抗c-met抗体配制剂的制作方法
【专利摘要】本文中提供包含单臂抗c-met抗体的药物配制剂及其用途，其中所述抗c-met抗体包含：包含序列KSSQSLLYTSSQKNYLA（SEQ?ID?NO：1）的HVR-L1，包含序列WASTRES（SEQ?ID?NO：2）的HVR-L2，包含序列QQYYAYPWT（SEQ?ID?NO：3）的HVR-L3，包含序列GYTFTSYWLH（SEQ?ID?NO：4）的HVR-H1，包含序列GMIDPSNSDTRFNPNFKD（SEQ?ID?NO：5）的HVR-H2，和包含序列ATYRSYVTPLDY（SEQ?ID?NO：6）的HVR-H3。
【专利说明】抗C-MET抗体配制剂
[0001]对相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2011年6月30日提交的美国专利申请61/503，513的优先权，通过述及将其完整内容完整收入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请含有序列表，已经以ASCII格式经EFS-WEB提交且通过述及完整收入本文。2012年2月16日创建的所述ASCII拷贝命名为P4690R1W0.txt，并且大小为22，553个字节。
发明领域
[0005]本文中提供包含抗c-met抗体的药物配制剂及其用途。
[0006]发明背景
[0007]将赋形剂添加至药物配制剂以帮助稳定活性化合物。赋形剂与活性化合物的相容性对于药物配制剂的品质和稳定性是至关重要的。在赋形剂在稳定活性化合物中是重要的同时，赋形剂可引起问题:赋形剂可降解且因此丧失其稳定机制，或者它可生成与活性化合物相互作用的降解物。
[0008]其中的活性化 合物为多肽(例如抗体)的药物配制剂可造成特殊的问题，因为多肽一般比传统的有机和无机分子更大且更复杂(例如，在复杂的三维结构之外，多肽还拥有多种官能团)。另外，对于多肽保留生物学活性，药用多肽配制剂必须至少保持多肽核心氨基酸序列构象整体的完整性，同时维持药学多肽配制剂的物理和化学稳定性。赋形剂在水溶液中一般是稳定的；然而，药用多肽配制剂中的赋形剂能与多肽相互作用而在配制剂中经历降解，而且能阻止蛋白质的稳定化，或者降解物能与多肽相互作用而造成挑战(诸如活性的损失)。因此，评估药物配制剂的非活性成分和多肽活性剂的相互作用对于确保化学和物理稳定性是至关重要的。
[0009]聚山梨酯是用于针对界面诱导的聚集和表面吸附稳定活性化合物的非离子型表面活性剂。聚山梨酯针对多种压力可以是有效的，诸如搅动(例如摇动或搅拌)，冷冻/融化，和冻干。在药用多肽配制剂中，聚山梨酯最小化对表面的吸附且降低空气-液体界面表面张力及因此降低蛋白质变性速率。药物配制剂中聚山梨酯的损失可导致配制剂的不稳定性。而且，聚山梨酯可因氧化和水解而降解，这可导致药物配制剂中聚山梨酯的表观浓度随长贮存期而降低。聚山梨酯(例如聚山梨酯20)可被切割而生成降解物(例如游离月桂酸和山梨聚糖聚氧乙烯侧链)。这些聚山梨酯降解物的表面活性不如未降解聚山梨酯，因此药物配制剂的化学和物理稳定性可能受损。而且，一些聚山梨酯降解物是不溶性的，而且如果它们没有被完整聚山梨酯溶解的话，即如果降解聚山梨酯20:完整聚山梨酯20比率太高的话，可形成颗粒。
[0010]聚山梨酯降解的速率和程度受到活性化合物的化学和物理特性影响，而且聚山梨酯的稳定能力可以在包含不同活性化合物的不同药物配制剂之间变化。特别地，由于蛋白质配制剂中包括聚山梨酯来稳定蛋白质，因此药用多肽配制剂中聚山梨酯浓度的降低和降解物分子的积累对于蛋白质稳定性而言是潜在关注的。
[0011]已经报告了众多祀向HGF/c-met途径的分子。这些分子包括c_met的胞外域的一部分和抗c-met抗体诸如US5, 686, 292,Martens,T.et al.,Clin.Cancer Res.12(20Pt.1):6144 (2006) ；US6, 468，529 ；W02006/015371 ；W02007/063816 ;和 W02010/045345 中记载的那些。二价形式的抗c-met抗体显示出促进c-met 二聚化且导致活化(激动功能),而相反，单价抗体显示出抑制c-met活性(拮抗功能)。对于治疗需要拮抗功能的病理状况，抗c-met抗体的二价性可导致不想要的激动效应，且因此要求单价性状来确保抗c-met抗体结合靶来治疗病理状况时的拮抗活性。Fab片段和单臂抗体是单价抗体的例子。单臂抗体一般具有比Fab更长的半衰期。然而，因为单臂抗体包含单一轻链和单一重链(以及另外的Fe区)，如果单臂抗体结构没有得到稳定化，那么多肽能潜在形成具有两条重链和两条轻链的二价抗体。包含抗c-met抗体的药物配制剂中单价抗体聚集(形成多聚体和寡聚体)和/或维持单价结构失败可导致不想要的激动效应。最小化药物配制剂中的抗c-met抗体聚集因而是特别重要的。因此，尽管靶向HGF/c-met途径的分子有显著进步，仍然需要最小化cnet抗体聚集的稳定的药物配制剂。
[0012]通过述及完整收录本文中引用的所有参考文献，包括专利申请和出版物。
[0013]发明概述
[0014]本文中提供药物配制剂包含抗c-met抗体。在一些实施方案中，该药物配制剂为液体药物配制剂。在一些实施方案中，该药物配制剂为稳定的药物配制剂。在一些实施方案中，该药物配制剂为稳定的液体药物配制剂。在一些实施方案中，该抗c-met抗体为拮抗性抗c-met抗体。
[0015]例如，本文中提供药物配制剂包含:(a)抗c-met抗体；(b)pH5.0-5.4的组氨酸缓冲剂；(c)糖类；和⑷聚山梨酯，其中该聚山梨酯以大于0.02%w/v存在。
[0016]在任何配制剂的一些实施方案中，该抗c-met抗体包含:包含序列KSSQSLLYTSSQKNYLA (SEQ ID NO:1)的 HVR-L1，包含序列 WASTRES (SEQ ID NO:2)的HVR-L2，包含序列 QQYYAYPWT (SEQ ID NO:3)的 HVR-L3，包含序列 GYTFTSYWLH (SEQ IDNO:4)的 HVR-H1，包含序列 GMIDPSNSDTRFNPNFKD (SEQ ID NO:5)的 HVR-H2，和包含序列ATYRSYVTPLDY (SEQ ID NO:6)的HVR-H3。在一些实施方案中，该抗c-met抗体包含(a)包含序列:EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFTSYWLHWVRQAPGKGLEWV GMIDPSNSDTRFNPNFKDRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAT YRSYVTPLDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO:19)的重链可变域和(b)包含序列:DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKSSQSLLYTSSQKNYLAWYQQKPGKAP KLLIYffASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTI SSLQPEDFATYYCQQYYAYP WTFGQGTKVEIKR (SEQ ID NO:20)的轻链可变域。在一些实施方案中，该抗c-met抗体包含单一抗原结合臂且包含Fe区,其中该Fe区包含第一和第二 Fe多肽，且其中该第一和第二 Fe多肽存在于复合物中。在一些实施方案中，该第一和第二 Fe多肽形成与包含所述抗原结合臂的Fab分子相比提高所述抗体片段的稳定性的Fe区。在一些实施方案中，该抗c-met抗体包含(a)包含氨基酸序列SEQ IDNO:19,CHl序列和第一 Fe多肽的第一多肽和(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO:20和CLl序列的第二多肽。在一些实施方案中，该抗c-met抗体进一步包含(C)包含第二 Fe多肽的第三多肽。在一些实施方案中，该第一 Fe多肽包含图2 (SEQ ID NO: 17)所示Fe序列且该第二 Fe多肽包含图3 (SEQ ID NO: 18)所示Fe序列。在一些实施方案中，该抗c-met抗体为onartuzumab。在一些实施方案中，该抗c-met抗体与onartuzumab结合相同表位。
[0017]在任何配制剂的一些实施方案中，该抗c-met抗体以介于约10mg/mL和约IOOmg/mL之间(例如约15mg/mL和约75mg/mL)的浓度存在。在一些实施方案中，该抗c_met抗体以约60mg/mL的浓度存在。
[0018]在任何配制剂的一些实施方案中，该糖类以约75mM至约200mM (例如约IOOmM至约150mM)的浓度存在。在一些实施方案中，该糖类以约120mM的浓度存在。在一些实施方案中，该糖类为二糖。在一些实施方案中，该二糖为海藻糖。在一些实施方案中，该二糖为蔗糖。
[0019]在任何配制剂的一些实施方案中，该组氨酸缓冲剂处于约ImM至约50mM (例如约ImM至约25mM)的浓度。在一些实施方案中，该组氨酸缓冲剂处于约IOmM的浓度。在一些实施方案中，该组氨酸缓冲剂为组氨酸乙酸酯。
[0020]在任何配制剂的一些实施方案中，该聚山梨酯以大于0.02%且小于约0.1%的浓度存在。在一些实施方案中，该聚山梨酯以约0.04%的浓度存在。在一些实施方案中，该聚山梨酯为聚山梨酯20。
[0021]在任何配制剂的一些实施方案中，该配制剂是用稀释剂(例如0.9%NaCl)稀释的。在一些实施方案中，该抗c-met抗体以约lmg/mL的浓度存在。
[0022]本文中提供抑制c-met激活的细胞增殖的方法,所述方法包括使细胞或组织与有效量的本文所述药物配制剂接触(例如在稀释后)。
[0023]本文中还提供调控与HGF/c-met信号传导轴失调有关的疾病的方法，所述方法包括对受试者施用有效量的本文所述药物配制剂(例如在稀释后)。
[0024]进一步提供治疗具有增殖性病症的受试者的方法，所述方法包括对该受试者施用有效量的本文所述药物配制剂(例如在稀释后)。在一些实施方案中，该增殖性病症为癌症。在一些实施方案中，该癌症为肺癌(非小细胞肺癌(NSCLC))、成胶质细胞瘤、胰腺癌、肉瘤、肾细胞癌、肝细胞癌、胃癌、结肠直肠癌、和/或乳腺癌。在一些实施方案中，该方法进一步包括第二治疗剂。
[0025]本文提供制备本文所述药物配制剂的方法。
[0026]另外，本文中提供制品，其包括容器，该容器中装有本文所述药物配制剂(例如在稀释后)。本文中还提供制备包含本文所述药物配制剂(例如在稀释后)的制品的方法。
[0027]附图简述
[0028]图1描绘c-Met的短半衰期和长半衰期激动剂和拮抗剂的一般结构。
[0029]图2 描绘 MetMAb (onartuzumab 或 0Α?5.ν2)的框架(FR),高变区(HVR),第一恒定域(CL或CHl)和Fe区(Fe)的氨基酸序列。描绘的Fe序列包含“穴”(空腔)突变T366S，L368A 和 Y407V，如 W02005/063816 中记载的。
[0030]图3描绘包含“节”(隆起)突变T366W的Fe多肽的序列，如W02005/063816中记载的。在一些实施方案中，包含这种序列的Fe多肽与包含图1中的Fe序列的Fe多肽形成复合物以生成Fe区。图3中公开的序列代表SEQ ID NO:18的残基6-227。
[0031]图4 描绘 ρΗ5.2, 5.7,和 6.2 的配制剂 20mg/mL onartuzumab, IOmM 组氨酸乙酸酯，120mM海藻糖，和0.02%聚山梨酯20于40°C的聚集物形成速率，如高分子量种类(HMWS)随时间(天)的百分比所示。[0032]图5 描绘ρΗ5.I, 5.4,和 5.7 的配制剂 40mg/mL onartuzumab, IOmM组氛酸乙酸酷，120mM海藻糖，和0.02%聚山梨酯20于25 °C的聚集物形成速率，如高分子量种类(HMWS)随时间(天)的百分比所示。
[0033]图6 描绘ρΗ5.I, 5.4,和 5.7 的配制剂 40mg/mL onartuzumab, IOmM组氛酸乙酸酷，120mM海藻糖，和0.02%聚山梨酯20于40°C的聚集物形成速率，如高分子量种类(HMWS)随时间(天)的百分比所示。
[0034]图7 描绘ρΗ5.I, 5.4,和 5.7 的配制剂 40mg/mL onartuzumab, IOmM组氨酸乙酸酯，120mM海藻糖，和0.02%聚山梨酯20于25°C和40°C的化学稳定性，通过离子交换层析(IEC)测量，如主峰随时间(天)的百分比所示。
[0035]图8描绘配制剂60mg/mL onartuzumab, IOmM组氨酸乙酸酯,ρΗ5.4,和120mM鹿糖及0.02%聚山梨酯20或0.04%聚山梨酯20于40°C时完整聚山梨酯随时间(周)的百分比。
[0036]图9描绘在装有0.9%NaCl的IV袋中稀释至lmg/mL的onartuzumab的聚集物形成速率。下述经过稀释的配制剂的聚集速率如高分子量种类(HMWS)随搅动时间(小时)的百分比所示，(a)保持于室温的ρΗ5.4的60mg/mL onartuzumab, IOmM组氨酸乙酸酯，120mM海藻糖，和0.02%聚山梨酯20以方框表示，和(b)保持于30°C的ρΗ5.4的60mg/mL onartuzumab,IOmM组氨酸乙酸酯，120mM蔗糖，和0.04%聚山梨酯20以圆圈表示。
[0037]发明详述
[0038]本文中提供包含抗c-met抗体的稳定的药物配制剂。在一些实施方案中，该抗c-met抗体为拮抗性抗c-met抗体。在一些实施方案中，该抗c_met抗体为单价抗c_met抗体。另外，提供包含抗c-met抗体药物配制剂的试剂盒和制品及抗c-met抗体药物配制剂的用途。
[0039]1.定义
[0040]术语“药物配制剂”指处于如下的形式，使得容许其中含有的活性成分的生物学活性是有效的，且不含对会接受配制剂施用的受试者具有不可接受的毒性的别的组分的制剂。“药学可接受”赋形剂(媒介、添加剂)为那些可合理施用于受试者以提供有效剂量的活性化合物。
[0041]“稳定”配制剂为一种其中的多肽在贮藏后和/或施用期间(例如在IV袋中稀释后)基本上保留其物理稳定性和/或化学稳定性和/或生物学活性的。多种用于测量蛋白质稳定性的分析技术是本领域可得的且综述于例如Peptide and Protein DrugDelivery, 247-301, Vincent Lee Ed., Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., Pubs.(1991)及Jones, A.Adv.Drug Delivery Rev.10:29-90 (1993)。可测量在预定温度忙藏预定时间段后的稳定性。
[0042]若在给定时间的化学稳定性使得蛋白质被认定为仍然保留其生物学活性且可接受的安全概况，例如人用药物注册技术要求国际协调会议指南确定的(例如在视觉检查颜色和/或澄清度时或根据UV光散射或大小排阻层析的测量，例如商业可接受水平的聚集、沉淀和/或变性)，则多肽在药物配制剂中“保留其物理稳定性”。
[0043]若在给定时间的化学稳定性使得蛋白质被认定为仍然保留其生物学活性，则多肽在药物配制剂中“保留其化学稳定性”。化学稳定性可通过检测和定量蛋白质的化学改变形式来评估。化学改变可涉及大小修饰(例如修剪)，这可使用例如大小排阻层析、SDS-PAGE和/或基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱术(MALDI/TOF MS)来评估。其它类型的化学改变包括电荷改变，其可通过例如离子交换层析来评估。
[0044]“药学可接受载体”指药物配制剂中与活性成分不同的，且对受试者无毒的成分。药学可接受载体包括但不限于缓冲剂、赋形剂、稳定剂、或防腐剂。
[0045]“组氨酸缓冲剂”指包含组氨酸离子的缓冲剂。
[0046]本文中的“糖类”包含一般组成(CH2O)n及其衍生物。
[0047]术语“抗c-met抗体”和“结合c_met的抗体”指能够以足够亲和力结合c_met,使得该抗体可作为诊断剂和/或治疗剂用于靶向c-met的抗体。在一些实施方案中，根据例如通过放射免疫测定法(RIA)的测量，抗c-met抗体结合无关的、非c-met的蛋白质的程度小于该抗体对c-met的结合的约10%。在一些实施方案中，结合c-met的抗体具有≤I μ M、(ΙΟΟηΜ、≤ ΙΟηΜ、≤ InM、≤ 0.1nM、≤ 0.01nM、或≤ 0.0OlnM(例如 10_8M 或更少，例如 KT8M到10_13M，例如10_9M到I(T13M)的解离常数(Kd)。在一些实施方案中，抗C-met抗体结合在来自不同物种的c-met中保守的c-met表位。
[0048]术语“抗体”以最广义使用，具体涵盖单克隆抗体(包括全长单克隆抗体)、多克隆抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)、单价抗体、多价抗体、及抗体片段，只要它们展现出期望的生物学活性(例如Fab和/或单臂抗体)。
[0049]抗体的“类”指其重链拥有的恒定域或恒定区的类型。抗体有5大类:IgA、IgD、IgE、IgGjP IgM，并且 这些中的几种可以进一步分成亚类(同种型)，例如，IgG1, IgG2, IgG3、IgG4 JgA1、和IgA2。与不同类免疫球蛋白对应的重链恒定域分别称作α、δ、ε、Y、和μ。
[0050]“抗体片段”指与完整抗体不同的分子，其包含完整抗体的一部分且结合完整抗体结合的抗原。抗体片段的例子包括但不限于Fv、Fab、Fab’、Fab’ _SH、F(ab’ )2 ;双抗体；线性抗体；单链抗体分子(例如scFv);和由抗体片段形成的多特异性抗体。
[0051]术语“全长抗体”、“完整抗体”、和“全抗体”在本文中可互换使用，指与天然抗体结构具有基本上类似的结构或者具有含有如本文中所限定的Fe区的重链的抗体。
[0052]“阻断性”抗体或“拮抗性”抗体指显著抑制(部分地或完全地)其所结合的抗原的生物学活性的抗体。
[0053]与参照抗体“结合相同表位的抗体”指在竞争测定法中将参照抗体对其抗原的结合阻断50%或更多的抗体，且相反，参照抗体在竞争测定法中将该抗体对其抗原的结合阻断50%或更多。本文中提供了例示性的竞争测定法。
[0054]出于本文中的目的，“受体人框架”指包含自人免疫球蛋白框架或如下文定义的人共有框架衍生的轻链可变域(VL)框架或重链可变域(VH)框架的氨基酸序列的框架。自人免疫球蛋白框架或人共有框架“衍生”的受体人框架可以包含其相同的氨基酸序列，或者它可以含有氨基酸序列变化。在一些实施方案中，氨基酸变化的数目是10或更少、9或更少、8或更少、7或更少、6或更少、5或更少、4或更少、3或更少、或2或更少。在一些实施方案中，VL受体人框架与VL人免疫球蛋白框架序列或人共有框架序列在序列上相同。
[0055]术语“可变区”或“可变域”指抗体重或轻链中牵涉抗体结合抗原的域。天然抗体的重链和轻链可变域(分别为VH和VL) —般具有类似的结构,其中每个域包含4个保守的框架区(FR)和3个高变区(HVR) ο (见例如Kindt等Kuby Immunology,第6版，W.H.Freeman and C0.,第91页(2007))。单个VH或VL域可以足以赋予抗原结合特异性。此外，可以分别使用来自结合抗原的抗体的VH或VL域筛选互补VL或VH域的文库来分离结合特定抗原的抗体。见例如，Portolano 等,J.1mmunol.150:880-887 (1993) ; Clarkson等，Nature352:624-628 (1991)。
[0056]在用于本文时，术语“高变区”或“HVR”指抗体可变域中在序列上高变的和/或形成结构上限定的环(“高变环”)的每个区。一般地，天然的4链抗体包含6个HVR;三个在VH中(H1、H2、H3)，且三个在VL中(L1、L2、L3)。HVR 一般包含来自高变环和/或来自“互补决定区”(CDR)的氨基酸残基，后一种是最高序列变异性的和/或牵涉抗原识别。例示性高变区存在于氨基酸残基26-32 (LI)、50-52 (L2) ,91-96 (L3)、26-32 (Hl)、53-55 (H2)、和 96-101 (H3) (Chothia 和 Lesk, J.Mol.Biol.196:901-917(1987))。例示性CDR (CDR-Ll、CDR-L2、CDR-L3、CDR-Hl、CDR-H2、和 CDR-H3)存在于氨基酸残基 LI 的 24-34、L2 的 50-56,L3 的 89-97,Hl 的 31_35B、H2 的 50-65、和 H3 的 95-102 (Kabat 等，Sequencesof Proteins of Immunological Interest,第 5 版 Public Health Service, NationalInstitutes of Health, Bethes da, MD(1991))。除了 VH 中的 CDRl 外，CDR—般包含形成高变环的氨基酸残基。⑶R还包含“特异性决定残基”，或“SDR”，其是接触抗原的残基。SDR包含在称作缩短的-⑶R，或a-⑶R的⑶R区内。例示性的a-⑶R (a_⑶R-Ll、a_⑶R-L2、a-CDR-L3、a-CDR-Hl、a-CDR-H2、和 a_CDR-H3)存在于 LI 的氨基酸残基 31_34、L2 的 50-55、L3 的 89-96、Hl 的 31-35B、H2 的 50-58、和 H3 的 95-102 (见 Almagro 和 Fransson, Front.Biosc1.13:1619-1633(2008)) ο除非另有指示，可变域中的HVR残基和其它残基(例如，FR残基)在本文中依照Kabat等，见上文编号。
[0057]“框架”或“FR”指除高变区(HVR)残基外的可变域残基。一般地，可变域的FR由4个？1?域组成疋1?1、？1?2、？1?3、和？1?4。因而，HVR和FR序列在VH (或VL)中一般以如下的顺序出现:FR1-H1 (LI) -FR2-H2 (L2) -FR3-H3 (L3) -FR4。
[0058]如本文中使用的，短语“N端截短的重链”指包含部分但非整个全长免疫球蛋白重链的多肽，其中缺失的部分是那些在正常情况中位于重链N端区的。缺失的部分可包括但不限于可变域、CH1、和部分或整个铰链序列。一般地，如果野生型铰链序列不存在，那么N端截短的重链中的剩余恒定域会包含能够连接另一 Fe序列(即本文中描述的“第一” Fe多肽)的成分。例如，所述成分可以是能够形成二硫化物连接的添加的半胱氨酸残基或经修饰残基。
[0059]如本文中所使用的，术语“Fe区” 一般指包含免疫球蛋白重链C端多肽序列的二聚体复合物，其中C端多肽序列是通过木瓜蛋白酶消化完整抗体可获得的。Fe区可包含天然或变体Fe序列。虽然免疫球蛋白重链的Fe序列的边界可以有所变化,但是人IgG重链Fe序列通常定义为Fe序列自位于大约位置Cys226的氨基酸残基,或自大约位置Pro230,至羧基端的区段。然而，Fe序列的C端赖氨酸(Lys447)可以存在或不存在。免疫球蛋白的Fe序列一般包含两个恒定域，CH2域和CH3域，且任选包含CH4域。“Fe多肽”在本文中指构成Fe区的多肽之一。可以自任何合适的免疫球蛋白获得Fe多肽，诸如IgG1, IgG2, IgG3,或IgG4亚型，IgA, IgE, IgD或IgM。在一些实施方案中，Fe多肽包含部分或整个野生型铰链序列(一般位于其N端)。在一些实施方案中，Fe多肽不包含功能性或野生型铰链序列。
[0060]“Fe受体”或“FcR”描述能结合抗体Fe区的受体。在一些实施方案中，FcR是天然人FcR。在一些实施方案中，FcR是能结合IgG抗体的FcR ( Y受体)，包括FcyR1、Fe Y RII和Fe Y RIII亚类的受体，包括那些受体的各等位变体和各可变剪接形式。FcyRII受体包括Fe Y RIIA (“活化受体”)和Fe Y RIIB (“抑制受体”)，它们具有相似的氨基酸序列，区别主要在于其胞质结构域。活化受体Fe Y RIIA在其胞质结构域中包含免疫受体基于酪氨酸的活化基序(ITAM)。抑制受体Fe Y RIIB在其胞质结构域中包含免疫受体基于酪氨酸的抑制基序(ITIM)(参见例如Dairon, Annu.Rev.1mmunol.15:203-234(1997))。FcR 的综述参见例如 Ravetch 和 Kinet, Annu.Rev.1mmunol.9:457-492 (1991) ; Capel等,Immunomethods4:25-34(1994);及 de Haas 等,J.Lab.Clin.Med.126:330-341(1995)。术语“FcR”在本文中涵盖其它FcR，包括那些未来将会鉴定的。
[0061]术语“Fe受体”或“FcR”还包括新生儿受体，FcRn，其负责将母体IgG转移给胎儿(Guyer 等,J.1mmunol.117:587 (1976)；及 Kim 等,J.1mmunol.24:249 (1994))和调节免疫球蛋白的体内稳态。测量对FcRn的结合的方法是已知的(参见例如Ghetie andWard.，Immunol.Todayl8(12):592-598(1997);Ghetie et al., Nature Biotechnology, 15(
7):637-640(1997);Hinton et al.，J.Biol.Chem.279(8):6213-6216(2004);W02004/92219(Hinton et al.) X
[0062]可以测定人FcRn高亲和力结合多肽对人FcRn的体内结合和血清半衰期，例如在表达人FcRn的转基因小鼠或经转染人细胞系中，或者在施用了带有变异Fe区的多肽的灵长类动物中。W02000/42072 (Presta)记载了对FcR的结合得到改进或消除的抗体变体。还可参见 Shields et al., J.Biol.Chem.9 (2): 6591-6604 (2001) ?
[0063]如本文中所使用的，“铰链区”，“铰链序列”，及其变化形式包括本领域知道的含义，其例示于例如Janeway等，Immuno Biology: the immune system in healthand disease, (Elsevier Science Ltd., NY)(第 4 版，1999) ；Bloom 等，ProteinScience(1997)，6:407-415 ；Humphreys 等，J.1mmunol.Methods(1997)，209:193-202。
[0064]除非另有说明，表述“多价抗体”贯穿本说明书用于指包含三个或更多抗原结合位点的抗体。优选地，多价抗体改造成具有三个或更多个抗原结合位点，而且一般不是天然序列IgM或IgA抗体。
[0065]“Fv”片段是包含完整抗原识别和结合位点的抗体片段。该区域由紧密结合(该结合的本质可以是共价的，例如在scFv中)的一个重链可变域和一个轻链可变域的二聚体组成。正是在这种构造中，每个可变域的三个⑶R相互作用而在Vh-' 二聚体表面上限定了抗原结合位点。六个CDR或其子集(subset) —起赋予抗体以抗原结合特异性。然而，即使是单个可变域(或是只包含对抗原特异性的三个CDR的半个Fv)也具有识别和结合抗原的能力，只是通常亲和力低于完整结合位点。
[0066]“Fab”片段包含轻链的可变域和恒定域及重链的可变域和第一恒定域(CHl)。F (ab’) 2抗体片段包含一对Fab片段，这对Fab片段一般通过它们之间的铰链半胱氨酸在它们羧基末端附近共价连接。本领域还知道抗体片段的其它化学偶联形式。
[0067]如本文中使用的，短语“抗原结合臂”指抗体片段有能力特异性结合感兴趣靶分子的组成部分。一般地且优选地，抗原结合臂是免疫球蛋白多肽序列(例如免疫球蛋白轻链和重链HVR和/或可变域序列)的复合物。
[0068]“单链Fv”或“scFv”抗体片段包含抗体的Vh和\结构域，其中这些结构域存在于一条多肽链上。一般而言，Fv多肽在Vh与\结构域之间进一步包含多肽接头，其使得scFv能够形成结合抗原的期望结构。关于scFv的综述参见Pluckthun,于《The Pharmacology ofMonoclonal Antibodies》，第 113 卷，Rosenburg 和 Moore 编，Springer-Verlag, New York,第 269-315 页，1994。
[0069]术语“双抗体”指具有两个抗原结合位点的小型抗体片段，该片段在同一条多肽链(%及')中包含相连的重链可变域(Vh)和轻链可变域(')。通过使用过短的接头使得同一条链上的两个结构域之间不能配对，迫使这些结构域与另一条链的互补结构域配对，从而产生两个抗原结合位点。双抗体更完整的记载于例如EP404，097 ；W093/11161 ；Hollinger等，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA90:6444-6448 (1993)。
[0070]表述“线性抗体”指Zapata 等，Protein Eng.，8 (10): 1057-1062 (1995)中所描述的抗体。简言之，这些抗体包含一对串联的Fd区段(Vh-Ch1-Vh-ChI),该区段与互补的轻链多肽一起形成一对抗原结合区。线性抗体可以是双特异性的，或者是单特异性的。
[0071]在用于本文时，术语“单克隆抗体”指从一群基本上同质的抗体获得的抗体，即构成群体的各个抗体是相同的和/或结合相同表位，除了例如含有天然存在的突变或在单克隆抗体制备物的生成期间发生的可能的变体抗体外，此类变体一般以极小量存在。与通常包含针对不同决定簇(表位)的不同抗体的多克隆抗体制备物不同，单克隆抗体制备物的每种单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。如此，修饰语“单克隆”指示抗体自一群基本上同质的抗体获得的特性，而不应解释为要求通过任何特定方法来生成抗体。例如，可以通过多种技术来生成单克隆抗体，包括但不限于杂交瘤方法、重组DNA方法、噬菌体展示方法、和利用含有所有或部分人免疫球蛋白基因座的转基因动物的方法，本文中描述了用于生成单克隆抗体的此类方法和其它例示性方法。
[0072]术语“嵌合”抗体指其中的重和/或轻链的一部分自特定的来源或物种衍生，而重和/或轻链的剩余部分自不同来源或物种衍生的抗体。
[0073]“人共有框架”指代表人免疫球蛋白VL或VH框架序列选集中最常存在的氨基酸残基的框架。通常，人免疫球蛋白VL或VH序列选集来自可变域序列亚组。通常，序列亚组是如 Kabat 等，Sequences of `Proteins of Immunological Interest,第五版，NIHPublication91-3242, Bethesda MD (1991),第1-3卷中的亚组。在一个实施方案中，对于VL，亚组是如Kabat等，见上文中的亚组κ I。在一个实施方案中，对于VH，亚组是如Kabat等，见上文中的亚组III。
[0074]“人源化”抗体指包含来自非人HVR的氨基酸残基和来自人FR的氨基酸残基的嵌合抗体。在某些实施方案中，人源化抗体会包含至少一个，通常两个基本上整个可变域，其中所有或基本上所有HVR (例如，CDR)对应于非人抗体的那些，且所有或基本上所有FR对应于人抗体的那些。任选地，人源化抗体可以至少包含自人抗体衍生的抗体恒定区的一部分。抗体，例如非人抗体的“人源化形式”指已经经历人源化的抗体。
[0075]“人抗体”指拥有与由人或人细胞生成的或利用人抗体全集或其它人抗体编码序列自非人来源衍生的抗体的氨基酸序列对应的氨基酸序列的抗体。人抗体的此定义明确排除包含非人抗原结合残基的人源化抗体。
[0076]“裸抗体”指未与异源模块(例如细胞毒性模块)或放射性标记物缀合的抗体。裸抗体可以存在于药物配制剂中。
[0077]“天然抗体”指具有不同结构的天然存在的免疫球蛋白分子。例如，天然IgG抗体是约150，000道尔顿的异四聚糖蛋白，由二硫化物键合的两条相同轻链和两条相同重链构成。从N至C端，每条重链具有一个可变区(VH)，又称作可变重域或重链可变域，接着是三个恒定域(CH1、CH2、和CH3)。类似地，从N至C端，每条轻链具有一个可变区(VL)，又称作可变轻域或轻链可变域，接着是一个恒定轻(CL)域。根据其恒定域氨基酸序列，抗体轻链可归入两种类型中的一种，称作卡帕(κ)和拉姆达(λ)。
[0078]“亲和力”指分子(例如抗体)的单一结合位点与其结合配偶体(例如抗原)之间全部非共价相互作用总和的强度。除非另有指示，如本文中使用的，“结合亲和力”指反映结合对的成员(例如抗体和抗原)之间1:1相互作用的内在结合亲和力。分子X对其配偶体Y的亲和力通常可以用解离常数(Kd)来表述。亲和力可以通过本领域知道的常用方法来测量，包括本文中所描述的方法。下文描述了用于测量结合亲和力的具体的说明性和例示性的实施方案。
[0079]“亲和力成熟的”抗体指在一个或多个HVR中具有一处或多处改变的抗体，与不拥有此类改变的亲本抗体相比,此类改变导致该抗体对抗原的亲和力改善。
[0080]具有指定抗体的“生物学特征”的抗体指拥有该指定抗体区别于其它结合相同抗原的抗体的一项或多项生物学特征的抗体。
[0081]抗体的“功能性抗原结合位点”指能够结合靶抗原的位点。抗原结合位点的抗原结合亲和力不必像衍生该抗原结合位点的亲本抗体那样强，但是结合抗原的能力必须是使用已知用于评估抗体对抗原结合的多种方法之任一可测量到的。此外，本文中多价抗体的每个抗原结合位点的抗原结合亲和力不必在量上相同。对于本文中的多聚体抗体，功能性抗原结合位点的数目可以使用超速离心分析来评估，如美国专利申请公开文本N0.20050186208中所记载的。依照这种分析方法，将靶抗原与多聚体抗体以不同比例混合，并计算复合物的平均 分子量，其中假设不同数目的功能性结合位点。将这些理论值与得到的实际实验值进行比较以评估功能性结合位点的数目。
[0082]“物种依赖性抗体”指这样一种抗体，其对来自第一哺乳动物物种的抗原具有强于对来自第二哺乳动物物种的该抗原同系物的结合亲和力。通常，物种依赖性抗体“特异性结合”人类抗原(即具有不超过约1χ10_7Μ，优选不超过约1χ10_8Μ，最优选不超过约1χ10_9Μ的结合亲和力(Kd))，但对来自第二非人哺乳动物物种的该抗原同系物具有比其对人类抗原的结合亲和力弱至少约50倍，或至少约500倍，或至少约1000倍的结合亲和力。物种依赖性抗体可以是如上定义的各种类型的抗体。在一个实施方案中，物种依赖性抗体是人源化抗体或人抗体。
[0083]“分离的”抗体指已经与其天然环境的组分分开的抗体。在一些实施方案中，抗体纯化至大于95%或99%的纯度，如通过例如电泳(例如，SDS-PAGE、等电聚焦(IEF)、毛细管电泳)或层析(例如，离子交换或反相HPLC)测定的。关于用于评估抗体纯度的方法的综述，见例如 Flatman 等,J.Chromatogr.Β848:79-87 (2007)。
[0084]短语“基本上相似”或“基本上相同”在用于本文时指两个数值之间足够高的相似程度(例如一个与抗体有关，另一个与参照/比较抗体有关)，以致本领域技术人员将认为在用所述数值(例如Kd值)所测量的生物学特性背景内两个数值之间的差异具有很小的或没有生物学和/或统计学显著性。
[0085]短语“实质性降低”或“实质性不同”在用于本文时指两个数值之间足够高的差异程度(通常一个与分子有关，另一个与参照/比较分子有关)，以致本领域技术人员将认为在用所述数值(例如Kd值)所测量的生物学特性背景内两个数值之间的差异具有统计学显著性。
[0086]“效应器功能”指那些可归于抗体Fe区且随抗体同种型而变化的生物学活性。抗体效应器功能的例子包括:Clq结合和补体依赖性细胞毒性(CDC) ；Fc受体结合；抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC);吞噬作用；细胞表面受体(例如B细胞受体)下调；和B细胞活化。
[0087]“免疫缀合物”指与一种或多种异源分子，包括但不限于细胞毒剂缀合的抗体。
[0088]在用于本文时，术语“细胞毒剂”指抑制或阻止细胞功能和/或引起细胞死亡或破坏的物质。细胞毒剂包括但不限于:放射性同位素(例如At211、I131、I125、Y9°、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32、Pb212和Lu的放射性同位素);化学治疗剂或药物(例如甲氨蝶呤(methotrexate)、阿霉素(adriamycin)、长春花生物碱类(vinca alkaloids)(长春新碱(vincristine)、长春碱(vinblastine)、依托泊苷(etoposide))、多柔比星(doxorubicin)、美法仑(melphalan)、丝裂霉素(mitomycin)C、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、柔红霉素(daunorubicin)或其它嵌入剂)；生长抑制剂；酶及其片段，诸如溶核酶；抗生素；毒素，诸如小分子毒素或者细菌、真菌、植物或动物起源的酶活性毒素，包括其片段和/或变体 '及下文公开的各种抗肿瘤或抗癌剂。
[0089]“病症”指任何会受 益于本文所述物质/分子或方法的治疗的疾患。这包括慢性和急性病症或疾病，包括那些使哺乳动物倾向于所讨论病症的病理状况。本文中待治疗的病症的非限制性例子包括恶性和良性肿瘤；非白血病(non-leukemia)和淋巴样恶性肿瘤；神经元、神经胶质、星形细胞、下丘脑和其它腺体、巨噬细胞、上皮、基质(stromal)和囊胚腔病症；及炎性、免疫性和其它血管发生相关的病症。
[0090]术语“细胞增殖性病症”和“增殖性病症”指与一定程度的异常细胞增殖有关的病症。在一个实施方案中，细胞增殖性病症指癌症。
[0091]如本文中使用的，“肿瘤”指所有赘生性(neoplastic)细胞生长和增殖，无论是恶性的还是良性的，及所有癌前(pre-canceixms)和癌性细胞和组织。术语“癌症”、“癌性”、“细胞增殖性病症”、“增殖性病症”和“肿瘤”在本文中提到时并不互相排斥。
[0092]术语“癌症”和“癌性”指向或描述哺乳动物中特征通常为细胞生长/增殖不受调控的生理疾患。癌症的例子包括但不限于癌、淋巴瘤(例如何杰金氏(Hodgkin)淋巴瘤和非何杰金氏淋巴瘤)、母细胞瘤、肉瘤和白血病。此类癌症的更具体例子包括鳞状细胞癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肺的腺癌、肺的鳞癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、胶质瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌(liver cancer)、膀胱癌、肝瘤(h印atoma)、乳腺癌、结肠癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌(hepaticcarcinoma)、白血病和其它淋巴增殖性病症、及各种类型的头和颈癌。在一些实施方案中，癌症是三重阴性(ER-、PR-、HER2-)癌症。在一些实施方案中，癌症是三重阴性转移性乳腺癌，包括任何经组织学确认的具有局部复发性或转移性疾病的三重阴性(ER-、PR-、HER2-)乳腺癌，例如局部复发疾病不适合具有治愈目的的切除术的情况。
[0093]“转移”指癌自其原发部位传播至身体中的其它位置。癌细胞能脱离原发性肿瘤，渗透入淋巴和血管，经由血流而循环和在身体中其它地方的正常组织中的远端病灶(转移)中生长。转移可以是局部的或远端的。转移是一个连续过程，视肿瘤细胞自原发性肿瘤脱落、经由血流而传播、并在远端部位停止而定。在新的部位，该细胞建立血供且能生长至形成危及生命的团块。
[0094]在用于本文时，“治疗”(及其语法变化形式，诸如“处理”或“处置”)指试图改变所治疗个体的自然进程的临床干预，可以是为了预防或在临床病理学的进程中进行。治疗的期望效果包括但不限于预防疾病的发生或复发、缓解症状、削弱疾病的任何直接或间接病理学后果、预防转移、减缓疾病进展的速率、改善或减轻疾病状态、及免除或改善预后。在一些实施方案中，使用抗体来延迟疾病的发生/发展，或用于减缓疾病的进展。
[0095]药剂(例如药物配制剂)的“有效量”指在必需的剂量和时段上有效实现期望的治疗或预防结果的量。
[0096]“治疗有效量”指治疗剂在哺乳动物中治疗或预防疾病或病症的量。在癌症的情况中，治疗有效量的治疗剂可减少癌细胞的数目；缩小原发性肿瘤的尺寸；抑制(即一定程度的减缓，优选阻止)癌细胞浸润入周围器官；抑制(即一定程度的减缓，优选阻止)肿瘤转移；一定程度的抑制肿瘤生长；和/或一定程度的减轻一种或多种与病症有关的症状。根据药物可阻止现有癌细胞生长和/或杀死现有癌细胞的程度，它可以是细胞抑制性的和/或细胞毒性的。对于癌症疗法，体内功效可以通过例如评估存活持续时间、距疾病进展的时间(TTP)、响应率(RR)、响应持续时间、和/或生活质量来测量。
[0097]“个体”或“受试者”是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于驯养的动物(例如，牛、绵羊、猫、犬、和马)、灵长类(例如，人和非人灵长类诸如猴)、家兔、和啮齿类(例如，小鼠和大鼠)。在某些实施方案中，个体或受试者是人。
[0098]术语“抗癌疗法”指在治疗癌症中有用的疗法。抗癌治疗剂的例子包括但不限于例如化疗剂、生长抑制剂、细胞毒剂、放射疗法中所使用的药剂、抗血管发生剂、凋亡剂、抗微管蛋白剂、和其它治疗癌症的药剂，抗CD20抗体、血小板衍生生长因子抑制剂(例如Gleevec? (Imatinib Mesylate))、C0X-2 抑制剂(例如 celecoxib)、干扰素、细胞因子、结合一种或多种以下靶物的拮抗剂(例`如中和性抗体)(roGFR-β、BlyS, APRIL、BCMA受体、TRAIL/Apo2)、和其它生物活性和有机化学剂，等。本发明还包括它们的组合。
[0099]在用于本文时，术语“细胞毒剂”指抑制或阻止细胞功能和/或引起细胞破坏的物质。该术语意图包括放射性同位素(例如At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32、Pb212和Lu的放射性同位素)；化学治疗剂(例如甲氨蝶呤(methotrexate)、阿霉素(adriamycin)、长春花生物碱类(vinca alkaloids)(长春新碱(vincristine)、长春碱(vinblastine)、依托泊苷(etoposide))、多柔比星(doxorubicin)、美法仑(melphalan)、丝裂霉素(mitomycin)C、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、柔红霉素(daunorubicin)或其它嵌入剂)；酶及其片段，诸如溶核酶；抗生素；毒素，诸如小分子毒素或者细菌、真菌、植物或动物起源的酶活性毒素，包括其片段和/或变体；及下文公开的各种抗肿瘤或抗癌剂。下文描述了其它细胞毒剂。杀肿瘤剂引起肿瘤细胞破坏。
[0100]“化疗剂”指可用于治疗癌症的化学化合物。化疗剂的实例包括烷化剂类(alkylating agents)，诸如塞替派(thiotepa)和环憐酸胺(cyclophosphamide)(CYTOXAN? );磺酸烷基酯类(alkyl sulfonates),诸如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan);氮丙唳类(aziridines),诸
【权利要求】
1.一种药物配制剂，其包含: (a)一种抗c-met抗体，其中该抗c-met抗体包含:包含序列KSSQSLLYTSSQKNYLA(SEQID NO:1)的 HVR-L1，包含序列 WASTRES (SEQ ID NO:2)的 HVR-L2，包含序列 QQYYAYPWT(SEQ ID NO:3)的 HVR-L3，包含序列 GYTFTSYWLH (SEQ ID NO:4)的 HVR-H1，包含序列GMIDPSNSDTRFNPNFKD (SEQ ID NO:5)的 HVR-H2，和包含序列 ATYRSYVTPLDY (SEQ ID NO:6)的HVR-H3，且其中该抗c-met抗体包含单个抗原结合臂且包含Fe区，其中该Fe区包含第一和第二 Fe多肽,且其中该第一和第二 Fe多肽存在于复合物中； (b)pH5.0-5.4的组氨酸缓冲剂； (c)糖类；和 (d)聚山梨酯,其中该聚山梨酯以大于0.02%w/v存在。
2.权利要求1的药物配制剂，其中该抗c-met抗体包含(a)包含序列EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGYTFTSYWLHWVRQAPGKGLEWV GMIDPSNSDTRFNPNFKDRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCAT YRSYVTPLDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 19)的重链可变域和(b)包含序列 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKSSQSLLYTSSQKNYLAWYQQKPGKAP KLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYYAYP WTFGQGTKVEIKR (SEQ ID NO:20)的轻链可变域。
3.权利要求2的药物配制剂，其中该第一和第二Fe多肽形成与包含所述抗原结合臂的Fab分子相比提高所述抗体片段的稳定性的Fe区。
4.权利要求1-3任一项的药物配制剂,其中该抗c-met抗体包含(a)包含氨基酸序列SEQ ID NO:19、CHl序列和第一 Fe多肽的第一多肽和(b)包含氨基酸序列SEQ ID NO:20和CLl序列的第二多肽。`
5.权利要求4的药物配制剂,其中该抗c-met抗体进一步包含(C)包含第二Fe多肽的第二多妝。
6.权利要求1-5任一项的药物配制剂，其中该第一Fe多肽包含图2 (SEQ ID NO:17)所示Fe序列且该第二 Fe多肽包含图3 (SEQ ID NO: 18)所示Fe序列。
7.权利要求1-6任一项的药物配制剂,其中该抗c-met抗体为onartuzumab。
8.权利要求1-7任一项的药物配制剂,其中该抗c-met抗体与onartuzumab结合相同表位。
9.权利要求1-8任一项的药物配制剂,其中该抗c-met抗体以介于约10mg/mL和约100mg/mL之间(例如约15mg/mL和约75mg/mL)的浓度存在。
10.权利要求9的药物配制剂,其中该抗c-met抗体以约60mg/mL的浓度存在。
11.权利要求1-10任一项的药物配制剂，其中该糖类以约75mM至约200mM(例如约IOOmM至约150mM)的浓度存在。
12.权利要求11的药物配制剂，其中该糖类以约120mM的浓度存在。
13.权利要求1-12任一项的药物配制剂，其中该糖类为二糖。
14.权利要求13的药物配制剂，其中该二糖为海藻糖。
15.权利要求13的药物配制剂，其中该二糖为蔗糖。
16.权利要求1-15任一项的药物配制剂，其中该组氨酸缓冲剂处于约ImM至约50mM(例如约ImM至约25mM)的浓度。
17.权利要求16的药物配制剂，其中该组氨酸缓冲剂处于约IOmM的浓度。
18.权利要求1-17任一项的药物配制剂，其中该组氨酸缓冲剂为组氨酸乙酸酯。
19.权利要求1-18任一项的药物配制剂，其中该聚山梨酯以大于0.02%且小于约0.1%的浓度存在。
20.权利要求19的药物配制剂，其中该聚山梨酯以约0.04%的浓度存在。
21.权利要求1-20任一项的药物配制剂，其中该聚山梨酯为聚山梨酯20。
22.权利要求1-21任一项的药物配制剂，其中该配制剂是用稀释剂(例如0.9%NaCl)稀释的。
23.权利要求22的药物配制剂,其中该抗c-met抗体以约lmg/mL的浓度存在。
24.—种抑制c-met激活的细胞增殖的方法,所述方法包括使细胞或组织与有效量的权利要求1-23任一项的药物配制剂接触。
25.—种调控与HGF/c-met信号传导轴失调有关的疾病的方法，所述方法包括对受试者施用有效量的权利要求1-23任一项的药物配制剂。
26.一种治疗具有增殖性病症的受试者的方法，所述方法包括对该受试者施用有效量的权利要求1-23任一项的药物配制剂。
27.权利要求26的方法，其中该增殖性病症为癌症。
28.权利要求27的方法，其中该癌症为肺癌(例如非小细胞肺癌(NSCLC))、成胶质细胞瘤、胰腺癌、肉瘤、肾细胞癌、肝细胞癌、胃癌、结肠直肠癌、和/或乳腺癌。
29.权利要求24-28任一项的方法，进一步包括第二治疗剂。
30.一种制备权利要求1-23任一项的药物配制剂的方法。
31.一种制品，其包括容器，该容器中装有权利要求1-23任一项的药物配制剂。
32.—种制备权利要求31的制品的方法。
【文档编号】C07K16/28GK103781493SQ201280035071
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2012年6月29日 优先权日:2011年6月30日
【发明者】B.卡巴科夫, 刘骏, N.皮罗斯, 朱青, B.德姆勒 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司