专利名称：一种中生菌素原药的制备方法
技术领域：
本发明属于微生物源生物杀菌剂领域，具体涉及中生菌素原药的制备方法。
背景技术：
中生菌素有效成分为链丝菌素(streptothricins),该有效成分是由Waksman等于1942年从淡紫灰链霉菌(Streptomyces Iavendulae)中分离到的一类广谱抗生素。中生菌素各组分的结构中均包含一分子古洛糖胺、一分子链里定内酰胺和数量不等的β_赖氨酸，对多种细菌和真菌具有强烈的抑制效果，属蛋白质合成抑制剂，其抑菌活性与结构中所含赖氨酸的数目呈正相关，即赖氨酸数量越多，抑菌活性越强。秦岭链霉菌(Streptomycesqinlingensis.sp.nov.)是国内报道的另一株中生菌素产生菌,其在“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”的保藏号为CGMCC N0.1381。另外中生菌素也可能由其它微生物菌种发酵得到。目前福建生产的原药是先过滤，然后浓缩滤液，最后再把滤渣加进去，喷雾干燥这样就没有去除有机杂质，导致加工成可湿性粉剂的湿润时间超过常规的90秒，且因含有有机杂质，产品容易吸潮，不易保存，储存期间分解率10%。文献报道的3%可溶性粉剂是直接喷雾干燥的滤液，然后进行的制剂加工，只能加工3%左右低含量产品，且产品吸潮很厉害，不能加工成高含量产品。因此，从中生菌素发酵液中制备中生菌素原药，尚未见高效、精提，且可作为加工各种类型制剂原料的制备方法的报道。
发明内容
有鉴于此，为了克服现有技术的不足，本发明提供一种中生菌素原药的制备方法，该方法精度和收率均高，所制备原药可作为加工各种类型制剂的原料。本发明提供一种中生菌素原药的制备方法，所述方法包括步骤:(I)调整中生菌素发酵液的PH值至2-7，(2)采用板框或陶瓷膜过滤所述pH中生菌素发酵液至重量百分比含量在0.1 %-10%, (3)以温度50°C _100°C在喷干塔内对所述含量的发酵液进行喷雾干燥。进一步，所述步骤(2)控制所述过滤液的pH值为3.0, (3)以温度85°C在喷干塔内对所述含量发酵液进行喷雾干燥。根据发明人的反复试验证明，在温度较低时，尤其是温度低于65°C时，物料会粘附在塔内，不能顺利排出，无法连续生产；温度在65°C _85°C时，产品收率不断提高；而温度超过95°C时，由于温度过高,反而会造成产品高温烘烤分解,收率再次降低。温度为85°C时，收率最高，为90%，且水分含量小于3%，符合农药对水分的要求。进一步，所述步骤(2)按重量比浓缩发酵滤液:载体=I: 0.0001-0.1加入载体，浆叶转速10-120r/min制浆。进一步，所述载体为白炭黑、高龄土、膨润土、硅藻土、凹凸棒土、轻质碳酸钙、滑石粉、陶土、叶蜡石、蒙脱石、黏土、 伊利石、云母粉、珍珠岩、方解石中的一种或多种的组合。由于原药中含有载体，流动性良好，有利于产品顺利从喷雾干燥塔内排出，减少了粘壁，保证了喷雾干燥过程顺利进行；产品吸潮性降低，有利于产品保存和后续制剂加工过程。进一步，所述步骤⑵板框滤液按照以下分步骤进行树脂过滤浓缩:A.含量为0.1% -1%、pH为3-3.5的发酵滤液，用阳离子交换树脂吸附至饱和，B.用体积比大于1.5倍树脂量的水洗去未发生离子交换的残留液和杂质，C.用体积比3-7倍树脂量的0.1-1.5mol/L浓度的阳离子洗脱液，以0.5-3倍树脂量/小时的流速洗脱。进一步，所述阳离子交换树脂骨架选用聚苯乙烯系或聚丙烯酸(酯)系树脂。进一步，所述阳离子洗脱液是无机盐水溶液、无机酸水溶液或无机碱水溶液，洗脱剂的阳离子组成是H+、K+、Na+、NH4+等无机离子中的一种或几种。进一步，所述洗脱液采用孔径0.001微米-0.01微米纳滤膜过滤或负压真空浓缩，至含量在1% -12%。与现有技术相比，本发明的有益效果在于:1.首次提出收率高、易于操作的中生菌素原药的精提方法。2.本发明方法精提纯度广品纯度最闻可达45.3%。3.过滤后，去除了有机杂质，添加了惰性载体，提高了后续制剂加工性能。4.提纯后的原药可以加工成性能优异的农药制剂，比如加工成3%可湿性粉剂湿润时间小于40秒，两年常温储存更加稳定的农药制剂(比如加工成3%可湿性粉剂两年常温储存分解率小于8%，优于传统方法的1`0% )。5.树脂过滤提纯所得原药，由于去除了杂质，为全水溶性，既可以加工成固体制剂也可以加工成液体制剂，产品可以加工高含量和系列混配制剂，进行系列化开发。克服了以往产品只能加工成低含量可湿性粉剂的缺陷。
具体实施例方式实施例1:采用33%工业盐酸调整中生菌素发酵液pH值为3，采用板框过滤，过滤液PH值控制在3.0，浓缩至含量在10%，在浓缩液中加入0.01 %白炭黑组合制浆，制浆时浆叶转速50r/min。在85°C喷雾干燥。制得含载体原药含量为14%，水分含量为1.8%，为均匀的灰褐色粉末，适合加工成农药固体制剂。实施例2:采用90%以上草酸调整中生菌素发酵液pH值在6，采用孔径为0.05um陶瓷膜过滤，过滤液pH值控制在3.0，浓缩至含量在I %。当滤液pH值在3.0以上时，用33%工业盐酸或者90%以上草酸调整。在浓缩液中加入10%硅藻土制浆，制浆时浆叶转速100r/min。在85°C喷雾干燥。制得含载体原药含量为14.6%，水分含量为2.1%，为均匀的灰褐色粉末，适合加工成农药固体制剂。实施例3:采用33%工业盐酸调整生菌素发酵液pH值在3，采用孔径在0.05um陶瓷膜过滤，至含量在0.1%。过滤液pH值控制在3.0，当滤液pH值在3.0以上时，用33%工业盐酸或者90%以上草酸调整。在浓缩液中加入10%方解石制浆，制浆时浆叶转速在80r/min之间。喷雾干燥时，塔内温度(出风温度)控制在85°C。收率最高，为95%，水分含量
2.3%。实施例4(I)采用pH值3.5中生菌素溶液(当滤液pH值在3.5以上时，用33%工业盐酸调整)，采用板框过滤。(2)板框滤液含量为1%，采用001X4(氢型)聚苯乙烯系树脂吸附，吸附流速为1.2树脂体积/小时。(3)吸附完成的树脂，采用3倍树脂体积的清水洗涤，洗涤速度为I倍树脂体积/小时，洗涤至透光率大于85%。(4)洗涤后的树脂采用氨水进行洗脱，洗下有效成分，氨水浓度0.5mol/L，流速为2倍树脂体积/小时。(5)洗脱液中生菌素含量低于4%，采用真空薄膜浓缩机进行浓缩，浓缩至含量12%，浓缩时温度控制在60°C ；(6)喷雾干燥时，塔内温度(出风温度)控制在85°C。中生菌素干燥收率最高，为94%,水分含量1.7%,水不溶物小于0.1 % ,产品含量45.3%,远远高于目前市场销售的12%母粉。由于去除了杂质，为全水溶性，既可以加工成固体制剂也可以加工成液体制剂。实施例5(I)采用pH值为2的中生菌素溶液(当滤液pH值在2以上时，用33%工业盐酸调整)，采用板框过滤。(2)板框滤液含量为0.5%，采用001X4(氢型)聚苯乙烯系树脂吸附，吸附流速为1.2树脂体积/小时。(3)吸附完成的树脂，采用7倍树脂体积的清水洗涤，洗涤速度为0.1倍树脂体积/小时，洗涤至透光率大于85%。(4)洗涤后的树脂采用氨水进行洗脱，洗下有效成分，氨水浓度0.5mol/L，流速为3倍树脂体积/小时。(5)洗脱液中生菌素含量低于4%，采用孔径0.001微米滤膜过滤(有浓缩和脱盐作用)，浓缩至含量10%。(7)喷雾干燥时，塔内温度(出风温度)控制在85°C。中生菌素干燥收率最高，为94.4%,且水分含量小于3%,水不溶物小于0.1 % ,产品含量45.7%,远远高于目前市场销售的12%母粉。实施例6(I)采用pH值3.5中生菌素溶液(当滤液pH值在3.5以上时，用33%工业盐酸调整)，采用板框过滤。(2)板框滤液含量为1%，采用001X4(氢型)聚苯乙烯系树脂吸附，吸附流速为
1.2树脂体积/小时。(3)吸附完成的树脂，采用3倍树脂体积的清水洗涤，洗涤速度为I倍树脂体积/小时，洗涤至透光率大于85%。(4)洗涤后的树脂采用氨水进行洗脱，洗下有效成分，氨水浓度0.5mol/L，流速为2倍树脂体积/小时。(5)洗脱液中生菌素含量低于4%，采用孔径0.01纳米滤膜过滤(有浓缩和除盐作用)，浓缩至含量6%。(8)喷雾干燥时，塔内温度( 出风温度)控制在85°C。中生菌素干燥收率最高，为96%,且水分含量小于1.4%,水不溶物小于0.1 % ,产品含量45.4%,远远高于目前市场销售的12%母粉。试验例1:纯度试验:对上述实施例1-6所得中生菌素原药纯度测定结果中生菌素原药纯度的测定:
权利要求
1.一种中生菌素原药的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤:(1)调整中生菌素发酵液的PH值至2-7，(2)采用板框或陶瓷膜过滤所述pH中生菌素发酵液至重量百分比含量在0.1% -10%, (3)以温度50°C -100°C在喷干塔内对所述含量的发酵液进行喷雾干燥。
2.按照权利要求1所述的中生菌素原药制备方法，其特征在于，所述步骤(2)控制所述过滤液的pH值为3.0, (3)以温度85°C在喷干塔内对所述含量发酵液进行喷雾干燥。
3.按照权利要求1所述的中生菌素原药制备方法，其特征在于，按重量比浓缩发酵滤液:载体=I: 0.0001-0.1加入载体，浆叶转速10-120r/min制浆。
4.按照权利要求3所述的中生菌素原药制备方法，其特征在于，所述载体为白炭黑、高龄土、膨润土、硅藻土、凹凸棒土、轻质碳酸钙、滑石粉、陶土、叶蜡石、蒙脱石、黏土、伊利石、云母粉、珍珠岩、方解石中的一种或多种的组合。
5.按照权利要求3所述的中生菌素原药制备方法，其特征在于，所述步骤(2)板框滤液按照以下分步骤进行树脂过滤浓缩:A.含量为0.1% -1%且pH为3-3.5的发酵滤液，用阳离子交换树脂吸附至饱和，B.用体积比大于1.5倍树脂量的水洗去未发生离子交换的残留液和杂质，C.用体积比3-7倍树脂量的0.1-1.5mol/L浓度的阳离子洗脱液，以0.5-3倍树脂量/小时的流速洗脱。
6.按照权利要求5所述的 中生菌素原药制备方法，其特征在于，所述阳离子交换树脂骨架为聚苯乙烯系或聚丙烯酸(酯)系树脂。
7.按照权利要求5所述的中生菌素原药制备方法，其特征在于，所述阳离子洗脱液是无机盐水溶液、无机酸水溶液或无机碱水溶液。
8.按照权利要求5所述的中生菌素原药制备方法，其特征在于，所述洗脱液采用孔径.0.001微米-0.01微米纳滤膜过滤或负压真空浓缩，至含量在1% -12%。
全文摘要
本发明提供一种中生菌素原药的制备方法，所述方法包括步骤(1)调整中生菌素发酵液的pH值至2-7，(2)采用板框或陶瓷膜过滤所述pH中生菌素发酵液至重量百分比含量在0.1％-10％，(3)以温度50℃-100℃在喷干塔内对所述含量的发酵液进行喷雾干燥。板框滤液还可进行树脂过滤浓缩至更高精度和含量。本发明关于中生菌素原药的精提方法尚未见报道。本发明方法收率可高达90％，精提纯度最高可达45.3％。所制备原药可作为加工各种类型制剂的原料。
文档编号C07H1/06GK103087126SQ20131003499
公开日2013年5月8日 申请日期2013年1月30日 优先权日2013年1月30日
发明者杨宏勃 申请人:杨宏勃