专利名称：高纯度灯盏花乙素原料药的制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种纯度在99%以上的灯盏花素乙素原料药的制备方法。
背景技术：
灯盏花素系从灯盏花Erigeron breviscapus (Vant) Hand-Mazz全草中分离出 的黄酮类成分，部颁《药品标准》记载的规定为灯盏花素注射液中灯盏花乙素 含量为90%以上。由于目前精制灯盏花素原料药的方法，系仿制黄苳甙的精制 方法，产品质量达不到部颁布标准的规定。灯盏花素原料药精制方法一直未能 很好解决，因此有必要研究新的精制方法，使之符合部颁《药品标准》的规定。
中国专利申请号00113019.6公开了一种"灯盏花有效部位及制备工艺和制 剂"，其特征在于将灯盏花原料(全草)粗粉直接通过的稀甲醇或稀乙醇或稀丙酮 提取，提取液低温减压浓縮，放置沉淀，除去叶绿素等杂质，浓縮液上聚苯乙 烯树脂柱层析，先用水洗脱，收集水洗液及其稀醇或烯丙酮洗脱部份，水液用 浓盐酸调至pHl—2，此酸性水溶液再上聚苯乙烯树脂柱，最后用稀醇洗脱，该 洗脱液减压、浓縮，喷雾干躁，得黄色粉末，即为该有效部位。该方法所采用 的原料为灯盏花全草，其有效部位为黄酮类化合物、咖啡酸及咖啡酰基奎宁酸 类化合物及一焦炔康酸及其衍生物。其指向并不是灯盏花素原料药——含量为 灯盏花素乙素90%以上的灯盏花素原料药。
本申请人的6项在先申请"高纯度灯盏花乙素原料药的制备工艺"(申请号 200410062573.3 )、"高纯度灯盏花乙素原料药的制备工艺"(申请号 200410040182.1 )、"高纯度灯盏花乙素原料药的制备工艺"(申请号 200410040352.6 )、"高纯度灯盏花乙素原料药的制备工艺"(申请号 200410079583.8 )、"高纯度灯盏花乙素原料药的制备工艺"(申请号 200410079642.1 )、"高纯度灯盏花乙素原料药的制备工艺"(申请号 200510010723.1)是采用市售的灯盏花素原料药，经过一定工艺步骤后，制成灯 盏花素乙素含量为99%以上的高纯度的原料药。
发明内容
本发明的目的旨在提供一种简单、有效的高纯度灯盏花乙素原料药的制备 工艺。
本发明所述的高纯度灯盏花乙素原料药的制备工艺由以下步骤组成
一、 采用型号为D101或AB-8的大孔树脂，大孔树脂用量与原料药用量的 重量比为10-15: 1，以水为溶剂装柱；
二、 灯盏花素上柱溶液的配制取灯盏花素乙素含量为90%以下的灯盏花
素原料，用沸水配制成重量百分比浓度为10-20%，再用碱液调pH至6.8-7.5， 溶解，滤过，得到上柱溶液；
三、 将步骤二的上柱溶液加入步骤一的大孔树脂柱上，用水作为洗脱剂洗 脱，直至洗脱液基本无色，收集洗脱液；
四、 将上述洗脱液在60-70'C下减压浓縮至原体积的1/10-1/20，得浓縮液；
五、 在30-35。C下，在上述浓縮液中加入丙酮或乙醇，加入量按体积比为浓 縮液的10-15倍，搅拌，静置，沉淀，滤过，用丙酮洗尽沉淀物中的母液，即得 到灯盏花素盐；
六、 在上述灯盏花素盐中加入5-10倍体积量的浓度为30-50%的丙酮水溶液， 搅匀，加入无机酸调pH至1-2，静置，滤取沉淀，水洗至中性，得到高纯度灯 盏花乙素原料药。
步骤一所述的大孔树脂型为按照常规的操作方法处理合格的树脂，所述的常 规的操作方法为用乙醇或丙酮反复洗涤，直至洗涤液遇水不发生浑浊。步骤 二所述的碱液为常用的调pH的碱溶液，如10M的NaHCO3溶液、5%的氢氧化 钠溶液等；所述溶液在滤过之前可以先进行离心分离，以提高滤过效率。步骤 六所述的酸为常用的调pH的酸溶液，如5-20%的盐酸溶液、5-10%的硫酸溶 液等。步骤六中所得的高纯度灯盏花乙素原料药为湿品，即可用于配制注射制 剂。若要得到干品，可在水洗后，再用乙醇洗涤，烘干。或者直接烘干，粉碎。 用乙醇洗涤的目的是容易烘干。
如经过上述精制过程，灯盏花素乙素的含量达不到99%，可再重复操作l-2 次，即可将乙素含量提高到99%以上。
本发明中所采用的大孔树脂是一种常用吸附剂， 一般用于植物成分的粗步 分离，很少用于精制化学成分。但本发明的独特之处就在于采用了型号为DIOI 或AB-8的大孔树脂，使得更好地除去灯盏花素原料药中的杂质，提高灯盏花素
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乙素的含量。本发明的特点在于将大孔树脂水洗脱液直接浓縮至一定的体积， 直接加入丙酮沉淀出灯盏花素盐，省去了原有工艺将水洗脱液先酸化、再滤过， 用大量水洗至中性，再碱化，再用丙酮沉淀出灯盏花素盐。故本工艺具有明显 的縮短生产周期和降低生产成本的优点，有利于环境保护。
图1为实施例1中精制前灯盏花乙素原料的高效液相色谱图。 图2为实施例1中精制后灯盏花乙素原料的高效液相色谱图。 图中使用仪器类型液相色谱 梯度方式恒流检测器紫外
仪器型号LC-10A 波长(nm): 335 柱温(。C): 32
柱型号Phenomenx 型号Prodigy(250* 4.6mm) 5u ODS3 100R
积分方法面积归一法
具体实施例方式
本发明的实施方案中，采用的大孔树脂必须处理至检验合格使用。 实施例1:
称取市售灯盏花素1000g，其中灯盏花乙素含量为86%，置于不锈钢桶中， 加入沸水配制成重量百分比浓度为20%，搅拌均匀，用20%碳酸氢钠调pH值至 7，使溶解，滤液先经16000rpm连续管试离心机离心后，再进行滤过，滤液加 入到DIOI大孔树脂柱上，用水为洗脱液，收集洗脱液至基本无色为止。洗脱液 浓縮至原体积的1/20，加入10倍体积量的丙酮，搅拌，静置10小时，沉淀， 滤过，再用丙酮洗尽沉淀物中的母液，即得到灯盏花素盐。
将得到的灯盏花素盐移至另一容器中，加入8倍体积量的浓度为50%的丙 酮水溶液，搅匀，用10。/。盐酸调pH至l，静置10.小时，滤取沉淀，水洗至中 性，用乙醇洗涤一次，80。C烘干，得到灯盏花乙素含量为99.5%原料药。
分析图见图1图2。
检测方法同现有技术。如申请号200410062573.3。
权利要求
1、一种单次酸碱化制备高纯度灯盏花素原料药的方法，其特征在于由以下步骤组成一、采用型号为D101或AB-8的大孔树脂，大孔树脂用量与原料药用量的重量比为10-151，以水为溶剂装柱；二、灯盏花素上柱溶液的配制取灯盏花素乙素含量为90％以下的灯盏花素原料，用沸水配制成重量百分比浓度为10-20％，再用碱液调pH至6.8-7.5，溶解，滤过，得到上柱溶液；三、将步骤二的上柱溶液加入步骤一的大孔树脂柱上，用水作为洗脱剂洗脱，直至洗脱液基本无色，收集洗脱液；四、将上述洗脱液在60-70℃下减压浓缩至原体积的1/10-1/20，得浓缩液；五、在30-35℃下，在上述浓缩液中加入丙酮或乙醇，加入量按体积比为浓缩液的10-15倍，搅拌，静置，沉淀，滤过，用丙酮洗尽沉淀物中的母液，即得到灯盏花素盐；六、在上述灯盏花素盐中加入5-10倍体积量的浓度为30-50％的丙酮水溶液，搅匀，加入无机酸调pH至1-2，静置，滤取沉淀，水洗至中性，得到高纯度灯盏花乙素原料药。
全文摘要
本发明涉及一种纯度在99％以上的灯盏花素乙素原料药的制备方法。本发明所述工艺由以下步骤组成一、采用型号为D101或AB-8的大孔树脂，以水为溶剂装柱；二、配制灯盏花素上柱溶液；三、将步骤二的上柱溶液加入步骤一的大孔树脂柱上，用水作为洗脱剂洗脱，直至洗脱液基本无色，收集洗脱液；四、将上述洗脱液在60-70℃下减压浓缩至原体积的1/10-1/20，得浓缩液；五、在30-35℃下，在上述浓缩液中加入丙酮或乙醇，加入量按体积比为浓缩液的10-15倍，搅拌，静置，沉淀，滤过，用丙酮洗尽沉淀物中的母液，即得到灯盏花素盐；六、在上述灯盏花素盐中加入5-10倍体积量的浓度为30-50％的丙酮水溶液，搅匀，加入无机酸调pH至1-2，静置，滤取沉淀，水洗至中性，得到高纯度灯盏花乙素原料药。
文档编号C07H17/07GK101376668SQ20071006615
公开日2009年3月4日 申请日期2007年8月31日 优先权日2007年8月31日
发明者张人伟, 樊献俄, 程惠佳 申请人:樊献俄