专利名称：：一种从披针叶黄华种籽中提取金雀花碱和黄华碱的方法
技术领域：
：本发明涉及一种采用植物化学方法从披针叶黄华种籽中制备可用于医药化学原料的金雀花碱和黄华碱的生产工艺。
背景技术：
：披针叶黄华(r.7aflceW"aR.Br.)又名牧马豆、野决明，系豆科Ue卵/w77ase朋)野决明属(7^er双o/^'s)多年生草本植物，药用其成熟的种籽，分布于中国东北、华北及西北等广大地区，资源丰富。据资料记载，本种为有毒植物，种籽和全草可引起牲畜中毒，但该植物也是有名的药用植物，具有兴奋呼吸、抗辐射及祛痰止咳等功效，其主要有效成分金雀花碱(Cytisiiie)对呼吸系统的作用类似烟碱，能反射性地兴奋呼吸，其兴奋作用强于同剂量的山梗碱；临床上用O.15%水溶液肌肉或静脉注射，抢救手术创伤，战伤及窒息性毒剂、氰类毒剂、麻醉药等引起中毒时的反射性呼吸暂停、传染性疾病时呼吸、心血管活动的衰竭以及休克、虚脱状态和新生儿窒息等。根据金雀花碱的特有生物活性，前苏联临床上用该生物碱刺激呼吸；最近两年，金雀花碱作为疗效明显的戒烟制剂原料引起国际医药界的关注，以其为主要前提物合成的一种新化学实体化合物瓦伦尼克林(Varenicline)，能够与神纟i^^烟碱样乙截胆碱受体a4P2亚型高度选择性结合，是一种通过影响尼古丁依赖性神经机制产生戒烟效果的药物。目前关于从披针叶黄华种籽中制备金雀花碱的工艺研究公开资料比较少，其方法主要有以下两种(1)披针叶黄华种籽粉碎，用甲醇、乙醇等有机溶剂提取，提取液浓缩得到含金雀花碱的总碱溶液，用盐酸等调PH使成酸性，用氯仿萃取除去一定杂质后，用K0H或K2C03等碱化酸水溶液，再用氯仿等有机溶剂萃取金雀^M等生物碱，回收溶剂，用丙酮结晶、重结晶，得到金雀花碱；(2)披针叶黄华种籽粉碎后加入氨水或其他碱性试剂碱化，用氯仿或其他有机溶剂加热回流提取，提取液用一定比例的酸水反萃吸收，得到含金雀花碱的总碱酸水溶液，再加入NaOH等碱化，用氯仿等有机溶剂萃取，得到粗生物碱，用丙酮结晶、重结晶，得到金雀花碱。上述两种方法各有优点，只能得到金雀花碱一种产品，且存在金雀花碱得率较低，产品外观较差(颜色为淡黄色)，金雀花碱质量不稳定，含量达不到98%以上；另外，仅凭重结晶提高产品质量导致得率和原辅料使用效率不高，溶剂消耗较大等不足。发萌内容本发明的目的是提供一种从披针叶黄华种籽中同时制备金雀花碱和黄华碱的方法，该方法工艺简单，成本低，产品纯度可达9鄉以上，适宜大规模工业化生产两种产品。实现本发明目的所采用的技术方案是:用一定比例的乙醇提取披针叶黄华种籽，得到总生物碱浸膏，用苯类溶剂、卤代烃中的一种萃取，用酸性水溶液吸收萃取溶剂，至萃取剂中无生物碱反应，获得主要含黄华碱的酸性水溶液，调节酸性水溶g—定PH值，浓缩，析晶，重结晶获得黄华碱；萃取过的浸膏再用碱化试剂调节PH值，再次萃取，真空浓縮萃取溶液，浓縮物用有机溶剂结晶、重结晶，获得金雀花碱。本发明具体生产方法如下(1)将披针叶黄华种籽粉碎，粒度为10^60目，装入不锈钢多功能提取罐中，用95%的乙醇或甲醇反复提取三次，溶剂用量为物料重量的10倍，合并提取液，提取液用双效蒸发器浓縮成浸膏状，比重1.15~1.25,料渣弃去；(2)—次萃取将步骤(1)所得浸膏用萃取溶剂反复萃取，萃取溶剂用酸化试剂吸收后可再次使用，反复萃取直至薄层检测萃取溶剂无明显生物碱反应为止；O)将步骤(2)所得主要含黄华碱的酸水溶液用碱化试剂喊化，使Whl2,放置，结晶，即可得到黄华碱；(4)二次萃取将步骤(2)的水层用碱化试剂碱化，使其PH—2,用萃取溶荆反复萃取，至薄层检测萃取溶剂无明显生物碱反应为止，真空回收溶剂，得到主薆含金雀花碱的总生物碱；(5)将步骤(4)所得金雀花碱的总生物碱用有机溶剂在50'C溶解，浓縮，皿，结晶，过滤，烘干，即可得到金雀花碱。所用的萃取溶剂为苯、二甲苯、甲苯，乙酸乙酯、石油醚、三氯甲烷、二氯甲烷中的一种或两种混合物。所用的酸化试剂为盐酸、硫酸、磷酸、硝酸中的一种。所用的碱化试剂为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、氨水中的一种。所用的结晶溶剂为丙酮、甲醇、乙醇中的一种或两种。本发明薄层层析检测的具体方法是取薄层层析硅胶G，用2^aOH溶液调制成乳膏状，制成薄层板，105"C活化1小时，以金雀花滅和黄华碱为对照品，以苯丙酮甲醇=4:2:2(体积比)为展开剂，进行薄层层析，用改良的碘化铋钾试剂为显色剂，Rf值分别为0.65和0-9D。本发明具有以下优点次投料可以获得两种产品，提高了药材的使用效率；2.工艺简单，不需要复杂的生产设备，适合工业化生产3.本发明所得产品纯度高，质量好，有效成分含量可达98%以上。附國说明图l是本发明生产工艺简图。图2是金雀花碱对照品高效液相色谱图。图3是实施例一所得金雀花碱高效液相色谱图。图4是实施例二所得金雀花碱高效液相色谱图。具体錢方式图2是金雀花碱对照品高效液相色谱图<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>实施例一取披针叶黄华种籽200公斤，粉碎至20目，装入2000L不锈钢多功能提取罐中，第一次加入800公斤含醇量为95%的工业乙醇，加热至75'C，保持此温度2小时以上，得到乙醇提取液；第二次，加入600公斤含醇量为站%的工业乙醇,加热至75t:，保持此温度2小时以上，滤出溶液第三次，加入600公斤含醇量为95%的工业乙醇，加热至75。C，保持此温度2小时以上，滤出溶液；合并三次提取液，用双效蒸发器在65TC,-0.08MPa以下真空条件下浓缩，除去乙醇和部分水，使成浸膏状，比重为1.18，得浸膏92公斤，收率为46.0%;浸膏用苯萃取6次，每次250公斤，至萃取液无生物碱反应为止；苯萃取液用1096的盐酸水溶液反萃取，至苯溶液无明显生物碱反应为止，使主要为黄华碱的生物碱转移至酸性水溶液中，苯可重复使用；分离出酸水溶液，加入30%的NaOH水溶液碱化，结晶，过滤，用丙酮重结晶，得到黄华碱0.2公斤；苯萃取过的浸膏用20%NaOH水溶液碱化，用二氯甲烷萃取6次，每次280公斤，至萃取液中无生物碱反应为止；二氯甲烷萃取液真空浓縮，浓縮物用丙圉溶解，过滤，801C常压蒸馏至有结晶析出为止，放置，结晶，过滤，得到金雀花碱粗品，用丙酮重结晶，真空干燥，即可得到金雀花碱产品1.15公斤，含量98.6%，含水量O.鄉，总得率0.57邻所得金雀花碱高效液相色谱图如图3所示。峰号保留时间峰高_峰面积_含量12.2481359,19211015.6470.228422.640167.691949.7630.019733.882200.7351111.7580.023044.107607315.1884810527.50099.7254J_6.632_25.966_167.850_0.0035总计609068.7714823772.518100.0000实施例二取披针叶黄华种籽300公斤，粉碎至40目，装入2000L不锈钢多功能提取罐中，第一次加入1200公斤含醇量为95%的工业甲醇，加热至75'C,保持此温度2小时以上，滤出溶液；第二次，加入900公斤含醇量为95%的工业甲醇，加热至75t:,保持此温度2小时以上，滤出溶液；第三次，加入900公斤含醇量为95鹏工业甲醇，加热至75r,保持此温度2小时以上，滤出溶液合并三次提取液，用双效蒸发器在65t:，-0.08MPa以下真空条件下浓縮，除去甲醇和部分水，使成浸膏状，比重为1.2，得浸膏145公斤，收率为48.3%;浸膏用二甲苯萃取6次，每次380公斤，至二甲苯萃取液无生物碱反应为止；二甲苯M液用5嫩硫酸水溶液反萃取，至二甲苯溶液中无生物碱反应为止，使主要为黄华碱的生物碱转移至酸水溶液中，二甲苯可重复使用；分离出酸水溶液，加入2(m的KOH水溶液碱化，结晶，过滤，用丙醣重结晶，得到黄华碱0.35公斤；苯萃取过的浸膏用2WKOH水溶液碱化，用三氯甲垸萃取6次，每次600公斤至萃取液中无生物碱反应为止；三氯甲垸萃取液真空浓縮，浓缩物用丙酮溶解，过滤，8(TC蒸馏至有结晶析出为止，放置，结晶，过滤，得到金雀花碱，用丙s重结晶，真空干燥，即可得到金雀花碱产品1.83公斤,含量98.5%,含水量0.8%,总得率0.61%。所得金雀花碱高效液相色谱图如图4所示。峰号保留时间峰高_峰面积_含量12.248497.9464819.6000.109223.890110.500538.3000.012234.115_628151.3754406585.000_99.8786S￥628759.8214411942-900100.0000实施例三色谱柱为C18柱(4.6咖X250咖，5um)，流动相为0.05西ol/L磷酸二氯钠溶液甲醇高氯酸氨(15ml:85ml:0.5g);体积流量为1.0l/iim检测波长306咖；柱温25TC;进样量10ul;理论塔板数按金雀花碱峰计算应不低于5000。权利要求1、一种从披针叶黄华种籽中提取金雀花碱和黄华碱的方法，其特征在于该方法包括以下步骤(1)将披针叶黄华种籽粉碎，粒度为10～60目，装入不锈钢多功能提取罐中，用95％的乙醇或甲醇反复提取三次，溶剂用量为物料重量的10倍，合并提取液，提取液用双效蒸发器浓缩成浸膏状，比重1.15～1.25，料渣弃去；(2)一次萃取将步骤(1)所得浸膏用萃取溶剂反复萃取，萃取溶剂用酸化试剂吸收后可再次使用，反复萃取直至薄层检测萃取溶剂无明显生物碱反应为止；(3)将步骤(2)所得主要含黄华碱的酸水溶液用碱化试剂碱化，使PH＝12，放置，结晶，即可得到黄华碱；(4)二次萃取将步骤(2)的水层用碱化试剂碱化，使其PH＝12，用萃取溶剂反复萃取，至薄层检测萃取溶剂无明显生物碱反应为止，真空回收溶剂，得到主要含金雀花碱的总生物碱；(5)将步骤(4)所得金雀花碱的总生物碱用有机溶剂在50℃溶解，浓缩，放置，结晶，过滤，烘干，即可得到金雀花碱。2、如权利要求1所述的一种从披针叶黄华种籽中提取金雀花碱和黄华碱的方法,其特征在于所用的萃取溶剂为苯、二甲苯、甲苯，乙酸乙酯、石油醚、三氯甲烷、二氯甲烷中的一种或两种混合物。3、如权利要求，所述的一种从披针叶黄华种籽中提取金雀花碱和黄华碱的方法,其特征在于所用的酸化试剂为盐酸、硫酸、磷酸、硝酸中的一种。4、如权利要求1所述的一种从披针叶黄华种籽中提取金雀花碱和黄华碱的方法，其特征在于所用的碱化试剂为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、氨水中的一种。5、如权利要求1所述的一种从披针叶黄华种籽中提取金雀花碱和黄华碱的方法,其特征在于所用的结晶溶剂为丙S、甲醇、乙醇中的一种或两种。全文摘要本发明涉及一种从披针叶黄华种籽中提取金雀花碱和黄华碱的方法，其特征在于将披针叶黄华种籽粉碎后，经提取、浓缩得浸膏，用有机溶剂萃取浸膏，酸水溶液反萃取、净化萃取溶剂，同时得到含黄华碱的酸水溶液，此酸水溶液加入碱性试剂碱化，析晶，重结晶，可得到黄华碱产品；萃取过的浸膏溶液碱化后用有机溶剂萃取，浓缩，结晶，重结晶，可得到纯度98％以上的金雀花碱产品。金雀花碱用于抢救手术创伤，战伤及窒息性毒剂、麻醉药等引起中毒时的反射性呼吸暂停和新生儿窒息等，以其为主要原料的化学合成物是一种疗效显著的新型戒烟药，本发明具有工艺简单，成本低，所得金雀花碱产品得率高，纯度好，适合大规模工业化生产，同时又可得到黄华碱产品。文档编号C07D471/00GK101624393SQ20091002348公开日2010年1月13日申请日期2009年8月4日优先权日2009年8月4日发明者周军辉,静李,王新莉,王答祺申请人:王答祺