专利名称：新的a1腺苷受体兴奋剂和拮抗剂的制作方法
本申请是1994年10月28日申请的申请顺序号为08／330，640的待审申请的继续申请；它也是1993年10月28日申请的申请顺序号08／144，459(现为美国专利号5，446，046)的申请的继续申请。
腺苷是一种由身体中的所有细胞产生的细胞外信使物质。腺苷本身具有重要的临床应用，一方面表现腺苷的作用，另一方面又中和其作用。在心脏(其功能关键依赖于供氧充足的一种器官)中，腺苷可调节供氧(冠状血流)与需氧(心脏工作)之间的平衡。从工作中的心脏细胞释放的腺苷通过冠脉扩张增加供氧，并通过减慢心率和调节β-肾上腺素能的兴奋作用来减少氧消耗。当心脏的供氧有限如冠状动脉狭窄时，腺苷的保护性作用是极为重要的。
最近的几件文献对腺苷系统进行了详细描述(Belardinelli，L．，J．Linden，R．M．BerneProg．Cardiovasc．Dis．32∶73-97；Belardinelli，L．，A．PellegJ．Cardiovasc．Elecrrophysiol．1∶327-339；Olsson，R．A．，J．D．PearsonPhysiol．Rev．70761-845)。心脏的腺苷系统包括三个部分(1)腺苷生成的机制；(2)腺苷受体和将其与效应体结合的蛋白质；以及(3)去除腺苷的机制。通过使用如腺苷受体拮抗剂和腺苷吸收抑制剂药物的一种或多种这些系统的选择性变化，可以改进对治疗有利的腺苷的作用。
当需氧大于供氧时，腺苷生成增加，这样促进了腺苷核苷酸的降解。从神经末梢和神经介质释放的腺苷酸的降解以及S-腺苷高半胱氨酸(甲基化反应的副产物)的降解是心脏腺苷的又一来源。心肌和冠状血管细胞吸收几乎所有由心脏产生的腺苷，并使腺苷重掺入到细胞的核苷酸库中。
至少有两种类型的受体介导心脏腺苷的作用。例如，A1腺苷受体(A1AR)通过减慢心率以减少氧消耗，A2腺苷受体(A2AR)通过使血管舒张而增加供氧。腺苷对心脏细胞的作用可以是直接的(cAMP-非依赖性)或是间接的(cAMP依赖性)。直接作用包括对AV结的负变导性效应。这些电生理学效应是腺苷的抗心率失常特性的基本原理；腺苷对控制阵发性室上心搏过速(PSVT)极为有效(＞90％)。兴奋剂刺激的(但不是根本的)腺苷酸环化酶活性的A1AR介导的抑制作用构成腺苷的间接作用。而腺苷的直接作用出现在没有兴奋剂时，通过腺苷环化酶起作用，间接作用反映了当受到比如β-肾上腺素能兴奋剂的刺激时这些酶的抑制作用。
许多采用选择性受体兴奋剂的药理学研究支持A2ARs介导冠状血管舒张这一观点。虽然内皮细胞含有A2ARs，因而在血管舒张中发挥作用，但它们不是必需的，因为腺苷可作用于冠状血管平滑肌细胞，使之松弛。
当腺苷用作药物时，它的副作用通常只是短暂的，表现为其在体内极为快速的降解(秒)。在PSVT的诊断和治疗中腺苷的安全性现已很明确了。阻止腺苷类似物的治疗进展的一个重要因素是腺苷作用于各种组织时普遍存在的特点。
有两种药物根据它们是否增强或减弱核苷酸的作用来改变腺苷的作用。细胞膜核苷酸转运蛋白的抑制剂阻止腺苷从细胞外去除，这样就使浓度升高了从而增强了它的作用。腺苷吸收阻滞剂也抑制人类红细胞和心细胞膜的核苷酸转运系统，增强狗的腺苷的心脏作用。
甲基黄嘌呤能完全拮抗腺苷与A1AR和A2AR的结合。某些天然产的甲基黄嘌呤如咖啡因和茶碱可拮抗腺苷的心血管作用。例如，给已服用茶碱的病人服用腺苷，不会产生AV阻断和PSVT停止。然而，那些甲基黄嘌呤对实验动物和人的腺苷的电生理和血管舒张效应的拮抗作用相对较弱，且更为重要的是它是非选择性的。茶碱也能改善腺苷的非心脏效应如潮红、局部疼痛以及呼吸兴奋。
合成的烷基黄嘌呤如8-环戊基-1，3-二丙基黄嘌呤(CPX；见美国专利号4，364，922和4，980，379)是较茶碱或咖啡因在A1AR上明显更为有效的选择性拮抗剂。
本发明是有关某些能与腺苷受体结合并具有极强的亲和力、专一性和选择性的新化合物的发明。在此特别强调的是包含环氧化物的黄嘌呤和腺苷类似物。本文更详细指出了这些腺苷兴奋剂和拮抗剂在许多临床应用(包括心脏和肾脏的调节)中具有治疗作用。其中这些新化合物既是腺苷兴奋剂，又是腺苷拮抗剂。
本发明的一个实施方案中，将新化合物1，3-二丙基-8-{3-噁三环[3．1．2．02，4]辛-6(7)-基}黄嘌呤(在此称作ENX)用作腺苷拮抗剂。突出的是，已发现ENX是唯一有效、专一且高度选择性的A1腺苷受体。将ENX化合物的特殊对映异构体用于合成和测验其相对活性。ENX的R-和S-对映异构体的试验揭示了S-对映异构体的优点，即较其外消旋物或R-对映异构体而言，对A1AR的选择性更强，更有效。但是，由于R-对映异构体的生物半衰期较短，它可在需要短期产生作用的一定的治疗应用中更为有益。
本发明还涉及其它在环外取代基中含环氧化物的黄嘌呤和腺苷。本发明更进一步的实施方案包括可用作腺苷的兴奋剂或拮抗剂并具有治疗作用的含ENX的组合物和制剂，或它们的类似物或衍生物。
本发明另一方面涉及使用这些已公开的调节腺苷的生物活性的化合物的方法。这些化合物或含此化合物的组合物，可以用来调节腺苷，例如作为腺苷受体的兴奋剂或拮抗剂的效应。本化合物的这种拮抗剂活性可用于治疗腺苷含量升高的疾病；当需要腺苷受体的刺激时此兴奋剂便起作用了。这些疾病包括(但不限于此)心、肾、肝或肺疾病，如心率失常、肾衰、肝功能衰竭腹水和哮喘。调节腺苷活性也可用于治疗成人初始糖尿病。
还发现一些N6-取代的腺苷化合物也具有象A1腺苷受体兴奋剂一样的活性。现已合成了N6-(5，6-环氧降冰片-2-基)腺苷的外-和内-两种外消旋异构体，它们都是A1腺苷受体的有效且高度选择性的兴奋剂。制备这些化合物时，通过最佳的库尔提斯重排可以合成并得到外-和内-降冰片基胺。
合成本发明化合物的新方法也已作了描述，这也是本发明的一部分。
图1是概述了合成含环氧化物部分、具有C-8取代基的1，3-二丙基黄嘌呤的反应图解。
图2是用二甲基二环氧乙烷合成含环氧化物部分的腺苷衍生物的反应图解(反应图解1)。反应图解1用特定的外-或内-5-氨基降冰片-2-烯合成相应的腺苷衍生物的外-或内-异构体。图2(反应图解1)还显示了降冰片烯与酰基氯(偏-氯苯甲酸)的氧化过程，这是已公认的氧化反应，但可导致嘌呤的N-1位的氧化。
图3表示(2R)-和(2S)-及(2S)-内-5-降冰片烯-2-羧酸的合成。
图4A-4D表示ENX对腺苷(Ado)的负变导性(S-H间期延长)效应的选择性拮抗作用。图4A-4B表示在有或无0．4μM ENX存在时输注腺苷(4μM)3分钟所导致的S-H间期延长(A1反应，图4A)和冠脉传导增强(A2反应，图4B)的模拟记录。ENX抑制腺苷的负变导性效应，但不会拮抗由腺苷所致的冠状血管舒张(冠脉传导增强)。图4C-4D表示ENX(0．4μM)对腺苷(4μM)引起的A1受体介导的S-H间期增加(而不是A2受体介导的冠状血管舒张)的选择性拮抗作用。这些值是从五只几内亚猪心脏得到的平均数±SEM。星号表示这些值与腺苷本身相比具有显著性差异(P＜0．05)。
图5A-5D表示ENX对左室压力(LVP)和dP／dtmax不产生作用。几内亚猪心脏前房以300毫秒的不变周期搏动，并出现逐渐较高的ENX浓度，如2和200μM。在同样的心脏中，仅ENX不会引起对其束间期刺激的显著变化(未表示)。在其它三个心脏中得到完全相同的结果。
图6表示ENX和异丁基黄嘌呤(IBMX)对DDT1MF-2细胞匀浆的磷酸二酯酶(PDE)活性的作用。IBMX的数据在图中以方块表示，它清楚地表明了磷酸二酯酶活性的抑制作用。与此相对照，给予ENX后的磷酸二酯酶的活性(在图中以圆圈表示)保持不变，没有出现抑制作用。
图7表示ENX拮抗几内亚猪心脏中腺苷的负变导性效应(S-H延长)的专一性作用。测定了ENX(2nM，2μM)对由腺苷(ADO，4μM)，镁(Mg2+，3mM)和碳酰胆碱(CCh0．14μM)而致的类似S-H延长所产生的作用。每一条线图的高度代表四个实验的平均值±SEM。仅仅腺苷引起S-H间期延长受到ENX的拮抗。
图8表示静脉内给予0．1mg／kg ENX(外消旋的)混合物、ENX(R-对映异构体)、ENX(S-对映异构体)以及用赋形剂作为对照时大鼠总的尿排出量。
图9A-9B表示合成外-或内-5-降冰片-2-烯或内／外-5-降冰片-2-烯盐酸盐的可选择的两个图。图中符号说明(ⅰ)KNCS，H2SO4；(ⅱ)NaOH；(ⅲ)SOCl2／ClC(O)OEt，NEt3；(ⅳ)NaN3，H2O，△(ⅴ)TFA；(ⅵ)K2CO3；(ⅶ)NaN3；H2O，2M HCl／CCl4。图9A是在此之前未描述的图；图9B是制备外-5-降冰片-2-烯的标准图。
本发明涉及新的化合物，含这些化合物的制剂，以及合成这些化合物的方法。本发明的化合物或组合物可优先用作腺苷受体的兴奋剂或拮抗剂。特别是，这些化合物既能促进又可拮抗由A1腺苷受体(A1AR)介导的负变导性、变时性、变力性效应。在心脏中，这些化合物既能促进又可拮抗由A1AR介导的负变导性、变时性、变力性效应，而在肾脏中，拮抗剂通过A1AR促进排尿。
本发明化合物有两种常见类型(1)包含环氧化物(环氧乙烷基)部分、含C-8取代基的1，3-二烷基黄嘌呤，和(2)包含环氧化物部分、含N-6取代基的腺苷。在本发明的优选实施方案中，黄嘌呤环氧化物是环氧化物部分以共价键与黄嘌呤的C-8取代基结合的1，3-二烷基黄嘌呤。优选的黄嘌呤或腺苷的环氧化物是那些以环氧化物部分作为环外取代基的环氧化物。
1，3-二烷基黄嘌呤的一级通式如下式Ⅰ所示
其中R1和R2可以相同或不同，可以是长为1-4C的烷基；n=0-4。还应清楚R1和／或R2可以是H。有一个R基团是H、另一个R基团是烷基的化合物为烷基黄嘌呤的环氧化物；两个R基团均为烷基的化合物为二烷基黄嘌呤的环氧化物。
1，3-二烷基-8-噁三环烷基黄嘌呤的通式如下面式Ⅱ所示
其中R1和R2可以相同或不同，可以是H或1-4C的烷基；R3可以是O或1-4C的烷基；n=0-4。
长为1-4C的聚亚甲基链可将环氧化物部分与1，3-二甲基黄嘌呤的C-8相连接，如式1所示。环氧化物基团也可是直接或通过长1-4C的(聚)亚甲基与黄嘌呤部分的C-8相连的环外取代基的一部分，如式Ⅱ所示。式Ⅱ所示的环外取代基可以是二环烷基(形成噁三环烷基取代基)。其它环外环氧化物结构也可以是此化合物的组成部分，根据本说明书公开的内容，这对于本领域技术人员来说是很容易知道的。二环烷基可进一步含有链烯基以形成第二个环氧化物部分。
图1描绘的是8-取代的1，3-二丙基黄嘌呤的总合成图。
本发明的一个优选实施方案是化学名为1，3-二丙基-8-{3-噁三环[3．1．2．02，4]辛-6(7)-基}-黄嘌呤的化合物，通常称作环氧降冰片基黄嘌呤或ENX。ENX的通式如下面式Ⅲ所示
已证实ENX作为腺苷拮抗剂具有非常优越且未料想的特性，即对A1腺苷受体的高度选择性和亲和力。实际上，患有任何内源性腺苷水平过量的疾病的病人，都可从使用本发明拮抗剂化合物或含此化合物的组合物治疗得到改善。例如，本发明涉及利用本拮抗剂化合物作为利尿剂或治疗肾衰。另外，本发明拮抗剂化合物或含这些化合物的组合物可用于治疗一些影响心脏的疾病，包括伴有缺氧或局部缺血(心肌梗塞形成)的心律缓慢，病窦结综合征，还可用于心衰，其中拮抗剂的正变导性效应可起作用。其它由内源性腺苷的水平升高而导致或受此影响的疾病也可用本发明腺苷拮抗剂治疗。
本发明化合物如ENX所具有的对A1腺苷受体的高度选择性和亲和力，使得它们特别适用于作为利尿剂。已证实ENX作为利尿剂的效能至少与速尿(Lasix)(人类和动物医学常用的利尿剂)的效能一样强。因此，应该清楚，使用ENX的方式与速尿对病人产生利尿作用的使用方式可以进行比较。
ENX所具有的利尿活性可用于治疗一些通常影响哺乳动物特别是人类的疾病。例如，充血性心力衰竭(CHF)就是一种广泛使用利尿剂的疾病。高血压(通常是CHF的并发症)也经常用利尿剂治疗。已知ENX与目前市售的用于治疗这些疾病的利尿剂如Lasix的利尿活性和效能具有可比性。因此，本发明化合物特别是ENX可以按治疗这些疾病的同样方式使用。
本发明腺苷拮抗剂也可称作肾保护性化合物。已知与A1腺苷受体结合的ENX，在使用已知的肾中毒性的对照剂期间可用来阻断那些受体，或用于中和一些抗菌素(如庆大霉素、两性霉素或环孢菌素)的肾中毒性作用的治疗中。
此外，本发明A1腺苷拮抗剂如ENX可用于治疗肝功能衰竭腹水。对于本领域技术人员来说很清楚，进行治疗方案的某些修改，ENX也是适用的，可用于治疗肝功能衰竭的非移植病人，移植前病人，或患肝肾综合征的移植病人。
作为腺苷A1受体抑制剂和利尿剂的这些活性表明本发明拮抗剂化合物如ENX也可用作止痛剂，特别是用于治疗心绞痛、跛行和伴有局部缺血、缺氧或reperfusion的心律缓慢。另外，已知外源性地使用腺苷用于心脏诊断过程(比如，假设心脏脉管系统)时会产生短暂的包括疼痛在内的副作用。由于这些副作用是因为腺苷与A1受体(而不是A2受体)的结合和对它的刺激而致，因此抑制腺苷与A1受体结合的腺苷拮抗剂可用来消除接受诊断过程的病人所经受的疼痛。抑制腺苷结合的本发明化合物(包括ENX)选择性地与A1腺苷受体结合(这样阻止或消除了因腺苷与A1受体结合而致的任何副作用)。
而且，本发明拮抗剂化合物(包括ENX)可用作支气管扩张药，比如止喘药。已知ENX可松弛气管平滑肌，这样产生支气管扩张。其它很弱的黄嘌呤衍生物如茶碱也通常具有这种特性。本发明拮抗剂化合物用作止喘治疗的这种用途表明此化合物经吸入途径给药时也是有效的。
也可使用本发明化合物的其它给药途径。例如，通常根据适用于所治疗疾病的最佳途径来决定如何给予该化合物。因此，对于本领域普通技术人员来说，很清楚本化合物可以通过静脉内，口服，经皮等方式给药，以单剂量或多剂量方式给药。
本领域普通技术人员还知道本发明化合物的上述用途可以通过使用具有不同的生物活性的特殊异构体而达到最佳。已知含手性中心的ENX至少存在两种对映异构体形式。采用本技术领域已知的方法，已将ENX对映异构体(即S-对映异构体和R-对映异构体)合成为5-降冰片烯-2-羧酸的R-异构体和S-异构体。参见Poll，T．et al．(1985)Tetrahedron Lett．26∶3095-3098，和Poll，T．et al．(1989)Tetrahedron Lett．30∶5595-5598．ENX的内-R-和内-S-对映异构体分别如式Ⅳ和Ⅴ所示。
对ENX的两种对映异构体的研究表明，与A2AR相比这两种异构体对A1AR具有选择性。S-对映异构体较R-对映异构体具有更长的作用周期。虽然R-和S-对映异构体的外消旋混合物可具有其中一种或同时具有两种异构体的生物活性。现已知S-异构体和R-异构体可分别用作单一的对映异构体，以产生任意一种对映异构体的特别有利的活性。
例如，ENX的外消旋混合物所表现的生物活性约有80-90％是属于S-对映异构体的。这种结果主要是由于与S-对映异构体所具有的作用周期相比，R-对映异构体的活性周期非常短。S-对映异构体的延长作用是由于在肝中的清除速度较慢，比如，被酶系统(如细胞色素P450)代谢性降解较慢。S-对映异构体与R-对映异构体相比，表现出稍强的体外效能，实际上它具有更高的体内效能，并且与A2受体相比，它对A1腺苷受体的选择性更高。参见实施例4比较ENX的S-和R-对映异构体的选择性和亲和力特性的特殊数据。
S-对映异构体具有的突出特性(如，增强的效能(体外和体内)和较高的选择性，以及较长的作用周期)表明S-对映异构体作为动物和人的利尿剂是非常有用的。在大多数情况下，如上面举例说明的，S-对映异构体是优选的化合物，这是因为它的活性周期较R-对映异构体更长，可关键性地发挥作用。换句话说，本化合物至少应产生足以达到预期结果的作用。
另一方面，在需要短期作用的情况下，如静脉内注射腺苷或心肌短暂缺血发作时，当出现腺苷水平快速升高且仅短时间持续时(以秒或分计)可以优先使用具有短期作用的腺苷拮抗剂，例如ENX的R-对映异构体。ENXR-对映异构体的活性短时期有效。但是ENX的R-对映异构体易快速降解或代谢。由于ENX的R-对映异构体的浓度迅速下降，这种快速代谢可以防止药物相互作用所导致的并发症。由于ENX的R-对映异构体的止痛特性，它可以用于心绞痛的急性疼痛。
具有短期作用的本发明化合物的另一个应用是作为止喘药或支气管扩张药。已经有人提出，ENX的S-对映异构体具有强的生物活性是由于ENX的R-对映异构体在肝脏快速并选择性的代谢。这种结果可能是由于R-对映异构体具有的首次排泄效应所致，当通过药物被肝酶降解的途径给药时，在此之前或与此同时，对映异构体到达合适的受体部位，引起药理学效应。但是，也可优先使用一些其他的给药途径，以利用这种首次排泄效应。例如，已证实ENX的S-和R-对映异构体为支气管扩张药。用吸入法给予R-对映异构体(或含R-对映异构体但不含S-对映异构体的组合物)，可立即使本化合物与气管和支气管中的适当受体结合而产生作用。任何已吸收的化合物被快速去除，这样可减少体内化合物的残余量。
含环氧化物部分的腺苷衍生物，特别是那些在N-6取代基上有环氧化物部分的腺苷衍生物，可以用作A1AR兴奋剂。腺苷兴奋剂的环氧化物衍生物对腺苷受体也可表现出高度选择性。对心脏组织的高度选择性也已得到证实。更为特别的是含环氧环烷基的腺苷的N6-取代作用可导致有效的和组织选择性的兴奋剂。详细的结构活性和制作型分子模型的研究表明腺苷兴奋剂通过含N6-，2-和9-(核糖)取代基的三种结构域与A1受体相互作用。
A1腺苷受体的N6-亚区包含手性识别位点，这些位点对于确定A1／A2选择性非常重要。环氧化物可被环烷基取代，如腺苷的环戊基，降冰片基或硬石基衍生物。下面式Ⅵ所示的是在N6位上有环氧化物取代基的腺苷环氧化物。此环氧化物可与环戊基或降冰片基连接。
且R1=1-4碳的烷基。含N6-降冰片基的兴奋剂化合物的实例包括下面式Ⅶ和Ⅷ分别所示的外-和内-异构体。
本发明兴奋剂化合物可以是四种异构体(2R-内，2R-外，2S-内或2S-外形式)中的一种。2R-内和2S-内对映异构体如下面式Ⅸ和Ⅹ所示
本发明兴奋剂化合物的另一个例子包括下面式Ⅸ所示的化合物，它在嘌呤环的N-1位上连接有氧原子。此化合物为N6-(5，6-环氧降冰片-2-基)腺苷-1-氧化物。
如图2所示，使用文献中已知的方法，从降冰片二烯经两步可容易地生成外-5-氨基降冰片-2-烯。然而，已证实内-异构体的合成更难，根据本文所述方法和图9A所示，使用降冰片-2-羧酸可使之变得容易。由内-降冰片烯-2-羧酸合成化合物内-5-氨基降冰片-2-烯(图9A中的化合物7b)具有适合于合成2R和2S-内异构体检验的优点。本发明包括这一发现，即三氟乙酸(TFA)是用库而提斯反应的修改形式将中间体异氟酸酯转化为三氟乙酰胺的有用试剂。已证实TFA为有效的捕获剂，不论反应是否在丙酮中或在相转移情况下(见表1)进行，由酰基氯(图9A中的化合物9，其中X=Cl)或混合酐(图9A中的化合物9，其中X=C(O)OEt)生成酰基叠氮，最后均同样生成异构的三氟乙酰胺(图9A中的化合物11)。尽管内-和外-异构体具有相似的极性，但用柱层析只能将少量内-异构体完全纯化。随后的加碱水解可得到相应的胺(图9B中的化合物7b)。
更直接的方法包括仔细调节的两相混合物中的中间体异氰酸酯的酸水解。这样，用等摩尔数的2MHCI水溶液回流四氯化碳中的酰基叠氮／异氰酸酯后，转化成胺盐酸盐，但不影响降冰片烯双键。此反应产率很高，它是目前合成5-氨基降冰片-2-烯盐酸盐(图9B中的化合物7c)的最有效的方法。在从盐酸盐中析出5-氨基降冰片-2-烯时，升高PH和用有机溶剂萃取，得到低产率的游离胺。然而，盐酸盐可直接用于6-氯嘌呤核苷的烷基化。
将6-氯嘌呤核苷与外-和内-5-氨基降冰片-2-烯(分别为图9A中的化合物7a和7b)反应生成N6-取代的腺苷，N6-(内-降冰片-5-烯-2-基)腺苷或N6-(外-降冰片-5-烯-2-基)腺苷。最后一步，通过用二氯甲烷中的间氯过苯甲酸处理N6-(降冰片-5-烯-2-基)腺苷，而使这些烯烃转化为环氧化物。加入1mol当量过酸后，用薄层色谱观察两种化合物。继续加入间氯过苯甲酸(另外2当量)直至仅观察到此化合物。用乙酸乙酯、氯仿和氨(85∶15∶1)的混合物作洗脱液，通过柱层析达到纯化。在1H NMR光谱中用δ3．23处的2-质子单峰取代δ6．17和δ6．20处的烯属信号，这与烯烃部分的氧化作用是一致的。但是，质谱显示392时的分子离子(比预期的高16质量单位)，提示N1点也可出现氧化作用。用少量过酸重复此反应，并通过薄层色谱和NMR密切观测，经48小时，仅加入了约0．1当量一小部分。立即检测N-氧化物的生成，所有起始物质反应完全后，通过NMR观察到N-氧化物N6-(内／外-降冰片-5-烯-2-基)腺苷之比为1．5∶1。通过使用选择性地使烯烃环氧化的二甲基二环氧乙烷，可防止N1氧化，从而得到高产率N6-(内／外-环氧降冰片-5-烯-2-基)腺苷。主要副产物(丙酮)的挥发特性使产物的分离变得极为容易，并可避免过多的层析。二甲基二环氧乙烷是一种优选的氧化剂，这是因为它对烯烃部分具有选择性，已氧化的产物容易纯化，并且可用于将外-、内-或外消旋降冰片烯分别转化为外-、内-或外消旋环氧化物。也可使用本领域熟知的其它对烯烃有选择性的氧化剂。
通过改变环烷基腺苷分子的其它部分也可增强其生物活性。例如，N6-环烷基腺苷的2-和5′-氯取代物两者都用于增加A1选择性。图2表示一个图例，即化学上将腺苷分子或其衍生物转化为含环氧二环烷基(作为N6取代基)的腺苷化合物。二甲基二环氧乙烷是用于生成腺苷化合物的环氧化物优选的氧化剂。参见lyer，R．S．等，(1994)J．Am．Chem．Soc．116∶1603-1609。可以根据本领域已知的方法和步骤制备二甲基二环氧乙烷。参见Murray，R．W．，R．Jeyaraman(1985)，J．Org．Chem．502847-2853；Adam，W．等(1991)Chem．Ber．124-2377。
本发明腺苷兴奋剂可用于治疗需要A1AR的刺激的病人。本发明腺苷兴奋剂和含那些兴奋剂的组合物的用途包括，用作功能性β-阻断剂；控制心率的抗心率失常剂，包括室上性心律过速，儿茶酚胺(CAMP-依赖性)室上性和心室性心律失常；Ⅱ型糖尿病；以及心肌保护，如减少梗塞范围和增加对心肌局部缺血的耐受力。
尤其是，本发明兴奋剂化合物可用于治疗腺苷敏感性室上性心律过速，比如，通过给需要这种治疗的病人使用有效量兴奋剂，在心房扑动或心房纤颤时控制心室速率，或者在室上性心搏过速时抑制A-V结传导。
在优选的实施方案中，通过给病人使用有效量的内-5，6-环降冰片-2-烯腺苷，而将此化合物用于这些治疗中。此化合物可以以2R-和2S-对映异构体的外消旋混合物的形式给药，或以2R-或2S-对映异构体两者的任意一种的形式给药。更优选的实施方案为2R-，2S-，或2R-／2S-外消旋混合物的内-形式。最优选的实施方案为本发明兴奋剂的2S-内-形式，即N6-(2S-内-5，6-环降冰片-2-基)腺苷，如式Ⅹ所示。已证实这种特殊的对映异构体对A-V(A1效应)缓慢传导的作用效能较冠状血管扩张(A2效应)强100倍，但在所有动物中未见低血压(A2)效应。
本领域普通技术人员还知道兴奋剂化合物的核糖部分可以进行改变，这可提供某些有利之处。例如，众所周知可以对核糖部分进行乙酰化，氯化或甲基化，这些改变可提高溶解性或吸收，或延长分子的半衰期。特别是这些改变发生在与核糖分子的C-5相连的羟基时。本领域普通技术人员也可制备包括此兴奋剂化合物的脱氧形式在内的位于核糖部分的这些或其它羟基取代基的类似取代物，并可按本文所述的进行使用，这些也是本发明的组成部分。
本发明化合物可提供一种使心室节律正常化和改善心室血流动力学或心房纤颤时的心输出量的方法。心房纤颤时给病人使用本发明的一种化合物是药理学上使心室节律正常的唯一方法，由此可改善心房纤颤时病人的心室血流动力学和心输出量。
可以将本发明化合物(兴奋剂和拮抗剂)与药物上可接受的载体一同制备成可给病人使用的组合物，病人将从本发明化合物或组合物的腺苷受体兴奋剂或拮抗剂的特性中得到治疗。
有利的是，本发明腺苷拮抗剂用于治疗复苏后的心律失常的剂量可以小于0．1-20mg／kg，对于已知的腺苷拮抗剂以前已有此报道。参见美国专利号4，980，379。有效剂量应该是能减轻心动过缓和血流动力学衰退的逆转。
现已确定了有效量的腺苷拮抗剂(如茶碱和氨茶碱)的标准给药程序，这是本领域技术人员众所周知的。例如，用于治疗可逆性气道阻塞病人，推荐的茶碱血浆含量范围是10-20μg／ml。具有高度选择性和效能的本发明化合物为已知的血中浓度时是有效的。
以上列举的本发明化合物或组合物的治疗用途并没有完全概括，本领域普通技术人员很容易知道其它可优选使用本发明的情况。例如，本技术领域容易认识到，可通过减少升高的内源性腺苷的作用或通过增加A1AR的刺激而能够治疗的其它疾病，也可从分别使用本发明腺苷拮抗剂或兴奋剂中得到治疗。
下面是举例说明生产方法的实施例，其包括实施本发明的最佳方式。这些实施例不应看成是对本发明的限定。除非另有说明，所有百分数均为重量百分比，所有溶剂混合物的比例均为体积比。
实施例1-8-环氧烷基黄嘌呤的制备化学。图1所示的图式描述的是含环氧化合物并有C-8取代基的1，3-二丙基黄嘌呤的合成。将5，6-二氨基-1，3-二丙基尿嘧啶(1)与ω-链烯基卤化物或ω-链烯基酯反应得到酰胺(2)，再将(2)在热碱中环化生成8-ω-链烯基-1，3-二丙基黄嘌呤(3)。与间-氯过苯甲酸氧化得到8-环氧烷基黄嘌呤(4)。或者，3与1，3-环链二烯产生狄尔斯-阿德尔缩合作用而生成8-二环链烯基黄嘌呤(5)。当呋喃为链二烯时，反应产物则为8-ω-{7-噁二环[2．2．1]庚-2-烯-5(6)-基}黄嘌呤(5)，它同时包含(a)环氧化物部分和(b)用于生成第二个环氧化物部分的链烯基部分。5与2．4当量偏氯苯甲酸发生氧化作用生成8-环氧二环烷基黄嘌呤(6)。
1，3-二丙基-8-{3-噁三环[3．2．1．02，4]辛-6(7)基}嘌呤。在室温下，在50ml CH2Cl2中将含8-二环[2．2．1]庚-2-烯-5(6)基黄嘌呤(1．0g，3mmol)和间-氯过苯甲酸(0．8g，3．6mmol)的溶液搅拌24小时。加入又一等分过酸，再继续搅拌24小时。蒸发得到黄色的油状物，通过用70-80％梯度的甲醇水溶液洗脱C-18硅胶上的制备型反相高效液相层析(HPLC)将这种油纯化。产率0．54g，52％，mp149-150℃。
1，3-二丙基-8-{7-噁二环[2．2．1]庚-2-烯-5(6)基}黄嘌呤。在室温下搅拌置于50ml干燥含呋喃的THF(0．22ml，3mmol)中的1，3-二丙基-8-乙烯基黄嘌呤(0．4g，1．5mmol)悬浮液。加入1滴TMS三氟甲烷磺酸酯溶液，HPLC提示起始物质消失了。用50-80％梯度的甲醇溶液洗脱C-18硅胶上的制备型反相HPLC，得到0．25g(50％)产物。
实施例2-含环氧化物部分的腺苷衍生物的制备用作腺苷兴奋剂的化合物是包含N-6取代基为噁二环-或噁三环烷基的腺苷衍生物。制备此化合物的通式如图2所示。
N6-内-{-噁三环[3．2．1．02，4]辛-6(7)-基}腺苷。在冰浴中将100ml干甲醇中的N6-(内-2-降冰片烯-5-基)腺苷(0．5g，1．4mmol)冷却至0-5℃，加入二甲基二环氧乙烷的丙酮(40ml，4mmol)溶液；在冰浴中持续搅拌8小时，然后在室温下过夜。蒸发溶剂并用层析法纯化，得到白色固体物0．42g(81％)。
实施例3-用作腺苷拮抗剂的新化合物的用途为了证明作为腺苷拮抗剂的本发明化合物的功效，将本化合物的活性与已知拮抗剂进行比较。另外，在几内亚猪剥离的心脏，几内亚猪的脑膜，DDT1MF-2和PC12细胞中，进行了有关作为A1腺苷受体拮抗剂的ENX的专一性、选择性和效能的试验，及其功能和生化(放射性配体结合测定)的试验。这些试验结果如下所述。
1．功能研究。在剥离灌注的几内亚猪心脏中得到这种功能的依据，即烷基黄嘌呤(ENX)的环氧化物专一并选择性地拮抗A1-腺苷受体介导的腺苷的心脏作用，但不拮抗A2-腺苷受体介导的冠状血管舒张。研究了ENX和其它两种烷基黄嘌呤(NAX和CPX)对A1受体介导的束间期刺激的变化(S-H间期；测定AV结传导)和对A2受体介导的冠状血管舒张所产生的作用。ENX，NAX和CPX拮抗A1兴奋剂CCPA的负变异性(S-H延长)和腺苷的血管舒张作用的能力如表2和3所示
PA2(-Log10KB)，平衡关系常数KB和Schild点的斜率的值为平均数+S．E．M．。心脏反应选择性A1兴奋剂CCPA的负变异性作用的拮抗作用。圆括号中的数为KB的最小值和最大值。n=试验数。拮抗剂中PA2(KB)或Schild点均没有显著性差异。
数值为抑制50％(IC50)由腺苷引起的最大冠状血管舒张的拮抗剂的浓度。圆括号中的数值为IC50值的95％置信区间。n=试验数。
虽然所有三种烷基黄嘌呤拮抗A1受体介导的S-H间期延长的作用是完全相同的，但ENX的选择性远远超过NAX和CPX。
为了进一步证明ENX对A1与A2受体的选择性，在单独给予腺苷和同时给予腺苷和ENX期间，观测了A1受体介导的S-H间期和A2-受体介导的冠脉传导增强(图4A-4D)。当单独给予腺苷(Ado，4μM)时，S-H间期和冠脉传导显著增加。当同时给予腺苷和ENX(0．4μM)时，S-H间期延长完全被抑制，而A2-介导的冠状血管舒张保持不变。冲洗ENX后，第三次单独给予腺苷导致S-H间期明显延长(与第一次给予腺苷相似)和冠脉传导增强。这些发现证明了ENX的作用是可逆的，ENX拮抗A1-受体介导的S-H延长，但不拮抗A2-受体介导的由腺苷引起的冠脉传导增强。这些数据还证明了ENX具有抑制与腺苷同A1受体结合相关的活性(和任何副作用)的能力，但A2受体的腺苷刺激的有益的药理学活性不受影响。
为了证明ENX是否具有增强收缩力的作用，进行了确定它对左心室压力(LVP)和首次导数dP／dt及收缩指数的作用的试验。如图5所示，当给这些正常几内亚猪心脏使用高浓度的ENX(2-200μM)时，这些猪的LVP或dP／dt均未见明显变化。在给予各种浓度的ENX和冲洗过程中，LVP和dP／dt保持不变。这些结果表明ENX没有增强收缩力作用。
与缺乏增强收缩力作用一致，ENX也不能抑制磷酸二酯酶(图6)。在40mMpH8．0的三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲液中搅拌细胞，所有的匀浆均用于酶测定。通过在Tris缓冲液中于30℃将匀浆(0．4mg蛋白)孵育45分钟来测定PDE活性，这种Tris缓冲液包括20mM的MgCl2，4mM巯基乙醇，0．06mg牛血清蛋白，0．4mM[3H]CAMP的CAMP130nCi和指定浓度的ENX或IBMX。在没有匀浆的并行测定中进行空白孵育。孵育结束时，将悬浮液在沸水浴器中孵育2分钟，再转移至冰水浴中2分钟，后加入0．1mg蛇毒磷酸二酯酶。在30℃将悬浮液孵育10分钟，用离子交换层析分离所生成的腺苷。形成的腺苷的控制速率为220pmol／mg蛋白／分。形成的腺苷量与所花的孵育期呈线性关系。
已知抑制磷酸二酯酶的试剂能产生增强收缩力的作用。图6所示的结果清楚地表明ENX不能抑制磷酸二酯酶，而异丁基甲基黄嘌呤(IBMX，一种已知地增强收缩力剂)能抑制磷酸二酯酶。这些发现证实了ENX超出其它能抑制磷酸二酯酶的烷基黄嘌呤的一大优点，因而它具有正收缩性作用。
将碳酰胆碱和MgCl2用于测定ENX拮抗作用的专一性，比如，如图7所示的腺苷介导的S-H间期延长，ENX(2nM，2μM)不能拮抗碳酰胆碱或MgCl2的负变异性效应。相比之下，ENX也不拮抗腺苷引起的S- H延长。
总之，上述功能实验的结果表明，在心脏中，ENX是A1受体亚型上腺苷的可逆性的、专一的和高度选择性的拮抗剂。
2．放射性配体结合研究。
为了确定一种烷基黄嘌呤的环氧化物(ENX)的结合亲和力，并与其它烷基黄嘌呤(CPX，NAX和CPT)进行比较，在从脑组织、DDT1MF-2和PC12细胞线中制备的膜中进行放射性配体结合实验。这些实验结果如表4和5所示。下面表4总结的结果表明，在脑组织中，ENX较其它烷基黄嘌呤在A1AR上更为有效，而在DDT11MF-2细胞中，烷基黄嘌呤对A1受体的结合亲和力几乎一样。至于PC12细胞膜中的A2受体，ENX的效能明显小于CPX。另外，ENX对脑或DDT1MF-2细胞中的A1受体的结合亲和力明显高于对PC-12细胞膜中的A2受体的亲和力。
在几内亚猪前脑和心脏膜以及在完整的DDT1-MF2细胞中用[3H]CPX进行A1受体结合。在PC-12细胞膜中用[3H]NECA进行A2受体结合。每个数次(n)制备的数值为重复三次测定的平均数±SEM。Ki值按已述的方法计算。烷基黄嘌呤的缩写如下ENX=1，3-二丙基-8-{3-噁三环[3．1．2．02．4]辛-6(7)-基}黄嘌呤；CPX=8-环戊基-1，3-二丙基黄嘌呤；NAX=1，3-二丙基-8-(3-非硬石基)黄嘌呤；CPT=8-环戊基-1，3-二甲基黄嘌呤。
为了证实与前面已知的腺苷受体拮抗剂(NAX或CPX)相比，ENX对A1受体的选择性更强，在几内亚猪的前脑(A1受体)和纹状体(A2受体)中进行了另一个放射性配体结合研究。表5表示表达A1(前脑)和A2(纹状体)腺苷受体的脑组织的A1和A2受体结合亲和力。表5的结果清楚地表明ENX较其它烷基黄嘌呤(NAX和CPX)对A1受体的选择性较A2受体明显更强。也即是说，ENX对A1的选择性是A2的800倍，而NAX和CPX对A1的选择性分别为A2的20和7．5倍。这些放射性配体结合研究的结果与几内亚猪剥离心脏的功能研究的结果完全一致
在几内亚猪的前脑和纹状体中用[3H]CPX和[3H]CGS 21，860分别进行A1和A2受体结合。四种制剂中每一个的数值均为三次重复测定的平均数±S．E．M。
实施例4-ENX对映异构体的活性依上述合成ENX的S-对映异构体和R-对映异构体并测定其活性和效能。如下面表6所示，ENX的S-对映异构体较低的关系常数提示，与R-对映异构体相比(Ki=2．1)，S-对映异构体的效能稍强(Ki=0．98)。<
另外，ENX的S-对映异构体证明对A1受体的结合选择性较强。见下表7。
*“IC50”指50％抑制对受体的放射性配体结合的浓度。
图8所示的是S-对映异构体的增强效能。如图所示，外消旋混合物ENX所具有的大多数利尿活性存在于S-对映异构体中。尤其是，图8提供了给予0．1mg／kg ENX外消旋物、ENX R-对映异构体和ENX S-对映异构体的大鼠中的2小时累积排尿量。由此表明，作为利尿剂，ENX的S-对映异构体较ENX的R-对映异构体或ENX的R-和S-对映异构体的外消旋混合物更为有效。ENX的S-对映异构体的作用周期也更长。ENX的S-对映异构体的这些特性提示在治疗通常需要给予利尿剂的疾病时，它可作为长期利尿剂使用。标准的药理学筛选实验证明ENX的S-对映异构体(口服100mg／kg)能使收缩的几内亚猪的气管肌肉松驰。口服100mg／kgENX的S-对映异构体后，可减少血清胆固醇和沉淀β-脂蛋白的肝素。在它产生的影响中，所观察到的HPL／CHOL比例小于0．92的减少提示它可能降低致动脉粥样化的低密度β-脂蛋白的量。
口服等于或大于3mg／kg，在水合大鼠中可观察与增加的尿排出量相关的促尿食盐排泄作用。口服30mg／kg后，也可发现缓慢的促尿钾排泄作用，提示少量排钾的排尿作用。
已知R-对映异构体具有用作腺苷拮抗剂的活性。特别是，观察到R-对映异构体可松驰几内亚猪气管的自发音。在口服10mg／kg ENX R-对映异构体的水合大鼠中观察到与增加的排尿量有关的促尿食盐排泄活性。但是，与S-对映异构体相比，ENX R-对映异构体的活性作用周期很短。然而，那对于治疗适用于短期作用疗法的疾病是有用的。
实施例5-N6-取代的腺苷衍生物的合成根据已知方法可合成式Ⅵ所示的本发明兴奋剂化合物。例如，得到这些化合物的总的合成图开始包括适当取代的胺(如二环胺)与6-氯嘌呤核苷的烷基化作用。这种直接反应通常用于N6-取代的腺苷的合成。参见WO 8404882(1985)。
用一双键可使取代的胺官能化，然后再将它氧化生成环氧化物。间-氯过苯甲酸可用于这种氧化反应。也参见Sharpless，K．B．，w．Amberg，Y．L．Bennani，G．A．Crispino，J．Hartung，K．-S．Jeong，H．-L．Kwong，K．Morikawa，Z．-M．Wong，D．Xu，X．-L．Zhang(1992)J．Org．Chem．57∶2768-2771；和Kolb，H．C．，B．K．Sharpless(1992)Tetrahedron 48∶1015-1030。
生成环氧化物的另一个可选择的方法是锇催化的烯烃二羟基化，这在发现2，3-二氮杂萘配位体时已为大家所共知，并且通过有机氨磺酰可加速锇酸酯水解。将连二醇转化为环氧化物的一种简单一步法在本技术领域是公知的(Kolb，H．C．，B．K．Sharpless，supra)。这种反应程序没有通过卤化醇酯中间体的差向异构。这些方法的结合可从立体有择形式的烯烃生成环氧化物。
如式Ⅵ-Ⅺ所示的，可用于合成本发明化合物的取代的胺为3-环戊烯-1-基胺(用于腺苷的环戊烯氧化衍生物)或5-降冰片烯-2-基(用于腺苷的环已烯环氧化物衍生物)。由顺-1，4-二环丁烯和二乙基丙酸通过5步反应程序可合成3-环戊烯-1-基胺，这在本技术领域也是公知的(Murdock，K．C．，R．B．AngierJ．Org．Chem．272395-2398)。
用5-降冰片烯-2-羧酸可进行合成5-降冰片烯-2-基胺(市场上可买到的四种异构体(2R和2S的内和外)的混合物)。将这种羧酸转化为酰基氯，接着用叠氮化钠处理，得到酰基叠氮。库尔提斯重排(去掉N2和取代基移位)和紧接着的水解得到异构体混合物5-降冰片烯-2-基胺。在合成4-氨基环己烯时，如没有酰基叠氮或异氰酸酯的分离，这种反应可连续继进行。用于库尔提斯重排的另一个改变，包括通过用亚硝酸处理对应的酰基购来制备酰基叠氮。在这两种情况中，在手性中心重排保留绝对构型。内外成分可用本领域公知的HPLC方法分离。
旋光纯的5-降冰片烯-2-基胺的合成包括利用不对称的狄耳斯-阿德耳反应得到中间体羧酸，接着进行上面所述的库尔提斯重排。合成这些化合物的总图示于图3。
实施例6-合成A1腺苷受体兴奋剂和中间体的分析数据本实施例所述的有关化合物的参照数字参见图9A和／或9B。在电热熔点仪器上测定熔点并未修正。1H和13CNMR光谱记录在JEOL JNM-EX270分光计上，除非另有说明，d6-DMSO用作溶剂，TMS为内标物。通过DEPT实验测定每个碳的质子数，并且用相应的13C NMR信号标记。以KBr圆片为基体用Bio-Rad3240-SPC分光光度计得到红外光谱图。在JEOL JMS-DX300质谱仪上测定FAB质谱，并处理MSS数据系统。Merck Kieselgel 60和60F254分别用于柱和薄层色谱法。溶剂为AR级或使用前蒸馏。丙酮通过在碳酸钾上蒸馏而干燥，并于4A筛上贮存。
N6-(外-5，6-环氧降冰片-2-基)腺苷。在0-5℃将丙酮(40．0mL，≈0．1M，≈4．0mmol)中的二甲基二环氧乙烷滴加到干甲醇(100mL)中的N6-(外-降冰片-5-烯-2-基)腺苷(0．5g，1．39mmol)溶液中。在0-5℃将反应混合物搅拌8小时，再在室温下放置12小时(过夜)。在减压下蒸发溶剂，并用柱色谱法(CHCl3／MeOH／NH3，80∶20∶1)纯化粗产物得到白色结晶物(0．42g，80％)；mp 240-242℃；1H NMRδ1．15(m，2H，H3”／H7”)，1．72(m，2H，H3”／H7”)，2．41(brs，1H，H1”／H4”)，2．51(brs，1H，H1”／H4”)，3．18(m，2H，H2”，H5”，H6”)，3．64(m，2H，H5a’，b’)，4．00(d，1H，H4’)，4．18(d，1H，H3’)，4．64(M，1H，H2’)，5．24(brs，1H，OH)，5．50(brs，2H，2xOH)，5．92(d，1H，H1’)，7．88(d，1H，NH)，8．26(s，1H，H2／8)，8．38(s，1H，H2／8)；13CNMRδ23．0，34．3，36．3，42．7，49．1，49．6，51．0，61．8，70．8，73．7，86．0，88．1，119．8，139．9，148．6，152．4，154．1；HR MS(C17H22N5O5)计算值376．16208，实验值376．16109)。
N6-(内-5，6-环氧降冰片-2-基)腺苷。在0-5℃将丙酮(27．8mL，≈0．1M，≈2．78mmol)中的二甲基二环氧乙烷滴加到干甲醇(40mL)中的N6-(内-降冰片-5-烯-2-基)腺苷(0．5g，1．39mmol)溶液中。在0-5℃将反应混合物搅拌4小时，再在室温下放置2小时。在减压下蒸发溶剂，并用柱色谱法(EtOAc／MeOH／NH3，90∶10∶1)纯化粗产物得到白色结晶物(0．36g，68％)；mp 207-214℃(分解)；1HNMRδ0．93-2．08(m，4H，H3”，H7”)，2．42(brs，1H，H1”／H4”)，2．87(brs，1H，H1”／H4”)，3．23-3．41(m，3H，H2”，H6”)，3．68(dd，2H，H5’)，4．03(d，1H，H4’)，4．22(brs，1H，H3”)，4．67(brs，1H，H2’)，5．22(brs，1H，OH)，5．44(brs，2H，2xOH)，5．97(d，1H，H1’)，7．84(brs，1H，NH)，8．25(s，1H H2／8)，8．38(s，1H，H2／8)；13CNMRδ25．2，31．1，36．4，39．5，48．3，50．7，61．6 70．6，73．4，85．8，87．9，120．0，139．7，148．3，152．2，154．7；HR MS(C17H22N5O5)计算值376．16208，实验值376．16228。
N6-(外-降冰片-5-烯-2-基)腺苷。将干甲醇(20mL)中的外-5-氨基降冰片-2-烯(2．02g，18．5mmol)加入干甲醇(40mL)中的6-氯嘌呤核苷-(5．0g，17．4mmol)和三乙胺(3．53g，34．9mmol)溶液中。回流24小时后，加入另一摩尔当量外-5-氨基降冰片-2-烯，再继续回流40小时。蒸发溶剂和过量三乙胺后，并用柱色谱法(CHCl3／MeOH／NH3，80∶20∶1)纯化粗产物。分离得到纯的4a，收率98％；mp 108-113℃；1HNMRδ1．37-1．73(m，4H，H3”，H7”)，2．78(brs，1H，H1”／H4”)，2．83(brs，1H，H1”／H4”)，3．20(m，1H，H2”)，3．62(m，2H，H5a’，b’)，3．96(d，1H，H4’)，4．14(d，1H，H3’)，4．60(m，1H，H2’)，5．19(d，1H，OH)，5．44(d，2H，2xOH)，5．89(d，1H，H1’)，6．16(dd，1H，H5”／H6”)，6．20(dd，1H，H5”／H6”)，7．97(brs，1H，NH)，8．23(brs，1H，H2／8)，8．35(s，1H，H2／8)；13CNMRδ34．5，41．5，46．5，48．3，51．7，62．4，71．4，74．5，86．8，89．0，120．2，135．4，140．1，140．7，148．7，153．4，154．9。
N6-(内-降冰片-5-烯-2-基)腺苷。在氮气中将6-氯嘌呤核苷(0．70g，2．44mmol)和内-5-氨基降冰片-2-烯(0．32g，2．93mmol)溶于干甲醇(20ml)中。加入三乙胺(0．51mL，0．37g，3．66mmol)，将反应混合物回流48小时。经此过程后，HPLC监测显示未出现进一步改变，因此蒸发溶剂得到褐色油状固体。经柱色谱法(用乙酸乙酯／甲醇／氢氧化铵90∶10∶1)得到白色泡沫状化合物(0．69g，79％)；mp 108-112℃；1HNMRδ 1．11-2．14(m，4H，H3”，H”)，2．79(brs，1H，H1”／H4”)，2．83(brs，1H，H1”／H4”)，3．22(brs，1H，H2”)，3．61(m，2H，H5a’，b’)，3．97(d，1H，4H’)，4．15(d，1H，H3’)，4．61(m，1H，H2”)，5．20(d，1H，OH)，5．45(d，2H，2xOH)，5．89(d，1H，4H’)，5．97(dd，1H，H5”／H6”)，6．35(dd，1H，H5”／H6”)，6．93(brs，1H，NH)，8．25(brs，1H，H2／8)，8．36(s，1H，H2／8)；13CNMRδ33．5，42．1，45．5，47．9，50．4，61．6，70．6，73．5，85．8，87．9，119．6，131．6，138．8，139．6，148．2，152．2，154．4。
外-降冰-5-烯-2-基异硫氰酸盐(6)。在35-40℃将水(12mL)中的浓缩H2SO4(38．4g)滴加到(超过2小时)二环[2．2．1]庚-2，5-二烯(60mL)、苯(150mL)和KSCN(57．5g)的混合物中。3小时后，将反应混合物冷却再加入水。在真空下通过多孔玻璃过滤漏斗将反应混合物过滤，并用乙醚(200mL)漂洗。分离有机层，用水冲洗，再用硫酸镁干燥。过滤和蒸发溶剂得到橙色液体。在减压(70-74℃，1 mbar，lit．676-78℃，1mmHg)得到纯化合物(40％)；1H NMRδ1．61-1．77(m，4H，H3，H7)，2．92(brs，1H，H1／H4)，3．10(brs，1H，H1／H4)，3．53(t，1H，H2)，5．98(dd，1H，H5／H6)，6．21(dd，1H，H5／H6)；13C NMRδ35．6，41．0，46．1，49．8，55．3，132．7，140．2外-5-氨基降冰片-2-烯(7a)。在乙二醇中的降冰片基异硫氰酸盐(56．7g，0．375mmol)搅拌溶液(保持在100℃)中加入(超过5分钟)固体NaOH(45．0g)。温度升高至165℃，再搅拌反应物3小时。冷却后，再将反应混合物冷却并注入饱和碳酸钾(1L)溶液中，然后由二氯甲烷(3×400mL)萃取。分离有机层再用HCl(2N，3×200mL)萃取，用2N NaOH使之碱化，并用碳酸钾使之饱和。过滤和蒸发溶剂得到液体，液体在真空下(54-54．5℃，30mmHg，lit．770℃，40-41mmHg)蒸馏得到褐色产物(14．3g，35％)。1H NMRδ0．88(dd，1，H2)，5．92(dd，1H，H5／H6)，5．96(dd，1H，H5／H6)；13C NMR(CDCl3δ37．0，41．2，44．8，50．9，51．9，135．0，138．0内-5-氨基降冰片-2-烯(7b)。在室温，氮气下将甲醇(5mL)和水中(20mL)中的2-三氟乙酰基氨基降冰片-5-烯(0．54g，2．6mmol)和碳酸钾(0．61g，4．4mmol)的混合物搅拌25小时。在旋转式汽化器中浓缩后，用二乙醚(3×20mL)萃取反应混合物。将有机相在硫酸镁上干燥，过滤并蒸发得到褐色油(0．23g，80％)。蒸馏得到纯的7b(152-160℃，lit．10150-160℃)。1H NMRδ0．43(dt，1H，H3／H7)，1．20-1．30(m，2H，H3／H7)，1．95(m，1H，H3／H7)，2．72(brs，1H，H1／H4)，2．75(brs，1H，H1／H4)，3．28(m，1，H2)，5．97(dd，1H，H5／H6)，6．30(dd，1H，H5／H6)；13C NMR(CDCl3)δ33．6．42．6，47．9，48．5，51．1，131．6，138．9。
外／内-5-氨基降冰片-2-烯盐酸盐(7c)。方法A(用酰基氯)在冰浴中冷却含溴化四丁铵(≈50mg)的降冰片-5-烯-碳酰氯(2．66g，17．0mmol)CCl4(25mL)溶液，加入叠氧化钠(1．33g，20．5mmol)的水(5ml溶液，在0℃用力搅拌反应混合物2小时。将反应混合物倾注在冰(≈10mL)上，用CCl4(2×25mL)萃取水相。所有有机部分被合并，再用2MHCl(8．5mL)回流17小时。冷却后，收集水相并用0．5MHCl(10mL)冲洗CCl4。蒸发已合并的含水层得到白色固体(2．37g，96％)。通过用乙酸乙酯研制以将这种固体纯化，或直接用于合成N6-(内-降冰片-5-烯-2-基)腺苷。方法B(用混合酐)在冰浴中冷却干丙酮(40mL)中的降冰片-5-烯-2羧酸(3．74g，27．1mmol)和三乙胺(4．40mL，3．21g，31．7mmol)的溶液。加入丙酮(15mL)中的新蒸馏的氯甲酸乙酯(2．98mL，3．38g，31．2mmol)，在0℃搅拌反应混合物30分钟。经此过程后，加入叠氮化钠(2．21g，34．0mmol)的蒸馏水(10mL)溶液，在0℃搅拌反应混合物2小时。将反应混合物倾注在冰(≈10mL)上，用CCl4(2x25mL)萃取水相。所有有机部分被合并，再用2MHCl(13．6mL)回流20小时。冷却后，收集水相并用0．5MHCl(10mL)冲洗CCl4。蒸发已合并的含水层得到油状固体，用乙酸乙酯(3．72g，94％)研制此固体；mp256-265℃(分解)；1H NMRδ0．85-2．09(m，H3外，内，H7外，内)，2．82(brs，H1／H4内)，2．99(brs，H1／H4外)，3．02(brs，H1／H4外)，3．08(brs，H1／H4内)，3．38(m，H2外，内)，5．96(dd，H5／H6内)，6．05(dd，H5／H6内)，6．20(dd，H5／H6外)，6．37(dd，H5／H6内)，8．03(brs，NH2)，8．50(brs，HCl)；13C NMRδ31．6，40．8，41．9，44．7，44．8，45．2，45．4，47．9，49．3，50．2，130．3，133．9，139．3，140．4。
1HNMR信号的积分表明此混合物约含85％内-异构体。
外／内-降冰片基-5-烯-2-碳酰氯(9)。在室温下，在氮气中搅拌(一夜)亚硫酰氯(2．7mL，35．2mmol)中的溶液8(3．5g，28．9mmol)。在减压下蒸发过量亚硫酰氯，再蒸馏所得的油状物(65℃，7．5mmHg)；1H NMR(CDCl3)δ1．32-1．56(m，H3／H7外／内)，1．95(m，H3／H7外／内)，2．98(brs，H1／H4外／内)，3．42(dd，1H，H5／H6外)，6．26(dd，1H，H5／H6内)；13C NMR(CDCl3)δ30．0，31．1，41．7，42．8，42．9，46．2，46．8，47．0，49．1，56．3，131．5，134．8，138．6，138．9，174．8，176．6。
2-三氟乙酰氨基降冰片-5-烯(11)。方法A(用混合酐)在冰浴中冷却干丙酮(25mL)中的降冰片-5-烯-2羧酸(1．75g，12．Smmol)和三乙胺(1．95mL，1．43g，14．1mmol)的溶液。加入新蒸馏的氯甲酸乙酯(1．41mL，1．60g，14．7mmol)，在0℃搅拌反应混合物。经此过程后，加入蒸馏水(5mL)中的叠氮化钠(1．04g，16．0mmol)溶液，在0℃搅拌反应混合物2小时。将反应混合物倾注在冰(≈10mL)上，用二氯甲烷(2×20mL)萃取水相。所有有机部分被合并，在硫酸镁上干燥14小时，过滤并蒸发得到无色的油状物。在二氯甲烷中收集该油状物，并用三氟乙酸(1．28mL，1．90g，1．67mmol)回流14小时。冷却后，用饱和碳酸氢钠(2×25mL)冲洗反应混合物，在硫酸镁上干燥，过滤并蒸发得到粗产物。用氯仿／己烷(1∶1)作洗脱液，通过柱层析使之纯化。得到的目的产物为白色结晶状固体(1．48g，57％)。方法B(用酰基氯，单相)在冰浴中冷却丙酮(25mL)中的降冰片-5-烯-羰基氯(1．90g，12．5mmol)溶液。加入蒸馏水(5mL)中的叠氮化钠(0．98g，15．1mmol)溶液，在0℃搅拌反应混合物2小时。将反应混合物倾注在冰(≈10mL)上，用二氯甲烷(3×40mL)萃取水相。所有有机部分被合并，在硫酸镁上干燥14小时，然后过滤。在滤液中加入三氟乙酸(1．25mL，1．85g，16．2mmol)，然后将它回流24小时。冷却后，用饱和碳酸氢钠(2×25mL)冲洗反应混合物，在硫酸镁上干燥，过滤并蒸发，用洗脱剂洗脱纯化。得到的目的产物为白色结晶状固体(1．41g，57％)。方法C(用酰基氯，相转移条件)在冰浴中冷却含溴化四丁铵(50-100mg)，二氯甲烷(25mL)中的降冰片-5-烯-2羰基氯(2．0g，13．4mmol)溶液。加入蒸馏水(5mL)中的叠氮化钠(1．05g，16．2mmol)溶液，在0℃用力搅拌反应混合物2小时。将反应混合物倾注在冰(≈10mL)上，再用二氯甲烷(2x20mL)萃取水相。所有有机部分被合并，在硫酸镁上干燥14小时，然后过滤。在滤液中加入三氟乙酸(1．14mL，1．69g，14．8mmol)，然后将它回流14小时。冷却后，反应混合物用饱和碳酸氢钠洗涤(2×50ml)。在硫酸镁上干燥，过滤并蒸发得到粗产物。用氯仿／己烷(1∶1)作洗脱液，通过柱层析使之纯化。将所选择的部分蒸发得到纯的内-2-三氟乙酰胺降冰片-5-烯(0．77g，28％)，而外和内异构体两者的总产率为56％(1．46g)；mp44-46℃；1H NMR(CDCl3)δ0．83(dt，2H，H3／H7)，1．37-1．57(m，2H，H3／H7)，2．28(m，1H，H3／H7)，2．93(brs，1H，H1／H4)，3．13(brs，1H，H1／H4)，4．53(m，1H，H2)，6．04(dd，1H，H5／6)，6．45(dd，1H，H5／6)；13C NMR(CDCl3)δ35．2，42．5，45．8，48．8，50．0，115．8(q，J-288．1 Hz，-CF3)，130．7，141．0，156．7(q，J=36．6Hz，C=O)。
N6-(外-5，6-环氧降冰片-2-基)腺苷-1-氧化物(式Ⅺ)。将间氯过苯甲酸(216mg，1．25mmol)加入二氯甲烷(40mL)中的N6-外-降冰片-5-烯-基腺苷(359mg，10mmol，1．0eq)溶液中。在室温下搅拌反应物，同时用薄层色谱监测。24小时后再加入间氯过苯甲酸(173mg，1．0mmol)，48小时后再加一次。又过24小时后，蒸发溶剂得到粗产物。用CHCl3／MeOH／NH3(80∶20∶1)作洗脱液通过柱层析纯化，得到纯产物5(239mg，61％)；mp125-132℃；1H NMRδ1．1 5(dd，2H，H3／H7)，1．76-1．95(m，H3／H7)，2．46(brs，1H，H1”／H4”)，2．55(brs，1H，H1”／H4”)，3．23(m，3H，H2”，H5”，H6”)，3．62(m，2H，H5a’，b’)，3．95(d，1H，H4’)，4．15(brs，1H，H3’)＜4．63(s，1H，H2’)，5．12(brs，1H，OH)，5．27(d，1H，OH)，5．72(d，1H，OH)，5．90(d，1H，H1’)，8，17(brs，1H，NH)，8．60(s，1H，H2／8)，8．65(s，1H，H2／8)；13C NMRδ22．8，34．8，36．4，43．8，48．8，50．7，52．1，61．1，70．1，73．8，85．5，87．4，118．5，142．2，142．7，142．8，146．3，MS(C17H22N5O5)m／e 392。
实施例7-兴奋剂化合物的活性对本兴奋剂化合物进行试验以检测其抑制DDT1MF-2(DDT)细胞中异丙基肾上腺素刺激所致的cAMP积聚的能力。这种作用是通过A1-腺苷受体(A1AR)的作用而介导的。为了对比，将环氧化物N6-(5，6-环氧降冰片-2-基)腺苷(内-和外-化合物的R-和S-对映异构体)及其N-1氧化物与明确且有效的A1AR兴奋剂(N6-环戊基腺苷(CPA))进行比较。
原料和方法。
细胞培养。在37℃下，在被水湿润的5％CO2和95％空气混合气中，在Dulbecco改进的Eagle培养基上将DDT1MF-2细胞(美国模式培养物保藏所)培养成单层细胞，此培养基包括5％胎牛血清，100U／mL青霉素G，0．1mg／mL链霉素和2．5μg／mL两性霉素B。以0．2-1．0×104细胞／cm2种植细胞，用含1mM乙二胺四乙酸(EDTA)的二价阳离子游离磷酸盐缓冲溶液解吸后，每周进行两次传代培养。试验在细胞中进行，将其生长至1天预汇合(preconfluent)。
cAMP测定。通过A1AR兴奋剂抑制(-)异丙基肾上腺素刺激所致的cAMP积聚来确定A1AR兴奋剂的能力。通过在5mL含1mM EDTA的二价阳离子游离Hank’s平衡盐液中培养而使DDT细胞解吸。以500g将细胞悬浮液离心5分钟，用轻度悬浮液再次冲洗，再离心，并悬浮在HBSS中。然后于37℃在微型驱散管(microfuge tubes)中用0．5mL HBSS培养细胞(0．15-2mg蛋白)共10分钟，HBSS含100μM环戊氧基甲氧苯基吡咯烷酮、1μM(-)异丙基肾上腺素和不同浓度的腺苷受体兴奋剂(0．05-1000nM)。培养结束时，将试管置于沸水浴中5分钟以使反应终止。冷却至室温后，以10，000g将试管离心2分钟，保留上清液。使用牛血清蛋白作标准对照，根据Lowry等的方法(Lowry，O．H．，N．J．Rosebrough，A．L．Farr，R．J．RandallJ．Biol．Chem．193∶265-275)测定细胞的蛋白含量。
根据前面所述的竞争性蛋白质结合分析法测定上清液的cAMP含量(Standifer，K．M．，J．Pitha，S．P．BakerNaunyn-Schmiedeberg’s Arch。Pharmacol．339129-137)。简言之，即在4℃将等份上清液(50μL)在0．2mL含25mM Tris-HCl缓冲液(PH7．0)，8mM茶碱，0．8pmol[3H]cAMP(31．4Ci／mmol，New England Nuclear)和20μg牛心脏cAMP依赖性蛋白激酶(Sigma，Chemical Co．)的容积中培养1小时。培养结束时，向每管中加入75μl的50％(v／v)羟基磷灰石一水悬浮液，再加入4ml用冰预冷的10mM Tris-HCl缓冲液(PH7．0)。然后在减压下将悬浮液注入Whatman GF／B玻璃纤维过滤器中，用另6ml用冰预冷的缓冲液冲洗滤液，置于又4mL Liquiscint(国家鉴定)的闪烁小瓶中，用液体闪烁仪测定放射活性。用未标记的cAMP的已知浓度标准曲线计算样品中的cAMP数量。用无线性回归公式(Marquardt-Levenberg)的浓度效应分析法确定对最大cAMP积聚产生50％抑制的化合物的有效浓度。
结果。(-)异丙基肾上腺素(1μM)本身可使DDT细胞中的cAMP积聚增加至超出基本水平57倍。CPA和环氧化物衍生物以浓度依赖性方式抑制(-)异丙基肾上腺素刺激所致的cAMP积聚，如下表8所示用EC50值表示。CPA和N6-(5，6-环氧降冰片-2-基)腺苷的外和内消旋异构体抑制cAMP积聚时相似的EC50值约为1-2nM。相对而言，外异构体(12)的N-氧化衍生物较CPA或N6-(5，6-环氧降冰片-2-基)腺苷的外-和内-异构体的效能更小，EC50值为403nM。
在37℃用1μM(-)异丙基肾上腺素和各种浓度的化合物将aDDT细胞培养10分钟。按试验部分所述测定积聚的cAMP和EC50值。每10分钟形成的基本的cAMP和(-)异丙基肾上腺素刺激所致cAMP积聚分别为8±3和458±41 pmol。每个值为进行三次重复测定的平均数±SE。
实施例8-用途、制剂和用法使用本领域技术人员目前已知或预知的任何适合的方法和技术，可以达到本发明化合物和含此化合物的组合物的治疗和预防的应用。而且，本发明化合物还可用作制备其它有用的化合物和组合物的起始原料或中间体。本发明化合物用于各种非治疗和治疗的目的。从实验中很显然本发明化合物具有有效的抗心律失常的活性。尤其是，它们可用于调节动物(更优选哺乳动物，最佳优选是人)的心脏心律失常(包括PVST)。
已证实兴奋剂和拮抗剂对心脏的变时性、变导性和收缩性起作用，这使得它们在治疗上可用作心脏活动的刺激剂或调节剂，因而影响心脏功能。例如，本发明化合物的调节活性可影响心率(变时性作用)和心冲动传导(变导性作用)。诊断学上本发明化合物也可用于确定心功能参数，如用作确定腺苷受体是否是心脏或其它器官机能障碍的介质的药理学试剂。
本发明化合物也可作为体内和体外研究的标准，即测定或比较直接或间接通过腺苷受体起作用的其它兴奋剂和拮抗剂的活性。作为这些比较的试剂，本化合物是非常有价值的药理学物质。它们对A1腺苷受体的高度亲和力和选择性，使它们成为有关全身的那些受体的功能的信息的重要来源。
本发明化合物的其它用途包括用于描绘器官或组织的腺苷受体的结构或位置的特征。例如，用本领域普通技术人员已知的标准技术或方法，在本发明化合物上附着适当的标记或信息来实现这一目的。适用于与本发明化合物接合的标记包括(但不限于此)放射性标记(如放射性同位素)、荧光标记和生物素标记。适用于标记本发明化合物的放射性同位素包括溴-77、氟-1 8、碘-131、碘-123、碘-125、碘-126、碘-133、铟-111、铟-113m、镓-67、镓-68、钌-95、钌-97、钌-103、钌-105、汞-107、汞-203、铼-99m、铼-105、铼-101、锝-99m、碲-121m、碲-99m、碲-125m、铥-165、铥-167、铥-168和氚。优选的同位素是γ-发射的铟和锝-99m，因为这些同位素可用γ相机检测到，并具有适于体内成象、适合的半衰期。或者，本领域普通技术人员都知道也可使用非放射性标记，例如，酶-底物复合体，如生物素-亲和素，辣根过氧化酶-碱性磷酸酶等。另外，用于标记本发明化合物的荧光实体包括荧光素钠、荧光素异硫氰酸盐和德克萨斯红磺酰氯。照此，本化合物可用于显现体内或体外器官或组织的结构或功能，其中有A1腺苷受体。
本发明的另一个实施方案包括本化合物将治疗化合物带到A1腺苷受体位点的用途。由于本发明化合物的专一性，它们可与治疗化合物接合以将治疗化合物带到A1腺苷受体附近。还有，在本发明化合物对特殊类型组织(如心脏组织)具有选择性的情况中，这些化合物可将治疗剂或诊断剂带到这些部位。
本发明化合物的用法是用作抗心律失常剂。因此，作为活性成分的包含本发明化合物的药物组合物可用于预防或治疗人或其它哺乳动物的心律失常。
给药量将依据所需的抗心律失常效应；所治患者的类型；患者的年龄、健康状况、体重、当前的治疗方法；治疗次数；治疗比率等情况来决定。有利的是，所给予的活性成分的剂量可以是，例如，皮肤给药为1-约500mg／kg；口服，0．01-200mg／kg；鼻内，0．01-约100mg／kg；以及气雾剂0．01-约50mg／kg(动物体重)。
以浓度表示，本发明的活性成分可在新组合物中经皮肤、皮下、鼻内、支气管、肌肉、阴道内、静脉内或口服使用，浓度为占组合物的约0．01约-50％w／w，尤其是占组合物的约0．1-约30％w／w。优选新化合物占组合物的约1-约10％，最佳优选新组合物包含约5％新化合物。
本发明组合物可以各种形式，如片剂、软膏、胶囊、丸剂、粉剂、气雾剂、颗粒剂和口服液或悬浮剂等形式使用是有利的，其中含有指定的适量活性成分。本文和所附的权利要求书中所指的这些组合物通称“药物组合物”。尤其是它们可以是单位剂量形式，即，适合用于人或动物的物理上分散单位(适合作为单元剂量)，每一单位包含预定量活性成分和一种或多种药物上可接受的其它成分(如稀释剂或载体)，其中活性成分足以产生预期的治疗或预防作用。
当药物组合物为气雾剂时，可将活性成分装在含推进剂(如二氧化碳、氮气、丙烷等)和常用辅助剂(如共溶剂、湿润剂等)的加压气雾剂容器中。
当药物组合物为软膏时，活性成分可与稀释剂赋形剂(如可可脂、粘性聚乙二醇、氢化油)混合，如需要可将这些混合物乳化。
根据本发明，药物组合物包含作为活性成分的有效量的一种或多种无毒的药物上可接受的成分。用于组合物中的这些成分的实例包括乙醇、二甲亚矾、甘油、矾土、淀粉、碳酸钙、滑石、面粉和等量无毒载体与稀释剂。
应该清楚，本文所述的实施例和实施方案仅仅是用于举例说明本发明目的，本领域技术人员可以进行各种修改或变化，这些修改或变化应包括在本申请的精神和范围以及所附权利要求的范围内。
权利要求
1．一种腺苷环氧化合物，其选择性和特性地结合作为所述受体兴奋剂的A1腺苷受体，其中所述化合物是N6-(环氧环烷基)腺苷或类似物、衍生物或其异构体。
2．根据权利要求1的化合物，其中所述化合物具有下式
其中R1=1-4个碳原子的烷基。
3．根据权利要求1的化合物，其中所述化合物为N6-(环氧降冰片基)腺苷。
4．根据权利要求1的化合物，其中所述化合物选自下式
5．根据权利要求1的化合物，其中所述化合物具有下面结构式
6．一种用于控制心房纤颤时的心室速率的方法，所述方法包括给予有效量的N6-(环氧环烷基)腺苷化合物。
7．根据权利要求6的方法，其中所述化合物具有下式
其中R1=1-4个碳原子的烷基。
8．根据权利要求6的方法，其中所述化合物为N6-(环氧降冰片基)腺苷。
9．根据权利要求6的方法，其中所述化合物选自下式
10．根据权利要求6的方法，其中所述化合物具有下面结构式
11．一种用于控制心房扑动时的心室速率的方法，所述方法包括给予有效量的N6-(环氧环烷基)腺苷化合物。
12．根据权利要求11的方法，其中所述化合物具有下式
其中R1=1-4个碳原子的烷基。
13．根据权利要求11的方法，其中所述化合物为N6-(环氧降冰片基)腺苷。
14．根据权利要求11的方法，其中所述化合物选自下式
15．根据权利要求11的方法，其中所述化合物具有下面结构式
16．一种用于控制腺苷依赖性室上心搏过速的方法，所述方法包括给予有效量的N6-(环氧环烷基)腺苷化合物。
17．根据权利要求16的方法，其中所述化合物具有下式
其中R1=1-4个碳原子的烷基。
18．根据权利要求16的方法，其中所述第二种化合物为N6-(环氧降冰片基)腺苷，或类似物，衍生物或其异构体。
19．根据权利要求16的方法，其中所述化合物选自下式
20．根据权利要求16的方法，其中所述化合物具有下式
21．一种用于抑制室上心搏过速时的A-V结性传导的方法，所述方法包括给予有效量的N6-(环氧环烷基)腺苷化合物，或类似物，衍生物或其异构体。
22．根据权利要求21的方法，其中所述化合物具有下式
其中R1=1-4个碳原子的烷基。
23．根据权利要求21的方法，其中所述化合物为N6-(环氧降冰片基)腺苷。
24．根据权利要求21的方法，其中所述化合物选自下式
25．根据权利要求21的方法，其中所述化合物具有下式
26．一种用作A1腺苷受体的兴奋剂的组合物，所述组合物包括N6-(环氧环烷基)腺苷化合物，或类似物，衍生物或其异构体；以及药物上可接受的载体。
27．根据权利要求26的组合物，其中所述化合物具有下式
其中R1=1-4个碳原子的烷基。
28．根据权利要求26的组合物，其中所述化合物为N6-(环氧降冰片基)腺苷。
29．根据权利要求26的组合物，其中所述化合物选自下式
30．根据权利要求26的组合物，其中所述化合物具有下式
31．一种用于制备核苷或类似物、衍生物、异构体，或其盐的环氧化物的方法，其中所述方法包括将核苷或类似物、衍生物、异构体，或其盐与二甲基二环氧乙烷反应。
32．根据权利要求31的方法，其中所述核苷为腺苷。
33．一种用于制备5-氨基-降冰片-2-烯的优选异构体的方法，所述方法包括用降冰片-5-烯-2-羧酸作为反应起始原料。
34．一种使室性节律恢复正常并改善心房纤颤时的室性血流动力学和心输出量的方法，所述方法包括给予有效量的N6-(环氧环烷基)腺苷化合物。
35．根据权利要求34的方法，其中所述化合物具有下式
其中R1=1-4个碳原子的烷基。
36．根据权利要求34的方法，所述方法包括给予有效量的N6-(环氧降冰片基)腺苷化合物。
37．根据权利要求34的方法，其中所述化合物选自下式
38．根据权利要求34的方法，其中所述化合物具有下式
全文摘要
腺苷和黄嘌呤衍生物以及包含这些化合物的组合物都是腺苷受体的有效的选择性兴奋剂和拮抗剂。这些衍生物和组合物常用于治疗包括某些心脏心律失常在内的疾病。
文档编号C07D473/06GK1206420SQ96199338
公开日1999年1月27日 申请日期1996年12月26日 优先权日1995年12月29日
发明者路易兹·比拉迪内里, 雷·奥尔桑, 斯蒂芬·巴克尔, 彼得·J·斯卡梅里斯, 彼得·G·米尔纳, 朱格·R·普菲斯特 申请人:佛罗里达大学