专利名称：一种木通苯乙醇苷b的提取方法
技术领域：
本发明涉及一种木通苯乙醇苷B的提取方法，具体而言，是一种采用大孔树脂柱层析结合制备色谱提纯木通苯乙醇苷B的方法。
背景技术：
中药木通为木通科植物木通Akebia quinata (Thunb. ) Decne.、三叶木通Akebia trifliata(Thunb. )Koidz,或白木通 Akebia trifoliata(Thunb. )Koidz. var.australis (Diels)Rehd.的干燥藤莖。具清心火，利小便，通经下乳之功效，主治胸中烦热、喉痹咽痛、尿赤、五淋、水肿、周身挛痛、经闭乳少。木通苯乙醇苷B，2010年版药典将其作为木通药材含量检测的指标性成分，规定理论塔板数不低于3000。苯乙醇苷类化合物是一类在植物界广泛分布，具有广泛生物学活性的化合物，一直受到各国学者的高度关注，发展较为迅速。目前，从不同植物中分离鉴定出的苯乙醇苷类化合物已近200种，并且仍不断有新的苯乙醇苷类化合物被发现。大量研究表明，该类成分具有抗菌、抗炎、保肝、抗病毒、抗氧化、免疫调节、增强记忆、强心等多种药理活性。苯乙醇苷类化合物所表现的较强而且广泛的药理活性，及其低毒、安全的特性，使其具有潜在的开发研究价值。目前，木通苯乙醇苷B的相关研究报道较少，文献“木通药理活性成分及质量控制的研究”表明其具有一定的抗炎作用。高慧敏等发表的文献“RP-HPLC测定木通中木通苯乙醇苷B的含量”，该文献公开了不同产地木通中木通苯乙醇苷B的含量差异。关于木通苯乙醇苷B的提取纯化研究尚未见报道。
发明内容
本发明的目的在于填补木通苯乙醇苷B提取纯化研究的空白，提供一种木通苯乙醇苷B的制备方法，该方法提取效率高，提取过程无污染。为了实现上述目的，本发明技术方案为将木通药材粉碎，置于提取罐中采用乙醇液回流提取，提取液浓缩至无醇味，上大孔树脂柱吸附，依次用水、乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥；干燥物采用制备色谱进一步反复纯化得高含量的木通苯乙醇苷B。所述的乙醇液为70 85%乙醇水溶液，用量是药材量的4 8倍量。所述的大孔树脂可选D-101、LSA-20、AB_8中的一种，上样方式采用动态上样。·所述的制备色谱进一步反复纯化为以C18柱为色谱柱，乙腈-醋酸水溶液(pH2. 8)为流动相，体积比为23 30 70 77，分段收集色谱峰对应流分，各段分别采用HPLC检测，合并高浓度流分，蒸干得高纯度木通苯乙醇苷B ;合并较低浓度流分，蒸干，采用制备色谱进行重复分离。所述的HPLC检测条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸溶液(35 65 O. 5)为流动相；设定检测波长330nm ;柱温25°C ;流速lml/min ;进样量10 μ Io本发明的优势在于本发明在提取木通苯乙醇苷B时，采用70-85%的乙醇溶液提取，减少了大量水溶性杂质的溶出，易于过滤；采用制备色谱纯化步骤少，耗时短，得率高，分离效率高，易于小规模化生产。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :取木通药材lKg，粉碎，置于提取罐中，加入4L85%乙醇液回流提取，过滤，提取液浓缩至无醇味，上D-IOl大孔树脂柱吸附，先用2BV水洗脱杂质、再用4BV65%乙醇洗脱，收 集乙醇洗脱液，浓缩干燥得干燥物；将上述干燥物用流动相溶解，过滤除去不溶物,再经O. 4 μ m滤膜过滤，滤液采用制备色谱纯化，以C18柱为色谱柱，乙腈-醋酸水溶液(pH2. 8)为流动相，体积比为23 77，分段收集目标色谱峰对应流分，利用HPLC分析各段流分，HPLC条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸溶液(35 65 0.5)为流动相；设定检测波长330nm;柱温25°C;流速lml/min ;进样量10μ I ;合并高浓度流分蒸干，得木通苯乙醇苷BI. 13g，含M 96. 3%o实施例2:取木通药材lKg，粉碎，置于提取罐中，加入8L70%乙醇液回流提取，过滤，提取液浓缩至无醇味，上LSA-20大孔树脂柱吸附，先用3BV水洗脱杂质、再用5BV65%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥得干燥物；将上述干燥物用流动相溶解，过滤除去不溶物,再经O. 4 μ m滤膜过滤，滤液采用制备色谱纯化，以C18柱为色谱柱，乙腈-醋酸水溶液(pH2. 8)为流动相，体积比为25 75，分段收集目标色谱峰对应流分，利用HPLC分析各段流分，HPLC条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸溶液(35 65 0.5)为流动相；设定检测波长330nm;柱温25°C;流速lml/min ;进样量10μ I ;合并高浓度流分蒸干，得木通苯乙醇苷BI. 24g，含M 97. I % ο实施例3 取木通药材10Kg，粉碎，置于提取罐中，加入60L75%乙醇液回流提取，过滤，提取液浓缩至无醇味，上AB-8型大孔树脂柱吸附，先用3BV水洗脱杂质、再用7BV50%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥得干燥物；将上述干燥物用流动相溶解，过滤除去不溶物,再经O. 4 μ m滤膜过滤，滤液采用制备色谱纯化，以C18柱为色谱柱，乙腈-醋酸水溶液(pH2. 8)为流动相，体积比为28 72，分段收集目标色谱峰对应流分，利用HPLC分析各段流分，HPLC条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸溶液(35 65 0.5)为流动相；设定检测波长330nm;柱温25°C;流速lml/min ;进样量10μ I ;合并高浓度流分蒸干，得木通苯乙醇苷BIO. 2g，含M 96. 6%0
权利要求
1.一种木通苯乙醇苷B的提取方法，其特征在于将木通药材粉碎，置于提取罐中采用乙醇液回流提取，提取液浓缩至无醇味，上大孔树脂柱吸附，依次用水、乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥；干燥物采用制备色谱进一步反复纯化得高含量的木通苯乙醇苷B。
2.根据权利要求I所述的一种木通苯乙醇苷B的提取方法，其特征在于所述的制备色谱进一步反复纯化为以C18柱为色谱柱，乙腈-醋酸水溶液(pH2. 8)为流动相,体积比为23 30 70 77，分段收集色谱峰对应流分，各段分别采用用PLC检测，合并高浓度流分，蒸干得高纯度木通苯乙醇苷B;合并较低浓度流分，蒸干，采用制备色谱进行重复分离。
全文摘要
本发明涉及一种木通苯乙醇苷B的提取方法，该方法包括将木通药材粉碎，置于提取罐中采用乙醇液回流提取，提取液浓缩至无醇味，上大孔树脂柱吸附，依次用水、乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥；干燥物采用制备色谱反复纯化得高含量的木通苯乙醇苷B。采用本方法制备木通苯乙醇苷B，提取效率高，产品收率高，所得产品含量大于95％，而且解决现有工艺中的高污染，适合小规模生产。
文档编号C07H15/18GK102911217SQ20111021874
公开日2013年2月6日 申请日期2011年8月2日 优先权日2011年8月2日
发明者李法庆, 刘东锋 申请人:苏州宝泽堂医药科技有限公司