m,1H),7.17-7.44(m,14H),7.80(s,1H),7.92(s,1H),8.05(s,1H). N1-((2S,3R)-4-(3-乙炔基苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.21(s,3H),2.54-2.86(m,10H),3.49-3.61(m,3H),4.07-4.13(m,1H),4.72(s,2H),6.67(s,1H),6.95-7.22(m,10H0,7.40-7.46(m,3H). N1-((2S,3R)-4-(苄氨基)-3-羟基-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.43(s,3H),2.80-3.09(m,7H),3.63-3.87(m,3H),4.28-4.37(m,1H),4.94(s,2H),6.88(s,1H),7.21-7.70(m,14H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(2-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.40(s,3H),2.85-3.19(m,11H),3.66-3.78(m,4H),4.23-4.32(m,1H),4.91(s,2H),6.81-6.87(m,4H),7.09-7.20(m,7H),7.39-7.43(m,1H),7.69-7.72(m,2H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(4-甲氧基苯乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.41(s,3H),2.72-3.19(m,11H),3.75(s,3H),3.82-3.92(s,1H),4.59-4.68(m,1H),4.93(s,1H),6.79-6.88(m,3H),7.08-7.27(m,8H),7.40-7.44(m,1H),7.69-7.72(m,2H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)-5-硝基间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.41(s,3H),2.70-2.98(m,2H),2.98-3.18(m,5H),3.70-3.73(m,6H),4.25-4.30(m,1H),4.92(s,2H),6.74-6.89(m,4H),7.10-7.22(m,6H),8.03(s,1H),8.35(s,1H),8.52(s,1H) N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(甲磺酰基甲基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300Mz,CDCl3)1.67(d,3H,J=7.2Hz),2.78(s,3H),2.86-2.97(m,4H),3.80-3.94(m,6H),4.20(s,2H),4.42-4.46(m,1H),5.30-5.39(m,1H),6.85-6.96(m,3H),7.21-7.47(m,11H),7.78(s,1H),7.94(s,1H),8.19(s,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(N-(3-甲氧基苄基)-4-(2-吗啉代基乙基氨基)-4-氧代丁酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.60(d,3H,J=7.2Hz),2.34-2.67(m,10H),2.84(s,3H),2.96-3.04(m,2H),3.20-3.36(m,2H),3.32(s,3H),3.40-3.49(m,1H),3.60-3.76(m,5H),3.76(s,3H),3.90-4.06(m,1H),4.32-4.45(m,1H),4.58-4.64(m.2H)5.26-5.38(m,1H),6.46-6.68(m,1H),6.66-6.95(m,4H),7.10-7.42(m,10H),7.86-7.89(m,1H),7.96-7.99(m,1H),8.04-8.08(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(N-(3-甲氧基苄基)-4-氧代-4-(吡啶-3-基甲基氨基)丁酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.48(d,3H,J=6.6Hz),2.34-3.32(m,6H),2.80(s,3H),3.22(s,3H),3.76(s,3H),3.80-4.78(m,8H),5.20-5.32(m, 1H),6.64-6.82(m,3H),7.00-7.36(m,12H),7.42-8.48(m,6H) N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(N-(3-甲氧基苄基)-5-氧代-5-(吡啶-3-基甲基氨基)戊酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.60(d,3H,J=7.2Hz),1.88-2.20(m,2H),2.24-2.42(m,4H),2.80(s,3H),2.82-3.44(m,3H),3.26(s,3H),3.64-3.76(m,1H),3.76(s,3H),3.80-4.02(m,1H),4.20-4.58(m,4H),5.22-5.36(m,1H),6.60-6.82(m,4H),7.06-7.40(m,13H),7.50-8.41(m,5H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(N-(3-甲氧基苄基)-5-(2-吗啉代基乙基氨基)-5-氧代戊酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.59(d,3H,J=6.6Hz),1.88-2.00(m,2H),2.20-2.29(m,4H),2.31-2.52(m,6H),2.82(s,3H),2.92-3.08(m,2H),3.20-3.38(m,2H),3.29(s,3H),3.40-3.60(m,2H),3.64-3.74(m,4H),3.76(s,3H),3.92-4.04(m,1H),4.28-4.40(m,1H),4.58-4.64(m.2H)5.23-5.36(m,1H),6.20-6.35(m,1H),6.62-6.80(m,4H),7.10-7.40(m,10H),7.86-7.89(m,1H),7.95-7.98(m,1H),7.98-8.00(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(N-(3-甲氧基苄基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基氨基)-5-氧代戊酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.57(d,3H,J=6.6Hz),1.84-2.00(m,2H),2.24-3.16(m,17H),2.80(s,3H),3.26(s,3H),3.40-3.60(m,2H),3.74(s,3H),3.92-4.12(m,1H),4.20-4.72(m,3H),5.22-5.38(m,1H),6.56-6.80(m,3H),7.02-7.24(m,11H),7.74-8.22(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(N-(3-甲氧基苄基)-5-氧代-5-(2-(哌啶-1-基)乙基氨基)戊酰氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD30D)1.56(d,3H,J=6.6Hz),1.84-2.00(m,2H),2.24-3.16(m,19H),2.81(s,3H),3.28(s,3H),3.40-3.60(m,2H),3.74(s,3H),3.92-4.12(m,1H),4.20-4.72(m,3H),5.20-5.38(m,1H),6.56-6.80(m,3H),7.02-7.24(m,11H),7.74-8.22(m,3H) 4-(((2R,3S)-2-羟基-3-(3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-((R)-1-苯基乙基氨甲酰基)苯甲酰氨基)-4-苯基丁基)(3-甲氧基苄基)氨基)-4-氧代丁酸2-(3,4-双(苄氧基)-5-氧代-2,5-二氢呋喃-2-基)-2-羟基乙基酯 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.56(m,3H),1.88-2.06(m,2H),2.24-2.60(m,4H),2.77(s,3H),2.90-3.80 (m,2H),3.25(s,3H),3.75(s,3H),3.92-4.68(m,8H),4.78-5.34(m,5H),6.60-6.82(m,3H),7.04-7.42(m,21H),7.74-8.26(m,3H) 4-(((2R,3S)-2-羟基-3-(3-(N-甲基甲磺酰氨基)-5-((R)-1-苯基乙基氨甲酰基)苯甲酰氨基)-4-苯基丁基)(3-甲氧基苄基)氨基)-4-氧代丁酸2-(3,4-二羟基-5-氧代-2,5-二氢呋喃-2-基)-2-羟基乙基酯 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.55(d,3H,J=6.6Hz),2.40-3.42(m,9H),2.83(s,3H),3.25(s,3H),3.74(s,3H),3.90-4.36(m,5H),4.60-4.74(m,2H),5.18-5.28(m,1H),6.60-6.80(m,3H),7.04-7.39(m,11H),7.58-8.00(m,3H) N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((R)-1-(4-(羟基甲基)唑-2-基)乙基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二甲酰胺 1HNMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.59(d,3H,J=7.2Hz),2.60-3.02(m,4H),2.83(s,3H),3.26(s,3H),3.66-3.82(m,3H),3.73(s,3H),4.24-4.36(m,1H),4.44(s.2H)5.32-5.42(m,1H),6.74-6.83(m,3H),7.04-7.24(m,6H),7.53(s.1H)7.75-7.77(m,1H),7.92-7.96(m,1H),8.05-8.08(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-((4-(羟基甲基)唑-2-基)甲基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)间苯二甲酰胺 1HNMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)2.70-3.08(m,4H),2.84(s,3H),3.27(s,3H),3.68-3.85(m,3H),3.73(s,3H),4.26-4.35(m,1H),4.46(s.2H),4.64(s.2H),6.74-6.88(m,3H),7.07-7.24(m,6H),7.53(s.1H)7.75-7.77(m,1H),7.93-7.96(m,1H),8.05-8.08(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-(4-甲基唑-2-基)乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.63(d,3H,J=7.2Hz),2.70-3.04(m,4H),2.85(s,3H),3.31(s,3H),3.74-3.88(m,3H),3.75(s,3H),4.32-4.39(m,1H),5.36-5.44(m,1H),6.76-6.90(m,3H),7.12-7.26(m,6H),7.30-7.32(m.1H)7.83-7.84(m,1H),7.97-7.99(m,1H),8.10-8.12(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)2.17(s,3H),2.74-3.16(m,7H)3.64-3.90(m,3H),3.78(s,3H),4.34-4.44(m,1H),4.77-4.84(m,2H),6.79-6.96(m,3H),7.00-7.50(m,7H),7.50-7.89(m.4H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((R)-2-羟基-1-苯基乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.58(d,3H,J=6.6Hz),2.50-3.04(m,4H),2.84(s,3H),3.28(s,3H),3.62-3.86(m,4H),4.30-4.38(m,1H),5.20-5.32(m,1H),7.04-7.20(m,15H),7.76-7.78(m,1H),7.85-7.87(m,1H),8.05-8.08(m,1H). N1-((2,5-二甲基唑-4-基)甲基)-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-甲基间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)2.24-2.60(m,6H),2.76-3.14(m,7H)3.64-3.88(m,3H),3.76(s,3H),4.28-4.36(m,1H),4.40-4.60(m,2H),6.79-6.92(m,3H),7.00-7.50(m,6H),7.50-7.89(m.4H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-(噻唑-2-基)乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.72(d,3H,J=6.9Hz),2.70-3.01(m,4H),2.84(s,3H),3.29(s,3H),3.70-3.89(m,3H),3.75(s,3H),4.27-4.36(m,1H),5.54-5.66(m,1H),6.76-6.90(m,3H),7.08-7.30(m,6H),7.67-7.69(m.1H)7.81-7.83(m,1H),7.95-7.98(m,1H),8.10-8.13(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.62(d,3H,J=7.2Hz),2.60-3.02(m,4H),2.82(s,3H),3.32(s,3H),3.68-3.78(m,3H),3.75(s,3H),4.21-4.33(m,1H),5.24-5.38(m,1H),6.74-6.84(m,3H),7.11-7.40(m,11H),7.90-7.92(m.1H)7.94-7.96 (m,1H),8.17-8.19(m,1H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((2-甲基噻唑-4-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)2.64(s,3H),2.76-3.14(m,7H)3.66-3.80(m,3H),3.78(s,3H),4.30-4.38(m,1H),4.68-4.84(m,2H),6.78-6.93(m,3H),7.04-7.40(m,7H),7.44-7.82(m.4H). N1-((4-乙基噻唑-2-基)甲基)-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-甲基间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.26(t,3H,J=7.5Hz),2.62-3.14(m,9H)3.64-3.82(m,3H),3.75(s,3H),4.28-4.36(m,1H),4.84-5.02(m,2H),6.78-6.91(m,3H),7.08-7.426(m,7H),7.33-7.78(m.4H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((2-甲基唑-4-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)2.54(s,3H),2.74-3.10(m,7H)3.68-3.84(m,3H),3.75(s,3H),4.27-4.36(m,1H),4.48-4.62(m,2H),6.76-6.90(m,3H),7.07-7.27(m,7H),7.36-7.84(m.4H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((S)-1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD),δ7.670(m,2H),7.526(m,1H),7.408(m 1H),7.237-7.107(m,6H),6.889-6.739(m,4H),4.931(br,1.3H),4.630(br,0.7H),4.293(m,1H),3.765(s,3H),3.783-3.633(m,2H),3.020-2.858(m,5H),2.646(m,2H),2.421(s,3H),1.398(d,J=6.6Hz,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-((R)-1-(3-甲氧基苯基)乙基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD),δ7.732(m,2H),7.532(m,1H),7.387(m 1H),7.277-7.113(m,6H),7.091-6.746(m,4H),4.932(br,1.4H),4.633(br,0.6H),4.333(m,1H),3.798-3.681(m,2H),3.731(s,3H),2.976(s,3H),2.846(m,2H),2.772-2.505(m,2H),2.421(s,3H),1.426(d,J=6.3Hz,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-(吡嗪-2-基甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)2.54-3.06 (m,7H),3.65-3.84(m,6H),4.25-4.36(m,1H),4.76-4.92(m,2H),6.74-6.90(m,3H),7.08-7.82(m,10H),8.30-8.71(m.3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(4-甲基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)2.19(s,3H),2.40(s,3H),2.63-2.96(m,7H),3.61-3.69(m,3H),4.16-4.22(m,1H),4.78-4.85(s,2H),6.78(s,1H),6.99-7.17(m,10H),7.25-7.58(m,3H). N1-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N3-甲基-5-(甲磺酰基甲基)-N3-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1HNMR(300MHz,CDCl3)2.42(s,3H),2.62-3.18(m,10H),3.72-3.83(m,6H),4.2(s,2H),4.14-4.20(m,1H),4.824.90(s,2H),6.76-6.92(m,4H),7.21-7.38(m,6H),7.67-8.18(m,3H). N1-环己基-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)

7.69-7.15(m,1H),7.05-6.81(m,5H),4.93(broad s,2H),4.40(m,1H),3.87-3.68(m,6H),3.49(broad s,1H),3.03-2.81(m,5H),2.43(s,4H),1.72-1.54(m,7H),1.01-0.86(m,4H). N1-环丙基-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-甲氧基-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.32-7.16(m,10H),6.93-6.79(m,4H),4.98(broad s,2H),4.37(m,1H),4.00-3.74(m,9H),3.10-2.77(m,4H),2.45(s,3H),0.58-0.48(m,4H). N1-((2S,3S)-3-羟基-4-(3-甲氧基苄氨基)-1-苯基丁-2-基)-5-(N-甲基甲磺酰氨基)-N3-((R)-1-苯基乙基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3+CD3OD)1.62(d,3H,J=7.2Hz),2.60-3.02(m,4H),2.82(s,3H),3.32(s,3H),3.68-3.78(m,3H),3.75(s,3H),4.21-4.33(m,1H),5.24-5.38(m,1H),6.74-6.84(m,3H),7.11-7.40(m,11H),7.90-7.92(m.1H)7.94-7.96(m,1H),8.17-8.19(m,1H). N1-环丙基-N3-((2S,3R)-3-羟基-4-((5-异丙基吡啶-3-基)甲基氨基)-1-苯基丁-2-基)-N1-((4-甲基噻唑-2-基)甲基)间苯二甲酰胺 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.32-7.16(m,10H),6.93-6.79(m,4H),4.98(broad s,21-1),4.37(m,1H),4.00-3.74(m,9H),3.10-2.77(m,4H),2.45(s,3H),0.58-0.48(m,4H). 实施例5memapsin 1、memapsin 2和组织蛋白酶D催化活性的抑制 将底物肽NH3-ELDLAVEFWHDR-CO2(用于memapsin 2、memapsin1和组织蛋白酶D的抑制试验)以2mg/ml溶于DMSO中,用0.1M乙酸钠以1∶100进行稀释,试验前pH正好为4.0。将溶于DMSO中的抑制剂用0.1M乙酸钠稀释,pH为4.0(1∶100稀释)。将在pH4缓冲液中的抑制剂溶液的50ml等分试样与150ml 0.1M含有100-200nM memapsin 1、memapsin 2或组织蛋白酶D的乙酸钠合并。于37℃预先孵育,然后通过加入50ml用pH4缓冲液稀释的底物开始蛋白水解试验,于37℃继续孵育。以时间间隔移去等分试样,将其与等体积的MALDI-TOF基质(在丙酮中的α-羟基肉桂酸,20mg/ml)合并,立即在不锈钢MALDI样品板上点样,一式两份。在校内的分子生物学资源中心,在PE Biosystems Voyager DE仪器上进行了MALDI-TOF质谱法。该仪器以具有150ns延迟的正极模式在25,000加速电压下进行操作。在650-2000原子质量单位的范围内检测了具有质荷比(m/z)的离子。通过Voyager Data Explorer模块分析了数据,得到所给混合物中底物和相应产物的质量类别的离子强度数据。将相对产物的形成计算为产物的信号强度与产物和相应底物的信号强度总和的比。使用如下模型、由表示初始形成15%产物的数据的非线性回归分析得到每单位时间形成的相对产物 1-e-kT, 其中k为相对水解速率常数,T为时间(秒)。或者,使用荧光切割测定法(fluorogenic cleavage assay,Ermolieff,J.等人,Biochemistry,3912450-12456(2000))测定了相对水解速率。来自任一方法的初始速率相对于未抑制的对照而言被表达,通过非线性拟合为竞争性抑制的紧密结合模型(Bieth,J.,Bayer-Symposium V蛋白酶抑制剂,第463-469页,Spinger-Varlag,柏林(1994))测定了抑制常数Ki。结果示于上表1(M2K、CDK和M1K栏分别表示对memapsin 2、组织蛋白酶D和memapsin 1得到的Ki值)。
实施例6细胞AβIC50的测定 在Aβ生成的细胞试验中测定了化合物对memapsin 2催化活性的效能。成功穿过细胞膜的化合物表明它们具有抑制内涵体腔(endosomalcompartment)中memapsin 2催化活性、从而阻断Aβ生成的能力。将过表达具有伦敦和瑞典型突变的人APP695的中国仓鼠卵巢细胞以10%汇合接种在多孔板中。将化合物溶于DMSO中至浓度接近1mM,用培养基稀释至终浓度接近4μM(最终为0.4%DMSO)。将化合物进行系列稀释,在接种后48小时应用于多孔板中的细胞。在5%CO2、37℃下继续孵育24小时。移去等分试样,使用夹心ELISA(BioSource International)对Aβ40含量进行测定。相对于对照孵育而言,将Aβ40的量相对于化合物的浓度范围拟合为4-参数IC50模型。结果在上表1中提供(标注为“细胞”的栏)。
权利要求
1.具有下式的化合物
其中
R1是卤素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的C3-C20烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y;
R5是卤素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基;
R2和R3独立地是卤素、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y;
R4是卤素、-OH、-CF3、-NO2、-NR8R9、-OR10、-S(O)nR11、-C(O)R12、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y;
R6和R7独立地是-S(O)2R11、-C(O)R12、-NR8R9、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y;
n独立地是0、1或2;
R8独立地是-C(O)R13、-S(O)2R14、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基;
R9独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基;
R10独立地是-C(O)R13、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基;
R11独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基,其中如果n是2,则R11任选是-NR15R16,并且其中如果n是1或2,则R11不是氢;
R12独立地是-NR18R19、-OR19、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基;
R13独立地是-OR19、-NR18R19、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基,
R14独立地是-NR18R19、氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基,其中
R18和R19独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基;
R15和R16独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基;
L1和L3独立地是价键、-NR17-、-S(O)q-、取代或未取代的亚烷基或者取代或未取代的杂亚烷基;
L2是取代或未取代的亚烷基、-NR17-、-S(O)q-或者取代或未取代的杂亚烷基;
R17独立地是氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基;
q独立地是0、1或2;
A1和A2独立地是取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基;
Y是载体部分;且
L4是价键、-OP(OH)2O-、-C(O)OR20-、-C(O)NHR21-、-S(O)2NHR22-、取代或未取代的亚烷基、取代或未取代的杂亚烷基或者肽基连接基,其中
R20、R21和R22独立地是取代或未取代的烷基、取代或未取代的杂烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
2.权利要求1的化合物,其中R1是氢、卤素、-NR8R9、-OR10或-S(O)nR11。
3.权利要求1的化合物,其中R1是氢、-NR9S(O)nR14、-OR10或-S(O)nR11。
4.权利要求1的化合物,其中R1是氢或-NR9S(O)nR14。
5.权利要求1的化合物,其中R5、R8、R9、R10和R11独立地是氢、取代或未取代的C1-C20烷基、取代或未取代的2至20元杂烷基、取代或未取代的C5-C7环烷基、取代或未取代的5至7元杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基或者-L4-Y。
6.权利要求1的化合物,其中取代或未取代的亚烷基各自是R23-取代或未取代的C1-C20亚烷基,取代或未取代的杂亚烷基各自是R23-取代或未取代的2至20元杂亚烷基,取代或未取代的烷基各自是R23-取代或未取代的C1-C20烷基,取代或未取代的杂烷基各自是R23-取代或未取代的2至20元杂烷基,取代或未取代的环烷基各自是R23-取代或未取代的C5-C7环烷基,取代或未取代的杂环烷基各自是R23-取代或未取代的5至7元杂环烷基,取代或未取代的杂芳基各自是R24-取代或未取代的杂芳基,取代或未取代的芳基各自是R24-取代或未取代的芳基,其中
R23独立地是氧代基、卤素、-CN、-CF3、-OCF3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元杂烷基、R25-取代或未取代的C5-C7环烷基、R25-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R26-取代或未取代的杂芳基或者R26-取代或未取代的芳基;
R24独立地是卤素、-CN、-CF3、-OCF3、-OCH3、OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元杂烷基、R25-取代或未取代的C5-C7环烷基、R25-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R26-取代或未取代的杂芳基或者R26-取代或未取代的芳基;
t独立地是0、1或2;
R27、R28和R29独立地是氢、R25-取代或未取代的C1-C20烷基、R25-取代或未取代的2至20元杂烷基、R25-取代或未取代的C5-C7环烷基、R25-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R26-取代或未取代的杂芳基或者R26-取代或未取代的芳基,其中如果t是1或2,则R27不是氢,并且其中
R25独立地是氧代基、卤素、-CN、-OH、-CF3、-OCF3、-OCH3、未取代的C1-C20烷基、未取代的2至20元杂烷基、未取代的C5-C7环烷基、未取代的5至7元杂环烷基、未取代的芳基或未取代的杂芳基,并且
R26独立地是卤素、-CN、-OH、-CF3、-OCF3、-OCH3、未取代的C1-C20烷基、未取代的2至20元杂烷基、未取代的C5-C7环烷基、未取代的5至7元杂环烷基、未取代的芳基或未取代的杂芳基。
7.权利要求6的化合物,其中R2、R3、R8、R9、R10、R11和R12独立地是R23-取代或未取代的C1-C20烷基、R23-取代或未取代的2至20元杂烷基、R23-取代或未取代的C5-C7环烷基、R23-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R24-取代或未取代的杂芳基或者R24-取代或未取代的芳基。
8.权利要求7的化合物,其中
R27、R28和R29独立地是氢、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元杂烷基;
R23独立地是氧代基、卤素、-CN、-CF3、-OCF3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元杂烷基;且R24独立地是卤素、-CN、-CF3、-OCF3、-OCH3、-OR27、-S(O)tR27、-OCH3、-C(O)R27、-NR28R29、-NR28C(O)R27、-C(O)NR28R29、R25-取代或未取代的C1-C20烷基或者R25-取代或未取代的2至20元杂烷基。
9.权利要求6的化合物,其中R2、R3、R8、R9、R10、R11和R12是取代或未取代的C1-C20烷基或者取代或未取代的杂环烷基。
10.权利要求6的化合物,其中R2、R3、R8、R9、R10、R11和R12是未取代的C1-C20烷基。
11.权利要求6的化合物,其中R2、R3、R8、R9、R10、R11和R12是未取代的C1-C5烷基。
12.权利要求1的化合物,其中R2和R3独立地是氢、卤素或未取代的C1-C20烷基。
13.权利要求6的化合物,其中R5是R23-取代或未取代的C5-C7环烷基、R23-取代或未取代的5至7元杂环烷基、R24-取代或未取代的杂芳基或者R24-取代或未取代的芳基。
14.权利要求6的化合物,其中R5是R24-取代或未取代的杂芳基或者R24-取代或未取代的芳基。
15.权利要求6的化合物,其中R5是R24-取代或未取代的芳基。
16.权利要求1的化合物,其中R5选自取代或未取代的四氢呋喃基、取代或未取代的四氢吡喃基和取代或未取代的吡啶基甲基。
17.权利要求16的化合物,其中L3是未取代的C1-C5烷基。
18.权利要求17的化合物,其中L3是亚甲基。
19.权利要求15的化合物,其中R24是卤素、-CN、-OH、-CF3、未取代的C1-C20烷基或未取代的烷氧基。
20.权利要求19的化合物,其中R5是二氟苯基。
21.权利要求15的化合物,其中R5是苯基。
22.权利要求21的化合物,其中L3是未取代的C1-C3亚烷基。
23.权利要求21的化合物,其中L3是未取代的2至5元杂亚烷基。
24.权利要求23的化合物,其中L3是-(CH2)e-S-,其中符号e表示0至10的整数。
25.权利要求24的化合物,其中e是1。
26.权利要求1的化合物,其中A1和A2独立地是取代或未取代的C5-C7环烷基、取代或未取代的5至7元杂环烷基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
27.权利要求1的化合物,其中A2是取代或未取代的芳基或者取代或未取代的杂芳基。
28.权利要求1的化合物,其中A1和A2独立地是取代或未取代的苯基、取代或未取代的吡唑基、取代或未取代的呋喃基、取代或未取代的咪唑基、取代或未取代的异唑基、取代或未取代的二唑基、取代或未取代的唑基、取代或未取代的吡咯基、取代或未取代的吡啶基、取代或未取代的嘧啶基、取代或未取代的哒嗪基、取代或未取代的噻唑基、取代或未取代的三唑基、取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的二氢噻吩并吡唑基、取代或未取代的硫茚基、取代或未取代的咔唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的苯并噻吩基、取代或未取代的苯并呋喃基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的喹啉基、取代或未取代的苯并三唑基、取代或未取代的苯并噻唑基、取代或未取代的苯并唑基、取代或未取代的苯并咪唑基、取代或未取代的异喹啉基、取代或未取代的异吲哚基、取代或未取代的吖啶基、取代或未取代的benzoisazolyl(苯并异唑基)、取代或未取代的二甲基乙内酰脲、取代或未取代的吡嗪基、取代或未取代的四氢呋喃基、取代或未取代的吡咯啉基、取代或未取代的吡咯烷基、取代或未取代的吗啉基、取代或未取代的吲哚基、取代或未取代的二氮杂基、取代或未取代的氮杂基、取代或未取代的硫杂基、取代或未取代的哌啶基或者取代或未取代的氧杂基。
29.权利要求1的化合物,其中A2是取代或未取代的芳基。
30.权利要求1的化合物,其中A2是取代或未取代的苯基。
31.权利要求1的化合物,其中A2是取代或未取代的杂芳基。
32.权利要求1的化合物,其中A2是取代或未取代的吡啶基。
33.权利要求1的化合物,其中L3和L1独立地是价键、未取代的亚烷基或未取代的杂亚烷基。
34.权利要求1的化合物,其中L3和L1独立地是价键、未取代的C1-C20亚烷基或未取代的2至20元杂亚烷基。
35.权利要求1的化合物,其中L3和L1独立地是价键、未取代的C1-C5亚烷基或未取代的2至5元杂亚烷基。
36.权利要求1的化合物,其中L3是C1-C5亚烷基。
37.权利要求1的化合物,其中L1是支链未取代的C1-C5亚烷基。
38.权利要求1的化合物,其中L2是未取代的C1-C20亚烷基或未取代的2至20元杂亚烷基。
39.权利要求1的化合物,其中L2是未取代的C1-C5亚烷基或未取代的2至5元杂亚烷基。
40.权利要求1的化合物,其中L2是未取代的C1-C5亚烷基。
41.权利要求1的化合物,其中L2是支链未取代的C1-C5亚烷基。
42.权利要求1的化合物,其中L2是亚甲基。
43.权利要求40的化合物,其中A2是取代或未取代的杂芳基或者取代或未取代的芳基。
44.权利要求43的化合物,其中A1是取代或未取代的杂芳基或者取代或未取代的芳基。
45.权利要求44的化合物,其中A2是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的吡啶基。
46.权利要求44的化合物,其中A1是取代或未取代的苯基或者取代或未取代的吡啶基。
47.权利要求45的化合物,其中L2是亚甲基。
48.权利要求1的化合物,其中如果R1是-NR8R9且R8是-S(O)2R14,则R6是氢。
49.权利要求48的化合物,其中R7是取代或未取代的烷基。
50.权利要求48的化合物,其中R7是未取代的C1-C5烷基。
51.权利要求48的化合物,其中R2和R3是氢。
52.权利要求1的化合物,其中如果R1是氢,则R6不是氢。
53.权利要求52的化合物,其中R6是取代或未取代的烷基。
54.权利要求52的化合物,其中R6是未取代的C1-C5烷基。
55.权利要求52的化合物,其中R6是取代或未取代的C3-C6环烷基。
56.权利要求52的化合物,其中R6是取代或未取代的环丙基。
57.权利要求54的化合物,其中R7是氢。
58.权利要求57的化合物,其中R2和R3是氢。
59.在需要其的受治疗者中治疗阿尔茨海默病的方法,该方法包括给需要这种治疗的受治疗者施用有效量的权利要求1的化合物。
60.降低memapsin 2催化活性的方法,该方法包括使memapsin 2蛋白质与有效量的权利要求1的化合物接触。
61.权利要求60的方法,其中所述的memapsin 2β-分泌酶在细胞内接触。
62.相对于memapsin 1催化活性而言选择性降低memapsin 2催化活性的方法,该方法包括在memapsin 1β-分泌酶的存在下使memapsin 2蛋白质与有效量的权利要求1的化合物接触。
63.相对于组织蛋白酶D催化活性而言选择性降低memapsin 2催化活性的方法,该方法包括在组织蛋白酶D的存在下使memapsin 2蛋白质与有效量的权利要求1的化合物接触。
64.相对于memapsin 1催化活性和组织蛋白酶D催化活性而言选择性降低memapsin 2催化活性的方法,该方法包括在memapsin 1 β-分泌酶和组织蛋白酶D的存在下使memapsin 2蛋白质与有效量的权利要求1的化合物接触。
全文摘要
本发明提供了通式(I)的新的β-分泌酶(secretase)抑制剂、使用它们来治疗阿尔茨海默病的方法以及使用它们来降低memapsin 2催化活性的方法,其中变量A1、A2、L1、L2、L3、R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7如权利要求中所定义。
文档编号C07C233/00GK101198583SQ200680020719
公开日2008年6月11日 申请日期2006年4月10日 优先权日2005年4月8日
发明者A·K·高希, N·库马拉古鲁巴兰, 刘春峰, T·德瓦萨穆德拉姆, 晖 雷, L·斯旺森, S·安卡拉, J·唐, G·比尔塞尔 申请人:科门蒂斯公司, 伊利诺斯大学理事会, 俄克拉荷马州医疗研究基金会, 珀杜研究基金会
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