用于检测次氯酸的荧光探针的制备及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及用于检测次氯酸的荧光探针的制备及其应用。具体地，本发明的荧光探针为一类2-苯并噻唑啉苯酚类化合物，其可作为荧光探针用于次氯酸/次氯酸根的检测。这类探针可实现如下技术效果中的至少一个：高灵敏度高选择性地识别次氯酸/次氯酸根；可以瞬时对次氯酸/次氯酸根实现响应；可以实现对次氯酸/次氯酸根的实时检测；性质稳定，可以长期保存使用；有利于在生理水平条件下对次氯酸/次氯酸根进行检测；以及具有较强的抗干扰能力。
【专利说明】用于检测次氯酸的荧光探针的制备及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及用于检测次氯酸的荧光探针的制备及其应用。具体地，本发明的检测 次氯酸的荧光探针为2-苯并噻唑啉苯酚类化合物，其可在生理水平条件下对次氯酸进行 实时高灵敏高选择性识别应用，或者其可测定生物样品和水中次氯酸/次氯酸根的浓度。
【背景技术】
[0002] 次氯酸（HClO)或次氯酸根（CKT)是活性氧簇中极其重要的一种，它从在生物体 内抵抗病原体入侵到我们日常生活中的饮用水消毒中都起着关键的作用。在生物体内，当 病原体入侵时，吞噬体中髓过氧化物酶（MPO)催化过氧化氢和氯离子产生次氯酸根来消灭 病原体维持生物体的正常运行。此外，次氯酸根还能调节蛋白质、DNA和RNS等各种生物分 子的化学变化。在我们日常生活中，次氯酸根由于其强氧化性被广泛用作消毒剂和漂白剂， 比如供应水的消毒、游泳池的消毒等，因此，次氯酸根充斥于我们生活的环境中。
[0003] 然而，无论是体内的CKT过量产生还是从体外过量摄取CKT都是对人体健康的重 大威胁：由于CKT高反应活性及无针对性，当体内过量的CKT产生时它会像摧毁病原体微 生物那样进攻宿主细胞，造成宿主组织的损害，引起相关联的一系列疾病，例如肾疾、动脉 硬化、炎症甚至癌症。另外，当环境中CKT及其生成物被人体摄入后，也会带来一系列的不 良反应。例如，用氯消毒后的水中或其它环境中残留生成的氯酸盐及亚氯酸盐会引起胃部 不适等，更严重的是，存在产生剧毒的有机消毒副产物（DBPS)比如三氯甲烷和氯乙酸的潜 在威胁。因此，无论是在活细胞或是环境中，我们都需要发展一种能够快速检测CKT的简 单高效手段。
[0004] 到目前为止，在滴定法、比色法、电化学检测法、色谱法和荧光探针法等众多 CKT检测方法中，荧光探针法因具有操作简单、高灵敏度和能够实现实时原位成像分析等 优点而成为研宄人员关注的焦点。然而不幸的是，目前报道的荧光探针仍存在众多缺陷，如 灵敏度低、选择性差、响应速度慢以及合成复杂等。为了进一步揭示CKT的生理功能及致 病机理，发展高灵敏度、高选择性、合成简单且能够实时响应的荧光探针是本领域技术人员 急需解决的问题。
【发明内容】
[0005] 本领域急需一种高灵敏度、高选择性且制备简单的实时响应次氯酸的荧光探针， 从而能够有效检测特别是能够在生理水平条件下检测次氯酸。为此，本发明合成了一类新 颖的次氯酸荧光探针，其合成简单、稳定性好、和/或灵敏度高、和/或选择性高，和/或能 够快速识别次氯酸。本发明的探针可在生理水平条件下进行次氯酸的测定。
[0006] 具体而言，本发明提供了如下次氯酸荧光探针的合成方法：其为2-苯并噻唑啉苯 酚类化合物，其结构如下：
[0007]
【权利要求】
1. 化合物的制备方法，其中包括将一定摩尔比的邻氨基苯硫酚类化合物和水杨醛类化 合物溶于有机试剂中，然后高温下加热一段时间，反应结束后去除有机溶剂，最后将残留液 进行柱色谱分离，其中所述的化合物具有以下结构：
上式中成，r2,r3,r4,r5,r6, &和r8独立地选自氢原子，直链或支链烷基，直链或支链 烷氧基，磺酸基，酯基，羧基；Ri，R2,R3,R4,R5,R6,R7,R8可以相同或不同。
2. 根据权利要求1的方法，其中所述的化合物为
3. 根据权利要求1或2的方法，其中反应温度是60°C?140°C。
4. 根据权利要求1或2的方法，其中反应温度是120°C。
5. 根据权利要求1或2的方法，其中反应时间是8h?10h。
6. 根据权利要求1或2的方法，其中反应溶剂是甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、乙腈、甲苯 和二甲苯等有机试剂中的一种或两种。
7. 根据权利要求1或2的方法，其中邻氨基苯硫酚类化合物与水杨醛类化合物的摩尔 比为1 :1至1 :5。
8. 根据权利要求1或2的方法，其中所述的邻氨基苯硫酚类化合物是邻氨基苯硫酚，所 述的水杨醛类化合物是水杨醛。
9. 根据权利要求1或2的方法，其中将1 :1至1 :5的邻氨基苯硫酚和水杨醛溶于正丁 醇和甲苯的混合溶剂中，然后以120°C恒温加热10h，反应结束后旋蒸得到粗产品，然后使 用二氯甲烷进行柱色谱分离获得所述纯净化合物。
10. 检测样本（例如血液样本、自来水等）中次氯酸浓度的方法，其包括本发明的探针 与待测样本接触的步骤，优选地，本发明的检测方法在缓冲液中进行（例如在磷酸盐缓冲 液中）；任选地，在接触步骤之后（例如1 一 2分钟之后）测量液体的荧光光谱。
【文档编号】C07D277/66GK104478826SQ201410784125
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年12月16日 优先权日:2014年12月16日
【发明者】徐祖钧, 李昌旺 申请人:山东省章丘市第四中学