专利名称：聚乙烯亚胺衍生物及其制备方法和应用的制作方法
聚乙烯亚胺衍生物及其制备方法和应用
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种泊洛沙姆(Ploxamer，商品名Pluronic) 修饰的聚乙烯亚胺衍生物及其制备方法和应用。
背景技术：
基因治疗是指将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用。因体内存在多种可以降解DNA或RNA的酶以及不同类型的生物屏障，所以治疗基因要想有效地到达靶部位，必须借助于一定的载体运输。质粒DNA—般进入细胞核后可有效表达，而RNA(siRNA或miRNA)则是在细胞质中发挥其调节作用，因此，如何构建不同类型的载体，使其或者可以在细胞质中聚集，或者可以穿透核膜而在细胞核中富集，是现在基因载体所关注的热点和难点。聚乙烯亚胺 (polyethylenimine,PEI)是目前应用较为广泛的一类非病毒基因载体，在体内外均有较高的转染效率，PEI的转染效率与其分子量相关，其分子量大于22000时才可获得满意的转染效果，但同时也具有较高的细胞毒性，而小分子量的PEI (Mw = 2000)细胞毒性很小，但其转染效率低下，无法达到治疗的目的。而且PEI与DNA形成的复合物在体内极易聚集(如沉积于肺毛细血管床，则导致严重的肺栓塞)，其载体系统的粒径和分散稳定性对缓冲盐体系和血清都非常敏感，导致应用于体内时毒性大、转染效率低、药代动力学和体内分布不佳。 为了克服其缺点，一般使用生物相容性的亲水性聚合物如聚乙二醇(PEG)修饰PEI，以提高 PEI/DNA复合物的稳定性，降低毒性，但是由于PEI被亲水性聚合物修饰后与细胞的亲和力降低，使得目的基因无法进入细胞，转染效率下降。如何通过化学修饰的手段提高PEI的体内外转染效率，同时降低细胞毒性，是目前研究的热点。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种聚乙烯亚胺衍生物，该聚乙烯亚胺衍生物是泊洛沙姆修饰的聚乙烯亚胺，其在体内外的稳定性好，细胞毒性小，且转染效率高。此外，还需要提供一种聚乙烯亚胺衍生物的制备方法及其作为基因载体的应用。为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现在本发明的一个方面，提供了一种聚乙烯亚胺衍生物，该聚乙烯亚胺衍生物为泊洛沙姆修饰的聚乙烯亚胺，其化学结构式如下
OO
Jv ζ zl
PEI^—HNO X yyX-7Xx-^ ONH^—PEI式中，PEI为聚乙烯亚胺，χ = 2-80，y = 10-40。优选的，所述聚乙烯亚胺的分子量为2000。泊洛沙姆为两亲性聚合物，由亲水性的聚氧乙烯链(EO)和亲脂性的聚氧丙烯链(PO)组成，其化学结构式如下
权利要求
1.一种聚乙烯亚胺衍生物，其特征在于，该聚乙烯亚胺衍生物为泊洛沙姆修饰的聚乙烯亚胺，其化学结构式如下
2.根据权利要求1所述的聚乙烯亚胺衍生物，其特征在于，所述聚乙烯亚胺的分子量为 2000。
3.根据权利要求1或2所述的聚乙烯亚胺衍生物，其特征在于，所述泊洛沙姆选自型号为F68、P105、P123或L61的泊洛沙姆。
4.根据权利要求1或2所述的聚乙烯亚胺衍生物，其特征在于，所述泊洛沙姆和聚乙烯亚胺的反应摩尔比为1 2-10。
5.根据权利要求4所述的聚乙烯亚胺衍生物，其特征在于，所述泊洛沙姆和聚乙烯亚胺的反应摩尔比为1 5-10。
6.根据权利要求5所述的聚乙烯亚胺衍生物，其特征在于，所述泊洛沙姆和聚乙烯亚胺的反应摩尔比为1 10。
7.权利要求1所述聚乙烯亚胺衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤用三光气和N-羟基琥珀酰亚胺活化泊洛沙姆两端羟基；将活化的泊洛沙姆与聚乙烯亚胺反应，得泊洛沙姆修饰的聚乙烯亚胺。
8.权利要求1所述聚乙烯亚胺衍生物作为基因载体的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述基因载体承载DNA或RNA。
全文摘要
本发明公开了一种聚乙烯亚胺衍生物，该聚乙烯亚胺衍生物为泊洛沙姆修饰的聚乙烯亚胺。本发明还公开了该聚乙烯亚胺衍生物的制备方法和应用。本发明的聚乙烯亚胺衍生物，不仅细胞毒性小，而且转染效率高，非常适于作为基因载体应用。
文档编号C08G81/00GK102391509SQ20111038660
公开日2012年3月28日 申请日期2011年11月29日 优先权日2011年11月29日
发明者丁雪鹰, 刘继勇, 尹东锋, 朱全刚, 武鑫, 范伟, 高志祥, 高申, 高静 申请人:中国人民解放军第二军医大学