专利名称：一种用离子交换树脂分离长春碱的方法
技术领域：
本发明涉及天然药物领域，特别涉及一种采用超声波提取技术从长春花中提取长春碱的方法。
背景技术：
长春碱主要从长春花植物中提取得到，是夹竹桃科植物长春花所含有的一种抗癌生物碱，是目前临床使用的抗肿瘤药物，也可作为合成另一种抗癌生物碱长春瑞宾的化学中间体。目前从长春花中提取长春碱的方法有(1)从长春花鲜草中提取生物碱的工艺， 中国专利局公开号:CN101007033A ；
公开日:2007.8. 1 ；申请号:200610023692. 7，该发明涉及一种从长春花鲜草中提取生物碱的工艺，通过打浆一调酸一离心、榨汁一过滤一滤液调PH —四氯化碳萃取一浓缩抽松得到生物碱混合物；(2) —种长春碱的高效生产方法，中国专利局公开号:CN15;34038A ；
公开日:2004. 10.6 ；申请号:200410013558. X。该发明涉及一种长春碱的高效生产方法，通过将长春花经与醇或酸醇提取溶剂混合一勻浆固液萃取一空化混悬萃取一过滤一提取液浓缩一浓缩液调PH值一过滤一空化混悬液液萃取一浓缩一纯化后得到长春碱成品；C3)从长春花中提取抗癌活性成分的新工艺，中国专利局公开号 CN1365978A ；
公开日2002. 08. 28 ；申请号011319879. 9。该发明涉及一种长春花全草干粉中提取长春碱、长春新碱及熊果酸的工艺方法，采用长春花干料磨粉一苯渗漉一3 10% 的酒石酸液逆流萃取一酸溶物经柱层析分离一长春碱和长春新碱；(4)ft~0cess for the isolation of alkaloid components from the plantVinca Rosea L.(一禾中从长春花中分离生物碱成分的工艺)美国专利局公开号4172077 ；
公开日1979. 10. 23 ；申请号[HU]RI 638。该发明涉及一种以长春花干草粉碎后，通过不同的PH萃取来提取长春花生物碱的工艺方法。原料经粉碎一甲醇、2%硫酸水溶液及甲苯渗漉一浓缩渗漉液一pH梯度萃取一纯化得到生物碱；其中方法( (3) (4)存在工艺复杂不易推广、提取时间较长、生产成本高等缺点；方法(1) (3) (4)存在使用苯、甲苯、四氯化碳等有毒溶剂，容易对环境造成污染。
发明内容
本发明的目的是提供一种安全、低成本、高效率的提取分离中药长春碱的方法。该发明目的是通过如下工艺实现的取含有中药长春花的提取液，调整PH值2至 4，滤过，取滤液加于阳离子交换树脂柱上，先以水洗脱除杂，再以5% 20%的盐溶液浸泡树脂柱，之后以含酸或乙醇的盐溶液洗脱，收集洗脱液，经脱盐处理，即得所需的长春碱。基于上述工艺过程，发明人又进行了进一步的研究，细化各步骤的参数，筛选出最优方案，具体内容如下所用浸泡树脂的盐溶液浓度优选为10^-15%,洗脱浓度优选为5 % 8 %。所用的盐可以是CaCl2、KCl、NaCl、NH4Cl中的任一种，优选为NaCl和NH4C1。所用盐溶液浸泡树脂的时间为1 5小时。
洗脱用盐溶液含有0. 2 0. 5%的盐酸或含有0. 2 0. 5%的硫酸或10% 30% 的乙醇。所用的树脂可以是氢型和盐型，优选为盐型如钠型或铵型。洗脱速度优选为每小时4 6倍柱体积。该工艺过程与现有技术相比，不仅工艺流程简单，而且采用盐溶液(含稀酸或稀醇)作为洗脱液，对设备基本无腐蚀性，对工业生产设备要求降低了，成本大大降低，更易实现扩大生产的目的。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。实施例一取长春花100g，WpH = 4的酸水渗漉，合并渗漉液加水稀释至1000ml，离心，调节PH = 2，离心，上清液以5倍柱体积/小时通过阳离子交换树脂(001X7，钠型，径高比 1 6)，水洗至流出液无颜色，再用10%氯化钠的0.2%的盐酸溶液浸泡树脂5小时。再用 5%氯化钠的0. 3%的盐酸溶液洗脱，洗脱速度为4倍柱体积/小时，洗脱2倍柱体积后浸泡5小时，再洗脱至生物碱检查为阴性(流出液滴加10%硅钨酸无沉淀)，收集洗脱液，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得长春碱。实施例二取长春花50g，加水煎煮2次，每次10倍量，煎煮2小时，合并煎煮液，离心，调节 PH = 3，离心，上清液以4倍柱体积/小时通过阳离子交换树脂(001X2.5，铵型，径高比 1 8)，水洗至流出液无颜色，再用5%氯化铵的0.5%的盐酸溶液浸泡树脂2小时。再用 5%氯化铵的0. 2%的盐酸溶液洗脱，洗脱速度为2倍柱体积/小时，至生物碱检查为阴性 (流出液滴加10%硅钨酸无沉淀)，收集洗脱液，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得长春碱。实施例三取长春花50kg，加70%乙醇超声提取两次，每次加5倍量，超声0. 5小时，合并提取液，离心，回收乙醇，加水至500ml，调节pH = 2，离心，上清液以2倍柱体积/小时通过上阳离子交换树脂(001X10，钠型，径高比1 8)，水洗至流出液无颜色，再用20%氯化钠的 0. 5%的盐酸溶液浸泡树脂1小时。再用10%氯化钠的0. 2%的盐酸溶液洗脱，洗脱速度为 5倍柱体积/小时，至生物碱检查为阴性(流出液滴加10%硅钨酸无沉淀)，收集洗脱液，用氢氧化钠中和至中性，除盐，滤液浓缩干燥得长春碱。
权利要求
1.一种从长春花提取液中分离长春碱的方法，其特征在于该方法为取长春花提取液，调节PH值2至4，滤过，过阳离子交换树脂柱，先以水洗除杂，再以5% 20%的盐溶液浸泡树脂柱，再以含酸或乙醇的5% 20%盐溶液洗脱，收集洗脱液，经脱盐处理，浓缩干燥得长春碱。
2.根据权利要求1所述的分离长春碱的方法，其特征在于所用浸泡树脂的盐溶液浓度优选为10% 15 %，洗脱浓度优选为5% 8%。
3.根据权利要求1所述的分离长春碱的方法，其特征在于所用的盐可以是CaCl2、KCl、 NaCl、NH4Cl中的任一种，优选为NaCl和NH4Cl。
4.根据权利要求1所述的分离长春碱的方法，其特征在于所用盐溶液浸泡树脂的时间为1-5小时。
5.根据权利要求1所述的分离长春碱的方法，其特征在于洗脱用盐溶液含有0.2 0. 5%的盐酸或含有0. 2 0. 5%的硫酸或10% 30%的乙醇。
6.根据权利要求1所述的分离长春碱的方法，其特征在于所用的树脂可以是氢型和盐型，优选为盐型如钠型或铵型。
7.根据权利要求1所述的分离长春碱的方法，其特征在于洗脱速度优选为每小时4 6倍柱体积。
全文摘要
本发明公开了一种分离中药长春碱的方法，尤其是一种从中药长春花提取液中分离长春碱的方法。该方法包括如下技术方案取长春花提取液，调整pH值2至4，滤过，取滤液加于阳离子交换树脂柱上，先以水洗脱除杂，再以5％～20％的盐溶液浸泡树脂柱，再以含酸或乙醇的5％～20％盐溶液洗脱，检查无生物碱为止，收集洗脱液，加碱中和，经脱盐处理，浓缩干燥得中药长春碱。该方法可以高效率地从中药长春花提取液中分离高纯度的长春碱，克服了现有技术提取率低、有机溶剂用量大、酸碱浓度过高、工艺复杂等缺点，易于在生产中应用。
文档编号C07D519/04GK102516264SQ20111040320
公开日2012年6月27日 申请日期2011年11月25日 优先权日2011年11月25日
发明者毕云英 申请人:威海天泓农业科技有限公司