专利名称：：一种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺的制作方法
技术领域：
：本发明涉及龙胆苦苷的提取方法，尤其涉及一种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺。
背景技术：
：白花龙胆是龙胆科(Gewria"aceae)龙胆属(Ge""a"a7bwwL.)植物麻花秦艽(Ge油'fl"aMaxim.)的民间俗称，藏医称"解吉嘎保"，是我国重要的常用中藏药材资源之一，已有2000年的药用历史。麻花秦艽又名西秦艽、大秦艽、左秦艽、左扭根等，民间因其花的颜色为白色，将其称为白花龙胆。作为传统常用中药，历代本草皆有收载，其始载于《神农本草经》，列为中品，其根部的主要成份是裂环烯醚萜苷类龙胆苦苷、当药苦苷、当药苷，具有多种药效——如祛风湿、退虚热、舒筋止痛的作用，可用于治疗风湿性关节痛、结核病潮热、小儿疳热、黄疽性肝炎、小便不利等症。《中国药典》2005年版将秦艽、麻花秦艽、粗茎秦艽和小秦艽4种植物收载为中药秦艽的基原植物，以根入药，但在传统藏药中，麻花秦艽除根外，还以花入药，即白花龙胆花。目前，还没有关于从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的报道。
发明内容本发明所要解决的技术问题是提供一种以白花龙胆花为原料、提高龙胆苦苷得率的从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺。为解决上述问题，本发明所述的一种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺，包括以下步骤①将干燥的白花龙胆花粉碎至2080目；②用乙醇在室温下对白花龙胆花按料液1:5~1:30的重量体积比进行冷浸提取后过滤，得滤液；③浓缩滤液，得浓縮液；④将浓縮液用大孔吸附树脂吸附后，依次用水、乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；⑤将洗脱液浓縮至粘稠状，经干燥即可。所述步骤②中乙醇的浓度为50%~95%。所述步骤④中乙醇的浓度为30%90%。所述步骤⑤中干燥为冷冻干燥。本发明与现有技术相比具有以下优点1、本发明首次对白花龙胆花中的龙胆苦苷的提取制备过程进行了研究，由于龙胆苦苷是一种热不稳定物质，在高温下易转化，因此本发明采用可保持其活性的冷浸法，对影响提取得率及龙胆苦苷含量的各个参数(粒度、料液比、乙醇浓度、提取时间和提取次数)采用1^16(45)正交表进行优化，参见表l、表2:表h正交试验因素水平表<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>表2:正交试验结果及数据分析<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>从表l、表2可以看出，各因素对提取效果的影响程度为样品粒度>料液比>提取次数〉提取时间>乙醇浓度。同时，表明釆用本发明的工艺可以提高龙胆苦苷得率，并减小了工业消耗、降低了生产成本。2、由于本发明采用乙醇为溶剂，因此在提取过程中安全可靠，易于工业化生产。3、本发明的实现，可满足各种白花龙胆花药物开发的需求。具体实施例方式实施例l:一种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺，包括以下步骤①将25kg干燥的白花龙胆花粉碎至20目；②用125L、50%的乙醇溶液在室温下对白花龙胆花冷浸提取4次，每次6h，通过200目滤布过滤，过滤后得滤液；③合并四次滤液，用江苏星海仪器设备公司生产的20L旋转蒸发仪在40'C以下减压浓縮，浓縮后得浓縮液。对浓縮液利用高效液相色谱HPLC(来源美国安捷伦公司，Agilent1100)测定白花龙胆花中龙胆苦苷的含量为6.28mg/g;④首先将南开大学化工厂生产的D-101型大孔吸附树脂在5%的NaOH溶液和5%的HCL溶液中分别浸泡24h后，用蒸馏水冲洗至pH值为中性，即得处理好的大孔吸附树脂；然后将8L浓縮液用处理好的D-101型大孔吸附树脂吸附，先用蒸馏水洗脱至洗脱液澄清无色，再用浓度为30%乙醇溶液进行洗脱，HPLC法检测直至洗脱液中没有龙胆苦苷；⑤收集洗脱所得的龙胆苦苷溶液，用20L旋转蒸发仪在40°C以内减压浓縮至粘稠状，再将浓縮液置于美国LABCONCO生产的6L冷冻干燥机中，于-20卩冷冻411，再经真空干燥36h，即可得到130.8g纯度为8P/。的龙胆苦苷。实施例2:—种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺，包括以下步骤①将5kg干燥的白花龙胆花粉碎至60目；②用75L、95%的乙醇溶液在室温下对白花龙胆花冷浸提取1次，时间为18h，通过200目滤布过滤，过滤后得滤液；③将所得滤液用20L旋转蒸发仪在40°C以下减压浓縮,浓縮后得浓縮液。对浓縮液利用HPLC测定白花龙胆花中龙胆苦苷的含量为6.06mg/g;④将3.5L浓縮液用处理好的D-101型大孔吸附树脂吸附，先用蒸馏水洗脱至洗脱液澄清无色，再用浓度为60%乙醇溶液进行洗脱，HPLC法检测直至洗脱液中没有龙胆苦苷；⑤收集洗脱所得龙胆苦苷溶液，用20L旋转蒸发仪在40°C以内减压浓縮至粘稠状，再冷冻干燥即可得到34.5g纯度为82%的龙胆苦苷。实施例3:—种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺，包括以下步骤①将1kg干燥的白花龙胆花粉碎至80目；②用30L、60%的乙醇溶液在室温下对白花龙胆花冷浸提取2次，每次24h，通过200目滤布过滤，过滤后得滤液；③合并两次所得滤液，用20L旋转蒸发仪在40'C以下减压浓縮，浓縮后得浓縮液。对浓縮液利用HPLC测定白花龙胆花中龙胆苦苷的含量为6.38mg/g;将4L浓縮液用处理好的D-101型大孔吸附树脂吸附，先用蒸馏水洗脱至洗脱液澄清无色，再用浓度为90%乙醇溶液进行洗脱，HPLC法检测直至洗脱液中没有龙胆苦苷；⑤收集洗脱所得龙胆苦苷溶液，用20L旋转蒸发仪在40°C以内减压浓縮至粘稠状，再冷冻干燥即可得到5.76g纯度为87%的龙胆苦苷。权利要求1、一种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺，包括以下步骤①将干燥的白花龙胆花粉碎至20～80目；②用乙醇在室温下对白花龙胆花按料液15～130的重量体积比进行冷浸提取后过滤，得滤液；③浓缩滤液，得浓缩液；④将浓缩液用大孔吸附树脂吸附后，依次用水、乙醇溶液洗脱，收集洗脱液；⑤将洗脱液浓缩至粘稠状，经干燥即可。2、如权利要求1所述的一种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺，其特征在于所述步骤中乙醇的浓度为50%95%。3、如权利要求l所述的一种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺，其特征在于所述步骤中乙醇的浓度为30%90%。4、如权利要求l所述的一种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺，其特征在于所述步骤⑤中干燥为冷冻干燥。全文摘要本发明涉及一种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺，该工艺是指将干燥的白花龙胆花粉碎后，在室温下利用乙醇作为提取溶剂进行冷浸提取，经浓缩、吸附、干燥后得到纯度较高的龙胆苦苷。本发明首次对白花龙胆花中的龙胆苦苷的提取制备过程进行了研究，确定了白花龙胆花中龙胆苦苷的最佳冷浸提取条件和纯化工艺，可满足各种以白花龙胆花为主要原料的药物开发的需求。文档编号C07H1/08GK101386633SQ20081017603公开日2009年3月18日申请日期2008年11月5日优先权日2008年11月5日发明者芳杨,王洪伦,索有瑞申请人:中国科学院西北高原生物研究所