专利名称：高纯度二丁酰环磷腺苷钙及其制备方法
技术领域：
本发明涉及药物合成领域，具体为高纯度的二丁酰环磷腺苷钙及其制备方法。
背景技术：
二丁酰环磷腺苷钙是一种核苷酸类衍生物，作为G蛋白偶联型受体药物，可同时激活蛋白激酶A和蛋白激酶C，蛋白激酶是一种别构酶，由两个催化亚基和两个调节亚基组成，催化亚基具有催化蛋白质(或酶)磷酸化作用。故二丁酰环磷腺苷钙可催化人体内最基本的生物化学代谢——氧化磷酸化反应和三羧酸循环，使大多数蛋白质和酶类产生活性，激活人体各种反应，同时产生大量ATP，改善细胞和能量代谢，从而实现其促进神经再生、转化异常细胞、扩张血管、舒张平滑肌、改善心肌缺血等作用。二丁酰环磷腺苷钙是第二信使环磷腺苷(cAMP)的换代产品，由于cAMP不易透过细胞膜，而且进入细胞内的cAMP很快地被细胞内之磷酸二酯酶水解，故制成磷酸腺苷的衍生物，环磷酸腺苷双丁酰酯对细胞的渗透性比cAMP强，且能对抗机体内磷酸二酶的破坏作用，故其作用时间和速度均比cAMP持久和迅速。是新一代细胞功能激活剂，营养与治疗的
彡口口 二丁酰环磷腺苷钙可以治疗因G蛋白功能失调引起的各种疾病，蛋白功能失调可以表现为功能增强或下降，导致某些心血管疾病如:心绞痛、心肌梗塞、心肌炎、心源性休克、免疫遗传性疾病红斑狼疮和银屑病等。中国专利CN 100457770C公开了一种二丁酰环磷腺苷钙的精制方法。通过在粗品中加入甲醇和丙酮，进行分离纯化，最终得到纯度> 98%的二丁酰环磷腺苷钙干粉。较之市售的现有广品，纯度有了很大 提闻。
发明内容
本发明，经过特殊纯化工艺，将目标物二丁酰环磷腺苷钙的纯度提升至99%以上，且单个杂质量均小于0.2%，与市售产品，上海第一生化药业生产的二丁酰环磷腺苷钙原料药相比，纯度提高显著。二丁酰环磷腺苷钙药物，原料纯化困难，现有产品纯度较低，一般为80-95%，难以满足医疗需要，且杂质较多，含量较高。本发明的目的，在于提供一种高纯度的二丁酰环磷腺苷钙。本发明另一目的，在于提供一种高纯度的二丁酰环磷腺苷钙的制备方法，其特征在于，采取特殊的纯化工艺，喷雾干燥技术，和柱层析技术，得到高纯度的目标产品。二丁酰环磷腺苷钙的合成方法，一般以环磷腺苷为起始原料，经正丁酸酐酰化后，再成钙盐而制得。《最新生化药物制备技术》(中国医药科技出版社2001年三月第一版246-248页)提供了详细的合成方法(见
图1)。(I)成盐。cAMP与三乙胺按比例投料，溶解后，减压浓缩，加入无水吡啶，振摇脱水减压抽干，干燥得cAMP-乙胺盐。(2)酰化、水解。上述cAMP-乙胺盐，加入无水吡啶和丁酐，避光反应6-7天，酰化反应完全后，加入蒸馏水，低温水解2-3小时，减压浓缩，先后加入二倍量乙醚，3倍量蒸馏水提取，取水层，减压浓缩成浆状物，再用乙醚提取两次，抽取乙醚，用无水乙醇溶解成糖浆状。(3)成钙盐。上述糖浆状物加入无水氯化钙，减压浓缩至干，加入无水乙醇和乙醚，析出过滤，洗涤，减压干燥，即得二丁酰环磷腺苷钙。上述方法所得产品，收率84%。工艺操作繁琐、劳动强度大，收率较低且产品质量较差，经过检测最大单杂超过4%，水分含量约6%，且存在残留的丁酸等其他杂质，严重影响用药的安全性。日本专利JP51113896中，提出了新的合成方法。将环磷酰苷直接与正丁酸酐反应，产物水解后，洗涤除去丁酸，再过离子交换树脂柱，即得二丁酰环磷腺苷钠。由于采用直接酰化法，并结合使用离子交换树脂等处理，缩短了工艺周期。具体见图2。但结果收率很低，杂质问题也没有很好的解决。同时只能得到二丁酰环磷腺苷钠，而不是钙盐。针对现有二丁酰环磷腺苷钙原料制备工艺中存在的问题，我们在大量实验摸索的基础上，提出了一种新的二丁酰环磷腺苷钙制备方法(见图3)。环磷腺苷先与三乙胺成盐，再酰化；产物用醚洗去酸酐，并经水提取，得到二丁酰环磷腺苷三乙胺盐的水溶液；直接喷雾干燥，得到类白色的二丁酰环磷腺苷三乙胺盐固体粉末。再与等当量的氯化钙在乙醇水溶液中成盐，减压蒸馏浓缩至干，得到二丁酰环磷腺苷钙粗品。粗品过硅胶柱层析，以二氯甲烷-无水甲醇洗脱；使用平面薄层法监控，弃去最初的杂质馏分，收集含二丁酰环磷腺苷钙的组分，减压浓缩至干，即得二丁酰环磷腺苷钙产品O本发明提供的二丁酰环磷腺苷钙制备方法，其特征在于，采用喷雾干燥技术和柱层析纯化分离技术。本发明采用了喷雾干燥技术，保证快速干燥，避免了在有水存在的情况下长时间造成的降解，从而将杂质引入最终产品。影响喷雾干燥结果的几个重要参数是进口温度，进料速度，雾化压力等。本发明喷雾干燥过程避免引入杂质，不采用助干剂。溶剂选用水。将进口温度，进料速度，雾化压力三个参数作为考察因素，以干燥后粉末含水量以及产物纯度含量验证干燥效果和产物受破坏程度，进行正交试验，因素水平及试验结果见表1,表2。表I 喷雾干 燥工艺因素水平表
权利要求
1.高纯度环磷腺苷钙，其特征在于制备方法中，采用了喷雾干燥技术和柱层析技术。
2.权利要求1所述的喷雾干燥技术，其特征在于，进口温度为105°C-120°C，不采用助干剂，溶剂选用水。
3.权利要求1所述的柱层析技术，选用的填料为硅胶，200-300目。
4.权利要求1所述的柱层析技术，洗脱液包含但不限于水、甲醇、无水甲醇、乙醇、无水乙醇、异丙醇、正丙醇、乙腈、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、甲酸甲酯、1，4-二氧六环、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、石油醚，其中一种或多种混合物。
5.权利要求4所述的柱层析技术，洗脱液为甲醇-二氯甲烷、无水乙醇-二氯甲烷混合物，混合比例为10: 1-60:1。
全文摘要
本发明涉及一种高纯度二丁酰环磷腺苷钙及其制备方法。二丁酰环磷腺苷钙药物原料纯化困难，现有产品纯度较低80-95%，难以满足医疗需要。因此，本发明将传统制备工艺进行改进，采用了喷雾干燥和柱层析分离纯化技术，得到了高纯度的二丁酰环磷腺苷钙药物，纯度99%以上，最大杂质含量降低到0.2%以下。
文档编号C07H1/00GK103242403SQ201210206760
公开日2013年8月14日 申请日期2012年6月21日 优先权日2012年6月21日
发明者关屹, 闫冬, 李银博 申请人:辽宁亿灵科创生物医药科技有限公司, 关屹