本发明涉及经取代的吡咯并吡啶酮和经取代的吡唑并吡啶酮，其为诸如BRD2、BRD3、BRD4和BRD-t的BET蛋白的抑制剂且适用于治疗诸如癌症的疾病。
发明背景
真核生物体的基因组在细胞核内高度组织化。通过包绕组蛋白核心将DNA封装于染色质中以形成核小体。通过聚集和折叠进一步压实这些核小体以形成高度浓缩的染色质结构。可能存在多种不同的浓缩状态，且此结构的紧密性在细胞周期过程中变化，在细胞分裂过程中最紧凑。染色质结构在通过调控通向DNA的蛋白质通路来调控基因转录方面起重要作用。通过主要在组蛋白H3和H4中延伸越过核心核小体结构的尾部内对组蛋白进行一系列转译后修饰来控制染色质结构。这些可逆修饰包括乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化和SUMO化。这些表观遗传标记是由修饰组蛋白尾部内的特定残基，从而形成表观遗传密码的特定酶来进行书写和擦除。其它核蛋白结合这些标记且通过调控染色质结构和基因转录来实现由此信息规定的输出。越来越多的证据将基因变化与导致诸如神经退化性病症、代谢疾病、炎症和癌症的疾病中的异常组蛋白标记的编码基因的表观遗传调节因子和调控因子相关联。
组蛋白乙酰化典型地与基因转录的活化相关，因为所述修饰削弱DNA与组蛋白之间的相互作用，从而允许转录机制在更大程度上通向DNA。特定蛋白质结合组蛋白内的乙酰化赖氨酸残基以“阅读”表观遗传密码。称为溴结构域的高度保守蛋白模块结合组蛋白和其它蛋白质上的乙酰化赖氨酸残基。人基因组中存在多于60种含溴结构域的蛋白质。
含BET(溴结构域和额外末端)家族溴结构域的蛋白质包括4种蛋白质(BRD2、BRD3、BRD4和BRD-t)，所述蛋白质共有含有能够结合组蛋白和其它蛋白质的乙酰化赖氨酸残基的串联N末端溴结构域的保守结构组织。BRD2、BRD3和BRD4得以普遍表达，而BRDt局限于生殖细胞。BRD蛋白在调控基因转录和控制细胞生长方面起必要但不重叠的作用。BET蛋白质与调控许多基因转录方面的大蛋白质复合物相关，包括介体、PAFc和超级伸长复合物。已证实BRD2和BRD4蛋白在有丝分裂期间保持与染色体复合，且需要所述蛋白质促进起始细胞周期的重要基因(包括周期素D和c-Myc)转录(Mochizuki J Biol.Chem.2008 283:9040-9048)。BRD4对于将蛋白转译伸长因子B复合物募集至诱导基因的启动子从而使RNA聚合酶II磷酸化且刺激增产性基因转录和伸长而言为必需的(Jang等人,Mol.Cell2005 19:523-534)。在一些情况下，BRD4的激酶活性可直接使RNA聚合酶II磷酸化和活化(Devaiah等人,PNAS 2012 109:6927-6932)。缺乏BRD4的细胞显示细胞周期进展受损。据报导，BRD2和BRD3与组蛋白以及积极转录基因相关并且可参与促进转录伸长(Leroy等人,Mol.Cell.2008 30:51-60)。除乙酰化组蛋白以外，已证实BET蛋白选择性结合乙酰化转录因子，包括NF-kB和GATA1的RelA亚单位，从而直接调控这些蛋白质的转录活性以控制参与发炎和造血分化的基因的表达(Huang等人,Mol.Cell.Biol.2009 29:1375-1387；Lamonica Proc.Nat.Acad.Sci.2011 108:E159-168)。
在上皮瘤形成的高度恶性形式中发现涉及NUT(睾丸中的核蛋白)与BRD3或BRD4的反复移位形成新颖融合致癌基因BRD-NUT(French等人,Cancer Research 2003 63:304-307；French等人,Journal of Clinical Oncology 2004 22:4135-4139)。选择性减少此致癌基因可复原正常细胞分化且逆转致瘤表型(Filippakopoulos等人,Nature 2010468:1068-1073)。已证实BRD2、BRD3和BRD4的基因剔除会损害多种血液学和实体肿瘤细胞的生长和活力(Zuber等人,Nature 2011478:524-528；Delmore等人,Cell 2011 146:904-917)。除在癌症中的作用以外，BET蛋白还调控对细菌攻击的炎性反应，且BRD2亚等位基因小鼠模型显示显著较低水平的炎性细胞因子和防止肥胖诱导的糖尿病(Wang等人,Biochem J.2009 425:71-83；Belkina等人,J.Immunol 2013)。另外，一些病毒利用这些BET蛋白将其基因组系栓于宿主细胞染色质作为病毒复制过程的一部分，或使用BET蛋白促进病毒基因转录和阻遏(You等人,Cell 2004 117:349-60；Zhu等人,Cell Reports 2012 2:807-816)。
因此，需要调节BET家族蛋白质(包括BRD2、BRD3和BRD4)的活性的化合物，所述化合物可用于治疗BET蛋白相关疾病，诸如癌症。本发明化合物有助于满足此需要。
发明概要
本发明尤其涉及一种BET蛋白抑制剂，其中所述抑制剂为式I化合物：
或其药学上可接受的盐，其中所述变量定义于本文中。
本发明还涉及一种药物组合物，其包含式I化合物或其药学上可接受的盐以及至少一种药学上可接受的载体。
本发明还涉及一种治疗与BET蛋白相关的疾病或病状的方法，其包括向需要此种治疗的患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。
发明详述
本发明尤其涉及一种BET蛋白抑制剂，其中所述抑制剂为式I化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X为C＝O或CR8R9；
Y为O、S或NR10；
Z为CH或N；
R1和R2各自独立地选自H、卤基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6卤代烷基、Cy1、CN、ORa1、SRa1、C(O)Rb1、C(O)NRc1Rd1、C(O)ORa1、OC(O)Rb1、OC(O)NRc1Rd1、NRc1Rd1、NRc1C(O)Rb1、NRc1C(O)ORa1、NRc1C(O)NRc1Rd1、C(＝NRe1)Rb1、C(＝NRe1)NRc1Rd1、NRc1C(＝NRe1)NRc1Rd1、NRc1S(O)Rb1、NRc1S(O)2Rb1、NRc1S(O)2NRc1Rd1、S(O)Rb1、S(O)NRc1Rd1、S(O)2Rb1和S(O)2NRc1Rd1；其中所述C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基各自任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RA的取代基取代；
或R1和R2与其所连接的碳原子一起形成C3-10环烷基或4至10元杂环烷基，各自任选地经1、2或3个独立地选自RA的取代基取代；
R3为H或任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代的C1-6烷基：卤基、Cy、CN、NO2、ORa2、SRa2、C(O)Rb2、C(O)NRc2Rd2、C(O)ORa2、OC(O)Rb2、OC(O)NRc2Rd2、C(＝NRe2)NRc2Rd2、NRc2C(＝NRe2)NRc2Rd2、NRc2Rd2、NRc2C(O)Rb2、NRc2C(O)ORa2、NRc2C(O)NRc2Rd2、NRc2S(O)Rb2、NRc2S(O)2Rb2、NRc2S(O)2NRc2Rd2、S(O)Rb2、S(O)NRc2Rd2、S(O)2Rb2和S(O)2NRc2Rd2；
R4为H、卤基、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4卤代烷基、CN、ORa3、SRa3、C(O)Rb3、C(O)NRc3Rd3、C(O)ORa3、OC(O)Rb3、OC(O)NRc3Rd3、NRc3Rd3、NRc3C(O)Rb3、NRc3C(O)ORa3、NRc3C(O)NRc3Rd3、C(＝NRe3)Rb3、C(＝NRe3)NRc3Rd3、NRc3C(＝NRe3)NRc3Rd3、NRc3S(O)Rb3、NRc3S(O)2Rb3、NRc3S(O)2NRc3Rd3、S(O)Rb3、S(O)NRc3Rd3、S(O)2Rb3或S(O)2NRc3Rd3；
R5为H、卤基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6卤代烷基、Cy2、CN、NO2、ORa4、SRa4、C(O)Rb4、C(O)NRc4Rd4、C(O)ORa4、OC(O)Rb4、OC(O)NRc4Rd4、NRc4Rd4、NRc4C(O)Rb4、NRc4C(O)ORa4、NRc4C(O)NRc4Rd4、C(＝NRe4)Rb4、C(＝NRe4)NRc4Rd4、NRc4C(＝NRe4)NRc4Rd4、NRc4S(O)Rb4、NRc4S(O)2Rb4、NRc4S(O)2NRc4Rd4、S(O)Rb4、S(O)NRc4Rd4、S(O)2Rb4或S(O)2NRc4Rd4；其中所述C1-6烷基、C2-6烯基和C2-6炔基各自任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RB的取代基取代；
R6为H、卤基、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、CN或OH；
R7为H或C1-4烷基；
R8和R9各自独立地选自H、卤基、C1-4烷基和C1-4卤代烷基；
R10为H或C1-4烷基；
各RA独立地选自Cy1、卤基、CN、NO2、ORa1、SRa1、C(O)Rb1、C(O)NRc1Rd1、C(O)ORa1、OC(O)Rb1、OC(O)NRc1Rd1、C(＝NRe1)NRc1Rd1、NRc1C(＝NRe1)NRc1Rd1、NRc1Rd1、NRc1C(O)Rb1、NRc1C(O)ORa1、NRc1C(O)NRc1Rd1、NRc1S(O)Rb1、NRc1S(O)2Rb1、NRc1S(O)2NRc1Rd1、S(O)Rb1、S(O)NRc1Rd1、S(O)2Rb1和S(O)2NRc1Rd1；
各RB独立地选自Cy2、卤基、CN、NO2、ORa4、SRa4、C(O)Rb4、C(O)NRc4Rd4、C(O)ORa4、OC(O)Rb4、OC(O)NRc4Rd4、C(＝NRe4)NRc4Rd4、NRc4C(＝NRe4)NRc4Rd4、NRc4Rd4、NRc4C(O)Rb4、NRc4C(O)ORa4、NRc4C(O)NRc4Rd4、NRc4S(O)Rb4、NRc4S(O)2Rb4、NRc4S(O)2NRc4Rd4、S(O)Rb4、S(O)NRc4Rd4、S(O)2Rb4和S(O)2NRc4Rd4；
各Cy独立地选自C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环烷基，各基团任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RC的取代基取代；
各RC独立地选自卤基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6卤代烷基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环烷基、CN、ORa2、SRa2、C(O)Rb2、C(O)NRc2Rd2、C(O)ORa2、OC(O)Rb2、OC(O)NRc2Rd2、NRc2Rd2、NRc2C(O)Rb2、NRc2C(O)ORa2、NRc2C(O)NRc2Rd2、C(＝NRe2)Rb2、C(＝NRe2)NRc2Rd2、NRc2C(＝NRe2)NRc2Rd2、NRc2S(O)Rb2、NRc2S(O)2Rb2、NRc2S(O)2NRc2Rd2、S(O)Rb2、S(O)NRc2Rd2、S(O)2Rb2和S(O)2NRc2Rd2；其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环烷基各自任选地经1、2、3、4或5个独立地选自以下的取代基取代：卤基、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、CN、ORa2、SRa2、C(O)Rb2、C(O)NRc2Rd2、C(O)ORa2、OC(O)Rb2、OC(O)NRc2Rd2、NRc2Rd2、NRc2C(O)Rb2、NRc2C(O)ORa2、NRc2C(O)NRc2Rd2、C(＝NRe2)Rb2、C(＝NRe2)NRc2Rd2、NRc2C(＝NRe2)NRc2Rd2、NRc2S(O)Rb2、NRc2S(O)2Rb2、NRc2S(O)2NRc2Rd2、S(O)Rb2、S(O)NRc2Rd2、S(O)2Rb2和S(O)2NRc2Rd2；
各Cy1独立地选自C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环烷基，各基团任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RD的取代基取代；
各RD独立地选自卤基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6卤代烷基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环烷基、CN、ORa1、SRa1、C(O)Rb1、C(O)NRc1Rd1、C(O)ORa1、OC(O)Rb1、OC(O)NRc1Rd1、NRc1Rd1、NRc1C(O)Rb1、NRc1C(O)ORa1、NRc1C(O)NRc1Rd1、C(＝NRe1)Rb1、C(＝NRe1)NRc1Rd1、NRc1C(＝NRe1)NRc1Rd1、NRc1S(O)Rb1、NRc1S(O)2Rb1、NRc1S(O)2NRc1Rd1、S(O)Rb1、S(O)NRc1Rd1、S(O)2Rb1和S(O)2NRc1Rd1；其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环烷基各自任选地经1、2、3、4或5个独立地选自以下的取代基取代：卤基、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、CN、ORa1、SRa1、C(O)Rb1、C(O)NRc1Rd1、C(O)ORa1、OC(O)Rb1、OC(O)NRc1Rd1、NRc1Rd1、NRc1C(O)Rb1、NRc1C(O)ORa1、NRc1C(O)NRc1Rd1、C(＝NRe1)Rb1、C(＝NRe1)NRc1Rd1、NRc1C(＝NRe1)NRc1Rd1、NRc1S(O)Rb1、NRc1S(O)2Rb1、NRc1S(O)2NRc1Rd1、S(O)Rb1、S(O)NRc1Rd1、S(O)2Rb1和S(O)2NRc1Rd1；
各Cy2独立地选自C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环烷基，各基团任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RE的取代基取代；
各RE独立地选自卤基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6卤代烷基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环烷基、CN、ORa4、SRa4、C(O)Rb4、C(O)NRc4Rd4、C(O)ORa4、OC(O)Rb4、OC(O)NRc4Rd4、NRc4Rd4、NRc4C(O)Rb4、NRc4C(O)ORa4、NRc4C(O)NRc4Rd4、C(＝NRe4)Rb4、C(＝NRe4)NRc4Rd4、NRc4C(＝NRe4)NRc4Rd4、NRc4S(O)Rb4、NRc4S(O)2Rb4、NRc4S(O)2NRc4Rd4、S(O)Rb4、S(O)NRc4Rd4、S(O)2Rb4和S(O)2NRc4Rd4；其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环烷基各自任选地经1、2、3、4或5个独立地选自以下的取代基取代：卤基、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、CN、ORa4、SRa4、C(O)Rb4、C(O)NRc4Rd4、C(O)ORa4、OC(O)Rb4、OC(O)NRc4Rd4、NRc4Rd4、NRc4C(O)Rb4、NRc4C(O)ORa4、NRc4C(O)NRc4Rd4、C(＝NRe4)Rb4、C(＝NRe4)NRc4Rd4、NRc4C(＝NRe4)NRc4Rd4、NRc4S(O)Rb4、NRc4S(O)2Rb4、NRc4S(O)2NRc4Rd4、S(O)Rb4、S(O)NRc4Rd4、S(O)2Rb4和S(O)2NRc4Rd4；
各Ra1、Rb1、Rc1和Rd1独立地选自H、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环烷基、C6-10芳基-C1-4烷基、C3-10环烷基-C1-4烷基、(5至10元杂芳基)-C1-4烷基和(4至10元杂环烷基)-C1-4烷基，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环烷基、C6-10芳基-C1-4烷基、C3-10环烷基-C1-4烷基、(5至10元杂芳基)-C1-4烷基和(4至10元杂环烷基)-C1-4烷基各自任选地经1、2、3、4或5个独立地选自以下的取代基取代：C1-4烷基、C1-4卤代烷基、卤基、CN、ORa5、SRa5、C(O)Rb5、C(O)NRc5Rd5、C(O)ORa5、OC(O)Rb5、OC(O)NRc5Rd5、NRc5Rd5、NRc5C(O)Rb5、NRc5C(O)NRc5Rd5、NRc5C(O)ORa5、C(＝NRe5)NRc5Rd5、NRc5C(＝NRe5)NRc5Rd5、S(O)Rb5、S(O)NRc5Rd5、S(O)2Rb5、NRc5S(O)2Rb5、NRc5S(O)2NRc5Rd5和S(O)2NRc5Rd5；
或任何Rc1和Rd1与其所连接的N原子一起形成4-、5-、6-或7-元杂环烷基，所述杂环烷基任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：C1-6烷基、C3-7环烷基、4至7元杂环烷基、C6-10芳基、5至6元杂芳基、C1-6卤代烷基、卤基、CN、ORa5、SRa5、C(O)Rb5、C(O)NRc5Rd5、C(O)ORa5、OC(O)Rb5、OC(O)NRc5Rd5、NRc5Rd5、NRc5C(O)Rb5、NRc5C(O)NRc5Rd5、NRc5C(O)ORa5、C(＝NRe5)NRc5Rd5、NRc5C(＝NRe5)NRc5Rd5、S(O)Rb5、S(O)NRc5Rd5、S(O)2Rb5、NRc5S(O)2Rb5、NRc5S(O)2NRc5Rd5和S(O)2NRc5Rd5，其中所述C1-6烷基、C3-7环烷基、4至7元杂环烷基、C6-10芳基和5至6元杂芳基各自任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、ORa5、SRa5、C(O)Rb5、C(O)NRc5Rd5、C(O)ORa5、OC(O)Rb5、OC(O)NRc5Rd5、NRc5Rd5、NRc5C(O)Rb5、NRc5C(O)NRc5Rd5、NRc5C(O)ORa5、C(＝NRe5)NRc5Rd5、NRc5C(＝NRe5)NRc5Rd5、S(O)Rb5、S(O)NRc5Rd5、S(O)2Rb5、NRc5S(O)2Rb5、NRc5S(O)2NRc5Rd5和S(O)2NRc5Rd5；
各Ra2、Rb2、Rc2和Rd2独立地选自H、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环烷基、C6-10芳基-C1-4烷基、C3-10环烷基-C1-4烷基、(5至10元杂芳基)-C1-4烷基和(4至10元杂环烷基)-C1-4烷基，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环烷基、C6-10芳基-C1-4烷基、C3-10环烷基-C1-4烷基、(5至10元杂芳基)-C1-4烷基和(4至10元杂环烷基)-C1-4烷基各自任选地经1、2、3、4或5个独立地选自以下的取代基取代：C1-4烷基、C1-4卤代烷基、卤基、CN、ORa5、SRa5、C(O)Rb5、C(O)NRc5Rd5、C(O)ORa5、OC(O)Rb5、OC(O)NRc5Rd5、NRc5Rd5、NRc5C(O)Rb5、NRc5C(O)NRc5Rd5、NRc5C(O)ORa5、C(＝NRe5)NRc5Rd5、NRc5C(＝NRe5)NRc5Rd5、S(O)Rb5、S(O)NRc5Rd5、S(O)2Rb5、NRc5S(O)2Rb5、NRc5S(O)2NRc5Rd5和S(O)2NRc5Rd5；
或任何Rc2和Rd2与其所连接的N原子一起形成4-、5-、6-或7-元杂环烷基，所述杂环烷基任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：C1-6烷基、C3-7环烷基、4至7元杂环烷基、C6-10芳基、5至6元杂芳基、C1-6卤代烷基、卤基、CN、ORa5、SRa5、C(O)Rb5、C(O)NRc5Rd5、C(O)ORa5、OC(O)Rb5、OC(O)NRc5Rd5、NRc5Rd5、NRc5C(O)Rb5、NRc5C(O)NRc5Rd5、NRc5C(O)ORa5、C(＝NRe5)NRc5Rd5、NRc5C(＝NRe5)NRc5Rd5、S(O)Rb5、S(O)NRc5Rd5、S(O)2Rb5、NRc5S(O)2Rb5、NRc5S(O)2NRc5Rd5和S(O)2NRc5Rd5，其中所述C1-6烷基、C3-7环烷基、4至7元杂环烷基、C6-10芳基和5至6元杂芳基各自任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、ORa5、SRa5、C(O)Rb5、C(O)NRc5Rd5、C(O)ORa5、OC(O)Rb5、OC(O)NRc5Rd5、NRc5Rd5、NRc5C(O)Rb5、NRc5C(O)NRc5Rd5、NRc5C(O)ORa5、C(＝NRe5)NRc5Rd5、NRc5C(＝NRe5)NRc5Rd5、S(O)Rb5、S(O)NRc5Rd5、S(O)2Rb5、NRc5S(O)2Rb5、NRc5S(O)2NRc5Rd5和S(O)2NRc5Rd5；
各Ra3、Rb3、Rc3和Rd3独立地选自H和C1-4烷基；
各Ra4、Rb4、Rc4和Rd4独立地选自H、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环烷基、C6-10芳基-C1-4烷基、C3-10环烷基-C1-4烷基、(5至10元杂芳基)-C1-4烷基和(4至10元杂环烷基)-C1-4烷基，其中所述C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基、4至10元杂环烷基、C6-10芳基-C1-4烷基、C3-10环烷基-C1-4烷基、(5至10元杂芳基)-C1-4烷基和(4至10元杂环烷基)-C1-4烷基各自任选地经1、2、3、4或5个独立地选自以下的取代基取代：C1-4烷基、C1-4卤代烷基、卤基、CN、ORa5、SRa5、C(O)Rb5、C(O)NRc5Rd5、C(O)ORa5、OC(O)Rb5、OC(O)NRc5Rd5、NRc5Rd5、NRc5C(O)Rb5、NRc5C(O)NRc5Rd5、NRc5C(O)ORa5、C(＝NRe5)NRc5Rd5、NRc5C(＝NRe5)NRc5Rd5、S(O)Rb5、S(O)NRc5Rd5、S(O)2Rb5、NRc5S(O)2Rb5、NRc5S(O)2NRc5Rd5和S(O)2NRc5Rd5；
或任何Rc4和Rd4与其所连接的N原子一起形成4-、5-、6-或7-元杂环烷基，所述杂环烷基任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：C1-6烷基、C3-7环烷基、4至7元杂环烷基、C6-10芳基、5至6元杂芳基、C1-6卤代烷基、卤基、CN、ORa5、SRa5、C(O)Rb5、C(O)NRc5Rd5、C(O)ORa5、OC(O)Rb5、OC(O)NRc5Rd5、NRc5Rd5、NRc5C(O)Rb5、NRc5C(O)NRc5Rd5、NRc5C(O)ORa5、C(＝NRe5)NRc5Rd5、NRc5C(＝NRe5)NRc5Rd5、S(O)Rb5、S(O)NRc5Rd5、S(O)2Rb5、NRc5S(O)2Rb5、NRc5S(O)2NRc5Rd5和S(O)2NRc5Rd5，其中所述C1-6烷基、C3-7环烷基、4至7元杂环烷基、C6-10芳基和5至6元杂芳基各自任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：卤基、CN、ORa5、SRa5、C(O)Rb5、C(O)NRc5Rd5、C(O)ORa5、OC(O)Rb5、OC(O)NRc5Rd5、NRc5Rd5、NRc5C(O)Rb5、NRc5C(O)NRc5Rd5、NRc5C(O)ORa5、C(＝NRe5)NRc5Rd5、NRc5C(＝NRe5)NRc5Rd5、S(O)Rb5、S(O)NRc5Rd5、S(O)2Rb5、NRc5S(O)2Rb5、NRc5S(O)2NRc5Rd5和S(O)2NRc5Rd5；
各Ra5、Rb5、Rc5和Rd5独立地选自H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C2-4烯基和C2-4炔基，其中所述C1-4烷基、C2-4烯基和C2-4炔基各自任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：OH、CN、氨基、卤基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4烷氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4卤代烷基和C1-4卤代烷氧基；
或任何Rc5和Rd5与其所连接的N原子一起形成4-、5-、6-或7-元杂环烷基，所述杂环烷基任选地经1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：OH、CN、氨基、卤基、C1-6烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4烷氨基、二(C1-4烷基)氨基、C1-4卤代烷基和C1-4卤代烷氧基；且
各Re1、Re2、Re3、Re4和Re5独立地选自H、C1-4烷基和CN。
在一些实施方案中，X为C＝O。
在一些实施方案中，X为CR8R9。
在一些实施方案中，Y为O。
在一些实施方案中，Y为NR10。
在一些实施方案中，Z为CH。
在一些实施方案中，Z为N。
在一些实施方案中，R1和R2各自独立地选自H、C1-6烷基和Cy1，其中所述C1-6烷基任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RA的取代基取代；
或R1和R2与其所连接的碳原子一起形成任选地经1、2或3个独立地选自RA的取代基取代的C3-10环烷基。
在一些实施方案中，R1和R2各自独立地选自H、C1-3烷基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环烷基，其中所述C6-10芳基任选地经1或2个卤基取代，且其中所述C1-3烷基任选地经OH取代；
或R1和R2与其所连接的碳原子一起形成C3-6环烷基。
在一些实施方案中，R1和R2各自独立地选自H、甲基、乙基、丙基、环丙基、环戊基、吡喃-4-基、苯基、吡啶-2-基、2-氯-4-苯基和2-羟基乙基。
在一些实施方案中，R1和R2与其所连接的碳原子一起形成环丙基、环丁基、环戊基或环己基。
在一些实施方案中，R1和R2中一个为H且另一个不为H。
在一些实施方案中，R1和R2各自为C1-6烷基。
在一些实施方案中，R1和R2各自为甲基。
在一些实施方案中，R3为H或任选地经1、2或3个独立地选自Cy、C(＝O)NRc2Rd2和C(＝O)ORa2的取代基取代的C1-6烷基。
在一些实施方案中，R3为H、甲基、乙基或丙基，其中所述甲基任选地经环丙基、吡啶基、-C(＝O)NHCH3、-C(＝O)NH(4-甲基哌嗪-1-基)或-C(＝O)OH取代。
在一些实施方案中，R3为甲基。
在一些实施方案中，R4为H、卤基、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、CN或OH。
在一些实施方案中，R4为H。
在一些实施方案中，R5为H、C1-6烷基、Cy2、CN、NO2、ORa4、C(O)Rb4、C(O)NRc4Rd4、S(O)2Rb4或S(O)2NRc4Rd4；其中所述C1-6烷基任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RB的取代基取代。
在一些实施方案中，R5为H、1-甲基-1H-吡唑-4-基、2-呋喃基、CN、NO2、甲氧基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NH(CH3)、-C(＝O)N(CH3)2、-C(＝O)-(吗啉-4-基)、-C(＝O)CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2NH2、-CH2NHSO2(CH2CH3)、-CH2NHC(＝O)CH3、-CH(OH)CH3、-SO2CH3、-SO2CH2CH3、-SO2-(异丙基)、-SO2N(CH3)2、-SO2NH(CH3)、-SO2-NH(异丙基)或-SO2-(哌啶-1-基)。
在一些实施方案中，R5为S(O)2Rb4。
在一些实施方案中，R6为H。
在一些实施方案中，R7为C1-4烷基。
在一些实施方案中，R7为甲基。
在一些实施方案中，R8和R9各自为H。
在一些实施方案中，R10为H。
在一些实施方案中，本发明的化合物具有式IIa：
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，Z为CH。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，Z为N。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R1和R2各自独立地选自H、C1-6烷基和Cy1，其中所述C1-6烷基任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RA的取代基取代；
或R1和R2与其所连接的碳原子一起形成任选地经1、2或3个独立地选自RA的取代基取代的C3-6环烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R1和R2各自独立地选自H、C1-3烷基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环烷基，其中所述C6-10芳基任选地经1或2个卤基取代，且其中所述C1-3烷基任选地经OH取代；
或R1和R2与其所连接的碳原子一起形成C3-6环烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，且R2各自独立地选自H、甲基、乙基、丙基、环丙基、环戊基、吡喃-4-基、苯基、吡啶-2-基、2-氯-4-苯基和2-羟基乙基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R1和R2与其所连接的碳原子一起形成环丙基、环丁基、环戊基或环己基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R1和R2与其所连接的碳原子一起形成环丙基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R1和R2中一个为H且另一个不为H。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R1和R2各自为C1-6烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R1和R2各自为甲基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R3为H或任选地经1、2或3个独立地选自Cy、C(＝O)NRc2Rd2和C(＝O)ORa2的取代基取代的C1-6烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R3为H、甲基、乙基或丙基，其中所述甲基任选地经环丙基、吡啶基、-C(＝O)NHCH3、-C(＝O)NH(4-甲基哌嗪-1-基)或-C(＝O)OH取代。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R3为甲基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R3为乙基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R5为H、C1-6烷基、Cy2、CN、NO2、ORa4、C(O)Rb4、C(O)NRc4Rd4、S(O)2Rb4或S(O)2NRc4Rd4；其中所述C1-6烷基任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RB的取代基取代。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R5为H、1-甲基-1H-吡唑-4-基、2-呋喃基、CN、NO2、甲氧基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NH(CH3)、-C(＝O)N(CH3)2、-C(＝O)-(吗啉-4-基)、-C(＝O)CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2NH2、-CH2NHSO2(CH2CH3)、-CH2NHC(＝O)CH3、-CH(OH)CH3、-SO2CH3、-SO2CH2CH3、-SO2-(异丙基)、-SO2N(CH3)2、-SO2NH(CH3)、-SO2-NH(异丙基)或-SO2-(哌啶-1-基)。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R5为S(O)2Rb4。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R5为S(O)2CH3。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R5为S(O)2CH2CH3。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R5为-C(＝O)NH2。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R5为-CH2OCH3。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIa，R7为甲基。
在一些实施方案中，本发明的化合物具有式IIb：
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，Z为CH。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，Z为N。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R1和R2各自独立地选自H、C1-6烷基和Cy1，其中所述C1-6烷基任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RA的取代基取代；
或R1和R2与其所连接的碳原子一起形成任选地经1、2或3个独立地选自RA的取代基取代的C3-10环烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R1和R2各自独立地选自H、C1-3烷基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环烷基，其中所述C6-10芳基任选地经1或2个卤基取代，且其中所述C1-3烷基任选地经OH取代；
或R1和R2与其所连接的碳原子一起形成C3-6环烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R1和R2各自独立地选自H、甲基、乙基、丙基、环丙基、环戊基、吡喃-4-基、苯基、吡啶-2-基、2-氯-4-苯基和2-羟基乙基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R1和R2与其所连接的碳原子一起形成环丙基、环丁基、环戊基或环己基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R1和R2与其所连接的碳原子一起形成环丙基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R1和R2中一个为H且另一个不为H。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R1和R2各自为C1-6烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R1和R2各自为甲基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R3为H或C1-6烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R3为H或甲基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R5为H或S(O)2Rb4。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R5为H或-SO2CH3。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R5为H或-SO2CH2CH3。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R7为甲基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIb，R10为H。
在一些实施方案中，本发明的化合物具有式IIIa或IIIb：
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R1和R2各自独立地选自H、C1-6烷基和Cy1，其中所述C1-6烷基任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RA的取代基取代；
或R1和R2与其所连接的碳原子一起形成任选地经1、2或3个独立地选自RA的取代基取代的C3-10环烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R1和R2各自独立地选自H、C1-3烷基、C6-10芳基、C3-10环烷基、5至10元杂芳基和4至10元杂环烷基，其中所述C6-10芳基任选地经1或2个卤基取代，且其中所述C1-3烷基任选地经OH取代；
或R1和R2与其所连接的碳原子一起形成C3-6环烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R1和R2各自独立地选自H、甲基、乙基、丙基、环丙基、环戊基、吡喃-4-基、苯基、吡啶-2-基、2-氯-4-苯基和2-羟基乙基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R1和R2与其所连接的碳原子一起形成环丙基、环丁基、环戊基或环己基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R1和R2与其所连接的碳原子一起形成环丙基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R1和R2中一个为H且另一个不为H。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R1和R2各自为C1-6烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R1和R2各自为甲基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R3为H或任选地经1、2或3个独立地选自Cy、C(＝O)NRc2Rd2和C(＝O)ORa2的取代基取代的C1-6烷基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R3为H、甲基、乙基或丙基，其中所述甲基任选地经环丙基、吡啶基、-C(＝O)NHCH3、-C(＝O)NH(4-甲基哌嗪-1-基)或-C(＝O)OH取代。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R3为甲基。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R5为H、C1-6烷基、Cy2、CN、NO2、ORa4、C(O)Rb4、C(O)NRc4Rd4、S(O)2Rb4或S(O)2NRc4Rd4；其中所述C1-6烷基任选地经1、2、3、4或5个独立地选自RB的取代基取代。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R5为H、1-甲基-1H-吡唑-4-基、2-呋喃基、CN、NO2、甲氧基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NH(CH3)、-C(＝O)N(CH3)2、-C(＝O)-(吗啉-4-基)、-C(＝O)CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2NH2、-CH2NHSO2(CH2CH3)、-CH2NHC(＝O)CH3、-CH(OH)CH3、-SO2CH3、-SO2CH2CH3、-SO2-(异丙基)、-SO2N(CH3)2、-SO2NH(CH3)、-SO2-NH(异丙基)或-SO2-(哌啶-1-基)。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R5为S(O)2Rb4。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R5为S(O)2CH3。
在一些实施方案中，其中本发明的化合物具有式IIIa或IIIb，R5为S(O)2CH2CH3。
应了解，个别实施方案的内容中出于明确性目的而描述的某些本发明特征还可以组合形式提供于单一实施方案中。相反，单一实施方案的内容中出于简便目的而描述的各种本发明特征还可以任何适合的子组合形式单独提供。
如本文中所使用，词组“任选地经取代”意谓未经取代或经取代。如本文中所使用，术语“经取代”意谓氢原子被移除并且由取代基置换。应理解，指定原子上的取代受价态限制。
贯穿定义部分，术语“Ci-j”指示包括端点的范围，其中i和j为整数且指示碳数目。实例包括C1-4、C1-6及其类似物。
术语“z元”(其中z为整数)典型地描述成环原子数为z的部分中的成环原子数。举例来说，哌啶基为6元杂环烷基环的实例，吡唑基为5元杂芳基环的实例，吡啶基为6元杂芳基环的实例，且1,2,3,4-四氢-萘为10元环烷基的实例。
术语“碳”是指一个或多个碳原子。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的术语“Ci-j烷基”是指可为直链或支链且具有i至j个碳的饱和烃基。在一些实施方案中，烷基含有1至6个碳原子或1至4个碳原子或1至3个碳原子。烷基部分的实例包括但不限于诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基和叔丁基的化学基团。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的术语“Ci-j烷氧基”是指具有式-O-烷基的基团，其中烷基具有i至j个碳。在一些实施方案中，烷氧基的烷基具有1至3个碳原子。实例性烷氧基包括甲氧基、乙氧基和丙氧基(例如正丙氧基和异丙氧基)。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的“Ci-j烯基”是指具有一个或多个碳-碳双键且具有i至j个碳的不饱和烃基。在一些实施方案中，烯基部分含有2至6个或2至4个碳原子。实例性烯基包括但不限于乙烯基、正丙烯基、异丙烯基、正丁烯基、仲丁烯基及其类似基团。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的“Ci-j炔基”是指具有一个或多个碳-碳三键且具有i至j个碳的不饱和烃基。在一些实施方案中，炔基部分含有2至6个或2至4个碳原子。实例性炔基包括但不限于乙炔基、丙炔-1-基、丙炔-2-基及其类似基团。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的术语“Ci-j烷基氨基”是指具有式-NH(烷基)的基团，其中烷基具有i至j个碳原子。在一些实施方案中，烷基具有1至6个、1至4个或1至3个碳原子。实例性烷基氨基包括但不限于甲基氨基、乙基氨基和丙基氨基。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的术语“二Ci-j烷基氨基”是指具有式-N(烷基)2的基团，其中两个烷基各自独立地具有i至j个碳原子。在一些实施方案中，各烷基独立地具有1至6个、1至4个或1至3个碳原子。在一些实施方案中，二烷基氨基为-N(C1-4烷基)2，诸如二甲基氨基、二乙基氨基、N-甲基-N-乙基氨基或N-甲基-N-丙基氨基。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的术语“Ci-j烷硫基”是指具有式-S-烷基的基团，其中烷基具有i至j个碳原子。在一些实施方案中，烷基具有1至6个或1至4个碳原子。在一些实施方案中，烷硫基为C1-4烷硫基，诸如甲硫基或乙硫基。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的术语“氨基”是指具有式-NH2的基团。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的术语“芳基”是指单环或多环(例如具有2个或更多个稠合环)芳烃，诸如但不限于苯基、1-萘基、2-萘基及其类似基团。在一些实施方案中，芳基为C6-10芳基。在一些实施方案中，芳基为萘环或苯基环。在一些实施方案中，芳基为苯基。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的术语“Ci-j环烷基”是指具有i至j个成环碳原子的非芳族环烃部分，其可任选地含有一个或多个亚烯基(-C＝C-)作为环结构的一部分。环烷基可包括单环或多环(例如具有2、3或4个稠合环)环系统。环烷基的定义中还包括具有一个或多个与环烷基环稠合(即，具有共用键)的芳环的部分，例如环戊烷、环戊烯、环己烷及其类似物的苯并衍生物。环烷基的一个或多个成环碳原子可经氧化以形成羰基键联。在一些实施方案中，环烷基为C3-10环烷基、C3-7环烷基、C3-6环烷基或C5-6环烷基。例示性环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环戊烯基、环己烯基、环己二烯基、环庚三烯基及其类似基团。其它例示性环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。其它例示性环烷基包括环丙基。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的术语“Ci-j卤代烷氧基”是指具有i至j个碳原子的具有式-O-卤代烷基的基团。在一些实施方案中，卤代烷氧基仅经氟化。在一些实施方案中，烷基具有1至6个、1至4个或1至3个碳原子。在一些实施方案中，卤代烷氧基为C1-4卤代烷氧基。实例性卤代烷氧基为OCF3。另一实例性卤代烷氧基为OCHF2。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合的术语“卤基”是指选自F、Cl、I或Br的卤素原子。在一些实施方案中，“卤基”是指选自F、Cl或Br的卤素原子。在一些实施方案中，卤基取代基为F。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合使用的术语“Ci-j卤代烷基”是指具有1个卤素原子至2s+1个可能相同或不同的卤素原子的烷基，其中“s”为烷基中的碳原子数，其中烷基具有i至j个碳原子。在一些实施方案中，卤代烷基仅经氟化。在一些实施方案中，烷基具有1至6个或1至4个碳原子。在一些实施方案中，卤代烷基为氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。在一些实施方案中，卤代烷基为三氟甲基。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合的术语“杂芳基”是指单环或多环(例如具有2个或更多个稠合环)芳族杂环部分，其包含碳原子和一个或多个选自氮、硫和氧的杂原子环成员。在一些实施方案中，杂芳基具有1、2、3或4个杂原子环成员。在一些实施方案中，杂芳基具有1、2或3个杂原子环成员。在一些实施方案中，杂芳基具有1或2个杂原子环成员。在一些实施方案中，杂芳基具有1个杂原子环成员。在一些实施方案中，杂芳基为5至10元或5至6元。在一些实施方案中，杂芳基为5元。在一些实施方案中，杂芳基为6元。
当杂芳基含有多于一个杂原子环成员时，杂原子可相同或不同。杂芳基环中的氮原子可经氧化以形成N-氧化物。实例性杂芳基包括但不限于吡啶、嘧啶、吡嗪、哒嗪、吡咯、吡唑、唑基、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、咪唑、呋喃、噻吩、三唑、四唑、噻二唑、喹啉、异喹啉、吲哚、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并异噁唑、咪唑并[1,2-b]噻唑、嘌呤、三嗪及其类似基团。
5元杂芳基为具有5个成环原子的杂芳基，其中一个或多个成环原子独立地选自N、O和S。在一些实施方案中，5元杂芳基具有1、2或3个杂原子环成员。在一些实施方案中，5元杂芳基具有1或2个杂原子环成员。在一些实施方案中，5元杂芳基具有1个杂原子环成员。实例性成环成员包括CH、N、NH、O和S。实例性5元环杂芳基为噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡唑基、异噻唑基、异噁唑基、1,2,3-三唑基、四唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-三唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,3,4-三唑基、1,3,4-噻二唑基和1,3,4-噁二唑基。
6元杂芳基为具有6个成环原子的杂芳基，其中一个或多个成环原子为N。在一些实施方案中，6元杂芳基具有1、2或3个杂原子环成员。在一些实施方案中，6元杂芳基具有1或2个杂原子环成员。在一些实施方案中，6元杂芳基具有1个杂原子环成员。实例性成环成员包括CH和N。实例性6元环杂芳基为吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基和哒嗪基。
如本文中所使用，单独或与其它术语组合的术语“杂环烷基”是指非芳族杂环系统，其可任选地含有一个或多个不饱和度作为环结构的一部分，且其包含碳原子和至少一个独立地选自氮、硫和氧的杂原子环成员。在一些实施方案中，杂环烷基具有1、2、3或4个杂原子环成员。在一些实施方案中，杂环烷基具有1、2或3个杂原子环成员。在一些实施方案中，杂环烷基具有1或2个杂原子环成员。在一些实施方案中，杂环烷基具有1个杂原子环成员。当杂环烷基在环中含有多于一个杂原子时，杂原子可相同或不同。实例性成环成员包括CH、CH2、C(O)、N、NH、O、S、S(O)和S(O)2。杂环烷基可包括单环或多环(例如具有2、3或4个稠合环)环系统，包括螺环系统。杂环烷基的定义中还包括具有一个或多个与非芳环稠合(即，具有共用键)的芳环的部分，例如1,2,3,4-四氢-喹啉、二氢苯并呋喃及其类似物。杂环烷基环中的碳原子或杂原子可经氧化以形成羰基、亚磺酰基或磺酰基(或其它氧化键联)或氮原子可季铵化。在一些实施方案中，杂环烷基为5至10元、4至10元、4至7元、4元、5元、6元或7元。杂环烷基的实例包括1,2,3,4-四氢-喹啉、二氢苯并呋喃、氮杂环丁烷、氮杂环庚烷、吡咯烷、哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉和吡喃。
本文中所描述的化合物可为不对称的(例如，具有一个或多个立体异构中心)。除非另外指出，否则意指所有立体异构体，诸如对映异构体和非对映异构体。含有经不对称取代的碳原子的本发明化合物可呈光学活性或外消旋形式分离。关于由光学非活性起始材料制备光学活性形式的方法为本领域中已知的，诸如通过拆分外消旋混合物或通过立体选择性合成。许多烯烃几何异构体、C＝N双键及其类似物还可存在于本文中所描述的化合物中，且本发明中涵盖所有此种稳定异构体。描述本发明化合物的顺式和反式几何异构体，且其可分离为异构体混合物或个别异构形式。
当本发明化合物含有手性中心时，所述化合物可为任何可能的立体异构体。在具有单一手性中心的化合物中，手性中心的立体化学性质可为(R)或(S)。在具有两个手性中心的化合物中，手性中心的立体化学性质可各自独立地为(R)或(S)，因此手性中心的构型可为(R)和(R)、(R)和(S)、(S)和(R)或(S)和(S)。在具有三个手性中心的化合物中，三个手性中心各自的立体化学性质可各自独立地为(R)或(S)，因此手性中心的构型可为(R)、(R)和(R)；(R)、(R)和(S)；(R)、(S)和(R)；(R)、(S)和(S)；(S)、(R)和(R)；(S)、(R)和(S)；(S)、(S)和(R)；或(S)、(S)和(S)。
可通过本领域中已知的许多方法中的任一种来进行化合物外消旋混合物的拆分。实例性方法包括使用手性拆分酸进行分步再结晶，手性拆分酸为光学活性成盐有机酸。适用于分步再结晶法的拆分剂为例如光学活性酸，诸如D和L形式的酒石酸、二乙酰基酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、杏仁酸、苹果酸、乳酸或各种光学活性樟脑磺酸，诸如β-樟脑磺酸。适用于分步结晶法的其它拆分剂包括α-甲基苯甲胺的立体异构纯形式(例如，S和R形式或非立体异构纯形式)、2-苯基乙醇胺、降麻黄碱、麻黄碱、N-甲基麻黄碱、环己基乙胺、1,2-二氨基环己烷及其类似物。
外消旋混合物的拆分还可通过在填充有光学活性拆分剂(例如二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸)的柱上洗脱来进行。适合的洗脱溶剂组成可由本领域技术人员确定。
本发明化合物还包括互变异构形式。互变异构形式是由用相邻双键交换单键并且伴随质子迁移而产生。互变异构形式包括质子转移互变异构体，其为具有相同经验化学式和总电荷的异构质子化状态。实例性质子转移互变异构体包括酮-烯醇配对、酰胺-亚胺酸配对、内酰胺-内酰亚胺配对、酰胺-亚胺酸配对、烯胺-亚胺配对，和质子可占据杂环系统的两个或更多个位置的环形形式，例如1H-咪唑和3H-咪唑、1H-1,2,4-三唑、2H-1,2,4-三唑和4H-1,2,4-三唑、1H-异吲哚和2H-异吲哚以及1H-吡唑和2H-吡唑。互变异构形式可通过适当取代而处于平衡状态或在空间上锁定成一种形式。
本发明化合物还可包括中间物或最终化合物中出现的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子序数但具有不同质量数的原子。
如本文中所使用的术语“化合物”意欲包括所描绘的结构的所有立体异构体、几何异构体、互变异构体和同位素。除非另外规定，否则本文中以名称或结构确定为一种特定互变异构形式的化合物意欲包括其它互变异构形式。
所有化合物及其药学上可接受的盐可与诸如水和溶剂的其它物质一起存在(例如水合物和溶剂合物)，或可经分离。
在一些实施方案中，本发明化合物或其盐为基本上经分离的。“基本上经分离”意谓化合物至少部分或基本上与形成或检测到其的环境分离。部分分离可包括例如富含本发明化合物的组合物。基本上分离可包括含有以重量计至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％、至少约95％、至少约97％或至少约99％本发明化合物或其盐的组合物。用于分离化合物及其盐的方法为本领域中的常规方法。
本文中使用词组“药学上可接受的”是指化合物、材料、组合物和/或剂型在合理医学判断的范围内适合于与人和动物的组织接触使用而无过度毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症，与合理效益/风险比相称。
如本文中所使用的表述“环境温度”和“室温”在本领域中应能理解且一般是指约为进行反应的室内的温度的温度，例如反应温度，例如约20℃至约30℃的温度。
本发明还包括本文中所描述的化合物的药学上可接受的盐。如本文中所使用，“药学上可接受的盐”是指所公开的化合物的衍生物，其中通过将现有酸或碱部分转化成其盐形式对母体化合物进行修饰。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基(诸如胺)的无机酸盐或有机酸盐；酸性残基(诸如羧酸)的碱金属盐或有机盐；及其类似物。本发明的药学上可接受的盐包括例如母体化合物的由无毒无机酸或有机酸形成的常规无毒盐。本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。一般而言，此种盐可通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计算量的适当碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备；一般而言，如醚、乙酸乙酯、醇(例如甲醇、乙醇、异丙醇或丁醇)或乙腈(MeCN)的非水性介质优选。适合的盐的清单参见以下文献：Remington'sPharmaceutical Sciences,第17版,(Mack Publishing Company,Easton,1985),第1418页；Berge等人,J.Pharm.Sci.,1977,66(1),1-19；和Stahl等人,Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use,(Wiley,2002)。
本文中可使用以下缩写：AcOH(乙酸)；Ac2O(乙酸酐)；aq.(水溶液)；atm.(大气压)；Boc(叔丁氧基羰基)；BOP((苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐)；br(宽)；Cbz(羧基苯甲基)；calc.(计算)；d(双重峰)；dd(双重双重峰)；DBU(1,8-二氮双环[5.4.0]十一碳-7-烯)；DCM(二氯甲烷)；DIAD(N,N'-叠氮二甲酸二异丙酯)；DIEA(N,N-二异丙基乙胺)；DIPEA(N,N-二异丙基乙胺)；DIBAL(二异丁基氢化铝)；DMF(N,N-二甲基甲酰胺)；Et(乙基)；EtOAc(乙酸乙酯)；FCC(快速柱色谱法)；g(克)；h(小时)；HATU(N,N,N',N'-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐)；HCl(盐酸)；HPLC(高效液相色谱法)；Hz(赫兹)；J(偶合常数)；LCMS(液相色谱-质谱法)；LDA(二异丙基氨基锂)；m(多重峰)；M(摩尔)；mCPBA(3-氯过氧基苯甲酸)；MS(质谱法)；Me(甲基)；MeCN(乙腈)；MeOH(甲醇)；mg(毫克)；min.(分钟)；mL(毫升)；mmol(毫摩尔)；N(正)；nM(纳摩尔)；NMP(N-甲基吡咯烷酮)；NMR(核磁共振光谱)；OTf(三氟甲烷磺酸盐)；Ph(苯基)；pM(皮摩尔)；RP-HPLC(反相高效液相色谱法)；s(单重峰)；t(三重峰或叔)；TBS(叔丁基二甲基甲硅烷基)；tert(叔)；tt(三重三重峰)；TFA(三氟乙酸)；THF(四氢呋喃)；μg(微克)；μL(微升)；μM(微摩尔)；wt％(重量百分比)。
合成
可使用已知有机合成技术来制备且可根据许多可能合成路径中的任一种来合成本发明化合物，包括其盐。
用于制备本发明化合物的反应可在适合的溶剂中进行，所述溶剂可由有机合成领域的技术人员容易地选择。适合的溶剂在进行反应的温度下，例如可在所述溶剂的凝固温度至所述溶剂的沸腾温度范围内的温度下可基本上不与起始材料(反应物)、中间物或产物反应。指定反应可在一种溶剂或多于一种溶剂的混合物中进行。取决于特定反应步骤，熟练技术人员可选择适用于特定反应步骤的溶剂。
本发明化合物的制备可涉及不同化学基团的保护和脱保护。对保护和脱保护的需要以及适当保护基的选择可由本领域技术人员容易地确定。保护基的化学作用可参见例如P.G.M.Wuts和T.W.Greene,Protective Groups in Organic Synthesis,第4版,Wiley&Sons,Inc.,New York(2006)，所述文献是以全文引用的方式并入本文中。
可如流程I中所示来制备本发明化合物。可在标准铃木条件下或在标准斯蒂尔条件下(例如在存在诸如四(三苯基膦)钯(0)的钯(0)催化剂和碱(例如碳酸氢盐或碳酸盐碱)的情况下)或在标准根岸条件下(例如在存在诸如四(三苯基膦)钯(0)的钯(0)催化剂的情况下)使中间物(i)(其中X1为卤基)与(ii)(其中M为硼酸、硼酸酯或经适当取代的金属，诸如Sn(Bu)4或Zn)偶合，得到经保护的衍生物(iii)。可在标准条件((例如用于脱除甲苯磺酰基保护的NaOH和用于脱除SEM保护的TFA)下移除保护基(例如P为甲苯磺酰基或SEM)，得到本发明化合物。
或者，(i)的X1卤基可转化成适当经取代的金属(iv)(例如M为B(OH)2、Sn(Bu)4或Zn)，且随后在标准铃木条件下或在标准斯蒂尔条件下(例如在存在诸如四(三苯基膦)钯(0)的钯(0)催化剂和碱(例如碳酸氢盐或碳酸盐碱)的情况下)或在标准根岸条件下(例如在存在诸如四(三苯基膦)钯(0)的钯(0)催化剂的情况下)与杂环卤化物(v)(X1为卤基)偶合，得到经保护的衍生物(iii)，所述经保护的衍生物可脱除保护以产生本发明化合物。
流程I
可如流程II中所示来制备本发明化合物。可用诸如N-氯丁二酰亚胺、N-溴丁二酰亚胺、Br2或N-碘丁二酰亚胺的适合试剂将硝基苯酚(i)卤化，得到卤化物，其中X1＝Cl、Br或I，且随后在标准条件(例如Fe或Zn)下还原硝基可得到氨基中间物(ii)。使用标准烷基化条件用X2C(＝O)C(R1R2)-Br(iii)(其中X2为C1-4烷氧基，诸如乙氧基)对(ii)进行烷基化可得到醚，可使所述醚原地或在加热后环化，获得二环衍生物(iv)。或者，在标准酰化条件下用BrC＝OCR1R2-Br(iii)对胺(ii)进行酰化可得到酰胺，可使所述酰胺原地或在加热后环化，获得二环衍生物(iv)。在任选地进行N-烷基化步骤以引入R3之后，可使化合物(iv)与中间物(v)(其中M为硼酸、硼酸酯或适当经取代的金属，诸如Sn(Bu)4或Zn)在如上文所提及的标准铃木条件或标准斯蒂尔条件下偶合，得到经保护的衍生物(vi)。或者，可在形成衍生物(vi)之后经由烷基化引入R3。举例来说，可通过与R3-X1(其中X1＝卤基(Br、Cl或I))和碱(诸如三乙胺、NaH或Na2CO3)反应对吡啶酮(vi)进行烷基化，且随后在标准条件(例如用于脱除甲苯磺酰基保护的NaOH和用于脱除SEM保护的TFA)下脱除保护，获得本发明化合物(vii)。
任选地，用诸如硼烷的还原剂还原(iv)的羰基，随后用R3-X1和碱进行烷基化可得到本发明化合物(ix)。可使这些化合物与(v)在标准铃木条件或标准斯蒂尔条件下偶合，得到经保护的衍生物，随后在标准条件下脱除保护基，获得本发明化合物(viii)。
流程II
可如流程III中所示来形成本发明化合物。可用诸如N-氯丁二酰亚胺、N-溴丁二酰亚胺或Br2或N-碘丁二酰亚胺的适合试剂对硝基化合物(i)进行卤化，得到卤化物，其中X1＝Cl、Br或I。硝基卤化物(ii)与诸如RO2CCR1R2-Y1(其中R为C1-4烷基且Y1为OH或NR10)的酯(iii)反应可得到硝基中间物衍生物，在标准条件(例如Fe或Zn)下还原硝基后可得到相应胺，随后可原地或在加热后进行环化，得到二环衍生物(iv)。可使化合物(iv)与中间物(v)(其中M为硼酸、硼酸酯或适当经取代的金属，诸如Sn(Bu)4或Zn)在标准铃木条件或标准斯蒂尔条件下偶合，得到经保护的衍生物(vi)。可通过与R3-X1(其中X1＝Br、Cl或I)和诸如三乙胺、NaH或Na2CO3的碱反应对吡啶酮(vi)进行烷基化。随后可在标准条件下脱除保护基，得到本发明化合物(vii)。
任选地，可首先用R3-X1对化合物(iv)进行烷基化，随后在标准铃木条件或标准斯蒂尔条件下与(v)偶合，得到经保护的衍生物(vi)。随后可在标准条件下脱除保护基，得到本发明化合物(vii)。用诸如甲硼烷的还原剂还原(vii)的羰基可得到本发明化合物(viii)。
流程III
可如流程IV中所示制备用于制造本发明化合物的中间物。可用Rb4X1(其中X1＝Br、Cl或I)和碱(诸如三乙胺、NaH或Na2CO3)对硫代苯酚(i)进行烷基化，得到硫醚，可用诸如mCPBA或H2O2或双氧环乙烷的适合试剂将其氧化，得到亚砜，可用诸如mCPBA或H2O2或双氧环乙烷的氧化剂进一步氧化，得到砜(ii)。可在标准条件(例如HNO3，有或无Fe或H2SO4催化剂)下对砜(ii)进行硝化，得到硝基苯酚(iii)。可使用流程II中所描述的方法由中间物(iii)合成本发明化合物。
流程IV
可如流程V中所示来制备本发明化合物。可用适合试剂(例如LiBH4或甲硼烷)还原氰基苯酚(i)，得到胺(ii)，可在标准条件下对其进行酰化、芳基化或烷基化。或者，可用诸如DIBAL的还原剂将氰基苯酚(i)还原成醛(v)，且随后在标准条件(例如，NaCNBH4、HNRR，其中各R独立地为例如C1-6烷基、-C(＝O)(C1-6烷基)、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基或其经取代的衍生物及其类似物)下还原胺化，得到氨基衍生物(iii)。还可在标准条件(例如，具有式R-MgX1(X1＝卤基)的格氏试剂)下对醛(v)进行烷基化，得到醇(vi)，可将其转化成诸如甲磺酸酯的离去基，且用胺HNRR置换，得到衍生物(iii)。另外，可使氰基苯酚(i)水解成其羧酸(iv)，且随后使用标准酰胺偶合剂(例如，HBTU、HATU或EDC)与胺HNRR偶合，得到酰胺(vii)。可使用流程II中所描述的方法由这些硝基苯酚衍生物(i-vii)合成本发明化合物。
流程V
可如流程VI中所示来制备本发明化合物。可使卤化物衍生物(i)与M-R5(其中M为硼酸、硼酸酯或适当经取代的金属，诸如Sn(Bu)4或Zn-R5)在标准铃木条件或标准斯蒂尔条件下偶合，得到衍生物(ii)。M-R5还可为含胺的杂环(其中M为H且连接于杂环R5的胺氮)，通过与碱一起或在布赫瓦尔德/哈特维希条件下(例如在存在诸如四(三苯基膦)钯(0)的钯(0)催化剂和碱(例如醇盐碱)的情况下)加热与卤化物(i)偶合，得到衍生物(ii)。可使用流程II中所描述的方法由中间物(ii)合成本发明化合物。
流程VI
可如流程VII中所示制造用于制备本发明化合物的中间物。可使吡啶基衍生物(i)与1,1-二甲氧基-N,N-二甲基甲胺反应，得到烯烃(ii)。在标准条件(例如Fe或Zn)下还原硝基得到氨基化合物，可使其原地或在加热后环化，获得二环衍生物(iii)。可在标准条件(例如甲苯磺酰氯或SEM-Cl)下用适合保护基P保护(iii)的氨基，其中举例来说，P为甲苯磺酰基或SEM，得到经保护的杂环(iv)。醚的酸水解和在标准条件下用R7-X1(其中X1＝卤基)和碱(诸如三乙胺、NaH或Na2CO3)对酰胺进行烷基化可获得吡啶酮(v)。在标准条件下将(v)的溴化物转化成金属(例如M为B(OR)2、SnR3、Zn)可得到中间物(vi)。可使用流程I-III中所描述的方法由(vi)合成本发明化合物。(另参见WO2013/097601，第92页)。
流程VII
可如流程VIII中所示制造用于制备本发明化合物的中间物。可在标准条件下用R7-X1(其中X1＝Br、Cl或I)和碱(诸如三乙胺、NaH或Na2CO3)对吡啶基衍生物(i)进行烷基化，得到吡啶酮(ii)。在标准条件(例如Fe或Zn)下还原(ii)的硝基可得到氨基化合物，其在与亚硝酸戊酯反应后可原地或在加热后环化，获得二环衍生物(iv)。可在标准条件(例如甲苯磺酰氯或SEM-Cl)下用适合保护基保护杂环胺(iv)，得到经保护的杂环(v)。在标准条件下将(v)的溴化物转化成金属M(例如M为B(OR)2、SnR3、Zn)可得到中间物(vi)。可使用流程I-III中所描述的方法由中间物(vi)合成本发明化合物。(另参见WO 2013/097601，第92页)。
流程VIII
对于特定化合物的合成，可对上述通用方案进行修改。举例来说，可对产物或中间物进行修饰以引入特定官能基。或者，可通过本领域技术人员已知的方法在总合成的任何步骤修饰取代基，例如，如以下文献所描述：Larock,Comprehensive Organic Transformations:A Guide to Functional Group Preparations(Wiley,1999)；和Katritzky等人(编),Comprehensive Organic Functional Group Transformations(Pergamon Press 1996)。
本文中未描述其合成的起始材料、试剂和中间物是购自市面，为文献中已知的，或可通过本领域技术人员已知的方法制备。
本领域技术人员应了解，所描述的方法并非可合成本发明化合物的唯一手段，且许多合成有机反应可用于合成本发明化合物。本领域技术人员知晓如何选择和实现适当合成途径。可通过参考文献来确定起始材料、中间物和产物的适合合成方法，包括诸如以下的参考文献来源：Advances in Heterocyclic Chemistry,第1-107卷(Elsevier,1963-2012)；Journal of Heterocyclic Chemistry第1-49卷(Journal of Heterocyclic Chemistry,1964-2012)；Carreira等人(编),Science of Synthesis,第1-48卷(2001-2010)和知识更新KU2010/1-4、2011/1-4、2012/1-2(Thieme,2001-2012)；Katritzky等人(编),Comprehensive Organic Functional Group Transformations,(Pergamon Press,1996)；Katritzky等人(编),Comprehensive Organic Functional Group Transformations II(Elsevier,第2版,2004)；Katritzky等人(编),Comprehensive Heterocyclic Chemistry(Pergamon Press,1984)；Katritzky等人,Comprehensive Heterocyclic Chemistry II,(Pergamon Press,1996)；Smith等人,March's Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure,第6版(Wiley,2007)；Trost等人(编),Comprehensive Organic Synthesis(Pergamon Press,1991)。
使用方法
本发明化合物为BET蛋白抑制剂，且因而适用于治疗与BET蛋白活性相关的疾病和病症。对于本文中所描述的用途，可使用任何本发明化合物，包括其任何实施方案。
本发明化合物可抑制BET蛋白BRD2、BRD3、BRD4和BRD-t中的一种或多种。在一些实施方案中，相对于另一种BET蛋白，本发明化合物选择性地抑制一种或多种BET蛋白。“选择性”意谓与诸如另一BET蛋白的参考相比，所述化合物分别以较大亲和力或效能结合或抑制BET蛋白。举例来说，相对于BRD3、BRD4和BRD-t，所述化合物可对BRD2具有选择性；相对于BRD2、BRD4和BRD-t，对BRD3具有选择性；相对于BRD2、BRD3和BRD-t，对BRD4具有选择性；或相对于BRD2、BRD3和BRD4，对BRD-t具有选择性。在一些实施方案中，所述化合物抑制两种或更多种BET蛋白或所有BET蛋白。一般而言，选择性可为至少约5倍、至少约10倍、至少约20倍、至少约50倍、至少约100倍、至少约200倍、至少约500倍或至少约1000倍。
本发明化合物因此适用于治疗BET蛋白介导的病症。术语“BET介导”是指诸如BRD2、BRD3、BRD4和/或BRD-t的BET蛋白中的一种或多种或其突变体起作用或疾病或病状与一种或多种BET蛋白的表达或活性相关的任何疾病或病状。因此本发明化合物可用于治疗已知诸如BRD2、BRD3、BRD4和/或BRD-t的BET蛋白或其突变体起作用的疾病和病状或减轻其严重程度。
可使用本发明化合物治疗的疾病和病状包括但不限于癌症和其它增殖性病症、自体免疫性疾病、慢性炎性疾病、急性炎性疾病、败血症和病毒感染。所述疾病可通过向需要治疗的个体(例如患者)施用治疗有效量或剂量的本发明化合物或其任何实施方案或其药物组合物加以治疗。本公开还提供本发明化合物或其任何实施方案或其药物组合物，其是用于治疗BET介导的疾病或病症。还提供本发明化合物或其任何实施方案或其药物组合物的用途，其是用于制造用以治疗BET介导的疾病或病症的药剂。
可用本发明化合物治疗的疾病包括癌症。癌症可包括但不限于肾上腺癌、腺泡细胞癌、听神经瘤、肢端小痣性黑色素瘤、肢端汗腺瘤、急性嗜曙红性白血病、急性类红细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、急性巨核母细胞性白血病、急性单核细胞性白血病、急性早幼粒细胞性白血病、腺癌、腺样囊性癌、腺瘤、腺瘤样牙原性肿瘤、腺鳞癌、脂肪组织赘瘤、肾上腺皮质癌、成人T细胞白血病/淋巴瘤、侵袭性NK细胞白血病、AIDS相关淋巴瘤、腺泡状横纹肌肉瘤、腺泡状软部分肉瘤、釉母细胞纤维瘤、退行性大细胞淋巴瘤、退行性甲状腺癌、血管免疫胚细胞T细胞淋巴瘤、血管肌脂瘤、血管肉瘤、星形细胞瘤、非典型畸胎样杆状肿瘤、B细胞慢性淋巴细胞性白血病、B细胞前淋巴细胞性白血病、B细胞淋巴瘤、基底细胞癌、胆道癌、膀胱癌、母细胞瘤、骨癌、布伦纳氏肿瘤、布朗氏肿瘤、伯基特氏淋巴瘤、乳癌、脑癌、癌瘤、原位癌、癌肉瘤、软骨肿瘤、牙骨质瘤、脊髓肉瘤、软骨瘤、脊索瘤、绒毛膜癌、脉络丛乳头状瘤、肾透明细胞肉瘤、颅咽管瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、子宫颈癌、结肠直肠癌、德戈斯氏病、促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、胚胎发育不良性神经上皮肿瘤、无性细胞瘤、胚胎癌、内分泌腺赘瘤、内胚层窦肿瘤、肠病相关T细胞淋巴瘤、食道癌、胎内胎、纤维瘤、纤维肉瘤、滤泡性淋巴瘤、滤泡性甲状腺癌、神经节细胞瘤、胃肠癌、生殖细胞肿瘤、妊娠期绒毛膜癌、巨细胞纤维母细胞瘤、骨巨细胞肿瘤、神经胶质肿瘤、多形性神经胶质母细胞瘤、神经胶质瘤、大脑胶质瘤病、升糖素瘤、性腺母细胞瘤、粒膜细胞瘤、两性胚细胞瘤、胆囊癌、胃癌、毛细胞白血病、血管母细胞瘤、头颈癌、血管外皮瘤、血液学恶性病、肝母细胞瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、侵袭性小叶癌、肠癌、肾癌、喉癌、恶性小痣、致命性中线癌、白血病、莱氏细胞肿瘤、脂肉瘤、肺癌、淋巴管瘤、淋巴管肉瘤、淋巴上皮瘤、淋巴瘤、急性淋巴细胞性白血病、急性髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、肝癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、MALT淋巴瘤、恶性纤维组织细胞瘤、恶性周围神经鞘肿瘤、恶性蝾螈肿瘤、套细胞淋巴瘤、边缘区B细胞淋巴瘤、肥大细胞白血病、纵隔生殖细胞肿瘤、胸部髓性癌、骨髓甲状腺癌、髓母细胞瘤、黑素瘤、脑膜瘤、梅克尔细胞癌、间皮瘤、转移性尿路上皮癌、混合型苗勒肿瘤、粘质肿瘤、多发性骨髓瘤、肌肉组织赘瘤、蕈样真菌病、粘液样脂肉瘤、粘液瘤、粘液肉瘤、鼻咽癌、神经鞘瘤、神经母细胞瘤、纤维神经瘤、神经瘤、结节性黑素瘤、眼癌、寡突星形细胞瘤、寡枝神经胶质细胞瘤、嗜酸性腺瘤、视神经鞘脑膜瘤、视神经肿瘤、口腔癌、骨肉瘤、卵巢癌、潘科斯特肿瘤、乳头状甲状腺癌、副神经节瘤、松果体母细胞瘤、松果体细胞瘤、垂体细胞瘤、垂体腺瘤、垂体肿瘤、浆细胞瘤、多胚瘤、前体T淋巴母细胞淋巴瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、原发性腹膜癌、前列腺癌、胰腺癌、咽癌、腹膜假粘液瘤、肾细胞癌、肾髓性癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌瘤、横纹肌肉瘤、里克特氏转型、直肠癌、肉瘤、施万瘤病、精原细胞瘤、塞氏细胞肿瘤、性索腺基质肿瘤、印戒细胞癌、皮肤癌、小蓝圆细胞肿瘤、小细胞癌、软组织肉瘤、生长抑素瘤、煤烟疣、脊髓肿瘤、脾边缘区淋巴瘤、鳞状细胞癌、滑膜肉瘤、塞札瑞氏病、小肠癌、鳞状细胞癌、胃癌、T细胞淋巴瘤、睾丸癌、泡膜细胞瘤、甲状腺癌、移行性细胞癌、咽喉癌、脐尿管癌、泌尿生殖器癌、尿路上皮癌、葡萄膜黑色素瘤、子宫癌、疣状癌、视路神经胶质瘤、外阴癌、阴道癌、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症、沃辛氏肿瘤和维尔姆斯瘤。在一些实施方案中，癌症可为腺癌、成人T细胞白血病/淋巴瘤、膀胱癌、母细胞瘤、骨癌、乳癌、脑癌、癌瘤、脊髓肉瘤、子宫颈癌、结肠直肠癌、食道癌、胃肠癌、多形性神经胶质母细胞瘤、神经胶质瘤、胆囊癌、胃癌、头颈癌、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、肠癌、肾癌、喉癌、白血病、肺癌、淋巴瘤、肝癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、间皮瘤、多发性骨髓瘤、急性骨髓性白血病(AML)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、眼癌、视神经肿瘤、口腔癌、卵巢癌、垂体肿瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、前列腺癌、胰腺癌、咽癌、肾细胞癌、直肠癌、肉瘤、皮肤癌、脊髓肿瘤、小肠癌、胃癌、T细胞淋巴瘤、睾丸癌、甲状腺癌、咽喉癌、泌尿生殖器癌、尿路上皮癌、子宫癌、阴道癌或维尔姆斯瘤。
在一些实施方案中，癌症为血液学癌症。
在一些实施方案中，癌症为多发性骨髓瘤、急性骨髓性白血病(AML)或弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。
可使用本发明化合物治疗的疾病还包括MYC依赖性癌症，其中所述癌症与myc RNA表达或MYC蛋白表达中的至少一者相关。可通过测定癌组织或细胞中的myc RNA表达或MYC蛋白表达来确定患者以便进行此种治疗。
可用本发明化合物治疗的疾病还包括非癌性增殖性病症。可治疗的增殖性病症的实例包括但不限于良性软组织肿瘤、骨肿瘤、脑和脊髓肿瘤、眼睑和眼眶肿瘤、肉芽瘤、脂瘤、脑膜瘤、多发性内分泌瘤、鼻息肉、垂体瘤、泌乳素瘤、假性脑瘤、皮脂溢性角化症、胃息肉、甲状腺节结、胰脏膀胱赘瘤、血管瘤、声带节结、息肉和囊肿、卡斯特曼病、慢性藏毛病、皮肤纤维瘤、毛发囊肿、脓性肉芽肿和青少年息肉综合征。
可用本发明化合物治疗的疾病和病状还包括慢性自体免疫性和炎性病状。可治疗的自体免疫性和炎性病状的实例包括急性、超急性或慢性移植器官排斥、急性痛风、急性炎性反应(诸如急性呼吸窘迫综合征和局部缺血/再灌注损伤)、阿狄森氏病、无γ球蛋白血症、过敏性鼻炎、过敏反应、脱发、阿兹海默氏病(Alzheimer's disease)、阑尾炎、动脉粥样硬化、哮喘、骨关节炎、青少年关节炎、银屑病关节炎、类风湿性关节炎、异位性皮炎、自体免疫性脱发、自体免疫性溶血性和血小板减少性状态、自体免疫性垂体机能减退、自体免疫性多腺性疾病、白塞氏病、大疱性皮肤病、胆囊炎、慢性特发性血小板减少性紫癜、慢性阻塞性肺病(COPD)、肝硬化、退化性关节疾病、抑郁、皮炎、皮肌炎、湿疹、肠炎、脑炎、胃炎、肾小球肾炎、巨细胞性动脉炎、古德帕斯彻氏综合征、格林-巴利综合征、齿龈炎、格雷夫斯氏病、桥本氏甲状腺炎、肝炎、垂体炎、炎性肠病(克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)、炎性盆腔病、过敏性肠综合征、川崎氏病、LPS诱导的内毒素性休克、脑膜炎、多发性硬化、心肌炎、重症肌无力、蕈样真菌病、肌炎、肾炎、骨髓炎、胰腺炎、帕金森氏病、心包炎、恶性贫血、肺炎、原发性胆汁性硬化性胆管炎、多发性结节性动脉炎、银屑病、视网膜炎、巩膜炎、硬皮瘤、硬皮病、窦炎、休格伦氏病、败血症、败血性休克、晒斑、系统性红斑狼疮、组织移植排斥、甲状腺炎、I型糖尿病、高安氏动脉炎、尿道炎、葡萄膜炎、血管炎、血管炎(包括巨细胞性动脉炎)、涉及器官的血管炎(诸如肾小球肾炎)、白斑病、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症和韦格纳肉芽肿。
可用本发明化合物治疗的疾病和病状还包括涉及对细菌、病毒、真菌、寄生虫或其毒素感染的炎性反应的疾病和病状，诸如败血症、败血症综合征、败血性休克、内毒素血症、系统性炎性反应综合征(SIRS)、多器官官能障碍综合征、中毒性休克综合征、急性肺损伤、ARDS(成人呼吸窘迫综合征)、急性肾衰竭、暴发型肝炎、烧伤、急性胰炎、手术后综合征、结节病、赫克斯海默反应、脑炎、脊髓炎、脑膜炎、疟疾、与诸如流感、带状疱疹、单纯性疱疹和冠状病毒的病毒感染相关的SIRS。
可用本发明化合物治疗的其它疾病包括病毒感染。可治疗的病毒感染的实例包括爱-巴二氏病毒(Epstein-Barr virus)、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、疱疹病毒、人免疫缺陷病毒、人乳头状瘤病毒、腺病毒、痘病毒和其它基于游离体的DNA病毒。所述化合物因此可用于治疗诸如单纯性疱疹感染和再活化、唇疱疹、带状疱疹感染和再活化、水痘、带状疱疹、人乳头状瘤病毒、子宫颈瘤形成、腺病毒感染的疾病和病状，包括急性呼吸道疾病和痘病毒感染，诸如牛痘和天花和非洲猪瘟病毒。在一个特定实施方案中，指示本发明化合物用于治疗皮肤或子宫颈上皮的人乳头状瘤病毒感染。
可用本发明化合物治疗的疾病和病状还包括与局部缺血-再灌注损伤相关的病状。此种病状的实例包括但不限于诸如心肌梗死、脑血管局部缺血(中风)、急性冠状动脉综合征、肾再灌注损伤、器官移植、冠状动脉旁路移植、心肺旁路程序和肺、肾、肝、胃肠或周围肢栓塞的病状。
本发明化合物还适用于经由调节APO-A1来治疗脂类代谢病症，诸如高胆固醇血症、动脉粥样硬化和阿兹海默氏病。
本发明化合物还适用于治疗纤维化病状，诸如特发性肺纤维化、肾纤维化、手术后狭窄、瘢痕瘤形成、硬皮病和心脏纤维化。
本发明化合物还可用于治疗眼科适应症，诸如干眼症。
本发明化合物还可用于治疗心脏病，诸如心脏衰竭。
如本文中所使用，术语“接触”是指在活体外系统或活体内系统中使所指示的部分在一起。举例来说，使BET蛋白与本发明化合物“接触”包括向具有BET蛋白的个体或患者(诸如人)施用本发明化合物，以及例如将本发明化合物引入含有含BET蛋白的细胞制剂或纯化制剂的样品中。
如本文中所使用，术语“个体”或“患者”可互换使用，其是指任何动物，包括哺乳动物，优选为小鼠、大鼠、其它啮齿动物、兔、狗、猫、猪、牛、羊、马或灵长类动物，且最优选为人。
如本文中所使用，词组“治疗有效量”是指在组织、系统、动物、个体或人中引发研究人员、兽医、医生或其它临床医师所寻求的生物学或医学反应的活性化合物或药物剂的量。
如本文中所使用，术语“治疗”或“处理”是指抑制疾病；例如在正经历或呈现疾病、病状或病症的病理学或症状学的个体中抑制疾病、病状或病症(即，阻止病理学和/或症状学进一步发展)或改善疾病；例如在正经历或呈现疾病、病状或病症的病理学或症状学的个体中改善疾病、病状或病症(即，逆转病理学和/或症状学)，诸如降低疾病的严重程度。
如本文中所使用，术语“预防”是指预防疾病；例如在可能易感染疾病、病状或病症但尚未经历或呈现疾病的病理学或症状学的个体中预防疾病、病状或病症。
组合疗法
本发明化合物可用于组合治疗，其中本发明化合物是连同诸如施用一种或多种其它治疗剂的其它治疗一起施用。其它治疗剂典型地为正常情况下用于治疗欲治疗的特定病状的那些治疗剂。其它治疗剂可包括例如用于治疗BET蛋白相关疾病、病症或病状的化学治疗剂、消炎剂、类固醇、免疫抑制剂，以及Bcr-Abl、Flt-3、RAF、FAK和JAK激酶抑制剂。可同时或依序向患者施用一种或多种其它药物剂。
在一些实施方案中，本发明化合物可与靶向表观遗传调节因子的治疗剂组合使用。表观遗传调节因子的实例包括组蛋白赖氨酸甲基转移酶、组蛋白精氨酸甲基转移酶、组蛋白去甲基酶、组蛋白去乙酰基酶、组蛋白乙酰基酶和DNA甲基转移酶。组蛋白去乙酰基酶抑制剂包括例如伏立诺他(vorinostat)。
为了治疗癌症和其它增殖性疾病，本发明化合物可与化学治疗剂或其它抗增殖剂组合使用。本发明化合物还可与诸如手术或放射疗法(例如γ辐射、中子束放射疗法、电子束放射疗法、质子疗法、近程放射疗法和系统性放射性同位素)的医学疗法组合使用。适合的化学治疗剂的实例包括以下各项中的任一项：阿巴瑞克(abarelix)、阿地白介素(aldesleukin)、阿仑单抗(alemtuzumab)、阿利维A酸(alitretinoin)、别嘌呤醇(allopurinol)、六甲蜜胺(altretamine)、阿那曲唑(anastrozole)、三氧化二砷、天冬酰胺酶、阿扎胞苷(azacitidine)、贝伐单抗(bevacizumab)、蓓萨罗丁(bexarotene)、博来霉素(bleomycin)、硼替佐必(bortezombi)、硼替佐米(bortezomib)、静脉用白消安、口服白消安、二甲睾酮(calusterone)、卡培他滨(capecitabine)、卡铂(carboplatin)、卡莫司汀(carmustine)、西妥昔单抗(cetuximab)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、顺铂(cisplatin)、克拉屈滨(cladribine)、克罗拉滨(clofarabine)、环磷酰胺、阿糖胞苷、达尔巴嗪(dacarbazine)、放线菌素(dactinomycin)、达替肝素钠(dalteparin sodium)、达沙替尼(dasatinib)、道诺霉素(daunorubicin)、地西他滨(decitabine)、地尼白介素(denileukin)、地尼白介素-2(denileukin diftitox)、右雷佐生(dexrazoxane)、多烯紫杉醇(docetaxel)、多柔比星(doxorubicin)、丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate)、依库珠单抗(eculizumab)、表柔比星(epirubicin)、埃罗替尼(erlotinib)、雌氮芥(estramustine)、磷酸依托泊苷(etoposide phosphate)、依托泊苷(etoposide)、依西斯坦(exemestane)、柠檬酸芬太尼(fentanyl citrate)、非格司亭(filgrastim)、氟脲苷(floxuridine)、氟达拉滨(fludarabine)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、氟维司群(fulvestrant)、吉非替尼(gefitinib)、吉西他滨(gemcitabine)、吉妥珠单抗奥唑米星(gemtuzumab ozogamicin)、醋酸戈舍瑞林(goserelin acetate)、醋酸组氨瑞林(histrelin acetate)、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)、伊达比星(idarubicin)、异环磷酰胺(ifosfamide)、甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate)、干扰素α2a、伊立替康(irinotecan)、二甲苯磺酸拉帕替尼(lapatinib ditosylate)、来那度胺(lenalidomide)、来曲唑(letrozole)、甲酰四氢叶酸(leucovorin)、醋酸亮丙瑞林(leuprolide acetate)、左旋四咪唑(levamisole)、洛莫司汀(lomustine)、氮芥(meclorethamine)、醋酸甲地孕酮(megestrol acetate)、美法仑(melphalan)、巯基嘌呤(mercaptopurine)、氨甲蝶呤(methotrexate)、甲氧沙林(methoxsalen)、丝裂霉素C(mitomycin C)、米托坦(mitotane)、米托蒽醌(mitoxantrone)、苯丙酸诺龙(nandrolone phenpropionate)、奈拉滨(nelarabine)、诺非莫单抗(nofetumomab)、奥沙利铂(oxaliplatin)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、帕米膦酸盐(pamidronate)、帕尼单抗(panitumumab)、培门冬酶(pegaspargase)、培非格司亭(pegfilgrastim)、培美曲塞二钠(pemetrexed disodium)、喷司他丁(pentostatin)、哌泊溴烷(pipobroman)、光辉霉素(plicamycin)、丙卡巴肼(procarbazine)、喹吖因(quinacrine)、拉布立酶(rasburicase)、利妥昔单抗(rituximab)、鲁索替尼(ruxolitinib)、索拉非尼(sorafenib)、链脲霉素(streptozocin)、舒尼替尼(sunitinib)、马来酸舒尼替尼、他莫西芬(tamoxifen)、替莫唑胺(temozolomide)、替尼泊苷(teniposide)、睾内酯(testolactone)、沙利度胺(thalidomide)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、噻替派(thiotepa)、拓朴替康(topotecan)、托瑞米芬(toremifene)、托西莫单抗(tositumomab)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、维甲酸(tretinoin)、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)、戊柔比星(valrubicin)、长春花碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春瑞滨(vinorelbine)、伏立诺他和唑来膦酸盐(zoledronate)。
为了治疗癌症和其它增殖性疾病，本发明化合物可与鲁索替尼组合使用。
为了治疗自体免疫性或炎性病状，本发明化合物可与诸如曲安西龙(triamcinolone)、地塞米松、氟轻松、可体松、泼尼松龙或氟甲隆(flumetholone)的皮质类固醇组合施用。
为了治疗自体免疫性或炎性病状，本发明化合物可与诸如醋酸氟轻松利美索龙(AL-2178、Vexol、Alcon)或环孢霉素的免疫抑制剂组合施用。
为了治疗自体免疫性或炎性病状，本发明化合物可与选自以下的一种或多种其它药剂组合施用：DehydrexTM(Holles Labs)、Civamide(Opko)、透明质酸钠(Vismed，Lantibio/TRB Chemedia)、环孢霉素(ST-603，Sirion Therapeutics)、ARG101(T)(睾酮，Argentis)、AGR1012(P)(Argentis)、依卡倍特钠(ecabet sodium)(Senju-Ista)、吉法酯(gefarnate)(Santen)、15-(s)-羟基二十碳四烯酸(15(S)-HETE)、西维美林(cevilemine)、强力霉素(ALTY-0501，Alacrity)、米诺环素、iDestrinTM(NP50301，Nascent Pharmaceuticals)、环孢霉素A(Nova22007，Novagali)、氧四环素(耐久霉素，MOLI1901，Lantibio)、CF101(2S,3S,4R,5R)-3,4-二羟基-5-[6-[(3-碘苯基)甲基氨基]嘌呤-9-基]-N-甲基-氧杂环戊烷-2-氨甲酰基，Can-Fite Biopharma)、伏环孢素(voclosporin)(LX212或LX214，Lux Biosciences)、ARG103(Agentis)、RX-10045(合成消退素类似物，Resolvyx)、DYN15(Dyanmis Therapeutics)、利格列酮(rivoglitazone)(DE011，Daiichi Sanko)、TB4(RegeneRx)、OPH-01(Ophtalmis Monaco)、PCS101(Pericor Science)、REV1-31(Evolutec)、催泪蛋白(Lacritin)(Senju)、瑞巴匹特(rebamipide)(Otsuka-Novartis)、OT-551(Othera)、PAI-2(University of Pennsylvania和Temple University)、毛果芸香碱、他克莫司、吡美莫司(pimecrolimus)(AMS981，Novartis)、依碳酸氯替泼诺(loteprednol etabonate)、利妥昔单抗、地夸磷索四钠(diquafosol tetrasodium)(INS365，Inspire)、KLS-0611(Kissei Pharmaceuticals)、脱氢表雄甾酮、阿那白滞素(anakinra)、依法利珠单抗(efalizumab)、霉酚酸钠(mycophenolate sodium)、依那西普(etanercept)羟氯奎、NGX267(TorreyPines Therapeutics)或沙利度胺。
在一些实施方案中，本发明化合物可与选自以下的一种或多种药剂组合施用：抗生素、抗病毒剂、抗真菌剂、麻醉剂、消炎剂(包括类固醇消炎剂和非类固醇消炎剂)和抗过敏剂。适合的药剂的实例包括氨基糖苷，诸如阿米卡星(amikacin)、庆大霉素(gentamycin)、托普霉素(tobramycin)、链霉素(streptomycin)、奈替霉素(netilmycin)和卡那霉素(kanamycin)；氟喹诺酮，诸如赛普沙辛、诺氟沙星、氧氟沙星、曲伐沙星、洛美沙星、左氧氟沙星和依诺沙星；萘啶；磺酰胺；多粘菌素；氯霉素；新霉素；巴龙霉素；甲磺酸粘菌素；杆菌肽；万古霉素；四环素；利福平和其衍生物(“利福平类”)；环丝氨酸；β-内酰胺；头孢菌素；两性霉素；氟康唑；氟胞嘧啶；纳他霉素；霉康唑；酮康唑；皮质类固醇；双氯芬酸；氟比洛芬；酮咯酸；舒洛芬；色甘酸；洛度沙胺；左卡巴司丁；萘唑啉；安他唑啉；非尼拉敏；或氮杂内酯类抗生素。
还可与所提供的化合物组合的一种或多种药剂的其它实例包括：针对阿兹海默氏病的治疗诸如多奈哌齐(donepezil)和利斯的明(rivastigmine)；针对帕金森氏病的治疗，诸如L-DOPA/卡比多巴、恩他卡朋(entacapone)、罗匹尼罗(ropinirole)、普拉克索(pramipexole)、溴麦角环肽、培高利特、三己芬迪和金刚烷胺；用于治疗多发性硬化(MS)的药剂，诸如β干扰素(例如和)、醋酸格拉替雷和米托蒽醌；针对哮喘的治疗，诸如舒喘宁和孟鲁司特；用于治疗精神分裂症的药剂，诸如再普乐(zyprexa)、利司培酮(risperdal)、思乐康(seroquel)和氟哌丁苯；消炎剂，诸如皮质类固醇，诸如地塞米松或泼尼松、TNF阻断剂、IL-1RA、咪唑硫嘌呤、环磷酰胺和柳氮磺胺吡啶；免疫调节剂，包括免疫抑制剂，诸如环孢菌素、他克莫司、雷帕霉素、霉酚酸酯、干扰素、皮质类固醇、环磷酰胺、咪唑硫嘌呤和柳氮磺胺吡啶；神经营养因子，诸如乙酰胆碱酯酶抑制剂、MAO抑制剂、干扰素、抗惊厥剂、离子通道阻断剂、利鲁唑或抗帕金森病剂；用于治疗心血管疾病的药剂，诸如β-阻断剂、ACE抑制剂、利尿剂、硝酸盐、钙通道阻断剂或他汀；用于治疗肝病的药剂，诸如皮质类固醇、消胆胺、干扰素和抗病毒剂；用于治疗血液病症的药剂，诸如皮质类固醇、抗白血病剂或生长因子；或用于治疗免疫缺陷病症的药剂，诸如γ球蛋白。
在一些实施方案中，本发明化合物是与JAK激酶抑制剂(例如鲁索替尼、托法替尼、巴瑞克替尼、CYT387、GLPG0634、来他替尼、帕克利替尼、TG101348或JAK1选择性抑制剂)、Pim激酶抑制剂(包括PIM1、PIM2和PIM3中的一个或多个的抑制剂)、PI3激酶抑制剂(包括PI3K-δ选择性抑制剂和广谱PI3K抑制剂)、MEK抑制剂、周期素依赖性激酶抑制剂、b-RAF抑制剂、mTOR抑制剂、蛋白酶体抑制剂(例如硼替佐米、卡非佐米)、HDAC抑制剂(例如帕比司他、伏立诺他)、DNA甲基转移酶抑制剂、地塞米松、美法仑或免疫调节剂(例如来那度胺、泊马度胺)组合施用。
制剂、剂型和施用
当用作药物时，本发明化合物可呈药物组合物形式施用。这些组合物可用药物技术中众所周知的方式制备，且可通过多种途径施用，取决于局部治疗或全身治疗和欲治疗的区域。施用可为局部(包括经皮、经表皮、经眼和经粘膜，包括经鼻内、经阴道和经直肠递送)、经肺(例如通过吸入或吹入粉剂或气雾剂，包括通过喷雾器；经气管内或经鼻内)、经口或非经肠。非经肠施用包括静脉内、动脉内、皮下、腹膜内、肌肉内或注射或输注；或颅内(例如鞘内)或心室内施用。非经肠施用可呈单次推注剂量形式，或可例如通过连续灌注泵。用于局部施用的药物组合物和制剂可包括经皮贴片、软膏、洗剂、乳膏、凝胶、滴剂、栓剂、喷雾、液体和粉剂。常规药物载体、水溶液、粉剂或油性基质、增稠剂及其类似物可为必需的或合乎需要的。
本发明还包括含有作为活性成分的本发明化合物或其药学上可接受的盐与一种或多种药学上可接受的载体(赋形剂)的组合的药物组合物。在一些实施方案中，所述组合物适合于局部施用。在制造本发明的组合物时，典型地将活性成分与赋形剂混合，通过赋形剂稀释或囊封于例如呈胶囊、药囊、纸张或其它容器形式的载体内。当赋形剂充当稀释剂时，其可为固体、半固体或液体材料，其充当活性成分的媒介物、载体或介质。因而，所述组合物可呈片剂、丸剂、粉剂、糖丸、药囊、扁囊剂、酏剂、悬浮液、乳液、溶液、糖浆、气雾剂(呈固体形式或处于液体介质中)、例如含多达10重量％活性化合物的软膏、软胶囊和硬胶囊、栓剂、无菌可注射溶液和无菌包装粉剂形式。
在制备制剂时，可研磨活性化合物以提供适当粒度，随后与其它成分组合。如果活性化合物基本上不可溶，则其可研磨至小于200目的粒度。如果活性化合物基本上可溶于水，则可通过研磨以便在制剂中提供基本上均匀分布来调节粒度，例如约40目。
本发明化合物可使用诸如湿磨的已知研磨程序进行研磨，以获得适合于片剂形成和其它制剂类型的粒度。本发明化合物的精细分散(纳米微粒)制剂可通过本领域中已知的方法来制备，例如，参见国际申请第WO 2002/000196号。
适合的赋形剂的一些实例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、海藻酸盐、黄芪胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、糖浆和甲基纤维素。所述制剂可另外包含：润滑剂，诸如滑石、硬脂酸镁和矿物油；润湿剂；乳化剂和悬浮剂；防腐剂，诸如苯甲酸甲酯和羟基苯甲酸丙酯；甜味剂；和调味剂。可配制本发明的组合物以便在通过使用本领域中已知的程序施用患者之后提供活性成分的快速、持续或延迟释放。
所述组合物可经配制而呈单位剂量形式，各剂量含有约5至约1,000mg(1g)，更通常含有约100mg至约500mg活性成分。术语“单位剂量形式”是指适合作为用于人类个体和其它哺乳动物的单位剂量的物理离散单元，各单元含有经计算能产生所要治疗效果且与适合的药物赋形剂缔合的预定量的活性材料。
活性化合物在较宽剂量范围内可为有效的且一般以药学上有效的量施用。然而应理解，实际上施用的化合物的量通常将由医师根据相关情形(包括欲治疗的病状、所选施用途径、所施用的实际化合物、个别患者的年龄、体重和反应、患者症状的严重程度和其类似因素)来确定。
为了制备诸如片剂的固体组合物，将主要活性成分与药物赋形剂混合，以形成含有本发明化合物的均质混合物的固体预配制组合物。当提及这些预配制组合物为均质时，活性成分典型地均匀分散于整个组合物中，使得所述组合物可容易地再分成同样有效的单位剂型，诸如片剂、丸剂和胶囊剂。随后将此固体预制剂再分成含有例如约0.1至约1000mg本发明活性成分的上述类型的单位剂型。
本发明的片剂或丸剂可经涂布或以其它方式混配以提供能获得延长作用时间优势的剂型。举例来说，片剂或丸剂可包含内部剂量和外部剂量组分，后者呈处于前者上的封套形式。所述两种组分可由肠衣层隔开，所述肠衣层用于在胃中抵抗崩解且允许内部组分完整地进入十二指肠或延迟释放。多种材料可用于此类肠衣层或包衣层，此类材料包括许多聚合酸和聚合酸与诸如虫胶、鲸蜡醇和醋酸纤维素的材料的混合物。
可掺入本发明的化合物和组合物以便经口或通过注射施用的液体形式包括水溶液、适当调味的糖浆、水或油悬浮液和含诸如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油的可食用油以及酏剂和类似药物媒介物的调味乳液。
用于吸入或吹入的组合物包括处于药学上可接受的水性溶剂或有机溶剂或其混合物中的溶液和悬浮液和粉末。液体或固体组合物可含有如上文所描述的适合的药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，所述组合物是通过经口或经鼻呼吸途径施用以达成局部或全身效应。组合物可利用惰性气体进行雾化。雾化的溶液可由雾化装置直接呼吸，或雾化装置可连接于面罩幕或间歇性正压呼吸机。溶液、悬浮液或粉剂组合物可从以适当方式递送制剂的装置经口或经鼻施用。
局部制剂可含有一种或多种常规载体。在一些实施方案中，软膏可含有水和选自例如液体石蜡、聚氧乙烯烷基醚、丙二醇、白凡士林及其类似物的一种或多种疏水性载体。乳膏的载体组合物可基于水与甘油和一种或多种其它组分(例如单硬脂酸甘油酯、PEG-单硬脂酸甘油酯和鲸蜡基硬脂醇)的组合。凝胶可使用适当地与诸如甘油、羟乙基纤维素及其类似物的其它组分组合的异丙醇和水来配制。在一些实施方案中，局部制剂含有至少约0.1、至少约0.25、至少约0.5、至少约1、至少约2或至少约5重量％本发明化合物。局部制剂可适当地封装于管中，例如，100g，其任选地附带关于治疗所选适应症(例如银屑病或其它皮肤病状)的说明书。
施用患者的化合物或组合物的量将取决于施用何物、施用目的(诸如预防或治疗)、患者状态、施用方式及其类似因素。在治疗性应用中，可施用已罹患疾病的患者的组合物的量足以治愈或至少部分阻遏所述疾病及其并发症的症状。有效剂量将取决于所治疗的疾病病状以及由护理医师视诸如疾病严重程度、患者的年龄、体重和一般状况及其类似因素的因素而作出的判断。
施用患者的组合物可呈上述药物组合物形式。这些组合物可通过常规灭菌技术进行灭菌，或可进行无菌过滤。水溶液可经封装以供依原样使用，或经冻干，冻干制剂可在施用前与无菌水性载体组合。化合物制剂的pH值典型地将介于3与11之间，更优选为5至9且最优选为7至8。应理解，使用某些前述赋形剂、载体或稳定剂将形成药物盐。
本发明化合物的治疗剂量可根据例如进行治疗的特定用途、施用化合物的方式、患者的健康状况和病状以及处方医师的判断而变化。本发明化合物在药物组合物中的比例或浓度可视许多因素而变化，包括剂量、化学特征(例如疏水性)和施用途径。举例来说，本发明化合物可以含有约0.1至约10％w/v化合物的水性生理学缓冲溶液形式提供以用于非经肠施用。一些典型剂量范围为每日约1μg/kg至约1g/kg体重。在一些实施方案中，剂量范围为每日约0.01mg/kg至约100mg/kg体重。剂量有可能取决于诸如疾病或病症的类型和进展程度、特定患者的总体健康状态、所选化合物的相对生物学效力、赋形剂的配方及其施用途径的变数。有效剂量可由得自于活体外或动物模型测试系统的剂量反应曲线外推。
本发明的组合物可还包括一种或多种其它药物剂，诸如化学治疗剂、类固醇、消炎化合物或免疫抑制剂，其实例列于上文中。
经标记的化合物和分析方法
本发明的另一方面涉及不仅适用于成像技术而且适用于活体外和活体内检定的经标记的本发明化合物(经放射标记、荧光标记等)，其是用于对组织样品(包括人)中的BET蛋白进行定位和定量，和用于通过抑制经标记化合物的结合来鉴别BET蛋白。因此，本发明包括含有所述经标记化合物的BET蛋白检定。
本发明还包括经同位素标记的本发明化合物。经“同位素”或“放射标记”的化合物为本发明化合物，其中一个或多个原子由原子质量或质量数与自然界中典型地发现(即，天然存在)的原子质量或质量数不同的原子置换或取代。可掺入本发明化合物中的适合放射性核素包括但不限于3H(也写作T，即氚)、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、18F、35S、36Cl、82Br、75Br、76Br、77Br、123I、124I、125I和131I。并入本发明的经放射性标记的化合物中的放射性核素将取决于所述经放射性标记的化合物的特定应用。举例来说，对于活体外BET蛋白标记和竞争检定，掺入3H、14C、82Br、125I、131I或35S的化合物一般将为最适用的。对于放射成像应用，11C、18F、125I、123I、124I、131I、75Br、76Br或77Br一般将为最适用的。
应理解，“经放射性标记”或“经标记的化合物”为已掺入至少一个放射性核素的化合物。在一些实施方案中，放射性核素选自由以下各项组成的群：3H、14C、125I、35S和82Br。在一些实施方案中，所述化合物掺入1、2或3个氘原子。
本发明可还包括用于将放射性同位素掺入本发明化合物中的合成方法。用于将放射性同位素掺入有机化合物中的合成方法在本领域中为熟知的，且本领域技术人员将容易地辨别适用于本发明化合物的方法。
本发明的经标记化合物可用于筛选检定以鉴别/评估化合物。举例来说，新合成或鉴别的经标记化合物(即，测试化合物)可通过追踪标记从而监测其在与BET蛋白接触时的浓度变化来评估其结合BET蛋白的能力。举例来说，可评估测试化合物(经标记)减少已知可结合BET蛋白的另一化合物(即，标准化合物)的结合的能力。因此，测试化合物与标准化合物竞争结合BET蛋白的能力与其结合亲和力直接相关。相反，在一些其它筛选检定中，标准化合物经标记而测试化合物未经标记。因此，监测经标记的标准化合物的浓度以便评估标准化合物与测试化合物之间的竞争，且因而确定测试化合物的相对结合亲和力。
将利用特定实施例更详细地描述本发明。以下实施例是出于说明目的而提供，且不意欲以任何方式限制本发明。本领域技术人员将容易地辨别多个非重要参数，所述参数可变化或修改以产生基本上相同的结果。发现实施例的化合物为一种或多种如下文所述的BET蛋白的抑制剂。
实施例
以下提供本发明化合物的实验程序。在Waters质量定向分馏系统上对所制备的一些化合物进行制备型LC-MS纯化。在文献中已详细描述用于操作这些系统的基本设备设定、方案和控制软件。参见例如“Two-Pump At Column Dilution Configuration for Preparative LC-MS”,K.Blom,J.Combi.Chem.,4,295(2002)；“Optimizing Preparative LC-MS Configurations and Methods for Parallel Synthesis Purification”,K.Blom,R.Sparks,J.Doughty,G.Everlof,T.Haque,A.Combs,J.Combi.Chem.,5,670(2003)；和“Preparative LC-MS Purification:Improved Compound Specific Method Optimization”,K.Blom,B.Glass,R.Sparks,A.Combs,J.Combi.Chem.,6,874-883(2004)。典型地在以下条件下对所分离的化合物进行分析型液相色谱质谱法(LCMS)以进行纯度分析：仪器：Agilent 1100系列，LC/MSD；柱：Waters SunfireTM C18 5μm，2.1×50mm；缓冲液：移动相A：0.025％TFA/水和移动相B：乙腈；梯度2％至80％B，3分钟，流速2.0mL/min。
同样如实施例中所指示，通过利用MS检测器的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)或快速色谱法(硅胶)在制备规模下分离所制备的一些化合物。典型制备型反相高效液相色谱(RP-HPLC)柱条件如下：
pH＝2纯化：Waters SunfireTM C18 5μm，19×100mm柱，用如下移动相洗脱：移动相A：0.1％TFA(三氟乙酸)/水和移动相B：乙腈；流速为30mL/min，使用如文献中所描述的化合物特异性方法优化方案对各化合物的分离梯度进行优化[参见“Preparative LCMS Purification:Improved Compound Specific Method Optimization”,K.Blom,B.Glass,R.Sparks,A.Combs,J.Comb.Chem.,6,874-883(2004)]。典型地，与30×100mm柱一起使用的流速为60mL/min。
pH＝10纯化：Waters XBridge C18 5μm，19×100mm柱，用如下移动相洗脱：移动相A：0.15％NH4OH/水和移动相B：乙腈；流速为30mL/min，使用如文献中所描述的化合物特异性方法优化方案对各化合物的分离梯度进行优化[参见“Preparative LCMS Purification:Improved Compound Specific Method Optimization”,K.Blom,B.Glass,R.Sparks,A.Combs,J.Comb.Chem.,6,874-883(2004)]。典型地，与30×100mm柱一起使用的流速为60mL/min。
实施例1. 8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2-苯基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1. 8-溴-2-苯基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将2-氨基-6-溴苯酚(0.10g，0.53mmol)(Frinton，目录号FR-2404)和α-溴-苯乙酸甲酯(0.084mL，0.53mmol)(Aldrich，目录号365270)与N-甲基吡咯烷酮(2.0mL)和1,8-二氮双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.080mL，0.53mmol)组合于密封管中。在微波中将混合物加热至140℃后维持5分钟。随后冷却反应混合物，溶解于乙酸乙酯中，且用1N HCl、盐水洗涤，经硫酸镁干燥并浓缩，得到深色油。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈半固体状的8-溴-2-苯基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.1g，60％)。对于C14H11BrNO2，LCMS计算值：(M+H)+:m/z＝304.0,306.0；实测值：303.8,305.8。
步骤2. 8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2-苯基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将8-溴-2-苯基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.02g，0.06mmol)与6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮(0.028g，0.066mmol)(WO2013097601，第92页)合并于1,4-二噁烷(1.5mL)与含碳酸钾(0.018g，0.13mmol)的水(0.50mL)的混合物中。利用氮气对反应物进行脱气，且添加催化剂[1,1'-双(二苯膦)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(1:1)(0.005g，0.006mmol)。在密封管中将反应物加热至100℃后维持2小时。将混合物冷却至室温且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤有机层，经硫酸镁干燥并浓缩，得到呈深色油状的8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2-苯基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.025g，83％)。对于C29H24N3O5S，LCMS计算值：(M+H)+:m/z＝526.1；实测值：526.1。
步骤3. 8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2-苯基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2-苯基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮溶解于乙醇(3.0mL)与1.0M氢氧化钠水溶液(1.0mL)的混合物中，且在油浴中加热至80℃后维持1h。随后将混合物冷却至室温且用三氟乙酸(TFA)酸化。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题产物(25mg)。对于C22H18N3O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝372.1；实测值：372.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.98(s,1H),11.03(s,1H),7.28(ddd,J＝8.5,6.4,3.9Hz,5H),7.17(t,J＝2.8Hz,1H),7.06(s,1H),7.05-6.89(m,3H),6.02-5.95(m,1H),5.73(s,1H),3.47(s,3H)。
实施例2至4.
以下表1中阐述实施例2至实施例4的化合物和用于制备其的实验程序。
表1
实施例5. 8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2-吡啶-2-基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐
步骤1.溴(吡啶-2-基)乙酸甲酯
将过氧苯甲酰(80mg，0.3mmol)一次性添加至2-吡啶基乙酸甲酯(500mg，3mmol)(Aldrich，目录号M78305)和N-溴丁二酰亚胺(600mg，3mmol)于四氯化碳(5mL)中的溶液中。将反应物加热至100℃后持续1h，冷却至室温且过滤以移除固体。蒸发溶剂，得到呈暗黄色半固体状的溴(吡啶-2-基)乙酸甲酯。对于C8H9BrNO2，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝229.9,231.9；实测值＝229.9,231.8。
步骤2. 8-溴-2-吡啶-2-基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
在微波中在140℃下将2-氨基-6-溴苯酚(100mg，0.5mmol)、溴(吡啶-2-基)乙酸甲酯(100mg，0.5mmol)和1,8-二氮双环[5.4.0]十一碳-7-烯(80μL，0.5mmol)于N-甲基吡咯烷酮(3mL)中的混合物加热10min。使反应物冷却，用乙酸乙酯稀释且用水洗涤。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈粗产物形式的8-溴-2-吡啶-2-基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.15g，90％)。对于C13H10BrN2O2，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝304.9 306.9；实测值＝305.0,307.0。
步骤3. 8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2-吡啶-2-基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐
将8-溴-2-吡啶-2-基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(15mg，0.049mmol)和6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮(25mg，0.059mmol)溶解于1,4-二噁烷(2mL)与含碳酸钾(10mg，0.07mmol)的水(0.8mL)的混合物中。利用氮气对反应物进行脱气，且添加催化剂[1,1'-双(二苯膦)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(1:1)(5mg，0.006mmol)。在100℃下将反应物加热4h，使其冷却，且分配在水与EtOAc之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经硫酸镁干燥并浓缩。在C-18柱上利用制备型HPLC纯化产物，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色固体状的8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2-吡啶-2-基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐(0.015g，58％)。对于C28H23N4O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝527.1；实测值527.1。
步骤4. 8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2-吡啶-2-基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐
将8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2-吡啶-2-基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮2,2,2-三氟乙酸盐(0.015g，0.028mmol)溶解于乙醇(2mL)与1.0M氢氧化钠水溶液(1mL)的混合物中，且在80℃下搅拌2h。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化反应混合物而不进行处理，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色固体状的标题产物(0.004g，30％)。对于C21H17N4O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝373.1；实测值＝373.0。
实施例6. 2-环丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1.溴(环丙基)乙酸乙酯
在室温下将亚硫酰氯(0.46mL，6.3mmol)逐滴添加至环丙基乙酸(0.5g，5mmol)(Oakwood，目录号003710)于1,2-二氯乙烷(5.2mL)中的溶液中。将反应物加热至回流后维持2h，随后使其冷却至室温，此时相继添加N-溴丁二酰亚胺(1.12g，6.27mmol)和溴化氢(2μL，0.04mmol)(48％水溶液)。将所得混合物加热至回流后维持2天。随后将反应混合物冷却至室温，添加乙醇(4mL)，且在室温下将反应物再搅拌2h。随后浓缩反应混合物，得到粗产物。将粗产物溶解于四氯化碳中，且通过短凝胶柱并且浓缩，得到呈油状的溴(环丙基)乙酸乙酯(0.70g，70％)。
步骤2. 2-环丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例5类似的方法，但使用溴(环丙基)乙酸乙酯，制得标题化合物且在C-18柱上通过制备型HPLC加以纯化，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色非晶固体状的2-环丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.007g，40％)。对于C19H18N3O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝336.1；实测值＝336.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.68(s,1H),10.36(s,1H),6.92(d,J＝3.5Hz,2H),6.66(d,J＝4.6Hz,2H),6.55(q,J＝4.7,4.1Hz,1H),5.83(t,J＝2.3Hz,1H),3.72(d,J＝8.3Hz,1H),3.20(s,3H),0.82(ddt,J＝13.0,8.2,4.3Hz,1H),0.21(t,J＝9.2Hz,1H),0.14--0.05(m,3H)。
实施例7. 8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1.四氢-2H-吡喃-4-基乙酸甲酯
将四氢-2H-吡喃-4-基乙酸(500mg，3mmol)(Combi Blocks，目录号AM-1005)和硫酸(20μL，0.4mmol)于甲醇(10μL)中的混合物加热至回流后维持12h。随后冷却混合物并浓缩以移除甲醇。将所得残余物溶解于EtOAc中，用饱和NaHCO3洗涤，干燥并浓缩，以得到呈粗产物形式的四氢-2H-吡喃-4-基乙酸甲酯(510mg，100％)。
步骤2.溴(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸甲酯
在-78℃下将正丁基锂的己烷溶液1.6M(2mL，3mmol)逐滴添加至N,N-二异丙基乙胺(0.6mL，3mmol)于四氢呋喃(5mL)中的溶液中。将反应混合物搅拌30min，且随后添加至四氢-2H-吡喃-4-基乙酸甲酯(500mg，3mmol)于四氢呋喃(5mL)中的冷溶液中。将混合物搅拌1h，随后添加三甲基氯硅烷(0.4mL，3mmol)。使所得混合物升温至室温后维持1h，冷却至-78℃，且添加N-溴丁二酰亚胺(0.6g，3mmol)。使反应物升温至室温且再搅拌2h。使悬浮液通过硅胶垫进行过滤，且用乙醚洗涤固体。浓缩有机溶液，得到呈油状的粗制溴(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸甲酯(0.30g，40％)。
步骤3. 8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例5类似的方法，但使用溴(四氢-2H-吡喃-4-基)乙酸甲酯，制备呈白色非晶固体状的标题化合物(0.008g，40％)。对于C21H22N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝380.1；实测值＝380.2。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.00(s,1H),10.73(s,1H),7.25(d,J＝3.9Hz,2H),7.03-6.97(m,2H),6.88(dd,J＝6.6,2.7Hz,1H),6.21-6.11(m,1H),4.45(d,J＝4.7Hz,1H),3.73(t,J＝10.8Hz,2H),3.54(s,3H),3.24-3.12(m,2H),2.18-2.08(m,1H),1.46-1.26(m,4H)。
实施例8. 2-乙基-4-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1. 2-乙基-4-甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将实施例4的2-乙基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(20mg，0.04mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中，添加处于矿物油中的氢化钠(2mg，0.08mmol)，并且将混合物搅拌10min。添加甲基碘(4μL，0.06mmol)且将混合物再搅拌30min。随后使反应混合物分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经硫酸镁干燥并浓缩，得到呈玻璃状的粗制2-乙基-4-甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(20mg，100％)。对于C26H26N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝492.1；实测值＝491.9。
步骤2. 2-乙基-4-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将粗制2-乙基-4-甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(20mg，0.04mmol)溶解于乙醇(2mL)与1.0M氢氧化钠水溶液(1mL)的混合物中，且在80℃下将反应混合物加热1h。随后在C-18柱上以制备型LC-MS纯化反应混合物而不进行处理，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色固体状的2-乙基-4-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(6mg，40％)。对于C19H20N3O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝338.1；实测值＝338.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.01(s,1H),7.24(d,J＝5.3Hz,2H),7.19-7.03(m,3H),6.14(s,1H),4.54(dd,J＝8.0,4.2Hz,1H),3.53(s,3H),3.31(s,3H),1.81(dd,J＝11.5,7.2Hz,1H),1.65(dt,J＝14.4,7.6Hz,1H),0.76(t,J＝7.3Hz,3H)。
实施例9. 2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1. 8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
在密封管中将2-氨基-6-溴-4-甲氧基苯酚(0.1g，0.4mmol)(Aldrich，目录号653705)和2-溴-3-甲基丁酸乙酯(0.11mL，0.69mmol)(Alpha，目录号B22525)与1,8-二氮双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.14mL，0.92mmol)合并于N-甲基吡咯烷酮(1.0mL)中。在微波中将反应混合物加热至140℃后维持15分钟。随后冷却反应混合物且分配在乙酸乙酯与1N HCl之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经硫酸镁干燥并浓缩，得到深色油。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈半固体状的8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.03g，30％)。对于C12H15BrNO3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝300.1,302.1；实测值＝300.0,302.0。
步骤2. 2-异丙基-6-甲氧基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.03g，0.1mmol)与6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮(0.043g，0.10mmol)合并于1,4-二噁烷(2.5mL)和含碳酸钾(0.031g，0.22mmol)的水(0.84mL)中。利用氮气对反应物进行脱气，且添加催化剂[1,1'-双(二苯膦)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(1:1)(0.009g，0.01mmol)。在密封管中将反应物加热至100℃后维持2小时。随后将混合物冷却至室温且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经硫酸镁干燥并浓缩，得到呈深色油状的2-异丙基-6-甲氧基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.03g，60％)。对于C27H28N3O6S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝522.1；实测值＝522.1。
步骤3. 2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将2-异丙基-6-甲氧基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.03g，0.06mmol)溶解于乙醇(5.1mL)与1.0M氢氧化钠水溶液(1.7mL)的混合物中，且在油浴中加热至80℃后维持1h。随后将混合物冷却至室温且用TFA酸化。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化粗产物，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(0.02g，50％)。对于C20H22N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝368.1；实测值＝368.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.01(s,1H),10.61(s,1H),7.35-7.20(m,2H),6.57(d,J＝2.9Hz,1H),6.45(d,J＝2.9Hz,1H),6.20(d,J＝2.1Hz,1H),4.30(d,J＝4.3Hz,1H),3.70(s,3H),3.53(s,3H),2.28-2.09(m,1H),0.80(dd,J＝11.7,6.8Hz,6H)。
实施例9A.2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(对映异构体1)
实施例9B.2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(对映异构体2)
使用以下手性分离条件，通过制备型手性柱色谱法分离实施例9的对映异构体：柱：Chiralpak IA C-2 5μm，21，2×250mm；移动相：30％EtOH/己烷；梯度条件：等度，14mL/min；负载量：1.0mg，900μL；运作时间：17min；峰时间：11.0和14.4min。
实施例9A，峰1，呈固体残余物形式(11.0min)。对于C20H22N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝368.1；实测值＝368.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.01(s,1H),10.61(s,1H),7.35-7.20(m,2H),6.57(d,J＝2.9Hz,1H),6.45(d,J＝2.9Hz,1H),6.20(d,J＝2.1Hz,1H),4.30(d,J＝4.3Hz,1H),3.70(s,3H),3.53(s,3H),2.28-2.09(m,1H),0.80(dd,J＝11.7,6.8Hz,6H)。
实施例9B，峰2，呈固体残余物形式(14.4)。对于C20H22N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝368.1；实测值＝368.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.01(s,1H),10.61(s,1H),7.35-7.20(m,2H),6.57(d,J＝2.9Hz,1H),6.45(d,J＝2.9Hz,1H),6.20(d,J＝2.1Hz,1H),4.30(d,J＝4.3Hz,1H),3.70(s,3H),3.53(s,3H),2.28-2.09(m,1H),0.80(dd,J＝11.7,6.8Hz,6H)。
实施例10. 2-异丙基-6-甲氧基-4-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
根据与用于合成实施例8的化合物的程序类似的实验程序来合成实施例10的化合物。LCMS实测值(M+H)+:382.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.02(s,1H),7.27(d,J＝4.5Hz,2H),6.71(d,J＝2.7Hz,1H),6.65(d,J＝2.7Hz,1H),6.19(bs,1H),4.32(d,J＝4.7Hz,1H),3.77(s,3H),3.53(s,3H),3.31(s,3H),2.22-2.10(m,1H),0.77(dd,J＝15.1,6.8Hz,6H)。
实施例11.[2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基]乙酸
步骤1.(8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)乙酸叔丁酯
在室温和氮气下将实施例10的8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.15g，0.50mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL，26mmol)中。添加处于矿物油中的氢化钠(0.024g，0.60mmol)且将反应物搅拌15分钟。随后添加溴乙酸1,1-二甲基乙酯(0.11mL，0.75mmol)，并且在室温下将所得混合物搅拌1h。随后用水将反应混合物淬灭且用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤所合并的有机层，经硫酸镁干燥并浓缩，得到呈半固体状的粗产物。在硅胶上通过FCC纯化粗产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈玻璃状的(8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)乙酸叔丁酯(0.15g，95％)。对于C18H25BrNO5，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝414.1,416.1；实测值＝358.1,360.1(M+H-叔丁基)。
步骤2.(2-异丙基-6-甲氧基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)乙酸叔丁酯
将(8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)乙酸叔丁酯(0.030g，0.072mmol)与6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮(0.031g，0.072mmol)合并于1,4-二噁烷(1.8mL)和含碳酸钾(0.022g，0.16mmol)的水(0.61mL)中。利用氮气对混合物进行脱气，且添加催化剂[1,1'-双(二苯膦)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(1:1)(0.006g，0.008mmol)。在密封管中将反应混合物加热至100℃后维持1h。随后将反应混合物冷却至室温且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经硫酸镁干燥并浓缩，得到呈深色油状的(2-异丙基-6-甲氧基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)乙酸叔丁酯(0.04g，85％)。对于C33H38N3O8S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝636.2；实测值＝636.2。
步骤3.[2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基]乙酸
将(2-异丙基-6-甲氧基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)乙酸叔丁酯(0.04g，0.06mmol)溶解于乙醇(3.7mL)和1.0M氢氧化钠水溶液(1.2mL)中。在油浴中将混合物加热至80℃后维持1h，使其冷却至室温，且用TFA酸化。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题产物(0.02g，65％)。对于C22H24N3O6，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝426.1；实测值＝426.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.02(s,1H),12.03(s,1H),7.37-7.21(m,2H),6.66(d,J＝2.7Hz,1H),6.58(d,J＝2.7Hz,1H),6.20(bs,1H),4.64(s,2H),4.34(d,J＝5.2Hz,1H),3.74(s,3H),3.54(s,3H),2.13(dd,J＝12.3,6.5Hz,1H),0.81(d,J＝6.9Hz,3H),0.74(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例12. 2-[2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基]-N-甲基乙酰胺
步骤1. 2-(8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)乙酸
在室温下将实施例11的2-(8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)乙酸叔丁酯(0.190g，0.459mmol)溶解于二氯甲烷(3.0mL)和三氟乙酸(1.0mL)中后维持2h。在真空中浓缩反应混合物，得到呈油状的粗制2-(8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)乙酸(0.163g，100％)。对于C14H17BrNO5，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝358.1,360.1；实测值＝358.0,360.0。
步骤2. 2-(8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)-N-甲基乙酰胺
将2-(8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)乙酸(0.05g，0.1mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)中，且添加2.0M甲胺的甲醇溶液(0.35mL，0.70mmol)、N,N,N',N'-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(0.064g，0.17mmol)(Oakwood，目录号023926)。在室温下将反应混合物搅拌2h，且随后分配在乙酸乙酯与水之间。用1N HCl、盐水洗涤有机层，经硫酸镁干燥并浓缩，得到呈油状的粗制2-(8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)-N-甲基乙酰胺(0.05g，100％)。对于C15H20BrN2O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝371.1,373.1；实测值＝371.0,373.0。
步骤3. 2-(2-异丙基-6-甲氧基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)-N-甲基乙酰胺
将2-(8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)-N-甲基乙酰胺(0.027g，0.072mmol)与6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮(0.031g，0.072mmol)合并于1,4-二噁烷(1.8mL)和含碳酸钾(0.022g，0.16mmol)的水(0.61mL)中。利用氮气对混合物进行脱气，且添加催化剂[1,1'-双(二苯膦)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(1:1)(0.006g，0.008mmol)。随后在密封管中将反应混合物加热至100℃后维持1h，冷却至室温，且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经硫酸镁干燥并浓缩，得到呈深色油状的粗制2-(2-异丙基-6-甲氧基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)-N-甲基乙酰胺(0.035g，83％)。对于C30H33N4O7S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝593.1；实测值＝593.2。
步骤4. 2-[2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基]-N-甲基乙酰胺
将2-(2-异丙基-6-甲氧基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-2,3-二氢-4H-1,4-苯并噁嗪-4-基)-N-甲基乙酰胺(0.035g，0.059mmol)溶解于乙醇(3.7mL)与1.0M氢氧化钠水溶液(1.2mL)的混合物中，并且在油浴中加热至80℃后维持1h。随后将混合物冷却至室温且用TFA酸化。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(0.015g，47％)。对于C23H27N4O5，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝439.1；实测值＝439.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.03(s,1H),8.09(d,J＝4.7Hz,1H),7.27(d,J＝2.6Hz,2H),6.65(d,J＝2.7Hz,1H),6.44(d,J＝2.7Hz,1H),6.23-6.14(m,1H),4.58-4.38(m,2H),4.35(d,J＝5.0Hz,1H),3.72(s,3H),3.54(s,3H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H),2.16(dd,J＝11.9,6.9Hz,1H),0.81(d,J＝6.9Hz,3H),0.75(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例13至16.
以下表2中阐述实施例13至实施例16的化合物和用于制备其的实验程序。
表2
实施例17. 2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈
步骤1. 3-溴-4-羟基-5-硝基苯甲腈
在室温下将溴(500mg，3mmol)添加至4-羟基-3-硝基苯甲腈(500mg，3mmol)(Aldrich，目录号344575)、氯化铁(100mg，0.9mmol)和乙酸(20mL)的混合物中。将反应混合物加热至50℃后维持2h，使其冷却至室温且添加水(100mL)。缓慢形成沉淀物，收集，用水洗涤并且干燥，获得呈黄色固体状的3-溴-4-羟基-5-硝基苯甲腈(0.50g，70％)。对于C7H4BrN2O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝242.9,244.9；实测值＝242.9,244.9。
步骤2. 3-氨基-5-溴-4-羟基苯甲腈
将铁屑(300mg，5mmol)添加至3-溴-4-羟基-5-硝基苯甲腈(400mg，2mmol)于乙酸(20mL)中的混合物中。随后用氮气对混合物进行脱气且在室温下搅拌隔夜。浓缩反应混合物以移除乙酸，且使残余物分配在乙酸乙酯与饱和碳酸氢钠水溶液之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到呈深色固体状的粗制3-氨基-5-溴-4-羟基苯甲腈(250mg，70％)。对于C7H6BrN2O，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝212.9,214.9；实测值＝212.9,214.9。
步骤3. 2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用3-氨基-5-溴-4-羟基苯甲腈，制备标题化合物并且在C-18柱上通过制备型HPLC加以纯化，以经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色非晶固体状的2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈(0.007g，40％)。对于C20H19N4O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝363.1；实测值＝363.0。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.06(s,1H),11.01(s,1H),7.46(d,J＝2.0Hz,1H),7.34(s,1H),7.27(t,J＝2.7Hz,1H),7.18(d,J＝2.0Hz,1H),6.24-6.13(m,1H),4.62(d,J＝3.8Hz,1H),3.53(s,3H),2.29-2.16(m,1H),0.78(dd,J＝6.8,3.9Hz,6H)。
实施例18. 2-异丙基-4-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈
步骤1. 8-溴-2-异丙基-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈
将处于矿物油中的氢化钠(2mg，0.07mmol)添加至实施例17的8-溴-2-异丙基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈(20mg，0.07mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物中。将反应混合物搅拌5分钟，添加甲基碘(5.1μL，0.081mmol)，并且将反应混合物再搅拌1h。随后使反应物分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈玻璃状的粗制8-溴-2-异丙基-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈(0.020g，100％)。对于C13H14BrN2O2，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝309.1,311.1；实测值＝308.9,310.7。
步骤2. 2-异丙基-4-甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈
将8-溴-2-异丙基-4-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈(16mg，0.051mmol)和6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮(26mg，0.061mmol)溶解于1,4-二噁烷(2mL)与含碳酸钾(10mg，0.08mmol)的水(0.9mL)中，且用氮气对混合物进行脱气。添加催化剂[1,1'-双(二苯膦)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(1:1)(5mg，0.006mmol)，并且在100℃下将混合物加热4h。随后使反应混合物冷却且分配在水与乙酸乙酯之间。用MgSO4干燥所合并的有机层并且浓缩，得到呈玻璃状的粗制2-异丙基-4-甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈(0.027g，100％)。对于C28H27N4O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝531.1；实测值＝531.2。
步骤3. 2-异丙基-4-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈
将2-异丙基-4-甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈(0.027g，0.051mmol)溶解于乙醇(2mL)与1.0M氢氧化钠水溶液(1mL)的混合物中。随后在80℃下将混合物加热1h。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化反应混合物而不进行处理，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色非晶固体状的标题化合物(0.005g，26％)。对于C21H21N4O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝377.1；实测值＝377.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.06(s,1H),7.65(d,J＝1.9Hz,1H),7.56(d,1H),7.34(s,1H),7.30-7.25(m,1H),6.21-6.14(m,1H),4.62(d,J＝4.2Hz,1H),3.54(s,3H),3.34(s,3H),2.27-2.18(m,1H),0.75(d,J＝6.8Hz,6H)。
实施例19. 2-异丙基-4-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲酰胺
将实施例18的2-异丙基-4-甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈溶解于乙醇(2mL)与1.0M氢氧化钠水溶液(1mL)的混合物中。随后在80℃下将混合物加热4h。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化反应混合物而不进行处理，用经TFA缓冲达pH2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色非晶固体状的标题化合物(0.007g，20％)。对于C21H23N4O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝395.1；实测值＝395.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.04(s,1H),8.00(s,1H),7.68(d,J＝1.3Hz,1H),7.61(d,J＝1.5Hz,1H),7.35(s,1H),7.30(s,1H),7.27(t,J＝2.5Hz,1H),6.15(t,J＝2.1Hz,1H),4.51(d,J＝4.3Hz,1H),3.55(s,3H),3.36(s,3H),2.21(dd,J＝11.4,6.7Hz,1H),0.77(dd,J＝6.6Hz,6H)。
实施例20. 2-异丙基-N-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲酰胺
步骤1. 8-溴-2-异丙基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲酸
在100℃下将8-溴-2-异丙基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈(得自实施例18，30mg，0.1mmol)于浓盐酸(1mL，30mmol)中的溶液加热10h。冷却反应混合物且在真空中浓缩，随后分配在水与乙酸乙酯之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈固体残余物状的粗制8-溴-2-异丙基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲酸(30mg，100％)。对于C12H13BrNO4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝314.0,316.0；实测值＝313.9,315.9。
步骤2. 8-溴-2-异丙基-N-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲酰胺
将N,N,N',N'-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓六氟磷酸盐(54mg，0.14mmol)和N,N-二异丙基乙胺(30μL，0.2mmol)添加至8-溴-2-异丙基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲酸(30mg，0.1mmol)于DMF(2mL)中的溶液中。添加处于乙醇中的甲胺(3M，48μL，0.14mmol)且在室温下将反应物搅拌1h。随后使反应混合物分配在1N HCl与乙酸乙酯之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈玻璃状的粗制8-溴-2-异丙基-N-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲酰胺(30mg，90％)。对于C13H16BrN2O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝327.1,329.1；实测值＝327.0,329.0。
步骤3. 2-异丙基-N-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲酰胺
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用得自步骤2的8-溴-2-异丙基-N-甲基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲酰胺，制备标题化合物并且在C-18柱上通过制备型HPLC加以纯化，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色非晶固体状的2-异丙基-N-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲酰胺(5mg，30％)。对于C21H23N4O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝395.1；实测值＝395.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.03(s,1H),10.84(s,1H),8.38-8.28(m,1H),7.50(d,J＝2.1Hz,1H),7.37(d,J＝1.9Hz,1H),7.28(s,1H),7.27-7.23(m,1H),6.18(s,1H),4.49(d,J＝4.1Hz,1H),3.55(s,3H),2.73(d,J＝4.4Hz,3H),2.27-2.14(m,1H),0.79(dd,J＝6.9,2.0Hz,6H)。
实施例21. 2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-硝基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
根据与用于合成实施例9的化合物的程序类似的实验程序来合成实施例21的化合物。LCMS实测值(M+H)+:383.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.11(s,1H),11.11(s,1H),7.90(d,J＝2.8Hz,1H),7.73(d,J＝2.8Hz,1H),7.36-7.22(m,2H),6.23(s,1H),4.70(d,J＝3.6Hz,1H),3.55(s,3H),2.30-2.19(m,1H),0.80(d,J＝6.8Hz,6H)。
实施例22. 4-(2-异丙基-6-甲氧基-4-甲基-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-8-
实施例22. 4-(2-异丙基-6-甲氧基-4-甲基-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-8-基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮
步骤1. 8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪
在室温下将处于甲苯(400μL，0.7mmol)中的2.0M硼烷-二甲硫醚复合物(Aldrich，目录号194824)逐滴添加至实施例9的8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(100mg，0.4mmol)的混合物中，且随后在60℃下将混合物加热隔夜。将反应混合物冷却至室温，用MeOH稀释，且在60℃下再加热30min。随后将混合物冷却至室温并浓缩，以产生粗产物。在硅胶上通过FCC纯化粗产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈透明油状的8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪(70mg，70％)。对于C12H17BrNO2，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝286.1,288.1；实测值＝286.0,288.0。
步骤2. 4-(2-异丙基-6-甲氧基-4-甲基-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-8-基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮
使用与实施例8中的条件类似的方法，但使用得自步骤1的8-溴-2-异丙基-6-甲氧基-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪，制备标题化合物并且在C-18柱上通过制备型HPLC加以纯化，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色非晶固体状的4-(2-异丙基-6-甲氧基-4-甲基-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-8-基)-6-甲基-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮(5mg，30％)。对于C21H26N3O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝368.1；实测值＝368.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.90(s,1H),7.21(t,J＝2.7Hz,1H),7.16(s,1H),6.24(d,J＝2.8Hz,1H),6.18(d,J＝2.8Hz,1H),6.12(d,J＝2.1Hz,1H),3.75-3.67(m,1H),3.67(s,3H),3.51(s,3H),3.30(d,J＝9.5Hz,1H),3.01-2.91(m,1H),2.85(s,3H),1.68-1.57(m,1H),0.82(d,J＝6.8Hz,3H),0.75(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例23至24.
以下表3中阐述实施例23至实施例24的化合物和用于制备其的实验程序。
表3
实施例24A.6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2-苯基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(对映异构体1)
实施例24B.6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2-苯基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(对映异构体2)
使用以下条件，通过制备型手性HPLC分离实施例24的对映异构体：柱：Phenomenex Lux Cellulose C-4，5μm，21.2×25mm；移动相：30％乙醇/己烷；梯度：18mL/min；负载量：2mg，1800μL；运作时间：28min；峰滞留时间：20.9和24.0分钟。
实施例24A，峰1(20.9min)，呈固体残余物形式。对于C23H20N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝402.1；实测值：402.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.93(s,1H),10.90(s,1H),7.28-7.17(m,4H),7.13(t,J＝2.7Hz,1H),7.02(s,1H),6.49(d,J＝2.9Hz,1H),6.46(d,J＝2.9Hz,1H),5.99(s,1H),5.61(s,1H),3.65(s,3H),3.42(s,3H)。
实施例24B，峰2(24.0min)，呈固体残余物形式。对于C23H20N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝402.1；实测值：402.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.93(s,1H),10.90(s,1H),7.28-7.17(m,4H),7.13(t,J＝2.7Hz,1H),7.02(s,1H),6.49(d,J＝2.9Hz,1H),6.46(d,J＝2.9Hz,1H),5.99(s,1H),5.61(s,1H),3.65(s,3H),3.42(s,3H)。
实施例25. 2-(2-氯-4-氟苯基)-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1.溴(2-氯-4-氟苯基)乙酸甲酯
将(2-氯-4-氟苯基)乙酸甲酯(100mg，0.5mmol)(Acros Organics，目录号30478)和N-溴丁二酰亚胺(90mg，0.5mmol)于四氯化碳(0.7mL)中的溶液加热至100℃后维持1h。使反应混合物冷却至室温，过滤且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈淡黄色半固体状的粗制溴(2-氯-4-氟苯基)乙酸甲酯(120mg，90％)。
步骤2. 2-(2-氯-4-氟苯基)-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用得自步骤1的溴(2-氯-4-氟苯基)乙酸甲酯，制备标题化合物且在C-18柱上通过制备型HPLC加以纯化，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色非晶固体状的2-(2-氯-4-氟苯基)-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(4mg，20％)。对于C23H18ClFN3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝454.1；实测值＝454.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.94(s,1H),11.00(s,1H),7.52-7.40(m,2H),7.36-7.13(m,2H),7.11(s,1H),6.55(s,1H),6.13(s,1H),5.87(s,1H),3.74(s,3H),3.46(s,3H)。
实施例26. 2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1. 2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用6-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1,6-二氢-7H-吡唑并[3,4-c]吡啶-7-酮(0.081g，0.20mmol)(WO2013097601)，制备呈油状的标题化合物。对于C25H35N4O5Si，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝499.2；实测值＝499.2。
步骤2. 2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将2-异丙基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮溶解于二氯甲烷与TFA的混合物(2:1)中，且在室温下搅拌3h。在真空中浓缩反应混合物，得到油性残余物。将此残余物溶解于乙醇(3mL)和氢氧化铵(1mL)中，且在室温下将混合物搅拌隔夜。随后在真空中浓缩混合物，得到玻璃状残余物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(25mg，42％)。对于C19H21N4O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝369.1；实测值＝369.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.64(s,1H),7.80(s,1H),7.36(s,1H),6.58(d,J＝2.4Hz,1H),6.48(d,J＝2.6Hz,1H),4.39(d,J＝3.8Hz,1H),3.72(s,3H),3.56(s,3H),2.28-2.11(m,1H),0.76(dd,J＝6.6,3.4Hz,6H)。
实施例27. 6-甲氧基-2,2-二甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
根据与用于合成实施例9的化合物的程序类似的实验程序来合成实施例27的化合物，得到白色非晶固体(15mg，25％)。LCMS实测值(M+H)+:354.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.03(s,1H),10.59(s,1H),7.26(t,J＝2.7Hz,1H),7.19(s,1H),6.56(d,J＝2.9Hz,1H),6.47(d,J＝2.9Hz,1H),6.22-6.12(m,1H),3.70(s,3H),3.54(s,3H),1.30(s,6H)。
实施例28. 2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1. 4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-硝基苯酚
将4-溴-2-硝基苯酚(1.0g，4.6mmol)(Aldrich，目录号309877)与1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1H-吡唑(1.0g，5.0mmol)(Acros Organics，目录号38296)合并于1,4-二噁烷(20mL)和含氟化铯(1.5g，10mmol)的水(10mL)中。用氮气对混合物进行脱气，添加催化剂4-(二叔丁基膦)-N,N-二甲基苯胺-二氯钯(2:1)(0.1g，0.2mmol)，并且在密封管中将混合物加热至100℃后维持1h。随后使混合物冷却至室温且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤有机层，经硫酸镁干燥并浓缩，产生深色油。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈黄色固体状的4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-硝基苯酚(0.20g，20％)。对于C10H10N3O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝220.1；实测值＝220.1。
步骤2. 2-溴-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-硝基苯酚
将4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-硝基苯酚(0.10g，0.46mmol)溶解于乙酸(3.9mL)中，且添加含氯化铁(0.01g，0.09mmol)的水(0.56mL)。在室温下搅拌反应混合物，随后添加含溴(0.073g，0.46mmol)的乙酸(2mL)。在室温下将所得混合物再搅拌2h，随后用水稀释以产生浆液。过滤此浆液且用水洗涤固体并且干燥。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈半固体状的2-溴-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-硝基苯酚(0.12g，85％)。对于C10H9BrN3O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝298.1,300.1；实测值＝297.9,299.9。
步骤3. 2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用得自步骤2的2-溴-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-硝基苯酚，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(18mg，30％)。对于C23H24N5O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝418.2；实测值＝418.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.00(s,1H),10.71(s,1H),8.00(s,1H),7.68(s,1H),7.29(s,1H),7.28-7.23(m,1H),7.17(d,J＝1.9Hz,1H),6.97(d,J＝1.9Hz,1H),6.19(s,1H),4.38(d,J＝4.2Hz,1H),3.83(s,3H),3.55(s,3H),2.29-2.11(m,1H),0.87-0.73(m,6H)。
实施例29. 6-甲氧基-2,2-二甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
根据与用于合成实施例9和实施例26的化合物的程序类似的实验程序来合成实施例29的化合物，得到呈非晶白色固体状的标题化合物(22mg，37％)。LCMS实测值(M+H)+:355.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.62(s,1H),7.80(s,1H),7.29(s,1H),6.60(d,J＝2.9Hz,1H),6.49(d,J＝2.9Hz,1H),3.72(s,3H),3.56(s,3H),1.30(s,6H)。
实施例30. 8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
步骤1. 1-(2-溴-6-硝基苯氧基)环丙烷甲酸甲酯
将处于矿物油中的氢化钠(22mg，0.94mmol)添加至1-羟基环丙烷甲酸甲酯(40mg，0.4mmol)(Acros Organics，目录号30211)于四氢呋喃(2mL)中的溶液中。在10min之后，添加15-冠-5(5μL，0.02mmol)和1-溴-2-氟-3-硝基苯(100mg，0.4mmol)(Ark Pharma，目录号AK-35754)。在室温下将反应混合物搅拌隔夜，随后用甲醇(1mL)淬灭且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，产生粗产物。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈半固体状的1-(2-溴-6-硝基苯氧基)环丙烷甲酸甲酯(50mg，40％)。对于C11H11BrNO5，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝316.1,318.1；实测值＝315.9,318.0。
步骤2. 8-溴螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
将铁粉(40mg，0.8mmol)添加至1-(2-溴-6-硝基苯氧基)环丙烷甲酸甲酯(50mg，0.2mmol)于乙酸(20mL)中的混合物中，用氮气进行脱气。在60℃下将反应混合物加热2h，且随后浓缩以移除乙酸。使所得残余物分配在乙酸乙酯与饱和碳酸氢钠水溶液之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到8-溴螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮(40mg，100％)。对于C10H9BrNO2，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝254.1,256.1；实测值＝253.9,256.0。
步骤3. 8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
将8-溴螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮(13mg，0.050mmol)和6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮(26mg，0.060mmol)溶解于1-丁醇(4mL)与含氟化铯(26mg，0.17mmol)的水(1mL)的混合物中。随后用氮气对反应混合物进行脱气，且添加4-(二叔丁基膦)-N,N-二甲基苯胺-二氯钯(2:1)(20mg，0.02mmol)。将所得混合物加热至100℃后维持3h。随后使此混合物冷却至室温且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，产生粗产物。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈半固体状的8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮(20mg，63％)。对于C25H22N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝476.1；实测值＝476.1。
步骤4. 8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
将8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮溶解于乙醇(4mL)与1.0M氢氧化钠水溶液(2mL)的混合物中，且在80℃下将所得混合物加热1h。随后浓缩反应混合物且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，产生粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经TFA缓冲达pH2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(7mg，40％)。对于C18H16N3O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝322.1；实测值＝322.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.02(s,1H),10.82(s,1H),7.25(t,J＝2.7Hz,1H),7.12(s,1H),7.07-6.95(m,2H),6.91(dd,J＝7.3,2.0Hz,1H),6.09(t,J＝2.2Hz,1H),3.51(s,3H),1.25-1.14(m,2H),1.09-0.99(m,2H)。
实施例31. 2,2-二甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
根据与用于合成实施例1的化合物的程序类似的实验程序来合成实施例31的化合物，得到呈非晶白色固体状的标题化合物(15mg，25％)。LCMS实测值(M+H)+:324.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.02(s,1H),10.66(s,1H),7.26(t,J＝2.7Hz,1H),7.17(s,1H),7.00(s,1H),6.99(d,J＝2.1Hz,1H),6.88(dd,J＝5.7,3.6Hz,1H),6.13(s,1H),3.54(s,3H),1.33(s,6H)。
实施例32. 3,3-二甲基-5-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮
步骤1. 2-[(2-溴-6-硝基苯基)氨基]-2-甲基丙酸甲酯
将碳酸氢钠(70mg，0.83mmol)添加至1-溴-2-氟-3-硝基苯(100mg，0.4mmol)和2-氨基-2-甲基丙酸甲酯盐酸盐(90mg，0.6mmol)(Aldrich，目录号A8754)于N-甲基吡咯烷酮(1mL)中的溶液中，且将所得溶液加热至100℃隔夜。随后使反应混合物冷却至室温且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，产生粗残余物。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈半固体状的2-[(2-溴-6-硝基苯基)氨基]-2-甲基丙酸甲酯(50mg，30％)。对于C11H14BrN2O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝317.1,319.1；实测值＝317.0,319.0。
步骤2. 3,3-二甲基-5-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮
使用与实施例30中的条件类似的方法，但使用得自步骤1的2-[(2-溴-6-硝基苯基)氨基]-2-甲基丙酸甲酯，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(4mg，20％)。对于C18H19N4O2，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝323.1；实测值＝323.1。
实施例33至34.
以下表4中阐述实施例33至实施例34的化合物和用于制备其的实验程序。
表4
实施例35. 2-环戊基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1.溴(环戊基)乙酸乙酯
在室温下将亚硫酰氯(0.35mL，4.8mmol)逐滴添加至环戊烷乙酸(0.5g，4mmol)(Alfa Aesar，目录号A15696)于1,2-二氯乙烷(20mL)中的溶液中。将反应混合物加热至回流后维持2h，随后冷却至室温，此时相继添加N-溴丁二酰亚胺(850mg，4.8mmol)和溴化氢(5μL，0.09mmol)(48％水溶液)。随后将此混合物加热至回流后维持2天。随后将混合物冷却至室温，添加乙醇(5mL，80mmol)，且在室温下将所得混合物再搅拌2h。随后浓缩反应混合物，得到粗残余物。使此残余物悬浮于四氯化碳中，通过短硅胶垫并且浓缩，得到呈油状的粗制溴(环戊基)乙酸乙酯(0.8g，90％)。对于C9H16BrO2，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝235.1；实测值＝235.1。
步骤2. 2-环戊基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用得自步骤1的溴(环戊基)乙酸乙酯，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(8mg，40％)。对于C22H24N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝394.1；实测值＝394.2。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.99(s,1H),10.56(s,1H),7.27(s,2H),6.58(d,J＝2.9Hz,1H),6.47(d,J＝2.9Hz,1H),6.20(s,1H),4.36(d,J＝6.1Hz,1H),3.71(s,3H),3.54(s,3H),2.39-2.29(m,1H),1.63-1.18(m,8H)。
实施例35A.2-环戊基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(对映异构体1)
实施例35B.2-环戊基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(对映异构体2)
使用以下条件，通过手性柱HPLC分离实施例35的化合物的对映异构体：柱：Phenomenex Lux Cellulose C-4，5μm，21.2×250mm；移动相：60％乙醇/己烷；梯度：18mL/min，等度；负载量：1mg，900μL；运作时间：11min；滞留时间：7.7和8.7分钟。
实施例35A，峰1(7.7min)。对于C22H24N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝394.1；实测值＝394.2。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.99(s,1H),10.56(s,1H),7.27(s,2H),6.58(d,J＝2.9Hz,1H),6.47(d,J＝2.9Hz,1H),6.20(s,1H),4.36(d,J＝6.1Hz,1H),3.71(s,3H),3.54(s,3H),2.39-2.29(m,1H),1.63-1.18(m,8H)。
实施例35B，峰2(8.7min)。对于C22H24N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝394.1；实测值＝394.2。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.99(s,1H),10.56(s,1H),7.27(s,2H),6.58(d,J＝2.9Hz,1H),6.47(d,J＝2.9Hz,1H),6.20(s,1H),4.36(d,J＝6.1Hz,1H),3.71(s,3H),3.54(s,3H),2.39-2.29(m,1H),1.63-1.18(m,8H)。
实施例36. 6-(羟基甲基)-2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1. 8-溴-6-(羟基甲基)-2-异丙基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将氯甲酸异丁酯(50μL，0.38mmol)逐滴添加至8-溴-2-异丙基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲酸(得自实施例20，100mg，0.3mmol)于四氢呋喃(10mL)和三乙胺(53μL，0.38mmol)中的冷却至0℃的溶液中。在0℃下将所得混合物搅拌2h，随后添加至四氢硼酸钠(40mg，1mmol)于水(4mL)中的溶液中。使此混合物升温至室温且再搅拌18h。随后使用1N HCl对混合物进行酸化，且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，产生粗产物。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈半固体状的8-溴-6-(羟基甲基)-2-异丙基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(80mg，80％)。对于C12H15BrNO3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝300.1,302.1；实测值＝300.0,302.1。
步骤2. 6-(羟基甲基)-2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用步骤1的8-溴-6-(羟基甲基)-2-异丙基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(50mg，70％)。对于C20H22N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝368.1；实测值＝368.1。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.02(s,1H),10.69(s,1H),7.32-7.22(m,2H),6.95(d,J＝1.9Hz,1H),6.84(d,J＝1.8Hz,1H),6.24-6.15(m,1H),4.45(d,J＝4.2Hz,1H),4.42(s,2H),3.53(s,3H),2.29-2.11(m,1H),0.89-0.72(m,6H)。
实施例37. 2-异丙基-6-(甲氧基甲基)-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1. 8-溴-2-异丙基-6-(甲氧基甲基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
用对甲苯磺酸单水合物(10mg，0.07mmol)处理实施例36的8-溴-6-(羟基甲基)-2-异丙基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(20mg，0.07mmol)于甲醇(2mL，50mmol)中的溶液，且在90℃下在微波中将所得混合物加热40min。使此混合物冷却至室温，浓缩且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈透明油状的8-溴-2-异丙基-6-(甲氧基甲基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(20mg，100％)。对于C13H17BrNO3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝314.1,316.1；实测值＝314.0,316.1。
步骤2. 2-异丙基-6-(甲氧基甲基)-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用得自步骤1的8-溴-2-异丙基-6-(甲氧基甲基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经TFA缓冲达pH 2的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(6mg，30％)。对于C21H24N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝382.1；实测值＝382.1。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.99(s,1H),10.69(s,1H),7.30-7.23(m,2H),6.96(d,J＝1.8Hz,1H),6.84(d,J＝1.9Hz,1H),6.18(t,J＝2.3Hz,1H),4.39(d,J＝4.2Hz,1H),4.34(s,2H),3.54(s,3H),3.28(s,3H),2.25-2.17(m,1H),0.82(dd,J＝15.5,6.8Hz,6H)。
实施例38. 6-(氨基甲基)-2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1.[(8-溴-2-异丙基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯
向8-溴-2-异丙基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-甲腈(得自实施例17，100mg，0.3mmol)于甲醇(5mL)中的冰冷溶液中添加二碳酸二叔丁酯(100mg，0.7mmol)和六水合氯化镍(8mg，0.03mmol)，随后逐份添加四氢硼酸钠(90mg，2mmol)。在0℃下将所得黑色溶液搅拌30min，随后升温至室温且搅拌隔夜。随后添加N1-(2-氨基乙基)乙烷-1,2-二胺(10mg，0.1mmol)，并且将混合物浓缩至干燥。将所得残余物溶解于乙酸乙酯中且依序用10％柠檬酸和饱和碳酸氢钠洗涤。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，产生粗产物。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈半固体状的[(8-溴-2-异丙基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(100mg，70％)。对于C17H23BrN2O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝399.1,401.1；实测值＝399.1,401.0。
步骤2. 6-(氨基甲基)-2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用得自步骤1的[(8-溴-2-异丙基-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经缓冲达pH 10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(5mg，50％)。对于C20H23N4O3，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝367.1；实测值＝367.2。
实施例39.N-{[2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基]甲基}乙磺酰胺
步骤1. 6-(氨基甲基)-2-异丙基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐
在室温下将实施例38的[(2-异丙基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.2mmol)溶解于4M氯化氢的二噁烷溶液(5mL)中，并且将混合物搅拌2h。随后浓缩反应物，得到呈白色盐状的粗制6-(氨基甲基)-2-异丙基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐(100mg，100％)。对于C27H29N4O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝521.1；实测值＝521.2。
步骤2.N-[(2-异丙基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基)甲基]乙磺酰胺
在0℃下将乙磺酰氯(4.1mg，0.032mmol)添加至6-(氨基甲基)-2-异丙基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮盐酸盐(16mg，0.029mmol)于二氯甲烷(1.0mL)和三乙胺(8μL，0.06mmol)中的溶液中，且在0℃下将混合物搅拌30min。使混合物分配在乙酸乙酯与水之间。随后用盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈半固体状的粗制N-[(2-异丙基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基)甲基]乙磺酰胺(15mg，85％)。对于C29H33N4O7S2，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝613.1；实测值＝613.2。
步骤3.N-{[2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基]甲基}乙磺酰胺
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用得自步骤2的N-[(2-异丙基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-基)甲基]乙磺酰胺，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经缓冲达pH 10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(6mg，40％)。对于C22H27N4O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝459.1.1；实测值＝459.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.03(s,1H),10.74(s,1H),7.57(t,J＝6.2Hz,1H),7.32-7.26(m,1H),7.25(s,1H),7.01(d,J＝1.9Hz,1H),6.85(d,J＝1.8Hz,1H),6.23(d,J＝2.5Hz,1H),4.37(d,J＝4.3Hz,1H),4.06(d,J＝6.2Hz,2H),3.54(s,3H),2.94(q,J＝7.3Hz,2H),2.29-2.12(m,1H),1.16(t,J＝7.4Hz,3H),0.81(dd,J＝14.0,6.8Hz,6H)。
实施例40至41.
以下表5中阐述实施例40至实施例41的化合物和用于制备其的实验程序。
表5
实施例42. 2-环戊基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
根据与用于合成实施例35和实施例26的化合物的程序类似的实验程序来合成实施例42的化合物，得到呈非晶白色固体状的标题化合物(50mg，50％)。LCMS实测值(M+H)+＝395.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.61(s,1H),7.80(s,1H),7.35(s,1H),6.59(d,J＝2.9Hz,1H),6.49(d,1H),4.44(d,J＝5.9Hz,1H),3.72(s,3H),3.26(s,3H),2.39-2.23(m,1H),1.59-1.19(m,8H)。
实施例42A.2-环戊基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(对映异构体1)
实施例42B.2-环戊基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(对映异构体2)
步骤1. 2-环戊基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例42中的条件类似的方法，制备呈一对对映异构体形式的中间产物2-环戊基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮。使用以下条件，通过手性柱HPLC分离对映异构体：柱：Phenomenex Lux Cellulose C-4，5μm，21.2×250mm；移动相：60％乙醇/己烷；梯度：18mL/min，等度；负载量：1mg，900μL；运作时间：7min；滞留时间：2.9和5.0分钟。
中间物峰1(2.9分钟)。对于C27H37N4O5Si，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝525.1；实测值＝525.2。
中间物峰2(5.0分钟)。对于C27H37N4O5Si，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝525.1；实测值＝525.2。
步骤2. 2-环戊基-6-甲氧基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例42中的条件类似的方法，但使用步骤1的经纯化对映异构体，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经缓冲达pH 10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物。
实施例42A.峰1。对于C21H23N4O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝395.1；实测值＝395.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.61(s,1H),7.80(s,1H),7.35(s,1H),6.59(d,J＝2.9Hz,1H),6.49(d,1H),4.44(d,J＝5.9Hz,1H),3.72(s,3H),3.26(s,3H),2.39-2.23(m,1H),1.59-1.19(m,8H)。
实施例42B.峰2。对于C21H23N4O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝395.1；实测值＝395.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.61(s,1H),7.80(s,1H),7.35(s,1H),6.59(d,J＝2.9Hz,1H),6.49(d,1H),4.44(d,J＝5.9Hz,1H),3.72(s,3H),3.26(s,3H),2.39-2.23(m,1H),1.59-1.19(m,8H)。
实施例43. 6-(2-呋喃基)-2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
根据与用于合成实施例28的化合物的程序类似的实验程序来合成实施例43的化合物，得到呈非晶白色固体状的标题化合物(15mg，25％)。LCMS实测值(M+H)+＝404.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.22(s,1H),10.76(s,1H),7.74(s,1H),7.42-7.36(m,1H),7.31(d,J＝20.1Hz,2H),7.02(d,J＝8.3Hz,1H),6.85(s,2H),6.77(s,1H),4.38(d,J＝5.4Hz,1H),3.59(s,3H),2.24-2.10(m,1H),1.02(d,J＝6.9Hz,3H),0.94(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例44. 2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1. 2-[2-羟基-5-(甲基磺酰基)苯基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮
将邻苯二甲酸酐(1.7g，12mmol)添加至2-氨基-4-(甲基磺酰基)苯酚(2.0g，11mmol)(TCI，目录号A2198)于乙酸(40.0mL)中的溶液中，并且将所得混合物加热至120℃后维持18h。随后将反应物冷却至室温并且倾倒于水(150mL)上，其在水上缓慢形成沉淀物。收集固体并且干燥，得到呈褐色结晶固体状的2-[2-羟基-5-(甲基磺酰基)苯基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(3.0g，80％)。对于C15H12NO5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝318.1；实测值＝318.0。
步骤2. 2-[3-溴-2-羟基-5-(甲基磺酰基)苯基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮
在室温下将含溴(0.52mL，10mmol)的乙酸(2mL)缓慢添加至2-[2-羟基-5-(甲基磺酰基)苯基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(3.2g，10.mmol)于乙酸(160mL)中的溶液和氯化铁(0.3g，2mmol)于水(32mL)中的溶液中。将反应混合物搅拌2h，且随后用水稀释，产生浆液。滤出固体，用水洗涤并且干燥，得到呈灰白色粉末状的2-[3-溴-2-羟基-5-(甲基磺酰基)苯基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(3.1g，78％)。对于C15H11BrNO5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝396.1,398.1；实测值＝396.0,398.0。
步骤3. 2-氨基-6-溴-4-(甲基磺酰基)苯酚
在室温下将肼(0.48mL，15mmol)添加至2-[3-溴-2-羟基-5-(甲基磺酰基)苯基]-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(3.0g，7.6mmol)于乙醇(150mL)中的溶液中。在室温下将反应物搅拌15分钟，形成浆液。随后将混合物加热至100℃后维持18h，冷却至室温，过滤并且在真空中浓缩母液，产生半固体残余物。使此残余物悬浮于乙酸乙酯中，过滤并浓缩，得到呈粘性油状的2-氨基-6-溴-4-(甲基磺酰基)苯酚(1.8g，90％)。对于C7H9BrNO3S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝266.1,268.1；实测值＝265.9,267.9。
步骤4. 2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用得自步骤1的2-氨基-6-溴-4-(甲基磺酰基)苯酚，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经缓冲达pH 10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(55mg，68％)。对于C20H22N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝416.1；实测值＝416.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.09(s,1H),11.03(s,1H),7.55(d,J＝2.2Hz,1H),7.38(s,2H),7.29(t,J＝2.6Hz,1H),6.21(s,1H),4.62(d,J＝3.9Hz,1H),3.55(s,3H),3.20(s,3H),2.32-2.18(m,1H),0.80(d,J＝6.7Hz,6H)。
实施例44A.2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
实施例44B.2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用以下条件，通过制备型手性柱色谱法分离实施例44的化合物的对映异构体：柱：phenomenex Lux Cellulose C-4，5μm，21，2×250mm；移动相：80％EtOH/己烷；梯度条件：等度，18mL/min；负载量：1.5mg，900μL；运作时间：17min；峰滞留时间：11.6和14.8min。
实施例44A.峰1(11.6min)，呈固体残余物形式。对于C20H22N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝416.1；实测值＝416.1。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.09(s,1H),11.03(s,1H),7.55(d,J＝2.2Hz,1H),7.38(s,2H),7.29(t,J＝2.6Hz,1H),6.21(s,1H),4.62(d,J＝3.9Hz,1H),3.55(s,3H),3.20(s,3H),2.32-2.18(m,1H),0.80(d,J＝6.7Hz,6H)。
实施例44B.峰2(14.8min)，呈固体残余物形式。对于C20H22N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝416.1；实测值＝416.1。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.09(s,1H),11.03(s,1H),7.55(d,J＝2.2Hz,1H),7.38(s,2H),7.29(t,J＝2.6Hz,1H),6.21(s,1H),4.62(d,J＝3.9Hz,1H),3.55(s,3H),3.20(s,3H),2.32-2.18(m,1H),0.80(d,J＝6.7Hz,6H)。
实施例45至47.
以下表6中阐述实施例45至实施例47的化合物和用于制备其的实验程序。
表6
实施例47A.2-异丙基-4-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
实施例47B.2-异丙基-4-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用以下条件，通过制备型手性柱色谱法分离实施例47的化合物的对映异构体：柱：Chiralpak IA，5μm，21，2×250mm；移动相：80％EtOH/己烷；梯度条件：等度，8mL/min；负载量：16.0mg，900μL；运作时间：70min；峰滞留时间：27.3和51.3min。
实施例47A，峰1(27.3min)。对于C21H24N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝430.1；实测值＝430.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.06(s,1H),7.58(d,J＝2.1Hz,1H),7.52(d,J＝2.1Hz,1H),7.34(s,1H),7.25(d,J＝2.8Hz,1H),6.15(d,J＝2.8Hz,1H),4.59(d,J＝4.2Hz,1H),3.51(s,3H),3.34(s,3H),3.23(s,3H),2.25-2.13(m,1H),0.73(dd,J＝6.7,4.8Hz,6H)。
实施例47B，峰2(51.3min)。对于C21H24N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝430.1；实测值＝430.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.06(s,1H),7.58(d,J＝2.1Hz,1H),7.52(d,J＝2.1Hz,1H),7.34(s,1H),7.25(d,J＝2.8Hz,1H),6.15(d,J＝2.8Hz,1H),4.59(d,J＝4.2Hz,1H),3.51(s,3H),3.34(s,3H),3.23(s,3H),2.25-2.13(m,1H),0.73(dd,J＝6.7,4.8Hz,6H)。
实施例48至49.
以下表7中阐述实施例48至实施例49的化合物和用于制备其的实验程序。
表7
实施例50. 6-(1-羟基乙基)-2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
在室温下将6-乙酰基-2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(得自实施例49，0.050g，0.13mmol)溶解于甲醇(5.0mL)中，且添加四氢硼酸钠(0.010g，0.26mmol)。将反应混合物搅拌1h且在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物而不进行处理，用经缓冲达pH 10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色非晶固体状的标题化合物(25mg，50％)。对于C21H24N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝382.1；实测值：382.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.96(s,1H),10.61(s,1H),7.25-7.13(m,2H),6.93(dd,J＝5.3,1.9Hz,1H),6.82(dd,J＝5.8,1.9Hz,1H),6.14(s,1H),5.09(d,J＝3.9Hz,1H),4.68-4.52(m,1H),4.30(d,J＝3.7Hz,1H),3.49(s,3H),2.23-2.05(m,1H),1.25(d,J＝6.3Hz,3H),0.76(dd,J＝12.5,6.8Hz,6H)。
实施例51. 6-(乙基磺酰基)-2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1. 4-(乙硫基)苯酚
将4-巯基苯酚(0.5g，4mmol)(Aldrich，目录号559938-5)溶解于丙酮(10.0mL)中，且添加碳酸钾(0.684g，4.95mmol)和碘乙烷(0.396mL，4.95mmol)。在室温下将反应混合物搅拌2h，用乙酸乙酯稀释，并且过滤。在真空中浓缩有机层，产生黄色油。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈透明梯度油状的4-(乙硫基)苯酚，其在静置后结晶(0.5g，80％)。
步骤2. 4-(乙基磺酰基)苯酚
在室温下将过硫酸氢钾(0.99g，6.5mmol)(Aldrich，目录号22803-6)逐份添加至4-(乙硫基)苯酚(0.50g，3.2mmol)于乙醇(10.0mL)和水(10.0mL)中的溶液中。将反应混合物搅拌18h，随后分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经硫酸镁干燥，且在真空中浓缩，得到呈半固体状的4-(乙基磺酰基)苯酚(0.58g，96％)。对于C8H11O3S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝187.0；实测值：187.0。
步骤3. 4-(乙基磺酰基)-2-硝基苯酚
在室温下将硝酸(0.1mL，3mmol)添加至4-(乙基磺酰基)苯酚(0.5g，3mmol)于乙酸(9mL)中的混合物中。将混合物加热至80℃后维持3h，随后冷却至室温且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，产生粗产物。使产物从乙醚中结晶，得到呈浅黄色固体状的4-(乙基磺酰基)-2-硝基苯酚(0.59g，100％)。对于C8H10NO5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝232.1；实测值：232.0。
步骤4. 2-溴-4-(乙基磺酰基)-6-硝基苯酚
在室温下将含溴(0.41g，2.6mmol)的乙酸(5mL)添加至4-(乙基磺酰基)-2-硝基苯酚(0.6g，2mmol)于乙酸(20mL)中的溶液和氯化铁(0.08g，0.5mmol)于水(0.3mL)中的溶液中，并且将所得混合物搅拌4h。随后用水(70mL)稀释此混合物，形成浆液。收集固体，用水洗涤，并且干燥，得到呈灰白色粉末状的2-溴-4-(乙基磺酰基)-6-硝基苯酚(0.72g，80％)。对于C8H9BrNO5，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝310.0,312.0；实测值：310.0,311.9。
步骤5. 2-氨基-6-溴-4-(乙基磺酰基)苯酚
将2-溴-4-(乙基磺酰基)-6-硝基苯酚(0.20g，0.64mmol)溶解于乙醇(7.0mL，120mmol)中，用氮气进行脱气，且添加雷氏镍(75mg)。在氢气氛围下将反应混合物搅拌2h。倾析混合物除去固体且在真空中浓缩，得到呈玻璃状的2-氨基-6-溴-4-(乙基磺酰基)苯酚(0.11g，47％)。对于C8H11BrNO3S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝280.1,282.1；实测值：280.0,282.0。
步骤6. 6-(乙基磺酰基)-2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例44中的条件类似的方法，但使用得自步骤5的2-氨基-6-溴-4-(乙基磺酰基)苯酚，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经缓冲达pH 10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(25mg，20％)。对于C21H24N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝430.1；实测值430.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.05(s,1H),10.95(bs,1H),7.43(d,J＝2.2Hz,1H),7.33(s,1H),7.27(dd,J＝10.2,2.4Hz,2H),6.14(d,J＝2.7Hz,1H),4.57(d,J＝3.8Hz,1H),3.50(s,3H),3.21(q,2H),2.28-2.12(m,1H),1.07(t,J＝7.3Hz,3H),0.76(d,J＝6.7Hz,6H)。
实施例52-56.
以下表8中阐述实施例52至实施例56的化合物和用于制备其的实验程序。
表8
实施例57. 8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
步骤1. 1-溴-2-氟-5-(甲基磺酰基)-3-硝基苯
将溴(1g，9mmol)逐滴添加至1-氟-4-(甲基磺酰基)-2-硝基苯(2g，9mmol)(Oakwood，目录号009288)于硫酸(10mL)中的溶液中，随后逐滴添加硝酸(0.42mL，10.mmol)。将所得混合物加热至80℃后维持5h，随后冷却并倾倒于冰上。用二氯甲烷萃取水层，且用饱和Na2S2O3、盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，产生粗物质。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈玻璃状的1-溴-2-氟-5-(甲基磺酰基)-3-硝基苯(0.80g，30％)。对于C7H6BrNO4S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝298.1,300.1；实测值277.9,299.7。
步骤2. 1-[2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯氧基]环丙烷甲酸甲酯
将处于矿物油中的氢化钠(45mg，1.9mmol)添加至1-羟基环丙烷甲酸甲酯(40mg，0.3mmol)于四氢呋喃(5mL)中的溶液中。在10min之后，添加15-冠-5(10μL，0.05mmol)和1-溴-2-氟-5-(甲基磺酰基)-3-硝基苯(100mg，0.3mmol)。在室温下将此混合物搅拌隔夜，且随后用MeOH(1mL)淬灭。使所得混合物分配在乙酸乙酯与水之间，且用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，产生粗物质。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈玻璃状的1-[2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯氧基]环丙烷甲酸甲酯(45mg，30％)。对于C12H13BrNO7S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝394.1,396.1；实测值393.7,395.8。
步骤3. 8-溴-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
将铁屑(20mg，0.4mmol)添加至1-[2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯氧基]环丙烷甲酸甲酯(40mg，0.1mmol)于乙酸(3mL)中的溶液中。在60℃下将反应物加热3h，用乙酸乙酯稀释，过滤并且浓缩。随后将残余物溶解于乙酸乙酯中且用饱和NaHCO3洗涤。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈粗物质形式的8-溴-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮。对于C11H11BrNO4S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝332.0,334.0；实测值331.8,333.8。
步骤4. 8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
使用与实施例44中的条件类似的方法，但使用得自步骤3的8-溴-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经缓冲达pH 10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(10mg，30％)。对于C19H18N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝400.1；实测值＝400.0。
实施例58. 3,3-二甲基-5-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-7-(甲基磺酰基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮
步骤1. 2-{[2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯基]氨基}-2-甲基丙酸甲酯
在100℃下将得自实施例57的1-溴-2-氟-5-(甲基磺酰基)-3-硝基苯(70mg，0.2mmol)、2-氨基-2-甲基丙酸甲酯盐酸盐(50mg，0.3mmol)(Sigma Aldrich，目录号A8754)和碳酸氢钠(40mg，0.5mmol)于N-甲基吡咯烷酮(4mL)中的混合物加热隔夜。随后使混合物冷却至室温且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，产生粗物质。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈玻璃状的2-{[2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯基]氨基}-2-甲基丙酸甲酯(60mg，60％)。对于C12H16BrN2O6S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝395.1,397.1；实测值＝395.0,397.0。
步骤2. 3,3-二甲基-5-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-7-(甲基磺酰基)-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮
使用与实施例57中的条件类似的方法，但使用得自步骤1的2-{[2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯基]氨基}-2-甲基丙酸甲酯，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经缓冲达pH 10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(12mg，30％)。对于C19H21N4O4S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝401.1；实测值＝401.1。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.09(s,1H),10.58(s,1H),7.31-7.24(m,3H),7.21(s,1H),6.02(s,1H),5.68(s,1H),3.55(s,3H),3.11(s,3H),1.24(s,6H)。
实施例59至62.
以下表9中阐述实施例59至实施例62的化合物和用于制备其的实验程序。
表9
实施例63. 4-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
步骤1. 1-溴-2-氟-5-(甲基磺酰基)-3-硝基苯
将硝酸(0.42mL，10.mmol)逐滴添加至1-氟-4-(甲基磺酰基)-2-硝基苯(2g，9mmol)于硫酸(10mL)和溴(1g，9mmol)中的溶液中，并且将反应物加热至80℃后维持5小时。使反应物冷却至室温且倾倒于冰上。用二氯甲烷萃取水层。用饱和Na2S2O3、盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到粗物质。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，获得呈白色固体状的1-溴-2-氟-5-(甲基磺酰基)-3-硝基苯(0.80g，30％)。
步骤2. 1-[2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯氧基]环丙烷甲酸甲酯
在0℃下将处于矿物油中的氢化钠(110mg，4.7mmol)添加至1-羟基环丙烷甲酸甲酯(100mg，0.8mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的溶液中。在5min之后，添加1-溴-2-氟-5-(甲基磺酰基)-3-硝基苯(250mg，0.84mmol)且在0℃下将反应物搅拌1h。用MeOH(3mL)淬灭反应物且分配在水与乙酸乙酯之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到粗物质。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈黄色油状的1-[2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯氧基]环丙烷甲酸甲酯(0.10g，67％)。对于C12H13BrNO7S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝394.0 396.0；实测值：394.0,395.9。
步骤3. 8-溴-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
将铁粉(500mg，8mmol)添加至1-[2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯氧基]环丙烷甲酸甲酯(700mg，2mmol)于乙酸(40mL)中的溶液中，用氮气进行脱气。在60℃下将反应物加热3小时。使反应物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，过滤并浓缩。使残余物分配在乙酸乙酯与饱和NaHCO3之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈固体状的粗物质(0.50g，90％)。对于C11H11BrNO4S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝331.9,333.9；实测值：331.9,333.8。
步骤4. 8-溴-4-甲基-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
在0℃下将处于矿物油中的氢化钠(30.mg，1.3mmol)添加至8-溴-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮(280mg，0.84mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的混合物中。将反应物搅拌20min且添加甲基碘(63μL，1.0mmol)并且在室温下搅拌30min。用甲醇淬灭反应物且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到粗物质。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈半固体状的8-溴-4-甲基-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮(0.286g，96％)。对于C12H13BrNO4S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝346.1和348.1；实测值：346.1,348.1。
步骤5. 4-甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
将8-溴-4-甲基-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮(260mg，0.75mmol)和6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮(390mg，0.90mmol)溶解于1,4-二噁烷(40mL)与含氟化铯(300mg，2mmol)的水(10mL)中，且用氮气对反应物进行脱气。添加催化剂4-(二叔丁基膦)-N,N-二甲基苯胺-二氯钯(2:1)(200mg，0.2mmol)，用氮气进行脱气并且将反应物加热至100℃后维持2小时。使反应物冷却至室温且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层且经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到粗物质。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈固体残余物状的4-甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮(0.27g，63％)。对于C27H26N3O7S2，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝568.1；实测值：568.1。
步骤6. 4-甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮
将1.0M氢氧化钠水溶液(2mL，2mmol)添加至4-甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-6-(甲基磺酰基)螺[1,4-苯并噁嗪-2,1'-环丙]-3(4H)-酮于乙醇(6mL)中的溶液中。在80℃下将反应物搅拌2h，随后使其冷却至室温。在C-19柱上通过制备型HPLC纯化产物而不进行处理，用经缓冲达pH10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色非晶固体状的标题化合物(0.12g，39％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.09(s,1H),7.62(d,J＝2.1Hz,1H),7.60(d,J＝2.1Hz,1H),7.30(d,J＝2.8Hz,1H),7.25(s,1H),6.14(d,J＝2.8Hz,1H),3.54(s,3H),3.42(s,3H),3.29(s,3H),1.32-1.25(m,2H),1.16-1.10(m,2H)。对于C20H20N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝414.1；实测值：414.1。
实施例64. 8'-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6'-(甲基磺酰基)-1',4'-二氢-3'H-螺[环己烷-1,2'-喹喔啉]-3'-酮
根据与用于合成实施例58的化合物的程序类似的实验程序来合成实施例64的化合物，得到呈白色非晶固体状的标题化合物(5mg，10％)。LCMS实测值(M+H)+＝441.2。
实施例65至66.
以下表10中阐述实施例65至实施例66的化合物和用于制备其的实验程序。
表10
实施例67. 2-异丙基-N,N-二甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-磺酰胺
步骤1. 4-羟基-N,N-二甲基-3-硝基苯磺酰胺
在室温下将2.0M二甲胺的THF溶液(0.2mL，0.4mmol)添加至4-羟基-3-硝基苯磺酰氯(100mg，0.4mmol)(Matrix，目录号084425)和4-N,N-二甲基氨基吡啶(50mg，0.4mmol)于四氢呋喃(5mL)中的混合物中。将反应混合物搅拌隔夜，随后分配在乙酸乙酯与1N HCl之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈固体状的粗制4-羟基-N,N-二甲基-3-硝基苯磺酰胺(90mg，90％)。对于C8H11N2O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝247.1；实测值＝247.0。
步骤2. 3-溴-4-羟基-N,N-二甲基-5-硝基苯磺酰胺
在室温下将溴(10μL，0.2mmol)添加至4-羟基-N,N-二甲基-3-硝基苯磺酰胺(50mg，0.2mmol)于乙酸(2mL)中的溶液和氯化铁(7mg，0.04mmol)于水(0.5mL)中的溶液中。在室温下将反应物搅拌隔夜，随后分配在饱和NaHCO3与乙酸乙酯之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈玻璃状的粗制3-溴-4-羟基-N,N-二甲基-5-硝基苯磺酰胺(60mg，80％)。对于C8H10BrN2O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝325.1,327.1；实测值＝324.9,326.9。
步骤3. 3-氨基-5-溴-4-羟基-N,N-二甲基苯磺酰胺
在巴氏振荡瓶中，将雷氏镍(25mg)添加至3-溴-4-羟基-N,N-二甲基-5-硝基苯磺酰胺(50mg，0.2mmol)于乙醇(5mL)中的溶液中。用氮气对混合物进行脱气且装入30psi氢气。将混合物振荡2h，过滤并且浓缩，得到呈黄色油状的粗制3-氨基-5-溴-4-羟基-N,N-二甲基苯磺酰胺(40mg，90％)。对于C8H12BrN2O3S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝295.1,297.1；实测值＝295.0,297.0。
步骤4. 2-异丙基-N,N-二甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-3-氧代-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噁嗪-6-磺酰胺
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用得自步骤3的3-氨基-5-溴-4-羟基-N,N-二甲基苯磺酰胺，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经缓冲达pH 10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色非晶固体状的标题化合物(4mg，40％)。对于C21H25N4O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝445.1；实测值＝445.2。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.1(s,1H),7.35(s,1H),7.29(d,J＝2.8Hz,1H),7.22(m,1H),7.11(m,1H),6.16(d,J＝2.7Hz,1H),4.4(d,1H),3.54(s,3H),2.62(s,3H),2.48(s,3H),2.3-2.2(m,1H),0.80(dd,6H)。
实施例75. 2,2,4-三甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1. 4-(甲硫基)苯酚
将4-巯基苯酚(0.5g，4mmol)(Aldrich，目录号559938-5)溶解于丙酮(10.0mL)中，随后添加碳酸钾(0.684g，4.95mmol)和碘甲烷(0.396mL，4.95mmol)。在室温下将反应混合物搅拌2h，用乙酸乙酯稀释，并且过滤。在真空中浓缩有机层，产生黄色油。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈透明油状的4-(甲硫基)苯酚，其在静置后结晶(0.55g，80％)。
步骤2. 4-(甲基磺酰基)苯酚
在室温下将过硫酸氢钾(0.99g，6.5mmol)(Aldrich，目录号22803-6)逐份添加至4-(甲硫基)苯酚(0.50g，3.2mmol)于乙醇(10.0mL)和水(10.0mL)中的溶液中。将反应混合物搅拌18h，随后分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经硫酸镁干燥，且在真空中浓缩，得到呈半固体状的4-(甲基磺酰基)苯酚(0.60g，96％)。对于C7H9O3S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝173.0；实测值：173.0。
步骤3. 4-(甲基磺酰基)-2-硝基苯酚
在室温下将硝酸(0.1mL，3mmol)添加至4-(甲基磺酰基)苯酚(0.5g，3mmol)于乙酸(9mL)中的混合物中。将混合物加热至80℃后维持3h，随后冷却至室温且分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，产生粗产物。使产物从乙醚中结晶，得到呈浅黄色固体状的4-(甲基磺酰基)-2-硝基苯酚(0.59g，100％)。对于C7H8NO5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝218.1；实测值：218.0。
步骤4. 2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯酚
在室温下将含溴(0.41g，2.6mmol)的乙酸(5mL)添加至4-(甲基磺酰基)-2-硝基苯酚(0.63g，2mmol)于乙酸(20mL)中的溶液和氯化铁(0.08g，0.5mmol)于水(0.3mL)中的溶液中，并且将所得混合物搅拌4h。随后用水(70mL)稀释此混合物，形成浆液。收集固体，用水洗涤，并且干燥，得到呈灰白色粉末状的2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯酚(0.75g，80％)。对于C7H7BrNO5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝295.9,297.9；实测值：296.0,298.0。
步骤5. 2-氨基-6-溴-4-(甲基磺酰基)苯酚
将2-溴-4-(甲基磺酰基)-6-硝基苯酚(0.20g，0.64mmol)溶解于乙醇(7.0mL，120mmol)中，用氮气进行脱气，且随后添加雷氏镍(75mg)。在氢气氛围下将反应混合物搅拌2h。倾析混合物除去固体且在真空中浓缩，得到呈玻璃状的2-氨基-6-溴-4-(甲基磺酰基)苯酚(0.19g，95％)。对于C7H9BrNO3S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝266.1,268.1；实测值：266.0,268.0。
步骤6. 8-溴-2,2-二甲基-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
在室温下将2-溴-2-甲基-丙酰溴(0.41mL，3.4mmol)(Aldrich，目录号252271)缓慢添加至2-氨基-6-溴-4-(甲基磺酰基)苯酚(0.75g，2.8mmol)于乙腈(49.7mL)中的溶液和碳酸钾(1.6g，11mmol)于水(16mL)中的溶液中。将反应物搅拌1h并且在油浴中加热至80℃以进行环化。将反应物加热18h且使其冷却至室温。使反应物分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经硫酸镁干燥并浓缩，得到深色油。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈固体状的8-溴-2,2-二甲基-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.84g，89％)。对于C11H13BrNO4S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝334.1,336.1；实测值：334.0,336.0。
步骤7. 8-溴-2,2,4-三甲基-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
在室温下，在氮气下将氢化钠(0.12g，2.9mmol)添加至8-溴-2,2-二甲基-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.82g，2.4mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(23.4mL)中的溶液中。将反应物搅拌30分钟且添加甲基碘(0.30mL，4.9mmol)。在搅拌1h之后，使反应物分配在乙酸乙酯与水之间。用盐水洗涤有机层，经硫酸镁干燥并浓缩，得到呈固体残余物状的8-溴-2,2,4-三甲基-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(0.83g，97％)。对于C12H15BrNO4S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝348.1,350.1；实测值：348.0,350.0。
步骤8. 2,2,4-三甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
使用与实施例9中的条件类似的方法，但使用得自步骤7的8-溴-2,2,4-三甲基-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮，制备粗产物。在C-18柱上通过制备型HPLC纯化产物，用经缓冲达pH 10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈灰白色非晶固体状的标题化合物(25mg，30％)。对于C20H22N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝416.1；实测值416.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.11(s,1H),7.63(d,J＝1.7Hz,1H),7.59(d,J＝1.9Hz,1H),7.30(d,J＝2.7Hz,2H),6.15(d,J＝2.1Hz,1H),3.56(s,3H),3.40(s,3H),3.28(s,3H),1.38(s,6H)。
实施例76. 6-(乙基磺酰基)-2,2,4-三甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
步骤1. 8-溴-6-(乙基磺酰基)-2,2-二甲基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将碳酸钾(200mg，1mmol)添加至得自实施例51步骤5的2-氨基-6-溴-4-(乙基磺酰基)苯酚(180mg，0.64mmol)于乙腈(2mL)和2-溴-2-甲基-丙酸乙酯(520mg，2.7mmol)中的溶液中。将反应物加热至80℃后维持3小时。过滤反应物，浓缩并且在硅胶上通过FCC加以纯化，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，得到呈白色固体状的8-溴-6-(乙基磺酰基)-2,2-二甲基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(124mg，54％)。对于C12H15BrNO4S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝348.1,350.1；实测值：347.8,349.9。
步骤2. 8-溴-6-(乙基磺酰基)-2,2,4-三甲基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
在0℃下将处于矿物油中的氢化钠(19mg，0.78mmol)添加至8-溴-6-(乙基磺酰基)-2,2-二甲基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(180mg，0.52mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的混合物中。将反应物搅拌20min且添加甲基碘(39μL，0.62mmol)并且在室温下搅拌30min。用MeOH淬灭反应物且分配在水与乙酸乙酯之间。用盐水洗涤所合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到呈泡沫状物形式的粗制8-溴-6-(乙基磺酰基)-2,2,4-三甲基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(280mg，96％)。对于C13H17BrNO4S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝362.0,364.0；实测值：362.0,364.0。
步骤3. 6-(乙基磺酰基)-2,2,4-三甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将8-溴-6-(乙基磺酰基)-2,2,4-三甲基-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(200mg,0.6mmol)和6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧戊环-2-基)-1,6-二氢-7H-吡咯并[2,3-c]吡啶-7-酮(280mg，0.66mmol)溶解于1,4-二噁烷(30mL)与含氟化铯(200mg，2mmol)的水(10mL)中，且用氮气进行脱气。添加催化剂4-(二叔丁基膦)-N,N-二甲基苯胺-二氯钯(2:1)(100mg，0.2mmol)，用N2进行脱气，并且将反应物加热至100℃后维持2h。使反应物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释且用水、盐水洗涤，并且经MgSO4干燥，随后过滤并浓缩，得到粗物质。在硅胶上通过FCC纯化产物，用己烷:乙酸乙酯梯度洗脱，获得呈玻璃状的6-(乙基磺酰基)-2,2,4-三甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(200mg，60％)。对于C28H30N3O7S2，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝584.1；实测值：584.2。
步骤4. 6-(乙基磺酰基)-2,2,4-三甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
将1.0M氢氧化钠水溶液(1mL，1mmol)添加至所获得的6-(乙基磺酰基)-2,2,4-三甲基-8-{6-甲基-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基}-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮于乙醇(4mL)中的溶液中。在80℃下将反应物搅拌2h，使其冷却至室温且在C-18柱上通过制备型HPLC加以纯化而不进行处理，用经缓冲达pH 10的水:乙腈梯度洗脱，得到呈白色非晶固体状的标题化合物(110mg，50％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.12(s,1H),7.58(d,J＝1.9Hz,1H),7.52(d,J＝2.0Hz,1H),7.30(d,J＝2.6Hz,2H),6.13(d,J＝2.1Hz,1H),3.56(s,3H),3.39(s,3H),3.34(q,J＝7.4Hz,2H),1.38(s,6H),1.14(t,J＝7.3Hz,3H)。对于C21H24N3O5S，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝430.1；实测值：430.1。
实施例68至83.
以下表11中阐述实施例68至实施例83的化合物和用于制备其的实验程序。
表11
实施例83A.6-(1-羟基乙基)-2,2,4-三甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(对映异构体1)
实施例83B.6-(1-羟基乙基)-2,2,4-三甲基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮(对映异构体2)
使用以下条件，通过制备型手性柱色谱法分离实施例83的化合物的对映异构体：柱：phenomenex Lux Cellulose C-2，5μm，21，2×250mm；移动相：60％EtOH/己烷，梯度条件：等度，18mL/min；负载量：9.0mg，900μL；运作时间：11min；峰滞留时间：6.4和8.5min。
实施例83A，峰1(6.4min)，对于C21H24N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝382.1；实测值：382.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.99(s,1H),7.22(t,J＝2.7Hz,1H),7.12(s,1H),7.04(s,2H),6.08(t,J＝2.3Hz,1H),5.14(d,J＝4.3Hz,1H),4.77-4.60(m,1H),3.50(s,3H),3.27(s,3H),1.30(d,J＝6.4Hz,3H),1.27(s,6H)。
实施例83B，峰2(8.5min)，对于C21H24N3O4，LCMS计算值(M+H)+:m/z＝382.1；实测值：382.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.99(s,1H),7.22(t,J＝2.7Hz,1H),7.12(s,1H),7.04(s,2H),6.08(t,J＝2.3Hz,1H),5.14(d,J＝4.3Hz,1H),4.77-4.60(m,1H),3.50(s,3H),3.27(s,3H),1.30(d,J＝6.4Hz,3H),1.27(s,6H)。
实施例84. 2-异丙基-8-(6-甲基-7-氧代-6,7-二氢-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶-4-基)-6-(甲基磺酰基)-2H-1,4-苯并噁嗪-3(4H)-酮
根据与用于合成实施例44和实施例26的化合物的程序类似的实验程序来合成实施例84的化合物，得到呈白色非晶固体状的标题化合物(12mg，20％)。LCMS实测值(M+H)+＝417.1。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.06(s,1H),7.86(bs,1H),7.55(d,J＝2.0Hz,1H),7.44(bs,1H),7.41(d,J＝2.0Hz,1H),4.71(d,J＝3.7Hz,1H),3.58(s,3H),3.22(s,3H),2.33-2.17(m,1H),0.78(d,J＝6.7Hz,3H),0.72(d,J＝6.9Hz,3H)。
分析数据
下文在表12中提供实施例2至4、实施例13至16、实施例23至24、实施例33至34、实施例40至41、实施例45至49、实施例52至56、实施例59至62、实施例65至66和实施例68至83的化合物的1H NMR数据(Varian Inova 500光谱仪、Mercury 400光谱仪或Varian(或Mercury)300光谱仪)和LCMS质谱数据(MS)。
表12
实施例A1：BRD4AlphaScreenTM分析
BRD4AlphaScreenTM分析
在白色384孔聚苯乙烯板中进行BRD4-BD1和BRD4-BD2检定，最终体积为40μL(BD1)和60μL(BD2)。首先在DMSO中连续稀释抑制剂且将抑制剂添加至板孔中，随后添加其它反应组分。在所述检定中，DMSO的最终浓度为1.25％(BD1)和0.83％(BD2)。在室温下，在含有50nM经生物素标记的四乙酰化组蛋白H4肽(H4Ac4)和浓度小于1nM的BRD4-BD1或BRD4-BD2蛋白的分析缓冲液(50mM Tris-HCl pH 7.5、0.01％Tween-20、0.01％BSA、5mM DTT)中进行所述检定。在弱光下培育75min，随后添加20μL检定缓冲液，所述检定缓冲液补充有抗生蛋白链菌素供体珠粒(PerkinElmer 6760002)和GSH受体珠粒(PerkinElmer-AL109C)，最终浓度为2-4μg/mL。在板密封之后，在室温下在暗处将板培育75min，随后在PHERAstar FS板读数器(BMG Labtech)上读数。通过使用GraphPad Prism 5.0软件拟合对照活性百分比对抑制剂浓度对数的曲线来进行IC50测定。
实施例的IC50数据提供于表13中，如通过检定A1所测定(栏符号：+是指≤100nM；++是指>100nM且≤1000nM；+++是指>1000nM且≤10,000nM)。
表13
实施例B1：KMS.12.BM细胞活力检定
KMS.12.BM细胞系(人骨髓瘤)是购自JCRB(Osaka，Japan)，且将其维持在含10％FBS培养基的RPMI中。为了通过ATP定量来测量化合物的细胞毒性活性，在存在或不存在一定浓度范围的测试化合物的情况下，将KMS.12.BM细胞于RPMI培养基中以5000个细胞/孔/100μL涂铺于96孔聚苯乙烯透明黑色组织培养板(Greiner-bio-one，VWR，NJ)中。在3天后，在室温下将100mL Cell Titer-GLO Luminescent(Promega，Madison，WI)细胞培养剂添加至各孔中后维持10分钟以稳定发光信号。此举基于对所存在的ATP进行定量来确定培养物中的活细胞数目，ATP会发出存在代谢活性细胞的信号。利用Top Count 384(Packard Bioscience，Perkin Elmer，Boston，MA)测量发光。确定相对于在无药物下培养的细胞的化合物抑制，且IC50报告为50％细胞死亡所需的化合物浓度。实施例的IC50数据提供于表14中，如通过检定B1所测定(栏符号：+是指≤1000nM；++是指>1000nM且≤10,000nM；NA指示数据无法获得)。
表14
实施例C1：KMS.12.BM C-myc ELISA分析
KMS.12.BM细胞系(人骨髓瘤)是购自JCRB(Osaka，Japan)，且将其维持在含10％FBS培养基的RPMI中。为了测量化合物的C-myc抑制活性，在存在或不存在一定浓度范围的测试化合物的情况下，将KMS.12.BM细胞于RPMI培养基中以75000个细胞/孔/200μL涂铺于96孔平底聚苯乙烯组织培养板(Corning，VWR，NJ)中。在2小时后，使细胞沉淀并且在蛋白酶抑制剂(Life Technologies，Grand Island，NY；和Sigma，St Louis，MO)存在下用细胞提取缓冲液(BioSource，Carlsbad，CA)溶解。在C-myc市售ELISA(Life Technologies，Grand Island，NY)中测试澄清溶解物。确定相对于在无药物下培养的细胞的化合物抑制，且IC50报告为50％C-myc抑制所需的化合物浓度。
除本文中所描述的修改以外，本领域技术人员根据以上描述将显而易知对本发明的各种修改。此类修改也意欲属于所附权利要求书的范围内。本申请中所引用的各参考文献(包括所有专利、专利申请和出版物)是以全文引用的方式并入本文中。