用于治疗充血性心力衰竭的组合物及方法

文档序号:3561043阅读:1896来源:国知局

专利名称::用于治疗充血性心力衰竭的组合物及方法用于治疗充血性心力衰竭的组合物及方法本发明一般地涉及GLP-1分子或其激动剂和类似物的应用,并涉及毒蜥外泌肽(胰高血糖素样肽抑制剂,exendin)分子或其激动剂和类似物的应用,更具体地,涉及这些分子在预防或治疗充血性心力衰竭中的应用。用于本发明方法的药物组合物也被公开。本发明进一步涉及用于治疗糖尿病、用于预防高血糖症和用于减少对象食物^聂入的组合物及方法。
背景技术
:胰高血糖素样肽-l[7-36]酰胺(也称为GLP-[7-36]NH2或GLP-1)是胰高血糖素原基因的产物。它主要从肠道被分泌进血浆并产生与胰腺和胃肠道功能相关的多种生物效应。亲代肽胰高血糖素原(PG)具有众多取决于起源的组织产生其它肽产物的剪切位点,所述肽产物包括胰腺中的胰高血糖素(PG[32-62])和GLP-1[7-36]NH2(PG[78-107])与肠的L细胞中的GLP-l[7-37](PG[78-108])和GLP曙l[7-36]丽2(PG[78-107]),其中GLP-1[7-36]NH2(78-107PG)是主要的产物。如本文应用的GLP-1[7-36]NH2,或一般地,只是"GLP-1",具有促胰岛素(insulinotropic)作用,刺激胰岛素从胰腺P-细胞分泌;GLP-1也抑制胰高血糖素从胰腺a-细胞分泌(Orskov,etal.,D/a^fes,42:658-61,1993;D,Alessio,etal"/C〃"./打ve",97:133-38,1996)。GLP-1被报道抑制胃排空(WilliamsB,etal"J.C//w.E"do"/m/.Mw"Z).,81(l):327-32,1996;WettergrenA,etal"Dz'g.Scz"38(4):665-73,1993),和胃酸分泌(SchjoldagerBT,etal"D/g.Z)/&34(5):703-8,1989;O;HalloranDJ,etal.,J.Em/ocr/wo/.,126(1):169國73,1990;WettergrenA,etal.,"/g.ZXy.5W.,38(4):665-73,1993)。已经报道了脑室内给予GLP-1的利尿的、antidypsogenic作用,但是,该报道声称外周腹膜内注射GLP-1没有这样的作用(Tand-Christensen"a/.,^m.乂尸/z,,'o/.,271:R848-56,1996)。在其羧基端具有额外的甘氨酸残基的GLP-l[7-37]也刺激人体内的胰岛素分泌(Orskov"D/"6efes,42:658-61,1993)。被认为负责GLP-1的促胰岛素效果的跨膜G蛋白腺苷酸环化酶偶联受体已经从大鼠胰岛cDNA文库中被克隆(Thorens,A^f/.」c^/.5W.f7&489:8641-45,1992)。胰高血糖素和胰高血糖素样肽已经^皮发现具有不同的心血管作用。胰高血糖素已经被报道具有正性变力和变时(positiveinotropicandchronotropic)作用,在正常个体中产生动脉血压的少许增高,并影响局部血液循环。高剂量GLP-1已经被发现产生收缩压和舒张压二者的适度增高,而GLP-2对那些参数没有影响。已报道,通过颈静脉给药的极高剂量的GLP-1引起收缩压和舒张压及心率的提高。该效果由在中枢神经系统(CNS)中的GLP-1受体介导(在Barragan,J.M.,W"/.,67:63-68,1996中综述)。毒蜥外泌肽是在生于亚利桑那州(Arizona)的蜥蜴——希拉毒封斤(Gila-monster),和墨西哥珠封斤蜴(MaxicanBeadedLizard)的唾液中发现的肽。毒蜥外泌肽-3存在于墨西哥毒晰(//e/o^mza/zom'6/w附)的唾液中,而毒封斤夕卜泌肽-4存在于希拉毒晰(i/e/ofifer附o愿;e"應)的唾液中(Eng,J.,"a/.,脂.C7z亂,265:20259-62,1990;Eng,J.,"/.,/.CTzem.,267:7402-05,1992)。毒蜥外泌肽与胰高血糖素样肽家族的几个成员具有一些序列相似性,与GLP-1具有最高的同一性53%(Goke,"a/.,丄脂.C7z細"268:19650-55,1993)。毒蜥外泌肽-4是有效的GLP-1受体激动剂。该肽也在分离的胃中刺激生长激素抑制素释放并抑制胃泌素释放(Goke,"所o/.C77em.,268:19650-55,1993;Schepp,efa/.,五w广《/.户/zarmaco/.,69:183-91,1994;Eissele,""/.,h/e5W"55:629-34,1994)。发现毒蜥外泌肽-3和毒蜥外泌肽-4是GLP-1受体激动剂,这在于其刺激胰腺腺泡细胞中的cAMP产生和从激胰腺腺泡细胞的淀粉酶释放(Malhotra,R.,etal.,Wegw/a/ory41:149-56,1992;Raufman,etal.,,S/o/.CTzem.,267:21432-37,1992;Singh,etal"m,53:47-59,1994)。已经提出了毒封斤外泌肽-3和毒蜥外泌肽-4的促胰岛素活性用于糖尿病的治疗和高血糖症的预防的用途(Eng,美国专利号5,424,286)。美国食品和药品管理局(FDA)已经认证了BYETTA(依森泰德(exenatide))注射作为辅助疗法,以改善患2型糖尿病对象中的血糖控制,所述对象正服用二曱双胍(metformin)、磺脲类(sulfonylurea)、或二曱双胍和磺脲类的组合,但没有获得足够的血糖控制。截短的毒封斤外泌肽,如羧基酰胺化(carboxyamidated)分子毒蜥外泌肽-[9-39]、和片段3-39至9-39,已经被报道是GLP-1的有力且选择性的拮抗剂(Goke,"a/.,肠/.C/z匿,268:19650-55,1993;Raufman,J.P.,&o/"/編.C/z匿,266:2897-902,1991;Schepp,W.,"a/.,P/zarm.,269:183-91,1994;Montrose國Rafizadeh,a/.,D/"&fey,45(Suppl.2):152A,1996)。毒蜥外泌肽-[9-39]在体内阻断内源GLP-l,导致降低的胰岛素分泌(Wang,W《/C//"./"ve化,95:417-21,1995;D,Alessio,/"額f"97:133-38,1996)。明显负责GLP-1的促胰岛素效果的受体已经从大鼠胰岛细胞中被克隆(Thorens,B.,尸亂淑/.爿c"t/,园89:8641-8645,1992)。毒蜥夕卜泌肽和毒蜥外泌肽-[9-39]与克隆的GLP-1受体结合(大鼠胰腺细胞GLP-1受体FehmannHC,e"/"尸ep"Wes,15(3):453-6,1994;人GLP-1受体ThorensB,Wa/.,Z)/"Zj"es,42(ll):1678-82,1993)。在用克隆的GLP-1受体转染的细胞中,毒蜥外泌肽-4是激动剂,即其提高cAMP,而毒浙外泌肽-[9-39]是拮抗剂,即其阻断毒蜥外泌肽-4和GLP-1的刺激作用。出处同前。毒蜥外泌肽-[9-39]也发挥全长毒蜥外泌肽的拮抗剂的作用,抑制毒蜥外泌肽-3和毒蜥外泌肽4对胰腺腺泡细胞的刺激作用(Raufman,efa/.,/5z'o/.C/^m.,266:2897-902,1991;Raufman,ef"/.,C&w.,266:21432-37,1992)。毒蜥外泌肽-[9-39]抑制毒蜥外泌肽-4对血浆胰岛素水平的刺激,并抑制毒蜥外泌肽-4和GLP-1的生长激素抑制素释放刺激活性和胃泌素释放抑制活性(Kolligs,F.,W"/.,D^^e/M,44:16-19,1995;Eissde,"h/e5We"cw,55:629-34,1994)。已经报道,通过颈静脉给予的毒蜥外泌肽-4引起收缩压、舒张压和平均动月永血压、以及心率的增力口(Barragan,"ieg"/(3z107尸印"W^,67:63-68,1996)。充血性心力衰竭("CHF")是工业化国家中死亡和残疾的最常见原因之一,并且在五年中具有约50%的死亡率(Goodmanand12Gilman6勺7Tze尸/zarmaco/og/ca/5aw.so/r/ze/^pew/Zcs,Ed.McGrawffill,N.Y.,pp.809-838)。充血性心力衰竭可能由诸如心肌梗塞的引发事件(indexevent)的发生引起,或可能继发于其它原因,例如高血压、缺血性心脏病、心脏畸形如瓣膜疾病、或暴露于心脏毒性化合物如蒽环类抗生素。不被理论限制,已经报道,由高血压或可收缩组织丟失产生的工作负荷(workload)增加引起代偿性心肌细胞肥大和左心室壁增厚,从而增强收缩性和维持心脏功能。然而,随着时间过去,左心室腔扩大,收缩和舒张功能退化,心肌细胞经历程序性细胞死亡,且心肌功能逐渐退化。充血性心力衰竭可以緩慢地发展。由于一种或多种代偿机制的激活,泵送能力(泵排量,pumpingcapacity)的初始降低可能不是立即明显的。此外,CHF的发展已经被发现独立于患者的血液动力学状态。因此,由疾病引起的损伤性改变可能存在并发展,即使患者保持无症状。实际上,在CHF早期维持正常心血管功能的代偿机制可能事实上归因于疾病的发展,例如通过对心脏和循环施加不良影响。心肌主要使用游离脂肪酸作为其主要的能量来源。然而,在心肌缺血或受伤的情况下,由于相对经济的02消耗,葡萄糖仍然是心肌ATP生产的最有效的来源。充血性心力衰竭的主要问题是应激性高血糖和胰岛素耐受。高循环水平的游离脂肪酸与降低的葡萄糖摄入组合的结果是,向脂肪酸氧化、Krebs循环中间体消耗和葡萄糖氧化减少移动。这些变化最终导致磷酸肌酸水平降低、能量储备损失和能量使用效率低。目前用于治疗充血性心力衰竭的药剂包括血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、p-阻断剂((3-受体阻断剂)、引起收缩效应(inotropiceffect)(如心脏收缩力增加)的化合物及增加尿流的化合物或利尿剂。在与用于治疗充血性心力衰竭的这些药剂的使用有关的其它缺点中,这些药剂不足以解决与应激性高血压和胰岛素耐受相关的问题。利尿剂具有若干性质使其成为治疗充血性心力衰竭的次最佳试剂。许多利尿剂如噻嗪类、髓袢利尿剂(loopdiuretics)、碳酸酐酶抑制剂和渗透性利尿剂遇到的一个难题是,尽管它们可能被采用以提高钠排泄,它们也导致尿钾丢失增加。钾丟失的影响的例子包括肌肉无力、麻痹(包括呼吸肌麻痹)、心电图异常、心律失常和心脏停搏。某些利尿剂遇到的另一个问题是,它们的作用速率緩慢,这无助于它们在紧急情况下的使用。目前临床使用的收缩性药剂包括毛地黄、拟交感神经胺和氛利酉同(Harrison'sPn'c/pfeso//"tenia/MieWc/we,12thEdition,1991,McGrawHill,N.Y.,pp.894-899)。Digotoxin-—种强心苦,一种针对心力衰竭的古老但有效的疗法,初始来自洋地黄(foxglove)叶、紫花洋地黄(digitalispurpurea)和毛花洋地黄(digitalislanata)。强心苷是钠和钾离子跨细胞膜主动运输的有力且高度选择性的抑制剂(GoodmanandGilman,上文)。强心普已经被报道提高心肌收缩的速度,导致心室功能的改善;据报道,这种效果是由于在收缩期提高胞浆Ca^的可用性,以便与收缩蛋白相互作用来提高肌节缩短的速度和程度(Goodman和Gilman,上文)。Digotoxin及相关的强心苷(如洋地黄毒苷(digitoxin))具有有用的作用周期,因为它们的排泄——主要通过肾脏——导致1.5-5天的血浆t^。但是这些药物的治疗指数非常低,轻度毒性剂量:最小有效剂量比为2:1且致死剂量:最小有效剂量比为5:1到10:1之间。由于噻。秦类和髓袢利尿剂的使用引起的尿钾丟失可能严重地增加洋地黄中毒的危险,包括对心律不齐的易感性,并且保钾利尿剂通常是必要的。强心苷的缓慢消除在洋地黄中毒期间可以延长危险的时间,这已经被报道发生在20%使用这些药物的院内对象。除了苦毒毛旋花子甙以外的所有强心苷的吸收和作用发生略微延长,并且这在紧急的心脏状况下可能是不利的。拟交感神经胺——通常包括肾上腺素、异丙肾上腺素、多巴胺和多巴酚丁胺,可以#1用于急性情况以刺激心肌收缩性,但是它们通常要求对对象进行持续静脉输注和持续加强监护。它们通常在8小时后失去效力,显然是由于受体的下调。因此,需要治疗充血性心力衰竭的改进药剂。这样的方法,以及因此有用的化合物和组合物,已经被发明并在本文^皮描述和要求保护。GLP-1、毒蜥外泌肽、和毒蜥外泌肽或GLP-1;敫动剂治疗充血性心力衰竭的用途已经被提出。参见例如,1999年2月5日提交的美国6,703,359,其与本申请享有共同所有权并被引入本文作为参考。最近的研究表明,用GLP-1的短期治疗(48-72小时输液)可以通过改善心肌葡萄糖利用来改善梗塞后的人类和动物的心脏功能(参见,例如,Nikolaidis,L.A.,"a/"C7腦/加'ow,110:955-961,2004;Nikolaidis,L.A.,W《C/簡/flf"開,109:962-965,2004;Bose,A.K."a/"飾6eb,54:146-151,2005)。然而,用GLP-1或毒蜥外泌肽的长期或'隄性治疗在充血性心力衰竭中对心脏功能和重塑(remodeling)的效力先前是未知的。本申请涉及令人吃惊的发现——使用GLP-1、毒蜥外泌肽、或毒蜥外泌肽或GLP-1激动剂或类似物的治疗,特别是长期治疗,可以在充血性心力衰竭的动物模型中改善心脏功能、削弱心脏重塑并增强运动能力。使用GLP-1、毒蜥外泌肽、或毒蜥外泌肽或GLP-1激动剂的长期治疗也提高了运动表现并改善胰岛素敏感性。GLP-1或肠降血糖素模拟物的长期给药代表了治疗充血性心力衰竭的潜在新颖的治疗方法。本文/>开的化合物和组合物在降低食物摄入和肥胖症的治疗中也有用。毒蜥外泌肽已经被发现抑制胃排空(美国专利申请序列号08/694,954,1996年8月8日提交,其与本发明享有共同所有权并在此被引入作为参考)。毒封斤外泌肽-[9-39]已经被用于研究中枢GLP-l在控制食物摄入方面的生理相关性(Turton,M.D.WA^^re,379:69-72,1996)。通过脑室内(ICV)注射给予的GLP-1在大鼠中抑制食物摄入。据报道,脑室内注射输送的GLP-1的引起饱足感的效果被毒蜥外泌肽-[9-39]的ICV注射抑制(Turton,上文)。然而,已经报道,当通过外周注射给药时,GLP-1不抑制小鼠的食物摄入(Turton,M.D.,淑騰,379:69-72,1996;Bhavsar,S.P.,脸wmsc/.庙/r21:460(188.8),1995)。毒蜥外泌肽和毒蜥外泌肽类似物的给药也已经被发现降低食物摄入(美国专利6,956,026,1998年1月7日提交,其与本发明享有共同所有权并在此被引入作为参考)。肥胖症——脂肪组织过量,正日益成为发达国家的普遍现象。例如,大约30%的美国成人被估计超过理想体重20%——足以施加#1康危害的可4妄受的月巴胖度量(//arn'so"JW打c^/eso/^&r"a/15Me&c/"e7,五AY/o",McGrawHill,Inc.(1991)p.411)。月巴胖症的发病机理据信是多因素的,但是基本问题在于肥胖对象的食物摄入和能量消耗直到有过量的脂肪组织才达到平衡。减少食物摄入或营养过剩的尝试在中期通常是没有结果的,因为由节食引起的体重减轻导致食欲增大和能量消耗的降低(LeibelWa/"(1995)A^w^g/"wdJowr""/o/M^/z'c/we,322:621-628)。消筹毛足够能量以实质上减轻脂肪重量所需的身体锻炼强度对于大多数人来说太强以至于不能在足够频度的基础上进行。因此,肥胖症是目前很难治疗的、慢性的、基本上难治的代谢疾病。不但肥胖症本身由于外表的原因被一些人认为是不期望的,而且肥胖症也带有伴随疾病(co-morbidity)的严重风险,包括2型糖尿病、退化性关节炎(degenerativearthritis)、和涉及全身麻醉的手术并发症的发生率提高。超重和肥胖与多种心脏并发症相关,如提高的心脏风险、高血压、动脉硬化、充血性心力衰竭和猝死。营养过剩引起的肥胖症也是被称作胰岛素抵抗综合征或"X综合征"的疾病群的危险因素。在X综合征中,已经报道,在胰岛素抵抗和高血压之间有联系(WatsonN.和SandlerM.,Cwr.M^/.i^s.Qp/w.,12(6):374-378(1991);KodamaJ.Wa/.,D&Z^tesCa,13(1l):l109-1111(1990);LithellCani/owwc.尸/zarm(3co/.,15Suppl.5:S46-S52(1990))。在那些成功减轻重量约10%的体重几个对象中,可以有伴随疾病状况的惊人改善,所述伴随疾病状况最具体地是饮食和减重为主要治疗手段的2型糖尿病,虽然出于上述原因在许多对象中相对无效。减少肥胖对象的食物摄入会降低这些对象中的血糖水平、血脂水平和心脏风险。营养过剩也是多种饮食性疾病的结果和心理原因。减少食物摄入在这些疾病的治疗中也会是有益的。因此,可以认识到,减少食物摄入的有效方式是主要的挑战并且较好的治疗方法会有大的用途。这样的方法、以及其有用的化合物和组合物已经被发明并在本文中被描述并被要求保护。而且,因为超重和肥胖症是心脏疾病的危险因素,本文所述用于治疗肥胖症并减少食物摄入的方法也可以延迟充血性心力衰竭或继发于肥胖症和超重的其它心脏疾病的发病或降低其严重性。概述本文提供了GLP-1分子或其激动剂和类似物的应用,以及毒蜥外泌肽分子或其激动剂和类似物、包括它们的衍生物和活性片段的应用,用于充血性心力衰竭的预防或治疗。用于本文所述方法的药物组合物也被公开。进一步提供了组合物和方法,其用于治疗和/或预防糖尿病、高血糖、胰岛素抵抗和肥胖症,并用于减少对象的食物損_入和抑制对象的食欲。本申请的GLP-1、毒蜥外泌肽、和毒封斤外泌肽或GLP-1的激动剂和类似物包括表1所示的那些(SEQIDNOS1-99,分别以出现的顺序)。在一种实施方式中,提供了包含氨基酸序列HGEGTFTSDLSKQLEEKAAKEFIEWLKQGGPSSGAPPPS(SEQIDNO:27),或其C-末端酰胺形式(-NH2)的多肽。本文的多肽可以任选地包括C-末端酰胺,其被标为"-NH2"。这一末端酰胺可以在肽化学合成过程中净皮包含,通过化学方法或酶方法体内添加或合成后添加。在另一实施方式中,提供了包含氨基酸序列HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSKEIIS-OH(SEQIDNO:60)的多肽。进一步的实施方式涉及GLP-1类似物和毒晰外泌肽类似物,其包含一个或多个带有修饰氨基酸的取代基,所述氨基酸包含C广C2。烷基侧链(如辛基链)。一种实施方式涉及包含一个或多个辛基甘氨酸残基的GLP-1类似物和毒蜥外泌肽类似物。另一实施方式涉及在氨基酸位置14上包含辛基甘氨酸残基的GLP-1类似物和毒蜥外泌肽类似物。在一种实施方式中,提供了包含氨基酸序列IDNO:100)的多肽。在另一实施方式中,提供了包含氨基酸序列IDNO:48)的多肽。在一种实施方式中,提供了治疗充血性心力衰竭的方法。该方法一般包括给予需要它的对象有效治疗充血性心力衰竭量的GLP-1、毒晰外泌肽、或毒浙外泌肽或GLP-1激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒晰外泌肽、或GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表1中包含的那些。一方面,GLP-1、毒封斤外泌肽、或毒晰外泌肽或GLP-1激动剂或类似物;故长期给予。在另一实施方式中,该方法包括给予需要它的对象有效治疗充血性心力衰竭量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒晰外泌肽激动剂或类似物,皮长期(慢性,chronically)给予。另一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒晰外泌肽激动剂或类似物被短期(急性,acutely)给予。在另一实施方式中,提供了用于预防充血性心力衰竭的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效预防充血性心力衰竭量的GLP-1、毒蜥外泌肽、或毒蜥外泌肽或GLP-1激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒封斤外泌肽、或GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表1中包含的那些。一方面,GLP-1、毒蜥外泌肽、或毒蜥外泌肽或GLP-1激动剂或类似物一皮长期给予。在另一实施方式中,该方法包括给予需要它的对象有效预防充血性心力衰竭量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽i敫动剂或类似物寻皮长期给予。另一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物被短期给予。在另一实施方式中,提供了用于改善与充血性心力衰竭相关的心脏功能的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效改善与充血性心力衰竭相关的心脏功能的量的GLP-1、毒蜥外泌肽、或毒蜥外泌肽或GLP-1激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒封斤外泌肽、或GLP-1或毒晰外泌肽激动剂或类似物是本文/>开的任意新肽,例如表1中包含的那些。在另一实施方式中,该方法包括给予需要它的对象改善与充血性心力衰竭相关的心脏功能的量的GLP-1激动剂或类似物或毒浙外泌肽激动剂或类似物。一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒晰外泌肽激动剂或类似物被长期给予。另一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物被短期给予。在另一实施方式中,提供了用于削弱心脏重塑的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效削弱心脏重塑量的GLP-1、毒晰外泌肽、或毒蜥外泌肽或GLP-1激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-l、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒晰外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表1中包含的那些。在一个实施方式中,该方法包括给予需要它的对象有效削弱心脏重塑量的GLP-1激动剂或类似物或毒晰外泌肽激动剂或类似物。一方面,心脏重塑发生在充血性心力衰竭诊断之前或充血性心力衰竭发生之前。另一方面,心脏重塑发生在充血性心力衰竭诊断之后或充血性心力衰竭发生之后。另一方面,心脏重塑与充血性心力衰竭有关。又一方面,心脏重塑发生在心肌梗塞之后。一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒晰外泌肽激动剂或类似物被长期给予。另一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物被短期给予。在另一实施方式中,提供了用于限制梗塞大小的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效限制梗塞大小量的GLP-1、毒蜥外泌肽、或毒蜥外泌肽或GLP-1激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒晰外泌肽、或GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表l中包含的那些。一方面,GLP-1、毒晰外泌肽、或毒晰外泌肽或GLP-1激动剂或类似物,皮长期给予。在一个实施方式中,该方法包括给予需要它的对象有效制梗塞大小量的GLP-1激动剂或类似物或毒晰外泌肽激动剂或类似物。一方面,需要它的对象经历过或正在经历心肌梗塞。另一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物被长期给予。在另一实施方式中,提供了用于减轻与充血性心力衰竭相关的胰岛素抵抗的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效减轻与充血性心力衰竭相关的胰岛素4氏抗的量的GLP-1、毒蜥外泌肽、或毒蜥外泌肽或GLP-1激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒晰外泌肽激动剂或类似物是本文^开的寸壬意新肽,例如表1中包含的那些。在一个实施方式中,该方法包括给予需要它的对象有效减轻与充血性心力衰竭相关的胰岛素抵抗的量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒晰外泌肽激动剂或类似物被长期给予。另一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物被短期给予。在另一实施方式中,提供了用于提高患有充血性心力衰竭的对象的运动能力的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效提高运动能力的量的GLP-1、毒蜥外泌肽、或毒蜥外泌肽或GLP-1激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表1中包含的那些。在一个实施方式中,该方法包括给予需要它的对象有提高运动能力的量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物被长期给予。另一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物一皮短期给予。在另一实施方式中,提供了治疗糖尿病的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效治疗糖尿病量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表1中包含的那些。在另一实施方式中,提供了治疗胰岛素抵抗的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效治疗胰岛素抵抗的量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒晰外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表1中包含的那些。在另一实施方式中,提供了治疗餐后高血糖的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效治疗餐后高血糖的量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒晰外泌肽、或GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂或类似物是本文7>开的4壬意新肽,例如表l中包含的那些。在另一实施方式中,l是供了降低血并唐的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效降低血糖的量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒浙外泌肽^:动剂或类似物是本文^^开的^[壬意新肽,例如20表1中包含的那些。在另一实施方式中,提供了刺激胰岛素释放的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效刺激胰岛素释放的量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒晰外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表l中包含的那些。在另一实施方式中,提供了在期望或需要减少食物摄入的对象中减少食物摄入的方法。该方法通常包括外周给予该对象有效减少食物摄入的量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表l中包含的那些。在另一实施方式中,提供了在期望或需要降低食欲的对象中降低食欲的方法。该方法通常包括外周给予对象有效减小食欲的量的GLP-1激动剂或类似物或毒晰外泌肽激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表l中包含的那些。在另一实施方式中,提供了在期望或需要减轻体重的对象中减少食物摄入的方法。该方法通常包括外周给予对象有效减轻体重的量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表l中包含的那些。在另一实施方式中,^是供了治疗肥胖症的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效治疗肥胖症的量的GLP-1激动剂或类似物或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表1中包含的那些。在另一实施方式中,提供了用于治疗肥胖症相关的心脏疾病的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效治疗肥胖症相关的心脏疾病的量的GLP-1激动剂或类似物或毒封斤外泌肽激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表1中包含的那些。一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒晰外泌肽激动剂或类似物被长期给予。在另一实施方式中,提供了用于治疗肥胖症相关的充血性心力衰竭的方法。该方法通常包括给予需要它的对象有效治疗肥胖症相关的充血性心力衰竭的量的GLP-1激动剂或类似物或毒浙外泌肽激动剂或类似物。在一种实施方式中,GLP-1、毒蜥外泌肽、或GLP-1或毒晰外泌肽激动剂或类似物是本文公开的任意新肽,例如表1中包含的那些。一方面,GLP-1激动剂或类似物或毒晰外泌肽激动剂或类似物被长期给予。附图简述图l(A-B)是血糖水平对毒蜥外泌肽激动剂腹膜内注射的反应的图示。点代表平均值士标准偏差。图2(A-C)是心肌梗塞(MI)诱导的充血性心力衰竭(CHF)后心脏舒张和收缩功能对GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂长期治疗的反应的图示。早期(E)对晚期(A)充盈波(fillingwave)峰的比(E/A)及左心房体积(LAV)代表心脏舒张功能;左心室射血分数(LVEF)代表心脏收缩功能。图3(A-B)是MI诱导的CHF后左心室腔尺寸对GLP-1或毒晰外泌肽激动剂长期治疗的反应的图示。左心室腔尺寸由左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD)表示。图4(A-C)是MI诱导的CHF后空腹血浆胰岛素和葡萄糖水平与胰岛素抵抗对GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂长期治疗的反应的图示。稳态模型评估(homeostasismodelassessment,HOMA)是胰岛素抵抗的主要指标。图5(A-C)是MI诱导的CHF后运动能力和效率对GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂长期治疗的反应的图示。图6(A-C)是MI诱导的CHF后运动能力对峰值乳酸(lactate)比例和基线血浆乳酸对GLP-1或毒蜥外泌肽激动剂长期治疗的反应的图示。图7(A-B)是MI诱导的CHF后舒张功能对GLP-1、巯曱丙脯酸治疗或GLP-1与巯甲丙脯酸联合治疗的反应的图示。E/A比例是心脏舒张功能的度量。图8(A-B)是MI诱导的CHF后心脏收缩性对GLP-1、巯甲丙脯酸治疗或GLP-1与巯曱丙脯酸联合治疗的反应的图示。缩短分数百分数(fractionalshorteningpercentage)是心脏收缩的度量。图9(A-D)是MI诱导的CHF后左心室腔尺寸对GLP-1、巯曱丙脯酸治疗、或GLP-1与巯曱丙脯酸联合治疗、或GLP-1与巯甲丙脯酸联合疗法的反应的图示。左心室腔尺寸由左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD)表示。图IO(A-B)是MI诱导的CHF后运动能力和效率对GLP-l、巯曱丙脯酸治疗或GLP-1与巯曱丙脯酸联合治疗的反应的图示。图ll(A-B)是MI诱导的CHF后运动能力对峰值乳酸比和基线血浆乳酸对GLP-1、巯甲丙脯酸治疗或GLP-1与巯曱丙脯酸联合治疗的反应的图示。图12(A-B)是MI诱导的CHF后心脏功能与胰岛素抵抗对毒蜥外泌肽激动剂治疗的反应的图示。发明详述鉴于它们的药物性质,本文提供的GLP-1分子或其激动剂和类似物,和毒蜥外泌肽分子或其激动剂和类似物,包括它们的书f生物和活性片段是有用的。具体的GLP-1分子或其激动剂和类似物、和毒晰外泌肽分子或其激动剂和类似物显示于表1中。GLP-1或毒蜥外泌肽类似物或激动剂的活性可以通过下述测试中的活性表明。例如,GLP-1或毒晰外泌肽1激动剂或其类似物对葡萄糖降低和减少食物摄入的作用可以用以下实例中所述的方法或本领域已知的其它方法净皮识别、评价或筛选。在表l中,双星号"**"表示使用GLP-1环化酶(6-23)(CYCLASE)测试。<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>SEQRBACYCLASE葡萄糖I^(氐60膽IDNO.序歹'J(,时的SUfe或酸形式)GLP(RIN)ICso(nM)GLP/GIP/CT(RIN)EC邻(nM)AUC240@2mnol/kg的食物駄量527133HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLF正WLKNGGPSSGAPPPS-NH21.50.138-17%518234HGEGTYTNDVSSYLEEEAARLF正WLKQGGPSSGAPPPS-NH21.50.24-16%518335HGEGTYTNDVSSYLEGQAARLF正WL—QGGPSSGAPPPS-NH20.310,21519536HGEGTFTSDLSKQLEERAVRLFIEWLKQGGPSSGAPPPS-NH20.140,1519637HGEGTFTSDLSKQKEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGAPPPS-NH20.430.1527038HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLF正YLKNGGPSSGAPPPS-NH21.10.104527139HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLF正WLKNGGPSSGAPPPS-NH21.50.138-17%527240HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLF正WLKNGGPSSGFPPPS-NH20.460.107-21%519741HGEGTFTSDLSKQSEEEAVRLF正WLKQGGPSSGAPPPS-NH21.30.14545242HGEGTFTSDLSKQLEEKAVRLF正WLKNGGPSSGAPPPS-NH20.062200780019364.2势溢也被19/533<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>依据本公开并且如本文所用,以下术语被定义为具有以下含义,除非另有明确说明。术语"氨基酸"指的是天然氨基酸、非天然氨基酸、和氨基酸类似物,所有其D和L立体异构体——如果它们的结构允许这样的立体异构形式。天然氨基酸包括丙氨酸(Ala或A)、精氨酸(Arg或R)、天冬酰胺(Asn或N)、天冬氨酸(Asp或D)、半胱氨酸(Cys或C)、谷氨酰胺(Gln或Q)、谷氨酸(Glu或E)、甘氨酸(Gly或G)、组氨酸(His或H)、异亮氨酸(Ile或I)、亮氨酸(Leu或L)、赖氨酸(Lys或K)、蛋氨酸(Met或M)、苯丙氨酸(Phe或F)、脯氨酸(Pro或P)、丝氨酸(Ser或S)、苏氨酸(Thr或T)、色氨酸(Trp或W)、酪氨酸(Tyr或Y)和缬氨酸(Val或V)。非天然氨基酸包括但不限于吖啶羧酸(azetidinecarboxylicacid)、2-氨基己二酸、3-氨基己二酸、(3-丙氨酸、氨基丙酸、2-氨基丁酸、4-氨基丁酸、6-氨基己酸、2-氨基庚酸、2-氨基异丁酸、3-氨基异丁酸、2-氨基庚二酸、叔丁基甘氨酸、2,4-二氨基异丁酸、锁链素、2,2'-二氨基庚二酸、2,3-二氨基丙酸、N-乙基甘氨酸、N-乙基天冬酰胺、高脯氨酸(homoproline)、轻赖氛卧臾、另'J鞋赖氛酸(allohydroxylysine)、3-幾脯氨酸、4-羟脯氨酸、异锁链素、别异亮氨酸、N-甲基丙氨酸、N-甲基甘氨酸、N-曱基异亮氨酸、N-曱基戊基甘氨酸、N-曱基缬氨酸、萘基丙氨酸(naphthalanine)、正缬氨酸、正亮氨酸、辛基甘氨酸、鸟氨酸、戊基甘氨酸、六氬吡夂羧酸和硫代脯氨酸。氨基酸类似物包括天然和非天然氨基酸,其被可逆或不可逆地化学封闭,或在其N-末端氨基基团或其侧链基团上被修饰,例如,蛋氨酸亚砜(methioninesulfoxide)、蛋氨酸砜(methioninesulfone)、S-(羧曱基)-半胱氨酸、S-(羧曱基)-半胱氨酸亚砜和S-(羧曱基)-半胱氨酸砜。术语"氨基酸类似物"指的是这样的氨基酸——其中C-末端羧基、N-末端氨基或侧链官能团被化学修饰为另外的官能团。例如,天冬氨酸((3-甲基酯)是天冬氨酸的氨基酸类似物。N-乙基甘氨酸是甘氨酸的氨基酸类似物;或丙氨酸曱酰胺是丙氨酸的氨基酸类似物。"烷基"用在这里表示直链或支链脂肪族烃基。取代基的非限定性实例是直链或支链烷基,如曱基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、戊基、己基和烯基、羟基、烷氧基、氨基、卤素。术语"低级(lower),,在这里指的是有机基团,如烷基基团定义了这样的基团,其带有多达并包括约6个、多达并包括4个或一个或两个碳原子。这样的基团可能是直链或支链的。"药物上可接受的盐"包括本文所述化合物的盐,其来自这样的化合物和有机或无机酸的组合。在实践中,盐形式的使用等同于碱形式的使用。化合物的游离碱和盐形式都有用。此外,以下缩写代表以下含义"CAN,,或"CH3CN,,指乙腈。"Ado"指8-氨基-3,6二氧杂辛酸(oxaoctanoicacid)。"Boc"、"tBoc"或"Tboc"指叔丁氧羰基。"DCC指N,N'-二环己基碳二亚胺。"D(OMe)"或"Asp(OMe)"指天冬氨酸的(94-曱酯。"Fmoc"指芴曱氧羰基。"HBTU,,指2-(lH-苯并三唑-l-基)-l,l,3,3-四曱基脲六氟磷酸酯。"HOBt"指1-羟基苯并三唑一水合物。"homoP"或"hPro,,指高脯氨酸。"MeAla"或"Nime"指N-曱基丙氨酉吏。"naph"指萘基丙氨酸。"pG"或"pGly"指戊基甘氨酸。"tBuG"指叔丁基甘氨酸。"ThioP"或"tPro"指硫代脯氨酸。"3Hyp"指3-羟脯氨酸。"4Hyp"指4-羟脯氨酸。"NAG"指N-烷基甘氨酸。"NAPG"指N-烷基戊基甘氨酸。"Norval"指正缬氨酸。"Norleu"指正亮氨酸。"OctG"指辛基甘氨酸。本文公开的类似物多肽也可以通过化学改变,如酰胺化、糖基化、酰化、硫酸化、磷酸化、乙酰化和环化而进一步衍生。这样的化学改变可通过化学或生物化学的方法获得,以及可以通过体内方法,或其任意组合获得。本发明的类似物多肽的衍生物可以也包括偶联到一个或多个聚合物或小分子取代基。聚合物偶联的一种类型是聚氨基酸(如聚组氨酸、聚精氨酸、聚赖氨酸等)和/或各种长度的脂肪酸链与毒浙外泌肽或GLP-1类似物的N-或C-末端或氨基酸残基侧链的连接(linkage)或连结(attachment)。小分子取代基包括短的烷基和受约束(constrained)烷基(例如,支链的、环状的、稠合的和金刚烷基),和芳基。激动剂指的是这样的分子,其对与参考分子相关的受体具有亲和力并刺激与参考分子结合到该受体相关的至少一种活性。例如,并且没有限制,GLP-1激动剂结合于也结合GLP-1的受体,并且激动剂结合的结果刺激与GLP-1结合到相同受体相关的至少一种活性。GLP-1分子或其激动剂和类似物,和毒蜥外泌肽分子或其激动剂和类似物可以通过若干策略之一与聚乙二醇(PEG)偶联。参见MJ!//e廳油gy,68:1(1998);肠函/,feC/z缓,6:150(1995);和O".r/zera/.i>"gC^r/wS".,9:249(1992),它们全部被完整引入作为参考。本领域普通技术人员因此可以使用这些公知的技术,将一个或多个聚乙二醇聚合物与本文所述的毒蜥外泌肽和毒蜥外泌肽激动剂或类似物,或GLP-1和GLP-1激动剂或类似物连接。适当的聚乙二醇聚合物通常可以买到或可由本领域普通技术人员公知的技术制备。聚乙二醇聚合物优选地具有500到20,000的分子量,并且可以是支链或直链聚合物。在其它实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物,和毒晰外泌肽分子或其激动剂或类似物按美国专利号6,552,167所述,通过加入精确长度的聚酰胺链而被修饰,所述美国专利被完整引入作为参考。而在另外的实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物,和毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物按美国专利号5,359,030和5,681,811所述,通过加入烷基聚乙二醇(alkylPEG)部分而被修饰,所述美国专利被完整引入作为参考。PEG在完整肽或蛋白上的连接可以通过偶联于氨基、羧基或硫基完成。这些基团通常为这些天然发生的氨基酸如赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸和半胱氨酸的N和C末端及在它们的侧链上。由于本公开的化合物可以通过固相肽化学技术制备,多种包含带有正交保护基团(orthogonalprotectinggroup)的双氨基和双羧基的部分可以被引入,用于与PEG的偶联。本公开也提供了GLP-1分子或其激动剂或类似物,或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物对除聚乙二醇以外的一种或多种聚合物的偶联,所述聚合物能够以与聚乙二醇相似的方式调节肾脏清除率。这样的聚合物的实例包括白蛋白和明胶。参见,Gombotz和Pettit,说ocow^gafeOzem.,6:332-351,1995,其被完整引入作为参考。一方面,免疫球蛋白的偶联物被包含在本发明的范围内,例如单克隆抗体、催化抗体如醛缩酶催化抗体人MAb38C2、或它们的片段如Fc。聚合物和方法可以在例如美国公开申请US20030175921A1和公开WO2002/046227中找到,它们被完整引入作为参考。—种实施方式涉及包括带有修饰氨基酸的一种或多种取代的毒封斤外泌肽和GLP-1类似物,所述氨基酸包括d-C2o烷基侧链,其在一种实施方式中是辛基链。在一种实施方式中,用辛基链修饰的氨基酸是甘氨酸。在另一实施方式中,亮氨酸残基被辛基甘氨酸残基替换。在另一实施方式中,丙氨酸残基被辛基甘氨酸残基替换。不被理论限制,据信一个或多个辛基链的并入提高类似物的半衰期,这可能是因为该类似物更有效地结合于循环血浆蛋白。也不被理论限制,一个或多个辛基链的并入可能减緩肾脏对该类似物的清除。已经报道,在某些位置上具有辛基甘氨酸取代的GLP-1类似物可能具有延长的作用时间。参见,例如WO2005/066207。在一种实施方式中,本/>开的GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒晰外泌肽分子或其激动剂或类似物包括含有Q一直链或支链烷基侧链、或环烷基基团的烷基甘氨酸。在一种实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒封斤外泌肽分子或其激动剂或类似物包括含有C6—8直链或支链烷基侧链的烷基甘氨酸。在另一实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物包括含有Q直链烷基侧链的烷基甘氨酸。在一种实施方式中,本7>开的GLP-1分子或其激动剂或类酉i。-一种'实施丫、式中一,^是供了包含氨基酸工序:IDNO:IOO)或其酰胺形式的多肽。在另一实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物包含在29、30、34或35位的辛基甘氨酸。本文所述的化合物,如GLP-1分子或其〗敫动剂和类似物、和毒蜥外泌肽分子或其激动剂和类似物可使用标准固相肽合成技术制备,例如自动或半自动肽合成仪。通常,使用这样的技术,a-N-氨基曱酰基保护的氨基酸和连接到树脂上增长肽链的氨基酸在室温下,在诸如二曱基曱酰胺、N-曱基吡咯烷酮或二氯甲烷的惰性溶剂中,在诸如二环己基碳二亚胺和l-羟基苯并三唑的偶联剂存在下,在诸如二异丙基乙胺的碱存在的条件下被偶联。a-N-氨基曱酰基保护基团使用诸如三氟乙酸或哌咬的试剂从产生的肽-树脂中除去,并且偶联反应用待加入肽链的下一个期望的N-保护氨基酸重复。合适的N-保护基在本领域中是熟知的,通常使用的是叔丁氧羰基(tBoc)和芴曱氧羰基(Fmoc)。肽合成仪中使用的溶剂、氨基酸衍生物和4-甲基二苯曱胺初于脂可乂人AppliedBiosystemsInc.(FosterCity,Calif.)购买。以下侧链<呆护的氨基酸可乂人AppliedBiosystemsInc.购买Boc-Arg(Mts)、Fmoc-Arg(Pmc)、Boc-Thr(Bzl)、Fmoc-Thr(t-Bu)、Boc画Ser(Bzl)、Fmoc-Ser(t-Bu)、Boc-Tyr(BrZ)、Fmoc画Tyr(t-Bu)、Boc-Lys(Cl-Z)、Fmoc-Lys(Boc)、Boc-Glu(Bzl)、Fmoc國Glu(t-Bu)、Fmoc國His(Trt)、Fmoc-Asn(Trt)和Fmoc國Gln(Trt)。Boc-His(BOM)可/人AppliedBiosystemsInc.或BachemInc.(Torrance,Calif.)购买。苯曱醚、二甲基碌u醚、酚、乙二石充醇和苯曱碌u醚可/人AldrichChemicalCompany(Milwaukee,Wis.)获得。AirProductsandChemicals(Allentown,Pa.)提供HF。乙基醚、乙酸和甲醇可从FisherScientific(Pittsburgh,Pa.)购买。固相肽合成可以用自动肽合成仪(型号430A,AppliedBiosystemsInc.,FosterCity,Calif.)、使用NMP/HOBt(选项1)系统和tBoc或Fmoc化学在力口盖(capping)条件下进行(参见AppliedBiosystems的ABI430A肽合成仪用户手册,1.3B版本,1988年1月1日,第6部分,pp.49-70,AppliedBiosystemsInc.,FosterCity,Calif.)。Boc-肽-树脂可用HF剪切(-5。C到0°C,1小时)。肽可以使用交替的水和醋酸从树脂提取,滤液被冻干。Fmoc-肽树脂可根据标准方法(IntroductiontoCleavageTechniques,AppliedBiosystems,Inc.,1990,pp.6-12)剪切。肽也可使用AdvancedChemTechSynthesizer(型号MPS350,Louisville,Ky.)装配。肽可通过RP-HPLC(制备和分析型)、使用WatersDeltaPrep3000系统被纯化。C4、C8或C18制备柱(10p,2.2x25cm;Vydac,Hesperia,Calif.)可被用于分离肽,纯度可使用C4、C8或C18分析柱(5/^,0.46x25cm;Vydac)确定。溶剂(A=0.1%TFA/水,且B=0.1%TFA/CH3CN)可以l.Oml/min的流速4皮输送到分析柱,并以15ml/min被输送到制备柱。氨基酸分析可在WatersPicoTag系统上进行并使用Maxima程序处理。肽可通过气相酸水解被水解(115°C,20-24小时)。水解产物可通过标准方法(Cohen,da/.,ThePicoTagMethod:AManualofAdvancedTechniques'forAminoAcidAnalysis,pp.11-52,MilliporeCorporation,Milford,Mass.(1999))被衍生化和分析。快速原子轰击分析可通过M-Scan,Incorporation(WestChester,Pa.)进行。质量校准可使用碘化铯或硪化铯/甘油进行。使用飞行时间检测(timeofflightdetection)的血浆解吸电离分牙斤(plasmadesorptionionizationanalysis)可在AppliedBiosystemsBio國Ion20质i普4义上进4亍。电喷射质谱可在VG-Trio仪器上进行。肽化合物也可使用重组DNA技术、使用本领域目前已知的方法制备。参见,例如Sowz6rooA:a/.,Mo/ecw/(3rC7om'"gvLaZjoraforyM謹a/,,五d,ColdSpringHarbor(l卿)和2004年11月24日提交的美国专利申请公开20050260701制备,它们被引入作为参考。本公开中使用的其它化合物可通过本领域已知方法制备。例如,含磷酸盐的氨基酸和含这种氨基酸的肽可使用本领域已知的方法制备。参见,例如Bartlett和Landen,肠rg.C/z涯14:356-377(1986)。毒蜥外泌肽或GLP-1的激动剂、类似物或^f汙生物,并且具体为表1中包含的那些,包含在本文所述的方法中。类似物或衍生物是毒蜥外泌肽或与GLP-1的功能变体,所述变体具有相关毒蜥外泌肽或GLP-1或其激动剂的相似氨基酸序列并在一定程度上保持其受体结合、葡萄糖降低或其它活性。功能变体是指,衍生物具有可以替代特定毒蜥外泌肽或GLP-1或其激动剂的一种或多种活性的活性。在一种实施方式中,功能变体保持特定毒蜥外泌肽或GLP-1或其激动剂的全部活性,但是,该功能变体可以具有这样的活性当被定量测量时,它较强或较弱,如在功能测试中测定,例如,如本文7>开的那些测试。示例性的功能变体具有这样的活性其在相关毒蜥外泌肽、GLP-1或其激动剂或类似物的活性的约1%到约10,000%之间,约10%到约1000%之间,和约50%到约500%之间。功能变体如书f生物或类似物,与相关毒蜥外泌肽或GLP-1、或其激动剂或类似物具有至少约50%的序列相似性,约70%、约90%或约95%的序列同一性。在一些实施方式中,功能变体与参考分子相比,具有不多于IO个氨基酸替换、删除或插入。在另一实施方式中,功能变体具有不多于5个氨基酸替换、删除或插入。在一种实施方式中,类似物、衍生物或功能变体是本文公开的任意新肽,例如表l中包含的那些。序列相似性或同一性可以通过已知的方法一皮容易地计算,所述方法包括,但不卩艮于C蘭拜to/7-0wa/Mo/ecw/arS/o/ogy,Lesk,ed.,OxfordUniversityPress,NewYork1988;B/oc画戸""gv/"yb潔a/7'csGewo膨iV。yec&,Smithed.,AcademicPress,NewYork1993;C謂戶fer^""/戸'so/Se《wewceZ)"to,/,GriffinandGriffin,eds.,HumanaPress,NewJersey1994;/Se,ewceJw"/戸'sMo/ec油r5/o/ogy,vonHeinje,AcademicPress1987;勘(3/拜、iV/,r,GribskovandDevereux,eds.,StocktonPress,NewYork1991;和CarilloandLipman,SIAM/.J;p//WMa^,48:10731988中描述的那些。可用于确定两个序列间的序列相似性或同一性的可^>开获得的计算机程序包括,但不限于GCG;5个BLAST程序的组,其中三个为核苷酸序列查询设计(BLASTN、BLASTX和TBLASTX),两个为蛋白序列查询设计(BLASTP和TBLASTN)。BLASTX程序可从NCBI和其它来源,如^RL4SrMm2wa/,Altschul"a/.,NCBINLMNIH,Bethesda,MD20894;Altschul"Mo/.215:403-410(1990)公开获得。公知的SmithWaterman算法也可以被用于测定同一性。用于多肽序列比较的参数通常包括以下算法Needleman和Wunsch,J.Mol.Biol.48:443-453(1970);比较矩阵BLOSSUM62,来源于HentikoffandHentikoff,iVoc.7Va//.Sc/.89:10915-10919(1992);空位罚分12;空位长度罚分4。可以与这些参数一起使用的程序可作为"空位(gap),,程序从GeneticsComputerGroup("GCG"),Madison,Wisconsin公开获得。以上参数与对末端空41位无罚分是用于肽比较的默认参数。用于核酸分子序列比较的参数包括以下算法Needleman和Wunsch,J.Mo/.AW.48:443-453(1970);比寿交矩阵匹配-十lO,4昔配=0;空位罚分50;空位长度罚分3。如本文应用,"同一性百分数"使用以上参数作为核酸分子序列比较的默认参数及来自GCG的"空位(gap)"程序版本10.2确定。衍生物保持一些活性的能力可以使用本文所述的技术确定。衍生物包括翻译期间或翻译后发生的修饰,例如,通过磷酸化,糖基化,交联,酰化,蛋白水解切割,连接到抗体分子、膜分子或其它酉己体(参见FergusonWa/.,iev.万/oc/^m.,57:285-320,1988)。4汙生物可以使用标准化学技术和重组核酸分子4支术产生。对特定多肽的修饰可以是故意的,如通过位点定向诱变和固相合成期间的氨基酸置换,或可以是无意的,如通过产生该多肽的宿主中的突变。包含书f生物的多肽可以4吏用标准技术获得,如SambrookW"/.,A/o/ecw/arC7om'"g,ColdSpringHarborLaboratoryPress(1989)中描述的那些。在一种实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物可以具有27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44或45个氨基酸残基的长度。在一种实施方式中,毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可以具有20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44或45个氨基酸残基的长度。因此,毒蜥外泌肽类似物或其活性片段可以具有,例如,氨基酸1-27、1-28、1-29或1-30(其中在毒蜥外泌肽-4中所见的9个氨基酸的C-末端"尾部"不存在)。例如,用于本文的组合物和方法的多肽可以包含化合物4016的1-30片段HGDGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGG或其酰胺形式的化合物4016(l-30)-NH2。在一种实施方式中,9个氨基酸的C末端尾部被截短、置换或衍生化,其可以提高肽的溶解度。而在另一实施方式中,GLP-1分子激动剂可以是小分子,其结合或激活GLP-1受体,并且可以以本领域已知的任何方式被合成。在另一实施方式中,使用DPPIV抑制剂减轻或消除GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物的失活也被考虑。DPPIV抑制剂可被单独给予或与GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物联合给予。这样,认为活化的GLP-1分子或毒晰外泌肽分子可通过DPPIV的抑制而增加。DPPIV的抑制剂被普通技术人员公知,以非限定性实例的方式包括2-氰基吡咯烷、四羟基异喹啉、3-甲酰胺衍生物、氟化环酰胺、基于金刚烷基甘氨酸(adamantylglycine)的抑制剂和基于甘氨酸腈(glycinenitrile)的4中制剂。参见,例如Fukushima,H.,W"/.,C/z纖丄饥,14(22):6053-6061(2004)。非限定示例性DPPIV抑制剂包4舌丝贞氛酉臾-pyrrolidide(丝义氛酉臾画p比p各火克,Marguet,D"efa/.,TVoc.iV"//.爿cac/.C7&4,97(12):6874-6879(2000))、异亮氨酸thiazolidide(异亮氨酸p塞唑烷,Pederson,R.A.,","/Wefey,47:1253-1258(1998))和NVP-DPP728(Balkan,B.,Wa/"Z)/"6e/o/og/a,42(11):1324-1331(1999))。包含吡咯烷酮和氮杂环丁酮(ketoazetidine)的DPPIV抑制剂已经在文献(Ferraris,D.,Wa/.,S/oorg.CTzem.Z^".,14(22):5579-5583(2004))中讨论。适合用于本文的DPP-IV抑制剂的实例包4舌美国专利号6,011,155、6,124,305、6,166,063、6,432,969、6,172,081、6,710,040、6,869,947、6,995183和6,9995,180中公开的那些。二曱双胍和吡格列酮(pioglitazone)已经,皮^是议在体内降低DPPIV的活性(Kenhard,J.M.,a/.,说'0j9/z3AS.Commww.,324(l):92-97(2004))。文献报告进一步描述了脯氨酸衍生的高苯丙氨酸3的优化,以产生有效的DPPIV抑制剂。参见Edmondson,S.D.,"a/.,Md.CT^m.14(20):5151-5155(2004)。本文所述的化合物可以与各种无机和有机酸及无机和有机〃喊形成盐。这样的盐包括用有机和无机酸制备的盐,所述酸例如HCl、HBr、H2S04、H3P04、三氟乙酸、乙酸、曱酸、甲磺酸、曱苯磺酸、马来酸、延胡索酸(fumaricacid)和樟脑磺酸。由碱制备的盐包括铵盐、碱金属盐如钠盐和钾盐、碱土金属盐如钙盐和镁盐、和锌盐。所述盐可通过传统方法形成,如通过使游离酸或游离v5威形式的产物与一种或多种适当的石咸或酸对等物(equivalent)在该盐不溶的溶剂或介质中或在诸如水的溶剂中反应,所述诸如水的溶剂随后在真空中、或通过冷冻干燥、或通过将现存盐的离子交换为适当离子交换树脂上的另一离子而被除去。43要求保护的组合物也可以被配制为药物上可接受的盐(如酸加成盐)和/或其复合物(complexes)。药物上可接受的盐是在其被给药的浓度下无毒的盐。这些盐的制备可以通过改变该组合物的物理化学性质而促进药学应用,而不妨碍该组合物发挥其生理作用。物理性质中有用的变化的实例包括降低熔点以促进跨粘膜给药和提高溶解度以促进更高药物浓度给药。药物上可接受的盐包括酸加成盐,如包含硫酸盐、盐酸盐、磷酸盐、氨基磺酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、曱磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对曱苯磺酸盐、环己基氨基磺酸盐和奎尼酸盐的那些。药物上可接受的盐可以从酸获得,如盐酸、硫酸、磷酸、氨基磺酸、醋酸、柠檬酸、乳酸、酒石酸、丙二酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对曱苯磺酸、环己基氨基磺酸和奎尼酸。这样的盐可通过,例如使游离酸或游离石咸形式的产物与一种或多种适当的碱或酸对等物,在该盐不溶的溶剂或介质中,或在诸如水的溶剂中反应而制备,所述诸如水的溶剂随后在真空中、或通过冷冻干燥、或通过将现存盐的离子交换为适当离子交换树脂上的另一离子而一皮除去。尽管化合物以其酸或酰胺形式在本文中描述,应该认识到每个分子的酸和酰胺形式都被考虑。鉴于其药理性质,本文所述的化合物是有用的。特别地,该化合物具有作为药剂的活性以便治疗充血性心力衰竭。该化合物也具有作为药剂的活性,用于治疗糖尿病,包括I型和II型糖尿病;用在会通过降低血浆葡萄糖水平的药剂而获益的疾病的治疗中;用于预防高血糖;用于预防高血压;和用于治疗会通过给予用于延迟和/或延緩胃排空的药剂而获益的疾病的治疗。本发明的化合物也具有作为药剂的活性,用于减少食物摄入、抑制食欲并治疗肥胖症。术语"充血性心力衰竭"是指心脏功能受损,其使心脏在休息或活动时不能保持正常的血液输出,或在正常的心脏充盈压(fillingpressure)的情况下不能保持正常的心输出量。左心室射血分数约40%或更少是充血性心力衰竭的指示(通过比较的方法,射血分数约60%为正常)。患有充血性心力衰竭的患者显示出公知的临床症状和体征,如呼吸急促、胸膜腔积液、休息或运动时疲劳、收缩机能障碍(contractile44dysfunction)和水胂。充血性心力衰竭容易通过公知方法被诊断(参见,例J(口"Consensusrecommendationsforthemanagementofchronicheartfailure",』m.,CW/o/.,83(2A):1A-38A,1999)。如果个体吸烟,肥胖,已经或将要暴露于心脏毒性化合物如蒽环类抗生素,或患有或曾经患有高血压、缺血性心脏病、心肌梗塞、已知增加心力衰竭风险的遗传缺陷、心力衰竭家族史、心月几肥大、肥厚型心月几病、左心室收缩功能障碍、冠状动脉旁路手术、糖尿病、血管疾病、动脉粥样硬化、酒精中毒、心包炎、病毒感染、牙龈炎或饮食性疾病(如,神经性厌食或暴食症(bulimia)),或酒精或可卡因成瘾,则该对象可能处于充血性心力衰竭的风险中。尽管"肥胖症"通常被定义为体重指数超过30,出于本公开的目的,需要或希望减轻体重的任何对象,包括体重指数小于30的那些,被包括在"肥胖"的范围内。根据本公开的方法,GLP-l分子或其激动剂或类似物,或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物,可以以本领域已知的任何方式给药,所述方式使这些分子对对象、细胞、细胞群或组织以有效量而生物可用。例如,GLP-l分子或其激动剂或类似物或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可通过本领域已知的任何中枢或外周途径给药,包括但不限于口服、肠道外、透皮、透粘膜或肺部途径。在一种实施方式中,给药是经肠道外的。在一种实施方式中,所述GLP-l分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物的给药模式是通过外周(皮下或静脉内)给药。一种特定的给药途径是皮下。另一方面,所述外周给药选自颊部、鼻部、肺部、口腔、眼内、直肠和透皮给药。而且,GLP-l分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可以通过倾倒、移液(pipetting)、浸没、注射、输注、灌注或本领域已知的任何其它方式给予细胞、细胞群或组织。适当给药方法的确定通常考虑待治疗的疾病(状况)(如病或病症)、疾病(如病或病症)阶段、对象舒适程度和本领域普通技术人员已知的其它因素而进行。通过本文公开的方法给药可以是间断的或连续的,都以短期和/或长期为基础。在一种实施方式中,GLP-l分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物的给药是连续的。连续静脉或皮下输注及连续经皮输注是用于本公开的给药方法的示例性实施方式。皮下输注——短期或长期,是特别优选的给药实施方式。—方面,毒封斤外泌肽或毒蜥外泌肽激动剂或类似物被皮下给药。在一种实施方式中,每一剂量给予约l微克到约20毫克毒蜥外泌肽或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。在另一实施方式中,每一剂量给予约30微克到约10毫克,或约300微克到约5毫克的毒晰外泌肽或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。又在另一实施方式中,每一剂量给予约30微克到约1毫克的毒蜥外泌肽或毒蜥外泌肽激动剂或类似物。—方面,GLP-1或GLP-1激动剂或类似物;故皮下或静-脉给药,例如,以每剂量约1孩t克到约20毫克的GLP-1或GLP-1激动剂或类似物。在一种实施方式中,每一剂量给予约30微克到约IO毫克、或约300微克到约5毫克的GLP-1或GLP-1激动剂或类似物。在另一实施方式中,每一剂量给予约30微克到约1毫克的GLP-1或GLP-1;敫动剂或类似物。如上文所提到,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥给药、包括在i暂事件发1前、、之;和/或之^的一段^"间临时:药。短期给药通常需要由短暂事件或疾病指示而给药。例如,短期给药可能在进展性心肌梗塞(evolvingmyocardialinfarction)过程中或不稳定型心绞痛过程中被涉及。经皮心脏介入(percutaneouscardiacintervention)("PCI")之前、之中和/或之后给药也构成短期给药的实例。此外,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可在任何心脏手术如开心手术、冠状动脉l荅桥、农i创心脏手术、瓣膜成形术或心脏移才直之前、期间和/或之后短期给药。可选地,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物也可以在心肌梗塞或手术后的充血性心力衰竭的基础上短期给药。特定事件之前、之中和/或之后的短期给药可在该事件(例如,如手术或移植)发生前的任何时间开始,并可持续任意长的时间,包括该事件后的延长时间段,这对于预防或改善与该事件相关的心肌细胞损伤或死亡是有用的。短期给药的持续时间可以由临床医生根据与该事件或疾病相关的心月几细^^损伤或死亡的风险确定。在一种实施方式中,短期给药的持续时间是1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、18小时、24小时、36小时、48小时或72小时。在没有识别出与充血性心力衰竭关联的特定短暂事件或短暂疾病时,可允许长期给予GLP-1分子或其激动剂或类似物或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物,用于预防或治疗充血性心力衰竭的。长期给药包括,在充血性心力衰竭的普通诱因的基础上或在非短暂的素因性(predisposing)状况(如,非短暂状况可未^^皮识别或不易消除,如高血压或缺血性心脏病)的基础上,在不确定时间段内给予GLP-1分子或其激动剂或类似物或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物。GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可以以本公开的方式长期纟会药,以-使预防充血性心脏病,而无i仑其病因。用于预防充血性心力衰竭的GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物的长期给药也可在有该疾病风险的糖尿病患者中涉及。GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒封斤外心脏移植的个体中保持移植的器官。当GLP-1分子或其激动剂或类似续任i长度的时间。然^,、长期给;通常进行延长的时间段。例:口,在一种实施方式中,长期给药持续72小时以上。在另一实施方式中,长期给药持续96小时、120小时、144小时、l周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、ll周、12周、4个月、5个月、6个月、9个月、l年、2年或更长。在一种实施方式中,给予GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物以预防充血性心力衰竭可以是预防性处理,与使对象处于充血性心力衰竭的风险的疾病(如,病或病症)的i貪断同时开始,例如,如在心力几梗塞(MI)i貪断时。在可选方案中,给予GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物以预防充血性心力衰竭可以在与充血性心力衰竭相关的症状发生之后发生。术语"有效量"指的是用于治疗、改善、预防或消除所识别的疾病(如,病或病症),或用于显示出可^r测的治疗或预防效果的药剂量。效果可以通过,例如,化学标记物、生物标记物、抗原水平或诸如发病率或死亡率的可检测事件的时间来检测。治疗效果包括防止心脏功能的进一步损失或减弱心脏重塑或两者。治疗效果也包括左心室腔的扩大速率减慢。进一步的治疗效果包括对象身体症状的减轻,例如,如呼吸急促身体活动的能力提高。对于对象的准确有效量将取决于对象的体重、身材和健康状态;疾病性质和程度;以及被选择给予的治疗或治疗组合。对于给定状况的有效量可以通过常规实验确定,其在临床医生的技能和判断内。对于任何GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物,有效量可以在例如细胞培养试^r中、或在诸如大鼠或小鼠模型的动物模型中被初始估计。动物模型也可以被用于确定合适的浓度范围和给药途径。这样的信息随后可以被用于确定在人类中有用的剂量和给药途径。效力和毒性可通过标准药学程序在细胞培养物或实验动物中确定,如EDso(在群体的50%中治疗有效的剂量)和LDm)(对群体的50%致死的剂量)。毒性效果和治疗效果之间的剂量比是治疗指数,并且其可以被表示为比例LD5。/ED5。。显示出高治疗指数的药物组合物是优选的。从细胞培养物试验和动物研究中获得的数据可以被用于配制一系列剂量用于人类使用。这样的组合物中包含的剂量优选地在循环浓度的范围内,所述循环浓度包括ED50并具有很小毒性或没有毒性。剂量可在此范围内取决于采用的剂型、患者的敏感性和给药途径而变化。在一种实施方式中,方法也包括给予GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物,以改善与充血性心力衰竭相关的心脏功能。改善心脏功能可包括心脏收缩功能或心脏舒张功能或两者的改善。改善心脏功能也可包括E/A比例、左心室射血分数(LVEF)或左心房容积(LAV)的改善。示例性分子包括但不限于HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS(SEQIDNO:3)的C-末端酰胺形式,和C-末端酸肽HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSKEIIS-OH(SEQIDNO:60)。改善的心脏功能可通过本领域已知的任何方法测量,包括实施例5-7中所述的方法。在评价与充血性心力衰竭相关的改善的心脏功能时,改善的功能可以是与给予GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物之前的心脏功能相比较的任何量的改善。可选地,改善的功能可以是与仅接受载体(vehicle)的匹配对照对象的心脏功能相比的任何量的改善。例如,治疗后LVEF的改善(即,提高)可以是约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、150%、200%或高于约200%。在另一实例中,治疗后E/A比例的改善可以是约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、150%、200%或高于约200%。而在另一实例中,LAV的改善可以是约10%、20Q/o、30%、40o/。、50%、60%、7()o/o、80%、90%、100%、150%、200%或高于约200%。在一种实施方式中,方法也包括给予GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物,用以减弱心脏重塑。心脏重塑可通过本领域已知的任何方法测量,包4舌实施例5-7中所述的方法,如超声心动图。作为一个实例,左心室腔尺寸可被用作心脏重塑的度量。在评价心脏重塑的减弱中,左心室尺寸增大的减弱可以是与给予GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物之前的左心室尺寸相比任何量的减弱。可选地,左心室尺寸增大的减弱可以是与仅接受载体的匹配对照对象的左心室尺寸相比任何量的减弱。左心室腔尺寸可通过,例如测量左心室舒张末期内径(LVEDD)或左心室收缩末期内径(LVESD)而一皮测量。在一个实例中,用GLP-1分子或其激动剂或类似物或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物治疗后,LVEDD的改变可以是10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、150%、200%或高于约200%。在另一实例中,用GLP-1分子或其激动剂或类似物或毒浙外泌肽分子或其激动剂或类似物治疗后,LVESD的改变可以是10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、150%、200%或高于约200%。公开WO2006110887A2中所述的特定GLP-1激动剂和毒蜥外泌肽激动剂被特别地排除了这种用途。在一种实施方式中,方法也包括给予GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物,用以减弱与充血性心力衰竭相关的胰岛素抵抗。与充血性心力衰竭相关的胰岛素抵抗可通过本领域已知的任何方法测量,包括实施例5-7中所述的方法。例如,胰岛素抵抗可通过测试血浆胰岛素水平、血浆葡萄糖水平或稳态模型评估(HOMA)来测量。作为一个实例,用GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物治疗后,血浆胰岛素或血浆葡萄糖水平的降低可以是10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、150%、200%或高于约200%。在另一实例中,用GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物治疗后,HOMA的改变(降低)可以是10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、150%、200%或高于约200%。在一种实施方式中,方法也包括给予GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物,用以改善患有充血性心力衰竭的对象的运动能力。运动能力的改善可通过本领域已知的任何方法测量,包括实施例5-7中所述的方法。例如,运动能力的改善可通过测试V02摄入峰值或运动能力与峰值乳酸比例来测量。运动中氧摄入峰值可通过例如间接量热法来测定。在一个实例中,用GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物治疗后,运动能力与峰值乳酸比例的改变可以是10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、150%、200%或高于约200%。在一种实施方式中,方法也包括给予GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物,用以改善心脏收缩性。改善心脏收缩性可包括可用于收缩的心肌细胞数量的提高,心肌细胞收缩能力的提高,或两者。为了评价心脏收缩性的改善,可采用任何形式的评估。例如,临床表现,如心输入量提高或心率降低或两者,可以导致确定心脏收缩性增加。可选地,体内心脏收缩性提高可通过确定左心室缩短分数(fractionalshortening)^是高被评估。左心室的缩短分数可由任何可用的方法观察,如超声心动图。在评价心脏收缩性增加时,左心室缩短分数提高可以是与给予GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物之前的缩短分数比较任何量的提高。例如,缩短的增加可以是约10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、150%、200%或高于约200%。另一方面,提供了预防和治疗的方法。考虑了基于短期或长期的治疗。此外,如果有这样的指征,基于短期的治疗可被延长为长期治疗。一方面,提供了在需要它的对象中治疗或预防与充血性心力衰竭相关状况的方法。该方法一般包括给予对象有效预防或改善充血性心力衰竭量的GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒晰外泌肽分子或其激动剂或类似物,其中与充血性心力衰竭相关的状况由此被改进。如本文所述,任何GLP-1分子或其激动剂或式进行。'、3.、—5、、'p、。、、。、而在另一实施方式中,方法进一步包括需要治疗的对象的识别。可使用任何有效标准,以确定对象可能从GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒浙外泌肽分子或其激动剂或类似物的给予中获益。例如,用于诊断心脏病和糖尿病的方法以及用于识别有发生这些状况风险的个体的程序,是本领域技术人员公知的。这样的程序可以包括临床检查、身体检查、个体访问和家族史评估。在一种实施方式中,本文/>开的GLP-1激动剂或类似物和毒蜥外泌肽分子及其激动剂或类似物与天然GLP-1相比,在血浆中具有提高的稳定性。在另一实施方式中,本文公开的任一种GLP-1激动剂或类似物和毒封斤外泌肽分子及其激动剂或类似物中的90%以上抗降解,即具有提高的血浆稳定性,如通过在血浆中温育5小时后90%的肽分子完整所示。又在另一实施方式中,本文公开的任一种GLP-1激动剂或类似物和毒晰外泌肽分子及其激动剂或类似物中的75%以上抗降解,即具有提高的血浆稳定性,如通过在血浆中温育2小时后75%的肽分子完整所示。具有提高的稳定性的肽的实例可在表1中找到。在一种实施方式中,具有提高的血浆稳定性的GLP-1激动剂或类似物和毒蜥外泌肽分子及其激动剂或类似物的实例包括化合物3922、4103、4596、4597、4784、4792、4793、4855、4856、5272、5194、5112、5090、5091、5092、5096、5099、5100、5102、5452、5128、5129、5130、5271、5182、5196、5270、5271、5272、5197、5452、5450、5198、5199、5200、5264、5265、5266、5267、5268、5269、5391、5097、5098、5101、5103、5131、5526、5132、5185、5186、5294、5296、5297、5440、5441、5442、5443、5444、5445、5446、5451、4983、4984、5201、5202、5203、5293、4992、5447、5540或5052或这些化合物的任何子集中的至少一种。在另一实施方式中,具有提高的血浆稳定性的GLP-1激动剂或类似物和毒蜥外泌肽分子及其激动剂或类似物的实例包括化合物3922、4103、4596、4597、4855、4856、5194、5112、5090、5091、5092、5096、5099、5102、5452、5129、5182、5452、5200、5267、5268、5269、5391、5101、5103、5131、5132、5185、5186、5294、5297、5440、5441、5442、5443、5451、4983、4992或5052或这些化合物的任何子集中的至少一种。为了评1^介稳定性,目的化合物以20吗/mL的浓度一皮掺入血浆。它一式三份在37。C温育0、1、2、3、4、5个小时。在每个时间点,MeOH被加入到96孔微滴定盘中,并且随后样品以1份样品对4份MeOH的比例寻皮加入,以终止消化反应。样品用多通道移液器(multi-channelpipette)或液体操作器(liquidhandler)混合。该盘随后被离心IO分钟并置于保持在l(TC的自动样品仪中。样品随后被注射进装备有自动加样器(LeapHTCPal)和HPLC泵(ShimadzuLC-10ADVP)的质谱仪(API3000,AppliedBiosystems)中。GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒浙外泌肽分子或其激动剂或类似物可以纟皮配制为药物组合物,与本7>开所述的方法关联应用。本文公开的组合物可以以适合肠胃外(包括静脉、肌肉内和皮下)或鼻腔或口腔给药的制剂形式被方便地提供。在一些情况下,在用于共同给药的单一组合物或溶液中提供GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒封斤外泌肽或其激动剂或类似物;和另一种活性剂,如另一种减少食物摄入、降低血糖或降低血脂的药剂,如糊精、糊精激动剂、CCK或痩素,或另一种心脏治疗剂如血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂,将是方便的。在其它情况下,与所述GLP-1或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽或其激动剂或类似物分开给予其它药剂可能是更有利的。合适的给药形式最好由医务人员对每个对象分别确定。合适的药物上可接受的载体及其制剂在标准制剂论著中描述,如E.W.Martin的i细/wg/ow,s/Vza簡acew"'ca/5Wewcw。也参见Wang,Y丄andHanson,M.A."ParenteralFormulationsofProteinsandPeptides:StabilityandStabilizers",Jowma/o/尸"rewfera/iSWewce"w<irec/mo/ogy,TechnicalReportNo.10,Supp.42:2S(1998)。化合物可以作为不经肠胃的组合物提供,用于注射或输注液。它们可以,例如,^皮悬浮在惰性油中,合适地为才直物油,如芝麻52油、花生油、橄榄油,或被悬浮在其它可接受的载体中。在一种实施方式中,它们被悬浮在水性载体中,例如,在pH约3.0到8.0或在pH约3.5到5.0下的等渗緩冲溶液中。在可选的实施方式中,pH值可被调整到约5.0到约8.0的pH范围。这些组合物可通过传统的灭菌技术被灭菌,或可被无菌过滤。组合物可包含接近生理条件所要求的药物上可接受的辅助物质,如pH緩冲剂。有用的緩冲剂包括,例如醋酸钠/醋酸緩沖液。贮藏或"贮库(depot)"形式的缓释配制物可被使用,以便治疗有效量的配制物在透皮注射或输送后数小时、数天或数周期间被输送到血流中。持续释放基质的实例如PLGA及其制剂可以在例如公开WO2005/102293A1中找到,其被完整引入作为参考。所需的等渗性可使用氯化钠或其它药物上可接受的药剂如右旋糖、硼酸、酒石酸钠、聚乙二醇、多元醇(如甘露醇和山梨醇)或其它无机或有机溶质实现。氯化钠对含有钠离子的緩冲液特别有用。术语"药物上可接受的赋形剂"是指用于给予药物制剂如GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽或其激动剂或类似物的赋形剂。该术语是指可被给予而没有过度毒性的任何药物赋形剂。药物上可接受的赋形剂部分由被给予的具体组合物决定,并且由用于给予该组合物的具体方法决定。因此,存在各种合适的药物组合物制剂,用于本公开的方法(参见,例^口,i^m/wgfo"k/Vz"rmacew"c"//SWewc^s)。合适的赋形剂可以是载体分子,其包括大的、代谢慢的大分子,如蛋白、多糖、聚乳酸、聚乙醇酸、聚合氨基酸、氨基酸共聚物和失活病毒颗粒。其它示例性的赋形剂包括抗氧化剂,如抗坏血酸;螯合剂,如EDTA;碳水化合物,如糊精、环糊精、羟基烷基纤维素、羟基烷基甲基纤维素、硬脂酸;液体,如油、水、盐水、甘油和乙醇;润湿剂或乳化剂;pH緩沖物质;等等。脂质体也被包含在药物上可接受的赋形剂的定义中。载体和赋形剂的其它实例包括碳酸钙,磷酸钙,各种糖,如乳糖、葡萄糖或蔗糖,或各种类型的淀粉,纤维素衍生物,明胶,植物油,聚乙二醇和生理上相容的溶剂。某些GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子^受的质子i剂和在;直物油中少i溶解(、微溶)'。然而,该:合物;在中链脂肪酸(如辛酸和癸酸)或甘油三酯中溶解,并且在中链脂肪酸的聚乙二醇酯中具有高溶解度。也被考虑用于本公开的方法中的是组合物(组分),该组合物(组分)已经通过化学或生化部分的取代或添加被修饰,所述修饰使它们更适合输送(如,提高溶解度、生物活性、适口性,降低不利反应等),例如,通过酯化、糖基化、聚乙二醇化等。GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒晰外泌肽分子或其激动剂或类似物也可在自乳化药物输送系统(SEDDS)中被配制用于口服给药。脂基制剂如SEDDS对于低溶解度化合物特别合适,并且可以一般地增强这些化合物的口服生物利用度。在可选的实施方式中,环糊精可作为水溶解度增强剂被加入。环糊精包括a-、P-和Y-环糊精的曱基、二曱基、羟丙基、羟乙基、葡糖基、麦芽糖基和麦芽三糖基(maltotrisoyl)衍生物。示例性的环糊精溶解度增强剂是羟丙基-P-环糊精(HPBC),其可被加入任何上述组合物中,以进一步提高GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物的水溶解度性质。在一种实施方式中,组合物包含0.1%到20。/。的羟丙基-P-环糊精,1%到15%的羟丙基-|3-环糊精,或2.5%到10%的羟丙基-|3-环糊精。使用的溶解度增强剂的量取决于组合物中GLP-1分子或其激动剂、或毒浙外泌肽分子或其激动剂的量。在另一实施方式中,吸收增强剂可被加入,其包括但不限于阳离子聚氨基酸,如聚精氨酸、聚组氨酸和聚赖氨酸。其它合适的吸收增强剂包括壳聚糖和磷脂,如二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)。如果希望,本文所述的组合物的溶液可用诸如曱基纤维素的增稠剂稠化。它们可以以乳化形式——或是油包水或是水包油——被制备。多种药物上可接受的乳化剂中任意可被采用,其包括,例如阿拉伯胶粉末、非离子表面活性剂(如Tween)、或离子表面活性剂(例如A威性聚醚醇發u酸盐或》黄酸盐,如Triton)。组合物可通过混合各成分按照通常接受的程序制备。例如,选定的组分可在搅拌器或其它标准设备中简单地混合以产生浓缩的混合物,其随后可通过水或增稠剂的加入被调整到最终的浓度和粘度,并且可能加入緩冲剂控制pH或加入额外的溶质控制渗透性。对于医生的使用,组合物可以被提供为含有一定量GLP-1或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽或其激动剂或类似物如毒蜥外泌肽-3和/或毒蜥外泌肽-4的剂量单位形式。本领域技术人员将认识到,治疗剂的有效量将随多种因素变化,包括对象的年龄和体重、对象的身体状况和其它因素。待给药的准确剂量由主治医生确定,并耳又决于例如具体化合物在本文引用范围内位于哪处。在任何期望治疗效果的时候,例如,在症状的首次迹象或充血性心力衰竭或糖尿病诊断后短时间内,给药应该开始。给药可通过注射,如皮下或月几肉内。口月良活性化合物可以口服,但是剂量应该增大5-20倍。用于对象的本申请化合物的优化制剂和给药模式取决于本领域已知的因素,如具体疾病或病症、期望的效果和对象的类型。尽管化合物将典型地被用于治疗人类对象,它们也可被用于治疗其它脊推动物中相似或相同的疾病,所述其它脊推动物如其它灵长类,农场动物如猪、牛和家禽,及运动动物(sportsanimal)和宠物如马、狗和猫。另一方面,结合用于本文公开方法中的GLP-1分子或其激血性心力衰竭的一种或多种其它活性成分也是可能的。例如,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可与一种或多种其它化合物——如用于充血性心力衰竭、用于肥胖症治疗、用于降低葡萄糖等——组合,如本文所述,其为单一剂型或意欲同时或顺序给予需要治疗的对象的分开的剂型。当顺序给药时,组合可以在两次或多次给药中给予。在可选的实施方式中,通过不同的途径给予GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物,及一种或多种其它活性成分是可能的。技术人员也将认识到,多种活性成分可与GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物联合给予,这可以发挥提高或协同增强预防或治疗目标疾病如充血性心力衰竭的作用。根据本文公开的方法,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可以(1)在联合制剂中被共同配制并同时给药或输送;(2)作为单独制剂交替或并行输送;或(3)通过本领域已知的任何其它联合治疗方案。当在交替治疗中输送时,方法可包括顺序给予或输送活性成分,如在单独的溶液、乳剂、悬液、片剂、丸剂或胶嚢中,或通过在分开的注射器中个別注射。一般来说,在交替治疗中,有效剂量的每种活性成分被顺序地、即顺次地给予;而在同时治疗中,有效剂量的两种或多种活性成分被共同给予。各种顺序的间歇组合治疗也可以被使用。在一种实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或抑制剂组合,用于治疗充血性心力衰竭。在一种实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物与曱巯丙脯酸(CAPOTEN)联合使用。在其它实施方式中,本公开的药剂可与一种或多种其它ACE抑制剂,如贝那普利(benazepril)(LOTENSIN)、依那普利(enalapril)(VASOTEC)、赖诺普利(lisinopril)(PRINIVIL,ZESTRIL)、福辛普利(fosinopril)(MONOPRIL)、雷米普利(ramipril)(ALTACE)、培哚普利(perindopril)(ACEON)、喹那普利(quinapril)(ACCUPRIL)、莫西普利(moexipril)(UNIVASC)和群多普利(trandolapril)(MAVIK)联合使用。在另一实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可与一种或多种|3阻断剂联合应用来治疗充血性心力衰竭,所述|3阻断剂如索他洛尔(sotalol)(BETAPACE)、參吗洛尔(timolol)(BLOCADREN)、艾司洛尔(esmolol)(BREVIBLOC)、卡替洛尔(carteolol)(CARTROL)、卡维地洛(carvedilol)(COREG)、纳多洛尔(nadolol)(CAOGARD)、普萘洛尔(propranolol)(INDERAL)、普萘洛尔(propranolol)(INDERAL-LA)、倍他洛尔(betaxolol)(KERLONE)、喷布洛尔(penbutolol)(LEBATOL)、美4乇洛尔(metoprolol)(LOPRESSOR)、拉贝洛尔(labetalol)(NORMODYNE)、醋丁洛尔(acebutolol)(SECTRAL)、阿替洛尔(atenolol)(TENORMIN)、美托洛尔(metoprolol)(TOPROL-XL)、拉贝洛尔(labetalol)(TRANDATE)、吲哚洛尔(pindolol)(VISKEN)和比索洛尔(bisoprolol)(ZEBETA)。56在另一实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可与一种或多种血管紧张素II受体阻断剂(ARB)如坎地沙坦酯(candesartancilexetil)(ATACAND)、厄贝沙坦(irbesartan)(AVAPRO)、氯沙坦(losartan)(COZAAR)、缬沙坦(valsartan)(DIOVAN)、替米沙坦(telmisartan)(MICARDIS)和甲磺酸依普罗沙坦(eprosartanmesylate)(TEVETEN)联合,用于治疗充血性心力衰竭。在另一实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可与一种或多种醛固酮拮抗剂如安体舒通(spironolactone)(ALDACTAZIDE)和依普利酮(eplerenone)(INSPRA⑧)联合,用于治疗充血性心力衰竭。在另一实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒晰外泌肽分子或其激动剂或类似物可与一种或多种血管肽酶(vasopeptidase)抑制剂联合,用于治疗充血性心力衰竭。血管肽酶抑制剂包括具有天然内肽酶(NEP)和ACE抑制活性的NEP/ACE抑制剂。NEP/ACE抑制剂的实例包括,但不限于三环benzazepinone硫醇(tricyclicbenzazepinonethiol)、奥马屈4立(omapatrilat)、gemopatrilat、mixanpril、消旋卡多曲(racecadotril)、法西多曲(fasidotril)、山巾白曲拉(sampatrilat)、MDL100.240Z13752A、BMS189921、BMS182657和CGS30008。适合用于本文的NEP/ACE抑制剂的实例包括美国专利号5,362,727、5,366,973、5,225,401、4,722,810、5,223,516、4,749,688和5,552,397中公开的那些。GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可与本领域已知的任何用于充血性心力衰竭的疗法组合,用于治疗充血性心力衰竭。例如,在一种实施方式中,GLP-1分子或其激动剂或类似物、或毒蜥外泌肽分子或其激动剂或类似物可与诸如心脏再同步(cardiacresynchronization)的治疗设备联合,用于治疗充血性心力衰竭。为了帮助本发明的理解,以下实施例^皮包括。与本发明相关的实验当然不应该被解释为特别地限定本发明和本发明的这些变化,现在已知的或今后发展的——其会在本领域普通技术人员的范围内,被认为落入这里描述及以下要求的本发明的范围内。本文引用的每一个参考文献被完整引入作为参考。实施例实施例1.受体结合实验膜从表达内源性GLP-1受体的RINm5f细胞的铺满培养中制备。膜与[1251]人GLP-1(2000Ci/mmol)并与未标记的肽在96孔聚苯乙烯一反中、在环境温度下温育60分钟。孔内含物-使用PerkinElmer平板收集器(plateharvestor)收集到96孔玻璃纤维板上。干燥的玻璃纤维板与闪烁体混合并在PerkinElmer闪烁计数器上计数。实施例2.环化酶测试G丄/VG/尸/cr豕化躇(^/a^》y试5pl连续稀释的肽被转移到384孔测试平板中。大鼠胰腺胰岛素瘤细胞(RIN-m5f)用Versene从组织培养瓶中分离并在缓沖液中清洗一次。随后,RIN-m5f细胞以2.5xl(^细胞/ml被重悬浮在緩冲液中。接着10pl细胞(2.5x104细胞)被加入测试平板的所有孔中,并且细胞在室温下黑暗中刺激30分钟。反应用1Ojil裂解緩冲液终止并在室温下黑暗中温育4小时。cAMP含量使用PerkinElmerAlphaScreencAMP测试试剂盒测定,并且结果在PerkinElmerFusion菱光光度计上读取。该测试在384孔+反中以25孩i升的体积完成。5^1连续稀释的肽被转移到384孔测试平板中。大鼠曱状腺癌细胞(6-23)用Versene从组织培养瓶中分离并在緩冲液中清洗一次。随后,6-23细胞以3.0x106细胞/1111被重悬浮在緩沖液中。接着10pl细胞(3.0x104细胞)被加入测试平板的所有孔中,并且细胞在室温下黑暗中刺激30分钟。反应用10|al裂解緩沖液终止并在室温下黑暗中温育4小时。cAMP含量使用PerkinElmerAlphaScreencAMP测试试剂盒测定,并且结果在PerkinElmerFusion荧光光度计上读取。该测试在384孔板中以25微升的体积完成。实施例3.葡萄糖降〗氐实验每笼3只圈养的雌性NIH/Swiss小鼠(约8-20周龄)(HarlanIndianapolis,IN,USA)被允许随意获取食物和水直到实马全开始。治疗前2小时,获取食物受限。治疗开始时,尾尖用针刺以获得1^1血液,作为"治疗前"对照血液样品。随后,每只小鼠被腹腔内(IP)立即注射测试样品(1nmol/kg或2nmol/kg)或200[il载体(10%DMSO盐水)。其它血液样品在注射后30、60、120、180和240分钟收集。血糖用葡萄糖氧化酶生物传感器(OneTouchUltra(LifeScan,Inc.,aJohnson&JohnsonCompany,Milpitas,CA))测量。在每个时间点,测试样品的效果被表示为相对于仅注射载体的小鼠的血糖变化百分数。测试样品和载体对照也与其各自的"治疗前"对照比较。测试样品的显著效果通过ANOVA鉴定(p<0.05)。在显著差异存在之处,用Dunnett,spost检验、使用用于Windows的GraphPadPrism版本4.00(GraphPadSoftware,SanDiegoCaliforniaUSA,www.graphpad.com)比專交测试平均值与对照平均<直。本文乂>开的毒蜥外泌肽类似物已经显示出相对于载体对照有效降低血糖。参见,例如表1和图1A-B。实施例4.食物摄入实验所有小鼠(NIH:Swiss小鼠)被圈养在22(士2)。C、60(±10)%湿度和12:12明暗周期的稳定环境中,灯在0300时打开。小鼠以三只一组被圈养在标准笼中,可随意获取食物(Teklad:LM485;Madison,Wis.)和水,除非有说明,实验前持续至少2周。所有的实验在0700到0900小时之间进行。小鼠被禁食(在实验前一天,食物于1530从所有动物移去)。所有小鼠接受lmg/kg的载体(10%DMSO盐水)或测试化合物的腹膜内注射(200|il),并立即给予预先称重的食物颗粒(TekladLM485)。该食物颗粒以30分钟、1小时和2小时的间隔称重以确定被吃掉的食物量。测试样品的显著效果通过ANOVA鉴定(p<0.05)。在显著差异存在之处,用Dunnett,s检验比较测试平均值与对照平均值。带有Dunnett,spost4全'验的单向(one-way)ANOVA4吏用用于Windows的GraphPadPrism片反本3.01,GraphPadSoftware,SanDiegoCalifornia进行。参见,例如表1。实施例5.MI诱导CHF动物模型SpragurDawley大鼠进行左侧冠状动脉结扎,以引发心肌梗塞(MI)及随后的充血性心力衰竭。一些大鼠进行假手术。冠状动脉结扎后两周开始,大鼠用GLP-1(2.5或25pmol/kg/min)、[Leu"]-毒蜥外泌肽-4酰胺(1.67或5pmol/kg/min)或载体通过皮下输注处理11周。心脏功能和重塑通过超声心动图评估。在研究的最后,大鼠进行平板试验,血液动力学测定值和空腹(12小时禁食)胰岛素和葡萄糖浓度被测定,并且胰岛素抵抗的主要指数稳态模型评估(HOMA)被计算。锻炼中的峰值氧摄入通过间接量热法测量。进行经胸Doppler超声心动图。简单地说,短轴图像在乳头肌水平获得,并且2D导向M-才莫式追踪(2DguideMmodetracing)以100mm/s的速度被记录。左心室舒张末期内径(LVEDD)和收缩末期内径(LVESD)根据美国超声心动图协会(AmericanSocietyforEchocardiography)的先进方法测量。左心房容积(LAV)和射血分数(LVEF)从长轴视图被测量并计算。二尖瓣流入的Doppler脉冲波谱从尖端5腔视图(apical5-chamberview)获得。取样容积被置于二尖瓣叶的尖端并一皮调整到最大速度的位置。早期(E)和晚期充盈波(A)的峰被测量并且E/A比例被计算。用GLP-1或化合物4103的长期治疗改善了MI诱导CHF后心脏的舒张和收缩功能。图2A-C。指示"L"和"H"分别表示低剂量和高剂量的药物。(E/A比例和左心房容积(LAV)代表心脏舒张功能;左心室射血分数(LVEF)代表心脏收缩功能)。MI诱导CHF后,GLP-1或化合物4103的长期治疗减小了左心室腔尺寸的增大。图3A-B。指示"L"和"H"分别表示低剂量和高剂量的药物。左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD)表示左心室腔尺寸。LVEDD和LVESD根据美国超声心动图十办会(AmericanSocietyforEchocardiography)的先进方法观寸量。在MIi秀导CHF后,GLP-1或化合物4103的长期治疗减轻胰岛素抵抗并提高胰岛素敏感性。图4A-C。指示"L"和"H"分别表示低剂量和高剂量的药物。高胰岛素血症和高血糖症在MI后的13周在未治疗的对照组中发生。如所示,长期治疗可以正常化空腹血浆胰岛素和葡萄糖水平,并提高胰岛素敏感性(由稳态模型评估(HOMA)测量,它是胰岛素抵抗的主要指数)。图5A-C示出MI诱导CHF后,用GLP-1或化合物4103长期治疗提高运动能力和效率。指示"L"和"H"分别表示低剂量药物和高剂量药物。在平板试验时,两只大鼠被同时置于恒定5%倾斜度的两道平板(ColumbusInstruments,Columbus,OH)上,其被代谢艙(OxymaxDeluxe,ColumbusInstrument)围绕,空气流以恒定的速度穿过该代谢舱。基础测定值在8-10分钟的时间段内获得。平板随后以8m/min的速度启动3分钟,接着是12m/min3分钟,并随后保持在18m/min直到小鼠力竭。平板测试的终止点由大鼠不能在平板上保持步伐并落在电击网上超过6秒确定。运动能力(EC)被计算为EC(kgm"体重(kg)x斜坡角度x跑动距离。耗氧量(vo2)、二氧化碳生成量(vco2)按所述测量。在平板试验后1分钟内,血浆乳糖和葡萄糖被测定。平板试验由不参与该研究的一名研究人员进行并分析。图6A-C说明MI诱导CHF以后,用GLP-1或化合物4103的长期治疗导致降低的基线血浆乳酸水平和提高运动能力对峰值乳酸比例。指示"L"和"H"分别表示低剂量药物和高剂量药物。用GLP-1、毒蜥外泌肽、或毒蜥外泌肽或GLP-1激动剂的长期治疗可以在充血性心力衰竭的动物模型中提高心脏功能,减弱心脏重塑,并增强运动能力。用GLP-1、毒蜥外泌肽、或毒蜥外泌肽或GLP-1激动剂的长期治疗也改善运动行为并提高与CHF相关的胰岛素敏感性。因此,GLP-1和肠降血糖素模拟物代表了用于充血性心力衰竭治疗的潜在的新治疗方法。实施例6.GLP-1与ACE抑制剂联合用于充血性心力衰竭的治疗如实施例5中所述,SpragueDawley大鼠进行左侧冠状动脉结扎,以引发心肌梗塞(MI)及随后的充血性心力衰竭。冠状动脉结扎后两周开始,大鼠用GLP-1、曱巯丙脯酸(150mg/kg/D口服;"Cap")、联合治疗(GLP-1和甲巯丙脯酸;"GLP+Cap")或载体治疗11周。GLP-1以25pmol/kg/min皮下提供,而甲巯丙脯酸以150mg/kg/D口服提供。用GLP-1和曱巯丙脯酸的联合治疗对E/A比例的恢复具有61加和作用,该比例是心脏舒张功能的一个量度。图7A-B。图8A-B说明GLP-1和曱巯丙脯酸的组合治疗对心脏收缩性的提高具有加和作用。缩短分数百分比由LVEDD和LVESD计算,并且是心肌收缩性的一个度量。GLP-1和曱巯丙脯酸的联合治疗在减少左心室腔尺寸增大中具有加和作用,图9A-B,并且提高MI-CHF大鼠的运动能力和效率。图IOA-B。MI诱导CHF后,GLP-1和甲巯丙脯酸的联合治疗在运动能力对峰值乳酸比例的反应和基线血浆乳酸具有加和效果。图IIA-B。这些结果一起显示,GLP-1和甲巯丙脯酸的联合治疗在充血性心力衰竭早期提供加和的心脏保护效果。实施例7.MI-CHF筛选模型如实施例5所述,SpragueDawley大鼠进行左侧冠状动脉结扎,以引发心肌梗塞(MI)及随后的充血性心力衰竭。冠状动脉结扎后两周开始,大鼠用测试化合物以5(xg/kg/d或10吗/kg/d、或载体处理3周。E/A比例在l周时根据实施例5所述的程序测定。HOMA在3周时根据实施例5所述的程序测定。如所示,本筛选方法可以^皮用于识别MI诱导CHF后能够提高心脏功能和胰岛素敏感性的毒蜥外泌肽类似物。图12A画B。权利要求1.包含氨基酸序列(SEQIDNO4)HGDGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。2.包含氨基酸序列(SEQIDNO:5)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。3.包含氨基酸序列(SEQIDNO:6)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。4.包含氨基酸序列(SEQIDNO:7)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。5.包含氨基酸序列(SEQIDNO:8)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。6.包含氨基酸序列(SEQIDNO:9)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。7.包含氨基酸序列(SEQIDNO:10)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。8.包含氨基酸序列(SEQIDNO:11)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。9.包含氨基酸序列(SEQIDNO:12)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。10.包含氨基酸序列(SEQIDNO:13)HGEGTFTSD[D(OMe)]LSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。11.包含氨基酸序列(SEQIDNO:14)HGEGTFTSD[D(OMe)]LSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。12.包含氨基酸序列(SEQIDNO:15)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。13.包含氨基酸序列(SEQIDNO:16)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。14.包含氨基酸序列(SEQIDNO:17)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。15.包含氨基酸序列(SEQIDNO:18)HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGTPPPS的多肽。16.包含氨基酸序列(SEQIDNO:19HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGVPPPS的多肽。17.包含氨基酸序列(SEQIDNO:20HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGRPPPS的多肽。18.包含氨基酸序列(SEQIDNO:21HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGKPPPS的多肽。19.包含氨基酸序列(SEQIDNO:2220.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:23HGEGTFTSDKSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGAPPPS的多肽。21.包含氨基酸序歹'J(SEQID22.包含氨基酸序列(SEQID23.包含24.包含基酸序歹'J(SEQID基酸序歹'J(SEQID25.包含氨基酸序列(SEQIDNO:24多肽。NO:25多肽。NO:26.多肽。NO:27.多肽。NO:28.HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。29.30.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:3431.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:35HGEGTYTNDVSSYLEGQAARLFIEWLQGGPSSGAPPPS的多肽。32.包含氨基酸序列(SEQIDNO:36HGEGTFTSDLSKQLEERAVRLFIEWLKQGGPSSGAPPPS的多肽。33.包含氨基酸序列(SEQIDNO:37HGEGTFTSDLSKQKEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGAPPPS的多肽。34.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:3835.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:39HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。36.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:40HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。37.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:41HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。38.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:42HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。39.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:43HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。40.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:44HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。41.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:45HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。42.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:46HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。43.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:47HGEGTYTNDVTEYLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。44.包含氨基酸序歹'J(SEQID45.包含氨基酸序列(SEQIDNO:52-OH的多NO:53-OH的多肽,46.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:54HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKNGKPKK[OctG]RYS画OH的多肽。47.包含氨基酸序列(SEQIDNO:56HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLIQGGPSKEIIS國OH的多肽。48.包含氨基酸序歹ll(SEQIDNO:57HGEGTFTSDVTQQLEEEAVRLFIEWLIQGGPSKEIIS國OH的多肽。49.包含氨基酸序列(SEQIDNO:58HGEGTFTSDLSKQLEEKAAKEFIEWLIQGGPSKEIIS國OH的多肽。50.包含氨基酸序列(SEQIDNO:59HGEGTFTSDLSKQLEEKAVRLFIEWLIQGGPSKEIIS-OH的多肽。51.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:60HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSKEIIS-OH的多肽。52.包含氨基酸序列(SEQIDNO:62HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLIKGRP-OH的多肽。53.包含氨基酸序列(SEQIDNO:66HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGKPKKIRYS-OH的多肽。54.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:63HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGKP-OH的多肽。55.包含氨基酸序列(SEQIDNO:64HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLIQGKP-OH的多肽。56.包含氨基酸序列(SEQIDNO:67HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNGGKPKKIRYS誦OH的多肽57.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:68HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNGKPGKGKIRYS國OH的多肽58.包含氨基酸序列(SEQIDNO:69HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNPGGKEIIS國OH的多肽。59.包含氨基酸序歹'j(SEQIDNO:70HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNGGPGGKEIIS-OH的多肽。60.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:8061.包含氨基酸序列(SEQIDNO:81HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRGGG[DPP4I2]的多肽,62.包含氨基酸序列(SEQIDNO:82HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRGGGGIPI的多肽。63.包含氨基酸序列(SEQIDNO:83HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRPSGGGIPI的多肽。64.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:84HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRGGGIPI的多肽。65.包含氨基酸序列(SEQIDNO:[VPI1]-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR的多肽。66.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:[VPI1]-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR的多肽。67包含氨基酸序列(SEQIDNO86)[VP11]-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR的多肽。68包含氨基酸序列(SEQIDNO88)HAEHGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGAPPPS的多肽。69包含氨基酸序列(SEQIDNO89)HAEGHGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKQGGPSSGAPPPS的多肽。70包含氨基酸序列(SEQIDNO90)YAHGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。71包含氨基酸序列(SEQIDNO91)HSHGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。72包含氨基酸序列(SEQIDNO92)YPHGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS的多肽。73包含氨基酸序列(SEQIDNO93)Ado-HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR的多肽。74.包含氨基酸序列(SEQIDNO:HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEFLKN的多肽。75.包含氨基酸序歹'(SEQIDNO:HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLFIEWLKN的多肽。76.包含氨基酸序歹'J(SEQIDNO:HGEGTFTSDLSKQLEEEAVRLKVEFLKN的多肽。77.包含氨基酸序列(SEQHGEGTFTSDLSKQLQEEAVRIXNEFLKN的多狀。78.包含氨基酸序列(SEQHGEGTFTSDLSKQVEEEAVRLKNEFLKN的多肽,79.包含氨基酸序列(SEQHGEGTFTSDLSKQVLEEAVRLLIEFLKN的多肽。80.包含氨基酸序列(SEQHGEGTFTSDLSKQVQEEAVRLFVEFLKN的多肽'81.包含氨基酸序列(SEQHGEGTFTSDLSKQQEEEAVRLLVEFLKN的多肽。82.包含氨基酸序列(SEQHGEGTFTSDLSKQQLEEAVRLFNEFLKN的多肽。83.包含氨基酸序列(SEQHGEGTFTSDLVKILEAEAVRKFIEFLKN的多肽。84.包含氨基酸序列(SEQIDNO:IDNO:102103IDNO:104IDNO:98IDNO:105IDNO:106IDNO:IDNO:99100'多肽。85.用于预防或治疗充血性心力衰竭的方法,包括给予需要预防或治疗充血性心力衰竭的对象有效治疗或预防充血性心力衰竭的量的至少一种任意前述权利要求所述的肽。86.用于改善与充血性心力衰竭相关的心功能的方法,包括给予需要改善的心功能的对象有效改善心功能的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。87.用于减弱心脏重塑的方法,包括给予需要减弱心脏重塑的对象有效减弱心脏重塑的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。88.用于限制梗塞尺寸的方法,包括给予需要限制梗塞尺寸的对象有效限制梗塞尺寸的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。89.减弱胰岛素抵抗的方法,包括给予需要限制胰岛素抵抗的对象有效限制胰岛素抵抗的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。90.提高患有充血性心力衰竭的对象的运动能力的方法,包括给予需要提高运动能力的对象有效提高运动能力的量的至少一种权利要求l-84所述的多肽。91.用于治疗糖尿病的方法,包括给予需要这样治疗的对象有效治疗糖尿病的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。92.治疗胰岛素抵抗的方法,包括给予需要这样治疗的对象有效治疗胰岛素抵抗的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。93.治疗餐后高血糖的方法,包括给予需要这样治疗的对象有效治疗餐后高血糖的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。94.降低血糖的方法,包括给予需要这样降低的对象有效降低血糖的量的至少一种权利要求l-84所述的多肽。95.刺激胰岛素反应的方法,包括给予需要这种胰岛素反应的对象有效刺激胰岛素反应的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。96.用于减少食物摄入的方法,包括给予需要或希望这样的减少的对象有效减少食物摄入的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。97.用于减小食欲的方法,包括给予需要或希望这样的减小的对象有效减小食欲的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。98.用于治疗肥胖症的方法,包括给予需要这样治疗的对象有效治疗肥胖症的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。99.用于治疗肥胖相关性心脏病的方法,包括给予需要这样治疗的对象有效治疗肥胖相关性心脏病的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。100.用于治疗血脂异常的方法,包括给予需要这样治疗的对象有效降低血脂的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。101.用于治疗高甘油三酯血症的方法,包括给予需要这样治疗的对象有效降低血浆甘油三酯的量的至少一种权利要求1-84所述的多肽。102.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于治疗或预防充血性心力衰竭。103.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于改善与充血性心力衰竭相关的心脏功能。104.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于减弱心脏重塑。105.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于限制梗塞尺寸。106.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于减弱胰岛素抵抗。107.权利要求1-84的任意所迷的至少一种多肽的用途,用于提高患有充血性心力衰竭的对象的运动能力。108.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于治疗糖尿病。109.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于治疗胰岛素抵抗。110.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于治疗餐后高血寿唐。111.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于降低血糖。112.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于刺激胰岛素释放。113.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于减少食物摄入。114.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于减小食欲。115.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于治疗肥胖症。116.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于治疗肥胖相关性心脏病。117.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于治疗肥胖相关性充血性心力衰竭。118.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于治疗血脂异常。119.权利要求1-84的任意所述的至少一种多肽的用途,用于治疗高甘油三酯血症。全文摘要本文提供了GLP-1分子或其激动剂和类似物的用途,和毒蜥外泌肽分子或其激动剂和类似物的用途,包括它们衍生物和活性片段的用途,用于预防或治疗充血性心力衰竭。用于本文所述方法的药物组合物也被公开。进一步提供了用于治疗和/或预防糖尿病、高血糖症、胰岛素抵抗和肥胖症,及用于减少对象的食物摄入和抑制对象的食欲的组合物及方法。文档编号C07K14/435GK101454342SQ200780019364公开日2009年6月10日申请日期2007年5月25日优先权日2006年5月26日发明者C·J·索亚雷斯,C·M·乔德卡,D·Y·路易斯,Q·林,S·S·高希,S·扬森,V·斯里瓦斯塔瓦,确刘申请人:安米林药品公司
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