专利名称：一种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法
技术领域：
本发明涉及一种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法，属于生物医药领域。
背景技术：
聚戊烯醇在裸子、被子植物中均广泛存在，其还存在于细菌、真菌和哺乳动物的脏器中，其结构与具有生物活性的多萜醇结构相似，因此被誉为最佳的合成中间体，所以从植物提取桦木型聚戊烯醇与人体中多萜醇结构相似，因此提取分离植物聚戊烯醇并合成多萜醇成为一种新的药物开发理念。聚戊烯醇是以C5异戊烯基为结构单元的类脂化合物，从结构上可分桦木醇型 ω - (trans) 2_ (cis)n_0H、菲卡醇型 ω - (trans) 3_ (cis)n_0H 和爺尼醇型 ω - (trans)n_0H，王成章等从银杏叶中分离出7种桦木醇型聚戊烯醇，结构单元为15 22。如图I.聚戊烯醇类脂在植物体中多以乙酸酯和游离态的醇的形式存在，在动物体中多以磷酸酯和醇的形式存在。有研究表明，在桦木中以碳链长度为30 40的不饱和醇和乙酸酯的形式存在，木兰叶中的聚戊烯醇为45 65碳的不饱和醇，叶绿醇中以碳链长度为20和45的饱和醇存在，翻白草中以碳链长度为75 175的不饱和醇存在，酵母中的聚戊烯醇以碳链长度为30 40的饱和乙酸酯存在，猪肝脏中的聚戊烯醇碳链长度为55的饱和醇和磷酸酯，真菌感染的叶子中含有碳链长度为55的饱和醇。目前有报道银杏聚戊烯醇、刺山柑聚戊烯醇、松针聚戊烯醇、桑叶聚戊烯醇、柏叶聚戊烯醇等。植物聚戊烯醇及其加氢衍生物是人体糖蛋白生物合成的关键载体，具用抗肿瘤、辅助放化疗及抗病毒和降血糖、抗突变、降血脂和调节免疫功能等作用。尤其S-多萜醇含有不饱和双键，具有抗氧化、清除脂质自由基作用，能抗衰老，提高亚键康人群的生活质量。尽管多萜醇及其磷酸酯是生物代谢的关键载体，但由于多萜醇在动物体内的含量太低，其提取、分离和纯化繁锁，收率极低，从动物内脏提取分离天然多萜醇成本极高，天然存在的多萜醇的供应极其稀少，如5kg猪肝仅含有200mg多萜醇，到目前为止，国内外没有解决高纯度多萜醇的大量制备问题，从而限制了多萜醇及其磷酸酯的药物开发。因此，如何合成多萜醇及其磷酸酯，并研究它们的生物活性及其代谢机理，成为国际研究的方向。目前国内外对于聚戊烯醇的提纯多用于硅胶柱层析分离，对于尿素包埋法纯化分离聚戊烯醇国内外并没有报道，尤其对于聚戊烯醇作为中间体加氢产物及其抗氧化性和抑菌生物活性的研究甚少。多萜醇是聚戊烯醇未端单元中异戊烯基加氢为饱和的异戊醇，是聚戊烯醇加氢产物中一种。本发明提取分离桦木醇型结构(ω-(trans)2-(cis)n-0H，η =10 20)的聚戊烯醇，通过合成制备聚戊烯醇分子结构中一个异戊烯基单元被氢饱和为异戊烷基单元的加氢衍生物，本发明的合成产物包括了多萜醇
发明内容
为实现上述目的，发明了ー种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法，由以下步骤组成第一歩，聚戊烯醇类脂提取将富含聚戊烯醇类脂的新鮮植物叶子，室温阴干，破碎至100目以下粉末，加入无水丙酮或Cl C3醇中任ー种溶剤，叶子与溶剂按质量比为I 20，在室温浸泡10 72小时，或在10°C 80°C经微波提取或超声波提取10 60分钟，重复提取两次，合并提取液，真空回收有机溶剤，浓缩物为聚戊烯醇类脂软膏；第二步，脲醇溶液的制备将尿素放入无水甲醇中，在充氮条件下水浴加热至尿素全部溶解，其中尿素与无水甲醇的重量体积比为I : I 10,回流温度为40 90°C ；第三步，聚戊烯醇类脂尿素包合物制备在脲醇溶液中加入聚戊烯醇类脂软膏和填料，聚戊烯醇类脂软膏填料脲醇溶液的质量比例0. I I : I 3 10 40，在40 90°C搅拌回流，冷却至室温后，在-40 10°C结晶，抽滤，结晶物为聚戊烯醇类脂尿素 包合物。 第四步，聚戊烯醇类脂纯化将聚戊烯醇类脂尿素包合结晶物装柱，用非极性溶剂进行洗脱，洗脱体积为柱体积1-4倍，TLC检测，合并聚戊烯醇类脂洗脱组分，浓缩后加入质量比为I : 6 30无水丙酮，室温搅拌溶解；40 200目硅藻土与石英沙按质量比I I 10混合，得到混合助剂，混合助剂与聚戊烯醇类脂质量比为0.5 20 100混合，在-30°C 0°C搅拌2 30小吋，3000 20000转/分钟离心机过滤，清液回收有机溶剤，浓缩物为纯化聚戊烯醇类脂；第五歩，聚戊烯醇制备聚戊烯醇类脂加入到5% -40%氢氧化钠溶液中，聚戊烯醇类脂与氢氧化钠溶液质量比为I : 10 50，在30°C 90°C搅拌反应0. 5 3小时，再用正己烷等体积萃取反应液2-5次，合并萃取相，用等体积水反洗2 5次，有机相减压浓縮，浓缩物加入5-20倍硅胶混匀，再用2-6倍正己烷室温浸泡0. 5-2小时，过滤，滤液浓干，浓缩物为淡黄色聚戊烯醇油状物，聚戊烯醇含量大于95%。第六步，聚戊烯醇加氢衍生物制备将聚戊烯醇溶于ニ氯甲烷-甲醇溶液(体积比为8 I : I)中，聚戊烯醇与ニ氯甲烷-甲醇溶液质量体积比(g ml)l 20 100;加入催化剂，聚戊烯醇与催化剂质量比为80 200 1，反应压カ8 20MPa，反应时间为18 48h，反应温度10°C 50°C ;反应结束后，过滤，真空浓缩，浓缩物为聚戊烯醇加氢衍生物。本发明中聚戊烯醇及其加氢衍生物对于金黄色葡萄球菌(Sa.)、大肠杆菌(Ec.)、枯草芽孢菌和沙门氏菌具有抑制作用，聚戊烯醇抑菌圈直径为6. 82-8. 55mm，加氢衍生物抑菌圈直径为8. 02 9. 98mm，氢化产物抑菌活性高于聚戊烯醇。氢化产物对02_ 的清除结果表明，氢化产物样品浓度的増加，超氧自由基的清除率逐渐上升，在0.2 0. 4mg/mL范围内呈平缓上升趋势，0. 4 I. Omg/mL范围内呈急速上升趋势，I. Omg/mL以后增加浓度，清除率上升幅度较小，在1.4mL以后趋势趋于平缓，但总体而言，增加产品的浓度，会増加超氧自由基的清除率，加强其抗氧化的活性。氢化产物对*0H的清除结果表明，氢化产物样品浓度的増加，羟基自由基的除率逐渐上升，在0. 4 I. 2mg/mL范围内呈平缓上升趋势，I. 2
2.Omg/mL范围内呈急速上升趋势，2. Omg/mL以后增加浓度，清除率上升趋势趋于平缓，但总体而言，增加产品的浓度，会增加羟基自由基的清除率，加强其抗氧化的活性。本发明制备的氢化产物对清除超氧自由基和羟基自由基均有较好的清除作用，有良好的抗氧化性。
本发明中聚戊烯醇来源于银杏叶、松针叶、桑叶中的一种，聚戊烯醇的结构为桦木醇型ω-(trans)2-(cis)n-0H，其中η的范围为10 20。通过催化加氢反应，将聚戊烯醇分子结构中一个异戊烯基单元被氢饱和为异戊烷基单元，其中包括未端单元为异戊醇的多萜醇结构。在本专利中选择的加氢催化剂是(S) -Ru (OAc) 2 (BINAP)、Rh/PVP_Ti02、Ru (BINAP)(OAc)2中任一种。如图I.在本发明第一步中Cl C3醇为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中任一种，优选异丙醇。在脲醇溶液的制备中，将尿素放入无水甲醇中，在充氮条件下水浴加热至尿素全部溶解，其中尿素与无水甲醇的重量体积比为I : I 10，优选I : I 4，回流温度为40 90°C，优选40 500°C ;本发明第三步中填料为硅胶、活性炭、聚酰胺树脂、凹凸棒土、氧化铝、硅藻土中一种。本发明在聚戊烯醇类脂尿素包合物制备，将聚戊烯醇类脂软膏填料脲醇溶液的质量比例O. I I : I 3 : 10 40，在40 90°C搅拌回流，优选40 60°C，再进行冷却去杂，优选-20 -10°C结晶，抽滤，结晶物为聚戊烯醇类脂尿素包合物。在聚戊烯醇类脂纯化中，将聚戊烯醇类脂尿素包合结晶物装柱，用非极性溶剂进行洗脱，优选正己烷，洗脱体积为柱体积1-4倍，TLC检测，合并聚戊烯醇类脂洗脱组分，浓缩后加入质量比为I : 6 30无水丙酮，室温搅拌溶解；40 200目硅藻土，优选100 120目，与石英沙按质量比I I 10混合，得到混合助剂，混合助剂与聚戊烯醇类脂质量比为O. 5 20 100混合，在-30°C 0°C搅拌2 30小时，3000 20000转/分钟离心机过滤，清液回收有机溶剂，浓缩物为纯化聚戊烯醇类脂；本发明中采用TLC检测和HPLC检测聚戊烯醇及其加氢衍生物，TLC检测时碘蒸气显色。HPLC分析色谱条件为色谱柱采用Kromasi 1C18 0DS-1 (4. 6mmX 150mm, 5 μ m),流动相为异丙醇甲醇=I 1(V/V)，柱温25°C，流速lmL/min，检测器波长210nm。本发明专利采用HPLC、IR、NMR和MS表征聚戊烯醇及其加氢衍生物的结构。如图2为氢化产物与聚戊 烯醇的HPLC对比，氢化产物的转化率在25 % 65 %。图3为聚戊烯醇及其加氢衍生物的IR，氢化产物和聚戊烯醇的红外光谱基本一致经分析在3322cm-1和835cm_1为=C-H的伸缩和弯曲振动峰，2958CHT1和2860cm-1为CH3-和-CH2-伸缩振动峰，1660cm-1为C = C的伸缩振动。1450cm_1为CH3-的弯曲振动，1380cm-1为-CH2-的弯曲振动，lOOOcnT1为C-0-H伸缩振动。图4-5为聚戊烯醇及其加氢衍生物的1H-NMIL聚戊烯醇1H-NMR谱参照标准δ⑶Cl3 = 7. 26 (单峰)，经分析得δ
I.59 (tranS-CH3), I. 68 (ciS-CH3)，I. 74 ( a -CH3-Cis)，I. 99-2. 09 (-CH3-) ,4. 07(α -CH2OH)，
5.12 (-C = CH)。氢化产物的核磁氢谱δ在I. 25和I. 29多重峰为α单元-CH(CH3) -CH2上的亚甲基氢，δ在O. 85处多重峰为α单元上的次甲基氢-CH(CH3)-CH2，提示不对称氢化产生于聚戊烯醇α单元不饱和双键处。图6-7为聚戊烯醇及其加氢衍生物的13C-NMR15聚戊烯醇 13C-NMR谱参照标准 δ CDCl3 = 77.00 (三重峰)，δ 135. 56 ( a -ciS-CH3CH = ) ,134. 84134. 77 (trans-CH3CH = ) ,134. 71 (ciS-CH3CH = ) ,134. 42 (trans-C (CH3) = CH) ,123. 67 124. 53( = CH)、58. 51 (-CH2-O-C = 0) ,39. 23 (-CH2-)、31. 71 (-CH2-)、31. 49 (ciS-CH2C (CH3)=)、26. 14 (trans-(CH3)2C = CH-)、25· 90 (trans_CH2CH = )、25· 82 (cis_CH2CH =)、25. 18 (Cis-CH3C = )、22· 86 (-CH3)、17. 17 (trans-C (CH3) = CH) ,15. 48 (trans-CH3C =)。氢化产物的核磁碳谱经分析得δ在29. 71上对应的次甲基峰高变，δ在139. I处峰高减弱对应说明聚戊烯醇中(CI-Cis-CH3CH = )处发生氢化，提示不对称氢化产生于聚戊烯醇a单元不饱和双键处。本专利对聚戊烯醇加氢反应转化率的測定，采用HPLC面积归ー化法，从图2可以看出随着出峰时间推移聚戊烯醇峰和加氢衍生物峰分离效果较好，所以我们选择以第五个峰的峰面积做标准曲线，推导了峰面积和聚戊烯醇的线性关系，来标定聚戊烯醇的含量，从而推导出反应的转化率。聚戊烯醇的标准曲线如图9所示，求得线性回归方程y =
7.23664x+3. 8945，R2 = 0. 9992，在 5. I 25. 2 y g 范围内线性关系良好。本专利对聚戊烯醇加氢反应进行了优化，主要选取了反应压力、反应时间、反应温度以及催化剂的用量，聚戊烯醇与ニ氯甲烷-甲醇溶液质量体积比(g ml) I 20 100;加入催化剂，聚戊烯醇与催化剂质量比为80 200 1，反应压カ8 20MPa，反应时间为18 48h，反应温度10°C 50°C;反应结束后，过滤，真空浓缩，浓缩物为聚戊烯醇加氢衍生物。
本发明的有益效果表现为I.首次将聚戊烯醇类脂与填料和脲醇溶液经混合溶解和冷冻结晶，制备聚戊烯醇类脂尿素包合物，有效除去了色素、脂肪酸及其酷、极性含氧功能团，能有效提高聚戊烯醇类脂的纯度，再经无水丙酮去蜡，硅藻土与石英沙分离，得到80%以上聚戊烯醇类脂。与传统方法比较，此方法制备的聚戊烯醇类脂在皂化反应时需要的碱液減少50%以上，不仅环境友好，而且不皂化产物经柱分离得到95%聚戊烯醇。2.首次采用不对称加氢催化剂，如催化剂为(S) -Ru (OAc) 2 (BINAP)、Rh/PVP_Ti02、Ru(BINAP) (OAc)2,提取分离桦木醇型结构(to _(trans)2_ (cis)n-0H, n = 10 20)的聚戍烯醇，通过催化加氢反应，将聚戊烯醇分子结构中一个异戊烯基单元被氢饱和为异戊烷基单元,其中包括未端单元为异戍醇的多職醇结构,反应转化率最高65%。3.首次制备具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物，对于金黄色葡萄球菌(Sa.)、大肠杆菌(Ec.)、枯草芽孢菌和沙门氏菌具有抑制作用，对于清除超氧自由基和羟基自由基具有清除作用。
图I三种类型的聚戊烯醇的化学结构图2聚戊烯醇与氢化产物的HPLC(A :聚戊烯醇，B :氢化产物)图3聚戊烯醇与氢化产物的IR(A :聚戊烯醇，B :氢化产物)图4聚戊烯醇的核磁氢谱(1H-NMR)图5氢化产物的核磁氢谱(1H-NMR)图6聚戊烯醇的核磁碳谱(13C-NMR)图7氢化产物的核磁碳谱(13C-NMR)图8聚戊烯醇的标准曲线图9样品各洗脱组分的TLC谱10加氢衍生物对02_ 自由基的清除率图11加氢衍生物对 OH自由基清除率
具体实施例方式以下实施例为本发明的一些举例，不应被看做是对本发明的限定。实施例I聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法一种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法，由以下步骤组成第一步，聚戊烯醇类脂提取将富含聚戊烯醇类脂的新鲜植物叶子，如银杏叶、松针叶、桑叶中的一种，优选银杏叶，室温阴干，破碎至100目以下粉末，加入无水丙酮或Cl C3醇中任一种溶剂，优选丙酮；叶子与溶剂按质量比为I : 20混合，在室温浸泡10 72小时，优选24 48小时；或叶子与溶剂按质量比为I : 20混合后在10°C 80°C经微波提取或超声波提取10 60分钟，优选超声波，提取温度10°C 40°C，时间10 30分钟，重复提取两次，合并提取液，真空回收有机溶剂，浓缩物为聚戊烯醇类脂软膏；
第二步，脲醇溶液的制备将尿素放入无水甲醇中，在充氮条件下水浴加热至尿素全部溶解，其中尿素与无水甲醇的重量体积比为I : I 10，如I : 3、1 : 4、1 : 5、1 : 6、1:8，回流温度为40 90°C，优选40 60°C ;第三步，聚戊烯醇类脂尿素包合物制备在脲醇溶液中加入聚戊烯醇类脂软膏和填料，填料选择硅胶、活性炭、聚酰胺树脂、凹凸棒土、氧化铝、硅藻土中一种，优选硅胶、凹凸棒土、氧化铝。聚戊烯醇类脂软膏填料脲醇溶液的质量比例O. I I : I 3 10 40，在40 90°C搅拌回流，冷却至室温后，在-40 10°C结晶，优选-20 -10°C结晶，抽滤，结晶物为聚戊烯醇类脂尿素包合物。第四步，聚戊烯醇类脂纯化将聚戊烯醇类脂尿素包合结晶物装柱，用非极性溶剂进行洗脱，优选正己烷、石油醚，洗脱体积为柱体积1-4倍，TLC检测，合并聚戊烯醇类脂洗脱组分，浓缩后加入质量比为I : 6 30无水丙酮，优选I : 6 15室温搅拌溶解；40 200目硅藻土，与石英沙按质量比I : I 10混合，得到混合助剂，混合助剂与聚戊烯醇类脂质量比为O. 5 20 100混合，优选100 120目，在-30°C (TC搅拌2 30小时，3000 20000转/分钟离心机过滤，优选3000 10000转/分钟清液回收有机溶剂，浓缩物为纯化聚戊烯醇类脂；第五步，聚戊烯醇制备聚戊烯醇类脂加入到5% -40%氢氧化钠溶液中，聚戊烯醇类脂与氢氧化钠溶液质量比为I : 10 50，在30°C 90°C搅拌反应O. 5 3小时，再用正己烷等体积萃取反应液2-5次，合并萃取相，用等体积水反洗2 5次，有机相减压浓缩，浓缩物加入5-20倍硅胶混匀，再用2-6倍正己烷室温浸泡O. 5-2小时，过滤，滤液浓干，浓缩物为淡黄色聚戊烯醇油状物，聚戊烯醇含量大于95%。第六步，聚戊烯醇加氢衍生物制备将聚戊烯醇溶于二氯甲烷-甲醇溶液(体积比为8 I : I)中，聚戊烯醇与二氯甲烷-甲醇溶液质量体积比(g ml)l 20 100;加入催化剂，聚戊烯醇与催化剂质量比为80 200 1，反应压力8 20MPa，反应时间为18 48h，反应温度10°C 50°C ;反应结束后，过滤，真空浓缩，浓缩物为聚戊烯醇加氢衍生物。本实施例中采用不对称加氢催化剂，如催化剂为⑶-Ru (OAc) 2 (BINAP)、Rh/PVP-TiO2, Ru(BINAP) (OAc) 2，对聚戊烯醇加氢反应进行了优化，主要选取了反应压力、反应时间、反应温度以及催化剂的用量，氢化产物的转化率在25% 65%，最高达到65%。
本实施例中采用TLC检测和HPLC检测聚戊烯醇及其加氢衍生物，TLC检测时碘蒸气显色。HPLC分析色谱条件为色谱柱采用Kromasi 1C18 0DS-1 (4. 6mmX 150mm, 5 y m),流动相为异丙醇甲醇=I 1(V/V)，柱温25°C，流速lmL/min，检测器波长210nm。采用HPLC、IR、NMR和MS表征聚戊烯醇及其加氢衍生物的结构。结果如图2-9.实施例2聚戊烯醇加氢反应单因素试验I.反应时间的选择固定反应温度30で，溶剂ニ氯甲烷甲醇=2 I (V/V)，催化剂为
(S)-Ru(0Ac)2(BINAP)，聚戊烯醇与催化剂的质量比为100 1，H2压カlOMPa，反应时间分别为3h、6h、9h、ia、18h、24h、36h，反应过程中取上清液作HPLC检测，反应转化率分别为
6.8%、16%、22%、32%、41%、56%和58%。随着反应时间的增加，产率逐步提高，24h后基本稳定，因此优选反应时间为24h。2.催化剂用量的选择固定反应温度20°C，催化剂为Ru(BINAP) (OAc)2，溶剂ニ氯甲烷甲醇=3 I (V/V)，4压力12MPa，反应时间为24h，聚戊烯醇与催化剂的质量比分别取50 UlOO I、200 1,300 1,500 UlOOO 1，反应过程中取上清液作HPLC检测，反应转化率分别为48%、46 %、40 %、36 %、24%、15 %，随着催化剂用量的增加，产率逐步提高，当催化剂的用量达到100 I时转化率稳定，因此催化剂的用量优选100 I。3.反应压カ的选择固定反应温度40°C，催化剂为Rh/PVP-Ti02，溶剂ニ氯甲烷甲醇=5 : I (V/V)，聚戊烯醇与催化剂的质量比为100 1，反应时间为24し反应压カ分别为210^、410^、610^、8MPa、10MPa、12MPa、15MPa、20MPa，反应过程中取上清液作HPLC检测，反应转化率分别为6%、18%、32%、43%、52%、60%、65%、68%，随着反应压カ的增大转化率逐渐升高，当压カ达到12MPa时转化率升高变缓，2010MPa时达到最高68%。考虑生产安全性，反应压カ优选 10 15MPa.实施例3聚戊烯醇的纯化实验I.取桑叶1kg，破碎至40目粉末，加入无水丙酮20kg，在室温浸泡50小时，过滤，再加入15kg无水丙酮，在40°C超声波提取20分钟，合并提取液，真空回收有机溶剂，浓缩物为聚戊烯醇类脂软膏；2.筛选了硅胶、味精脱色用活性炭、聚酰胺树脂、凹凸棒土等四种不同种类的吸附载体，纯尿素以及尿素与吸附载体按质量比10 1、5 1、5 2、5 3、1 I等5种不同质量配比对聚戊烯醇类脂软膏的纯化进行单因素筛选，结果如表1-2。表I尿素硅胶不同配比的纯化结果
权利要求
1.一种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法，其特征在于由以下步骤组成 第一步，聚戊烯醇类脂提取将富含聚戊烯醇类脂的新鲜植物叶子，室温阴干，破碎至100目以下粉末，加入无水丙酮或Cl C3醇中任一种溶剂，叶子与溶剂按质量比为I : 20，在室温浸泡10 72小时，或在10°C 80°C经微波提取或超声波提取10 60分钟，重复提取两次，合并提取液，真空回收有机溶剂，浓缩物为聚戊烯醇类脂软膏； 第二步，脲醇溶液的制备将尿素放入无水甲醇中，在充氮条件下水浴加热至尿素全部溶解，其中尿素与无水甲醇的重量体积比为I : I 10,回流温度为40 90°C ； 第三步，聚戊烯醇类脂尿素包合物制备在脲醇溶液中加入聚戊烯醇类脂软膏和填料，聚戊烯醇类脂软膏填料脲醇溶液的质量比例O. I I : I 3 : 10 40，在40 90°C搅拌回流，冷却至室温后，在-40 10°C结晶，抽滤，结晶物为聚戊烯醇类脂尿素包合物； 第四步，聚戊烯醇类脂纯化将聚戊烯醇类脂尿素包合结晶物装柱，用非极性溶剂进行洗脱，洗脱体积为柱体积1-4倍，TLC检测，合并聚戊烯醇类脂洗脱组分，浓缩后加入质量比为I : 6 30无水丙酮,室温搅拌溶解；40 200目娃藻土与石英沙按质量比I : I 10混合，得到混合助剂，混合助剂与聚戊烯醇类脂质量比为O. 5 20 100混合，在-30°C (TC搅拌2 30小时，3000 20000转/分钟离心机过滤，清液回收有机溶剂，浓缩物为纯化聚戊烯醇类脂； 第五步，聚戊烯醇制备聚戊烯醇类脂加入到5% -40%氢氧化钠溶液中，聚戊烯醇类脂与氢氧化钠溶液质量比为I : 10 50，在30°C 90°C搅拌反应O. 5 3小时，再用正己烷等体积萃取反应液2-5次，合并萃取相，用等体积水反洗2 5次，有机相减压浓缩，浓缩物加入5-20倍硅胶混匀，再用2-6倍正己烷室温浸泡O. 5-2小时，过滤，滤液浓干，浓缩物为淡黄色聚戊烯醇油状物，聚戊烯醇含量大于95% ； 第六步，聚戊烯醇加氢衍生物制备 将聚戊烯醇溶于二氯甲烷-甲醇溶液(体积比为8 I : I)中，聚戊烯醇与二氯甲烷-甲醇溶液质量体积比(g ml) I 20 100 ;加入催化剂，聚戊烯醇与催化剂质量比为80 200 1，反应压力8 20MPa，反应时间为18 48h，反应温度10°C 50°C ;反应结束后，过滤，真空浓缩，浓缩物为聚戊烯醇加氢衍生物。
2.根据权利要求I所述一种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法，其特征在于聚戊烯醇及其加氢衍生物对于金黄色葡萄球菌(Sa.)、大肠杆菌(Ec.)、枯草芽孢菌和沙门氏菌具有抑制作用，对于清除超氧自由基和羟基自由基具有清除作用。
3.根据权利要求I所述一种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法，其特征在于聚戊烯醇来源于银杏叶、松针叶、桑叶中的一种，聚戊烯醇的结构为桦木醇型u-(trans)2-(cis) n_OH，其中η的范围为10 20。
4.根据权利要求I所述一种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法，其特征在于聚戊烯醇加氢衍生物是聚戊烯醇分子结构中一个异戊烯基单元被氢饱和为异戊烷基单元。
5.根据权利要求I所述一种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法，其特征在于第一步中Cl C3醇为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中任一种。
6.根据权利要求I所述ー种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法，其特征在于第三步中填料为硅胶、活性炭、聚酰胺树脂、凹凸棒土、氧化铝、硅藻土中ー种。
7.根据权利要求I所述ー种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法，其特征在于第六步中催化剂为(S)-Ru(OAc)2(BINAP)、Rh/PVP-Ti02、Ru(BINAP)(OAc)2中任ー种。
全文摘要
本发明公开一种具有抑菌和抗氧化活性的植物聚戊烯醇及其加氢衍生物制备方法，以银杏、松针和桑叶为原料，通过非极性溶剂提取聚戊烯醇类脂软膏，在脲醇溶液中和填料包合，结晶，制备聚戊烯醇类脂尿素包合物，经柱层析，纯化聚戊烯醇类脂。加入到5％-40％氢氧化钠溶液中皂化反应，制备含量大于95％聚戊烯醇。在二氯甲烷-甲醇溶液中加入催化剂，聚戊烯醇与催化剂质量比为80～200∶1，反应压力8～20MPa，反应时间为18～48h，反应温度10℃～50℃；反应结束后，过滤，真空浓缩，浓缩物为聚戊烯醇加氢衍生物。本发明制备的聚戊烯醇及其加氢衍生物对于金黄色葡萄球菌(Sa.)、大肠杆菌(Ec.)、枯草芽孢菌和沙门氏菌具有抑制作用，对于清除超氧自由基和羟基自由基具有清除作用。
文档编号C07C29/17GK102775276SQ20121026591
公开日2012年11月14日 申请日期2012年7月26日 优先权日2012年7月26日
发明者周彦, 王成章, 陶冉 申请人:中国林业科学研究院林产化学工业研究所