专利名称：从亚麻饼粕中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法
技术领域：
本发明涉及一种从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，属于生物活性物质开发应用领域。
背景技术：
亚麻籽已成为全球第七大油料作物和我国第四大油料作物，亚麻主要种植地区和国家包括加拿大、印度、中国、美国、阿根廷、北欧地区和一些独联体国家，其中加拿大的亚麻籽产量最高。我国亚麻主产区主要分布在华北、西北部地区，甘肃、内蒙、宁夏、河北等省的亚麻籽产量最高，约占全国总产量的75%，新疆、吉林、陕西、青海次之，西南地区有零星种植。近年来，亚麻籽产量在中国和美国略有增加，亚麻籽中生物活性成分逐渐被研究者发现和认识，食品工业界对亚麻籽的开发利用表现出越来越强的兴趣。其中亚麻木酚素就是 一个很重要的发现。亚麻木酚素是亚麻籽中最为重要的生物活性成分之一，是亚麻籽深加工和综合利用不可缺少的一部分。研究报道指出亚麻木酚素主要是SEC0(开环异落叶松树脂酚)，另还有四种含量远低于SECO的木酚素类物质(如罗汉松脂酚、异落叶松脂醇、落叶松脂醇、松脂醇)与SECO具有共同母体结构，狭义上常用SDG(开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷)或SECO代指亚麻木酚素。研究还发现，亚麻木酚素是动物木酚素(END、ENL等)的前体，人体肠道内细菌能将SDG (开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷)水解转化成SEC0，经过系列微生物的脱羟基和脱甲基作用或氧化作用使SECO转化成END或ENL。研究表明，亚麻木酚素是一种植物雌激素，可以一定程度地缓解绝经期症状，对一些癌症具有较好的抑制作用，在辅助治疗狼疮肾炎和糖尿病方面也发挥着有益作用；另外，亚麻木酚素还具有抗病毒，抗氧化的作用，预防骨质疏松，降血脂、预防动脉粥样硬化和冠心病等作用。目前，亚麻木酚素已成为开发功能性食品和食品配料的热点。目前，亚麻木酚素的提取方法主要有溶剂萃取，微波、超声波辅助提取，亚临界水提取法，超临界流体萃取法和酶法提取等。溶剂浸提法由于其操作简单、方便，提取温度低、品质好，使用最早，也最为广泛，容易规模化生产，但是SECO得率受到限制，亚临界水提取提取率较高，但条件苛刻，工业应用存在很多问题。酶法提取，成本较高，不利于规模化工业生产应用。本发明，在综合已有学者的研究和报道后，发现通过采用乙醇做溶剂，超声波辅助处理的方法可以有效提高亚麻木酚素的得率。
发明内容
本发明所要解决的技术问题发现了提高了亚麻木酚素的提取率的一种方法。提取耗时长、溶剂耗量大、提取量低、成本高等缺点，从而提供了一种新的亚麻木酚素的提取方法，改进了传统醇浸提法，在不增加提取成本的同时提高了亚麻木酚素提取产量，缩短了提取时间，减少了溶剂的使用量，为扩大亚麻木酚素的产业应用价值打下基础。为了达到上述目的，本发明提供了一种从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，其特征在于，包括以下步骤(I)将干燥的亚麻饼柏粉碎后，加入体积浓度为50-70%的乙醇溶液，密封浸泡0. 5-1. 5h后，室温下超声波预处理20-40min，然后继续搅拌浸提，3 4个小时后离心，得到沉淀物为亚麻木酚素粗提物，并保留上清液；(2)将步骤(I)得到的粗提物调节pH值至11. 5-12. 5，搅拌浸提I. 5-2. 5h，保持PH值不变，然后离心；步骤(I)得到的上清液pH值调至4. 0-4. 5 ；(3)将步骤(2)得到的上清液经过大孔树脂层析吸附；(4)层析柱用20%乙醇溶液洗脱，得到含亚麻木酚素的醇溶液，旋转蒸发仪浓缩，然后真空冷冻干燥，得到亚麻木酚素成品。优选地，所述步骤(I)中的亚麻饼柏事先经过干燥、粉碎处理。 优选地,所述步骤⑴中亚麻饼柏与乙醇溶液的质量体积比为lg/5mL lg/10mL。优选地，所述步骤(I)中超声波预处理的工艺参数为超声波功率为300W，时间为20mino优选地，所述步骤⑴中浸提的温度为50°C 55°C。优选地,所述步骤(I)中离心的转速为1500rmp,时间为5 lOmin。优选地，所述步骤⑵中浸提的温度为50°C 55°C。优选地,所述步骤(2)中离心的转速为3000rmp,时间为10 15min。优选地，所述步骤(3)中大孔树脂层析吸附过程的温度为室温，洗脱速度为
0.5cm/min。优选地，所述步骤(4)中浓缩的条件为水浴温度50_60°C，采用真空旋转蒸发仪，浓缩至洗脱液中固形物重量含量达到至少30%。本发明还提供了一种由上述工艺提取得到的亚麻木酚素。本发明使用的试剂、原料和设备皆市售可得，且所用化学试剂纯度至少均为食品级。本发明的积极进步效果在于(I)本发明采用的亚麻饼柏是榨油工业的副产物，有效利用了资源，变废为宝。(2)本发明采用70%乙醇浸提，超声波辅助处理来破碎亚麻细胞壁，从而有助于亚麻木酚素的释放，提高了亚麻木酚素的产率。(3)本发明工艺操作简单，流程方便易操作，条件要求不高，而且得到的亚麻木酚素相对纯度比较高。
图I为本发明提供的从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法的工艺流程图。
具体实施例方式为使本发明更明显易懂，兹以优选实施例，并配合附图作详细说明如下。实施例I(I)将干燥的亚麻饼柏粉碎后，过100目筛，称取100g，加入适量70%乙醇溶液500ml，密封浸泡I. 5h后，置于超声波设备之中，功率设置为300W，温度为室温，处理20min，然后继续搅拌浸提，3个小时后，1500rmp离心lOmin，去沉淀，得到上清液；(2)向上一步得到的上清液中加入NaOH溶液调节pH = 12，搅拌浸提2. 5h，此过程中保持pH = 12不变,3000rmp离心IOmin,上清液用HCl溶液中和，pH调至4. 0 ；(3)将上一步得到的粗提物经过AB-8型大孔树脂层析吸附，流速控制在0. 5cm/min ；(4)用20%乙醇溶液洗脱，得到含亚麻木酚素的醇溶液，60°C水浴条件下，真空旋转蒸发仪浓缩，得到的浓缩产物进一步真空冷冻干燥，即得到亚麻木酚素成品。本实施例得到的亚麻木酚素提取率为15. 51mg/g，亚麻木酚素成品的纯度> 85%。实施例2 (I)将干燥的亚麻饼柏粉碎后，过100目筛，称取100g，加入适量60%乙醇溶液800ml，密封浸泡Ih后，置于超声波设备之中，功率设置为300W，温度为室温，处理30min，然后继续搅拌浸提，3. 5个小时后，1500rmp离心5min，去沉淀，得到上清液；(2)向上一步得到的上清液中加入NaOH溶液调节pH = 12. 5，搅拌浸提2h，此过程中保持pH = 12. 5不变,3000rmp离心IOmin,上清液用HCl溶液中和，pH调至4. 2 ；(3)将上一步得到的粗提物经过AB-8大孔树脂层析吸附，流速控制在0. 5cm/min ；(4)用20%乙醇溶液洗脱，得到含亚麻木酚素的醇溶液，55°C水浴条件下，真空旋转蒸发仪浓缩，得到的浓缩产物进一步真空冷冻干燥，即得到亚麻木酚素成品。本实施例得到的亚麻木酚素提取率为15. 28mg/g，亚麻木酚素成品的纯度> 85%。实施例3(I)将干燥的亚麻饼柏粉碎后，过100目筛，称取100g，加入适量50%乙醇溶液1000ml，密封浸泡0. 5h后，置于超声波设备之中，功率设置为300W，温度为室温，处理40min,然后继续搅拌浸提,4个小时后，1500rmp离心5min,去沉淀,得到上清液；(2)向上一步得到的上清液中加入NaOH溶液调节pH = 11. 5，搅拌浸提I. 5h，此过程中保持PH = 11. 5不变，3000rmp离心IOmin,上清液用HCl溶液中和，pH调至4. 5 ；(3)将上一步得到的粗提物经过AB-8大孔树脂层析吸附，流速控制在0. 5cm/min ；(4)用20%乙醇溶液洗脱，得到含亚麻木酚素的醇溶液，50°C水浴条件下，真空旋转蒸发仪浓缩，得到的浓缩产物进一步真空冷冻干燥，即得到亚麻木酚素成品。本实施例得到的亚麻木酚素提取率为15. 34mg/g，亚麻木酚素成品的纯度> 85%。
权利要求
1.一种从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)将干燥的亚麻饼柏粉碎后，加入体积浓度为50-70%乙醇溶液，密封浸泡0.5-1. 5h后，室温下超声波预处理20-40min，然后继续搅拌浸提，3 4个小时后离心，得到沉淀物为亚麻木酚素粗提物，并保留上清液； (2)将步骤(I)得到的粗提物调节pH值至11.5-12. 5，搅拌浸提I. 5-2. 5h，保持pH值不变，然后离心；步骤(I)得到的上清液PH值调至4. 0-4. 5 ； (3)将步骤(2)得到的上清液经过大孔树脂层析吸附； (4)层析柱用20%乙醇溶液洗脱，得到含亚麻木酚素的醇溶液，旋转蒸发仪浓缩，然后真空冷冻干燥，得到亚麻木酚素成品。
2.如权利要求I所述的从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，其特征在于，所述步骤(I)中的亚麻饼柏事先经过干燥、粉碎处理。
3.如权利要求I所述的从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，其特征在于，所述步骤⑴中亚麻饼柏与乙醇溶液的质量体积比为lg/mL lg/10mL。
4.如权利要求I所述的从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，其特征在于，所述步骤(I)中超声波预处理的工艺参数为超声波功率为300W，时间为20min。
5.如权利要求I所述的从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，其特征在于，所述步骤⑴中浸提的温度为50°C 55°C。
6.如权利要求I所述的从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，其特征在于，所述步骤(I)中离心的转速为1500rmp,时间为5 lOmin。
7.如权利要求I所述的从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，其特征在于，所述步骤⑵中浸提的温度为50°C 55°C。
8.如权利要求I所述的从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，其特征在于，所述步骤(2)中离心的转速为3000rmp，时间为10 15min。
9.如权利要求I所述的从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，其特征在于，所述步骤(3)中大孔树脂层析吸附过程的温度为室温，洗脱速度为0.5cm/min。
10.如权利要求I所述的从亚麻饼柏中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法，其特征在于，所述步骤(4)中浓缩的条件为水浴温度50-60°C，采用真空旋转蒸发仪，浓缩至洗脱液中固形物重量含量达到至少30%。
全文摘要
本发明公开了一种从亚麻饼粕中提取、分离和纯化亚麻木酚素的方法将干燥的亚麻饼粕粉碎后，加入乙醇溶液，密封浸泡0.5-1.5h，超声波辅助下处理20min；然后搅拌浸提后离心，得到亚麻木酚素粗提物；将亚麻木酚素粗提物pH值调至11.5-12.5，搅拌浸提1.5-2.5h，离心去沉淀，上清液pH调至4.0-4.5；将得到的上清液经过大孔树脂层析吸附；用20％乙醇溶液洗脱，得到含亚麻木酚素的醇溶液，用旋转蒸发仪进行浓缩，冷冻干燥，得到亚麻木酚素成品。本发明还公开了由该方法得到的亚麻木酚素。本发明的提取工艺简单，对生产设备要求低，提取效率高，明显优于传统溶剂提取法。
文档编号C07H15/18GK102796148SQ201210339318
公开日2012年11月28日 申请日期2012年9月13日 优先权日2012年9月13日
发明者赵肖, 刘国庆, 胡卫华, 钱晓勇 申请人:上海红马饲料有限公司