专利名称：用于递送寡核苷酸的新型单一化学实体和方法
用于递送寡核苷酸的新型单一化学实体和方法
背景技术：
集中于用于治疗目的的寡核苷酸全身性递送的科学努力正在进行中。关于寡核苷酸递送的三种突出方法包括I)脂质纳米颗粒(LNP)封装，2)聚合物缀合和3)单一化学缀合(single chemical conjugation)。单一化学缀合一般采用连接至寡核苷酸的祀向配体或脂质或可溶基团或内体裂解肽(endosomolytic peptide)或细胞穿透肽和/或两种或所有四种的组合。接头可以存在于缀合物以及其他功能性中。单一化学缀合是已知的，并且寡核苷酸的连接在寡核苷酸的5’或3’末端、在两个末端或内部发生。参见W02005/041859 ;W02008/036825 和 TO2009/126933。本发明的单一化学缀合物必须含有在寡核苷酸的5’和/或3’末端上的可以视为内吞体裂解组分的肽、细胞穿透肽和/或基因融合肽(fusogenic peptide)。接头还必须存 在于肽和寡核苷酸之间。其他功能性例如靶向配体、增溶剂、脂质和/或掩蔽剂是任选存在的。一般地，寡核苷酸是siRNA。进一步地,寡核苷酸是siRNA的过客链(passenger strand)或引导链。发明概沭
在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物(modular composition),其包含I)寡核苷酸；2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头；和任选地连接至寡核苷酸的一个或多个脂质、增溶基和/或靶向配体。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；和3)选自SEQ ID NOs: 1-59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA ;和3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的引导链；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的过客链；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头；和任选地连接至寡核苷酸的一个或多个脂质、增溶基和/或靶向配体。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；和3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA ;和3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的引导链；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽·连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的过客链；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头；和任选地连接至寡核苷酸的一个或多个脂质、增溶基和/或靶向配体。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；和 3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA ;和 3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的引导链；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的过客链；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头；和任选地连接至寡核苷酸的一个或多个脂质、增溶基和/或靶向配体。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；和 3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA ;和 3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一 个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的引导链；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的过客链；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。附图简述
图I 对于下述肽在pH 5. 4和7. 5的溶血百分比WHHWWHWWHHWffHHW (SEQ ID NO:2)。图2 对于下述肽在pH 5. 4和7. 5的溶血百分比AcLHLLHHLLHHLHHLLHHLLHLLHHLLHHLGGGRKKRRQRRRPPQC (SEQ ID NO: 57)。图3 对于下述肽在pH 5. 4和7. 5的溶血百分比m (Peg)44HLLHLLLHLWLHLLHLLLHLLC (SEQ ID NO:33)。图4 在用化合物3-6 (b-DNA方案)处理的HeLa细胞中的SSB mRNA水平。图5 在用化合物6-6 (b-DNA方案)处理的HeLa细胞中的SSB mRNA水平。图6 在用化合物8-5 (b-DNA方案)处理的HeLa细胞中的SSB mRNA水平。图7 在用化合物8-9 (b-DNA方案)处理的HeLa细胞中的SSB mRNA水平。图8 在用化合物9-7 (b-DNA方案)处理的HeLa细胞中的SSB mRNA水平。图9 在用化合物8-7 (b-DNA方案)处理的HeLa细胞中的SSB mRNA水平。
图10 在用化合物13-4 (b-DNA方案)处理的HeLa细胞中的SSB mRNA水平。图11 在用化合物12-3 (b-DNA方案)处理的HeLa细胞中的SSB mRNA水平。图12 在用化合物13-5 (b-DNA方案)处理的HeLa细胞中的SSB mRNA水平。图13 在用化合物3-8 (双萤光素酶方案)处理的HEK293T细胞中的SSB mRNA水平。图14 在用化合物15-1 (双萤光素酶方案)处理的HEK293T细胞中的SSB mRNA水平。图15 在所示化合物的单次玻璃体内剂量后3天，在大鼠视网膜组织中SSBmRNA的相对水平。发明详沭
在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头；和任选地连接至寡核苷酸的一个或多个脂质、增溶基和/或靶向配体。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表 I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；和3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA ;和3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的引导链；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的过客链；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2 )选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头；和任选地连接至寡核苷酸的一个或多个脂质、增溶基和/或靶向配体。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；和3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA ;和3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的引导链；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的过客链；3)选自SEQ ID NOs: 1_59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头；和任选地连接至寡核苷酸的一个或多个脂质、增溶基和/或靶向配体。 在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；和 3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA ;和 3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的引导链；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的过客链；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头；和任选地连接至寡核苷酸的一个或多个脂质、增溶基和/或靶向配体。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含I)寡核苷酸；2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至寡核苷酸；和 3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在另一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA ;和 3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一
个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的引导链；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至siRNA的过客链；3)选自 SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头。为了经由草图(car toon )举例说明本发明，本发明特征在于模块组合物，其包含寡核苷酸(O)、接头(L)、肽(P)以及任选脂质(X)、靶向配体(X)和/或增溶基(X)。·模块组合物可以具有式
P-L-O-L-P。模块组合物可以具有式
P-L-O-X。模块组合物可以具有式
P-L-O。模块组合物的例子是
siRNAii W Ii5' r
P.................................................L...............................i/WVWVXA—*------------------------— P
ywwvw
3> I 5'
Ι雅
这个例子用作指导。本领域技术人员将认识到存在用于将所需组分置于过客和引导链的多种排列。当寡核苷酸是双链寡核苷酸时，“P-L”和脂质、靶向配体和/或增溶基可以位于相同链或不同链上。在某些实施方案中，“P-L”和脂质、靶向配体和/或增溶基在相同链上。在某些实施方案中，“P-L”和脂质、靶向配体和/或增溶基在过客链上。在某些实施方案中，“P-L”和脂质、靶向配体和/或增溶基在引导链上。在某些实施方案中，“P-L”和脂质、靶向配体和/或增溶基在不同链上。在某些实施方案中，“P-L”在过客链上，而脂质、靶向配体和/或增溶基在引导链上。在某些实施方案中，“P-L”和脂质、靶向配体和/或增溶基在不同链上，但在双链寡核苷酸的相同末端上。
在某些实施方案中，“P-L”和脂质、靶向配体和/或增溶基在不同链上，并且在双链寡核苷酸的相反末端上。在某些实施方案中，等同或不同性质的另外“P-L”可以用于代替上述实施方案中提到的脂质、靶向配体和/或增溶基。在某些实施方案中，“P-L”可以位于过客或引导链的多个末端上，并且脂质、靶向配体和/或增溶基可以位于过客和引导链的剩余末端上。在某些实施方案中，一个“P-L”和两个或更多个脂质、靶向配体和/或增溶基存在于寡核苷酸上。在某些实施方案中，两个或更多个“P-L”和两个或更多个脂质、靶向配体和/或增 溶基存在于寡核苷酸上。在某些实施方案中，当寡核苷酸是双链寡核苷酸，并且存在多个“P-L”组分和/或脂质、靶向配体和/或增溶基时，此类多个“P-L”组分和/或脂质、靶向配体和/或增溶基可以都存在于双链寡核苷酸的一条链或两条链中。当存在多个“P-L”组分和/或脂质、靶向配体和/或增溶基时，它们可以都是相同的或不同的。在另一个方面，本发明包括将寡核苷酸递送给细胞的方法。该方法包括(a)提供或获得本发明的模块组合物；(b)使细胞与模块组合物接触；和(C)允许细胞将模块组合物内在化。该方法可以在体外、离体或在体内执行，例如以治疗鉴定为需要寡核苷酸的受试者。需要所述寡核苷酸的受试者是需要下调或沉默一种或多种基因例如与病症有关的基因表达的受试者，例如人。在一个方面，本发明提供了用于抑制一种或多种基因表达的方法。该方法包括使一种或多种细胞与有效量的本发明的寡核苷酸接触，其中所述有效量是抑制一种或多种基因表达的量。该方法可以在体外、离体或在体内执行。本发明的方法和组合物例如本文描述的模块组合物可以与本领域已知的任何寡核苷酸一起使用。此外，本发明的方法和组合物可以用于治疗本领域已知的任何疾病或病症，和用于治疗任何受试者，例如任何动物、任何哺乳动物例如任何人。本领域普通技术人员还将认识到本发明的方法和组合物可以用于治疗将获益于下调或沉默一种或多种基因的任何疾病。本发明的方法和组合物例如本文描述的模块组合物可以与本文描述的任何剂量和/或制剂或本领域已知的任何剂量或制剂一起使用。除本文描述的施用途径外，普通技术人员还应理解其他施用途径可以用于施用本发明的模块组合物。寡核苷酸
如本文使用的，“寡核苷酸”是双链或单链、未经修饰或经修饰的RNA或DNA。经修饰的RNAs的例子包括比未经修饰的RNAs对核酸酶降解具有更大抵抗力的那些。进一步例子包括具有2’糖修饰，碱基修饰，单链突出端例如3’单链突出端中的修饰，或特别地如果是单链的，那么包括一个或多个磷酸基或一个或多个磷酸基类似物的5’修饰的那些。寡核苷酸的例子和进一步描述可以在此引入作为参考的W02009/126933中发现。在一个实施方案中，寡核苷酸是反义、miRNA或siRNA。优选寡核苷酸是siRNA。另一种优选寡核苷酸是siRNA的过客链。另一种优选寡核苷酸是siRNA的引导链。siRNA
siRNA通过称为RNA干扰(RNAi)的过程指导mRNA的序列特异性沉默。该过程在广泛多样的生物包括哺乳动物及其他脊椎动物中发生。用于制备且施用siRNA的方法及其用于特异性灭活基因功能的用途是已知的。siRNA包括经修饰的和未经修饰的siRNA。siRNA的例子和进一步描述可以在此引入作为参考的W02009/126933中发现。可以用于将siRNA施用于受试者的许多示例性递送途径是已知的。此外，siRNA可
以根据本领域已知的任何示例性方法进行配制。siRNA制剂和施用的例子和进一步描述可以在此引入作为参考的W02009/126933中发现。|i
对于不能容易地跨越双层膜的大分子药物和亲水性药物分子，在细胞的胞内体/溶酶体区室中的诱陷被认为是有效递送至其作用部位的最大障碍。不希望受理论束缚，认为肽的使用将促进寡核苷酸自这些胞内体/溶酶体区室逃出或寡核苷酸易位跨越细胞膜且释放到细胞溶质区室内。在特定实施方案中，本发明的肽可以是聚阳离子或两亲或聚阴离子肽或拟肽，其显示PH依赖性膜活性和/或融合性(fusogenicity)。拟肽可以是设计为模拟肽的小蛋白质样链。在某些实施方案中，肽是细胞渗透剂，优选螺旋细胞渗透剂。这些肽通常被称为细胞渗透妝。参见例如，“Handbook of Cell Penetrating Peptides”编辑，Langel, U.；2007, CRC Press, Boca Raton, Florida。优选地,组分是两亲的。螺旋试剂优选是α-螺旋试剂，其优选具有亲脂和疏脂相。细胞渗透剂可以是例如细胞渗透肽、阳离子肽、例如主要由Tyr、Trp和Phe组成的两亲肽或疏水肽、树枝状肽、限制性肽(constrained peptide)或交联肽。细胞渗透肽的例子包括Tat、Penetratin和MPG。对于本发明，认为细胞渗透肽可以是“递送”肽，其可以携带大的极性分子包括肽、寡核苷酸和蛋白质跨越细胞膜。细胞渗透肽可以是线性或环状的，并且包括D-氨基酸、“反转型(retro-inverso)”序列、非肽或假肽键、肽基模拟物。此外，肽和肽模拟物可以是经修饰的，例如糖基化的、加入聚乙二醇的或甲基化的。肽的例子和进一步描述可以在此引入作为参考的W02009/126933中发现。肽的合成是本领域众所周知的。肽可以通过半胱氨酸或其他含硫醇部分对于C或N末端的添加在任一末端或两个末端缀合。当在N末端上未官能化时，肽可以通过乙酰基加帽，或可以用脂质、PEG或靶向部分加帽。当肽的C末端是未缀合或未官能化的时，它可以作为酰胺加帽，或可以用脂质、PEG或靶向部分加帽。本发明的肽是
权利要求
1.一种模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA ;和3)选自SEQ ID NOs: 1-59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至所述接头。
2.权利要求I的模块组合物，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至所述siRNA的引导链。
3.权利要求I的模块组合物，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至所述siRNA的过客链。
4.一种模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA ;和3)选自SEQ ID NOs: 1-59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至所述接头。
5.权利要求4的模块组合物，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至所述siRNA的引导链。
6.权利要求4的模块组合物，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至所述siRNA的过客链。
7.一种模块组合物，其包含DsiRNA ;2)选自表I的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA ;和3)选自SEQ ID NOs: 28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58和59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至所述接头。
8.权利要求7的模块组合物，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至所述siRNA的引导链。
9.权利要求7的模块组合物，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至所述siRNA的过客链。
10.一种模块组合物，其包含I) SiRNA ;2)选自表2的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3’和/或5’末端连接至siRNA;和3)选自SEQ ID NOs:28、29、33、36、40、50、51、52、53、54、55、56、57、58和59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至所述接头。
11.权利要求10的模块组合物，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至所述siRNA的引导链。
12.权利要求10的模块组合物，其中所述接头在3’和/或5’末端连接至所述siRNA的过客链。
全文摘要
在一个实施方案中，本发明公开了模块组合物，其包含1)寡核苷酸；2)选自表1的一个或多个接头，其可以是相同或不同的，其中所述接头在任何3'和/或5'末端连接至寡核苷酸；3)选自SEQ ID NOs:1-59的一个或多个肽，其可以是相同或不同的，其中所述肽连接至接头；和任选地连接至寡核苷酸的一个或多个脂质、增溶基和/或靶向配体。
文档编号C07H21/02GK102892420SQ201180017855
公开日2013年1月23日 申请日期2011年4月4日 优先权日2010年4月9日
发明者J.G.阿龙森, S.F.巴內特, R.巴茨, S.L.科勒特蒂, V.R.贾德哈夫, A.A.莫莫塞, A.W.肖, D.M.特勒斯, T.J.图克, W.王, Y.袁 申请人:默沙东公司