专利名称：具有释放生长激素特性的化合物的制作方法
发明的领域本发明涉及一些新化合物，特别是4,4-双取代和3,3-双取代的哌啶化合物，含有它们的组合物，以及它们用于治疗由生长激素缺乏所致的内科疾病。
背景技术：
生长激素是一种刺激所有能生长的组织生长的激素。而且已知生长激素对代谢过程有诸多作用，例如刺激蛋白质的合成和游离脂肪酸的调动从而产生能量代谢从碳水化合物代谢到脂肪酸代谢的转换。生长激素的缺乏可以导致许多严重的内科疾病，例如侏儒症。
生长激素是从脑垂体释放的。该释放是在大量激素和神经递质直接或间接的严密控制下进行。生长激素的释放可以通过生长激素释放激素(GHRH)刺激并且通过促生长抑制素抑制。在这两种情况下，激素从下丘脑释放，但是它们的作用主要是通过位于脑垂体的特定受体传递的。刺激生长激素从脑垂体释放的其他化合物，也有过报导。例如精氨酸、L-3,4-二羟基苯基丙氨酸(L-Dopa)、胰高血糖素、后叶加压素、PACAP(腺苷酸环化酶活化肽)、蕈毒碱受体拮抗剂和一种合成六肽，GHRP(生长激素释放肽)通过直接对脑垂体作用或通过影响下丘脑中释放GHRH和/或促生长抑制素来释放外源性生长激素。
在需要增加生长激素水平的疾病或病理状态下，生长激素的蛋白质性质决定了只有非肠道给药是可行的。
而且，其他直接作用的天然促分泌剂，例如GHRH和PACAP是较长的多肽，这正是优选非肠道给药的原因。
某些化合物用于增加哺乳动物体内生长激素水平的用途以前已经提出，例如在EP18072、EP83864、WO89/07110、WO89/01711、WO89/10933、WO88/9780、WO83/02272、WO91/18016、WO92/01711、WO93/04081、WO9517422、WO9517423、WO9514666、WO9419367、WO9534311、WO9602530、WO9615148、WO9613265、WO9622997、WO9635713、WO9638471、WO9632943、WO9700894、WO9706803、WO9709060、WO9707117、WO9711697、WO9722620、WO9723508、WO9724369和WO9734604中。
含有释放生长激素化合物的组合物，对于生长激素释放效力以及生物利用率是非常重要的。因此，本发明的目的是提供具有释放生长激素特性的新的化合物。而且，本发明的目的是提供新的释放生长激素的化合物(生长激素促分泌剂)，它是特异性的和/或选择性的，并且没有或基本上没有副作用，例如释放LH、FSH、TSH、ACTH、后叶加压素、催产素、皮质醇和/或催乳激素。本发明的另一个目的是提供具有良好口服生物利用率的化合物。
发明概要本发明提供一些新的化合物，它们可在体外标准的试验条件下直接作用于垂体细胞，而使其释放生长激素。
这些释放生长激素的化合物可在体外用作独特的研究工具，特别是用于了解生长激素的分泌在垂体水平的调节机制。
而且本发明的释放生长激素的化合物还可在体内应用，以提高内源性生长激素的释放。
发明的详细说明因此，本发明在宽范围内涉及一种通式Ⅰ的化合物 其中R1为氢，或者C1-6烷基，它可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代；
a和d为相互独立的0、1、2或3；b和c为相互独立的0、1、2、3、4或5，条件是b+c为3、4或5，D为R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自为氢或C1-6烷基，它可任意被一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意构成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j各自为1或2，并且U为-O-、-S-或一个价键；h和f各自为0、1、2或3；g和e各自为0或1；M为一个价键、-CR6=CR7-、亚芳基、杂亚芳基、-O-或-S-；R6和R7各自为氢，或者C1-6烷基，它可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代；G为-O-(CH2)k-R8， J为-O-(CH2)l-R13， 其中R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16和R17相互独立地为氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；
k和l各自为0、1或2；E为-CONR18R19、-COOR19、-(CH2)m-NR18SO2R20、-(CH2)m-NR18COR20、-(CH2)m-OR19、-(CH2)m-OCOR20、-CH(R18)R19、-(CH2)m-NR18-CS-NR19R21、或-(CH2)m-NR18-CO-NR19R21；或者E为-CONR22NR23R24，其中R22为氢、可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一个或多个C1-6烷基取代的芳基或杂芳基；R23为可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基，或者为C1-7酰基；并且R24为氢、可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一个或多个C1-6烷基取代的芳基或杂芳基；或者R22和R23与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R22和R24与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R23和R24与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；其中m为0、1、2或3，R18、R19和R21各自为氢或C1-6烷基，它可任意被卤素、-N(R25)R26(其中R25和R26各自为氢或C1-6烷基)、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷基碳酰氧基或芳基取代；或者R19为 其中Q为-CH＜或-N＜，K和L各自为-CH2-、-CO-、-O-、-S-、-MR27-或一个价键，其中R27为氢或C1-6烷基；n和o各自为0、1、2、3或4；R20为C1-5烷基、芳基或杂芳基；或者它的一种药物可接受的盐；条件是如果M为一个价键，则E为-CONR22NR23R24。
本发明在较窄的范围内涉及一种通式Ⅰ的化合物 其中R1为氢，或者C1-6烷基，它可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代；a和d为相互独立的0、1、2或3；b和c为相互独立的0、1、2、3、4或5，条件是b+c为3、4或5，D为R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自为氢或C1-6烷基，它可任意被一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意构成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j各自为1或2，并且U为-O-、-S-或一个价键；h和f各自为0、1、2或3；g和e各自为0或1；M为-CR6=CR7-、亚芳基、杂亚芳基、-O-或-S-；R6和R7分别为氢，或者C1-6烷基，它可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代；G为-O-(CH2)k-R8， J为-O-(CH2)l-R13， 其中R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16和R17相互独立地为氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；k和1分别为0、1或2；E为-CONR18R19、-COOR19、-(CH2)m-NR18SO2R20、-(CH2)m-NR18COR20、-(CH2)m-OR19、-(CH2)m-OCOR20、-CH(R18)R19、-(CH2)m-NR18-CS-NR19R21、或-(CH2)m-NR18-CO-NR19R21；或者E为-CONR22NR23R24，其中R22为氢、可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一个或多个C1-6烷基取代的芳基或杂芳基；R23为可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基，或者为C1-7酰基；并且R24为氢、可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基；或者可任意被一个或多个C1-6烷基取代的芳基或杂芳基；或者R22和R23与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R22和R24与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R23和R24与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者其中m为0、1、2或3，R18、R19和R21各自为氢或C1-6烷基，它可任意被卤素、-N(R25)R26(其中R25和R26各自为氢或C1-6烷基)、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷基碳酰氧基或芳基取代；或者R19为 其中Q为-CH＜或-N＜，K和L各自为-CH2-、-CO-、-O-、-S-、-NR27-或一个价键，其中R27为氢或C1-6烷基；n和o各自为0、1、2、3或4；R20为C1-5烷基、芳基或杂芳基；或者它的一种药物可接受的盐。
此外，式Ⅰ化合物可包括其任何的旋光异构体，其形式可为可分的、纯的或部分纯化的旋光异构体，或者是它们的外消旋混合物。每当存在一个或多个手性碳原子时，这个或这些手性中心可为R和/或S构型，或者为R和S的混合体。
另外，在可能的几何异构体中，此式Ⅰ化合物可具有一个或多个碳-碳双键。而且，除非指定一种特殊的几何异构体，本发明将包括可能的立体异构体(E或Z异构体)。
在式Ⅰ化合物的一个实施例中，R1为氢。在式Ⅰ化合物的另一个实施例中，R1为C1-6烷基，如C1-4烷基，特别是甲基。
在式Ⅰ化合物的再一个实施例中，a为1。
在式Ⅰ化合物的另外再一个实施例中，d为1。
在式Ⅰ化合物的再一个实施例中，b为1。
在式Ⅰ化合物的另外再一个实施例中，b为2。
在式Ⅰ化合物的再一个实施例中，b为3。
在式Ⅰ化合物的另外再一个实施例中，c为1。
在式Ⅰ化合物的再一个实施例中，c为2。
在式Ⅰ化合物的另外再一个实施例中，c为3。
在式Ⅰ化合物的一个特殊实施例中，b+c为4。
在式Ⅰ化合物的再一个实施例中，D为R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自为氢或C1-6烷基，它可任意被一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者
R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意形成-(CH2)i-(CH2)j-，其中i和j各自为1或2，并且U为-O-、-S-或一个价键，h和f各自为0、1、2和3；g和e各自为0或1；M为-CR6=CR7-、亚芳基、杂亚芳基、-O-或-S-，其中R6和R7各自为氢或C1-6烷基。在一个实施例中R2为氢。在第二个实施例中R3为氢。在第三个实施例中R3为C1-6烷基，特别是甲基。在另一个实施例中R4为氢。在另一个实施例中R4为C1-6烷基，尤其为甲基。在另一个实施例中R3和R4形成-(CH2)i-U-(CH2)j-。在再一个实施例中i为1。在另一个实施例中i为2。在另一个实施例中j为1。在另一个实施例中j为2。在另一个实施例中U为一个价键。在另一个实施例中R3和R4形成-(CH2)3-。在另一个实施例中h为0。在另一个实施例中f为0。在另一个实施例中f为1。在另一个实施例中g为0。在另一个实施例中e为0。在另一个实施例中e为1。在另一个实施例中M为-CR6=CR7-、亚芳基、-O-或-S-。在另一个实施例中R6和R7均为氢，或者R6和R7中的一个为甲基，另一个则为氢。在另一个实施例中M为-CR6=CR7-的E-异构体。在另一个实施例中M为-CH=CH-。在另一个实施例中M为-C(CH3)=CH-。在另一个实施例中M为亚芳基，尤其为亚苯基。
在式Ⅰ化合物的另一个实施例中D为R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自为氢或C1-6烷基，它可任意被一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意形成-(CH2)i-(CH2)j-，其中i和j各自为1或2，并且U为-O-、-S-或一个价键，h和f各自为0、1、2和3；g和e各自为0或1；M为一个价键。在一个实施例中R2为氢。在第二个实施例中R3为氢。在第三个实施例中R3为C1-6烷基，特别是甲基。在另一个实施例中R4为氢。在另一个实施例中R4为C1-6烷基，尤其为甲基。在另一个实施例中R3和R4形成-(CH2)i-U-(CH2)j-。在再一个实施例中i为1。在另一个实施例中i为2。在另一个实施例中j为1。在另一个实施例中j为2。在另一个实施例中U为一个价键。在另一个实施例中R3和R4形成-(CH2)3-。在另一个实施例中h为0。在另一个实施例中f为0。在另一个实施例中f为1。在另一个实施例中g为0。在另一个实施例中e为0。在另一个实施例中e为1。在式Ⅰ化合物的优选实施例中D为(1E)-4-氨基-4-甲基戊-1-烯基、(1E)-4-氨基-2,4-二甲基戊-1-烯基、(1E)-3-(1-氨基环丁基)丙-1-烯基、1-氨基-1-甲乙基或3-氨基甲苯基。
在式Ⅰ化合物的另一个实施例中G为-O-(CH2)k-R8、 其中R8、R9、R10、R11和R12相互独立地为氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；k为0、1或2。在另一个实施例中R8、R9、R10、R11和R12相互独立地为氢。在再一个实施例中R8、R9、R10、R11和R12中的一个为苯基，并且其它的为氢，特别是R10为苯基。在另一个实施例中R8为苯基。在另一个实施例中k为1。在另一个实施例中G为苯基、1-萘基或2-萘基，优选苯基或2-萘基。在另一个实施例中G为苄氧基。在另一个实施例中G为1H-吲哚基。在另一个实施例中G为联苯-4-基。
在上面式Ⅰ化合物中G优选为2-萘基、苄氧基、1H-吲哚基或联苯-4-基。
在式Ⅰ化合物的另一个实施例中J为 其中R13、R14、R15、R16和R17相互独立地为氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基。在另一个实施例中J为 在一个特别的实施例中J为 在一个优选实施例中R13、R14、R15、R16和R17均为氢。
在式Ⅰ化合物的另一个实施例中E为-CONR18R19、-COOR19或-(CH2)m-OR19。其中m为0、1、2或3。R18和R19各自为氢或C1-6烷基，它可任意被卤素、-N(R25)R26(其中R25和R26各自为氢或C1-6烷基)、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基碳酰氧基或芳基取代。在一个特别的实施例中E为-CONR18R19。在另一个实施例中R18和R19各自为氢或C1-6烷基。在一个特别的实施例中R18和R19中的一个为氢，而另一个为甲基。在另一个实施例中E为-COOR19。在一个特别的实施例中R19为C1-6烷基，特别是乙基。
在另一个实施例中E为-CONR22NR23R24。其中R22为氢、C1-6烷基(可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代)或者芳基或杂芳基(可任意被一个或多个C1-6烷基取代)；R23为C1-6烷基(可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代)或者C1-7酰基；R24为氢、C1-6烷基(可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代)或者芳基或杂芳基(可任意被一个或多个C1-6烷基取代)；或者R22和R23与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R22和R24与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R23和R24与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代。在另一个实施例中R22为氢。在另一个实施例中R22为C1-6烷基，诸如C1-4烷基，特别是甲基。在另一个实施例中R23为C1-6烷基，诸如C1-4烷基，特别是甲基。在另一个实施例中R23为C1-7酰基，诸如C2-4酰基，特别是乙酰基。在式Ⅰ化合物的另一个实施例中R24为氢。在另一个实施例中R24为C1-6烷基，诸如C1-4烷基，特别是甲基。在一个特殊实施例中R22为氢，并且R23和R24为C1-6烷基，诸如C1-4烷基，特别是甲基。在另一个实施例中R22和R23可与连接于它们的的氮原子一起形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代。这种杂环系，包括R22和R23，可为芳族或非芳族的，并且可选自例如吡唑、哒嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮杂萘、肉啉、吡唑烷或吡唑啉。在另一个实施例中R22和R24可与连接于它们的的氮原子一起形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代。这种杂环系，包括R22和R24，可为芳族或非芳族的，并且可选自例如吡唑、哒嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮杂萘、肉啉、吡唑烷或吡唑啉。在式Ⅰ化合物的另一个实施例中R23和R24可与连接于它们的的氮原子一起形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代。这种杂环系，包括R22和R23，可为芳族或非芳族的，并且可选自例如氮丙啶、二噻嗪、吡咯、咪唑、吡唑、异吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、咪唑啉、吡唑烷、吡唑啉、哌啶、哌嗪、二氢吲哚、异二氢吲哚或吗啉。在一个特殊实施例中，R23和R24与连接于它们的氮原子一起形成吡咯烷。
当R22和R23形成一种杂环系，R23和R24也可同时形成一种杂环系，或者R24可为氢、可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一个或多个C1-6烷基取代的芳基或杂芳基。
当R22和R24形成一种杂环系，R23和R24也可同时形成一种杂环系，或者R23可为可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基、或者C1-7酰基。
在上面式Ⅰ化合物中，E优选为(甲氨基)碳基、N,N-二甲基肼基羰基、乙氧基羰基、或(吡咯烷-1-基)氨基羰基。
式Ⅰ化合物一种特别优选的基团为那些具有式Ia的基团， 其中R1、D、G、E、J、a和d均如上所述。
式Ⅰ化合物另一种特别优选的基团为那些具有式Ib的基团， 其中R1、D、G、E、J、a和d均如上所述。
优选的本发明的式Ⅰ化合物为1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(1R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基)N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(联苯-4-基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺
1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(联苯-4-基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-((2R)-2-{N-[(2E)-4-(1-氨基环丁基)丁-2-烯酰基]-N-甲基氨基}-3-(联苯- 2-氨基-N-[(1R)-2-[4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-1(3R)-3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-苄氧基甲基-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺
2-氨基-N-[(1R)-2-[(3R)-3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(联苯-4-基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(联苯-4-基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯
1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰]-3-苄基哌啶-3-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰]-3-苄基哌啶-3-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-(3-(氨甲基)苯甲酰氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰]-3-苄基哌啶-3-羧酸乙酯
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(1R)-2-[4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基碳基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基甲基)-2-氧乙基}酰胺
2-氨基-N-{2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((联苯-4-基)甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{2-[3-苄基-3-(N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺
2-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 1-[(2R)-2-(2-氨基-2-甲基丙酰氨基)-3-(1-H-吲哚-3-基)丙酰]-3-苄基哌啶-3-羧酸(吡咯-1-基)酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’,N’-三甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 和它们的药物可接受的盐。
通用方法方案Ⅰ 本发明所用的并在上面方案Ⅰ中说明的方法是基于本领域所熟知的肽偶合反应，而且它不应该被理解为是对本发明进行任何限制。在第一步中，通过一种诸如碳化二亚胺和羟基氮杂苯并三唑(HOAt)的偶合剂将一种胺(1)与一种羧酸偶合为一种酰胺。在进行下一步偶合之前，应用本领域技术人员所熟知的方法可除去适宜的保护基，诸如叔丁基氧基羰基(Boc)，因此而产生化合物(2)。也可以免用保护基。然后通过一种偶合剂，将(2)与一种式D-COOH的羧酸偶合，而产生化合物(3)。方案Ⅱ 可按照方案Ⅱ中说明的方法制备通式结构Ⅰ的化合物，它在C末端含有一个肼。本发明所用的和在上面方案Ⅱ中说明的方法是基于本领域所熟知的肽偶合反应，而且它不应该被理解为是对本发明进行任何限制。在第一步中，应用一种适宜的偶合剂，诸如1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亚胺氢氯化物、1-羟基苯并三唑，或者另一种在适宜溶剂(诸如二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中进行肽偶合的已知偶合剂，将一种单、二或三取代肼或腙(4)和一种适宜的保护氨基酸偶合，而形成化合物(5)。然后通过一种偶合剂，将酰胺(5)和一种羧酸偶合而产生化合物(6)。然后通过一种偶合剂，将(6)与一种式D-COOH的羧酸偶合而产生化合物(7)。在此方法中，在进行下一步偶合之前，应用本领域技术人员所熟知的方法可除去适宜的保护基，诸如叔丁基氧基羰基(Boc)。也可以免用保护基。按照本领域已知的方法以及例如T.W.Green所述的方法(《有机合成中的保护基》，第2版，John Wiley和Sons，纽约，1991)可对这些适宜的氨基酸进行保护和去保护。
因为式Ⅰ化合物是非天然的，特别是因为非天然酰胺键模拟键取代了天然的酰胺键，所以对于通过酶而进行的蛋白降解作用，它们表现出强的抵抗性。与已知激素释放肽相比，本发明化合物对蛋白降解作用抵抗性的增强，其生物利用度将比前面文献所提到的肽的生物利用度估计会高。
在上面结构式和本发明整个说明书中，术语的含义说明如下上面指定的C1-6烷基、C1-6亚烷基、C1-4烷基或C1-4亚烷基将要包括直链或者支链或者环结构中的指定长度的那些烷基或亚烷基。直链烷基的实例有甲基、乙基、丙基、丁基、戊基和己基，以及它们相应的二价部分，诸如乙烯。支链烷基的实例有异丙基、仲丁基、叔丁基、异戊基和异己基，以及它们相应的二价部分，诸如异丙烯。环烷基的实例有C3-6环烷基，诸如环丙基、环丁基、环戊基和环己基，以及它们相应的二价部分，诸如环丙烯。
上面指定的C1-6烷氧基将要包括直链或者支链或者环结构中的指定长度的那些烷氧基。直链烷氧基的实例有甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基和己氧基。支链烷氧基的实例有异丙氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、异戊氧基和异己氧基。环烷氧基的实例有环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基和环己氧基。
上面指定的C1-7酰基将要包括直链或者支链或者环结构中的指定长度的那些酰基。直链酰基的实例有甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基等。支链酰基的实例有异丁酰基、异戊酰基和新戊酰基等。环酰基的实例有环戊基羰基和环己基羰基等。
在本发明说明书中，术语“芳基”将要包括单价碳环的芳环部分，或为单环，或为二环，或为多环，例如选自由苯基和萘基组成的组，它可任意被一个或多个C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、氨基或芳基取代。
在本发明说明书中，术语“亚芳基”将要包括二价碳环的芳环部分，或为单环，或为二环，或为多环，例如选自由亚苯基和亚萘基组成的组，它可任意被一个或多个C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、氨基或芳基取代。
在本发明说明书中，术语“杂芳基”将要包括单价杂环的芳环部分，或为单环，或为二环，或为多环，例如选自由吡啶基、1-H-四唑-5-基、噻唑基、咪唑基、吲哚基、嘧啶基、噻二唑基、吡唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻吩基、喹啉基、吡嗪基或异噻唑基组成的组，它可任意被一个或多个C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、氨基或芳基取代。
在本发明说明书中，术语“杂亚芳基”将要包括二价杂环的芳环部分，或为单环，或为二环，或为多环，例如选自由吡啶二基、1-H-四唑二基、噻唑二基、咪唑二基、吲哚二基、嘧啶二基、噻二唑二基、吡唑二基、噁唑二基、异噁唑二基、噁二唑二基、噻吩二基、喹啉二基、吡嗪二基或异噻唑二基组成的组，它可任意被一个或多个C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、氨基或芳基取代。
在本发明说明书中，术语“杂环系”将要包括芳环和非芳环部分，它可为单环、二环或多环，并且在它们的环结构中包含至少一个氮原子(诸如一个、二个或三个)和任意一个或多个其它杂原子(诸如一个或二个)，例如硫或氧原子。这个杂环系优先选自吡唑、哒嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮杂萘、1,2-二氮杂萘、吡唑烷、吡唑啉、氮丙啶、二噻嗪、吡咯、咪唑、吡唑、异吲哚、吲哚、嘌呤、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、咪唑啉、吡唑烷、吡唑啉、哌啶、哌嗪、二氢吲哚、异二氢吲哚或吗啉。
术语“卤素”将要包括氯(Cl)、氟(F)、溴(Br)和碘(I)。
本发明的化合物可具有一个或多个不对称中心(手性碳原子)，并且在本发明的范围内将包括可分离、纯化或部分纯化的立体异构体或它们的外消旋混合物。
本发明的化合物可任意为一种药物可接受的盐的形式，诸如式Ⅰ化合物的药物可接受的酸加成盐，它包括将式Ⅰ化合物与一种无机或有机酸反应而制备的那些盐，这些无机或有机酸诸如为盐酸、氢溴酸、硫酸、乙酸、磷酸、乳酸、马来酸、扁桃酸、苯二甲酸、柠檬酸、戊二酸、葡糖酸、甲磺酸、水杨酸、琥珀酸、酒石酸、甲苯磺酸、三氟乙酸、氨基磺酸或富马酸和/或水。
可以药物可接受的酸加成盐的形式应用式Ⅰ化合物，或者在适宜的地方以一种碱金属或碱土金属或者低级烷基铵盐进行应用。这种盐的形式其活性等级被认为是与游离碱形式的活性等级大致相同。
另一方面，本发明涉及一种药物组合物，它含有作为活性组分的通式Ⅰ的化合物或其药物可接受的盐和一种药物可接受的载体或稀释剂。
可按照常规技术制备包含本发明化合物的药物组合物，例如在《Remington’s药物科学》1985或在Remington《科学和药物实验》，19版(1995)中所述的方法。此组合物可为常规的形式，例如胶囊、片剂、气雾剂、溶液、悬浮剂或局部涂敷剂。
所用的药物载体或稀释剂可为常用的固体或液体载体。固体载体的实例为乳糖、石膏粉、蔗糖、环糊精、滑石、凝胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸镁、硬脂酸或纤维素的低级烷基醚。液体载体的实例为糖浆、花生油、橄榄油、磷脂、脂肪酸、脂肪酸胺、聚氧乙烯或水。
相似地，此载体或稀释剂可包括本领域已知的各种缓释物质，诸如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，单用或与一种蜡混合应用。
如果一种固体载体用于口服，则可将此制剂制成片剂、以粉末或小丸的形式放在一种硬凝胶胶囊中、或者它可为锭剂或糖锭的形式。固体载体的量可有较大的变化，但是通常为25mg左右至1g左右。如果应用一种液体载体，此制剂可为糖浆、乳剂、软凝胶胶囊或无菌注射液的形式，注射液诸如为含水或非水液体悬浮液或溶液。
按照常规制片技术制备的典型片剂可含有药芯活性化合物(可为自由化合物或其盐)100mg胶体二氧化硅(Aerosil) 1.5mg纤维素、微晶(Avicel)70mg改良的纤维素树胶(Ac-Di-Sol) 7.5mg硬脂酸镁包衣HPMC大约9mg*Mywacett 9-40 T 大约0.9mg*酰化单酸甘油酯用作涂膜的增塑剂。
用于鼻腔给药，此制剂中的式Ⅰ化合物可溶解或悬浮于液体载体中，特别是一种水载体中，以利于气雾给药。此载体可含有添加剂，诸如例如丙二醇的加溶剂、表面活性剂、诸如卵磷脂(磷脂酰胆碱)或环糊精的吸收增强剂、或者诸如对羟基苯甲酸酯(parabenes)的防腐剂。
通常按单位剂量形式分配本发明的化合物，每单位剂量由50-200mg的活性组分和一种药物可接受的载体组成。
本发明化合物作为药物应用于患者(例如人)时，适宜的剂量为0.01-500mg/天，例如可从5至50mg左右，诸如每剂可约为10mg。
在另一方面，本发明涉及单位剂量形式的一种药物组合物，它包含的活性组分是约为10至200mg的通式Ⅰ的化合物或其一种药物可接受的盐。
已经证明通式Ⅰ的化合物具有在体内释放内源性生长激素的作用。因此此化合物可用于治疗需要提高血浆生长激素水平的疾病，诸如生长激素不足的人或老年患者，或者家畜。
因而，在一个具体方面，本发明涉及一种用于刺激垂体释放生长激素的药物组合物，此组合物含有作为活性组分的一种通式Ⅰ的化合物或其药物可接受的盐与一种药物可接受的载体或稀释剂。
在另一方面本发明涉及一种刺激垂体释放生长激素的方法，此方法包括将一种有效量的通式Ⅰ的化合物或其药物可接受的盐给予需要它的患者。
在另一方面，本发明涉及通式Ⅰ的化合物或其药物可接受的盐在一种药物制备中的应用，此药物用于刺激垂体释放生长激素。
本领域的技术人员均知道，生长激素在人体中的现有和潜在用途是非常广泛和多种多样的。因而，式Ⅰ化合物可用于刺激垂体释放生长激素，并且因此具有与生长激素相似的作用和用途。式Ⅰ化合物用于刺激老年人生长激素的释放；预防糖皮质激素分解代谢的副作用；治疗和/或预防骨质疏松症；治疗慢性疲劳综合征(CFS)；治疗急性疲劳综合征和选择性手术后的肌肉脱失；刺激免疫系统；加速伤口愈合；加速骨折修复；加速骨折复合例如盘状骨生成；治疗继发性骨折的消耗；治疗生长迟缓；治疗肾衰或肾功不全所致的生长迟缓；治疗心肌病；治疗慢性肝病；治疗血小板减少症；治疗节段性回肠炎；治疗短肠综合征；治疗慢性阻塞性肺病(COPD)；治疗与移植相关的并发症；治疗包括生长激素不足的儿童的生理性身材矮小和与慢性疾病相关的身材矮小；治疗肥胖和与肥胖相关的生长迟缓；治疗厌食；治疗与Prader-Willi综合征和特纳综合征相关的生长迟缓；提高不完全性生长激素不敏感综合征患者的生长速度；加速烧伤患者的恢复并缩短住院期；治疗宫内发育迟缓、骨骼发育不良、皮质醇过多症、库欣综合征；诱导搏动的生长激素释放；应激患者生长激素的置换；骨软骨发育不良、Noonan’s综合征、精神分裂症、抑郁症、阿尔茨海默病、伤口愈合延迟和精神丧失的治疗；肺机能不良和呼吸机依赖性的治疗；心衰或相关的血管机能不良的治疗；心功损害的治疗；心肌梗塞的治疗或预防；降低血压；心室机能不良的保护或再灌注的预防；慢性透析成人患者的治疗；减弱大手术后蛋白分解代谢的反应；减轻癌症或艾滋病等慢性病所致的恶病质；包括胰岛细胞增殖症的高胰岛素血症的治疗；排卵诱导的辅助治疗；刺激胸腺发育并预防年龄相关的胸腺机能下降；免疫抑制患者的治疗；肌肉委缩的治疗；与艾滋病相关的消耗的治疗；增强肌肉力量、动度、保持皮肤厚度、代谢平衡、虚弱老年人肾平衡的保持；成骨细胞的激发；骨再成形和软骨生长；食物摄取的调节；宠物动物免疫系统的激发和宠物衰老疾病的治疗；促进家畜的生长和羊毛生长；代谢综合征(综合征X)的治疗；哺乳动物(例如人)中胰岛素抗性的治疗，包括NIDDM；睡眠质量的改善以及REM睡眠延长和REM潜伏期缩短所致衰老的相对生长激素减少的校正；以及低温的治疗。也将要包括预防性治疗。
对于上面所说的那些适应症来说，剂量将随所用式Ⅰ化合物、给药的方式和所需要的治疗的不同而不同。但是，对患者和动物使用一般剂量水平可获得内源性生长激素的有效释放，此剂量水平在0.0001和100mg/kg体重/天之间。而且按照上面的剂量水平进行给药时，式Ⅰ化合物没有或基本没有副作用，这种副作用是例如LH、FSH、TSH、ACTH、抗利尿激素、催产素、氢化可的松和/或催乳激素的释放。通常适用于口、鼻、肺或经皮给药的剂量含约0.0001mg至约100mg的式Ⅰ化合物与一种药物可接受的载体或稀释剂混合，式Ⅰ化合物优选为0.001mg左右至50mg左右。
本发明的药物组合物或者也可以是将式Ⅰ化合物与具有不同活性的一种或多种化合物组合，此不同活性的化合物例如为一种抗生素或其它药物活性物质。
给药途径可以是能有效地将活性化合物传递至适宜或需要作用的位点，诸如经口、鼻、肺、皮肤或胃肠外给药，优选口服给药。
式Ⅰ化合物除了药物应用外，它们还可用作体外的工具，以用于研究生长激素释放的调节。
式Ⅰ化合物还可用作体内工具，以评价垂体生长激素的释放能力。例如可检测这些化合物给药前后人血清样本中的生长激素。比较每份血清样本的生长激素可直接地确定患者垂体释放生长激素的能力。
可将式Ⅰ化合物用于经济上重要的动物，以提高它们的生长速度和生长程度，并能提高奶产量。
促生长激素分泌的式Ⅰ化合物的另一个用途是与其它促分泌素合用，这些促分泌素诸如为GHRP(2或6)、GHRH及其类似物、生长激素及其类似物，或包括IGF-1和IGF-2的生长调节素。
药理学方法可评价式Ⅰ化合物在大鼠垂体原始培养物中体外释放生长激素的效率和功能，并且可按照下述方法进行这种评价。
大鼠垂体细胞的分离群是O.Sartor等在《内分泌学116》1985，第952-957页中所述的改良型。从丹麦Lille Skensved的Mφllegaard购买雄性白化体Sprague-Dawley大鼠(250+/-25g)。将这些鼠养在分组饲育箱中(每箱4只)，并放在12小时光照周期的房间内。室温在19-24℃之间，湿度为30-60％。
对这些鼠处死，并分割垂体。除去神经中间叶，立即将剩余组织放于冰冷的分离缓冲剂中(添加有0.25％D-葡萄糖、2％非基本氨基酸(Gibco 043-01140)和1％牛血清白蛋白(BSA)(Sigma A-4503)的Gey’s培养基(Gibco 041-04030))。将此组织切成小片，转移至添加3.8mg/ml胰蛋白酶(Worthington#3707TRL-3)和330mg/ml脱氧核糖核酸(SigmaD-4527)的分离缓冲剂中。在37℃,95/5％的O2/CO2气氛中，以70转/分将此混合物培养35分钟。然后在上面的缓冲剂中将此组织冲洗3遍。用标准巴斯德移液管将此组织抽吸为单细胞。分散后，通过一种尼龙滤纸(160mm)过滤此细胞，以除去未水解的组织。用添加胰蛋白酶抑制剂(0.75mg/ml,Worthington#2829)的分离缓冲剂冲洗此细胞悬浮液3遍，最后将其再悬浮于培养基中，此培养基为添加25mM HEPES(Sigma H-3375)、4mM谷氨酰胺(Gibco 043-05030H)、0.075％碳酸氢钠(Sigma S-8875)、0.1％非基本氨基酸、2.5％胎牛血清(FCS,Gibco011-06290)、3％马血清(Gibco 034-06050)、10％新鲜大鼠血清、1nMT3(Sigma T-2752)和40mg/l地塞米松(Sigma D-4902)的DMEM(Gibco 041-01965)，PH为7.3，密度为2×105细胞/ml。以200ml/池，将此细胞种在微滴定板(Nunc，丹麦)上，并在37℃和8％的CO2下将其培养3天。
培养后，用刺激缓冲剂(添加1％BSA(Sigma A-4503)、0.25％D-葡萄糖(Sigma G-5250)和25mM HEPES(Sigma H-3375)的Hanks平衡盐溶液(Gibco041-04020)，pH为7.3)将此细胞冲洗2遍，然后在37℃预保温l小时。用90ml刺激缓冲剂(37℃)交换此缓冲剂。加入10ml试验化合物溶液，在37℃和5％CO2下将此板培养15分钟。倾析此培养基，并在rGH SPA试验系统中分析GH的含量。
进行试验的所有化合物的剂量范围为10pM至100nM。应用Hill等式(图表P,Biosoft)建立一种剂量-反应关系。用GHRP-6的Emax的百分比(％)表示其效率(最大GH释放，Emax)。将功能(EC50)确定为引起GH释放的最大刺激的半量的浓度。
可用下面描述的方法评价式Ⅰ化合物的代谢稳定性将化合物以1mg/ml的浓度溶于水中。将25ml此溶液加到175ml相关的酶溶液中(使酶底物比例(w/w)大约为1∶5)。将此溶液保持在37℃过夜。用分子离子的选择离子检测的流量注射电喷(electrospray)质谱分析法(ESMS)对10ml各种降解溶液进行分析，将这与相应的零样本进行对比。与零样本相比，如果信号下降超过20％，则通过HPLC和质谱分析法对剩余的溶液进行分析，以便精确地确定降解的程度和位点。
在稳定性试验中已经包括了几种标准肽(ACTH 4-10、血管紧张素1-14和胰高血糖素)，以便检验各种溶液降解肽的能力。
标准肽(血管紧张素1-14、ACTH 4-10和胰高血糖素)从美国密苏里州的Sigma公司购得。
酶(胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、氨肽酶M和羧肽酶Y和B)全部是从Boehringer Mannheim GmbH(曼海姆，德国)购得。
胰酶混合物胰蛋白酶、糜蛋白酶和弹性蛋白酶在100mM碳酸氢铵中，PH为8.0(所有浓度均为0.025mg/ml)。
羧肽酶混合物羧肽酶Y和B在50mM乙酸铵中，PH为4.5(浓度均为0.025mg/ml)。
氨肽酶M溶液氨肽酶M(0.025mg/ml)在100mM碳酸氢铵中，PH为8.0。
用两种不同的质谱仪进行质谱分析。在Sciex APIⅢ三相四极LC-MS仪器(Sciex仪器，Thornhill，安大略)上装有一种电喷(electrospray)离子源和一种Bio-lon20飞行时间等离子解吸仪(Bio-Ion Nordic AB,Uppsala，瑞典)。
在APIⅢ仪上在所分析物的流量注射的同时用所测定的分子离子的单离子检测，以此进行此化合物的定量测定(在降解前和降解后)。通过ABI 140BHPLC仪(Perkin-Elmer应用生物系统部，Foster市，加拿大)控制的液体流量(MeOH水1∶1)为100ml/min。将仪器的参数设定在标准操作条件，并用最强的分子离子进行SIM检测(在大多数情况中，这相当于两倍的带电分子离子)。
将样本用在硝化纤维包被的靶目标和标准仪器装置上，通过用等离子解吸质谱分析(PDMS)进一步进行降解产物的鉴定。在此测定的质量的精度通常优于0.1％。
用一种标准乙腈TFA分离梯度，用HY-TACH C-18反相4.6×105mmHPLC柱进行降解产物的离析和分离。所用的HPLC系统为HP1090M(惠普公司，Palo Alto，加拿大)。
+稳定(降解溶液中24后SIM信号减弱小于20％)-不稳定(降解溶液中24后SIM信号减弱大于20％)在此描述的任何新特征或特征的组合均被认为是本发明所必要的。
实施例在下面的实施例中进一步说明制备式Ⅰ化合物和包含该化合物的制剂的方法，但是它并不是要对本发明构成任何限制。
通过高性能液相色谱(HPLC)、核磁共振(NMR,Bruker 400MHz)或液相色谱-质谱(LC-MS)确定化合物的结构。每兆(ppm)部分地给出NMR移动，而且仅给出选择峰。mp是熔点，用℃表示。用W.C.Still等在有机化学杂志1978,43,2923-2925中所述的技术在Merck硅胶60(Art9385)上进行柱层析。用作原材料的化合物或者是已知化合物，或者是每个本领域的普通技术人员用已知方法很容易制备的化合物。所用的甲醇/氨溶液是含有10％氨的甲醇溶液。
HPLC分析方法A1.
通过在42℃下以1mL/分钟的速率洗脱的218TP54 4.6mm×250mm 5mC-18二氧化硅柱(The Seperation Group,Hesperia)上的214、254、276和301nm处，用紫外检测法进行逆向分析。此柱用含有5％乙腈的缓冲液平衡，缓冲液由0.1M硫酸铵组成并用4M硫酸调节PH至2.5，注射后，样品用梯度为5％-60％的乙腈缓冲液在50分钟内洗脱，所用缓冲液与上同。
方法B1.
通过在42℃下以1mL/分钟的速率洗脱的218TP54 4.6mm×250mm 5mC-18二氧化硅柱(The Seperation Group,Hesperia)上的214、254、276和301nm处的紫外检测进行逆向分析。此柱用含有5％乙腈的0.1％的TFA水溶液平衡，注射后，样品用含有梯度为5％-60％(乙腈+0.1％TFA)的相同缓冲水溶液在50分钟内洗脱。
LC-MS分析用Water3mm×150mm 3.5m C-18 Symmetry柱和流速为20ml/分钟的喷淋阳离子在PE Sciex AP1 100 LC/MS系统上进行LC-MS分析。此柱用线性梯度为5-90％乙腈、85-0％水和10％三氟乙酸(0.1％)/水在15分钟内以1ml/分钟的流速洗脱。
缩写TLC薄层分析
DMSO 二甲亚砜min 分钟h小时Boc 叔丁基氧羰基DMF 二甲基甲酰胺THF 四氢呋喃EDAC N-乙基-N’-二甲基氨丙基碳化二亚胺盐酸盐HOAt 1-羟基-1-氮杂苯并三唑DIEA 二异丙基乙胺TFA 三氟乙酸结构单元如加拿大化学杂志1977,55,906所述制备用于下列实施例的N-甲基化氨基酸。
实施例11-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基〕-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 步骤AN-叔-丁基氧羰基-4-苄基哌啶-4-羧酸将N-叔-丁基氧羰基-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯(11.0g；32mmol)(如Gilligan等在医药化学1994,364-370中所述用苄基溴作烷基化剂)在(190ml)乙醇和(18％190ml)氢氧化钠水溶液的混合物中回流7小时。在真空下将体积减至三分之一并用硫酸氢钠将pH调至3。加(300ml)水并用(2×250ml)乙酸乙酯提取混合物。蒸发混合的有机相得到8.6g N-叔-丁基氧羰基-4-苄基哌啶-4-羧酸。1H-NMR:d(CDCl3)1.45(s,9H)；1.5(m(br)；2H)；2.08(m(br)；2H)；2.88(m(br)；2H)；2.89(s,2H)；3.95(m(br)；2H)；7.09-7.30(5arom.H).
步骤B4-苄基-4-甲基氨基甲酰基哌啶-1-羧酸叔-丁基酯将(3.0g；9.0mmol)N-叔-丁基氧羰基-4-苄基哌啶-4-羧酸溶于(25ml)二氯甲烷，并加入(1.8g；9.0mmol)EDAC和(1.3g；9.0mmol)HOAt。搅拌混合物15分钟，然后加入(33％乙醇中；2.3ml；18mmol)甲胺和(1.6ml；9.0mmol)DIEA，并搅拌混合物过夜。加入(100ml)二氯甲烷，并用(50ml)饱和碳酸氢钠水溶液和(10％,50ml)硫酸氢钠冲洗，用MgSO4干燥并在真空下蒸发。用含有氨、乙醇和二氯甲烷(1∶7；92)的混合水溶液作洗脱剂在(90g)二氧化硅上层析残余物，得到2.8g 4-苄基-4-甲基氨基甲酰基哌啶-1-羧酸叔-丁基酯。1H-NMR:d(CDCl3)1.44(s,9H)；1.55(m(br)；2H)；1.98(m(br)；2H)；2.70(d,sH)；2.98(m(br)；2H)；2.89(s,2H)；3.87(m(br)；2H)；5.15(q(br)；1H)；7.01-7.32(5arom. H).步骤C4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺将(2.8g)4-苄基-4-甲基氨基甲酰基哌啶-1-羧酸叔-丁基酯溶于TFA和二氯甲烷的混合液并搅拌40分钟。在真空下去掉溶剂，将残余物溶于(30ml)水并用(1N)氢氧化钠水溶液将pH调至13。水相用(3×75ml)二氯甲烷提取，混合有机相用MgSO4干燥并在真空下蒸发，得到1.50g4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺。1H-NMR:d(CDCl3)1.80(td,2H)；2.14(d(br),2H)；2.70(d,3H)；2.81(s,2H)；2.85(dt,2H)；3.21(dt,2H)；5.25(t,1H)；7.00-7.35(5arom.H).步骤D
4-苄基-1-((2R)-2-甲基氨基-3-(2-奈基)丙酰)哌啶-4-羧酸甲基酰胺将(709mg；2.15mmol)(2R)-2-叔-丁基氧羰基氨基-N-甲基-3-(2-奈基)丙酸、(293mg 2.25mmol)HOAt和(412mg；2.25mmol)EDAC溶于(5ml)二氯甲烷，并搅拌15分钟。加入(500mg；2.25mmol)4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺和(0.35ml)DIEA，并搅拌混合物过夜。加入(30ml)二氯甲烷，并将混合物用(20ml)饱和碳酸氢钠水溶液和(10％,20ml)硫酸氢钠水溶液冲洗，用MgSO4干燥并在真空下蒸发。用乙酸乙酯作洗脱剂在(40g)二氧化硅上层析残余物，得到810mg 4-苄基-1-((2R)-2-(N-甲基-叔-丁基氧羰基氨基)-3-(2-萘基)丙酰)哌啶-4-羧酸甲基酰胺，将其溶于TFA/二氯甲烷(8+8ml)并在室温下搅拌40分钟。在真空下去掉溶剂，残余物用饱和碳酸氢钠溶液中和并用(50ml)乙酸乙酯提取。有机相用MgSO4干燥并蒸发得到729mg4-苄基-1-((2R)-2-甲基氨基-3-(2-萘基)丙酰)哌啶-4-羧酸甲基酰胺。
步骤E用步骤D中所述相同的偶合方法，将(360mg；0.82mmole)4-苄基-1-((2R)-2-甲基氨基-3-(2-萘基)丙酰)哌啶-4-羧酸甲基酰胺与(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5-甲基-2-己烯酸偶合。在-10℃下，如步骤D所述去掉N-末端叔-丁基氧羰基基团。粗产物在RP-18-Seppak(5g；Waters)上纯化，所用梯度为0.1％TFA的100/0水/乙腈溶液至0.1％TFA的60/40水/乙腈溶液，得到306mg三氟乙酸盐形式的标题化合物。1H-NMR:δ(MeOH)(主要旋转异构体的选择峰)1.30(s,3H)；1.31(a,3H)；2.10(AB-syst,2H)；2.55(s,3H)；5.81(m,1H).
HPLC:rt=31.88 min(A1)rt=33.30min(B1)ESMS:m/z:569.4(M+H)+实施例21-{(1R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基〕-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基}-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 如实施例1所述制备化合物，用(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5,3-二甲基-2-己烯酸代替步骤E中的(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5-甲基-2-己烯酸。
HPLC:rt=33.70 min(A1)rt=34.22min(B1)ESMS:m/z:583.4(M+H)+
HPLC:rt=34.53min(A1)rt=36.15min(B1)ESMS:m/z:595.4(M+H)+实施例41-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基〕-N-甲基氨基]-3-(联苯-4-基)丙酰基}-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 如实施例1所述制备化合物，用(2R)-2-叔-丁基氧羰基氨基-N-甲基-3-(4-联苯基)丙酸代替步骤D中的(2R)-2-叔-丁基氧碳基氨基-N-甲基-3-(2-萘基)丙酸，用(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5,3-二甲基-2-己烯酸代替步骤E中的(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5-甲基-2-己烯酸。
HPLCrt=35.15 min(A1)rt=36.83min(B1)ESMS:m/z:609.4(M+H)+实施例51-{(2R)-2-{N-[(2E)-4-(1-氨基环丁基)丁-2-烯酰基]-N-甲基氨基}-3-(联苯-4-基)丙酰)-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 如实施例1所述制备化合物，用(2R)-2-叔-丁基氧羰基氨基-N-甲基-3-(4-联苯基)丙酸代替步骤D中的(2R)-2-叔-丁基氧羰基氨基-N-甲基-3-(2-萘基)丙酸，用(2E)-4-(1-(叔-丁基氧羰基氨基)环丁基)丁-2-烯酸代替步骤E中的(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5-甲基-2-己烯酸。
HPLC:rt=35.15min(A1)rt=36.68min(B1)ESMS:m/z:607.4(M+H)+
实施例62-氨基-N-[(1R)-2-[4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-羧酸叔-丁酯 向含有(0.75g,2.35mmol)4-苄基哌啶-1,4-二羧酸1-叔-丁酯(如Gilligan等在医药化学杂志1994,364-370中所述制备)的(10ml)二氯甲烷溶液中，加入(0.32mg,2.35mmol)1-羟基-7-氮杂苯并三唑和(0.45g,2.35mmol)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)盐酸碳化二亚胺，并将混合物搅拌30分钟。然后加入(0.27ml,3.53mmol)N’,N’-二甲基肼和(0.52ml,3.06mmol)二异丙基乙胺，并将混合物搅拌2天。加入(100ml)二氯甲烷，混合物用(20ml)饱和碳酸氢钠水溶液和(20ml)水冲洗，用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。所得油在(40g)二氧化硅上用(1∶2)庚烷/乙酸乙酯层析，得到0.76g呈无色油状的4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-羧酸叔-丁酯。
HPLC:Rt=9.66min(H8)LC-MS:Rt=9.29min,m/z=362.0(M+1)4-苄基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基酰肼 在0℃下，向含有(0.76g,2.02mmol)4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-羧酸叔-丁酯的(2ml)二氯甲烷溶液中，加入(5ml)三氟乙酸，并将混合物搅拌60分钟。用(20ml)乙醇骤冷，在真空下浓缩并用二氯甲烷洗提三次，得到定量收率的4-苄基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基酰肼。
LC-MS:Rt=5.64min,m/z=262.0(M+1)(2-(4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基)氨基甲酸叔-丁酯 向含有(0.37g,1.2mmol)2-叔-丁氧基羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸的(15ml)二氯甲烷和(5ml)二甲基甲酰胺的溶液中，加入(0.16mg,1.20mmol)1-羟基-7-氮杂苯并三唑和(0.23g,1.2mmol)1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)盐酸碳化二亚胺，并将混合物搅拌30分钟。然后加入(0.26g,1.0mmol)4-苄基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基酰肼和(0.69ml,4.0mmol)二异丙基乙胺，并将混合物搅拌过夜。加入(100ml)二氯甲烷，混合物用(20ml)饱和碳酸氢钠水溶液和(20ml)水中洗，用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。所得油在(40g)二氧化硅上用(9∶1)二氯甲烷/(10％氨的乙醇溶液〕层析，得到0.43g呈无色油状的(2-(4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基)氨基甲酸叔-丁酯。
HPLC:Rt=10.45min(H8)LC-MS:Rt=9.92min,m/z=548.2(M+1)1-(2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰基)-4-苄基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基肼 在0℃下，向含有(0.40g,0.73mmol)(2-(4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基)氨基甲酸叔-丁酯的(3ml)二氯甲烷溶液中，加入(3ml)三氟乙酸，并将混合物搅拌30分钟。混合物用(20ml)乙醇骤冷，在真空下浓缩并用二氯甲烷洗提三次，得到0.63g呈无色油状的1-(2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰基)-4-苄基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基肼。
HPLC:Rt=7.52min(H8)LC-MS:Rt=7.61min,m/z=448.4(M+1)1-(2-(4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基氨基甲酰基)-1-甲基乙基)氨基甲酸叔-丁酯 向含有(0.18g,0.88mmol)2-叔-丁氧基羰基氨基-2-甲基丙酸的(10ml)二氯甲烷溶液中，加入(0.12mg,0.88mmol)1-羟基-7-氮杂苯并三唑和(0.12g,0.8mmol)1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)盐酸碳化二亚胺，并将混合物搅拌30分钟。然后加入(0.46g,0.73mmol)1-(2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰)-4-苄基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基肼和(0.50ml,2.92mmol)二异丙基乙胺，并将混合物搅拌过夜。加入(100ml)二氯甲烷，混合物用(20ml)饱和碳酸氢钠水溶液和(20ml)水冲洗，用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。所得油在(40g)二氧化硅上用(9∶1)二氯甲烷/(10％氨的乙醇溶液〕层析，得到0.31g呈无色油状的1-(2-(4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基氨基甲酰基)-1-甲基乙基)氨基甲酸叔-丁酯。
HPLC:Rt=10.25min(H8)LC-MS:Rt=9.66min,m/z=633.2(M+1)2-氨基-N-[(1R)-2-[4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 在0℃下，向含有(0.29g,0.46mmol)1-(2-(4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基氨基甲酰基)-1-甲基乙基)氨基甲酸叔-丁酯的(3ml)二氯甲烷溶液中，加入(3ml)三氟乙酸，并将混合物搅拌30分钟。混合物用(20ml)乙醇骤冷，在真空下浓缩并用二氯甲烷洗提三次，得到0.25g呈白色非晶形粉末的2-氨基-[(1R)-2-[4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺。
HPLC:Rt=24.56min(A1),Rt=24.95 min(B1),Rt=7.73min(H8)LC-MS:Rt=7.74min,m/z=533.4(M+1)实施例72-氨基-N-{(1R)-2-[(3R)-3-苄基-(N’,N’-二甲基-肼基羰基)哌啶-1-基]-1-苄氧基乙基-2-氧基-乙基}-2-甲基-丙酰胺
用实施例6中的方法制备化合物。
ESMS:m/z:524.4(M+H)+实施例82-氨基-N-[(1R)-2-[(3R)-3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 用实施例6中的方法制备化合物。
ESMS:m/z:533.4(M+H)+HPLC:rt:27.60min(A1)HPLC:rt:26.84min(B1)实施例91-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(联苯-4-基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=12.11min,m/z:610.4(M+H)HPLC:Rt=42.075min(A1)HPLC:Rt=44.383min(B1)
实施例101-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(联苯-4-基)丙酰基}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=12.36min,m/z:624.4(M+H)HPLC:Rt=42.785min(A1)HPLC:Rt=45.148min(B1)实施例111-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=11.92min,m/z:584.4(M+H)HPLC:Rt=39.893min(A1)HPLC:Rt=42.046 min(B1)实施例121-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=12.21min,m/z:598.2(M+H)HPLC:Rt=40.541min(A1)HPLC:Rt=42.780min(B1)实施例13(3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰基]-3-苄基哌啶-3-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=10.07 min,m/z:559.4(M+H)HPLC:Rt=35.585min(A1)HPLC:Rt=37.441min(B1)实施例14(3S)-1(2R)-2-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰基]-3-苄基哌啶-3-羧酸乙酯
LC-MS:Rt=10.42 min,m/z:573.2(M+H)HPLC:Rt=36.680min(A1)HPLC:Rt=38.563 min(B1)实施例15(3S)-1-[(2R)-2-(3-(氨基甲基)苄基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰]-3-苄基哌啶-3-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=10.24 min,m/z:567.4(M+H)HPLC:Rt=36.118min(A1)HPLC:Rt=38.052 min(B1)实施例16(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(2R)-2-[4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-奈基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 LC-MS:Rt=8.82 min,m/z:598.4(M+H)HPLC:Rt=30.858min(A1)HPLC:Rt=31.198min(B1)实施例17(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-[(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]酰胺 ESMS:m/z:573.2(M+H)+实施例18(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 ESMS:m/z:598.4(M+H)+实施例19(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基乙基)-2-氧乙基}酰胺
LC-MS:Rt=8.77min；m/z:564.2(M+H)HPLC:Rt=29.829min(A1)HPLC:Rt=29.250min(B1)实施例202-氨基-N-{2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2奈基}甲基)-2-氧-乙基}-2-甲基-丙酰胺 LC-MS:Rt=4.77min；m/z:544.4(M+H)HPLC:Rt=30.900/31.586min(A1)HPLC:Rt=30.188/30.727min(B1)实施例212-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((联苯-4-基}甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 LC-MS:Rt=4.98min；m/z:570.4(M+H)HPLC:Rt=33.839/34.313min(A1)HPLC:Rt=33.2978/33.640min(B1)
实施例222-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 LC-MS:Rt=4.32min,m/z:533.4(M+H)HPLC:Rt=25.946/27.231min(A1)HPLC:Rt=25.822/26.685min(B1)实施例232-氨基-N-{2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基碳基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 LC-MS:Rt=4.33/4.75min；m/z:510.4(M+H)HPLC:Rt=30.737/30.945(A1)HPLC:Rt=26.809/27.307(B1)实施例242-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 LC-MS:Rt=4.25/5.27min；m/z:519.4(M+H)HPLC:Rt=24.994min(A1)HPLC:Rt=25.742min(B1)实施例251-[(2R)-2-(2-氨基-2-甲基丙酰氨基)-3-(1-H-吲哚-3-基)丙酰基]-3-苄基哌啶-3-羧酸(吡咯烷-1-基)酰胺 非对映体的混合物非对映体ⅠLC-MS:Rt=4.40min；m/z:559.4(M+H)HPLC:Rt=26,04min(A1)HPLC:Rt=25,79min(B1)非对映体ⅡHPLC:Rt=27,38min(A1)
实施例262-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 非对映体的混合物非对映体ⅠLC-MS:Rt=5,07min；m/z:547,4(M+H)HPLC:Rt=32,16min(A1)非对映体ⅡLC-MS:Rt=5,24min；m/z:547,4(M+H)HPLC:Rt=33,60min(A1)用实施例1-6中所述的方法制备实施例9-26中的化合物。
权利要求
1．一种通式Ⅰ的化合物 其中R1为氢，或者C1-6烷基，它可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代；a和d为相互独立的0、1、2或3；b和c为相互独立的0、1、2、3、4或5，条件是b+c为3、4或5，D为R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自为氢或C1-6烷基，它可任意被一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意构成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j各自为1或2，并且U为-O-、-S-或一个价键；h和f分别为0、1、2或3；g和e分别为0或1；M为一个价键、-CR6=CR7-、亚芳基、杂亚芳基、-O-或-S-；R6和R7各自为氢，或者C1-6烷基，它可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代；G为-O-(CH2)k-R8， J为-O-(CH2)l-R13， 其中R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16和R17相互独立地为氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；k和l各自为0、1或2；E为-CONR18R19、-COOR19、-(CH2)m-NR18SO2R20、-(CH2)m-NR18COR20、-(CH2)m-OR19、-(CH2)m-OCOR20、-CH(R18)R19、-(CH2)m-NR18-CS-NR19R21、或-(CH2)m-NR18-CO-NR19R21；或者E为-CONR22NR23R24，其中R22为氢、可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一个或多个C1-6烷基取代的芳基或杂芳基；R23为可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基，或者为C1-7酰基；并且R24为氢、可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一个或多个C1-6烷基取代的芳基或杂芳基；或者R22和R23与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R22和R24与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R23和R24与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；其中m为0、1、2或3，R18、R19和R21各自为氢或C1-6烷基，它可任意被卤素、-N(R25)R26其中R25和R26分别为氢或C1-6烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧羰基、C1- 6烷基碳酰氧基或芳基取代；或者R19为 其中Q为-CH＜或-N＜，K和L各自为-CH2-、-CO-、-O-、-S-、-NR27-或一个价键，其中R27为氢或C1-6烷基；n和o各自为0、1、2、3或4；R20为C1-5烷基、芳基或杂芳基；或者它的一种药物可接受的盐；条件是如果M为一个价键，则E为-CONR22NR23R24。
2．根据权利要求1所述的化合物，其中R1为C1-6烷基。
3．根据权利要求1或2所述的化合物，其中a为1。
4．根据前面任一权利要求所述的化合物，其中d为1。
5．根据前面任一权利要求所述的化合物，其中b+c为4。
6．根据前面任一权利要求所述的化合物，其中D为R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自为氢或C1-6烷基，它可任意被一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意构成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j分别为1或2，并且U为-O-、-S-或一个价键；h和f各自为0、1、2或3；g和e各自为0或1；M为-CR6=CR7-、亚芳基、杂亚芳基、-O-或-S-；R6和R7各自为氢，或者C1-6烷基。
7．根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中D为R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自为氢或C1-6烷基，它可任意被一个或多个卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意构成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j分别为1或2，并且U为-O-、-S-或一个价键；h和f各自为0、1、2或3；g和e各自为0或1；M为一个价键。
8．根据前面任一权利要求所述的化合物，其中G为-O-(CH2)k-R8， 其中R8、R9、R10、R11和R12相互独立地为氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；k为0、1或2。
9．根据前面任一权利要求所述的化合物，其中J为 其中R13、R14、R15、R16和R17相互独立地为氢、卤素、芳基、杂芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基。
10．根据前面任一权利要求所述的化合物，其中E为-CONR18R19、-COOR19或-(CH2)m-OR19，其中m为0、1、2或3，R18和R19各自为氢或C1-6烷基，它可任意被卤素、-N(R25)R26其中R25和R26各自为氢或C1-6烷基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷基碳酰氧基或芳基取代。
11．根据权利要求1-9中任一项所述的化合物，其中E为-CONR22NR23R24，其中R22为氢、可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一个或多个C1-6烷基取代的芳基或杂芳基；R23为可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基，或者为C1-7酰基；并且R24为氢、可任意被一个或多个芳基或杂芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一个或多个C1-6烷基取代的芳基或杂芳基；或者R22和R23与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R22和R24与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；或者R23和R24与连接于它们的氮原子一起可形成一种杂环系，它可任意被一个或多个C1-6烷基、卤素、氨基、羟基、芳基或杂芳基取代；
12．根据前面任一权利要求所述的化合物，选自1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基〕-N-甲基氨基]-3-(2-奈基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(1R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基〕-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基〕-N-甲基氨基]-3-(联苯-4-基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基〕-N-甲基氨基]-3-(联苯-4-基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(2R)-2-{N-[(2E)-4-(1-氨基环丁基)丁-2-烯酰基]-N-甲基氨基}-3-(联苯-4-基)丙酰)-4-苄基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 2-氨基-N-[(1R)-2-[4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[(3R)-3-苄基-(N’,N’-二甲基-肼基羰基)哌啶-1-基]-1-苄氧基乙基-2-氧基-乙基}-2-甲基-丙酰胺 2-氨基-N-[(1R)-2-[(3R)-3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(联苯-4-基)丙酰基}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(联苯-4-基)丙酰}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基}-4-苄基哌啶-4-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰基]-3-苄基哌啶-3-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰基]-3-苄基哌啶-3-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-(3-(氨基甲基)苄基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰]-3-苄基哌啶-3-羧酸乙酯 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(2R)-2-[4-苄基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-[(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基乙基)-2-氧乙基}酰胺 2-氨基-N-{2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2萘基}甲基)-2-氧-乙基}-2-甲基-丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((联苯-4-基}甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 1-[(2R)-2-(2-氨基-2-甲基丙酰氨基)-3-(1-H-吲哚-3-基)丙酰基]-3-苄基哌啶-3-羧酸(吡咯烷-1-基)酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-苄基-3-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(苄氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 及其药物可接受的盐。
13．一种药物组合物，它含有作为活性组分的根据前面任一化合物权利要求中所述的一种化合物或其药物可接受的盐和一种药物可接受的载体或稀释剂。
14．一种刺激哺乳动物垂体释放生长激素的方法，此方法包括给所说的哺乳动物服用一种有效量的根据前面任一化合物权利要求中所述的一种化合物或其药物可接受的盐，或者是根据前面组合物权利要求中所述的一种组合物。
15．根据前面任一化合物权利要求中所述的一种化合物或其药物可接受的盐在制备一种用于刺激哺乳动物的垂体释放生长激素药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一些新的化合物,特别是4,4－双取代和3,3－双取代哌啶化合物,包含它们的组合物,以及它们在治疗生长激素缺乏所致的内科疾病中的应用。
文档编号C07D223/06GK1300281SQ99806010
公开日2001年6月20日 申请日期1999年5月10日 优先权日1998年5月11日
发明者托马斯·K·汉森, 迈克尔·安克森 申请人:诺沃挪第克公司