专利名称：一种生产7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法及其专用培养基的制作方法
技术领域：
本发明属于植物细胞工程领域，具体涉及一种生产7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法及其专用培养基。
背景技术：
紫杉醇(I)作为临床一线抗癌用药，目前被广泛用于卵巢癌、乳腺癌、肺癌等多种实体癌的治疗。目前规模化生产紫杉醇的途径主要是从红豆杉属植物中直接提取或提取其半合成前体——10-去乙酰巴卡亭III (2)，再通
权利要求
1.一种基本培养基，其特征在于该培养基的配方为=NH4NO3 1100-1300mg, KNO3 1800-2000mg, KH2PO4 320_360mg，CaCl2 · 2H20 420_460mg，MgSO4 · 7H20 350_380mg， FeSO4 · 7H20 26_29mg, Na2-EDTA 36_38mg, MnSO4 · 4H20 2. 0-2. 5mg, H3BO3 0. 5-0. 7mg, KI 0. 7-0. 9mg, Na2MoO4 · 2H20 0. 02-0. 03mg, CuSO4 · 5H20 0. 002-0. 003mg, CoCl2 · 6H200.002-0. 003mg, Zn · Na-EDTA 12_17mg，盐酸硫胺素 0. 4-0. 6mg,烟酸 0. 4-0. 6mg,盐酸吡哆醇 O. 4-0. 6mg，甘氨酸 l_3mg,用水定容至 1L, pH5. 6-5. 8。
2.利用权利要求1所述培养基生产7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于 该方法步骤如下1)无菌条件下，将红豆杉的外植体在体积百分浓度70%的乙醇中消毒30s，再将其置于质量百分浓度为10%的次氯酸钠中杀菌20min，用无菌水冲洗3次，接种前将外植体切成长度为5_的小段，将其接种于愈伤组织诱导培养基中在24°C，黑暗条件下诱导愈伤组织；2)将愈伤组织接种于继代培养基中在24°C，黑暗条件下进行继代培养。
3.按照权利要求2所述生产7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于所述愈伤组织诱导培养基为在权利要求1所述的基本培养基的基础上添加2，4-D l-7mg,蔗糖 20-50g，琼脂 5-8g/L。
4.按照权利要求2所述生产7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于所述继代培养基为在权利要求1所述的基本培养基的基础上添加2，4-D l-5mg,蔗糖20_50g，琼脂 5_8g/L。
5.按照权利要求2所述生产7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于所述红豆杉为南方红豆杉、云南红豆杉或中华红豆杉。
6.按照权利要求2所述生产7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于所述外植体为茎、针叶或雄花。
7.按照权利要求2所述生产7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法，其特征在于所述步骤2)中的继代培养周期为3-4周，至少继代4次。
全文摘要
一种生产7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的方法及其专用培养基，用该培养方法及其专用培养基可以获得产7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的愈伤组织，愈伤组织中7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的含量为0.005%-0.009%。本发明是第一次在红豆杉植物中通过细胞工程方法获得7-木糖-10-去乙酰紫杉醇。生产的7-木糖-10-去乙酰紫杉醇可以作为原料通过简单工艺转化为紫杉醇。本发明解决了紫杉醇生产上的原料问题，易操作、周期短，成本低，保护了红豆杉植物资源。
文档编号C07H17/04GK103013903SQ201210566819
公开日2013年4月3日 申请日期2012年12月24日 优先权日2012年12月24日
发明者杨凌, 侯琨, 栾宏伟 申请人:中国科学院大连化学物理研究所