综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法

专利名称：综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法
技术领域：
本发明涉及植物提取物技术领域，特别涉及一种综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法。
背景技术：
油茶是我国最古老的木本食用植物油之一，也是世界四大木本油料之一。因其种子可榨油(茶油)供食用，故名。茶油中富含油酸、亚油酸、亚麻酸等不饱和脂肪酸，含量高达93%。长期食用茶油可以降低血清中的胆固醇含量，有效预防心血管疾病，堪与世界上最流 行的食用油-橄榄油相媲美。油茶籽经榨油后的残渣称油茶饼柏，茶籽饼柏一般被作为燃料，或者简单处理后作为饲料使用。但研究表明，油茶饼柏中含有各种有效化学成分，如脂肪、茶皂素、黄酮、糖类、单宁、咖啡碱、和蛋白质等，这些成份都具有很高的应用价值。茶皂素，也称为油茶皂素、茶皂甙。在油茶饼柏中，油茶皂素含量较大，约为10%-14%，具有很高的研究和应用价值。油茶皂素是一种五环三帖类物质，具有亲水性的糖体和疏水性的皂苷元，所以它是一种天然非离子型表面活性剂，具有乳化、分散、湿润、发泡等表面活性作用以及抗渗、消炎、镇痛等药理功能，并且有灭菌杀虫和刺激某些植物生长的功能，因而广泛应用于日化、农药、食品及医药等领域。此外，茶皂素易酶降解为无毒的化合物排放，不会污染环境，因此是一种符合绿色环保要求的天然表面活性剂。黄酮类化合物也是油茶籽柏的重要有效成份之一。黄酮类化合物在抗氧化抗衰老、抗癌防癌、预防心血管疾病、调节免疫、抗菌杀菌等方面均有显著效果引人瞩目，是目前最热门的天然抗氧化剂之一，已经在越来越多的领域被广泛实验，如药品、食品添加剂、化妆品等。油茶籽柏中的绝大部分黄酮类化合物都以糖甙的形式存在，少数以游离甙元形式存在。两者的溶解性差异较大，可分别提取。从天然产物中分离出的多糖的研究是近年来天然物有机化学研究的热点之一。大量药理和临床实验证明，从天然产物中分离出的多糖与免疫功能的调节、细胞与细胞的识另O、细胞间物质的传输、癌症的诊断与治疗等都有密切关系，可作为一类新型的保健食品、药品原料和功能性食品添加剂。有关从油茶饼柏中提取有效成分的方法，现有公开的专利较多地涉及茶皂素的提取。如专利CN101863950A公开了一种从油茶饼柏中提取茶皂素的方法，该方法包括粉碎、除酶、浸提、多级过滤除杂质、多级膜分离纯化浓缩、脱色等步骤，但未提及其它有效成分的提取。专利CN1068360A公开了一种用醇一水溶液抽提后，经脱色、脱臭、蒸干工艺制得油茶籽皂素的方法，但该技术具有工艺复杂且所得茶皂素纯度低的缺点，并且该方法并未涉及其它有效成分的提取。也有文献报道提出了一些对油茶饼柏中少量几种成分综合提取利用的方法，如专利CN86106634A公开了一种用混合溶剂提取油茶饼柏中茶油、皂甙的方法，但没有对其他几种含量较高的有效成分进行提取。专利CN 101899070A公开了一种分离油茶饼柏中黄酮苷的方法，专利CN102617701A公开了一种油茶饼柏蛋白的提取方法，但这些文献中均未提及从同一原料的同一工艺流程中，获得多种有效成分的方法，由于提取一种有效成分时会造成另一种有效成分的损失，因此目前这类提取方法不多见。

发明内容
本发明的目的是针对目前缺乏有效地在同一工艺流程中从油茶饼柏中提取多种有效成分的方法的问题，提供一种从油茶饼柏中综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，该方法有效避免了在提取一种有效成分时会造成另一种有效成分损失的问题，获得了较好的提取效果。本发明的目的可以通过以下技术方案来实现一种综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，包括以下步骤
(I)用低极性溶剂提取干燥油茶饼柏，得油茶饼柏I和低极性溶剂提取液，浓缩蒸除低极性溶剂后得到茶油；(2)用乙酸乙酯对油茶饼柏I进行提取，得油茶饼柏II和乙酸乙酯提取液，浓缩乙酸乙酯提取液，冷却结晶，过滤后得到黄酮甙类化合物；(3)用乙醇-水溶液对油茶饼柏II进行提取，得油茶饼柏III和乙醇-水溶液提取液，浓缩蒸除乙醇-水溶液提取液中的乙醇后得剩余水相I，用乙酸乙酯对剩余水相I进行萃取后得乙酸乙酯相和剩余水相II，浓缩乙酸乙酯相后冷却结晶，过滤后得到黄酮甙元;(4)对剩余水相II进行脱色，用正丁醇对脱色后的剩余水相II进行萃取，浓缩正丁醇萃取液后冷却，向冷却后的正丁醇浓缩液中加入茶皂素沉淀剂，静置结晶，过滤后得到茶
皂素；(5)用水对油茶饼柏III进行提取，将水提取液浓缩后冷却，向冷却后的水浓缩液中加入多糖沉淀剂，静置析出沉淀，过滤后得到茶多糖，其中所述茶皂素沉淀剂为乙醚、丙酮中的一种或两种混合；所述多糖沉淀剂为C2_4醇类溶剂、c3_5酮类溶剂中的一种或几种混合。本发明结合油茶饼柏中各类有效成分的理化性质，依次采用低极性溶剂、乙酸乙酯、乙醇-水溶液和水按上述步骤进行提纯，可依次得到茶油、黄酮甙类化合物、黄酮甙元、茶皂素和茶多糖五种有效成分。优选地，所述多糖沉淀剂为乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、正戊醇、丙酮、丁酮中的一种或几种混合，更优选为丙酮。优选地，所述低极性溶剂为石油醚、正戊烷、正己烷、环己烷、超临界CO2中的一种或几种混合。在提取一种有效成分时，为了有效地降低另一种有效成分的损失，本发明优选地，所述低极性溶剂、步骤(2)中的乙酸乙酯、乙醇-水溶液和步骤(5)中水与油茶饼柏的质量比均为2:1 20:1。优选地，步骤(I)、步骤(2)、步骤(3)和步骤(5)中的提取方法为索氏提取或多次浸提的方法。优选地，在所述乙醇-水溶液中，乙醇的质量百分比为50% 85%，更优选为70%。
为了降低用乙酸乙酯提取黄酮甙元时对茶皂素含量的影响，本发明优选地，在步骤(3)中，所述乙酸乙酯与剩余水相I的体积比为O. 5:1 5:1，乙酸乙酯的萃取次数为I 5次。优选地，在步骤(4)中，所述正丁醇与脱色后的剩余水相II的体积比为O. 5:1 5:1，正丁醇的萃取次数为I 5次。优选地，所述脱色剂选自质量百分含量为30%的H2O2水溶液、活性炭、硅藻土、白土、高岭土中的一种或几种，所述脱色剂的质量为剩余水相II质量的5% 20%。优选地，所述茶皂素沉淀剂与所述正丁醇浓缩液的质量比为1:1 10:1，所述多糖沉淀剂与所述水浓缩液的质量比为1:1 10:1。优选地，所述浓缩方法为常压蒸馏法、减压蒸馏法或薄膜蒸馏法。本发明与现有技术相比具有以下优点 本发明结合了油茶饼柏中各类有效成分的理化性质，依次采用上述四类溶剂，按照所述步骤，实现了在同一工艺流程中，综合提取得到油茶饼柏中的五种有效成分，本发明的方法具有步骤少，使用溶剂的毒性小，提取效果好的优点。
具体实施例方式本发明所使用的索氏提取或多次浸提的方法，以及浓缩方法均按照本领域常规的实验操作步骤进行。下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例I一种综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，包括以下步骤(I)称取干燥油茶饼柏200g，用超临界CO2进行提取I次，得199. 59g油茶饼柏I和超临界CO2提取液，除去提取液后得到茶油O. 41g。(2)取油茶饼柏I 10g，用80ml乙酸乙酯进行索氏提取，提取时间为6小时，得油茶饼柏II 9. 93g和乙酸乙酯提取液，减压浓缩乙酸乙酯提取液、冷却结晶，过滤后得到黄酮甙类化合物O. 07g。(3)用80ml 70%乙醇-水溶液对上述油茶饼柏II进行索氏提取，提取时间为6小时，得油茶饼柏III 9. 91g和乙醇-水溶液提取液，减压蒸除提取液中乙醇后得20ml剩余水相I，用20ml乙酸乙酯对剩余水相I萃取3次后得乙酸乙酯相和20ml剩余水相II，减压浓缩乙酸乙酯相，冷却结晶，过滤得黄酮甙元O. 02g。(4)上述剩余水相II用2ml含30%H202的水溶液脱色后，用20ml正丁醇萃取3次，减压浓缩正丁醇萃取液后冷却，向所得5ml正丁醇浓缩液中加入20ml丙酮，静置结晶，过滤得到纯度为95%的茶皂素O. 87g。(5)用80ml的蒸馏水对上述油茶饼柏III进行索氏提取，提取时间为5小时，将水提取液减压浓缩至5ml后冷却，向冷却后的水浓缩液中加入50ml95%的乙醇，静置24小时后析出沉淀，过滤得到茶多糖O. 38g。
实施例2一种综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，包括以下步骤(I)称取干燥油茶饼柏20g，用150ml石油醚浸提3次，每次提取时间为2小时，得19. 24g油茶饼柏I和石油醚提取液，减压浓缩石油醚提取液后得茶油O. 76g。(2)用150ml乙酸乙酯对上述油茶饼柏I浸提3次，每次提取时间为2小时，得19. 09g油茶饼柏II和乙酸乙酯提取液，减压浓缩乙酸乙酯提取液、冷却结晶，过滤后得到黄酮甙类化合物O. 15g。(3)用150ml 70%乙醇-水溶液对上述油茶饼柏II浸提3次，每次提取时间为2小时，得19. 04g油茶饼柏III和乙醇-水溶液提取液，减压蒸除提取液中乙醇后得40ml剩余水相I，用40ml乙酸乙酯对剩余水相I萃取2次后得乙酸乙酯相和40ml剩余水相II，减压浓缩乙酸乙酯相，冷却结晶，过滤得黄酮甙元O. 04g。
(4)上述剩余水相II用2g活性炭脱色后，用40ml正丁醇萃取2次，减压浓缩正丁醇萃取液后冷却，向所得IOml正丁醇浓缩液中加入40ml丙酮，静置结晶，过滤得到纯度为95%的茶皂素I. 57g。(5)用150ml的蒸馏水对上述油茶饼柏III浸提3次，每次提取时间为2小时，将水提取液减压浓缩至8ml后冷却，向冷却后的水浓缩液中加入60ml95%的乙醇，静置24小时后析出沉淀，过滤得茶多糖O. 79g。以上所述，仅为本发明较佳具体实施方式
，但本发明的保护范围并不局限与此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)用低极性溶剂提取干燥油茶饼柏，得油茶饼柏I和低极性溶剂提取液，浓缩蒸除低极性溶剂后得到茶油； (2)用乙酸乙酯对油茶饼柏I进行提取，得油茶饼柏II和乙酸乙酯提取液，浓缩乙酸乙酯提取液，冷却结晶，过滤后得到黄酮甙类化合物； (3)用乙醇-水溶液对油茶饼柏II进行提取，得油茶饼柏III和乙醇-水溶液提取液，浓缩蒸除乙醇-水溶液提取液中的乙醇后得剩余水相I，用乙酸乙酯对剩余水相I进行萃取后得乙酸乙酯相和剩余水相II，浓缩乙酸乙酯相后冷却结晶，过滤后得到黄酮甙元； (4)对剩余水相II进行脱色，用正丁醇对脱色后的剩余水相II进行萃取，浓缩正丁醇萃取液后冷却，向冷却后的正丁醇浓缩液中加入茶皂素沉淀剂，静置结晶，过滤后得到茶皂素； (5)用水对油茶饼柏III进行提取，将水提取液浓缩后冷却，向冷却后的水浓缩液中加入多糖沉淀剂，静置析出沉淀，过滤后得到茶多糖， 其中所述茶皂素沉淀剂为乙醚、丙酮中的一种或两种混合；所述多糖沉淀剂为C2_4醇类溶剂、C3_5酮类溶剂中的一种或几种混合。
2.如权利要求I所述的综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，其特征在于，所述多糖沉淀剂为乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、正戊醇、丙酮、丁酮中的一种或几种混合。
3.如权利要求I所述的综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，其特征在于，所述低极性溶剂为石油醚、正戊烷、正己烷、环己烷、超临界CO2中的一种或几种混合。
4.如权利要求I所述的综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，其特征在于，所述低极性溶剂、步骤(2)中的乙酸乙酯、乙醇-水溶液和步骤(5)中的水与油茶饼柏的质量比均为2:1 20:1。
5.如权利要求I所述的综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，其特征在于，步骤(I)、步骤(2)、步骤(3)和步骤(5)中的提取方法为索氏提取或多次浸提的方法。
6.如权利要求I所述的综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，其特征在于，在所述乙醇-水溶液中，乙醇的质量百分比为50% 85%。
7.如权利要求I所述的综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述乙酸乙酯与剩余水相I的体积比为O. 5:1 5:1，乙酸乙酯的萃取次数为I 5次；在步骤(4)中，所述正丁醇与脱色后的剩余水相II的体积比为O. 5:1 5:1，正丁醇的萃取次数为I 5次。
8.如权利要求I所述的综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，其特征在于，所述脱色剂选自质量百分含量为30%的H2O2水溶液、活性炭、硅藻土、白土、高岭土中的一种或几种，所述脱色剂的质量为剩余水相II质量的5% 20%。
9.如权利要求I所述的综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，其特征在于，所述茶皂素沉淀剂与所述正丁醇浓缩液的质量比为1:1 10:1，所述多糖沉淀剂与所述水浓缩液的质量比为1:1 10:1。
10.如权利要求I所述的综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，其特征在于， 所述浓缩方法为常压蒸馏法、减压蒸馏法或薄膜蒸馏法。
全文摘要
本发明提供了一种综合提取茶油、黄酮类化合物、茶皂素和茶多糖的方法，包括以下步骤，先用低极性溶剂提取干燥油茶饼粕中的茶油，再依次用乙酸乙酯、乙醇-水溶液和水依次对油茶饼粕进行提取，分别得到黄酮甙类化合物、茶皂素和茶多糖。本发明实现了在同一工艺流程中，综合提取得到油茶饼粕中的五种有效成分，且本方法具有步骤少，使用溶剂的毒性小，提取效果好的优点。
文档编号C07H15/256GK102925292SQ201210401720
公开日2013年2月13日 申请日期2012年10月19日 优先权日2012年10月19日
发明者伊国群, 孟庆华 申请人:伊国群