专利名称：一种淫羊藿苷的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种淫羊藿苷的制备方法，属于药材中指标成分的 提取技术领域。
背景技术：
淫羊藿为《中华人民共和国药典》收载的常用中药，具有补肾 阳、强筋骨、祛风湿之功效，主要用于阳痿遗精，筋骨屡软，风湿痹痛，麻木 拘挛，更年期高血压等症。淫羊藿所含总黄酮类成分为有效部位之一，包括淫 羊藿苷、淫羊藿次苷等多种黄酮类成分，其中淫羊藿苷是淫羊藿药材及制剂中 的主要药用成分，具有增加心脑血管血流量、促进抗体生成、促进DNA合成、 及雄激素样作用，能促进造血功能、免疫功能及骨代谢，具有抗衰老、抗肿瘤 等功效。长期以来，国内外专家学者已发明了很多淫羊藿苷的提取方法。与现 有技术相比，本发明提供了一种仅需较少柱色谱，得率较高的纯度为98%以上
的淫羊藿苷提取制备工艺。
发明内容
本发明的目的在于提供一种淫羊藿苷的制备方法。本发明通过对淫羊藿 药材的提取工艺进行全面考察，确定了淫羊藿苷的最佳提取工艺，并成功地对 淫羊藿苷进行了分离和纯化。
本发明是这样实现的淫羊藿苷的制备方法为(1 )提取取淫羊藿药
材，切成断，加10-40倍量30-90 %的甲醇或乙醇回流2-5次，每次0. 5 _2h ， 合并所有的提取液，回收溶剂，得流浸膏；流浸膏加蒸馏水适量放置，弃沉淀， 取上清液，再浓缩得浓浸膏；依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取至近无色， 再用正丁醇反复萃取至近无色，回收正丁醇至干，即得含淫羊藿苷的粗浸膏； (2 )分离用甲醇溶解含淫羊藿苷粗浸膏，薄层色谱用硅胶拌样，硅胶柱色 谱分离，以氯仿甲醇=100 : 8 、 100 : 13 、 100 : 17 、 100 : 20、 100 : 22 进行梯度洗脱，以硅胶预制板跟踪检识，收集硅胶预制薄层层析TLC板上比移 值Rf等于淫羊藿苷对照品的斑点流份，回收溶剂后，即得淫羊藿苷粗品；粗品
用甲醇溶解，柱色谱用聚酰胺拌样，聚酰胺柱色谱分离，以乙酸乙酯乙醇
水=8 : 0 : 0 、 8 : 0.5 : 0 、 8 : 1 : 0. 1 、 8 : 1 : 0.2进行梯度洗脱， 以聚酰胺薄膜跟踪检识，收集聚酰胺薄膜薄层层析TLC板上比移值Rf等于淫羊藿苷对照品的斑点流份，回收溶剂后可得到淫羊藿苷精制品，置于干燥器24 小时以上，即得纯度》98。/。的淫羊藿苷。
更佳的提取过程为取淫羊藿药材，切成断，加20倍量70 %甲醇或乙醇 回流3次，每次lh ，合并三次的提取液，回收溶剂，得流浸膏；流浸膏加蒸 馏水适量放置，弃沉淀，取上清液，再浓縮得浓浸膏；依次用石油醚、氯仿、 乙酸乙酯萃取至近无色，再用正丁醇反复萃取至近无色，回收正丁醇至干，即 得含淫羊藿苷的粗浸膏。
其中硅胶薄层层析TLC的展开系统为氯仿甲醇=100 : 20 。 聚酰胺薄膜薄层层析TLC的展开系统为乙酸乙酯乙醇水=8 : 1 : 0.2 。 上述的制备方法所用的原料淫羊藿为小檗科淫羊藿属(Epimediiim)和美洲 淫羊藿属(Vancouveria)植物中的任何一种。
本发明制备方法中使用硅胶薄层层析检测淫羊藿苷的显色剂为5%硫酸乙醇 溶液，加热显色。
图-1为淫羊藿苷产品的HPLC图谱。
具体实施例方式
下面是本发明的实施例，但本发明不仅限于所述实施例。 实施例l : (1 )提取工艺-
取淫羊藿药材，切成断，加20倍70 %甲醇或乙醇回流3次，每次lh， 合并三次的提取液，回收溶剂，并浓縮成流浸膏。流浸膏加蒸馏水适量放置， 弃沉淀，取上清液，再浓縮得浸膏。依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取至近 无色，再用正丁醇反复萃取至近无色，回收正丁醇至干，即得到含淫羊藿苷的 粗浸膏。
(2 )分离工艺
①硅胶柱色谱的分离将上述所得粗浸膏用甲醇溶解，薄层色谱用硅胶拌样，硅胶柱色谱分离，
以氯仿甲醇(100 : 8、 100 : 13、 100 : 17、 100 : 20、 100 : 22 )梯度洗 脱，以硅胶预制板跟踪检识，展开系统为氯仿甲醇=100 : 20，收集硅胶预 制板TLC上Rf值等于淫羊藿苷的斑点流份，回收溶剂后，即得淫羊藿苷粗品。 ②聚酰胺柱色谱的分离
淫羊藿苷粗品用甲醇溶解，柱色谱用聚酰胺拌样，聚酰胺柱色谱分离，以 乙酸乙酯乙醇水(8 : 0 : 0、 8 : 0.5 : 0、 8 : 1 : 0. 1、 8 : 0 : 0.2) 梯度洗脱，以聚酰胺薄膜跟踪检识，展开系统为乙酸乙酯乙醇水=8 : 1 : 0.2， 收集聚酰胺薄膜TLC上Rf值等于淫羊藿苷的斑点流份，回收溶剂后可得到淫 羊藿苷精制品,置于干燥器24小时以上，即得纯度》98%的淫羊藿苷。 实施例2 :
提取工艺取淫羊藿药材，切成断，加10倍90 %甲醇或乙醇回流2次， 每次2h，合并两次的提取液，回收溶剂，并浓縮流浸膏。流浸膏加蒸馏水适量 放置，弃沉淀，取上清液，再浓縮得浸膏。依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃 取至近无色，再用正丁醇反复萃取至近无色，回收正丁醇至干，即得到含淫羊 藿苷的粗浸膏。
淫羊藿苷粗浸膏的分离工艺同实施例1所述。
实施例3 :
提取工艺取淫羊藿药材，切成断，加40倍45 %甲醇或乙醇回流5次， 每次0.5h,合并五次的提取液，回收溶剂，并浓縮成流浸膏。流浸膏加蒸馏水 适量放置，弃沉淀，取上清液，再浓縮得浸膏。依次用石油醚、氯仿、乙酸乙 酯萃取至近无色，再用正丁醇反复萃取至近无色，回收正丁醇至干，即得到含 淫羊藿苷的粗浸膏。
淫羊藿苷粗浸膏的分离工艺同实施例1所述。
权利要求
1一种淫羊藿苷的制备方法，其特征在于(1)提取取淫羊藿药材，切成断，加10-40倍量30-90％的甲醇或乙醇回流2-5次，每次0.5-2h，合并所有的提取液，回收溶剂，得流浸膏；流浸膏加蒸馏水适量放置，弃沉淀，取上清液，再浓缩得浓浸膏；依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取至近无色，再用正丁醇反复萃取至近无色，回收正丁醇至干，即得含淫羊藿苷的粗浸膏。(2)分离用甲醇溶解含淫羊藿苷粗浸膏，薄层色谱用硅胶拌样，硅胶柱色谱分离，以氯仿∶甲醇＝100∶8、100∶13、100∶17、100∶20、100∶22进行梯度洗脱，以硅胶预制板跟踪检识，收集硅胶预制薄层层析TLC板上比移值Rf等于淫羊藿苷对照品的斑点流份，回收溶剂后，即得淫羊藿苷粗品；粗品用甲醇溶解，柱色谱用聚酰胺拌样，聚酰胺柱色谱分离，以乙酸乙酯∶乙醇∶水＝8∶0∶0、8∶0.5∶0、8∶1∶0.1、8∶1∶0.2进行梯度洗脱，以聚酰胺薄膜跟踪检识，收集聚酰胺薄膜薄层层析TLC板上比移值Rf等于淫羊藿苷对照品的斑点流份，回收溶剂后可得到淫羊藿苷精制品，置于干燥器24小时以上，即得纯度≥98％的淫羊藿苷。
2.按照权利要求l所述淫羊藿苷的制备方法，其特征在于所述的提取过 程为取淫羊藿药材，切成断，加20倍量70 %甲醇或乙醇回流3次，每次 lh ，合并三次的提取液，回收溶剂，得流浸膏；流浸膏加蒸馏水适量放置，弃 沉淀，取上清液，再浓縮得浸膏；依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取至近无 色，再用正丁醇反复萃取至近无色，回收正丁醇至干，即得含淫羊藿苷粗浸膏。
3.按照权利要求1所述淫羊藿苷的制备方法，其特征在于硅胶薄层层 析TLC的展开系统为氯仿甲醇=100:20 。
4.按照权利要求1所述淫羊藿苷的制备方法，其特征在于聚酰胺薄膜 薄层层析TLC的展开系统为乙酸乙酯乙醇水=8: 1:0.2 。
5.按权利要求1所述淫羊藿苷的制备方法，其特征在于所用的原料淫 羊藿为小檗科淫羊藿属(Epimedium)和美洲淫羊藿属(Vancouveria)植物中 的任何一种。
6.按权利要求1所述淫羊藿苷的制备方法，其特征在于硅胶薄层层析 中检测淫羊藿苷的方法中的显色剂为5%硫酸乙醇溶液，加热显色。
全文摘要
本发明提供了一种淫羊藿苷的制备方法，取淫羊藿药材，用30-90％的甲醇或乙醇回流提取，回收溶剂，浓缩成浸膏；依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇反复萃取至近无色，回收正丁醇至干，得粗浸膏；然后依次进行硅胶柱色谱分离和聚酰胺柱色谱分离，即得淫羊藿苷精制品，纯度≥98％。与现有技术相比，本发明提供了一种仅需较少柱色谱，得率较高的纯度为98％以上的淫羊藿苷提取制备工艺。
文档编号C07H17/00GK101607976SQ20081012901
公开日2009年12月23日 申请日期2008年6月19日 优先权日2008年6月19日
发明者刘胜杰, 岚 周, 张援虎, 郝小江 申请人:贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室