专利名称：一种罗氟司特原料的制备方法和检测方法
技术领域：
本发明涉及一种罗氟司特原料的制备方法和检测方法，属于药物化学技术领域。
背景技术：
慢性阻塞性肺病(chronicobstructive puLmonary diseases 简称 C0PD)是一种具有气流受限特征的可以预防和治疗的疾病，气流受限不完全可逆、呈进行性发展，与肺部对香烟烟雾等有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关。COPD主要累及肺脏，但也可引起全身(或称肺外)的不良效应。慢性阻塞性肺病还常与心力衰竭和代谢综合征等密切相关，这些慢性共患疾病的存在可能会进一步加重慢性阻塞性肺病的临床表现。作为一种气道和肺部的慢性炎症性疾病，慢性阻塞性肺病已成为全球常见疾病和致人死亡的主要病因之一。
罗氟司特为磷酸二酯酶4抑制剂，用于辅助支气管扩张剂维持治疗成人与慢性支气管炎相关且有频繁病症恶化史的重度COPD患者，以降低COPD恶化的风险。罗氟司特的作用机制为通过抑制肺部细胞内的PDE4，防止CAMP水解，从而阻断炎症反应信号传递，减少炎症介质的释放，进而抑制如COPD和哮喘等呼吸道疾病对肺组织造成的损伤，起到抗炎作用。罗氟司特原研药是由Nycomed公司开发、以期用于治疗哮喘和慢性阻塞性肺病的一个新型口服药物，2010年7月已在欧盟获准用于辅助支气管扩张剂维持治疗重度慢性阻塞性肺病(COPD)患者，在欧盟国家，其商品名为Daxas ;2011年2月28日，美国FDA批准其用于降低伴慢性支气管炎和有急性加重史的严重CCffD患者的症状恶化风险，在美国的商品名为DaLiresp ;原研药上市的剂型为片剂,规格为500 y g,推荐用法用量为每天一次,每次一片(500ii g)。专利公开号为“CN1126468A”、申请号为“94192659. I”的专利文件中公开了以下技术内容在合成罗氟司特时，以四氢呋喃为溶剂，NaH做碱来制备中间体2，再与中间体I缩合得到罗氟司特。而实验过程中发现用NaH做碱制备中间体2时有大量氢气产生，不易控制，同时精制产品溶于溶剂时有乳光产生，可能是NaH中的杂质带来。此外，目前对罗氟司特原料还没有一套严格可靠的质量检测标准。如果没有严格的质量标准，得到的产品不能确保其质量，结果必将影响该药物的临床疗效；所以为提高以罗氟司特为原料制成的药物制剂的治疗作用，确保用药的安全、有效及产品质量的稳定，制定一个严格可靠的质量标准成为保证药品质量的基本要求。随着现代仪器分析技术的发展，高效液相色谱法等分析方法在药品的质量控制中得到了越来越广泛的应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种罗氟司特原料的制备方法和检测方法。本发明针对现有技术的不足，对罗氟司特原料的制备工艺进行了优化，使其对治疗COPD等疾病的疗效更为显著，并建立了系统的、完整的、有效的成分鉴别和含量测定方法，可有效控制该药品的质量，从而确保其临床疗效。以齐墩果酸为原料合成I a，2 a - 二羟基齐墩果酸，并对其进行了 CCL4所致肝细胞损伤的保护活性筛选，发现该化合物及其盐对四氯化碳诱导体外肝细胞损伤和体内肝损伤具有很好的保护作用，对四氯化碳诱导小鼠肝损伤有很好的保护作用，可应用于保肝药物的制备中。本发明的技术方案一种罗氟司特原料的制备方法，取3-环丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酸SM-1、氯化亚砜、二甲基甲酰胺和甲苯混合，发生酰氯化反应得中间体1，再取3，5- 二氯-4-氨基吡啶SM-2、四氢呋喃和叔丁醇钾混合，发生成盐反应得中间体2的四氢呋喃溶液，后取中间体I、中间体2和四氢呋喃混合，发生酰胺化反应得罗氟司特粗品，对罗氟司特粗品进行精制即得；其反应路线如下
权利要求
1.一种罗氟司特原料的制备方法，其特征在于取3-环丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酸SM-1、氯化亚砜、二甲基甲酰胺和甲苯混合，发生酰氯化反应得中间体1，再取3，5_ 二氯-4-氨基吡啶SM-2、四氢呋喃和叔丁醇钾混合，发生成盐反应得中间体2的四氢呋喃溶液，后取中间体I、中间体2和四氢呋喃混合，发生酰胺化反应得罗氟司特粗品，对罗氟司特粗品进行精制即得；其反应路线如下
2.根据权利要求I所述的一种罗氟司特原料的制备方法，其特征在于，由中间体I和中间体2制备罗氟司特粗品的具体过程为取中间体I溶于350mL四氢呋喃，将中间体I的四氢呋喃溶液滴入到中间体2的四氢呋喃反应液中，同时控制反应液温度O 10°C，Ih滴完，滴完后，于O I (TC保温反应I. 5h，再于O 15°C加入IN盐酸350mL，加完水相pH=2 3，分出有机相，水相用乙酸乙酯洗涤，合并有机相，先用饱和NaHCO3水溶液洗涤，再用水洗涤，有机相减压蒸干，得到湿粗品，将湿粗品放入干燥箱中于60 65°C干燥2h，得罗氟司特粗品 50g。
3.根据权利要求I或2所述的一种罗氟司特原料的制备方法，其特征在于，对罗氟司特粗品进行精制的具体过程为取罗氟司特粗品50g、乙酸乙酯190mL搅拌至固体溶解，先升温到回流，再保温加热回流15min，室温下静置析晶5h，抽滤，沉淀用冷乙酸乙酯洗涤两次，将滤饼均匀地铺于不锈钢方盘中，放入干燥箱中，于60 65°C干燥2h，得到罗氟司特精制产品40g。
4.根据权利要求I或2所述的一种罗氟司特原料的制备方法，其特征在于，由化合物SM-I制备中间体I的具体过程为取3-环丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酸35g、氯化亚砜39mL、二甲基甲酰胺ImL、甲苯350mL，搅拌使固体溶解，升温至80±5°C，再于80±5°C保温反应3h，当室温自然冷却至50°C时，将反应液真空减压蒸干溶剂，得到40g中间体I。
5.根据权利要求I或2所述的一种罗氟司特原料的制备方法，其特征在于，由化合物SM-2制备中间体2的具体过程为取四氢呋喃350mL、3，5- 二氯_4_氨基吡啶48. 9g搅拌至固体溶解，分三批加入叔丁醇钾33. 5g，同时控制反应液温度在10°C以下，叔丁醇钾加入完毕后，再于O 10°C保温反应20min,得到中间体2的四氢呋喃溶液。
6.如权利要求1-5中任一项所述的罗氟司特原料的检测方法，其特征在于所述检测方法包括性状、鉴别、检查和含量测定项目；其中鉴别是对罗氟司特进行鉴别；检查是对有关物质、有机残留溶剂、水分、炽灼残渣和重金属进行检查；含量测定是对罗氟司特含量进行测定。
7.根据权利要求6所述的罗氟司特原料的检测方法，其特征在于，对罗氟司特的具体鉴别方法为 (1)有机氟鉴别取本原料药7mg，参照《中国药典》2010版二部附录附录YDC的氧瓶燃烧法进行检查，以水20mL与O. 01moL/L氢氧化钠溶液6. 5mL为吸收液，待燃烧完毕后，充分振摇；取吸收液2mL，加茜素氟蓝试液O. 5mL，再加含12%醋酸钠的稀醋酸溶液O. 2mL，用水稀释至4mL，加硝酸亚铈试液O. 5mL，即显蓝紫色； (2)IR鉴别采用溴化钾压片，本原料药的红外光吸收图谱与对照品图谱一致。
8.根据权利要求6或7所述的罗氟司特原料的检测方法，其特征在于，具体检查方法为 (I)有关物质 色谱条件与系统适用性试验以pH 3. 5的O. 02M KH2PO4 CH3CN=42 :58为流动相，色谱柱为 ALLtimaTM, C18, 250X4. 6mm，5 μ m，柱温为 30。C，检测波长为 215nm，流速为 I. OmL/min，进样体积为10 μ L，运行时间为30min，数据采集时间为30min ;罗氟司特峰拖尾因子不得超过2. O,罗氟司特峰柱效不低于5000，罗氟司特峰与杂质C分离度不低于I. 5 ； 测定法精密称取罗氟司特工作对照品、罗氟司特杂质对照品A、杂质对照品B、杂质对照品C和杂质对照品D各IOmg于同一 IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释到刻度，摇匀，过滤，得100 μ g/mL的对照贮备液，吸取I. OmL对照贮备液于IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释到刻度，摇匀，过滤，得含罗氟司特、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D各I. Oyg/mL的溶液，作为对照品溶液；系统适用性溶液同对照品溶液；称取样品25mg置50mL容量瓶中，加40mL乙腈，超声lOmin，不时摇散，再用乙腈稀释到刻度，摇匀，过滤，即得O. 5mg/mL的样品溶液；进样品溶剂乙腈至系统稳定后，进样系统适用性溶液，使所得峰面积RSD不得超过5. 0%，取以上对照溶液10 μ L注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰高为满量程的20%，再取样品溶液10 μ L，注入液相色谱仪；按外标法计算，计算公式如下 (a)已知杂质用已知杂质对照峰面积计算
9.根据权利要求8所述的罗氟司特原料的检测方法，其特征在于，对罗氟司特含量进行测定的方法为 采用HPLC法测定罗氟司特的含量； 色谱条件与系统适用性试验:以pH 3. O的O. 03M KH2PO4 CH3CN=30 :70为流动相，色谱柱为ALLtimaTM，C18，250X4. 6_，5 μ m，柱温为30° C，流速为I. OmL/min，检测波长为220nm，进样体积为20yL，运行时间为12min，数据采集时间为数据采集为12min，罗氟司特峰拖尾因子不得超过2. O,罗氟司特峰柱效不低于5000，罗氟司特含量不得少于98. 5% ；测定法精密称取罗氟司特工作对照品25mg于一 50mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释到刻度，摇匀，过滤，即得500 μ g/mL的对照贮备液，吸取5. OmL对照贮备液于50mL容量瓶中，用50%乙腈稀释到刻度，摇匀，过滤，作为对照品溶液；系统适用性溶液同对照品溶液；称取样品25mg置50mL容量瓶中，加40mL50%乙腈，超声lOmin，不时摇散，再用样品溶剂稀释到刻度，摇勻，过滤，即得500 μ g/mL的样品贮备液，吸取5. OmL样品贮备液于50mL容量瓶中，用50%乙腈稀释到刻度，摇匀，过滤，作为样品溶液；进样品溶剂乙腈至系统稳定后进样系统适用性溶液，使所得峰面积RSD不得超过5. 0%，再取以上对照溶液10 μ L注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰高约为满量程的20% ;再取上述样品溶液10 μ L，注入
10.根据权利要求6所述的罗氟司特原料的检测方法，其特征在于，所述的检测方法包括 (一)性状本原料药为白色至类白色粉末； (二)鉴别 (1)有机氟鉴别取本原料药7mg，参照《中国药典》2010版二部附录附录YDC的氧瓶燃烧法进行检查，以水20mL与O. OlmoL/L氢氧化钠溶液6. 5mL为吸收液，待燃烧完毕后，充分振摇；取吸收液2mL，加茜素氟蓝试液O. 5mL,再加含12%醋酸钠的稀醋酸溶液O. 2mL,用水稀释至4mL，加硝酸亚铈试液O. 5mL，即显蓝紫色； (2)IR鉴别采用溴化钾压片，本原料药的红外光吸收图谱与对照品图谱一致； (三)检查 (I)有关物质 色谱条件与系统适用性试验以pH 3. 5的O. 02M KH2PO4 CH3CN=42 :58为流动相，色谱柱为 ALLtimaTM, C18, 250X4. 6mm，5 μ m，柱温为 30。C，检测波长为 215nm，流速为 I. OmL/min，进样体积为10 μ L，运行时间为30min，数据采集时间为30min ;罗氟司特峰拖尾因子不得超过2. O,罗氟司特峰柱效不低于5000，罗氟司特峰与杂质C分离度不低于I. 5 ； 测定法精密称取罗氟司特工作对照品、罗氟司特杂质对照品A、杂质对照品B、杂质对照品C和杂质对照品D各IOmg于同一 IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释到刻度，摇匀，过滤，得100 μ g/mL的对照贮备液，吸取I. OmL对照贮备液于IOOmL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释到刻度，摇匀，过滤，得含罗氟司特、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D各I. O μ g/mL的溶液，作为对照品溶液；系统适用性溶液同对照品溶液；称取样品25mg置50mL容量瓶中，加40mL乙腈，超声lOmin，不时摇散，再用乙腈稀释到刻度，摇匀，过滤，即得O. 5mg/mL的样品溶液；进样品溶剂乙腈至系统稳定后，进样系统适用性溶液，使所得峰面积RSD不得超过5. 0%，取以上对照溶液10 μ L注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰高为满量程的20%，再取样品溶液10 μ L，注入液相色谱仪；按外标法计算，计算公式如下 (a)已知杂质用已知杂质对照峰面积计算
全文摘要
本发明公开了一种罗氟司特原料的制备方法和检测方法，所述制备方法包括取3-环丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酸SM-1、氯化亚砜、二甲基甲酰胺和甲苯混合，发生酰氯化反应得中间体1，再取3，5-二氯-4-氨基吡啶SM-2、四氢呋喃和叔丁醇钾混合，发生成盐反应得中间体2的四氢呋喃溶液，后取中间体1、中间体2和四氢呋喃混合，发生酰胺化反应得罗氟司特粗品，对罗氟司特粗品进行精制即得。本发明针对现有技术的不足，对罗氟司特原料的制备工艺进行了优化，使其对治疗COPD等疾病的疗效更为显著，并建立了系统的、完整的、有效的成分鉴别和含量测定方法，可有效控制该药品的质量，从而确保其临床疗效。
文档编号C07D213/75GK102964297SQ20121049293
公开日2013年3月13日 申请日期2012年11月27日 优先权日2012年11月27日
发明者张观福 申请人:贵州信邦制药股份有限公司