从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法

文档序号:3497528阅读:423来源:国知局
专利名称:从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法
技术领域
本发明属于天然产物提取技术领域,具体涉及一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤 茶多糖和藤茶多酚的方法。
背景技术
藤茶,一种以葡萄科蛇葡萄属植物——显齿蛇葡萄[Ampelopsis-grossedentata (Hand-Mazz)W. Τ. Wang]的嫩茎叶为原料制作的代用茶。该植物主要分布于湖北、湖南、广 东、广西、江西、福建等省,资源丰富。民间对藤茶的传统应用历史和现代药理研究表明,藤 茶中含有丰富的黄酮(以二氢杨梅素为主)、藤茶多糖、藤茶多酚等成分,并具有较强的抗 氧化、降血糖等生物活性。目前关于藤茶生物活性成分的提取及生物活性研究主要集中在 藤茶黄酮及其分离成分二氢杨梅素方面,相关的专利文献有一种从藤茶中提取二氢杨梅 素的方法CN200510032918. 5,含有二氢杨梅素和杨梅素的组合物CN03138054. 9,藤茶黄酮 微囊的制备方法CN200510114557,等;非专利文献则较多(覃洁萍等,中国现代应用药学杂 志,2000,No. 3;李卫等,食品科学,2004,No. 11,等);其次是藤茶多糖方面的相关文献(罗 祖友等,食品科学,2007,No. 1,等);关于藤茶多酚的研究报道不多(熊皓平等,中国食品学 报,2004,No. 3)。以藤茶为原料进行二氢杨梅素、藤茶多糖、藤茶多酚中的任何一种成分的单独提 取,资源利用率不高,势必影响综合开发利用藤茶资源的经济效益。

发明内容
本发明要解决的问题是提供一种采用同批原料分步提取分离二氢杨梅素、藤茶多 糖和藤茶多酚的方法。本发明一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法,加工步骤中 包含有a.原料粉碎将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎;b.浸提用原料粉末清水以1 8 12料液比,在温度为90 100°C浸泡30 40min,过滤收集上清液I ;c.浓缩将上清液I 减压浓缩静置结晶,分别收集沉淀A和上清液II ;d.提取二氢杨梅素将沉淀A加水重结晶 处理,再对结晶物干燥,得二氢杨梅素产品;e.加醇将浓缩步骤的上清液II加入乙醇,边 加乙醇边搅拌,静置后,分别收集沉淀B和上清液III ;f.提取粗多糖将沉淀B经乙醇洗 涤后,得藤茶水溶性粗多糖;g.提取藤茶多酚将加醇步骤的上清液III减压浓缩,回收乙 醇,收集浓缩的水溶液,用乙酸乙酯萃取,再将乙酸乙酯萃取相浓缩、干燥可得到藤茶多酚 产品;或将浓缩的水溶液,经AB-8大孔树脂吸附一洗脱去杂一洗脱,收集洗脱液并减压浓 缩,回收乙醇,浓缩液干燥得到藤茶多酚产品。本发明一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法,其特征在于 所述的加工步骤中包含有a.原料粉碎将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎;b.浸提用原料粉 末清水以1 8 12料液比,在温度为90 100°C浸泡30 40min,趁热由滤布过滤 后、再离心(4000rpm,15min),收集上清液I,对滤渣重复提取1次,合并上清液I ;c.浓缩将上清液I减压浓缩,在4°C下静置10-15小时,结晶后以4000rpm离心15min,分别收集沉 淀A和上清液II ;d.提取二氢杨梅素将沉淀A经2 3次加水重结晶处理,再对结晶物于 35 45°C真空干燥,得二氢杨梅素产品;e.加醇将浓缩步骤的上清液II在50 60°C下 减压浓缩至原体积的1/3 1/5,再加入3倍体积的95%乙醇,边加乙醇边搅拌,放置8 24h后,4000rpm离心15min,分别收集沉淀B和上清液III ;f.提取粗多糖将沉淀B经95% 乙醇洗涤后,得藤茶水溶性粗多糖;g.提取藤茶多酚将加醇步骤的上清液III减压浓缩, 回收乙醇,收集浓缩的水溶液,用乙酸乙酯萃取,再将乙酸乙酯萃取相浓缩、干燥可得到藤 茶多酚产品;或将浓缩的水溶液,经AB-8大孔树脂动态吸附一蒸馏水洗脱去杂一70%乙醇 液动态洗脱,或静置经AB-8树脂静态吸附一蒸馏水洗脱去杂一70%乙醇静态洗脱,收集洗 脱液并减压浓缩,回收乙醇,浓缩液经低温真空干燥得到藤茶多酚产品。本发明一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法,在加工步骤 f.提取粗多糖中粗多糖可进一步进行纯化处理,粗多糖加水复溶一sevag法脱蛋白一用 双氧水脱色一乙醇沉淀一离心,收集沉淀一加水复溶一乙醇沉淀一离心,收集沉淀于35 45 °C真空干燥或加水溶解后喷雾干燥。本发明与现有技术比较,由于采用同批原料分步提取分离多种成分的综合提取方 法,该方法成本低,提取得率较高,环保,适合工业化连续生产,可实现藤茶资源的综合开发 利用和经济效益的提高。
具体实施例方式实施例1将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎制取原料粉末500g,加6L蒸馏水,加热至95°C下提取 30min,趁热用100目双层滤布过滤后,再趁热离心(4000rpm,15min),收集上清液I,对滤 渣加蒸馏水4L,加热至95°C下重复提取1次,合并上清液I ;将上清液I减压浓缩至1/3体 积,充分冷却,在4°C下静置12小时,结晶后,离心(4000rpm,15min),分别收集沉淀A和上 清液II ;沉淀A经2次加水重结晶处理,再对结晶物于40°C真空干燥,得二氢杨梅素,产品 得率可达11% (二氢杨梅素作标样,硝酸铝-亚硝酸钠比色法测定,产品二氢杨梅素含量 ^ 85% );将上清液II在60°C下减压浓缩至原体积的1/4,再加入3倍体积的95%乙醇, 边加乙醇边搅拌,放置24h后,离心(4000rpm,15min),分别收集沉淀B和上清液III ;沉淀 B经95%乙醇洗涤后,加水复溶得多糖液,以sevag法脱蛋白,即以3 1 (ν/ν)的糖液混 合液(4氯仿1正丁醇,ν/ν)脱蛋白1次,再调节多糖溶液ρΗ至ρΗ8,于50°C下滴加20% 双氧水脱色后,加入3倍体积的95%乙醇沉淀多糖,离心,收集沉淀;再加水复溶后,加入3 倍体积的95 %乙醇沉淀多糖,离心,收集沉淀,于40°C真空干燥,得初步纯化的藤茶水溶性 多糖,产品得率约4% (葡萄糖作标样,硫酸苯酚法测定,产品多糖含量约60%);将上清液 III经减压浓缩,回收乙醇,收集浓缩的水溶液,对水溶液用乙酸乙酯萃取(1 1.2, V/V), 再将乙酸乙酯相减压浓缩,回收乙酸乙酯,浓缩物经真空干燥得到藤茶多酚,产品得率5% 以上(没食子酸作标样,酒石酸亚铁比色法测定,产品多酚含量41% )。实施例2将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎制取原料粉末lOOOg,加入12L蒸馏水,加热至95°C下 提取30min,趁热用100目双层滤布过滤后,再趁热离心(4000rpm,15min),收集上清液I,对滤渣加蒸馏水8L,加热至95°C下重复提取1次,合并上清液I ;将上清液I减压浓缩至1/3 体积,充分冷却,在4°C下静置12小时,结晶后,离心(4000rpm,15min),分别收集沉淀A和 上清液II ;沉淀A经2次加水重结晶处理,再对结晶物于40°C真空干燥,得二氢杨梅素产 品,产品得率可达11% ( 二氢杨梅素作标样,硝酸铝_亚硝酸钠比色法测定,产品二氢杨梅 素含量> 85% );将上清液II在60°C下减压浓缩至原体积的1/4,再加入3倍体积的95% 乙醇,边加乙醇边搅拌,放置24h后,离心(4000rpm,15min),分别收集沉淀B和上清液III ; 沉淀B经95%乙醇洗涤后,加水复溶得多糖液,以sevag法脱蛋白,即以3 1 (ν/ν)的糖 液混合液(4氯仿1正丁醇,ν/ν)脱蛋白1次,再调节多糖溶液ρΗ至ρΗ8,于50°C下滴 加20%双氧水脱色后,加入3倍体积的95%乙醇沉淀多糖,离心,收集沉淀;再加水复溶后, 加入3倍体积的95 %乙醇沉淀多糖,离心,收集沉淀,再复溶后,水溶液经喷雾干燥(180°C 进口温度,80°C出口温度),得浅灰色粉末状藤茶水溶性多糖,产品得率约4% (葡萄糖作标 样,硫酸苯酚法测定,产品多糖含量约60% );将上清液III减压浓缩,回收乙醇,浓缩的水 溶液经AB-8树脂静态吸附过夜——蒸馏水洗脱去杂——70%乙醇静态洗脱,收集洗脱液并 减压浓缩,回收乙醇,浓缩液经低温真空干燥得到藤茶多酚,产品得率可达3% (没食子酸 作标样,酒石酸亚铁比色法测定,产品多酚含量34% )。实施例3将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎作为提取原料;原料粉末1500g,加18L蒸馏水,加热至 95°C下提取30min,趁热用100目双层滤布过滤后,再趁热离心(4000rpm,15min),收集上清 液I,对滤渣加蒸馏水12L,加热至95°C下重复提取1次,合并上清液I ;将上清液I减压浓缩 至1/3体积,充分冷却,在4°C下静置12小时,结晶后,离心(4000rpm,15min),分别收集沉 淀A和上清液II ;沉淀A经2次加水重结晶处理,再对结晶物于40°C真空干燥,得二氢杨梅 素,产品得率可达11% ( 二氢杨梅素作标样,硝酸铝_亚硝酸钠比色法测定,产品二氢杨梅 素含量> 85% );将上清液II在60°C下减压浓缩至原体积的1/4,再加入3倍体积的95% 乙醇,边加乙醇边搅拌,放置24h后,离心(4000rpm,15min),分别收集沉淀B和上清液III ; 沉淀B经95%乙醇洗涤后,加水复溶得多糖液,以sevag法脱蛋白,即以3 1 (ν/ν)的糖 液混合液(4氯仿1正丁醇,ν/ν)脱蛋白1次,再调节多糖溶液ρΗ至ρΗ8,于50°C下滴 加20%双氧水脱色后,加入3倍体积的95%乙醇沉淀多糖,离心,收集沉淀;再加水复溶后, 加入3倍体积的95%乙醇沉淀多糖,离心,收集沉淀,于40°C真空干燥,得初步纯化的藤茶 水溶性多糖,产品得率约4% (葡萄糖作标样,硫酸苯酚法测定,产品多糖含量约60%);将 上清液III经减压浓缩,回收乙醇,收集浓缩的水溶液,对水溶液用乙酸乙酯萃取(1 1.2, V/V),再将乙酸乙酯相减压浓缩,回收乙酸乙酯,浓缩物经真空干燥得到藤茶多酚,产品得 率5%以上(没食子酸作标样,酒石酸亚铁比色法测定,产品多酚含量41% )。
权利要求
一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法,其特征在于加工步骤中包含有a.原料粉碎将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎;b.浸提用原料粉末∶清水以1∶8~12料液比,在温度为90~100℃浸泡30~40min,过滤收集上清液I;c.浓缩将上清液I减压浓缩静置结晶,分别收集沉淀A和上清液II;d.提取二氢杨梅素将沉淀A加水重结晶处理,再对结晶物干燥,得二氢杨梅素产品;e.加醇将浓缩步骤的上清液II加入乙醇,边加乙醇边搅拌,静置后,分别收集沉淀B和上清液III;f.提取粗多糖将沉淀B经乙醇洗涤后,得藤茶水溶性粗多糖;g.提取藤茶多酚将加醇步骤的上清液III减压浓缩,回收乙醇,收集浓缩的水溶液,用乙酸乙酯萃取,再将乙酸乙酯萃取相浓缩、干燥可得到藤茶多酚产品;或将浓缩的水溶液,经AB 8大孔树脂吸附→洗脱去杂→洗脱,收集洗脱液并减压浓缩,回收乙醇,浓缩液干燥得到藤茶多酚产品。
2.按照权利要求1所述的一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方 法,其特征在于所述的加工步骤中包含有a.原料粉碎将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎;b.浸提用原料粉末清水以1 8 12料液比,在温度为90 100°C浸泡30 40min,趁热由滤布过滤后、再离心(4000rpm,15min),收集上清液I,对滤渣重复提取1次, 合并上清液I ;c.浓缩将上清液I减压浓缩,在4°C下静置10-15小时,结晶后以4000rpm离心 15min,分别收集沉淀A和上清液II ;d.提取二氢杨梅素将沉淀A经2 3次加水重结晶处理,再对结晶物于35 45°C真 空干燥,得二氢杨梅素产品;e.加醇将浓缩步骤的上清液II在50 60°C下减压浓缩至原体积的1/3 1/5,再 加入3倍体积的95%乙醇,边加乙醇边搅拌,放置8 24h后,4000rpm离心15min,分别收 集沉淀B和上清液III ;f.提取粗多糖将沉淀B经95%乙醇洗涤后,得藤茶水溶性粗多糖;g.提取藤茶多酚将加醇步骤的上清液III减压浓缩,回收乙醇,收集浓缩的水溶液, 用乙酸乙酯萃取,再将乙酸乙酯萃取相浓缩、干燥可得到藤茶多酚产品;或将浓缩的水溶 液,经AB-8大孔树脂动态吸附一蒸馏水洗脱去杂一70%乙醇液动态洗脱,或静置经AB-8树 脂静态吸附一蒸馏水洗脱去杂一70%乙醇静态洗脱,收集洗脱液并减压浓缩,回收乙醇,浓 缩液经低温真空干燥得到藤茶多酚产品。
3.按照权利要求2所述的一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方 法,其特征在于所述的加工步骤f.提取粗多糖中粗多糖可进一步进行纯化处理,粗多糖加 水复溶一sevag法脱蛋白一用双氧水脱色一乙醇沉淀一离心,收集沉淀一加水复溶一乙醇 沉淀一离心,收集沉淀于35 45°C真空干燥或加水溶解后喷雾干燥。
全文摘要
本发明涉及一种从藤茶中提取二氢杨梅素、藤茶多糖和藤茶多酚的方法,加工步骤中包含有a.原料粉碎将新鲜藤茶茎叶干燥、粉碎;b.浸提热水提取、离心收集上清液;c.浓缩将上清液I减压浓缩后,冷却静置,离心收集沉淀和上清液II;d.提取二氢杨梅素将沉淀经重结晶真空干燥,得二氢杨梅素;e.加醇将上清液II减压浓缩,醇沉,离心收集沉淀和上清液III;f.提取粗多糖将沉淀经纯化、真空干燥或喷雾干燥,得藤茶多糖;g.提取藤茶多酚将上清液III减压浓缩,以乙酸乙酯萃取、浓缩、干燥得藤茶多酚,或以AB-8树脂吸附、蒸馏水洗脱后,以乙醇洗脱收集洗脱液,浓缩、真空干燥得藤茶多酚。该方法成本低,产品得率较高环保,适合工业化连续生产,可实现藤茶资源的综合开发利用和经济效益的提高。
文档编号C07G99/00GK101973976SQ201010284838
公开日2011年2月16日 申请日期2010年9月16日 优先权日2010年9月16日
发明者刘金龙, 向东山, 向班贵, 周大寨, 唐巧玉, 李世荣, 武芸, 程超, 罗祖友, 肖强, 肖浩, 赵玉宏, 郑小江 申请人:湖北民族学院
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